穩(wěn)定化的液體和凍干的adamts13制劑的制作方法【專利摘要】本發(fā)明涉及具有改善的或期望的性質的ADAMTS13制劑。因此，本發(fā)明提供了適合于藥物施用的液體和凍干的ADAMTS13制劑。除了其它方面，本發(fā)明還提供了治療受治療者中與VWF和/或ADAMTS13機能障礙相關的各種疾病和病況的方法。本文還提供的是包含可用于治療各種疾病和病況的ADAMTS13制劑的藥劑盒。【專利說明】穩(wěn)定化的液體和凍干的ADAMTS13制劑[0001]本發(fā)明為下述申請的分案申請。[0002]發(fā)明名稱：穩(wěn)定化的液體和凍干的ADAMTS13制劑[000引申請日：2010年9月21日[0004]申請?zhí)枺?01080046707.6(PCT/US2010/049723)[000引交叉參考相關申請[0006]本申請要求2009年9月21日提交的第61/244,353號美國臨時申請的利益，為了所有目的將該申請通過引用整體并入本文。[0007]關于對在聯(lián)邦政府資助的研究或開發(fā)下進行的發(fā)明的權利的聲明[000引不適用[0009]參考于光盤上提交的"序列表"、表或計算機程序列表附錄[0010]不適用[0011]發(fā)明背景[001引ADAMTS(具有血小板反應蛋白I型（t虹ombospondintypeI)模體的去整合素（disintegrin)和金屬蛋白酶）蛋白是包含許多保守結構域（包括鋒依賴性催化結構域、富含半脫氨酸的結構域、去整合素樣結構域（disintegrin-l化edomain)和至少一個（在大多數情況下多個）血小板反應蛋白I型重復的金屬蛋白酶家族（關于綜述，參見Nicholson等人，BMCEvolBiol.2005Feb4;5(1):11)。在進化上與金屬蛋白酶的ADAM和MMP家族相關的此類蛋白（JonesGC，CurrWiarmBiotechnol.2006Feb;7(1):25-31)是與許多疾病和病況，包括血栓性血小板減少性紫薇（TTP)(MoakeJL，SeminHematol.2004Jan;41(1):4-14)、結締組織障礙、癌癥、炎癥（Nicholson等人）和嚴重惡性拒原蟲型拒疾（Plasmodiumfalciparummalaria)(Larkin等人，PLoSPathog.2009Mar;5(3):el000349)關聯(lián)的分泌性酶。由于該些關聯(lián)性，因此ADAMTS酶已被公認為許多疾病的潛在治療性祀（JonesGC，CurrWiarmBiotechnol.2006Feb;7(1):25-31)。[0013]一個ADAMTS家族成員，ADAMTS13,在殘基Tyr1605與Met1606之間切割vonWi1Iebrand因子（vWF)。ADAMTS13活性的喪失與許多病況例如TTP(MoakeJL，SeminHematol.2004Jan;41(1):4-14)、急性和慢性炎癥（Chauhan等人，JExpMed.2008S巧1;205巧）：2065-74)W及最近若干種惡性拒原蟲致拒疾（Larkin等人，PLoSPathog.2009Mar;5(3):61000349)關聯(lián)。[0014]血栓性血小板減少性紫薇CTT巧是特征在于血栓性微血管病、血小板減少癥和可引起不同程度的組織缺血和梗塞的微血管血栓形成。在臨床上，TTP患者通過癥狀例如血小板減少癥、裂紅細胞（紅細胞的碎片）和升高的乳酸脫氨酶水平（MoakeJL化romboticmicroangiopathies.NEnglJMed.2002；347:589-600；MoakeJL.vonWillebrandfactor，ADAMTS-13，andthromboticthrombocytopenicpurpura.SeminHematol.2004;41:4-14;SadlerJE，MoakeJL，Miyata!,GeorgeJN.民ecentadvancesinthromboticthrombocytopenicpurpura.Hematology(AmSocHematolEducProgram).2004:407-423;SadlerJE.NewconceptsinvonWillebranddisease.Annu民evMed.2005;56:173-191)來診斷。[0015]在1982年，Moake等人在慢性復發(fā)性TTP患者的血漿中發(fā)現非常大的vonWillebrand因子化^vWF)多聚體（MoakeJL，RudyCK，化〇11JH，WeinsteinMJ，ColanninoNM，AzocarJ，Seder民H，HongSL，DeykinD.UnusuallylargeplasmafactorVIII:vonWillebrandfactormultimersinchronicrelapsingthrombotic化romboc^openicpui^pura.NEnglJMed.1982;307:1432-1435)OU^vWF與TTP么間的關聯(lián)性獲得化rlan等人W及Tsai和Lian的獨立發(fā)現支持，所述發(fā)現是：大多數罹患TTP的患者缺乏血漿金屬蛋白酶（現稱為ADAMTS13)，所述酶切割vWF巧urlanM，RoblesR，SolenthalerM，WassmerM，SandozP，LaemmleB.DeficientactivityofvonWillebrandfactor-cleavingproteaseinchronicrelapsingthromboticthrombocytopenicpurpura.Blood.1997;89:3097-3103;TsaiHM，Sussman，II，GinsburgD，LanldiofH，SixmaJJ，Nagel民L.Proteolyticcleavageofrecombinanttype2AvonWillebrandfactormutants民834Wand民834Q:inhibitionbydoxycyclineandbymonoclonalantibodyVP-1.Blood.1997;89:1954-1962;TsaiHM，LianEC.AntibodiestovonWillebrandfactor-cleavingproteaseinacutethromboticthrombocytopenicpui^pura.NEnglJMed.1998;339:1585-1594)O[0016]ADAMTS13蛋白酶是主要由肝產生的190kDa糖基化蛋白化evyGG，NicholsWC，LianEC，ForoudT，McClintickJN，McGeeBM，YangAY，SiemieniakD民，StarkK民，Gruppo民，Sarode民，ShurinSB，ChandrasekaranV，StablerSP，SabioH，BouhassiraEE，UpshawJD，Jr.，GinsburgD，TsaiHM.MutationsinamemberoftheADAMTSgenefamilycausethromboticthrombocytopenicpurpura.Nature.2001;413:488-494;FujikawaK，SuzukiH，McMullenB，ChungD.PurificationofhumanvonWillebrandfactor-cleavingproteaseanditsidentificationasanewmemberofthemetalloproteinasefamily.Blood.2001;98:1662-1666;ZhengX，ChungD，TakayamaTKjMajerusEM,SadlerJE,FujikawaK.StructureofvonWillebrandfactor-cleavingprotease(ADAMTS13)，ametalloproteaseinvolvedinthromboticthrombocytopenicpurpura.JBiolChem.2001；276:41059-41063；SoejimaK,MimuraN,HirashimaM,MaedaH，HamamotoT，NakagakiT，NozakiC.Anovelhumanmetalloproteasesynthesizedintheliverandsecretedintotheblood:possibly,thevonWillebrandfactor-cleavingprotease；JBiochem(Tokyo).2001;130:475-480;GerritsenHE，Robles民，LammleB，FurlanM.PartialaminoacidsequenceofpurifiedvonWillebrandfactor-cleavingprotease.Blood.2001;98:1654-1661)。[0017]已顯示ADAMTS13基因中的突變引起TTP(LevyGG，NicholsWC，LianEC，ForoudT，McClintickJN，McGeeBM，YangAY，SiemieniakD民，StarkK民，Gruppo民，Sarode民，ShurinSB，ChandrasekaranV，StablerSP，SabioH，BouhassiraEE，UpshawJD，Jr.，GinsburgD，TsaiHM.MutationsinamemberoftheADAMTSgenefamilycausethromboticthrombocytopenicpurpura.Nature.2001;413:488-494)。通常由抑制ADAMTS-13活性的自身抗體引起的特發(fā)性TTP是在成人和年長孩子中發(fā)生的更常見的障礙，并且可在11-36%的患者（TsaiHM，LianEC.AntibodiestovonWillebrandfactor-cleavingproteaseinacutethromboticthrombocytopenicpurpura.NEnglJ16(1.1998:339:1585-1594:^14311M，LammleB.DeficiencyofvonWillebrandfactor-cleavingproteaseinfamilialandacquiredthromboticthrombocytopenicpui'pura.BaillieresClinHaematol.1998;11:509-514)中定期間隔發(fā)生。[001引非中和抗體也可通過誘導從循環(huán)的清除來抑制ADAMTS活性（ScheiflingerF，KnoblP，TrattnerB，PlaimauerB，MohrG，DockalM，DornerF，民iegerM.NonneutralizingIgMandIgGantibodiestovonWillebrandfactor-cleavingprotease(ADAMTS-13)inapatientwiththromboticthrombocytopenicpurpura.Blood.2003;102:3241-3243)。健康成人的血漿ADAMTS13活性在50%至178%的范圍內變化(MoakeJL.Thromboticthrombocytopenicpurpuraandthehemolyticuremicsyndrome.ArchPatholLabMed.2002;126:1430-1433)O在大多數家族性TTP或獲得性TTP患者中，血漿ADAMTS13活性不存在或低于5%的正?；钚?。在不治療的情況下，死亡率超過90%，但血漿療法使死亡率降低至約20%(MoakeJL^romboticthrombocytopenicpurpuraandthehemolyticuremicsyndrome.ArchPatholLabMed.2002;126:1430-1433)。[0019]巨棱細胞和內皮細胞中合成的vWF分別貶存在血小板-顆粒和We^el-Palade小體如超大vWF(化-vWF)中（MoakeJL，RudyCK，化〇11JH，WeinsteinMJ，ColanninoNM，AzocarJ，Seder民H，HongSL，DeykinD.UnusuallylargeplasmafactorVIII:vonWillebrandfactormultimersinchronicrelapsingthromboticthrombocytopenicpui^pura.NEnglJMed.1982;307:1432-1435;WagnerDD，OlmstedJB，HarderVJ.ImmunolocalizationofvonWillebrandproteininWeibel-Paladebodiesofhumanendothelialcells.JCellBiol.1982;95:355-360;WagnerDD，Bonfanti民.vonWillebrandfactorandtheendothelium.MayoClinProc.1991;66:621-627;SpornLA，HarderVJ，WagnerDD.vonWillebrandfactorreleasedfromWeibel-Paladebodiesbindsmoreavidlytoextracellularmatrixthanthatsecretedconstitutively.Blood.1987;69:1531-1534;TsaiHM，NagelRL，HatcherVB，Sussman，II.Endothelialcell-derivedhighmolecularweightvonWillebrandfactorisconvertedintotheplasmamultimerpatternbygranulocyteproteases.BiochemBiophysResCommun.1989;158:980-985;TsaiHM，NagelRL，HatcherVB，Sussman，II.Multimericcompositionofendothelialcell-derivedvonWillebrandfactor.Blood.1989;73:2074-2076)。一旦從內皮細胞分泌，此類化-vWF多聚體被循環(huán)中的ADAMTS13在vWF分子中的特定切割位點上切割成一系列更小的多聚體（TsaiHM，Nagel民L，HatcherVB，Sussman，II.Endothelialcell-derivedhighmolecularweightvonWillebrandfactorisconvertedintotheplasmamultimerpatternbygranulocyteproteases.BiochemBiophysResCommun.1989;158:980-985;DentJA,Ga化useraM，RuggeriZM.HeterogeneityofplasmavonWillebrandfactormultimersresultingfromproteolysisoftheconstituentsubunit.JClinInvest.1991;88:774-782;FurlanM，民obles民，AffolterD，MeyerD，BaillodP，LammleB.TripletstructureofvonWillebrandfactorreflectsproteolyticdegradationofhighmolecularweightmultimers.Proc化1:1AcadSciUSA.1993;90:7503-7507)。[0020]ADAMTS13在成熟vWF亞基的中也A2結構域中的Tyr842-Met843鍵上切割并且需要鋒或巧來獲得活性值entJA,BerkowitzSD,WareJ,KasperCK,RuggeriZM.Identi円cationofacleavagesitedirectingtheimmunochemicaldetectionofmolecularabnormalitiesintypeIIAvonWillebrandfactor.ProcNatlAcadSciUSA.1990;87:6306-6310)。vWF存在于"紗線球化aU-of-yarn)"和絲狀體（filamentousform)(如通過電子顯微鏡術看到的）中（SlaterH,LoscalzoJ,Bockenste化P,HandinRI.NativeconformationofhumanvonWillebrandprotein.Analysisbyelectronmicroscopyandquasi-elasticlightscattering.JBiol.Chem.1985;260:8559-8563)。此外，原子力顯微鏡確認了vWF在靜止條件下W球形構造存在并且在暴露于剪切應力后W展開的絲狀態(tài)存在（SiedleckiCA,LestiniBJ,Kottke-MarchantKK,ElppellSJ,WilsonDL，MarchantRE.Shear-dependentchangesinthethree-dimensionalstruc1:ureofhumanvonWillebrandfactor.Blood.1996;88:2939-2950)。當vWF纖絲的一個末端被銷定于表面時，該也可在體內發(fā)生。[0021]TTP患者的血栓由少量纖維蛋白和主要地vWF和血小板組成，該表明vWF-介導的血小板聚集為血栓形成的原因（AsadaY,SumiyoshiA,HayashiT,SuzumiyaJ,KaketaniK.Immunohistochemistryofvascularlesioninthromboticthrombocytopenicpurpura,withspecialreferencetofactorVIIIrelatedantigen.ThrombRes.1985；38:469-479)。具有復發(fā)性TTP的患者在血漿中具有超大多聚體?；?vWF多聚體隨時間過去積累，因為抑制劑（抗-ADAMTS13Ab)的持續(xù)存在降低了ADAMTS13的活性?；?vWF多聚體極度活躍并且因剪切應力而展開，從而引起血小板聚集，該導致血管內血栓形成（TsaiHM.VonWillebrandfactor,ADAMTS13,andthromboticthrombocytopenicpurpura.JMolMed.2002；80:639-647；TsaiH!.DeficiencyofADAMTS-13inthromboticandthrombocytopenicpurpura.JThrombHaemost.2003;1:2038-2040;dis州ssion2040-203巧。[002引據認為因ADAMTS13缺乏而導致的反應過度化-vWF多聚體在血漿中的存在可W與增加的患與冠狀動脈也臟病相關的動脈血栓形成的風險相關。[002引因此，本領域存在對適合用于治療與ADAMTS13和VWF機能障礙相關的各種疾病和病況的ADAMTS13蛋白的藥物制劑的需要。除了其它方面，本發(fā)明提供了適合用于藥物施用的ADAMTS13制劑W及治療患有與ADAMTS13和VWF機能障礙相關的疾病或病況的受治療者的方法。[0024]發(fā)明概述[0025]在一個方面，本發(fā)明提供了適合用于藥物施用的ADAMTS13(A13)巧驚U。有利地，在某些實施方案中，本發(fā)明提供了可被儲存延長的時期而不損失活性或變得過度聚集的A13巧驚U。在某些實施方案中，本發(fā)明的制劑可在高達至少約37C的溫度下被儲存至少6個月。[0026]在一個方面，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;化）OmM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)0.5mM至20mM的巧；(d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。[0027]在相關的方面，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)巧驚U，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；（a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)0.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性齊U;和訊用于維持pH在6.O和8.O之間的緩沖劑。[002引在本發(fā)明的一個方面，提供了適合用于藥物施用的重組ADAMTS13(A13)制劑。在某些實施方案中，本文提供的制劑具有高比活性并在儲存延長的時期后是穩(wěn)定的。[0029]在本發(fā)明的另一方面，提供了具有A13和rA13的降低的二聚作用或聚集。在某些實施方案中，本文提供的制劑在儲存延長的時期時延遲了A13和rA13二聚體的形成和聚集作用。在某些實施方案中，該些制劑適合用于藥物施用。[0030]在一個方面，本發(fā)明涉及治療或預防與一種或多種血栓的形成/存在相關的病癥的方法W及瓦解在需要其的患者中的一種或多種血栓的方法。與一種或多種血栓的形成/存在相關的病癥的實例是遺傳性血栓性血小板減少性紫薇（TTP)、獲得性TTP、動脈栓塞、急性也肌梗塞（AMI)、中風、敗血癥和彌漫性血管內凝血值1C)。在一個實施方案中，所述的治療或預防的方法包括施用本文提供的A13或rA13巧驚U。[0031]在另一方面，本發(fā)明提供了治療或預防在需要其的患者中的梗塞的方法。在某些實施方案中，提供了用于治療或預防與梗塞相關的疾病或病況的方法，所述疾病或病況包括但不限于也肌梗塞（也臟病發(fā)作）、肺栓塞、腦血管事件如中風、外周動脈閉塞性疾病（例如壞痘）、抗磯脂綜合征、敗血癥、巨細胞性動脈炎佑CA)、疵氣和腸扭轉。在一個實施方案中，所述的治療或預防的方法包括施用本文提供的A13或rA13巧驚U。[0032]在一個方面，本發(fā)明提供了配制具有高穩(wěn)定性和/或高比活性的A13或rA13的方法。在某些實施方案中，所述方法可用于配制可在高達至少約37C的溫度下儲存延長的時期而不損失對于藥物施用所期望的高比活性的溶液和凍干片。[0033]在另一方面，本文提供了用于A13或rA13的藥物施用的藥劑盒。在某些實施方案中，本發(fā)明的藥劑盒可包括可被儲存延長的時期的液體或凍干的制劑。[0034]附圖簡述[003引圖1.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13。溶液在4°C或37C下儲存高達6個月。在所示的時間點測定（A)FRETS-VWF73活性和炬）由ELISA測量的ADAMTS13蛋白濃度。[003引圖2.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13然后凍干。凍干的制劑在4°C或37C下儲存高達6個月。ADAMTS13制劑用無菌水復原并在所示的時間點測定（A)FRETS-VWF73活性和炬）由化ISA測量的ADAMTS13蛋白濃度。[0037]圖3.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13,然后將樣品直接加載到Superose6凝膠過濾柱上或在加載前凍干并用無菌水復原。然后通過凝膠過濾分析ADAMTS13制劑。[003引圖4.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組40411513。溶液在（4)41：或炬)371：下儲存高達6個月。然后在所示的時間點通過凝膠過濾分析ADAMTS13巧驚U。[003引圖5.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13然后凍干。然后凍干的制劑在（A)4°C或炬)37°C下儲存高達6個月。ADAMTS13制劑在所示的時間點在無菌水中復原并通過凝膠過濾分析。[0040]圖6.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13并然后（A)在溶液中儲存或炬）在4°C或37°C下凍干儲存高達6個月。凍干的制劑在無菌水中復原，并通過動態(tài)光散射分析來表征在溶液中和凍干的制劑中儲存的樣品。[0041]圖7.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM磯酸軸緩沖液的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13并然后（A)在溶液中儲存或炬）在4°C或37°C下凍干儲存高達6個月。凍干的制劑在無菌水中復原，并通過動態(tài)光散射分析來表征在溶液中和凍干的制劑中儲存的樣品。[004引圖8.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM巧樣酸H軸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13并然后（A)在溶液中儲存或炬）在4°C或37°C下凍干儲存高達6個月。凍干的制劑在無菌水中復原，并通過動態(tài)光散射分析來表征在溶液中和凍干的制劑中儲存的樣品。[004引圖9.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13并然后凍干。凍干的樣品在4C或37C下儲存3個月然后在無菌水中復原。然后通過傅里葉變換紅外光譜法表征ADAMTS13樣品，并將結果與新配制和凍干的樣品進行比較。[0044]圖10.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13。溶液在4°C或37C下儲存高達6個月。凍干的制劑用無菌水復原并通過反相HPLC分析測定所有樣品的純度。[0045]圖11.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13。溶液制劑的樣品也被凍干并用無菌水復原。溶液和復原的凍干的制劑通過差示掃描量熱分析表征。[0046]圖12.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80的緩沖液中，在抑7.0下，采用20mM的選自（1)組氨酸、（2)磯酸鹽緩沖液或（3)巧樣酸軸的緩沖劑配制重組ADAMTS13。在制劑中的ADAMTS13的Z-平均直徑通過動態(tài)光散射分析來表征。[0047]圖13.在包含150mM化C1、0%-2%藏糖、0%-3%甘露醇、巧、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下配制重組ADAMTS13,并通過凝膠過濾分析。完整的譜在圖（A)中示出，二聚體峰的放大的部分在圖炬）中示出。[0048]圖14.在包含150mM化Cl和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑5.5、6.5、7.5、8.5、和9.5下配制重組ADAMTS13。巧驚U在4C或4(TC下儲存24小時。然后對所示的抑制劑測定FRETS-VWF73活性和由化ISA測量的ADAMTS13蛋白濃度。[004引圖15.在包含150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.O下，采用（12B和12D)和不采用（12A和12C)2mMCaCl2配制重組ADAMTS13。將液體制劑在25C(12A和12B)或37C(12C和12D)下儲存3周。在所示的時間點通過FRETS-VWF73測定酶穩(wěn)定性。[0050]圖16.(A)將重組ADAMTS13加載到用包含20mMNa2HP〇4(pH7.W和SOOmM化Cl的緩沖液平衡的Superose6化凝膠過濾柱上，并且分子種類通過尺寸和形狀分離。產生對應于聚集的A13(池1)、二聚的A13(池2)和單體的A13(池3)的H個洗脫池（elutionpool)。然后測定每個池的FRETS-VWF73活性。炬）通過動態(tài)光散射分析進一步評價混合的部分的低聚狀態(tài)和多分散性。[0051]圖17.在包含2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80、20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下且化Cl為（A)OmM、炬）30mM、（C)60mM、（D)90mM、似120mM、或（F)ISOmM的條件下配制重組ADAMTS13。接著將配制的ADAMTS13組合物凍干并目視檢查所得凍干餅（Iyocake)的外觀。[005引圖18.將從包含0至150mM化Cl的制劑制成的重組ADAMTS13凍干餅在水中復原。通過凝膠過濾分析測定復原的ADAMTS13蛋白的聚集狀態(tài)。[0053]圖19.在包含0.05%聚山梨醇醋80、20mM組氨酸的緩沖液中，在抑7.0下，藏糖濃度為從5mM至20mM且化Cl濃度為從0至150mM的條件下配制重組ADAMTS13。通過FRETS-VWF73檢驗測定每個制劑中ADAMTS13蛋白的活性。[0054]圖20.將高鹽和低鹽緩沖液凍干。高鹽緩沖液（A)包含20mM組氨酸（pH7.0)、150mM化Cl、2%藏糖、0.05%聚山梨醇醋80和2mMCaCl2,而低鹽緩沖液做包含20mM組氨酸（pH7.0)、30mM化ClU%藏糖、3%甘露醇、0.05%聚山梨醇醋80和2mMCaCl2。然后在標準條件下凍干該兩種制劑并接著目視檢查所得的凍干餅。[00巧]圖21.通過使用Superose6化柱的尺寸排阻色譜法分析在凝膠過濾（A)之前和炬）之后通過陽離子交換色譜法分離的重組ADAMTS13的多聚體狀態(tài)。[0056]圖22.通過動態(tài)光散射分析在凝膠過濾（A)之前和炬）之后通過陽離子交換色譜法分離的重組ADAMTS13的多聚體狀態(tài)。[0057]圖23.對于rADAMTS13制劑的凍干的（A)標準的方案和做延長的方案。[0058]圖24.通過（A)使用標準的凍干方案凍干rA13制劑1至4,做使用延長的凍干方案凍干rA13制劑1至4,似使用標準的凍干方案凍干rA13制劑5至8和做使用延長的凍干方案凍干rA13制劑5至8而產生的rADAMTSlS凍干餅的比較。用于生成此數據的制劑和凍干方案可在實施例12中找到。[005引圖24.將在標準的（ALY0)或延長的炬LY0)凍干方案下由包含（A)30mM化Cl或炬)60mM化Cl的制劑產生的重組ADAMTS13凍干餅在水中復原。通過動態(tài)光散射分析測定復原的ADAMTS13蛋白的聚集狀態(tài)。[0060]圖25.在采用標準的或延長的方案凍干之后通過動態(tài)光散射分析評價由（A)30mM化Cl或做60mM化Cl配制的ADAMTS13組合物的低聚狀態(tài)和多分散性。[0061]圖26.人vonWillebrand因子（vW巧-切割蛋白酶ADAMTS13的結構域結構(domainstructure)。前體ADAMTS13多膚由信號膚（S)、前膚（P)、然后是包含催化金屬蛋白酶結構域、去整合素樣結構域、血小板反應蛋白1型（TSPl)模體、富含半脫氨酸的和間隔區(qū)結構域、7個另外的TSPl重復單元和2個CUB結構域的成熟多膚的結構特征組成。由閉合的圈標記十個可能的N-糖基化位點。[0062]圖27.采用不同緩沖劑配制的ADAMTS13組合物的流體力學直徑，如通過動態(tài)光散射分析值L巧測定的。[0063]圖28.剪切力對重組人ADAMTS13的影響，如通過動態(tài)光散射分析值L巧測定的。[0064]圖29.重組人ADAMTS13的凍融穩(wěn)定性，如通過FRETS活性測定的。[0065]圖30.重組人ADAMTS13的凍融穩(wěn)定性，如通過動態(tài)光散射分析值L巧測定的。[0066]圖31.凍干的重組人ADAMTS13的光穩(wěn)定性，如通過SE-HPLC測定的。[0067]圖32.液體和凍干的重組人ADAMTS13的光穩(wěn)定性，如通過動態(tài)光散射分析值LS)測定的。[0068]圖33.液體和凍干的重組人ADAMTS13的光穩(wěn)定性，如通過FRETS活性測定的。[0069]圖34.巧和鋒對重組人ADAMTS13的FRETS活性的影響。[0070]圖35.鹽和糖含量對凍干的重組人ADAMTS13制劑的低聚狀態(tài)的影響，如通過SE-HPLC測定的。每種制劑的糖含量應當Wg/L報告，而不是摩爾濃度（例如，20mM=20g/L)。[0071]圖36.通過對根據表15配制的重組人ADAMTS13的凍干產生的凍干餅。[0072]圖37.重組人ADAMTS13的低聚狀態(tài)的動態(tài)光散射值L巧分析，所述重組人ADAMTS13采用標準的3天凍干程序凍干、在（上圖）4°C下；（中圖）3(TC下；和（下圖）4(TC下儲存6個月。[0073]圖38.重組人ADAMTS13的低聚狀態(tài)的動態(tài)光散射值L巧分析，所述重組人ADAMTS13采用延長的10天凍干程序凍干、在（上圖）4C下；（中圖）3(TC下；和（下圖）4(TC下儲存6個月。[0074]圖39.重組人ADAMTS13的低聚狀態(tài)的動態(tài)光散射值L巧分析，所述重組人ADAMTS13是在4°C、3(rC和4(TC下儲存之后W不同蛋白濃度配制的。[00巧]發(fā)明詳述[0076]I.引言[0077]ADAMTS13是一種血漿金屬蛋白酶，其切割vonWillebrand因子（VWF)多聚體并向下調節(jié)它們在血小板聚集中的活性。血栓性血小板減少性紫薇O(jiān)T巧是與異乎尋常的大的、止血過度的vonWillebrand因子（VW巧相關的嚴重疾病W及ADAMTS-13的嚴重缺乏。已開發(fā)了一種重組ADAMTS13產品候選者作為治療ADAMTS13缺乏導致的TTP的重組蛋白替代療法（Plaimauer和Scheiflinger,SeminHematol.2004Jan;41(1):24-33;PlaimauerB等人，F.Blood.2002Nov15;100(10):3626-32.Epub2002化112;和化unoK等人，J!'虹omb化emost.2005May;3(5):1064-73,為了所有目的將該公開內容全部通過引用W其整體特別并入本文。）[0078]本發(fā)明部分基于對純化的ADAMTS蛋白的液體和凍干的制劑具有滿足由人用藥物注冊技術要求國際協(xié)調會（InternationalConferenceonHarmonisationofTechnicalRequirementsofPharmaceuticalsforHumanUse)(ICHGuideline,PHARMACEUTICALDEVELOPMENTQ8巧2),2005)提出的要求的增加的穩(wěn)定性的發(fā)現。[0079]VWF的止血活性高度依賴于多聚體的尺寸。血漿金屬蛋白酶ADAMTS13是被鑒定為生理學調節(jié)VWF的多聚體尺寸的主要蛋白酶。ADAMTS13在VWF的A2結構域中在Tyr1605與Met1606之間切割，得到176kDa和140kDa的典型的切割片段W及在循環(huán)中發(fā)現的較小的VWF多聚體。人ADAMTS13基因包含29個外顯子并并在染色體9q34上跨越約37化。4.7化轉錄主要在肝的星狀細胞中合成，但也在血管內皮細胞和血小板中合成并編碼1427個氨基酸殘基的初級翻譯產物。前體ADAMTS13多膚由信號膚和前膚組成，所述前膚的C末端為用于切割的可能的弗林蛋白酶位點、然后是成熟的VWF-切割蛋白酶的序列。成熟的ADAMTS13多膚（1353個氨基酸殘基）包括特征為所有ADAMTS家組成員的結構特征：reprolysin樣金屬蛋白酶結構域、去整合素樣結構域、中也血小板反應蛋白1型（TSPl)重復單元、具有對整合素相互作用可能重要的RGD模體的富含半脫氨酸的結構域、間隔區(qū)結構域、其后是7個連續(xù)的TSPl重復單元（TSPl/#2-8)與2個CUB結構域的獨特的組合（圖26)。[0080]成熟的ADAMTS13具有約145kDa的計算的分子質量，而純化的血漿衍生的ADAMTS13可能是由于翻譯后修飾而具有約ISOkDa的表觀分子質量，該與目前對在TSPl重復單元中的10個可能的N-糖基化位點和若干0-糖基化位點及一個C-甘露糖基化位點的共有序列一致。ADAMTS13的VWF-蛋白水解活性高度依賴于二價陽離子。在金屬蛋白酶結構域中的活性位點模體包含具有3個組氨酸殘基的高度保守的肥XXHXXGXX皿模體，該組氨酸殘基配位催化的化化離子和預測的巧結合位點，該巧結合位點被提出由Glu83、Asp173、切S281和Asp284配位。ADAMTS13結構域的功能作用主要使用體外測定系統(tǒng)來研究，表明了從金屬蛋白酶至間隔區(qū)結構域的N端區(qū)域對VWF切割是關鍵性的。C端TSPl重復單元和CUB結構域看起來對于VWF底物識別和結合至可能的表面受體如內皮細胞上的CD36是重要的。[0081]蛋白制劑發(fā)展的一個主要結果是鑒別了各個蛋白的滅活通道和聚集或降解通道。在4(TC下在液體制劑中，通過FRETS活性測定觀察到重組人ADAMTS13蛋白在1周內的完全時間依賴的滅活。如本文公開的，發(fā)現該種滅活可W在2mMCa"存在下被減輕。在25C下，FRETS活性在Ca2+存在下不再降低。在4°C下，ADAMTS13的液體制劑活性在Ca2+不存在下穩(wěn)定24周。[0082]此外，發(fā)現在相同凍干的制劑中，當制劑在Ca"不存在下在4(TC下儲存時僅出現輕微的滅活或未出現滅活。在4(TC下添加2mM或4mMCa2+不影響穩(wěn)定性。[0083]因此，本發(fā)明人已發(fā)現在液體制劑（例如，在4(TC下儲存）中的ADAMTS13蛋白的時間依賴的聚集對于酶活性的降解和/或損失是主要的原因。重要地，如由本發(fā)明所提供的，該種聚集可通過凍干和/或通過將Ca"添加至液體制劑中而顯著減少。此外，已發(fā)現在凍干的制劑中添加非離子型表面活性劑（例如，0.05%Tween80)減少ADAMTS13聚集體的形成。而且，發(fā)現一種或多種糖和/或糖醇的存在在凍干期間顯著穩(wěn)定化ADAMTS13并有助于形成改善的凍干餅。[0084]II.定義[0085]如本文中所使用的，"ADAMTS13"或"A13"是指在殘基Tyr1605與Metl606之間切割vonWillebrand因子（VWF)的ADAMTS的金屬蛋白酶（具有血小板反應蛋白I型模體的去整合素和金屬蛋白酶）家族。在本發(fā)明的上下文中，ADAMTS13蛋白包括任何ADAMTS13蛋白，例如來自諸如靈長類的動物、人（NP_620594)、猴、兔、豬、?？馪_610784)、曬齒動物、小鼠（NP_001001322)、大鼠狂P_342396)、倉鼠、沙鼠、犬科動物、貓科動物、青蛙(NP_001083331)、雞狂P_415435)的哺乳動物的ADAMTS13及其生物活性衍生物。還包括具有活性的突變型和變異型ADAMTS13蛋白，如ADAMTS13蛋白的功能片段和融合蛋白。此外，本發(fā)明的ADAMTS13蛋白還可包括促進純化、檢測或兩者的標簽。本文描述的ADAMTS13蛋白還可用治療性部分或適合體外或體內成像的部分進行修飾。[0086]人ADAMTS13蛋白包括但不限于包含GenBank登記號NP_620594的氨基酸序列的多膚或其處理的多膚，例如其中信號膚（氨基酸1至29)和/或前膚（氨基酸30-74)已被除去的多膚。人ADAMTS13的許多天然變異體在本領域中是已知的，并且被本發(fā)明的制劑所涵蓋，其中的一些包括選自W下的突變體；R7W、V88M、冊抓、R102C、R193W、T196I、肥34Q、A250V、R268P、W390C、R398H、Q448E、Q456H、P457L、P475S、C508Y、貼28G、P618A、R625H、I673F、R692C、A732V、E740K、A900V、S903L、C908Y、C951G、G982R、C1024G、A1033T、R109抓、R1095W、R1123C、C1213Y、T1226I、G1239V、和R1336W。此外，ADAMTS13蛋白包括已突變的、例如在非必需氨基酸處具有一種或多種保守突變的天然蛋白和重組蛋白。優(yōu)選地，對于ADAMTS13的酶活性所必需的氨基酸將不發(fā)生突變。該些包括，例如，已知或推測對金屬結合是必需的殘基，例如殘基83、173、224、228、234、281和284,W及在酶的活性位點中發(fā)現的殘基，如殘基225。類似地，在本發(fā)明的上下文中，ADAMTS13蛋白包括交替同種型，例如缺少全長人蛋白的氨基酸275至305和/或1135至1190的同種型。[0087]如本文中所使用的，術語"生物活性的衍生物"是指具有基本上與ADAMTS13相同的生物功能的任何多膚。生物活性衍生物的多膚序列可包括一種或多種氨基酸的缺失、添加和/或替換，所述一種或多種氨基酸的不存在、存在和/或替換分別對多膚的生物活性沒有任何明顯的負面影響。所述多膚的生物活性可通過例如W下來測量；至內皮的血小板粘附的減少或延遲，血小板聚集的減少或延遲，血小板系狀物（plateletstring)的形成的減少或延遲，血栓形成的減少或延遲，血栓生長的減少或延遲，血管閉塞的減少或延遲，vWF的溶蛋白性裂解，血栓癥的瓦解或膚底物的裂解，例如FRETS-VWF73膚化Okame等人，化J化ematol.2005Apr;129(1):93-100)或其變體。[008引同樣地，ADAMTS13蛋白可被進一步修飾，例如通過翻譯后修飾（例如，在選自人殘基142、146、552、579、614、667、707、828、1235、1354或任何其它天然或設計修飾的位點的一種或多種氨基酸處的糖基化）或通過離體化學修飾或酶促修飾，包括但不限于糖基化、通過水溶性聚合物的修飾（例如，PEG化、唾液酸化作用、肥S化等）、標記及類似修飾。[0089]如本文中所使用的，"一個ADAMTS13活性單位"被定義為Iml混合的正常人血漿的活性的量，無論所使用的測定是什么。例如，一個ADAMTS13FRETS-VWF73活性單位是切割與被Iml的混合正常人血漿切割的FRETS-VWF73底物的量相同的量的FRETS-VWF73底物所需的活性的量化okame等人，BrJ化ematol.2005Apr;129(1):93-100)。[0090]如本文中所使用的，"ADAMTS13"和"生物活性衍生物"分別還包括經重組DNA技術獲得的多膚。重組ADAMTS13("rADAMTS13")，例如重組人ADAMTS13("r-hu-ADAMTS13")，可通過本領域已知的任何方法產生。一個具體的實例在WO02/42441中公開，其關于產生重組ADAMTS13的方法在此通過引用并入。該可包括用于W下的本領域已知的任何方法：(i)通過基因工程產生重組DNA，如通過RNA的逆轉錄和/或DNA的擴增，（ii)通過轉染將重組DNA引入原核或真核細胞，即通過電穿孔或顯微注射，（iii)培養(yǎng)所述轉化細胞，例如W連續(xù)方式或分批方式，（iv)表達ADAMTS13,例如在必要時或在誘導時，W及（V)分離所述ADAMTS13,例如從培養(yǎng)基中或通過收獲轉化細胞，目的是（Vi)獲得基本上純化的重組ADAMTS13,例如通過陰離子交換色譜法或親合色譜法。術語"生物活性衍生物"還包括嵌合分子，例如與Ig結合的ADAMTS13(或其生物活性衍生物），目的是改善生物學/藥學性質，例如在哺乳動物、特別是人的循環(huán)系統(tǒng)中的ADAMTS13的半衰期。Ig能夠還具有結合至任選地突變的化受體的位點。[0091]如本文中所使用的，術語"血栓"血凝塊，特別是含血小板的血凝塊、微血栓和/或栓子。所述血栓可附著于動脈或靜脈血管或不附著，并可部分地或完全地阻塞動脈或靜脈血管的血流。[0092]如本文中所使用的，術語"維生素B3"、"煙堿"、"煙醜胺"、"尼亞新"和"煙酸"可互換地用于指維生素的B3家族的任何成員。[0093]如本文中所使用的，"治療有效的量或劑量"或"足夠的量或劑量"是指對于所施用于的對象產生效果的劑量。精確的劑量將取決于治療的目的，并且通過本領域技術人員使用已知技術將是可確定的（參見，例如，Lieberman,化armaceuticalDosageForms(第1-3卷，1992)；Lloyd,TheArt,ScienceandTechnologyofPharmaceuticalCompounding(1999);Pickar,DosageCalculations(1999)；和Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,第20片反，2003，Gennaro編牽茸，Lippincott,Williams&Wilkins)。[0094]如本文中所使用的，鹽的"生理濃度"是指在約IOOmM和約200mM之間的藥學上可接受的鹽的鹽濃度。藥學上可接受的鹽的非限制性實例包括但不限于氯化軸和氯化鐘、己酸軸和己酸鐘、巧樣酸軸和巧樣酸鐘、磯酸軸和磯酸鐘。[0095]如本文中所使用的，鹽的"亞生理濃度"是指小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽的鹽濃度。在優(yōu)選實施方案中，鹽的亞生理濃度為小于約SOmM的藥用鹽。在另一個優(yōu)選實施方案中，鹽的亞生理濃度為小于約60mM的藥用鹽。[0096]如本文中所使用的，術語"約"是指與指定值相差正或負10%的大致范圍。例如，措辭"約20%"涵蓋18-22%的范圍。如本文中所使用的，約還包括精確量。因此，"約20%"是指"約20%"且也指"20%"。[0097]如本文中所使用的，"儲存"是指制劑在制成后不立即施用于受治療者，而是在使用前在特定條件（例如特定溫度等等）下保持一段時間。例如，在施用于受治療者之前，液體或凍干的制劑可在各種溫度下如冷凍的溫度（(TC-IOC)或室溫（例如高達32C的溫度）下保持數天、數周、數月或數年。[0098]如本文中所使用的，術語"化學成分確定的培養(yǎng)基"是指其中所有成分的身份和濃度都是已知的合成生長培養(yǎng)基?；瘜W成分確定的培養(yǎng)基不包含細菌、酵母、動物或植物提取物，雖然它們可W包括或不包括個別植物或動物源性成分（例如，蛋白質、多膚等）。商購可得的化學成分確定的培養(yǎng)基的非限定性實例包括各種EX-CELL瑕培養(yǎng)基（SAFCBiosciences,Inc)、各種達爾伯克改良伊格爾（DM巧培養(yǎng)基（Sigma-Al化ichCo;SAFCBiosciences,Inc)、Ham'S營養(yǎng)培養(yǎng)基（Sigma-AldrichCo;SAFCBiosciences,Inc)等。制備化學成分確定的培養(yǎng)基的方法在本領域中，例如在第6,171，825和6,936,441號美國專利、W02007/077217W及第2008/0009040和2007/0212770號專利申請公布（為了所有目的將所述專利的公開內容通過引用整體并入本文）中是已知的。[0099]如本文中所使用的，術語"不含寡膚的培養(yǎng)基"是指不包含寡膚例如衍生自蛋白質水解物的寡膚的不含蛋白質的培養(yǎng)基。在一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有20或更多個氨基酸的寡膚。在本發(fā)明的一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有15或更多個氨基酸的寡膚。在本發(fā)明的另一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有10個或更多個氨基酸的寡膚。在一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有7個或更多個氨基酸的寡膚。在另一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有5個或更多個氨基酸的寡膚。在另一個實施方案中，培養(yǎng)基不包含具有3個或更多個氨基酸的寡膚。根據本發(fā)明的其它實施方案，培養(yǎng)基不包含具有2個或更多個氨基酸的寡膚。制備不含寡膚的培養(yǎng)基的方法在本領域中，例如在第6,171，825和6,936,441號美國專利、WO2007/077217W及第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布（為了所有目的將所述專利的公開內容通過引用整體并入本文）中是已知的。[0100]如本文中所使用的，術語"無血清培養(yǎng)基"是指未補充有動物血清的培養(yǎng)基。雖然許多時候無血清培養(yǎng)基是化學成分確定的培養(yǎng)基，但無血清培養(yǎng)基可補充有分離的動物或植物蛋白質或蛋白質級分。制備無血清培養(yǎng)基的方法在本領域中，例如在第6,171，825和6,936,441號美國專利、WO2007/077217W及第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布（為了所有目的將所述專利的公開內容通過引用整體并入本文）中是已知的。[0101]如本文中所使用的，術語"無動物蛋白質培養(yǎng)基"是指未補充有動物血清、蛋白質或蛋白質級分的培養(yǎng)基。雖然許多時候無動物蛋白質培養(yǎng)基是化學成分確定的培養(yǎng)基，但無動物蛋白質培養(yǎng)基可包含植物或酵母水解物。制備無動物蛋白質培養(yǎng)基的方法在本領域中，例如在第6,171，825和6,936,441號美國專利、WO2007/077217W及第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布（為了所有目的將所述專利的公開內容通過引用整體并入本文）中是已知的。[0102]"表達載體"是重組或合成產生的核酸構建體，其具有一系列允許特定核酸在宿主細胞中轉錄的特定核酸元件。表達載體可W是質粒、病毒或核酸片段的部分。通常，表達載體包括有效地連接于啟動子的待轉錄的核酸。[0103]術語"異源"，當用于指核酸的部分時，表示所述核酸包含在自然界中未W相同的彼此關系被發(fā)現的兩個或更多個子序列。例如，所述核酸通常是重組產生的，具有兩個或更多個來自無關基因的序列（它們經排列產生新型功能核酸），例如來自一個來源的啟動子和來自另一個來源的編碼區(qū)。類似地，異源蛋白質表示所述蛋白質包含在自然界中未W相同的彼此關系被發(fā)現的兩個或更多個子序列（例如，融合蛋白）。[0104]"啟動子"被定義為一系列指導核酸轉錄的核酸控制序列。如本文中所使用的，啟動子包括轉錄起始位點附近的必需核酸序列，例如，在聚合酶II型啟動子的情況下，TATA元件。啟動子還任選地包括遠端增強子或阻遏子元件，其可位于遠離轉錄起始位點多達數千堿基對。"組成型"啟動子是在大多數環(huán)境和發(fā)育條件下具有活性的啟動子。"誘導型"啟動子是在環(huán)境或發(fā)育調控下具有活性的啟動子。術語"有效連接的"是指核酸表達控制序列（例如啟動子或一系列轉錄因子結合位點）與第二核酸序列之間的功能連接，其中所述表達控制序列指導對應于所述第二序列的核酸的轉錄。[0105]III.ADAMTS13組合物和制劑[0106]在一個方面，本發(fā)明提供了ADAMTS13(A13)和rADAMTS13(rA13)蛋白的穩(wěn)定化的制劑。在一個實施方案中，本發(fā)明的制劑當在高達至少約4(TC的溫度下儲存至少約6個月時是穩(wěn)定的。在其它實施方案中，本文提供的制劑當儲存在延長的時期時保留顯著的ADAMTS13活性。在其它實施方案中，本發(fā)明的制劑減少或延遲ADAMTS13蛋白的二聚作用、低聚反應和/或聚集。[0107]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含W下的ADAMTS13的制劑：治療有效的量或劑量的ADAMTS13蛋白、亞生理濃度至生理濃度的藥學上可接受的鹽、穩(wěn)定化濃度的一種或多種糖和/或糖醇、非離子型表面活性劑、為制劑提供中性pH的緩沖劑、和任選的巧和/或鋒鹽。一般地，本文提供的穩(wěn)定化的A13制劑適合于藥物施用。在優(yōu)選實施方案中，A13蛋白是人ADAMTS13或其生物活性衍生物或片段。[0108]在某些實施方案中，ADAMTS13(A13)制劑是液體制劑。在其它實施方案中，ADAMTS13制劑是由本文提供的液體制劑凍干的凍干的制劑。[0109]在本文提供的制劑的某些實施方案中，ADAMTS13蛋白是人ADAMTS13〇iA13)或重組人ADAMTS13(rM13)、或其生物活性衍生物或片段。在一個實施方案中，M13的氨基酸序列是GenBank登記號NP_620594的氨基酸序列。在另一個實施方案中，M13的氨基酸序列包含NP_620594的氨基酸75至1427,其天然或保守的變異體，或其生物活性片段。[0110]在某些實施方案中，W在約〇.〇5mg/mL和約lOmg/mL之間的治療有效劑量提供ADAMTS13。在其它實施方案中，ADAMTS13W在約0.Img/mL和約lOmg/mL之間的濃度存在。在其它實施方案中，ADAMTS13W在約0.Img/mL和約5mg/mL之間的濃度存在。在另一個實施方案中，ADAMTS13W在約0.Img/mL和約2mg/mL之間的濃度存在。在其它實施方案中，ADAMTS13可W約0.Olmg/mL、或W約0.02mg/mL、0.03mg/mL、0.04mg/mL、0.05mg/mL、0.06mg/mL、0.07mg/mL、0.08mg/mL、0.09mg/mL、0.lmg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL、0.6mg/mL、0.7mg/mL、0.8mg/mL、0.9mg/mL、l.0mg/mL、l.lmg/mL、l.2mg/mL、l.3mg/mL、l.4mg/mL、l.5mg/mL、l.6mg/mL、l.7mg/mL、l.8mg/mL、l.9mg/mL、2.Omg/mL、2.5mg/mL、3.0mg/mL、3.5mg/mL、4.0mg/mL、4.5mg/mL、5.0mg/mL、5.5mg/mL、6.Omg/mL、6.5mg/mL、7.0mg/mL、7.5mg/mL、8.0mg/mL、8.5mg/mL、9.0mg/mL、9.5mg/mL、10.Omg/mL或更高濃度存在。在一個實施方案中，相對純的ADAMTS13制劑的濃度可通過光譜法（即WA280測量的總蛋白質）或其它容積測定化Ulkdetermination)來測定。在其它實施方案中，ADAMTS13濃度可通過ADAMTS13ELISA測定（例如，mg/mL抗原）來測定。[0111]在其它實施方案中，由本發(fā)明提供的制劑中的ADAMTS13濃度可W酶活性水平來表示。例如，在一個實施方案中，ADAMTS13制劑可包含約10個單位的FRETS-VWF73活性至約10,000個單位的FRETS-VWF73活性或其它合適的A13酶單位aU)。在其它實施方案中，所述制劑可包含約20個單位的FRETS-VWF73(Upvn)活性至約8,000個單位的FRETS-VWF73活性，或約30Uw3至約6,000Upv73、或約40Upv73至約4,000Upv73、或約50Uw3至約3,000Upv73、或約75Ufv73至約2,500Ufv73、或約100Ufv73至約2,000Ufv73、或約200Ufv73至約1，500Uw3或約其它在其中的范圍。在優(yōu)選實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑包含約150至約600Uw3。在某些實施方案中，所述制劑包含約10個單位的FRETS-VWF73活性，或約20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1，000、1，100、1，200、1，300、1，400、1，500、1，600、1，700、1，800、1，900、2,000、2,100、2,200、2,300、2,400、2,500、2,600、2,700、2,800、2,900、3,000、3,100、3,200、3,300、3,400、3,500、3,600、3,700、3,800、3,900、4,000、4,100、4,200、4,300、4,400、4,500、4,600、4,700、4,800、4,900、5,000、5,100、5,200、5,300、5,400、5,500、5,600、5,700、5,800、5,900、6,000、6,100、6,200、6,300、6,400、6,500、6,600、6,700、6,800、6,900、7,000、7,100、7,200、7,300、7,400、7,500、7,600、7,700、7,800、7,900、8,000、8,100、8,200、8,300、8,400、8,500、8,600、8,700、8,800、8,900、9,000、9,100、9,200、9,300、9,400、9,500、9,600、9,700、9,800、9,900、10,000或更多單位的FRETS-VWF73活性。[0112]類似地，在某些實施方案中，ADAMTS13的濃度可表示為酶活性每單位體積，例如，A13酶單位每血(lU/mL)。例如，在一個實施方案中，ADAMTS13制劑可包含約lOIU/mL至約10,000IU/mL。在其它實施方案中，所述制劑可包含約20IU/mL至約8,000IU/mL、或約30IU/血至約6,OOOIU/mL、或約40IU/mL至約4,OOOIU/mL、或約50IU/mL至約3,OOOIU/mL、或約75IU/mL至約2,500IU/mL、或約lOOIU/mL至約2,OOOIU/mL、或約200IU/mL至約1，500IU/mL、或約其它在其中的范圍。在優(yōu)選實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑包含約150IU/血至約600IU/mL。在另一個優(yōu)選實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑包含約lOOIU/mL至約l，000IU/mL。在某些實施方案中，所述制劑包含約lOIU/mL、或約20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1，000、1，100、1，200、1，300、1，400、1，500、1，600、1，700、1，800、1，900、2,000、2,100、2,200、2,300、2,400、2,500、2,600、2,700、2,800、2,900、3,000、3,100、3,200、3,300、3,400、3,500、3,600、3,700、3,800、3,900、4,000、4,100、4,200、4,300、4,400、4,500、4,600、4,700、4,800、4,900、5,000、5,100、5,200、5,300、5,400、5,500、5,600、5,700、5,800、5,900、6,000、6,100、6,200、6,300、6,400、6,500、6,600、6,700、6,800、6,900、7,000、7,100、7,200、7,300、7,400、7,500、7,600、7,700、7,800、7,900、8,000、8,100、8,200、8,300、8,400、8,500、8,600、8,700、8,800、8,900、9,000、9,100、9,200、9,300、9,400、9,500、9,600、9,700、9,800、9,900、10,000或更多的lU/mL。[0113]在某些實施方案中，由本發(fā)明提供的穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑將包含亞生理至生理鹽濃度，例如，OmM至約200mM的藥學上可接受的鹽。在一個實施方案中，ADAMTS13制劑將包含生理濃度的鹽，例如在約IOOmM和約200mM之間的藥學上可接受的鹽。在其它實施方案中，ADAMTS13制劑將包含約OmM、或約5mM、10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM、lOOmM、1lOmM、120mM、130mM、140mM、150mM、160mM、170mM、180mM、190mM、200mM或更多的藥學上可接受的鹽。在優(yōu)選實施方案中，所述鹽是氯化軸或氯化鐘。[0114]有利地，已發(fā)現包含亞生理濃度的藥學上可接受的鹽的ADAMTS13制劑形成具有光滑表面的緊密的凍干餅。此外，發(fā)現與采用生理濃度的鹽制備的制劑相比，ADAMTS13蛋白的低鹽凍干的制劑降低蛋白聚集。因此，在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明提供了包含亞生理濃度的藥學上可接受的鹽的ADAMTS13的低鹽制劑，例如，小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽。在一個實施方案中，本文提供的低鹽ADAMTS13制劑包含小于約IOOmM的藥用鹽。在優(yōu)選實施方案中，本文提供的低鹽ADAMTS13制劑包含小于約SOmM的藥用鹽。在另一個優(yōu)選實施方案中，本文提供的低鹽ADAMTS13制劑包含小于約60mM的藥用鹽（即約OmM和約60mM之間的鹽）。在另一個優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13巧驚U將包含在約30mM和約60mM之間的藥學上可接受的鹽。在其它實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑將包含約OmM、或約5mM、10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、35mM、40mM、45mM、50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM、或IOOmM的藥學上可接受的鹽。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。在優(yōu)選實施方案中，所述鹽是氯化軸或氯化鐘。[0115]已發(fā)現，包含中等水平（即，在約2%和約6%之間）的一種或多種糖和/或糖醇有助于制成具有光滑表面的緊密的凍干餅并且經凍干后促進穩(wěn)定化ADAMTS13。因此，在一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含約2%和約6%之間的一種或多種糖和/或糖醇的ADAMTS13巧驚U。可使用任何糖例如單糖、二糖或多糖、或水溶性的葡聚糖（包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麥芽糖、乳糖、藏糖、葡聚糖、海藻糖、普魯蘭多糖、糊精、環(huán)糊精、可溶性淀粉、輕己基淀粉和駿甲基纖維素。在具體的實施方案中，藏糖或海藻糖被用作糖添加劑。糖醇被定義為具有約4個至約8個碳原子和輕基的姪?？捎糜诒疚奶峁┑腁DAMTS13制劑的糖醇的非限制性實例包括甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、衛(wèi)茅醇、木糖醇和阿拉伯糖醇。在一個實施方案中，甘露醇被用作糖醇添加劑。在優(yōu)選實施方案中，ADAMTS13制劑包含糖和糖醇添加劑兩者。[0116]糖和糖醇可單獨使用或組合使用。在某些實施方案中，糖、糖醇或其組合將W約0.5%至約7%的濃度存在于制劑中。在一個實施方案中，所述制劑中的糖和/或糖醇含量將為約0.5%至約5%。在某些實施方案中，糖、糖醇或其組合將W約1%至約5%的濃度存在。在優(yōu)選實施方案中，糖、糖醇或其組合將W約2%至約6%的濃度存在。在另一個優(yōu)選實施方案中，糖、糖醇或其組合將W約3%至約5%的濃度存在。在某些實施方案中，最終濃度可W是約0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6.0%、6.5%、或7.0%的糖、糖醇或其組合。在具體的實施方案中，本文提供的制劑可包含約0.5%至約5.0%濃度的糖和約0.5%至約5.0%濃度的糖醇?？墒褂锰呛吞谴紳舛鹊娜我饨M合，例如^約0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6.0%、6.5%、或7.0%的濃度存在的糖和W約0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6.0%、6.5%、或7.0%的濃度存在的糖醇。[0117]有利地，還發(fā)現包含非離子型表面活性劑顯著減少ADAMTS13制劑的聚集。因此，在一個實施方案中，提供了包含穩(wěn)定化濃度的非離子型洗涂劑的ADAMTS13制劑。可用于本發(fā)明的制劑中的藥學上可接受的非離子型表面活性劑在藥學科學領域中是公知的，并且包括但不限于聚山梨醇醋SO(TweenSO)、聚山梨醇醋20(Tween20)和各種泊洛沙姆或普朗尼克，包括PluronicF-68和BRIJ35或其混合物。在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的藥物制劑中使用的非離子型表面活性劑是聚山梨醇醋80。在某些實施方案中，表面活性劑可W約0.001%和約0.2%之間的濃度用于本文提供的制劑中。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑W約0.Ol%和約0.1%之間的濃度使用。在另一個優(yōu)選實施方案中，表面活性劑W約0.05%的濃度使用。例如，在某些實施方案中，所述制劑可包含W約0.OOl%、〇.005%、0.Ol%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.125%、0.15%、0.175%、0.2%的濃度或類似濃度的非離子型表面活性劑。[0118]此外，發(fā)現ADAMTS13制劑在W約6.5至約7.5的中性抑下配制時被穩(wěn)定化。因此，在某些實施方案中，提供了ADAMTS13制劑，其包含適合于將制劑維持在中性抑的緩沖齊U。藥學上可接受的緩沖劑是本領域眾所周知的，并且包括但不限于磯酸鹽緩沖液、組氨酸、巧樣酸軸、肥陽S、Tris、N，N-二（輕己基）甘氨酸炬icine)、甘氨酸、N-甘氨醜甘氨酸、己酸軸、碳酸軸、雙甘氨膚、賴氨酸、精氨酸、磯酸軸及其混合物。在優(yōu)選實施方案中，緩沖液選自組氨酸、磯酸鹽緩沖液、肥PES和巧樣酸軸。在一個優(yōu)選實施方案中，緩沖液是組氨酸或HEPES。在具體實施方案中，緩沖液是組氨酸。在另一具體實施方案中，緩沖液是HEPES。在一個實施方案中，本文提供的制劑的抑在約6.5和約9.O之間。在某些實施方案中，所述制劑的抑為約6.5或約6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、或9.0。在優(yōu)選實施方案中，A13制劑的抑在約6.0和約8.0之間。在更優(yōu)選的實施方案中，A13制劑的抑在約6.5和約7.5之間。在具體的實施方案中，A13制劑的抑在約6.5和約7.5之間。在具體的實施方案中，A13制劑的抑為約7.0。在另一具體實施方案中，A13制劑的抑為7.0+0.2。[0119]本文還證實了包含巧進一步穩(wěn)定化ADAMTS13的制劑。因此，在某些實施方案中，提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧驚U，其包含0.5mM至約20mM的巧（例如，氯化巧）。任何藥學上可接受的巧鹽都可用于本文提供的制劑?？墒褂玫那甥}的非限制性實例包括，例如，CaCl2、CaC〇3、Ca咕也〇7)2、化3(P〇4)2、化(Cl化5〇2)2及類似物。在一個實施方案中，巧W約0.SmM至約IOmM的濃度存在于本發(fā)明的ADAMTS13制劑中。在另一個實施方案中，巧W約2mM和約SmM之間的濃度存在于ADAMTS13制劑中。在優(yōu)選實施方案中，巧W約2mM至約4mM的濃度存在于ADAMTS13制劑中。在某些實施方案中，巧的濃度為約0.5mM或約lmM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM、lOmM、llmM、12mM、13mM、14mM>15mM、16mM、17mM、18mM、19mM、或20mM。在具體的實施方案中，巧的濃度為約2mM。在另一個優(yōu)選實施方案中，巧的濃度為約3mM。在另一個優(yōu)選實施方案中，巧的濃度為約4mM。[0120]類似地，已發(fā)現在某些條件下，包含鋒進一步穩(wěn)定化如本文提供的ADAMTS13制齊U。例如，圖34顯示了包含約2yM至約10yM鋒進一步穩(wěn)定化含巧的ADAMTS13制劑。任何藥學上可接受的鋒鹽都可用于本文提供的制劑中?？墒褂玫匿h鹽的非限制性實例包括，例如，ZnS〇4?7&0、aiS〇3?2&0、Zn3(P〇4)2和佑品〇7)22叫?2&0及類似物。在一個實施方案中，ZnS〇4被用于本文提供的ADAMTS13制劑中。在某些實施方案中，鋒W約0.SyM至約20.0yM的濃度存在于本發(fā)明的ADAMTS13制劑中。在優(yōu)選實施方案中，鋒W約0.5yM至約10.0yM之間的濃度包含在ADAMTS13制劑中。在某些實施方案中，鋒的濃度為約0.5yM或約1yM、2yM、3yM、4yM、5yM、6yM、7yM、8yM、9yM、或10yM。[0121]在某些實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑還可包含一種或多種藥學上可接受的賦形劑、載體和/或稀釋劑。此外，本文提供的制劑還可包含其它藥用劑（medicinalagent)、載體、佐劑、稀釋劑、組織促滲劑、增溶劑及類似物。用于制備用于藥物施用的組合物和制劑的方法是本領域技術人員公知的（參見，例如，REMINGTON'SPHARMACEUTICALSCIENCES,第18版，MackPublishingCo.，Easton,PA(1990))。[0122]在一個實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑將具有在約200m0smo1/L和約400m0smol/L之間的范圍的張力（tonocity)、或在約250m0smol/L和約350m0smol/L之間的范圍的張力。在某些實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑將具有，例如，約200m0smol/L、或約210m0smol/L、220m0smol/L、230m0smol/L、240m0smol/L、250m0smol/L、260m0smol/L>270m0smol/L>280m0smol/L>290m0smol/L>SOOmOsmo1/L>3IOmOsmo1/L>320m0smol/L>330m0smol/L、340m0smol/L、350m0smol/L、360m0smol/L、370m0smol/L、380m0smol/L、39〇mOsmol/L、或400m0smol/L的張力。[0123]可用于本文提供的制劑中的張度劑（tonocityagent)的實例包括但不限于氯化軸、右旋糖、藏糖、木糖醇、果糖、甘油、山梨醇、甘露醇、海藻糖、氯化鐘、甘露糖、氯化巧、氯化鎮(zhèn)、其它無機鹽、其它糖、其它糖醇及其組合。在某些實施方案中，ADAMTS13制劑可包含至少一種張度劑或至少2、3、4、5或更多種張度劑。[0124]本文提供的ADAMTS13制劑可配制用于經已知方法施用，例如靜脈內施用，例如作為快速推注或通過經一段時期的連續(xù)輸注，通過肌肉內、腹膜內、腦脊髓內、皮下、關節(jié)內、滑膜內、銷內、口腔、局部或吸入途徑。在某些實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑可被系統(tǒng)施用或局部施用。系統(tǒng)施用包括但不限于；口腔、真皮下、腹膜內、皮下、經鼻、舌下或直腸途徑的施用。局部施用包括但不限于；局部、皮下、肌肉內和腹膜內途徑的施用。[01巧]在本發(fā)明的一方面，提供了單體的ADAMTS13蛋白的組合物。在某些實施方案中，單體的ADAMTS13蛋白的組合物基本上不含聚集的ADAMTS13、二聚的ADAMTS13或聚集的和二聚的ADAMTS13兩者。在某些實施方案中，單體的組合物比包含聚集的和/或二聚的ADAMTS13蛋白的類似的組合物具有較高的比活性。在具體的實施方案中，單體的ADAMTS13組合物通過包括凝膠過濾或尺寸排阻色譜法的方法產生。在一個具體的實施方案中，ADAMTS13蛋白是人ADAMTS13〇iA13)或重組人ADAMTS13(rM13)或其生物活性衍生物或片段。[0126]在另一方面，提供了單體的ADAMTS13組合物的制劑。在一個實施方案中，該制劑是單體的ADAMTS13蛋白的藥學上可接受的制劑。在某些實施方案中，該制劑基本上不含聚集的ADAMTS13、二聚的ADAMTS13或聚集的和二聚的ADAMTS13兩者。在某些實施方案中，單體的組合物比包含聚集的和/或二聚的ADAMTS13蛋白的類似的組合物具有較高的比活性。在具體的實施方案中，單體的ADAMTS13制劑通過包括凝膠過濾或尺寸排阻色譜法的方法產生。在一個具體的實施方案中，在制劑中的ADAMTS13蛋白是人ADAMTS13〇iA13)或重組人ADAMTS13(rM13)或其生物活性衍生物或片段。在某些實施方案中，單體的ADAMTS13蛋白根據本文提供的制劑配制。[0127]在實施方案中，本發(fā)明提供了包含W下的ADAMTS13的制劑：約0.05mg/ml至約10.Omg/ml的ADAMTS13蛋白、約OmM至約200mM的藥學上可接受的鹽、糖和/或糖醇、非離子型表面活性劑和緩沖劑。在某些實施方案中，所述制劑還可包含巧和/或鋒。在其它實施方案中，所述制劑可被緩沖在抑約6.5和9.0之間。在某些實施方案中，A13制劑適合于藥物施用。[012引在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑，包含；0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[0129]在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑被提供為包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑，包含約50個單位每血和約1000個單位每血之間的ADAMTS13活性。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[0130]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;OmM至200mM的藥學上可接受的鹽；ImM至IOmM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[013。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；約2%和約6%之間的糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在某些實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。在具體的實施方案中，藏糖和甘露醇的混合物由約1%藏糖和約3%甘露糖組成。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的觀優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[013引在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；約0.Ol%和0.1%之間的非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在某些實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68、BRIJ35及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。在具體的實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的巧，優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[013引在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑，其中緩沖劑是組氨酸或肥PES。在某些實施方案中，緩沖劑W約5mM和約IOOmM之間的濃度存在，優(yōu)選地W約IOmM和約50mM之間的濃度存在。在另一個優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的巧，優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[0134]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在某些實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的觀優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。[01巧]在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;0至60mMNaCl;2mM至4mM的巧；2%至4%甘露醇；0.5%至2%的藏糖；0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和IOmM至50mM組氨酸（pH7.0+0.。。在一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。[0136]在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13制劑被提供為包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和7.5之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0137]在一個實施方案中，穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13制劑被提供為包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑，包含約50個單位每血和約1000個單位每血之間的ADAMTS13活性。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0138]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；ImM至IOmM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0139]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；約2%和約6%之間的糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在某些實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。在具體的實施方案中，藏糖和甘露醇的混合物由約1%藏糖和約3%甘露醇組成。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的巧，優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0140]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；約0.01%和0.1%之間的非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖劑。在某些實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68、BRIJ35及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。在具體的實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的巧，優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0141]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖齊U，其中緩沖劑是組氨酸或肥PES。在某些實施方案中，緩沖劑W約5mM和約IOOmM之間的濃度存在，優(yōu)選地W約IOmM和約50mM之間的濃度存在。在另一個優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的觀優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0142]在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧Ij劑，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的藥學上可接受的鹽；0.5mM至20mM的巧；糖和/或糖醇；非離子型表面活性劑；和用于維持抑在約6.5和約7.5之間的緩沖齊U。在某些實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。在某些實施方案中，所述制劑包含約ImM和約IOmM之間的巧，優(yōu)選地約2mM和約4mM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，藥學上可接受的鹽是氯化軸或氯化鐘。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[014引在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13巧驚U，其包含0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;小于約IOOmM的化〔1;2mM至4mM的巧；2%至4%的甘露醇；0.5%至2%的藏糖；0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。在一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。在優(yōu)選實施方案中，低鹽ADAMTS13制劑是凍干的制劑。[0144]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)巧驚U，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTSlS;化)OmM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)0.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和(f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTSISo[0145]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0146]在穩(wěn)定化的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0147]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性齊U。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0148]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0149]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0150]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0151]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)巧驚U，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（目P，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)OmM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0152]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0153]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0154]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[015引在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0156]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.SyM和約20yM之間的鋒。[0157]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;(b)0至60mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0158]在相關的實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)巧Ij劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0159]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0160]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0161]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[016引在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0163]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。[0164]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至20〇1111的化〔1;似21111至41111的巧；（(1)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0165]在相關的實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0166]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0167]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0168]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0169]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0170]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20UM之間的鋒。[0171]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至60mM的化Cl;(c)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)lOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0172]IV.ADAMTS13制劑的穩(wěn)定性[0173]在某些實施方案中，本文提供的ADAMTS13制劑在儲存在某些溫度時，例如約-8(TC、-20°C、4°C、18°C、室溫、25°C、30°C、35°C、37°C、40°C或更高時，可穩(wěn)定延長的時期。在某些實施方案中，延長的時期為至少約一周。在其它實施方案中，延長的時期可包括至少約2周，或至少約3周，或至少約1個月，或至少約2個月，或至少約3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、14、16或18個月。在其它實施方案中，本發(fā)明的制劑可穩(wěn)定至少約2、3、4、5或更多年。[0174]在本發(fā)明的某些實施方案中，穩(wěn)定性可通過制劑中A13或rA13蛋白的一種或多種生物物理和/或酶性質來測定?？捎糜谠u價穩(wěn)定性的性質的非限制性實例包括酶活性、比活性、蛋白的單分散性或多分散性的程度、蛋白的二聚、寡聚或聚集的程度、蛋白的解折疊程度。[01巧]本領域技術人員將容易了解可用于評價ADAMTS13制劑的穩(wěn)定性的其它穩(wěn)定性測量方法，包括但不限于，凝膠過濾、動態(tài)或靜態(tài)光散射、分析超速離也、rp-HPLC、離子交換色譜法、傅里葉變換紅外光譜法、量熱法、差示掃描量熱法、NMR光譜法、質譜法、小角度X-射線衍射（SA幻、聚丙帰醜胺凝膠電泳及類似方法。[0176]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了在儲存延長的時期后保留至少約50%的總ADAMTS13活性的A13或rA13的制劑。在其它實施方案中，提供在儲存延長的時期后保留至少約60%，或至少約70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、或100%的總ADAMTS13活性的制劑。[0177]在另一個實施方案中，提供在儲存延長的時期后維持至少約50%的ADAMTS13比活性的制劑。在其它實施方案中，提供在儲存延長的時期后保留至少約60%，或至少約70%'80%'90%'91%'92%'93%'94%'95%'96%'97%'98%'99%或100%的ADAMTS13比活性的制劑。[0178]在其它實施方案中，本發(fā)明的制劑在儲存延長的時期后將具有至少約600U的FRETS-VWF73活性每mgADAMTS13蛋白的比活性。在其它實施方案中，本文提供的制劑在儲存延長的時期后將具有至少約700U/mgA13,或至少約800U/mg、900U/mg、lOOOU/mg、IlOOU/mg、1200U/mg、1300U/mg、1400U/mg、1500U/mg或更高的比活性。[0179]在一個實施方案中，本文提供的A13制劑在儲存延長的時期后將具有小于約50%的多分散性，如通過動態(tài)光散射分析測定的。在其它實施方案中，A13制劑在儲存延長的時期后將具有小于約45%，或小于約40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%的多分散性，如通過動態(tài)光散射分析測定的。[0180]在本發(fā)明的另一個實施方案中，本文提供的A13制劑在儲存延長的時期后將具有由至少約50%的A13單體組成的A13蛋白種群（proteinpopulation)。在其它實施方案中，所述制劑可具有至少約60%的A13單體，或至少約70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高百分比的A13單體。[0181]V.ADAMTS13表達和純化[0182]在某些實施方案中，用于本文提供的制劑中的ADAMTS13蛋白可根據先前公開的方法來表達、制備或純化，例如US6,926,894、US2005/0266528、US2007/0015703、US專利申請序列號12/437,384、U.S.專利申請序列號12/847,999、和WO2002/42441，其全部為了所有目的通過引用整體并入本文。[0183]A.宿主細胞和載體[0184]可通過在任何適當的原核或真核宿主系統(tǒng)中表達來產生重組ADAMTS蛋白。真核細胞的實例包括但不限于哺乳動物細胞例如C冊、COS、肥K293、BHK、SK-H巧和化pG2;昆蟲細胞，例如SF9細胞、SF21細胞、S2細胞和化曲Five細胞；W及酵母細胞，例如酵母屬(Saccharomyces)或裂殖酵母屬（Schizosaccharomyces)細胞。在一個實施方案中，所述ADAMTS蛋白可在細菌細胞、酵母細胞、昆蟲細胞、鳥類細胞、哺乳動物細胞等中表達。例如，在人細胞系、倉鼠細胞系或鼠細胞系中表達。在一個具體實施方案中，所述細胞系是CH0、BHK或肥K細胞系。在優(yōu)選實施方案中，所述細胞系是C冊細胞系。[018引在一個實施方案中，所述細胞可W是可W優(yōu)選在制造工藝（即，至少1升）中培養(yǎng)(W產生期望的ADAMTS蛋白例如ADAMTS13)的任何哺乳動物細胞。實例包括被SV40轉化的猴腎CVl細胞系（C0S-7，ATCCC化1651);人胚胎腎細胞系（經亞克隆W在息浮培養(yǎng)液中生長的293或293細胞，Gr址am等人，J.GenVirol.,36:59(1977));幼倉鼠腎細胞炬HK，ATCC(XL10);中國倉鼠卵巢細胞/-DHFR，例如DUKX-Bll亞克?。–H0,化iaub和Chasin，Proc.化11.4。3(1.5。1.口54,77:4216(1980));小鼠塞爾巧利細胞0￥4，]\&1地61'，81〇1.1?巧1'〇(1，23:243-251(1980));猴腎細胞（CV1ATCCCCL70);非洲綠猴腎細胞（VER0-76,ATCCC化-1587);人宮頸癌細胞OfeLa,ATCCC化2);犬腎細胞（MDCK，ATCCC化34);水牛大鼠肝細胞炬化3A，ATCCC化1442);人肺細胞（W138,ATCC(XL75);人肝細胞OfepG2,皿8065);小鼠乳腺癌（MMT060562，ATCC(XL51);TRI細胞（Mather等人，AnnalsN.Y.Acad.Sci.,383:44-68(1982));MRC5細胞；FS4細胞和人肝細胞瘤細胞系OfepG2)。優(yōu)選，所述細胞系是曬齒類動物細胞系，優(yōu)選倉鼠細胞系例如CHO或BHK。[0186]許多種載體可用于表達ADAMTS蛋白（例如,ADAMTS13)并且可選自真核和原核表達載體。在某些實施方案中，包括用于表達ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的質粒載體。通常，將包含復制子和來源于與宿主細胞相容的物種的控制序列的質粒載體與此類宿主結合使用。載體可具有復制位點W及能夠提供轉化的細胞中的表型選擇的標記序列。質?？砂幋a與一個或多個控制序列例如啟動子有效連接的ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的核巧酸序列。[0187]制備表達重組ADAMTS蛋白的穩(wěn)定CHO細胞克隆的方法優(yōu)選如下。用DHFR表達載體轉染DHFR缺陷CHO細胞系DUKX-B11，W允許相關重組蛋白質表達，基本上如第5,250,421號美國專利化aufman等人，GeneticsInstitute,Inc.)中所描述的。通過在不含次黃嘿嶺/胸巧（HT)的培養(yǎng)基中生長進行選擇，通過在遞增濃度的氨甲蝶嶺中增殖細胞來實現編碼重組ADAMTS蛋白和DHFR基因的表達的相關區(qū)域的擴增。適當時，可使CHO細胞系適應在無血清和/或蛋白質的培養(yǎng)基中生長，基本上如US6,100,061(Reiter等人，ImmunoAktiengesellschaft)中所描述的。[0188]在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定的肥K293細胞可通過用包含潮霉素選擇標記的構建體轉染，然后利用抗生素抗性選擇轉化體來制備。[0189]某些病毒通過受體介導的內吞作用感染細胞或進入細胞W及整合入宿主細胞基因組并且穩(wěn)定且高效地表達病毒基因的能力，已使它們成為用于將外源核酸轉移進入細胞(例如，哺乳動物細胞）的吸引人的候選者。因此，在某些實施方案中，將病毒載體用于將編碼ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的核巧酸序列引入宿主細胞W進行表達。病毒載體可包含編碼與一個或多個控制序列例如啟動子有效連接的ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的核巧酸序列?？蛇x擇地，病毒載體可W不包含控制序列，取而代之依賴于宿主細胞中的控制序列來驅動ADAMTS蛋白的表達?？捎糜谶f送核酸的病毒載體的非限定性實例包括腺病毒載體、AAV載體和逆轉錄病毒載體。[0190]在一個實施方案中，腺病毒載體包括包含足W支持構建體的包裝和最終表達已被克隆入其中的ADAMTS構建體的腺病毒序列的那些構建體。腺病毒載體允許引入高達7化的外源序列（Grunhaus等人，SeminarinVirology,200(2):535-546,1992))。[0191]在另一個實施方案中，腺伴隨病毒（AAV)可被用于將編碼ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的核巧酸序列引入宿主細胞W進行表達。AAV系統(tǒng)先前已被描述并且在本領域通常是公知的化elleher和Vos,Biotechniques,17(6):1110-7,1994;Cotten等人，Proc化1:1AcadSci1154,89(13):6094-6098,1992:011^161,^1:Immun,13(2-3):141-64,1994;Muz;yczka，QirrTopMicrobiolImmunol,158:97-129,1992)。關于rAAV載體的產生和用途的詳細內容描述于例如第5,139,941和4,797,368號美國專利（為了所有目的將每一個專利通過引用整體并入本文）中。[0192]在一個實施方案中，逆轉錄病毒表達載體可用于將編碼ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS13)的核巧酸序列引入宿主細胞W進行表達。該些系統(tǒng)先前已被描述并且在本領域通常是公知的（Mann等人，Cell,33:153-159,1983;Nicolas和Rubinstein,In:Vectors:Asurveyofmolecularcloningvectorsandtheiruses,Rodriguez和Denhar化編，Stoneham:Butterworth,pp.494-513,1988;Temin,In:GeneTransfer,Kucherlapati(ed.),NewYork:PlenumPress,pp.149-188,1986)〇在具體實施方案中，所述逆轉錄病毒載體是慢病毒載體（參見，例如，化Idini等人，Science,272巧259):263-267,1996;Zuffer巧等人，P'JatBiotechnol,15巧）：871-875,1997;Blomer等人，JVirol.,71(9):6641-6649,1997;美國專利No.6,013,516和5,994,136)。[019引用于原核表達的載體的非限定性實例包括質粒例如pRSET、祀T、pBAD等，其中用于原核表達載體的啟動子包括lac、trc、trp、recA、araBAD等。用于真核表達的載體的實例包括；（i)對于酵母中的表達，載體例如pAO、pPIC、pYES、pMET，使用啟動子例如AOXl、GAP、GALUAUGl等；（U)對于昆蟲細胞中的表達，載體例如pMT、pAc5、pIB、pMIB、pBAC等，使用啟動子例如？山910、11\405、化162、甜64、90化等，和（111)對于哺乳動物細胞中的表達，載體例如pS化、pCMV、pRc/RSV、PCDNA3、地PV等，和來源于病毒系統(tǒng)例如痘苗病毒、腺伴隨病毒、瘡疹病毒、逆轉錄病毒等的載體，使用啟動子例如CMV、SV40、EF-1、^C、RSV、ADV、BPV和目-?肌動蛋白。[0194]在某些實施方案中，ADAMTS13的細胞培養(yǎng)表達可包括使用微載體。本發(fā)明提供了，除其它方面W外，大規(guī)模ADAMTS蛋白表達的方法。在某些實施方案中，可在適合于提供高容積-比培養(yǎng)表面積W獲得高細胞密度和蛋白質表達的條件下在大生物反應器中進行所述實施方案的細胞培養(yǎng)。提供此類生長條件的一個方法是在攬拌的罐生物反應器中使用微載體來進行細胞培養(yǎng)。在另一個實施方案中，該些生長要求通過使用息浮細胞培養(yǎng)來滿足。[0195]B.培養(yǎng)方法[0196]在某些實施方案中，ADAMTS13表達可包括使用在分批或連續(xù)操作模式下操作的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。例如，當使用分批細胞培養(yǎng)時，可在單批、分批補料或重復分批模式下操作它們。同樣地，可在例如灌注、恒濁或恒化模式下操作連續(xù)細胞培養(yǎng)?？稍谙⒏』蚋街鴹l件下進行分批和連續(xù)細胞培養(yǎng)。當在息浮條件下操作時，可游離地息浮細胞，將其混合在培養(yǎng)基中?？蛇x擇地，在附著條件下，可將細胞與固相例如微載體、多孔微載體、盤載體（diskcarrier)、陶瓷筒（ceramiccartridge)、中空纖維、扁平薄片（flatsheet)、凝膠基質等結合。[0197]分批培養(yǎng)通常是其中將細胞接種物在罐或發(fā)酵罐中培養(yǎng)至最大密度，然后作為單批進行收獲和處理的大規(guī)模細胞培養(yǎng)。分批補料培養(yǎng)，其通常為用新鮮營養(yǎng)物（例如，生長限定基質（growth-limitingsubstrate))或添加劑（例如，產物前體）補充的分批培養(yǎng)。進料溶液通常被高度濃縮W避免生物反應器的稀釋。在重復分批培養(yǎng)中，將細胞置于培養(yǎng)基中并且生長至所需的細胞密度。為了避免衰退期和細胞死亡的發(fā)生，隨后在細胞達到它們的最大濃度之前用完全生長培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物。稀釋的量和頻率變化很大并且取決于細胞系的生長特征和培養(yǎng)方法的方便性?？砂匆笾貜退龇椒ǘ啻危⑶以趥鞔囵B(yǎng)時，除非棄去細胞和培養(yǎng)基，否則隨著每一次稀釋進行，培養(yǎng)物的容積將逐步增加。可通過使反應器具有足夠大的大小來允許在容器內進行稀釋或通過將稀釋的培養(yǎng)物分入幾個容器來處理遞增的體積。該類型的培養(yǎng)的原理是將細胞維持在指數生長狀態(tài)。連續(xù)傳代培養(yǎng)的特征在于培養(yǎng)物的容積總是逐步增加，可存在多次收獲，細胞持續(xù)生長并且只要需要該過程可持續(xù)進行。在某些實施方案中，可在收獲分批培養(yǎng)物的上清液后回收ADAMTS蛋白（例如，ADAMTS1如。[0198]連續(xù)培養(yǎng)可W是通過流入新鮮培養(yǎng)基連續(xù)提供營養(yǎng)物的息浮培養(yǎng)，其中培養(yǎng)容積通常通過廢培養(yǎng)基的伴隨性去除來保持恒定。在恒化和恒濁法中，提取的培養(yǎng)基包含細胞。因此，保留在細胞培養(yǎng)容器中的細胞必須生長至維持穩(wěn)定狀態(tài)。在恒化法中，生長速率通常通過控制稀釋速率即加入新鮮培養(yǎng)的速率來進行控制?？赏ㄟ^改變稀釋速率將培養(yǎng)中細胞的生長速率控制在例如次最大生長速率。相反地，在恒濁法中，設置稀釋速率W允許細胞可在給定的操作條件例如抑和溫度下實現的最大生長速率。[0199]在灌注培養(yǎng)中，通過例如過濾或通過離也方法（該方法導致細胞至培養(yǎng)基的重新引入）使提取的培養(yǎng)基耗盡保留在培養(yǎng)容器中的細胞。然而，通常地用于過濾的膜不保留100%的細胞，因此當提取培養(yǎng)基時，一部分細胞被除去。W極高的生長速率操作灌注培養(yǎng)可W不是至關重要的，因為大部分細胞保留在培養(yǎng)容器中。[0200]攬拌罐反應器系統(tǒng)可用于在息浮或附著模式下操作的分批和連續(xù)細胞培養(yǎng)。通常，可操作攬拌罐反應器系統(tǒng)，如具有任何類型的攬拌器例如Rushton、水翼化y化OfOil)、斜葉（pitchedblade)或marine的任何常規(guī)攬拌罐反應器。[0201]C.培養(yǎng)基[0202]ADAMTS13可在無外源添加的蛋白的培養(yǎng)基中表達。"無蛋白質培養(yǎng)基"和相關術語是指不存在來自對于培養(yǎng)物中的細胞是外源的來源或除所述細胞外的來源的蛋白質的培養(yǎng)基，所述細胞在生長過程中天然流出蛋白質。在一個實施方案中，ADAMTS13蛋白可在培養(yǎng)基中表達，所述培養(yǎng)基不含外源添加的蛋白質（即，無蛋白質）并且補充有鋒、巧和/或煙醜胺（維生素B3)。在某些實施方案中，無蛋白質的培養(yǎng)基包含多胺。例如，W至少2mg/L，或為或約為2mg/L至30mg/l，或為或約為2mg/L至8mg/L的濃度。在具體實施方案中，所述多胺是腐胺。在第6,171，825號和6,936,441號美國專利、W02007/077217、第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布、W及美國專利申請序列號12/847,999(其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中教導了示例性無蛋白質培養(yǎng)基。[0203]制備無動物蛋白質且化學成分確定的培養(yǎng)基的方法在本領域中，例如在第6,171，825和6,936,441號美國專利、WO2007/077217和第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布（其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中是已知的。在一個實施方案中，用于表達ADAMTS13蛋白的培養(yǎng)基是無動物蛋白質或無寡膚培養(yǎng)基。在某些實施方案中，培養(yǎng)基可W是化學成分確定的。在某些實施方案中，培養(yǎng)基可WW約0.5mg/L至約lOmg/L的濃度包含至少一種多胺。[0204]ADAMTS13蛋白還可W在不含外源添加的寡膚的培養(yǎng)基中表達。在一個實施方案中，ADAMTS13在培養(yǎng)基中表達，所述培養(yǎng)基不含外源添加的寡膚（即，無多膚）并且補充有鋒、巧和/或煙醜胺（維生素B3)。在某些實施方案中，所述無寡膚培養(yǎng)基包含多胺。例如，W至少2mg/L，或為或約為2mg/L至30mg/l，或為或約為2mg/L至8mg/L的濃度。在具體實施方案中，所述多胺是腐胺。在第6,171，825號和6,936,441號美國專利、WO2007/077217、第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布、W及美國專利申請序列號12/847,999(其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中教導了示例性無寡膚培養(yǎng)基。[0205]ADAMTS13蛋白還可W在不含血清的培養(yǎng)基中表達。在一個實施方案中，ADAMTS13在培養(yǎng)基中表達，所述培養(yǎng)基不含外源添加的血清（即，無血清）并且補充有鋒、巧和/或煙醜胺（維生素B3)。在某些實施方案中，所述無血清培養(yǎng)基包含多胺。例如，W至少2mg/L，或為或約為2mg/L至30mg/L，或為或約為2mg/L至8mg/L的濃度。在具體實施方案中，所述多胺是腐胺。在第6,171，825號和6,936,441號美國專利、WO2007/077217、第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布、W及美國專利申請序列號12/847,999(其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中教導了示例性無血清培養(yǎng)基。[0206]ADAMTS13蛋白還可W在不含動物蛋白質的培養(yǎng)基中表達。在一個實施方案中，ADAMTS13在培養(yǎng)基中表達，所述培養(yǎng)基不含外源添加的動物蛋白質或多膚（即，無動物蛋白質）并且補充有鋒、巧和/或煙醜胺（維生素B3)。在某些實施方案中，所述無動物蛋白質培養(yǎng)基包含多胺。例如，W至少2mg/L，或為或約為2mg/L至30mg/L，或為或約為2mg/L至8mg/L的濃度。在具體實施方案中，所述多胺是腐胺。在第6,171，825號和6,936,441號美國專利、WO2007/077217、第2008/0009040號和第2007/0212770號美國專利申請公布、W及美國專利申請序列號12/847,999(其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中教導了示例性無動物蛋白質培養(yǎng)基。[0207]ADAMTS13蛋白還可W在補充有額外的巧、鋒和/或維生素B3的培養(yǎng)基中表達，如美國專利申請序列號12/847,999中所述，為了所有目的將該專利申請的公開內容通過引用整體并入本文。在某些實施方案中，培養(yǎng)基可W是無動物蛋白質的、無寡膚的或化學成分確定的培養(yǎng)基。在某些實施方案中，按照第6,171，825和6,936,441號美國專利、WO2007/077217和第2008/0009040和第2007/0212770號美國專利申請公布（其公開內容為了所有目的通過引用整體并入本文）中所教導的制備無動物蛋白質或無寡膚培養(yǎng)基，并且所述培養(yǎng)基補充有額外的巧、鋒和/或維生素B3。在具體實施方案中，化學成分確定的培養(yǎng)基可與達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基（DMEM)相似，所述化學成分確定的培養(yǎng)基已補充了額外的巧、鋒和/或維生素B3,W增加在于所述培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達的ADAMTS蛋白的比活性。在其它實施方案中，培養(yǎng)基不含動物成分。在另一個實施方案中，培養(yǎng)基包含蛋白質，例如來自血清例如胎牛血清的動物蛋白質。在另一個實施方案中，培養(yǎng)基具有外源添加的重組蛋白質。在另一個實施方案中，所述蛋白質來自經檢驗無病原體的動物。[0208]D.ADAMTS13純化[0209]用于對來自混合的血清的天然ADAMTS13純化的方法是本領域中眾所周知的。同樣，用于重組ADAMTS13的表達和純化的方法也是本領域公知的。例如，由Plaimauer和Scheiflinger,SeminHematol.2004Jan;41(1):24-33;PlaimauerB等人，F.Blood.2002Nov15;100(10):3626-32.Epub2002化112;BrunoK等人，JI'虹ombHaemost.2005May;3(5):1064-73和美國專利申請序列號12/847,999(其公開內容為了所有目的通過引用W其整體明確地全部并入）教導了重組表達和純化。[0210]此外，本公開內容提供了用于純化重組ADAMTS13的另外的方法。在一個實施方案中，重組ADAMTS13在重組C冊細胞中表達并通過POROS服陽離子交換色譜法從所得的條件培養(yǎng)基中純化。為了消除不期望的二聚的、單體的和/或聚集的ADAMTS13,組合物接著經歷尺寸排阻凝膠過濾。ADAMTS13組合物通常還將經歷至少一個，優(yōu)選兩個病毒去除或滅活步驟。[0211]在某些實施方案中，本文中提供的用于制備ADAMTS13制劑的方法還包括至少一個病毒滅活或去除步驟。在某些實施方案中，本文中提供的方法可包括至少兩個或至少H個病毒滅活或去除步驟?？膳c本文中提供的方法一起使用的病毒滅活或去除步驟的非限定性實例包括溶劑去垢劑處理化orowitz等人，BloodCoagulFibrinolysis1994巧Suppl3):S21-S28和Kreil等人，Transfusion2003(43):1023-1028,為了所有目的將所述文獻的公開內容通過引用明確地整體并入本文）、納米過濾（Hamamoto等人，VoxSang1989(56)230-236和化asa等人，JGenVirol.1991(72(Pt8)):2021-2024,為了所有目的將所述文獻的公開內容通過引用明確地整體并入本文）。在優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明提供了用于制備ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括溶劑去垢劑處理和納米過濾。[0212]在一個實施方案中，提供了一種用于提供病毒上安全的ADAMTS13蛋白制劑，所述方法包括W下步驟；(a)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)具有編碼ADAMTS13蛋白的核酸的細胞；化）回收一部分包含ADAMTS13蛋白的培養(yǎng)基上清液；（C)利用層析步驟富集ADAMTS13蛋白；(d)進行至少一個病毒滅活或去除步驟；和（e)根據本文提供的制劑配制富集的ADAMTS13組合物，由此提供病毒上安全的ADAMTS13制劑。在一個實施方案中，培養(yǎng)基包含鋒、巧和任選地煙醜胺（維生素B3)。在優(yōu)選實施方案中，培養(yǎng)細胞的步驟包括連續(xù)培養(yǎng)（例如，灌注或恒化培養(yǎng)）。在另一個優(yōu)選實施方案中，將培養(yǎng)物維持在34C至37C的溫度下。在另一個優(yōu)選實施方案中，將培養(yǎng)物維持在6.9至7.2的抑下。在一個實施方案中，病毒去除步驟是納米過濾。[0213]在一方面的實施方案中，本發(fā)明提供了用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括W下步驟；(a)在含有約2yM至約12yM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；化）純化該ADAMTS13蛋白；和（C)制備根據本文提供的制劑中的任一種的制劑。[0214]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括W下步驟；a)在含有約2uM至約12yM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；（ii)純化該ADAMTS13蛋白；和（iii)制備包含W下的制劑；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0215]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0216]在穩(wěn)定化的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0217]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.Ol%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性齊U。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[021引在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0219]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0220]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)巧驚U，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0221]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括W下步驟；a)在含有約2uM至約12uM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；（ii)純化該ADAMTS13蛋白；和（iii)制備包含W下的制劑；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和訊用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0222]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0223]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0224]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.Ol%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[022引在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0226]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.SyM和約20yM之間的鋒。[0227]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;(b)0至60mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[022引在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括W下步驟；a)在含有約2uM至約12uM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；（ii)純化該ADAMTS13蛋白；和（iii)制備包含W下的制劑；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0229]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0230]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0231]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[023引在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0233]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20UM之間的鋒。[0234]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0235]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑的方法，所述方法包括W下步驟；a)在含有約2uM至約12uM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；（ii)純化該ADAMTS13蛋白；和（iii)制備包含W下的制劑；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0236]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0237]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[023引在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0239]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0240]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20UM之間的鋒。[0241]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至60mM的化Cl;(c)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[024引1.溶劑和去垢劑（S/D)處理[0243]為了滅活可存在于ADAMTS13制劑中的各種病毒污染物，一種或多種ADAMTS13中間溶液可經歷溶劑去垢劑（S/D)處理。用于溶液的去垢劑處理的方法在本領域是公知的（關于綜述參見，化IletierJP等人，BestPractResClin化ematol.2006;19(1):205-42,為了所有目的將所述文獻的公開內容通過引用明確地整體并入本文）。通常，可將任何標準S/D處理與本文中提供的方法結合使用。例如，下面提供用于S/D處理的示例性方法。[0244]在一個實施方案中，將TritonX-100、Tween-20和磯酸H(正-了基）醋（TNB巧W分別為或約為1.〇%、〇.3%和0.3%的終濃度加入ADAMTS13中間溶液。隨后在或約在18C至25C的溫度下攬拌混合物，進行至少約1小時。[0245]2.納米過濾和超濾/滲濾[0246]為了減少本文中提供的ADAMTS13蛋白制劑的病毒載量，可使用適當的納米過濾設備對制劑或中間體組合物進行納米過濾。在某些實施方案中，納米過濾設備可具有為或約為15nm至200nm的平均孔徑。適合用于該用途的納米過濾的實例包括但不限于DVD、DV50、DV20(Pall)'ViresolveNFP?、ViresolveNF民曲I(Millipore)、Wanova取15N、20N、35N和75N(Planova)。在具體實施方案中，納米過濾可具有為或約為15至72皿，或為或約為19至35皿，或為或約為15皿、19皿、20皿、35皿或72皿的平均孔徑。在優(yōu)選實施方案中，納米過濾可具有為或約為19nm、20nm或35nm的平均孔徑，例如As址iPLANOYA-20N或PLANOVA'35N濾器或其等同物。[0247]在納米過濾后，可任選地利用超濾和/或通過滲濾調整的緩沖液組合物濃縮濾液。在某些實施方案中，利用開放通道篩選（openchannelscreen)在盒（cassette)中進行超濾，并且超濾膜具有小于為或約為175kDa或小于為或約為170、160、150、140、130、120、110、100、90、80、70、60、50、40、30或更小的1^)3的標稱截留分子量（佩^0))。在優(yōu)選實施方案中，超濾膜具有不超過30kDa的NMWC0。在另一個優(yōu)選實施方案中，超濾膜具有不超過30kDa的NMWC0。[024引3.凍干法和熱處理[0249]在其它實施方案中，可通過熱處理凍干的組合物來進一步減小先前可能已經歷其它病毒滅活或去除步驟例如納米過濾的凍干的ADAMTS13蛋白（例如，ADAMTS13)的病毒活性。用于滅活血液因子中的病毒載量的熱處理在本領域是公知的（例如，參見，Piszkiewicz等人，"T虹ombRes.1987Jul15;47(2):235-41;Piszkiewicz等人，QirrSl:udHematolBloodTransfus.1989;巧6):44-54;Epstein和Rricke,ArchPatholL油Med.1990Mar;114(3):335-40)。[0250]VI.施用和處理方法[0251]所述制劑可被施用用于治療性或預防性治療。通常，對于治療性應用，所述制劑W"治療有效劑量"被施用于患有與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況或在其它方面需要其的受治療者。對該些用途有效的制劑和量將取決于疾病或病況的嚴重性和患者健康的一般狀態(tài)。取決于患者所需要和所耐受的劑量和頻率來施用制劑的單次施用或多次施用。[0252]為本發(fā)明的目的的"患者"或"受治療者"包括人和其它動物，特別是哺乳動物。因此，所述的組合物、制劑和方法可應用于人治療和獸醫(yī)應用。在特定的實施方案中，患者是哺乳動物，而在一個實施方案中是人。用于與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的病況的其它已知的治療和療法可與本發(fā)明提供的制劑和方法結合使用。[0253]在本發(fā)明的一個方面，提供了制備具有高比活性的穩(wěn)定化的rA13制劑的方法。在一個實施方案中，所述方法包括W下步驟：在含有約2yM至約12yM濃度的鋒和約0.5mM至約1.5mM的濃度的巧的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物，純化該ADAMTS13蛋白，和制備如上所述的制劑。在某些實施方案中，培養(yǎng)基還補充有約Img/L至約20mg/血的濃度的維生素B3。[0254]在另一方面，本發(fā)明提供了治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了治療或預防與一種或多種血栓的形成/存在相關的疾病或病況。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了瓦解在需要其的受治療者中的一種或多種血栓的方法。在其它實施方案中，本發(fā)明提供了治療或預防在需要其的受治療者中的梗塞的方法。通常，本發(fā)明提供的方法包括將本文提供的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。[0255]與一種或多種血栓的形成/存在相關的病癥的非限制性實例是血栓性血小板減少性紫薇（TTP)、獲得性TTP、動脈栓塞、急性也肌梗塞（AMI)、中風、敗血癥和彌漫性血管內凝血值IC)。[0巧6]與梗塞相關的病癥的非限制性實例包括但不限于也肌梗塞（也臟病發(fā)作）、肺栓塞、腦血管事件如中風、外周動脈閉塞性疾?。ɡ鐗亩唬?、抗磯脂綜合征、敗血癥、巨細胞性動脈炎佑CA)、疵氣和腸扭轉。[0巧7]A.用于ADAMTS13和VWF機能障礙的治療和預防[0巧引在一方面的實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將根據本文提供的制劑中的任一種的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。[0259]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0260]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0261]在穩(wěn)定化的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0262]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.Ol%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性齊U。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[026引在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0264]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。[0265]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0266]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0267]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[026引在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0269]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0270]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0271]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.SuM和約20yM之間的鋒。[0272]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;(b)0至60mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0273]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;(b)OmM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0274]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.O和約4.OmM之間的巧。[0275]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0276]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0277]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[027引在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20UM之間的鋒。[0279]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0280]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0281]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0282]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0283]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0284]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0285]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0286]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至60mM的化Cl;(c)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)lOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0287]B.用于血栓形成的疾病或病況的治療和預防[028引在一方面的實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將根據本文提供的制劑中的任一種的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。[0289]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0290]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0291]在穩(wěn)定化的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0292]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性齊U。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[029引在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0294]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0295]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0296]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0297]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[029引在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0299]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.Ol%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0300]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0301]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.SuM和約20yM之間的鋒。[0302]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;(b)0至60mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0303]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0304]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0305]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0306]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0307]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[030引在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5yM和約20yM之間的鋒。[0309]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0310]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0311]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0312]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0313]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0314]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0315]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0316]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至60mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)lOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0317]C.用于梗塞的治療和預防[031引在一方面的實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將根據本文提供的制劑中的任一種的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。[0319]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)OmM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.SmM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0320]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0321]在穩(wěn)定化的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0322]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.Ol%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性齊U。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[032引在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0324]在穩(wěn)定化的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5iM和約20iM之間的鋒。[0325]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的ADAMTS13(A13)制劑，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0326]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)OmM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（c)0.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0327]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[032引在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0329]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0330]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或肥PES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0331]在穩(wěn)定化的低鹽A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.SuM和約20yM之間的鋒。[0332]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽ADAMTS13(A13)巧驚U，其包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;(b)0至60mM的NaCl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（6)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和(g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.。。[0333]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至200mM的藥學上可接受的鹽；（C)O.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0334]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約1.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0335]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0336]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0337]在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[033引在穩(wěn)定化的凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5iM和約20iM之間的鋒。[0339]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的凍干的ADAMTS13(A13)巧驚U，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至200mM的化Cl;(C)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)IOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0340]在一個實施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者，所述ADAMTS13制劑包含（a)至少100個單位的ADAMTS13活性（即，FRETS-VWF73活性）每mgADAMTS13;化)0mM至IOOmM的藥學上可接受的鹽；（c)0.5mM至20mM的巧；（d)糖和/或糖醇；（e)非離子型表面活性劑；和（f)用于維持抑在6.0和8.0之間的緩沖劑。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少200個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少400個單位的A13活性每mgADAMTS13。在優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少600個單位的A13活性每mgADAMTS13。在更優(yōu)選的實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少800個單位的A13活性每mgADAMTS13。在另一個優(yōu)選實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含至少1000個單位的A13活性每mgADAMTS13。在一個實施方案中，穩(wěn)定化的ADAMTS13制劑包含約100個單位和約2000個單位之間的ADAMTS13活性每mgADAMTS13。[0341]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約I.OmM和約10.OmM之間的巧。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約2.0和約4.OmM之間的巧。[0342]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的另一個實施方案中，所述制劑包含約2%和約6%之間的糖和/或糖醇。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約3%和約5%之間的糖和/或糖醇。在具體實施方案中，所述制劑包含約4%的糖和/或糖醇。在一個實施方案中，糖和/或糖醇選自由藏糖、海藻糖、甘露糖及其組合組成的組。在優(yōu)選實施方案中，糖和/或糖醇是藏糖和甘露醇的混合物。[0343]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約0.01%和約0.1%之間的非離子型表面活性劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約0.05%的非離子型表面活性劑。在一個實施方案中，表面活性劑選自由聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。在優(yōu)選實施方案中，表面活性劑是聚山梨醇醋80。[0344]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑包含約5mM和約IOOmM之間的緩沖劑。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑包含約IOmM和約50mM之間的緩沖劑。在另一個實施方案中，緩沖劑是組氨酸或HEPES。在優(yōu)選實施方案中，緩沖劑是組氨酸。在一個實施方案中，所述制劑的抑在約6.5和7.5之間。在優(yōu)選實施方案中，所述制劑的抑為7.0+0.2。[0345]在穩(wěn)定化的低鹽凍干的A13制劑的一個實施方案中，所述制劑還包含約0.5UM和約20UM之間的鋒。[0346]在具體實施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定化的低鹽凍干的ADAMTS13(A13)制劑，其中所述制劑由包含W下的液體制劑凍干；(a)至少100個單位的ADAMTS13活性每mgADAMTS13;化)0至60mM的化Cl;(c)2mM至4mM的巧；（d)2%至4%的甘露醇；（e)0.5%至2%的藏糖；訊0.025至0.1%的聚山梨醇醋80;和（g)lOmM至50mM的組氨酸（pH7.0+0.2)。[0347]VII.ADAMTS13藥劑盒[034引在本發(fā)明的另一方面，提供了用于治療與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的藥劑盒。在一個實施方案中，所述藥劑盒包含如上所述的A13或rA13的制劑。在某些實施方案中，本文提供的藥劑盒可包含一劑或多劑本文提供的液體或凍干的制劑。當藥劑盒包含凍干的A13或rA13制劑時，藥劑盒通常還將包含用于液體制劑的重構的合適的液體，例如無菌水或藥學上可接受的緩沖液。在某些實施方案中，藥劑盒可包含預先包裝在注射器中用于通過健康護理專業(yè)人員施用或用于家用的ADAMTS13巧驚U。[0349]在一個實施方案中，提供包含約10個單位的FRETS-VWF73活性至約10,000個單位的FRETS-VWF73活性的藥劑盒。在其它實施方案中，藥劑盒可提供，例如，約20個單位的FRETS-VWF73扣PV73)活性至約8,000個單位的FRETS-VWF73活性，或約30Uw3至約6,000Upv73，或約40Upv73至約4,000Uw3，或約50Uw3至約3,000Upv73，或約75Upv73至約2,500Upv73,或約100Upv73至約2,〇〇〇Upv73,或約200Upvn至約1，5〇〇Upv73,或約其它在其中的范圍。在某些實施方案中，藥劑盒可提供約10個單位的FRETS-VWF73活性，或約20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、900、1，000、1，100、1，200、1，300、1，400、1，500、1，600、1，700、1，800、1，900、2,000、2,100、2,200、2,300、2,400、2,500、2,600、2,700、2,800、2,900、3,000、3,100、3,200、3,300、3,400、3,500、3,600、3,700、3,800、3,900、4,000、4,100、4,200、4,300、4,400、4,500、4,600、4,700、4,800、4,900、5,000、5,100、5,200、5,300、5,400、5,500、5,600、5,700、5,800、5,900、6,000、6,100、6,200、6,300、6,400、6,500、6,600、6,700、6,800、6,900、7,000、7,100、7,200、7,300、7,400、7,500、7,600、7,700、7,800、7,900、8,000、8,100、8,200、8,300、8,400、8,500、8,600、8,700、8,800、8,900、9,000、9,100、9,200、9,300、9,400、9,500、9,600、9,700、9,800、9,900、10,000或更多個單位的FRETS-VWF73活性。[0巧0]在某些實施方案中，藥劑盒將是用于ADAMTS13的單次施用或劑量。在其它實施方案中，藥劑盒可包含多劑ADAMTS13W用于施用。在一個實施方案中，藥劑盒可包含預先包裝在注射器中用于通過健康護理專業(yè)人員施用或用于家用的ADAMTS13巧驚U。[0；351]VIII.實施例[0巧引A.實施例1;重組ADAMTS13(rAl：3)的表達[0巧3]將表達人ADAMTS13的重組CHO細胞系#640-2的恒化細胞培養(yǎng)物生長在補充有額外鋒和維生素B3的化學成分確定的BACD-A13培養(yǎng)基中。將1化培養(yǎng)物維持53天，并且隨時間過去監(jiān)控rA13蛋白和活性的產生。[0巧4]使表達人ADAMTS13的重組CHO細胞適應化學成分確定的專利培養(yǎng)基炬CS培養(yǎng)基）。將DWCB解凍，在BCS培養(yǎng)基中制備細胞接種物。將從A13表達克隆#640-2繁殖的細胞轉移至具有Rushton型葉輪的1化生物反應器中，利用具有專利權的BACD-A13培養(yǎng)基，于在線控制的7.15-7.20的抑、37C和20%空氣飽和度的溶解氧濃度下W重復分批培養(yǎng)方式培養(yǎng)所述細胞。將2個分批培養(yǎng)物生長至IOL的終工作體積，在第5天將生物反應器轉換成連續(xù)培養(yǎng)基進料，W恒化模式操作另外48天。[035引每周一次從生物反應器取出上清液的樣品，利用ELISA分析其rA13蛋白的產量，利用FRETS-VWF73測定法測定rA13的活性。利用Nucleocounter技術測定細胞計數。測量稀釋速率，將其用于計算生長速率和容積生產率。[0巧6]在連續(xù)培養(yǎng)條件下，通過使用W1.432mg/LZnS〇4?7&0和7.02mg/L煙醜胺的終濃度補充有鋒和煙醜胺的化學成分確定的BACD-A13培養(yǎng)基，獲得了0.9至1.3mg/L/D的高水平rA13蛋白產量和約800至IlOOmU/UgrA13的比活性（表1)。值得注意地，容積和細胞比生產率在長期培養(yǎng)中隨時間過去增加，可能歸因于隨時間過去遞增的生長和稀釋速率?？蓪⑺磉_的rA13的高比活性在至少整個7周中維持在恒定的高水平上，將培養(yǎng)物在恒化條件下生長。事實上，培養(yǎng)物中產生的rA13的比活性實際上從第2周的約SOOmU/ygA13增加至第7周的約1100恤/ygA13。[0巧7]表1.分批實驗CP_07/18_M07:M13C冊Klon#985/1985DWCB#01的發(fā)酵數據防35引【權利要求】1.一種穩(wěn)定化的ADAMTS13水制劑，包含：(a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;(b)0mM至100mM的藥學上可接受的鹽；(c)0·5mM至20mM的鈣；(d)糖和/或糖醇；(e)非離子型表面活性劑；⑴緩沖劑，和(g)pH在6.0和8.0之間。2.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述制劑每mL包含約50個單位和約1000個單位之間的ADAMTS13活性。3.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述藥學上可接受的鹽是氯化鈉。4.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含1.OmM和10.OmM之間的鈣。5.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含2%和6%之間的糖和/或糖醇。6.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述糖和/或糖醇選自由蔗糖、海藻糖、甘露醇及它們的組合。7.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述糖和/或糖醇是蔗糖和甘露醇的組合。8.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含0.01%和0.1%之間的非離子型表面活性劑。9.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述表面活性劑選自由聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、PluronicF-68和BRIJ35組成的組。10.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含5mM和100mM之間的緩沖劑。11.根據權利要求10所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含10mM和50mM之間的緩沖劑。12.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中緩沖劑選自由組氨酸和HEPES組成的組。13.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述緩沖劑包含5mM和100mM之間的選自組氨酸或HEPES的緩沖劑。14.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述制劑的pH為6.5至7.5。15.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述制劑的pH為7.0±0.2。16.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含0.5μπι和20μπι之間的鋅。17.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含OmM和90mM之間的藥學上可接受的鹽。18.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含OmM和60mM之間的藥學上可接受的鹽。19.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含OmM和30mM之間的藥學上可接受的鹽。20.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含30mM和60mM之間的藥學上可接受的鹽。21.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含30mM和90mM之間的藥學上可接受的鹽。22.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含60mM和90mM之間的藥學上可接受的鹽。23.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中所述制劑包含單體ADAMTS13蛋白，并且ADAMTS13聚集體的含量小于總蛋白含量的5%。24.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，其中每mgADAMTS13蛋白中所述ADAMTS13蛋白的比活性為至少約600U的FRETS-VWF73活性。25.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含(a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;(b)OmM至60mM的NaCl;(c)2mM至4mM的隹丐；(d)2%至4%的甘露醇；(e)0.5%至2%的蔗糖；(f)0.025%至0·1%的聚山梨醇酯80;(g)10mM至50mM的組氨酸；和(h)pH為7.0±0.2。26.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含(a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;(b)OmM至100mM的藥學上可接受的鹽；(c)0·5mM至20mM的鈣；(d)糖和/或糖醇；(e)非離子表面活性劑；(f)5mM至lOOmM的選自由組氨酸和HEPES組成的組的緩沖劑；和(g)pH在6.0和8.0之間。27.根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的水制劑，包含(a)0.05mg/ml至10.Omg/ml的ADAMTS13;(b)OmM至lOOmM的藥學上可接受的鹽；(c)0·5mM至20mM的鈣；(d)2%至6%的糖和/或糖醇；(e)非離子表面活性劑；(f)5mM至lOOmM的選自由組氨酸和HEPES組成的組的緩沖劑；和(g)pH在6.0和8.0之間。28.-種用于制造穩(wěn)定化的ADAMTS13水制劑的方法，所述方法包括以下步驟：(a)在含有約2μΜ至約12μΜ濃度的鋅和約0.5mM至約1.5mM的濃度的鈣的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞中表達ADAMTS13蛋白或其生物活性衍生物；(b)純化所述ADAMTS13蛋白；和(c)制備根據權利要求1所述的制劑。29.-種藥劑盒，包含根據權利要求1所述的穩(wěn)定化的ADAMTS13水制劑。30.-種治療或預防與ADAMTS13或VWF機能障礙相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將治療有效劑量的根據權利要求1所述的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。31.-種治療或預防與血栓的形成和/或存在相關的疾病或病況的方法，所述方法包括將治療有效劑量的根據權利要求1所述的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。32.-種治療或預防梗塞的方法，所述方法包括將治療有效劑量的根據權利要求1所述的ADAMTS13制劑施用于需要其的受治療者。【文檔編號】A61K47/10GK104224705SQ201410452647【公開日】2014年12月24日申請日期:2010年9月21日優(yōu)先權日:2009年9月21日【發(fā)明者】H·P·馬蒂森,P·L·圖雷切克,H·P·施瓦茨申請人:巴克斯特國際公司,巴克斯特保健股份有限公司