杜仲和續(xù)斷的組合物及用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含杜仲和續(xù)斷的組合物及其治療骨病、絕經(jīng)后認知缺陷疾病的用途。所述組合物包含中藥材續(xù)斷和杜仲組合，包括包含續(xù)斷和杜仲單獨提取所得提取物的混合物，或者包含續(xù)斷和杜仲二者共同提取得到的提取物。該組合物具有良好的治療所述疾病的作用。
【專利說明】杜仲和續(xù)斷的組合物及用途
[0001]本申請是2012年7月19日提交的申請?zhí)?01210250590.4專利申請的分案申請；并要求申請日2011年7月28日提交的申請?zhí)?011102134581的中國專利申請的優(yōu)先權(quán)，其全部內(nèi)容通過引用并入本文。

【技術(shù)領域】
[0002]本發(fā)明涉及中藥【技術(shù)領域】，具體涉及一種包含杜仲和續(xù)斷的組合物，特別是涉及包括中藥杜仲和續(xù)斷的提取物的組合物。該組合物對于骨質(zhì)疏松癥具有較好的治療作用。

【背景技術(shù)】
[0003]骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis, 0P)是一種全身性骨病，以骨量減少、骨的微細結(jié)構(gòu)退化、骨強度降低、脆性增加導致骨折易感性增高為特征的系統(tǒng)性骨胳病變。
[0004]類固醇激素17 β-雌二醇(estrad1l，Ε2)是許多靶組織生長、分化以及行使生物學功能的關鍵調(diào)節(jié)因子。流行病學研究發(fā)現(xiàn)，絕經(jīng)前女性心血管事件低于同年齡男性，而在圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后女性心血管事件發(fā)生高于同年齡男性，提示雌激素在此過程中發(fā)揮著重要作用。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，雌激素效應異常與許多疾病的病理過程密切相關，如乳腺癌、高血壓、動脈粥樣硬化、骨質(zhì)疏松癥等。針對雌激素水平低下采用的激素替代療法(Hormone Replacement Therapy, HRT)已成為臨床上一種重要的治療手段，在過去的二十多年中，HRT—直用來補充絕經(jīng)后婦女雌激素的分泌不足，改善更年期綜合征癥狀，降低心血管疾病的發(fā)生率，預防骨質(zhì)疏松發(fā)生。2003年美國婦女健康協(xié)會(Women’s HealthInitiative，WHI)臨床研究發(fā)現(xiàn)，在患有冠心病的老年更年期婦女HRT干預期間雖然降低了骨質(zhì)疏松和骨折的危險性，但增加乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌的風險性，為此對于HRT或E2研究成為新的熱點。與此同時，人們也在致力于尋求雌激素替代物，期望這種替代物既能發(fā)揮雌激素對心血管等系統(tǒng)的保護作用，緩解更年期綜合征，又能降低腫瘤的風險，這類物質(zhì)即被稱為選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(selective estrogen receptor modulators, SERMs)。
[0005]雌激素的生物學功能主要是通過基因組效應和非基因組效應實現(xiàn)的。基因組效應主要通過雌激素受體α和β (ERa和ERi3)介導:雌激素與ERa (β)結(jié)合，引起受體變構(gòu)形成二聚體，在細胞核內(nèi)與祀基因調(diào)節(jié)區(qū)的雌激素應答元件(estrogen responseelement, ERE)直接結(jié)合，調(diào)節(jié)該基因的轉(zhuǎn)錄。雌激素除了通過直接調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄發(fā)揮生物學效應之外，還可以通過膜受體在細胞內(nèi)產(chǎn)生一些快速的信號轉(zhuǎn)導，包括生成第二信使、改變離子通道狀態(tài)、蛋白激酶活化等。這些反應的發(fā)生非常迅速，通常在幾分鐘甚至是幾秒鐘這樣不足以產(chǎn)生新蛋白的時間內(nèi)完成。雌激素的這種不需要基因轉(zhuǎn)錄的快速效應通常被稱為“非基因組效應”或“快速反應”。當然，快速反應不但可以引起離子通道改變、NO釋放這樣的快速反應，也可以通過一系列的信號轉(zhuǎn)導過程將效應信號傳導到細胞核內(nèi)，弓丨起細胞內(nèi)基因表達的變化，從而產(chǎn)生長期的效應。
[0006]同時雌激素的生物學效應有著細胞差異性。首先ERa和ER0是不同基因的產(chǎn)物，ER a基因定位于6號染色體的6q 25.1區(qū)，由140kb堿基構(gòu)成，編碼595個氨基酸的蛋白質(zhì)；ERi3基因定位于14號染色體的14q 22-24,由40kb堿基構(gòu)成，編碼530個氨基酸的蛋白質(zhì)，它們的序列在不同的區(qū)域都有一定的同源性。其次在分布和功能上ERa和ER3也有著相當大的差別，在不同的器官中，使用原位雜交的方法發(fā)現(xiàn)，ERa mRNA主要高表達在子宮、睪丸、腦下垂體等，ERPmRNA主要高表達在前列腺、卵巢、肺、血管等。在心血管系統(tǒng)中，研究發(fā)現(xiàn)血管平滑肌(VSMC)主要表達ER β，在VSMC中Ε2降低了 ρ42/44和ρ38ΜΑΡΚ活性，通過ERi3抑制平滑肌細胞增殖和遷移；而在內(nèi)皮細胞(EC)中主要表達ERa，在EC中E2顯著誘導p42/44和p38MAPK活性，通過ERa促進EC的增殖、遷移和eNOS表達。在成骨細胞、破骨細胞中，ERa和ERP均有表達，但是以ERP為主。在單核巨噬細胞(Raw264.7)中ERa和ERP亦均有表達。這就意味著同種配體與分布在不同細胞中的ERa和ER^亞型作用會表現(xiàn)出不同的生物活性，而不同的配體與同種受體亞型作用也可能產(chǎn)生不同的藥理作用。目前對雌激素效應的細胞差異性機制尚不十分清楚，以至于在雌激素與相關疾病關系的研究中出現(xiàn)一些混亂，甚至相互矛盾的結(jié)果。不能完全解釋患者復雜的臨床表現(xiàn)、病理改變以及對雌激素類藥物的不同治療反應，使人們對與雌激素相關重大疾病發(fā)病機理和治療藥物的研究受到了限制。
[0007]骨是雌激素靶組織，雌激素可通過多種途徑影響骨代謝。成骨細胞存在雌激素受體(estrogen receptor, ER)、細胞因子(IL-1, TNF, IL-6)受體，ER激活時抑制細胞因子的釋放，雌性激素減少后，抑制作用減弱，細胞因子刺激破骨細胞，抑制成骨細胞，導致骨量喪失。補充雌激素可有效防止絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥及其相關骨折的發(fā)生，但長期應用增加子宮內(nèi)膜癌和乳腺癌的危險性。
[0008]成骨能力下降是骨質(zhì)疏松癥的主要病理基礎之一，提高成骨細胞功能及促進骨形成對治療骨質(zhì)疏松癥有直接意義，研究藥物對成骨細胞的作用成為治療骨質(zhì)疏松創(chuàng)新藥物開發(fā)的重要內(nèi)容。堿性磷酸酶作為骨代謝中分化早期的一個標志性產(chǎn)物，它可以從側(cè)面反映藥物對成骨細胞的作用，其活性的高低可反映相應細胞向成骨方向轉(zhuǎn)化的趨勢。骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)是重要的骨形成調(diào)節(jié)因子，能夠促進新骨形成，在成骨細胞分化過程中起關鍵作用，有可能成為骨質(zhì)疏松癥防治藥物的重要靶點。結(jié)合雌激素受體激活、成骨細胞增殖、堿性磷酸酶活性影響和物質(zhì)對BMP-2的表達，可以預期物質(zhì)對骨的影響，從而可以用于治療骨質(zhì)疏松創(chuàng)新藥物的研發(fā)。
[0009]本領域仍然期待有新的治療骨質(zhì)疏松癥的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明的目的是提供一種新的治療骨質(zhì)疏松癥的方法。本發(fā)明人使用中藥材續(xù)斷和杜仲組合，或者使用續(xù)斷和杜仲單獨提取所得提取物的混合物，或者使用續(xù)斷和杜仲二者共同提取得到的提取物，令人驚奇的發(fā)現(xiàn)二者配伍使用效果優(yōu)于單獨使用，達到了協(xié)同增效的治療效果。本發(fā)明基于此發(fā)現(xiàn)而得以完成。
[0011]為此，本發(fā)明第一方面提供了組合物，其包括中藥材續(xù)斷和杜仲。
[0012]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中所述續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02 ?50):1，或者(0.05 ?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1o
[0013]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其是由中藥材續(xù)斷和杜仲制備得到的。在一個實施方案中，所述續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.0l?100):1，或者(0.02?50):1，或者(0.05 ?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1。
[0014]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其包括續(xù)斷和杜仲的提取物。在一個實施方案中，所述提取物是續(xù)斷和杜仲分別提取得到的各自的提取物，然后按藥材重量比混合得到的。在一個實施方案中，所述提取物是續(xù)斷和杜仲一起提取得到的。在一個實施方案中，所述分別或一起提取得到的提取物，所用藥材續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02 ?50):1，或者(0.05 ?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1。
[0015]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中所述續(xù)斷提取物是通過用水或含水乙醇提取，再任選地用堿處理和/或大孔樹脂處理后，濃縮得到的。在一個實施方案中，所述含水乙醇是30%?95%乙醇，優(yōu)選50%?90%乙醇。
[0016]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中所述杜仲提取物是通過水或含水乙醇提取后濃縮得到的。在一個實施方案中，所述含水乙醇是30 %?95 %乙醇，優(yōu)選50 %?90 %乙醇，優(yōu)選50 %?80 %乙醇，優(yōu)選60 %?80 %乙醇。
[0017]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中所述續(xù)斷和杜仲二者一起提取得到提取物。在一個實施方案中，該提取物所用藥材續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02?50):1，或者(0.05?20):1，或者(0.1?10):1，或者(0.2?5):1。在一個實施方案中，所述提取物是續(xù)斷和杜仲二者一起用水或含水乙醇提取后濃縮得到的。在一個實施方案中，所述提取物是續(xù)斷和杜仲二者一起用水或含水乙醇提取，再任選地用堿處理和/或大孔樹脂處理后，濃縮得到的。在一個實施方案中，所述含水乙醇是30%?95%乙醇，優(yōu)選50%?90%乙醇。
[0018]根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0-β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β-D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D。根據(jù)本發(fā)明第一方面的組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0- β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0- β -D-葡萄糖苷、α -氧-β -D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D，并且當存在它們的二種以上時，它們?nèi)我鈨烧咧g的重量比率為0.0001?10000:1。
[0019]本發(fā)明第二方面提供了本發(fā)明第一方面所述組合物在制備用于治療和/或預防骨質(zhì)疏松癥的藥物中的用途。
[0020]本發(fā)明第二方面還提供了本發(fā)明第一方面所述組合物在制備用于治療和/或預防骨病的藥物中的用途。
[0021]本發(fā)明第二方面還提供了本發(fā)明第一方面所述組合物在制備用于治療和/或預防絕經(jīng)后認知缺陷疾病的藥物中的用途。
[0022]本發(fā)明第三方面提供了一種藥物組合物，其中包含本發(fā)明第一方面所述組合物，以及藥學可接受的載體。
[0023]根據(jù)本發(fā)明第三方面的藥物組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0-β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β -D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2' ,4!-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D。
[0024]根據(jù)本發(fā)明第三方面的藥物組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0-β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β -D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D，并且當存在它們的二種以上時，它們?nèi)我鈨烧咧g的重量比率為0.0001?10000:1。
[0025]根據(jù)本發(fā)明第三方面的藥物組合物，其是用于治療和/或預防骨質(zhì)疏松癥、骨病、絕經(jīng)后認知缺陷疾病的藥物。
[0026]根據(jù)本發(fā)明第三方面的藥物組合物，其是呈片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、外用藥齊U、注射制劑等形式。

【具體實施方式】
[0027]Α、續(xù)斷部分
[0028]續(xù)斷例1:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0029]制備方法:
[0030]步驟⑴取10千克續(xù)斷藥材(購自河北安國祁新中藥顆粒飲片有限公司)粉碎成粗粉(不加篩網(wǎng))，用10倍量70%乙醇提取，回收乙醇得到浸膏；
[0031]步驟(ii)取步驟⑴所得浸膏水溶液用氫氧化鈉(加至水相量的2% )在60°C處理2小時，加適量鹽酸中和；
[0032]步驟(iii)使上述中和液過DlOl大孔樹脂分離，50%乙醇洗脫，洗脫液干燥，即為本發(fā)明的續(xù)斷提取物。
[0033]經(jīng)HPLC法測定，其中包含12.6%化合物①、3.6%化合物②、4.2%化合物③、
4.3%化合物④、和3.5%化合物⑤。其中化合物①為葳巖仙皂苷A、化合物②為3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0- β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、化合物③為馬錢子苷(Loganin)、化合物④為裂馬錢素苷、化合物⑤為triplostoside A。
[0034]續(xù)斷例2:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0035]制備方法:
[0036]步驟(i)取I千克續(xù)斷藥材(購自河北安國祁新中藥顆粒飲片有限公司)粉碎成粗粉(不加篩網(wǎng))，用10倍量60%乙醇提取，回收乙醇得到浸膏；
[0037]步驟(ii)取步驟⑴所得浸膏水溶液用氫氧化鈉(加至水相量的2% )在60°C處理2小時，加適量鹽酸中和；
[0038]步驟(iii)使上述中和液過DlOl大孔樹脂分離，80%乙醇洗脫，洗脫液干燥，即為本發(fā)明的續(xù)斷提取物。
[0039]經(jīng)HPLC法測定，其中包含9.8%化合物①、3.7%化合物②、2.9%化合物③、3.4%化合物④、和6.1 %化合物⑤。
[0040]續(xù)斷例3:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0041]制備方法:
[0042]步驟(i)取10千克續(xù)斷藥材(購自河北安國祁新中藥顆粒飲片有限公司)粉碎成粗粉(不加篩網(wǎng))，用10倍量80%乙醇提取，回收乙醇得到浸膏；
[0043]步驟(ii)將該浸膏加適量水分散，再用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯部分；
[0044]步驟(iii)萃取所得水相用氫氧化鈉(加至水相量的2% )在60°C處理2小時，加適量鹽酸中和；
[0045]步驟(iv)使上述中和液過DlOl大孔樹脂分離，依次用20%乙醇、50%乙醇、80%乙醇洗脫，取80%乙醇洗脫級分，干燥，即為本發(fā)明的續(xù)斷提取物。
[0046]經(jīng)HPLC法測定，其中包含17.6 %化合物①、6.6 %化合物②、9.2 %化合物③、14.7%化合物④、和8.3%化合物⑤。
[0047]續(xù)斷例4:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0048]制備方法基本上參考提取物例3，不同之處是步驟(i)用10倍量50%乙醇，步驟(iii)用氫氧化鉀(加至水相量的1% )在50°C處理5小時，步驟(iv)用D201大孔樹脂并依次用15%乙醇、55%乙醇、75%乙醇洗脫。75%乙醇洗脫級分經(jīng)干燥，即得本發(fā)明續(xù)斷提取物。
[0049]經(jīng)HPLC法測定，其中包含15.4%化合物①、7.2%化合物②、3.1 %化合物③、
4.7%化合物④、和7.4%化合物⑤。
[0050]續(xù)斷例5:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0051]制備方法基本上參考提取物例1，不同之處是步驟(i)用10倍量90%乙醇，步驟(iii)用碳酸氫鈉(加至水相量的5% )在80°C處理2小時，步驟(iv)用AB-8大孔樹脂并依次用25%乙醇、85%乙醇洗脫。85%乙醇洗脫級分經(jīng)干燥，即得本發(fā)明提續(xù)斷提取物。
[0052]經(jīng)HPLC法測定，其中包含16.3 %化合物①、5.6 %化合物②、7.2 %化合物③、
11.8%化合物④、和6.9%化合物⑤。
[0053]續(xù)斷例6:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0054]稱取100g續(xù)斷藥材，不加篩網(wǎng)過粉碎機，80%乙醇提取三次，每次2h，10倍量溶齊U，合并提取液，回收乙醇濃縮至盡，真空干燥得續(xù)斷提取物。HPLC含量測定含有9.8%木通皂苷D，l.2%化合物①。
[0055]續(xù)斷例7:續(xù)斷提取物的制備和含暈測定
[0056]稱取100g續(xù)斷藥材，不加篩網(wǎng)過粉碎機，50%乙醇提取三次，每次2h，10倍量溶齊U，合并提取液，回收乙醇濃縮至盡，真空干燥得續(xù)斷提取物。HPLC含量測定含有7.8%木通皂苷D，0.82%化合物①。
[0057]續(xù)斷例8:單體化合物的制備
[0058]取上文續(xù)斷例I所得續(xù)斷提取物，采用制備型HPLC法并參考上文測定提取物含量的HPLC法，分別制得化合物①、化合物②、化合物③、化合物④、和化合物⑤。五種化合物的純度分別為 98.8%,99.8%,97.3%,97.8%、和 99.1%。
[0059]續(xù)斷例9:單體化合物的表征
[0060]各化合物的結(jié)構(gòu)確證委托天津大學分析測試中心進行檢測，結(jié)果如下:
[0061]化合物①，經(jīng)鑒定為葳巖仙阜苷A(cauloside A),白色粉末(丙酮)，mp239-241 °C，易溶于丙酮和甲醇，IH-NMR(吡啶 _d5) δ:5.47 (1H, brs, H-12)，4.99 (1H, d, J =8Hz, H-1 ' )，1.22、1.02、0.99、0.93、0.92、0.91(3H，s，6XCH3) ；13C-NMR5: 38.8 (C-1), 26.1 (C-2)，82.0 (C-3)，43.5 (C_4)，47.6 (C_5)，18.2 (C_6)，32.9 (C_7)，39.8 (C_8)，48.2 (C_9)
，37.0 (C-1O)，23.7 (C-1l)，122.6 (C-12)，144.9 (C-13)，42.2 (C-13)，28.3 (C-14)，28.3 (C_l5)，23.9 (C-16)，46.7 (C-17)，42.0 (C-18)，46.5 (C-19)，30.9 (C-20)，34.2 (C-21)，33.2 (C-22)，64.5 (C-23)，13.6 (C-24)，16.1 (C-25)，17.5 (C-26)，26.2 (C-27)，180.3 (C-28)，33.2 (C_29),23.6(030),106.6(01' ),73.1(02' )，74.7(C-3' ),69.6(04' ),66.9(05')。以上理化數(shù)據(jù)及波譜數(shù)據(jù)與文獻基本一致。結(jié)構(gòu)如下。
[0062]

【權(quán)利要求】
1.一種組合物，其包括中藥材續(xù)斷和杜仲，其中續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.0l?100):1，或者(0.02 ?50):1，或者(0.05 ?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1o
2.權(quán)利要求1的組合物，其是由中藥材續(xù)斷和杜仲制備得到的。在一個實施方案中，所述續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02?50):1，或者(0.05?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1。
3.權(quán)利要求1的組合物，其包括續(xù)斷和杜仲的提取物；進一步地，所述提取物是續(xù)斷和杜仲分別提取得到的各自的提取物，然后按藥材重量比混合得到的；進一步地，所述提取物是續(xù)斷和杜仲一起提取得到的；進一步地，所述分別或一起提取得到的提取物，所用藥材續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02?50):1，或者(0.05?20):1，或者(0.1 ?10):1，或者(0.2 ?5):1。
4.權(quán)利要求3的組合物，其中所述續(xù)斷提取物是通過用水或含水乙醇提取，再任選地用堿處理和/或大孔樹脂處理后，濃縮得到的；進一步地，所述含水乙醇是30%?95%乙醇，優(yōu)選50%?90%乙醇。
5.權(quán)利要求3的組合物，其中所述杜仲提取物是通過水或含水乙醇提取后濃縮得到的；進一步地，所述含水乙醇是30 %?95 %乙醇，優(yōu)選50 %?90 %乙醇，優(yōu)選50 %?80 %乙醇，優(yōu)選60%?80%乙醇。
6.權(quán)利要求3的組合物，其中所述續(xù)斷和杜仲二者一起提取得到提取物；進一步地，該提取物所用藥材續(xù)斷和杜仲二者重量比是(0.01?100):1，或者(0.02?50):1，或者(0.05?20):1，或者(0.1?10):1，或者(0.2?5):1 ;進一步地，所述提取物是續(xù)斷和杜仲二者一起用水或含水乙醇提取后濃縮得到的；進一步地，所述提取物是續(xù)斷和杜仲二者一起用水或含水乙醇提取，再任選地用堿處理和/或大孔樹脂處理后，濃縮得到的；進一步地，所述含水乙醇是30 %?95 %乙醇，優(yōu)選50 %?90 %乙醇。
7.權(quán)利要求1-6任一項的組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0-β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β -D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D;或者，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0- β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β-D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D，并且當存在它們的二種以上時，它們?nèi)我鈨烧咧g的重量比率為0.0001?10000:lo
8.權(quán)利要求1-7任一項的組合物在制備用于治療和/或預防骨質(zhì)疏松癥的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預防骨病的藥物中的用途，或者在制備用于治療和/或預防絕經(jīng)后認知缺陷疾病的藥物中的用途。
9.一種藥物組合物，其中包含權(quán)利要求1-7任一項的組合物，以及藥學可接受的載體。 根據(jù)本發(fā)明第三方面的藥物組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷A、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0-β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β -D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2' ,4!-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D。
10.權(quán)利要求9的藥物組合物，其中包含至少一種選自下列的物質(zhì):葳巖仙皂苷Α、3-0-a-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-0- β -D-吡喃葡萄糖-(I — 6) - β -D-吡喃葡萄糖苷、馬錢子苷(Loganin)、裂馬錢素苷、triplostoside A、京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸、白樺脂酸、桃葉珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷、丁香脂素單葡萄糖苷、漢黃芩素、千葉素A、黃芩素、二氫查耳酮3-0-β -D-葡萄糖苷、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羥基二氫查耳酮、綠原酸、木通皂苷D，并且當存在它們的二種以上時，它們?nèi)我鈨烧咧g的重量比率為0.0001?10000:1 ;或者進一步地，其是用于治療和/或預防骨質(zhì)疏松癥、骨病、絕經(jīng)后認知缺陷疾病的藥物；或者進一步地，其是呈片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、外用藥劑、注射制劑等形式。
【文檔編號】A61K36/46GK104173418SQ201410397179
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2012年7月19日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月28日
【發(fā)明者】高秀梅, 劉二偉, 王虹, 樊官偉, 段衛(wèi)華, 劉志東, 張伯禮 申請人:天津中醫(yī)藥大學