羅勒多糖用作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種純中藥制劑羅勒多糖的新用途，即羅勒多糖用作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用。研究發(fā)現(xiàn)，羅勒多糖與紫杉醇聯(lián)用對于多個不同組織來源的腫瘤細胞具有抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌等，且羅勒多糖體外細胞實驗中工作濃度未見毒性，羅勒多糖對紫杉醇的增效作用呈劑量依賴性，具有臨床應用前景。
【專利說明】羅勒多糖用作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明具體涉及羅勒多糖在制備抗腫瘤紫杉醇增效劑中的新用途，即羅勒多糖用 作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，屬于中藥對腫瘤化療藥增效的【技術領域】。

【背景技術】
[0002] 腫瘤是嚴重危害人類健康和生命的疾病?；熓抢没瘜W藥物殺滅癌細胞的一種 全身性治療手段，廣泛應用于腫瘤患者的臨床治療。紫杉醇是一種新型抗微管化療藥物，它 通過促進微管蛋白的聚合抑制解聚，保持微管蛋白的穩(wěn)定，阻礙細胞有絲分裂，從而抑制腫 瘤生長。紫杉醇對乳腺癌、卵巢癌、子宮癌、肺癌、胃癌等具有特殊療效。但是紫杉醇不良反 應發(fā)生率較高，并且累積劑量時不良反應癥狀加重，嚴重時甚至發(fā)生過敏性休克，給患者帶 來很多身體上痛苦和心理上的壓力，造成治療上的困難。因而增強化療藥紫杉醇的療效，減 少使用劑量并達到較好的治療效果，提高患者的生活質量，延長腫瘤患者的生存時間一直 是抗腫瘤藥物研究領域的熱點。
[0003] 盡管有研究報道表明部分中藥或中藥提取物具有抗腫瘤作用，但目前中藥提取物 作為化療藥增效劑類的藥物應用比較少見。羅勒多糖應用于抗腫瘤轉移方面的作用已有文 獻報道，可用于多種腫瘤轉移，然而，尚未有報道表明羅勒多糖具有增強化療藥紫杉醇治療 腫瘤療效的作用。


【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種純中藥制劑羅勒多糖的新用途，即羅勒多糖用作紫杉醇增效劑 在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術方案實現(xiàn)的： 本發(fā)明試驗研究表明，羅勒多糖可以增加多種化療藥對于多個不同組織來源的腫瘤細 胞具有抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌、肝癌等。
[0006] 羅勒多糖用作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述腫瘤 為肺癌、喉癌、胃癌、肝癌。
[0007] 所述羅勒多糖與紫杉醇有效活性成分的重量比為1 :2. 5-160。
[0008] 本發(fā)明所使用的羅勒多糖是從植物羅勒（Ocimum basilicum L.)單味藥中采用以 下方法提取分離得到的： 將羅勒藥材用粉碎機粉碎，將粉碎的羅勒粉用85%乙醇脫脂兩次后真空脫水干燥，得 到脫脂羅勒粉。在脫脂羅勒粉中加入適量的水煎煮兩遍后，過濾收集煎煮液，將兩次收集的 煎煮液合并后，放入濃縮罐中進行濃縮，使其相對密度達到1. 08?1. 10,然后將濃縮液冷 卻至4°C，加入5倍液體量的95%乙醇靜置沉淀48小時，收集沉淀物得到羅勒多糖粗品，再 將羅勒多糖粗品加適量水溶解，過濾后濃縮，使其相對密度達到1. 08?1. 10,然后冷卻至 4°C，在濃縮液中加入5倍量95%乙醇靜置沉淀48小時，收集沉淀物，真空干燥脫水即得到 羅勒多糖成品。
[0009] 本發(fā)明所使用的羅勒多糖可以是常規(guī)藥劑學上的任一種劑型。
[0010] 本發(fā)明的有益效果是： (1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)羅勒多糖與化療藥紫杉醇同時使用可以增加化療藥紫杉醇治療多 種腫瘤的效果。研究發(fā)現(xiàn)，羅勒多糖與紫杉醇聯(lián)用對于多個不同組織來源的腫瘤細胞具有 抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌等，且羅勒多糖體外細胞實驗中工作濃 度未見毒性，羅勒多糖對紫杉醇的增效作用呈劑量依賴性，具有臨床應用前景。
[0011] (2)羅勒多糖可以增加紫杉醇對于H22肝癌荷瘤昆明種小鼠的腫瘤生長抑制作 用，具有臨床應用前景。
[0012] (3)羅勒多糖與紫杉醇聯(lián)合應用可以顯著提高H22肝癌腹水瘤昆明種小鼠的平均 生存時間，延長生存率，具有臨床應用前景。
[0013] (4)羅勒多糖與化療藥紫杉醇聯(lián)合應用在小鼠試驗工作濃度均未見肝、腎毒性。

【專利附圖】

【附圖說明】 圖1是羅勒多糖對紫杉醇抑制H22荷瘤小鼠增效實驗結果圖； 圖2是給藥后腹水瘤小鼠Kaplan-Meier生存率曲線圖。

【具體實施方式】
[0014] 以下結合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細的說明。
[0015] 實施例1 羅勒多糖對三種腫瘤細胞的作用 實驗材料：羅勒多糖為采用本發(fā)明提供的提取分離方法得到的羅勒多糖成品；常規(guī)培 養(yǎng)于含10%新生牛血清（NBS)的RPMI1640培養(yǎng)基中的人肺癌細胞株A549、人喉癌細胞株 Ifep-2和人胃癌細胞株SGC-7901。
[0016] 實驗方法：將羅勒多糖成品溶于適量去離子水中配制成l〇mg/ml濃度的溶液，滅 菌后分裝凍存于-20°C冰箱備用。人肺癌細胞株A549、人喉癌細胞株H印-2和人胃癌細胞 株SGC-7901常規(guī)培養(yǎng)于含10%新生牛血清（NBS)的RPMI1640培養(yǎng)基中，于37°C、5%C0 2、飽 和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。用0.25%胰蛋白酶消化傳代。取培養(yǎng)的對數(shù)生長期細胞，用 0. 25%胰蛋白酶消化，收集細胞，細胞計數(shù)，用含10%NBS的RMPI 1640培養(yǎng)液調整細胞密度 至4X104/ml，將細胞懸液加入96孔板內，每孔內加lOOiil。同時在3個孔中只加10%NBS 的RMPI 1640培養(yǎng)液作為空白孔，用于調零。將鋪有細胞的96孔板置于37°C、5%C02、飽和 濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜，待細胞貼壁后，加入待檢藥物羅勒多糖，并設陰性對照孔， 繼續(xù)培養(yǎng)48小時，然后在每孔中加入5mg/ml的MTT lOiil繼續(xù)培養(yǎng)4小時后，吸棄培養(yǎng) 液，每孔加150 yl DMS0,振蕩10分鐘，至結晶完全溶解，用酶標儀檢測A490光吸收值。按 下列公式計算腫瘤細胞生長抑制率：腫瘤細胞生長抑制率=(1-藥物組0D值/對照組0D 值）X100%。實驗結果見表1.1。
[0017] 表1. 1單獨應用羅勒多糖對幾種腫瘤細胞株的抑瘤作用

【權利要求】
1. 羅勒多糖用作紫杉醇增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述腫瘤為 肺癌、喉癌、胃癌、肝癌。
2. 根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖與紫杉醇有效活性成分的 重量比為1 :2. 5-160。
3. 根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖可以是藥劑學上任何一種 劑型。
【文檔編號】A61P35/00GK104382927SQ201410569116
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權日:2014年10月23日
【發(fā)明者】朱慶均, 張丹, 肖麗, 周洪雷, 于華靜, 李路 申請人:山東中醫(yī)藥大學