銅鰲合劑的醫(yī)藥用途
【專利摘要】本發(fā)明是關(guān)于一種銅鰲合劑的新的醫(yī)藥用途，該用途用于抑制由外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)(包括射頻、微波、激光、冷凍和放射治療等)引起的炎癥并發(fā)癥。本發(fā)明通過利用銅鰲合劑，有效的降低了器官組織和血液中銅的含量，降低了金屬銅介導的活性氧物質(zhì)的產(chǎn)生，從而抑制了炎癥的發(fā)生。本發(fā)明主要用于抑制在外科手術(shù)、創(chuàng)傷、定向能量外科技術(shù)治療時引起的炎癥反應和器官移植時供體和受體炎癥反應，從而減少了治療的并發(fā)癥，具有很好的實用性。
【專利說明】
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種化學制劑的新用途，特別是涉及一種銅鰲合劑在制備抑制炎癥反 應的藥物中的醫(yī)藥用途。 銅鰲合劑的醫(yī)藥用途

【背景技術(shù)】
[0002] 炎癥反應是生物體在進化過程中選擇的一套復雜的防御體系，能激發(fā)適當?shù)膽?答。然而肝臟射頻手術(shù)導致包括細胞因子和自由基等大量炎癥介質(zhì)的釋放，從而誘發(fā)過度 炎癥級聯(lián)反應。這種手術(shù)和創(chuàng)傷所致的嚴重打擊如超過了局部調(diào)節(jié)能力，則過度的急性期 應答反應及其產(chǎn)生的過量炎癥介質(zhì)將破壞自身本已不堪重負的防御系統(tǒng)，在臨床上可發(fā)生 各種手術(shù)后并發(fā)癥，會引起患者多器官功能衰竭甚至死亡（參考 ：SteetZ KL，WUStefeld T, Klein C, et al. Mediators of inflammation and acute phase response in the liver. Cell MolBiol，2001，47:661-673.)。我國每年開展肝臟外科物理治療手術(shù)治療肝癌 數(shù)十萬例，由手術(shù)后并發(fā)癥導致的醫(yī)療費用負擔和醫(yī)療資源浪費是十分龐大的。
[0003] 針對物理治療手術(shù)術(shù)后的急性炎癥反應，目前的治療主要是一般支持治療和抗 炎癥介質(zhì)治療。其中各種促炎因子的抗體、受體、拮抗劑、競爭性受體拮抗劑是近年來研 究的熱點，如TNF的單克隆抗體、可溶性的TNF受體、IL-1受體拮抗劑（IL-lRa)、IL_ 6單 克隆抗體等（參考：V. Kirimlioglu, Η· Karakayali, S. Turkoglu，and Μ· Haberal. Effect of Resveratrol on Oxidative Stress Enzymes in Rats Subjected to 70% Partial Hepatectomy. Transplantation Proceedings, 2008, 40, 293 - 2%)，雖然相關(guān)的動物試 驗及臨床前期研究提示了潛在的臨床應用價值，但在隨后的臨床試驗中并沒有得到預期 中的成功，不能有效地降低患者死亡率，在這方面的臨床試驗結(jié)果是令人失望的（參考： Djordjevic VB. Free radicals in cell biology. Int Rev Cytol，2004,237:57-89·)。如 何尋找一種治療外科物理治療術(shù)后急性炎癥反應的新的有效藥物或方法，是現(xiàn)在亟待解決 的問題。
[0004] 近年來，有研究者開始關(guān)注過渡區(qū)金屬在炎癥反應和器官損傷中的作用。過渡 金屬是指元素周期表中d區(qū)的一系列金屬元素，如鐵、銅、鋅等，它們在介導R0S產(chǎn)生過程 中起著重要作用（參考：KlaudiaJomova，et al. Advances in metal-induced oxidative stress and human disease. Toxicology, 2011，283:65 - 87·)，而R0S 正是導致肝臟外科術(shù) 后急性炎癥的重要介質(zhì)之一。銅離子作為電子載體，催化電子從許多還原劑如半胱氨酸、谷 胱甘肽等轉(zhuǎn)移給分子氧（〇 2)。在這個過程中，生成了過氧化物陰離子（〇2〇、過氧化氫和羥 基自由基（-0H)，引起DNA、膜和蛋白的破壞，導致組織損傷，引起和加劇炎癥反應（參考： Michael D. Mattie, et al. Mechanism of Copper-Activated Transcription:Activation of AP-1，以及 the JNK/SAPK and p38Signal Transduction Pathways·】· Mol Biol. 2008, 383 ：1008 - 1018. Donato A J, Eskurza I, Silver AE, et al. Direct evidence of endothelial oxidative stress with aging in humans:relation to impaired endothelium dependent dilation and upregulation of nuclear factor kappa B. Circ Res,2007, 100 (11):1659-1666)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的主要目的在于，克服現(xiàn)有的用于外科手術(shù)、創(chuàng)傷及物理治療等引起的炎 癥的藥物或方法存在的缺陷，而提供一種藥物，所要解決的技術(shù)問題是抑制氧自由基及炎 癥因子的產(chǎn)生，減少外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療等引起的炎癥反應并發(fā)癥的 發(fā)生，從而更加適于實用，且具有產(chǎn)業(yè)上的利用價值。
[0006] 本發(fā)明的另一目的在于，提供了一種新的治療這種炎癥的方法，通過給所需患者 在術(shù)前和術(shù)后施用銅鰲合劑，減少血液和組織中銅離子的含量，抑制氧自由基及其他炎癥 介質(zhì)的產(chǎn)生，減少外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療后周圍組織炎性細胞浸潤和炎 癥因子的產(chǎn)生，從而抑制炎癥，減少外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療后的炎癥反應 并發(fā)癥的發(fā)生。
[0007] 本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的。依據(jù)本發(fā)明提出 的銅鰲合劑，其可用于抑制由外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療引起的炎癥。
[0008] 本發(fā)明的目的及解決其技術(shù)問題還可采用以下技術(shù)措施進一步實現(xiàn)。
[0009] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑選自藥學上可接受且治療有效的銅 鰲合劑及其衍生物、復合物或其藥學上可接受的鹽中的一種或幾種，或其組合。
[0010] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑包含四個或四個以上的氨基。
[0011] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑為三亞乙基四胺、四乙基五胺、四硫 鉬酸鹽和/或D-青霉胺中的一種或幾種，或其組合。
[0012] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療引 起的炎癥包括外科手術(shù)、射頻、激光、微波和/或放射治療引起的炎癥，以及器官組織損傷 時引起的炎癥和/或器官移植時供體和受體的器官組織的炎癥。
[0013] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑的施用方式為口服，靜脈、皮內(nèi)或皮 下注射。
[0014] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的抑制由外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù) 治療引起的炎癥的藥物的施用劑型為片劑、丸劑、膠囊或錠劑，或以溶液的形式施用。
[0015] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑與不損害其作用的活性物質(zhì)聯(lián)合向 所需患者施用，其中所述的活性物質(zhì)選自抗生素、抗真菌劑、抗炎藥或抗病毒化合物中的一 種或幾種，或其組合。
[0016] 前述的銅鰲合劑的用途，其中所述的銅鰲合劑的施用劑量為1-100毫克/每天/ 每公斤體重。
[0017] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有明顯的優(yōu)點和有益效果。由以上技術(shù)方案可知，為了 達到前述發(fā)明目的，本發(fā)明的主要技術(shù)內(nèi)容如下：
[0018] 經(jīng)由上述可知，本發(fā)明是關(guān)于一種銅鰲合劑的醫(yī)藥用途，該用途用于抑制由外科 手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療及引起的炎癥。本發(fā)明通過利用銅鰲合劑，有效的降低 了器官組織和血液中銅的含量，降低了金屬銅介導的活性氧物質(zhì)的產(chǎn)生，從而抑制了炎癥 的發(fā)生。本發(fā)明主要用于抑制在外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療引起的炎癥反應 和器官移植時供體和受體炎癥反應，從而減少了治療的并發(fā)癥,具有很好的實用性。
[0019] 借由上述技術(shù)方案，本發(fā)明銅鰲合劑的醫(yī)藥用途至少具有下列優(yōu)點：
[0020] 本發(fā)明利用銅鰲合劑，可以減少器官組織和血液中銅離子的含量，減少外科手術(shù)、 物理治療及創(chuàng)傷后周圍組織炎性細胞浸潤和炎癥因子的產(chǎn)生，從而抑制炎癥，減少外科手 術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療后的并發(fā)癥的發(fā)生。
[0021] 綜上所述，本發(fā)明具有上述諸多的優(yōu)點及實用價值，在技術(shù)上有較大的進步，并產(chǎn) 生了簡便實用的效果，而且具有產(chǎn)業(yè)的廣泛利用價值。
[0022] 上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段， 并可依照說明書的內(nèi)容予以實施，以下以本發(fā)明的較佳實施例并配合附圖詳細說明如后。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0023] 圖1顯示的是本發(fā)明一實施例中對照試驗和施用銅鰲合劑后血漿中的銅含量差 異。
[0024] 圖2-1和圖2-2顯示的是本發(fā)明一實施例中對照試驗和施用銅鰲合劑后大鼠血漿 中促炎因子含量的變化。
[0025] 圖3-1、圖3-2和圖3-3顯示的是本發(fā)明一實施例中對照試驗和施用銅鰲合劑后炎 癥的顯著變化。
[0026] 圖4顯示的是本發(fā)明一實施例中對照試驗和施用銅鰲合劑后大鼠肝臟中炎癥因 子的表達變化。

【具體實施方式】
[0027]為更進一步闡述本發(fā)明為達成預定發(fā)明目的所采取的技術(shù)手段及功效，以下結(jié) 合附圖及較佳實施例，對依據(jù)本發(fā)明提出的銅鰲合劑的醫(yī)藥用途的【具體實施方式】詳細說明 如后。
[0028] 實施例1 :銅鰲合劑治療肝臟射頻消融急性炎癥的作用
[0029] 1. 1肝臟射頻消融動物模型的建立
[0030] (l)Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠（10周齡，體重320_350g)，由首都醫(yī)科大學實 驗動物中心提供并采用無特定病原物封閉環(huán)境中飼養(yǎng)（SPF，Specific Pathogen Free)。實 驗大鼠隨機分為2組，分別給與腹腔注射生理鹽水（對照組）和銅鰲合劑（三亞乙基四胺， Sigma，T5033Cat#38260-01_04)。
[0031] (2)銅鰲合劑的配制
[0032] 注射三亞乙基四胺（Trientine)溶液的制備方法如下：438.4mg三亞乙基四胺 (曲恩汀）溶解在l〇ml蒸餾水中，終濃度為0· 2mmol/mL(200mM)。用0· 4δ μ m孔徑的濾器 過濾，分裝，4°C保存，溶液的pH值呈中性。
[0033] (3)腹腔注射
[0034] 給大鼠腹腔注射劑量為三亞乙基四胺0. 5mm〇l/kg/天，三亞乙基四胺溶液終濃度 為0· 2mmol/mL(200mM)，腹腔注射的溶液體積為0· 25mL/100g，每天一次，肝臟射頻消融手 術(shù)前連續(xù)給予5天，術(shù)后給予1_2天（射頻手術(shù)后觀察2天的實驗組大鼠給予1天，觀察5 天的實驗組大鼠給予2天）。
[0035] (4)肝臟射頻消融
[0036] 連續(xù)給藥（或生理鹽水）5天后，對大鼠經(jīng)10%水合氯醛，0.4ml/100g大鼠體重， 麻醉成功后，無菌條件下從腹正中線開腹，暴露肝臟，直視下將電極針刺入肝實質(zhì)內(nèi)，進行 射頻消融。采用奧林帕斯的射頻發(fā)生儀器，參數(shù)為：3W，0.05KJ，持續(xù)時間15-20秒。
[0037] (5)取材
[0038] 分別在射頻消融術(shù)后2小時、2天、5天經(jīng)對大鼠麻醉后取材。給大鼠經(jīng)水合 氯醛、0. 4ml/100g的劑量進行麻醉。麻醉成功后，分離頸動脈插管，收集肝素抗凝血，分離 血漿，-80°C凍存待查。剖腹取射頻消融術(shù)后的肝臟，分為2部分：一部分常規(guī)甲醛固定、包 埋、切片，進行HE染色和免疫組化后觀察；另一部分迅速放入凍存管后置于液氮中凍存。
[0039] 1. 2血漿和肝組織中銅的測定
[0040] 采用等離子光譜發(fā)射法測定血漿和肝組中銅的含量。
[0041] ⑴儀器
[0042] ICPS-7000型電感輔合等離子體發(fā)射光譜儀（日本Shimadzu公司）；DB_3C型控 溫電加熱板（泉州萬達實驗設備廠）。
[0043] (2)試劑
[0044] 銅單元素標準溶液（1000 μ g/L，購于國家標準物質(zhì)研究中心），用1 %的ΗΝ03將 上述標準溶液逐級稀釋，鎂、鈣元素稀釋成1〇〇 U g/mL的標準鐵元素應用液。硝酸和高氯 酸均為優(yōu)級純（購于北京化學試劑公司）。實驗用水為重蒸去離子水。
[0045] (3)試驗方法
[0046] (a)儀器的工作條件
[0047] 工作頻率為40. 68MHz，入射功率為1. 0KW，冷卻氣流量8. OL/min，反射功率<5W，真 空光路，低氣流炬管，進樣速度1. 2ml/min，載氣流量0. 6L/min，輔助氣流量0. 6L/min。綜合 光譜線的靈敏度和譜線間的相互千擾，選擇Cu的分析波長為259. 940nm。
[0048] (b)Cu工作曲線的繪制
[0049] 選用0-0· 50 μ g/ml做測定血漿Cu標準曲線，選用〇_3· 〇 μ g/ml做測定肝組織的 Cu標準曲線
[0050] (c)樣品處理
[0051] 血漿處理：準確移取血漿3〇〇 U 1置于15ml干凈的玻璃燒杯中，加入混合酸（順〇3 : HC104 = 4 :1，V/V)0. 5ml加蓋玻璃片靜置24h，加入3ml的HN03(GR)，于熱板上14(TC加熱消 化，至近干白煙逸盡為止。冷卻后，用1 %的HN03將殘留物溶解，分4-5次轉(zhuǎn)移到l〇ml刻度 離心管中，定容至4. 0ml。同時按上述操作，用1%的HN〇3做試劑空白試驗。
[0052] 肝組織：準確移1. 5-2克，置于50ml干凈玻璃燒杯中，加入混合酸（HN〇3 :Hcl〇4 = 4 :1，V/V)20ml，加蓋玻璃片靜置24h，加入15ml的HN03(GR)，于熱板上16(TC加熱消化，至 近千白煙逸盡為止。冷卻后，用1%的 HN〇3將殘留物溶解，分4-5次轉(zhuǎn)移到1〇1111刻度離心 管中，定容至8. 0ml。同時按上述操作，用1%的HN03做試劑空白試驗。
[0053] (d)待測樣品和試劑空白溶液分別導入儀器，在儀器的工作條件下測定Cu的含 量，用標準曲線法定量。
[0054] 標準曲線法：（μ g/ml)CO Cl C2 C3 C4
[0055] 0.00 0· 10 0. 20 〇· 30 0.40
[0056] R = 0. 99985 SD = 0. 02196
[0057] 截距 c = 6. 4499e+00 ;斜率 d = -4· 8873-003
[0058] 標準曲線法：（μ g/ml)C0 Cl C2 C3 C4
[0059] 0. 5 1. 00 1. 50 2. 00 2. 50
[0060] R = 0. 99992 SD = 0. 04773
[0061] 截距 c = 1. 251e+001 ;斜率 d = 8· 8980e-003
[0062] (e)肝組織消化
[0063] 精確稱取肝組織（1-34，與5〇1111高腳燒杯中，加入1:4 = !1(：以)4:圖03(8-20)1111，力口 蓋玻璃片靜置24h，于熱板上120°C加熱消化，至近干白煙逸盡為止。冷卻后，用的HN〇3 將殘留物溶解，定量轉(zhuǎn)移到l〇ml刻度離心管中，定容至4. 0ml。同時按上述操作，用1%的 HN〇3做試劑空白試驗。
[0064] 1. 3血漿中細胞因子的測定
[0065] 對照組和實驗組血漿中細胞因子的檢測：采用LuminexxMAP技術(shù)檢測。
[0066] (1)儀器
[0067] BIO-RAD Bi〇-Plex200(Bio-Rad Laboratories Co. , Ltd.)
[0068] (2)試劑
[0069] MILLIPLEX xMAP大鼠細胞因子/趨化因子磁珠法-預混27Plex試劑 盒，RECYMAG65K27PMX (默克公司，美國馬薩諸賽州，比勒利卡）。
[0070] (3)試驗方法：嚴格按照試劑盒說明書操作。
[0071] 1. 4肝臟組織病理學變化和免疫組化方法評價肝臟射頻消融術(shù)后炎癥程度
[0072] ⑴HE染色
[0073] 甲醛固定的肝臟組織標本，石蠟包埋，切片（3-5 μ m)，HE (Hematoxylin-eosin)染 色，封片。顯微鏡下觀察，測量中心凝固性壞死帶與正常肝實質(zhì)之間的炎癥帶的厚度（每個 切片測量6-8個不同的點，取均數(shù)進行統(tǒng)計學分析）。
[0074] (2)免疫組化檢測
[0075] (a)脫蠟、水化；
[0076] (b)蒸餾水中3分鐘X 2次；
[0077] (c)抗原修復（根據(jù)一抗選用）；
[0078] (d)用蒸餾水或PBS配置新鮮的3% H202，室溫封閉5?10分鐘；
[0079] (e)PBS 洗 3 分鐘 X2 次；
[00S0] (f)滴加與二抗來源一致的正常動物血清封閉液，室溫1〇_2〇分鐘。甩去多余液 體；
[0081] (g)滴加一抗，室溫30分鐘?1小時（根據(jù)一抗使用說明）；
[0082] (h)PBS 洗 3 分鐘 X3 次；
[0083] (i)滴加二抗 I 試劑（Amplifier/M〇use&Rabbit IgGl)37°C，10 分鐘；
[0084] (j)PBS 洗 3 分鐘 X3 次；
[0085] (k)滴加二抗 II 試劑（Polymer/HRP)室溫 10 分鐘；
[0086] (l)PBS 洗 3 分鐘 X3 次；
[0087] (m) DAB顯色：DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色（鏡下掌握顯色程度）3-5分 鐘；
[0088] (η)蒸餾水洗終止染色，蘇木素復染、PBS返藍；
[0089] (〇)脫水、透明、封片、鏡檢。
[0090] 1 · 5肝組織內(nèi)炎癥因子mRNA的檢測
[0091] ⑴總RNA的提取與檢測
[0092] 在整個操作過程中戴手套；用新鮮的去離子水（Milli-Q-Grade)溶解RNA。
[0093] (a)取 50-100mg 組織樣品，用 0· 75ml TR [Z0丨,? LS 試劑勻漿，15-3(TC靜置 5min。
[0094] (b)加入 〇· 2mL 氯仿，劇烈振蕩 15s 后，15-3(TC靜置 2-15min。
[0095] (〇)4<€、12,00(^離心151^11，取上層水相。
[0096] ⑷加入 〇.5ml 異丙醇，15_30°C靜置 lOmin 后，4。0、12,00(^離心1〇1^11，棄上清。
[0097] (f)再加 lml75%乙醇漂洗沉淀，5,000g離心5min，棄上清，真空干燥去除樣品中 痕量的乙醇，加入適量無 RNase的去離子水。
[0098] (g)用紫外分光光度計分別測定樣品在260nm、280nm波長上的光密度，初步估算 RNA的純度，-80°C保存?zhèn)溆谩?br> [0099] ⑵逆轉(zhuǎn)錄PCR反應：
[0100] (a)儀器
[0101] BIO-RAD iQ5(Bio-Rad Laboratories Co. , Ltd.)〇
[0102] (b)試劑
[0103] cDNA 合成試劑盒為 PrilifScript* 1st Strand cDNA Synthesis Kit (TaKaRa Code :D6110A,寶生物工程（大連）有限公司）。
[0104] PCR 反應試劑盒為 SYRR使 Premix Ex TaqTM(TaKaRa Code :RR420A，寶生物工程 (大連）有限公司）。
[0105] (C)試驗方法：嚴格按照試劑盒說明書操作。
[0106]結(jié)合試驗結(jié)果（請參閱圖1、圖2、圖3、圖4)對實施例1進行分析。
[0107]圖1給與銅鰲合劑干預后，降低了大鼠血漿和肝組織中銅的含量。采用等離子光 譜發(fā)射法測定血漿和肝組中銅的含量。結(jié)果顯示，銅鰲合劑干預組大鼠血漿銅含量低于對 照組，圖1血漿中銅含量差異有顯著性（p = 〇. 〇27)。
[0108]圖2-1、圖2-2顯示，給與銅鰲合劑干預后，大鼠血漿中促炎因子的含量顯著性減 少，抑制炎癥的因子含量顯著性增加。
[0109]圖3-丨、圖3-2和圖3-3所示，給與銅鰲合劑干預后，免疫組化顯示銅鰲合劑干預 組大鼠肝組織炎癥明顯減輕：圖34顯示給與銅鰲合劑后，肝臟射頻消融術(shù)后2小時的炎 ^帶較對照組薄（P = 0· 013);圖3-2肝組織內(nèi)促炎癥細胞因子減少（IL-6陽性細胞數(shù)顯 著少于對照組P = 0· 025);圖3-3巨噬細胞浸潤減少（CD68陽性細胞數(shù)顯著少于對照組， ρ〈0· 001)。
[0110]圖4給與銅鰲合劑干預后，大鼠肝組中中炎癥因子的表達降低（ρ<〇. 〇1)。
[0111]實施例1的結(jié)果表明，銅鰲合劑在抑制由定向能量外科技術(shù)治療引起的炎癥中具 有意料不到的療效。 t〇112] 實施例2 :藥物準備和治療
[0113]人和其它動物，特別是哺乳動物，由于射頻消融等物理治療治療或其他傷害引起 的肝臟炎癥，可以通過給與一種或多種上述確定的銅鰲合劑或藥學上可以接受的衍生物或 其鹽治療。本發(fā)明所用的銅鰲合劑優(yōu)選有至少4個氨基的聚胺銅鰲合劑。
[0114] 如本文所用，藥學上可接受的鹽或復合物是指的鹽或配合物，保留了所需的上述 確定的化合物的生物活性，并表現(xiàn)出最小的毒理效應。這些鹽是與無機酸（例如，鹽酸、氫 溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等）形成的鹽，與有機酸形成鹽，如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、蘋果 酸、抗壞血酸、苯甲酸、單寧酸、雙羥萘酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸和聚半乳糖醛 酸。例如，三亞乙基四胺四鹽酸鹽或曲恩汀的的鹽酸鹽（Merck公司，美國新澤西州，商標為 SYPMNE 的 250mg 膠囊）。
[0115] 該活性化合物可被包括在藥學上可接受的載體或稀釋劑中，劑量足以給患者的治 療有效量，而不會給治療病人造成嚴重的毒性作用。在一些實施例中，可用于所有的上述條 件下的活性化合物的優(yōu)選劑量是從約〇. 5至500毫克/公斤體重的范圍內(nèi)，首選1至100 毫克/每天/每公斤體重。根據(jù)交付的母體化合物的重量，可以計算出藥學上可接受的衍 生物的有效劑量范圍。如果衍生品本身有活性，有效劑量可如上使用該衍生物的重量來估 計，或通過本領域技術(shù)人員利用已知的在本領域中其它方法估計。例如，給予鹽酸曲恩汀的 在初期確定兒科患者500-750毫克/天，成人劑量7 5〇_1250毫克/天，分為每日兩次、三次 或四次。初始劑量的臨床反應不足時，這樣的劑量可增加到成人2000毫克/天或兒童患者 (12歲或以下）1500毫克/天。口服藥物可以空腹，至少飯前飯后一個小時，或服用任何其 他藥物或食物一個小時或兩個小時后。
[0116] 本發(fā)明的化合物的有效量包括治療有效量或預防有效量的化合物。"治療有效量" 一般是指在劑量和所需要的時間，以達到理想的治療結(jié)果，如減少或逆轉(zhuǎn)肝臟炎癥反應。銅 鰲合劑的治療有效量的影響因素很多，如疾病狀態(tài)、年齡、性別和個人的體重，銅鰲合劑引 起個體所需的反應的的能力。治療有效量也受到有毒和有害效果的影響，這種效果是否超 過有效的治療效果。"預防有效量"一般是指在劑量和所需要的時間，以達到理想的預防結(jié) 果，如防止或抑制肝臟炎癥的發(fā)生率。預防有效量可以根據(jù)以上所述確定治療有效量的方 法來確定。例如，可以在肝臟射頻消融治療前或其他可能誘發(fā)炎癥反應的治療措施前給與 預防劑量的銅鰲合劑。通常情況下，由于用于預防劑量的受試者在疾病前或在疾病的早期 階段，預防有效量將小于治療有效量。
[0117] 本發(fā)明的化合物可以以任何適當?shù)膯挝粍┝啃问浇o藥，包括但不限于一個單位 劑量含有1至3000mg，優(yōu)選為每單位劑量形式包含 5?500mg活性成分，口服劑量可以是 25-250mg，使用方便。
[0118] 在某些治療方案中，要求給藥后血漿中藥物活性成分峰值濃度達到〇. 1-100 μ Μ 或約1-10 μ Μ。這可以通過靜脈注射藥物的活性成分的溶液，可以是鹽溶液、水溶液或是含 有活性成分的大丸劑。
[0119] 藥物里的活性成分的濃度取決于藥物的吸收、分布、滅活和排泄率等，以及其它方 面的相關(guān)因素。但是應當指出的是，劑量也隨著需要控制的病情嚴重程度的變化而變化。應 進一步理解，對于任何特定給藥對象，具體的劑量方案應根據(jù)個體需要和用藥人員或監(jiān)管 人員根據(jù)專業(yè)判斷隨時調(diào)整，本文中所述的濃度范圍僅僅是示例性的，而不是為了限制所 要求保護藥物的使用范圍和實踐?；钚猿煞挚梢砸淮谓o藥，或者被分成若干個小劑量在不 同時間間隔給藥。
[0120]可以通過任何適當?shù)耐緩浇o藥，例如，口服、非腸道、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)注射或皮下注 射。
[0121] 用于腸胃外、真皮內(nèi)、皮下或局部施用的溶液或懸浮液可包括以下組分：無菌稀釋 齊IJ，例如水的注射液、生理鹽水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑，抗菌 劑如芐醇或羥苯甲酸甲酯，抗氧化劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉，鰲合劑如乙二胺四乙酸，緩 沖劑如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽和等滲調(diào)節(jié)劑，如氯化鈉或葡萄糖。
[0122] 靜脈注射，首選的載體溶液為生理鹽水或磷酸鹽緩沖液?；钚猿煞忠部梢酝ㄟ^ 皮膚藥貼給藥。皮膚藥貼的準備方法在本【技術(shù)領域】的技術(shù)人員是已知的。例如，見參考 文獻 Brown L. , and Langer R. , Transdermal Delivery of Drugs, Annual Review of Medicine, 39:221-229(1988)。
[0123] 在另一個實施方案中，活性成分與能保護該化合物從體內(nèi)快速清除的載體一起制 備，這些載體包括控釋制劑，如植入物和微膠囊化的運輸系統(tǒng)。可以使用可生物降解的、生 物相容的聚合物，如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯和聚乳酸。
[0124] 脂質(zhì)體懸液也可以作為載體。這些可以根據(jù)此領域內(nèi)技術(shù)人員已知的方法制備， 如U. S. Pat. No. 4, 522, 811種所描述的。例如，脂質(zhì)體制劑可以通過將適當?shù)闹|(zhì)（如硬脂 酰磷脂酰乙醇胺、硬脂酰磷脂酰膽堿和膽固醇等）溶解至一種無機溶劑中，然后無機溶劑 蒸發(fā)，在容器表面留下干燥的脂質(zhì)薄膜。活性化合物的水溶液或者其單磷酸鹽和/或三磷 酸鹽衍生物裝入這種容器中。然后旋轉(zhuǎn)以釋放脂質(zhì)聚集體，從而形成脂質(zhì)體懸浮液。
[0125] 口服組分通常包括一種惰性稀釋液或者可食用的載體。它們被裝入明膠膠囊或者 壓縮成藥片?？诜委煹乃幬铮钚曰衔锟梢耘c賦形劑混合，制作成片劑、錠劑或膠囊的 形式使用。藥物相容的粘合劑，和/或輔助材料，可包括在該組合物中。
[0126] 片劑、丸劑、膠囊和錠劑等可以包括以下成分或類似的化合物：粘合劑，如微晶纖 維素或明膠，賦形劑如淀粉或乳糖，崩解劑如藻酸或玉米淀粉，潤滑劑如硬脂酸鎂，助流劑 如膠態(tài)二氧化硅，甜味劑如蔗糖或糖精，或調(diào)味劑如薄荷、水楊酸甲酯或橙味劑。當劑量單 位形式是膠囊時，除上述類型的材料外，它可以包括一種液體載體如脂肪油。此外，劑量單 位形式能含有各種其他修改的劑量單位物理形式的材料，例如，糖衣，蟲膠，或者其它腸溶 制劑的涂料。
[0127] 在可替代的實施例中，活性化合物或藥學上可接受的鹽或衍生物可以作為懸浮 液，糖漿，晶片，口香糖等的組成部分來使用。糖漿中除了活性化合物，可能還有作為甜味劑 的蔗糖和某些防腐劑、染料、著色劑和風味調(diào)料。本發(fā)明中銅鰲合劑是在肝臟中的多方面應 用。如采用口服、肌肉注射或腹腔注射。在進一步的替代方案中，該化合物可以全身給藥， 例如通過靜脈輸液或注射，用于治療或預防肝臟炎癥。
[0128] 該活性化合物或藥學上可接受的衍生物或其鹽，也可以與不損害所需操作的其它 活性物質(zhì)或其他所需的補充物一同應用，如抗生素、抗真菌劑、抗炎藥或抗病毒化合物的材 料?；钚曰衔锬芘c其他藥物一起給藥：降脂劑，如普羅布考，煙酸；血小板聚集抑制劑，如 阿司匹林；抗血栓劑，如香豆；鈣通道阻滯劑，如維拉帕米，地爾硫卓，硝苯地平；血管緊張 素轉(zhuǎn)化酶（ACE)抑制劑，例如卡托普利和依那普利；和β -受體阻滯劑如普萘洛爾和拉貝洛 爾。該化合物也可以與非留體抗炎藥物（如布洛芬、吲哚美辛，阿司匹林，苯氧苯丙酸，甲滅 酸，氟芬那酸，舒林酸）聯(lián)合應用。該化合物也可以與眼科學的類固醇激素制劑聯(lián)合應用。
[0129]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，雖 然本發(fā)明已以較佳實施例公開如上，然而并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人 員，在不脫尚本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi)，當可利用上述揭不的方法及技術(shù)內(nèi)容作出些許的更 動或修飾為等同變化的等效實施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的 技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案 的范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1. 銅鰲合劑在制備抑制由外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向能量外科技術(shù)治療引起的炎癥的藥物 中的用途，其中所述的定向能量外科技術(shù)包括射頻、微波、激光、冷凍和/或放射治療中的 一種或幾種，或其組合。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的銅鰲合劑選自藥學上可接受且治療有效劑 量的銅鰲合劑及其衍生物、復合物或其藥學上可接受的鹽中的一種或幾種，或其組合。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的銅鰲合劑包含四個或四個以上的氨基。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述的銅鰲合劑為三亞乙基四胺、四乙基五胺、四 硫鑰酸鹽和/或D-青霉胺中的一種或幾種，或其組合。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的用途,其中所述的外科手術(shù)、創(chuàng)傷及定向 能量外科技術(shù)治療引起的炎癥包括外科手術(shù)、射頻、激光、微波和/或放射治療引起的炎 癥，和/或器官組織損傷時引起的炎癥，和/或器官移植時供體和受體的器官組織的炎癥。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的用途，其中所述的銅鰲合劑的施用方式為 口服、靜脈、皮內(nèi)和皮下注射或外用表面處理。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的用途，其中所述的抑制由外科手術(shù)、創(chuàng)傷 及定向能量外科技術(shù)引起的炎癥的藥物的施用劑型為片劑、丸劑、膠囊或錠劑，或以溶液的 形式施用。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的用途，其中所述的銅鰲合劑與不損害其作 用的活性物質(zhì)聯(lián)合向所需患者施用，其中所述的活性物質(zhì)選自抗生素、抗真菌劑、抗炎藥或 抗病毒化合物中的一種或幾種，或其組合。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的用途，其中所述的銅鰲合劑的施用劑量為 1-100毫克/每天/每公斤體重。
【文檔編號】A61K31/132GK104189002SQ201410419608
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月22日
【發(fā)明者】李寧, 崔靜昭, 殷繼明 申請人:首都醫(yī)科大學附屬北京佑安醫(yī)院, 北京市肝病研究所, 李寧