一種新的哮喘動物模型的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種新的哮喘動物模型的制備方法。本發(fā)明所述哮喘動物模型的制備方法操作簡單，不需要麻醉。采用本發(fā)明所述制備方法得到的哮喘動物模型，動物反應性好，適合研究包括哮喘的速發(fā)相及遲發(fā)相在內的哮喘發(fā)作整個反應過程，可用于篩選發(fā)現(xiàn)新的治療哮喘的藥物等研究。
【專利說明】 一種新的哮喘動物模型的制備方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種新的哮喘動物模型的制備方法及利用所述模型篩選藥物的方法。

【背景技術】
[0002]哮喘是指一種常見氣道的過敏性、炎癥性疾病，全稱過敏性哮喘或變應性哮喘。主要特征是多變和復發(fā)的癥狀、可逆性氣流阻塞，和支氣管痙攣。常見癥狀表現(xiàn)為喘息、咳嗽、胸部發(fā)緊、胸悶和氣短。如果病情長期得不到有效控制，可以出現(xiàn)氣道重塑，引起不可逆性氣道縮窄。全球范圍內的哮喘發(fā)病率在20世紀60年代和2008年之間大幅增長，并自20世紀70年代被認為是主要的公眾健康問題。從20世界90年代開始，哮喘的發(fā)病率在發(fā)達國家趨于平穩(wěn)，而在發(fā)展中國家快速增長。哮喘影響了美國大約7%的人口，影響了英國大約5%的人口。加拿大、澳大利亞和新西蘭的發(fā)病率在14%?15%。截至2011年，世界上至少有3億人患有哮喘，大約有25萬人因哮喘而死。不同國家的哮喘發(fā)病率不同，一般在1%?18%之間。我國成人目前哮喘的發(fā)病率估計在2%左右。兒童發(fā)病情況比成人更高。中國人口基數(shù)大，因此即使只有2%，發(fā)病的絕對數(shù)目也是很大的。
[0003]過敏性哮喘發(fā)作前有先兆癥狀如打噴嚏、流涕、咳嗽、胸悶等，如不及時處理，可因支氣管阻塞加重而出現(xiàn)哮喘。過敏哮喘發(fā)作嚴重者可被迫采取坐位或呈端坐呼吸，干咳或咯大量白色泡沫痰，甚至出現(xiàn)紫紺等，部分較輕的患者可自行恢復，但多數(shù)患者尤其是兒童患者需要用藥或住院治療達到緩解。臨床上給患者做支氣管特異性致敏原吸入激發(fā)試驗發(fā)現(xiàn)患者在發(fā)作緩解一至數(shù)小時后可再次發(fā)作。典型的人類哮喘患者通過激發(fā)試驗發(fā)現(xiàn)，其哮喘的發(fā)作從時間上劃分，可見到速發(fā)相反應和遲發(fā)相反應。速發(fā)相反應是指吸入致敏原后立即或數(shù)分鐘后出現(xiàn)喘息、胸悶等哮喘反應的表現(xiàn)，一般持續(xù)I到2小時，癥狀緩解。遲發(fā)相反應是指速發(fā)相以后I至數(shù)小時可能再次出現(xiàn)哮喘發(fā)作，一般持續(xù)時間比速發(fā)相更長，可達6-8小時或更長。癥狀一般會更嚴重。速發(fā)相反應一般認為是致敏原吸入后和支氣管粘膜肥大細胞表面受體上的特異性IgE結合，導致肥大細胞脫顆粒釋放活性物質如組織胺、白三烯等引起支氣管平滑肌收縮所致。所以這個時間段的反應發(fā)生的迅速。也由于這些活性物質代謝分解很快，所以很快就消退了。肥大細胞同時也釋放具有趨化活性的物質，促使炎癥細胞主要是嗜酸性白細胞聚集到肺部支氣管參與過敏性炎癥過程，這個過程繼速發(fā)相反應之后發(fā)生，持續(xù)時間可達數(shù)小時或十幾小時，個別可能更久，稱為遲發(fā)相反應。研究發(fā)現(xiàn)，速發(fā)和遲發(fā)相反應可以在一個患者哮喘時相繼出現(xiàn)，也可能只觀測到其中的一相。
[0004]近幾十年，腎上腺糖皮質激素是治療哮喘(尤其是過敏性哮喘)最常用的治療藥物，但此類藥物有很大的副作用。因此研究人員一直試圖發(fā)現(xiàn)有理想療效且沒有或較少副作用的治療藥物。這就需要有理想的動物模型模擬患哮喘的病人來進行藥物評價和機理研究。
[0005]目前比較常用的動物模型有兩種。第一種是經(jīng)典的模型，是將過敏原致敏的動物麻醉后進行氣道阻力測定，但是由于動物麻醉后已經(jīng)不是正常動物，其反應性不好，一般只能觀察哮喘的前期變化及哮喘的速發(fā)反應相，難以觀察哮喘發(fā)作后期的遲發(fā)相，而且動物處于麻醉狀態(tài)，迷走神經(jīng)受到抑制，支氣管痙攣會減弱，不能真實反映支氣管痙攣程度。第二種是氣道高反應性模型，此模型主要是針對哮喘發(fā)作后氣道仍有炎癥，通過炎癥條件下氣道呈現(xiàn)過度敏感的狀態(tài)這個情況去研究，雖然是可以在動物非麻醉狀態(tài)下進行實驗，但是氣道高反應性模型是在哮喘發(fā)作過后再來觀察，已經(jīng)錯過了哮喘發(fā)作過程，并且非哮喘疾病如支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病等也可以有氣道高反應性，所以氣道高反應性模型不是哮喘的特異性的模型。而動物模型哮喘的發(fā)作情況越接近人類的哮喘發(fā)作情況可能越有實用價值。比如處于清醒狀態(tài)下的哮喘發(fā)作，可以觀測到速發(fā)和遲發(fā)雙相反應等。迄今為止在嚙齒類動物哮喘模型中未見這樣的報告。本模型彌補了以往哮喘動物模型的不足，更加貼近了對人類患者進行哮喘激發(fā)試驗的情況，即清醒狀態(tài)下紀錄，并可以進行哮喘發(fā)作的全程記錄，觀測到除速發(fā)相反應外的遲發(fā)相反應。


【發(fā)明內容】

[0006]有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種新的哮喘動物模型的制備方法。本發(fā)明所述制備方法制備的哮喘動物模型不需要麻醉、可以觀察哮喘發(fā)作整個反應過程。
[0007]為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
[0008]一種新的哮喘動物模型的制備方法，
[0009]取卵蛋白和氫氧化鋁混合加生理鹽水制成致敏液，其中所述致敏液中所述卵蛋白的含量為25mg/mL，所述氫氧化鋁的含量為250mg/mL ；
[0010]在大鼠皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0011]第5天重復皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0012]第37天給予大鼠5%卵蛋白-生理鹽水溶液，霧化吸入10分鐘激發(fā)哮喘，霧化結束后立即放入無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀中記錄數(shù)據(jù)16-20小時，分析數(shù)據(jù)可見動物哮喘發(fā)作出現(xiàn)速發(fā)相反應和遲發(fā)相或單相反應直至發(fā)作消退，即得哮喘動物模型。
[0013]本發(fā)明所述哮喘動物模型的制備方法不需要對動物進行麻醉，動物反應性好，適合觀察哮喘發(fā)作整個反應過程。
[0014]目前用于制備哮喘動物模型的動物主要為大鼠。其中，在一些實施方案中，本發(fā)明所述大鼠為6?8周近交系挪威褐鼠。
[0015]本發(fā)明所述哮喘是指過敏性哮喘。
[0016]本發(fā)明所述卵蛋白是指白蛋白又稱清蛋白。本發(fā)明所述卵蛋白是指雞卵白蛋白(ovalbumin, OVA)。
[0017]在一些實施方案中，卵蛋白也可以被其他抗原及半抗原，如塵螨、霉菌、花粉、小分子化合物等替代，用來致敏動物。
[0018]進一步的，在一些實施方案中，所述致敏液中的卵蛋白的純度> 98%。
[0019]在一些實施方案中，所述5%卵蛋白-生理鹽水溶液的卵蛋白的純度彡98%。
[0020]本發(fā)明還提供了上述制備方法制備得到的哮喘動物模型。
[0021]本發(fā)明還提供了一種篩選治療哮喘的新藥物的方法，包括以下步驟:
[0022]a、設置待測藥物組、生理鹽水對照組和正常對照組，其中待測藥物組和生理鹽水對照組以卵蛋白注射致敏用卵蛋白液霧化激發(fā)哮喘制備哮喘動物模型，正常對照組以生理鹽水注射并用生理鹽水霧化吸入激發(fā)，然后分別采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄待測藥物組、生理鹽水對照組和正常對照組數(shù)據(jù)16-20小時；
[0023]b、待測藥物組霧化吸入待測藥物，每日一小時，共14日；生理鹽水對照組和正常對照組霧化吸入生理鹽水，每日一小時，共14日；第15日三組分別吸入卵蛋白激發(fā)哮喘，采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄16-20小時；
[0024]C、分析步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)對藥物的治療效果進行評價。
[0025]其中，所述待測藥物在卵蛋白致敏制備哮喘動物模型后給予。
[0026]本發(fā)明所述方法中所述待測藥物給予可以采用注射、口服或吸入的方式。
[0027]在一些實施方案中，所述哮喘動物模型的制備方法具體為取卵蛋白和氫氧化鋁混合加生理鹽水制成致敏液，其中所述致敏液中所述卵蛋白的含量為25mg/mL，所述氫氧化鋁的含量為250mg/mL ；
[0028]在大鼠皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0029]第5天重復皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0030]第37天給予大鼠5%卵蛋白-生理鹽水溶液，霧化吸入10分鐘激發(fā)哮喘，霧化結束后立即放入無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀中記錄數(shù)據(jù)16-20小時，分析數(shù)據(jù)可見動物哮喘發(fā)作出現(xiàn)速發(fā)相反應和遲發(fā)相或單相反應直至發(fā)作消退，即得哮喘動物模型。
[0031]本發(fā)明所述篩選治療哮喘的藥物的方法采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀記錄待測藥物組、生理鹽水對照組及正常對照組，包括哮喘的速發(fā)相及遲發(fā)相的哮喘發(fā)作整個反應過程的數(shù)據(jù)，以評價藥物對哮喘的治療效果，篩選發(fā)現(xiàn)能夠治療哮喘的藥物。
[0032]其中，在一些實施方案中，所述無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀是由美國Buxco公司制造的
[0033]卵蛋白作為過敏原激發(fā)致敏大鼠后30至60分鐘內為哮喘的速發(fā)相，而從激發(fā)后I至2小時開始，往后為哮喘發(fā)作的遲發(fā)階段，一般持續(xù)數(shù)小時或更長，可達十幾小時，偶見超過20小時的。因此，本發(fā)明所述篩選治療哮喘的新藥物的方法中所述記錄時間為16-20小時。
[0034]在一些實施方案中，本發(fā)明所述篩選治療哮喘的新藥物的方法中所述分析步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)具體為分別比較正常對照組、生理鹽水對照組和待測藥物組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù):
[0035]若正常對照組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)均沒有升高，而生理鹽水對照組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)均有升高，出現(xiàn)速發(fā)相和遲發(fā)相反應或出現(xiàn)速發(fā)相與遲發(fā)相中的任意一相即表示哮喘動物模型制備成功；
[0036]若待測藥物組步驟b記錄的數(shù)據(jù)較步驟a記錄的數(shù)據(jù)受到抑制，即表示待測藥物有治療哮喘的作用。
[0037]由上述技術方案可知，本發(fā)明提供了一種新的哮喘動物模型的制備方法及一種篩選治療哮喘的藥物的方法。本發(fā)明所述哮喘動物模型的制備方法操作簡單，不需要麻醉。采用本發(fā)明所述制備方法制備得到的哮喘動物模型，動物反應性好，適合特異性的觀察包括哮喘的速發(fā)相及哮喘的遲發(fā)相在內的哮喘發(fā)作整個反應過程。采用本發(fā)明所述制備方法制備得到的哮喘動物模型去試驗治療哮喘的藥物可以全面的觀察藥物對哮喘發(fā)作全過程的影響，彌補現(xiàn)有模型的不足。本發(fā)明所述篩選治療哮喘的藥物的方法可實現(xiàn)在動物不麻醉的清醒狀態(tài)下，連續(xù)觀察藥物對哮喘速發(fā)相、遲發(fā)相的影響。由于速發(fā)和遲發(fā)這兩相的機理不同，通常一種藥物可能只對速發(fā)相有效，另一種藥物可能只對遲發(fā)相有效，本發(fā)明所述篩選治療哮喘的藥物的方法，可更廣泛的篩選獲得對哮喘速發(fā)相或哮喘遲發(fā)相有效的治療哮喘的藥物，同時還可間接觀察反映支氣管痙攣程度和氣道阻力的變化，進而全面考察藥物對哮喘發(fā)作全過程的影響，為哮喘發(fā)病機理研究、篩選治療哮喘的藥物提供一種新途徑。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0038]為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。
[0039]圖1示實施例1無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀對制備的哮喘動物模型連續(xù)記錄16小時的檢測圖；其中橫坐標為時間，單位為小時，縱坐標為呼氣相延長參數(shù)(EnhancedPause,Penh)；
[0040]圖2示實施例1無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀對正常的6?8周挪威褐鼠連續(xù)記錄16小時的檢測圖；其中橫坐標為時間，單位為小時,縱坐標為呼氣相延長參數(shù)(EnhancedPause,Penh)；
[0041]圖3示實施例2大鼠哮喘發(fā)作后肺部HE染色圖，嗜酸性白細胞浸潤明顯；
[0042]圖4不實施例2大鼠哮喘發(fā)作后肺部HE染色圖，其中，fir頭所指的為粘液；
[0043]圖5示實施例3待測藥物組霧化吸入地塞米松前與吸入地塞米松后的對比圖；其中圖5a為吸入前，圖5b為吸入后,橫坐標為時間，單位為小時，縱坐標為呼氣相延長參數(shù)(Enhanced Pause, Penh);吸入地塞米松前后對比顯示地塞米松可抑制哮喘發(fā)作；
[0044]圖6示實施例3生理鹽水對照組霧化吸入生理鹽水前與吸入生理鹽水后的對比圖；其中圖6a為吸入前，圖6b為吸入后，橫坐標為時間，單位為小時，縱坐標為呼氣相延長參數(shù)(Enhanced Pause, Penh);吸入生理鹽水前后對比顯示生理鹽水對哮喘沒有治療作用；
[0045]圖7示實施例3正常對照組霧化吸入生理鹽水前與吸入生理鹽水后的對比圖；其中圖7a為吸入前，圖7b為吸入后,橫坐標為時間，單位為小時，縱坐標為呼氣相延長參數(shù)(Enhanced Pause, Penh);吸入前后對比顯示沒有致敏的動物無哮喘發(fā)作，吸入生理鹽水沒有影響。

【具體實施方式】
[0046]下面將結合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。如無特別說明，本發(fā)明所使用的實驗材料均為市售產(chǎn)品，可通過商業(yè)渠道購買得到。
[0047]實施例1、哮喘動物模型的制備
[0048]實驗材料:卵蛋白(購自美國Sigma-Aldrich公司)，氫氧化鋁干粉(購自美國Sigma-Aldrich公司)，生理鹽水、6?8周挪威褐鼠(購自北京維通利華實驗動物技術有限公司)
[0049]制備方法:
[0050]1、取25mg卵蛋白和250mg氫氧化招干粉混合加入ImL生理鹽水制成致敏液；
[0051]2、取0.5mg卵蛋白加入1mL生理鹽水制成5%卵蛋白-生理鹽水溶液1mL ；
[0052]3、取6?8周挪威褐鼠，在大鼠皮下分兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0053]4、第5天重復在大鼠皮下分兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ；
[0054]5、第37天給予大鼠5%卵蛋白-生理鹽水溶液，霧化吸入10分鐘激發(fā)哮喘，霧化結束后立即放入無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀中記錄數(shù)據(jù)16-20小時，分析數(shù)據(jù)可見動物哮喘發(fā)作出現(xiàn)速發(fā)相反應和遲發(fā)相或單相反應直至發(fā)作消退，即得哮喘動物模型。
[0055]采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀分別對制備的哮喘動物模型和正常的6?8周挪威褐鼠連續(xù)記錄16小時。結果見圖1和圖2。
[0056]由圖1結果可見制備的哮喘動物模型在卵蛋白激發(fā)后出現(xiàn)了包括哮喘速發(fā)反應相和遲發(fā)反應相直至消退的哮喘發(fā)作的全過程。速發(fā)反應相發(fā)生在激發(fā)后的前一個小時(橫坐標120處)。一個小時后逐漸發(fā)生的是遲發(fā)反應相，持續(xù)約5個小時(橫坐標600處)后回落到正常，反應強度也比速發(fā)相大。而圖2結果顯示對照組正常動物，無哮喘發(fā)作，無速發(fā)、遲發(fā)相。
[0057]實施例2、哮喘動物模型鑒定
[0058]動物在給予卵蛋白致敏注射前以及注射后第7、14、21、28和35天分別取血檢測特異性IgE。結果顯示從第14天開始出現(xiàn)IgE, 28天時達到峰值。
[0059]激發(fā)哮喘發(fā)作后24小時，動物取肺經(jīng)HE染色光學顯微鏡下觀察，見嗜酸性白細胞浸潤，支氣管和肺泡空腔內可見粘液分泌增加，有灶性出血，符合過敏性支氣管哮喘發(fā)作炎癥性變化，結果見圖3、4。
[0060]實施例3、篩選治療哮喘的藥物的方法
[0061]實驗材料:6?8周近交系挪威褐鼠(購自北京維通利華實驗動物技術有限公司)，地塞米松磷酸鈉注射液(購自:天津金耀集團湖北天藥藥業(yè)股份有限公司)。
[0062]取6?8周近交系挪威褐鼠分三組:生理鹽水對照組、正常對照組、待測藥物組，按照實施例1的方法生理鹽水對照組和待測藥物組以卵蛋白注射致敏，用卵蛋白液霧化激發(fā)哮喘；正常對照組以生理鹽水注射，并用生理鹽水霧化吸入激發(fā)，然后均采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄16-20小時，待測藥物組結果見圖5a，生理鹽水對照組結果見圖6a，正常對照組結果見7a。然后待測藥物組霧化吸入地塞米松0.5mg/mL,每日一小時，共14日，生理鹽水對照組和正常對照組霧化吸入生理鹽水每日一小時，共14日。第15日三組分別吸入卵蛋白激發(fā)哮喘，采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄16-20小時，待測藥物組結果見圖5b，生理鹽水對照組結果見圖6b，正常對照組結果見圖7b。
[0063]由圖7a和圖7b可見正常對照組無哮喘發(fā)作，圖6a和圖6b可見生理鹽水對照組在給予生理鹽水前后均有哮喘發(fā)作，以上表明哮喘動物造模成功。由圖5a和圖5b待測藥物組給藥前后的自身對照及與生理鹽水對照組的比較，可見吸入地塞米松后動物哮喘發(fā)作程度受到抑制。
【權利要求】
1.一種哮喘動物模型的制備方法， 取卵蛋白和氫氧化鋁混合加生理鹽水制成致敏液，其中所述致敏液中卵蛋白的含量為25mg/mL,所述氫氧化招的含量為250mg/mL ； 在大鼠皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ； 第5天重復皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ； 第37天給予大鼠5%卵蛋白-生理鹽水溶液，霧化吸入10分鐘激發(fā)哮喘，霧化結束后立即放入無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀中記錄數(shù)據(jù)16-20小時，分析數(shù)據(jù)可見動物哮喘發(fā)作出現(xiàn)速發(fā)相反應和遲發(fā)相或單相反應直至發(fā)作消退，即得哮喘動物模型。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，所述大鼠為6?8周挪威褐鼠。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，所述致敏液中的卵蛋白的純度>98%。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，所述5%卵蛋白-生理鹽水溶液的卵蛋白的純度彡 98%。
5.權利要求1-4任意一項所述的方法制備得到的哮喘動物模型。
6.一種篩選治療哮喘的藥物的方法，包括以下步驟: a、設置待測藥物組、生理鹽水對照組和正常對照組，其中待測藥物組和生理鹽水對照組以卵蛋白注射致敏用卵蛋白液霧化激發(fā)哮喘制備哮喘動物模型，正常對照組以生理鹽水注射并用生理鹽水霧化吸入激發(fā)，然后分別采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄待測藥物組、生理鹽水對照組和正常對照組數(shù)據(jù)16-20小時； b、待測藥物組霧化吸入待測藥物，每日一小時，共14日；生理鹽水對照組和正常對照組霧化吸入生理鹽水，每日一小時，共14日；第15日三組分別吸入卵蛋白激發(fā)哮喘，采用無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀全程記錄16-20小時； C、分析步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)對藥物的治療效果進行評價。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，所述哮喘動物模型的制備方法具體方法為: 取卵蛋白和氫氧化鋁混合加生理鹽水制成致敏液，其中所述致敏液中卵蛋白的含量為25mg/mL,所述氫氧化招的含量為250mg/mL ； 在大鼠皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ； 第5天重復皮下兩點注射所述致敏液，每點0.2ml ； 第37天給予大鼠5%卵蛋白-生理鹽水溶液，霧化吸入10分鐘激發(fā)哮喘，霧化結束后立即放入無創(chuàng)性全身體積描記檢測儀中記錄數(shù)據(jù)16-20小時，分析數(shù)據(jù)可見動物哮喘發(fā)作出現(xiàn)速發(fā)相反應和遲發(fā)相或單相反應直至發(fā)作消退，即得哮喘動物模型。
8.根據(jù)權利要求6所述的方法，所述分析步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)具體為分別比較正常對照組、生理鹽水對照組和待測藥物組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù): 若正常對照組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)均沒有升高，而生理鹽水對照組步驟a和步驟b記錄的數(shù)據(jù)均有升高，出現(xiàn)速發(fā)相和遲發(fā)相反應或出現(xiàn)速發(fā)相與遲發(fā)相中的任意一相即表示哮喘動物模型制備成功； 若待測藥物組步驟b記錄的數(shù)據(jù)較步驟a記錄的數(shù)據(jù)受到抑制，即表示待測藥物有治療哮喘的作用。
【文檔編號】A61K38/38GK104436172SQ201410522117
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年9月30日 優(yōu)先權日:2014年9月30日
【發(fā)明者】張星東, 秦川, 陶婧婧 申請人:中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所