運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)二氧化硅復(fù)合體及制備和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/二氧化硅復(fù)合體的制備方法，首先二氧化硅顆粒包埋阿霉素藥物；然后靶向性脂質(zhì)體的制備；最后將上述兩種溶液混合，脂質(zhì)與二氧化硅治療比為1:10，后經(jīng)漩渦震蕩5分鐘后，靜止放置24小時(shí)，經(jīng)12000rpm離心后除去上層游離的脂質(zhì)層，將沉淀部分冷凍干燥，既得靶向性脂質(zhì)/SiO2復(fù)合體。本發(fā)明提供一種具有靶向指向作用的穩(wěn)定性好、生物相容性高、緩釋時(shí)間長、載藥量大、藥物包裹效率高的包覆方法。
【專利說明】運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)二氧化硅復(fù)合體及制備和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明是復(fù)合型醫(yī)藥材料制備和應(yīng)用，涉及一種包埋藥物的顆粒型材料，是脂質(zhì)體技術(shù)與無機(jī)顆粒載體技術(shù)的交叉應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]脂質(zhì)體作為藥物載體，具有進(jìn)入體內(nèi)被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，改變被包封藥物的體內(nèi)分布、使藥物在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中蓄積、從而提高藥物的治療指數(shù)、減少藥物治療劑量和降低藥物的毒性。然而，脂質(zhì)體體系是由磷脂、膽固醇等組成的熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，弱穩(wěn)定性限制了它的使用，影響其作為藥物載體的應(yīng)用。脂質(zhì)體在存儲(chǔ)期間，磷脂易氧化水解，膜層易相變，小粒徑脂質(zhì)體易相互聚集融合，包裹其中的藥物易發(fā)生泄漏。二氧化硅是一種具有良好生物兼容性的材料，通過控制前體硅酸四乙酯水解反應(yīng)制備不同形貌的二氧化硅納米粒子(如介孔二氧化硅和二氧化硅空心球)，實(shí)現(xiàn)作為藥物載體的用途。
[0003]阿霉素作為臨床使用頻繁的化療藥物，具有抗癌譜廣、化療指數(shù)高，其副作用存在有骨髓移植、惡心、嘔吐、脫發(fā)、高熱等癥狀，累計(jì)劑量大時(shí)會(huì)發(fā)生心肌壞死甚至充血性心力衰竭。使用二氧化硅材料包埋阿霉素藥物形成的納米藥物具有緩釋功能，延長藥物作用時(shí)間，增加在體內(nèi)的半衰期，保護(hù)被包埋的藥物分子不受體內(nèi)酶的破壞，增強(qiáng)生物相容性等特點(diǎn)。靶向性脂質(zhì)體是指在脂質(zhì)體表面聯(lián)接識(shí)別分子(如Lyp-1、RPARPAR、RGERPPR和ang1prep-2等)，通過識(shí)別分子特異性專一地與靶細(xì)胞表面的互補(bǔ)相互作用，將脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)到靶區(qū)釋放藥物。
[0004]本發(fā)明解決的技術(shù)問題是靶向脂質(zhì)體載體穩(wěn)定性弱，易氧化的問題。S12作為內(nèi)殼層，靶向脂質(zhì)體作為外殼層復(fù)合包載阿霉素的途徑，提供一種具有靶向指向作用的穩(wěn)定性好、生物相容性高、緩釋時(shí)間長、載藥量大、藥物包裹效率高的包覆方法，同時(shí)工藝簡(jiǎn)單、成本低的優(yōu)點(diǎn)。復(fù)合結(jié)構(gòu)克服脂質(zhì)體不穩(wěn)定的特點(diǎn)，同時(shí)又能發(fā)揮靶向性脂質(zhì)體細(xì)胞靶向的功能。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明針對(duì)脂質(zhì)體包封藥物穩(wěn)定性的不足，使用硅酸四乙酯水解后形成的二氧化硅殼層包載水溶性藥物分子，而后靶向性脂質(zhì)分子物理吸附于藥物顆粒表層形成復(fù)合結(jié)構(gòu)，并使其具有特定的組織靶向性。
[0006]一種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/ 二氧化硅復(fù)合體的制備方法，其特征在于，具體步驟如下:
(I) 二氧化硅顆粒包埋阿霉素藥物:
將10體積的環(huán)己烷、2.2?2.6體積的聚乙二醇對(duì)異辛基苯基醚和2.0?2.4體積的正己醇混合均勻，向混勻后的混合液中加入0.5?I體積、濃度為10-20mg/mL的氟化鈉溶液，攪拌均勻后形成反乳相微乳液；向該反相微乳液中加入0.1?0.13體積、0.01?0.05mol/L的阿霉素溶液和0.13?0.27體積的正硅酸乙酯(TEOS)，反應(yīng)完全后得到包埋阿霉素的二氧化硅納米顆粒(DOX-SiNP)微乳液體系；在破乳前加入0.02?0.05的氨丙基三乙氧基硅烷，室溫下攪拌至反應(yīng)完全；然后加入乙醇破乳，離心收集納米顆粒，洗滌后制得包埋藥物阿霉素的Si02m米顆粒；
(2)革El向性脂質(zhì)體的制備:
將腫瘤細(xì)胞穿膜肽溶于PH7.0的2毫升PBS溶液中，取馬來酰亞胺-聚乙二醇-磷脂復(fù)合物(DSPE-PEG-MAL)，其摩爾當(dāng)量為腫瘤細(xì)胞穿膜肽的0.8倍，溶于0.5毫升二甲基甲酰胺(DMF)，加入多肽水溶液中，超聲去除氣泡，攪拌反應(yīng)I小時(shí)至DSPE-PEG-Mal反應(yīng)完全，透析，截留分子量3500Da，透析介質(zhì)為水，去除過量的腫瘤細(xì)胞穿膜肽和DMF，冷凍干燥，得到腫瘤細(xì)胞穿膜肽-PEG-DSPE材料；將處方的摩爾組成為氫化大豆磷脂/膽固醇/mPEG-DSPE/RGERPPR-PEG-DSPE=55:45:2:1,將各組分用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60度旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的靶向性脂質(zhì)體；
(3)靶向性脂質(zhì)/S12復(fù)合體的制備:
將上述兩種溶液混合，脂質(zhì)與二氧化硅治療比為1:10，后經(jīng)漩渦震蕩5分鐘后，靜止放置24小時(shí)，經(jīng)12000rpm離心后除去上層游離的脂質(zhì)層，將沉淀部分冷凍干燥，既得靶向性脂質(zhì)/3102復(fù)合體。
[0007]所述的腫瘤靶向細(xì)胞穿膜肽為C-RGERPPR，Lyp-1，RPARPAR，RGERPPR，cRGD，NGR,ang1prep-2中的一種或其組合。
[0008]一種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/ 二氧化硅復(fù)合體，其特征在于，根據(jù)上述任一權(quán)利要求所述方法制備得到。
[0009]一種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/ 二氧化硅復(fù)合體針對(duì)腦膠質(zhì)瘤、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌治療的應(yīng)用。
[0010]本發(fā)明解決的技術(shù)問題是克服靶向性脂質(zhì)體穩(wěn)定性弱，易氧化的問題。靶向脂質(zhì)體復(fù)合二氧化硅包載阿霉素，提供一種具有靶向指向作用的穩(wěn)定性好、生物相容性高、緩釋時(shí)間長、載藥量大、藥物包裹效率高的包覆方法，同時(shí)工藝簡(jiǎn)單、成本低的優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明有如下優(yōu)勢(shì):
該方法使用硅酸四乙酯水解后的穩(wěn)定S12S內(nèi)殼層，增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性，同時(shí)具有藥物緩釋效果；靶向性脂質(zhì)體作為外殼層包覆于S12ODOX外層，賦予特異性的細(xì)胞靶向性。
[0011]操作簡(jiǎn)便，成本低，容易工業(yè)化實(shí)現(xiàn)；
本復(fù)合結(jié)構(gòu)具有高生物相容性，也可包裹CdS量子點(diǎn)等發(fā)光材料，輕易實(shí)現(xiàn)靶向組織熒光成像。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1為實(shí)施例1所得的TEM照片。
[0013]圖2為實(shí)施例3所得的TEM照片。
[0014]圖3為實(shí)施例5所得的TEM照片。
[0015]圖4為實(shí)施例1，3，5所得的藥物釋放曲線。
[0016]其中方框?yàn)镾12ODox,圓圈為mPEG-DSPE/Si02@Dox, 三角為細(xì)胞穿膜月太-PEG-DSPE/S12ODox。
[0017]圖5為實(shí)施例2所得的體外靶向分布數(shù)據(jù)圖片。
[0018]圖6為實(shí)施例4所得的體外靶向分布數(shù)據(jù)圖片。
[0019]圖7為實(shí)施例6所得的體外靶向分布數(shù)據(jù)圖片。
[0020]圖8為實(shí)施例1，2，3載藥顆粒的細(xì)胞抑制曲線。
[0021]其中黑色方框?yàn)楸话驳腄ox，左斜線方框?yàn)镾12ODox,右斜線方框?yàn)閙PEG-DSPE/Si02iDox,交叉線方框?yàn)榧?xì)胞穿膜肽-PEG-DSPE/S12ODox。

【具體實(shí)施方式】
[0022]以下通過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步描述。以下的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不限制本發(fā)明的范圍。
[0023]實(shí)施例1:
(1)S12包埋阿霉素:將環(huán)己烷5.5g、曲拉通TX100 2g和正己醇1.6g混合均勻，向混勻后的混合液中加入10yL 10mg/mL的氟化鈉溶液作為分散相，攪拌均勻后形成反相微乳液；向該反相微乳液中加入80 μ L 0.05mol/L的阿霉素溶液和100 μ L正娃酸乙醋，反應(yīng)24h后得到DOX-SiNP微乳液體系；
(2)功能化基團(tuán)的修飾S12:采用反相微乳液體系中功能化基團(tuán)同步修飾方法在上述制得的DOX-SiNP表面修飾氨基基團(tuán)，即在上述反應(yīng)24h后的DOX-SiNP微乳液體系中加入20 μ L的APTES，室溫?cái)嚢枥^續(xù)反應(yīng)24h后，加入乙醇破乳，離心收集其中的納米顆粒，并依次用乙醇、水洗滌收集的納米顆粒，冷卻干燥后制得包埋阿霉素的表面氨基化的二氧化娃納米顆粒(Si02@Dox)，其形貌照片如圖1所示
實(shí)施例2:
將實(shí)施例1中的S12ODox配置成為10mg/ml的乙醇分散液，將FITC-APTES配置成為0.lmg/ml的乙醇溶液，將上述溶液等比例混合，反應(yīng)4h后離心分離去除游離的FITC-APTES，可FITC-APTES修飾S12ODox表面用于激光共聚焦成像及流式細(xì)胞計(jì)數(shù)。
[0024]實(shí)施例3:
一種將實(shí)施例1制得的S12ODox納米粒子與普通長循環(huán)脂質(zhì)體復(fù)合。具體步驟為:將實(shí)施例1制備得到的S12ODox用超凈水離心清洗一次，將其配置成2mg/ml的超純水分散液；將mPEG-DSPE用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加超純水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60度旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的脂質(zhì)體，配置成為0.2mg/ml的超純水分散液；分別取上述溶液各Iml，1:1等比例混合，靜止放置24h ;使用12000rpm離心后除去溶液層，將沉淀層冷凍干燥，得到復(fù)合長循環(huán)脂質(zhì)體的S12ODox納米顆粒(mPEG-DSPE/Si02@Dox)，其形貌如圖2所示。
[0025]實(shí)施例4:
一種將實(shí)施例2制得的熒光性S12ODox納米粒子與普通長循環(huán)脂質(zhì)體復(fù)合。具體步驟為:將實(shí)施例2制備得到的熒光性S12ODox用超凈水離心清洗一次，將其配置成2mg/ml的超純水分散液；將mPEG-DSPE用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加超純水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60°C旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的脂質(zhì)體，配置成為0.2mg/ml的超純水分散液；分別取上述溶液各Iml，1:1等比例混合，靜止放置24h ;使用12000rpm離心后除去溶液層，將沉淀層冷凍干燥，得到熒光性復(fù)合長循環(huán)脂質(zhì)體的S12ODox納米顆粒(mPEG-DSPE/Si02@Dox)。
[0026]實(shí)施例5:
一種將實(shí)施例1制得的S12ODox納米粒子與革E向性長循環(huán)脂質(zhì)體(RGERPPR-PEG-DSPE)復(fù)合。具體步驟為:將實(shí)施例1制備得到的S12ODox用超凈水離心清洗一次，將其配置成lmg/ml的分散液；將處方組成為氫化大豆磷脂/膽固醇/ mPEG-DSPE/RGERPPR-PEG-DSPE=55:45:2:1, molimol的脂質(zhì)用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60度旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的脂質(zhì)體，配置成為0.lmg/ml的水溶液；分別取上述溶液各Iml ,1:1等比例混合，靜止放置24h ;使用12000rpm離心后除去溶液層，將沉淀層冷凍干燥，得到靶向性長循環(huán)脂質(zhì)體復(fù)合的S12ODox納米顆粒(RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox)其形貌如圖3所示。
[0027]實(shí)施例6:
一種將實(shí)施例2制得的S12ODox納米粒子與革E向性長循環(huán)脂質(zhì)體(RGERPPR-mPEG-DSPE)復(fù)合。具體步驟為:將實(shí)施例2制備得到的熒光性S12ODox粒子用超凈水離心清洗一次，將其配置成2mg/ml的分散液；將處方組成為氫化大豆磷脂/膽固醇 / mPEG-DSPE / RGERPPR-PEG-DSPE= 55:45:2:1，mol:mol)的脂質(zhì)用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加超純水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60度旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的脂質(zhì)體，配置成為0.2mg/ml的水溶液；分別取上述溶液各Iml ,1:1等比例混合，靜止放置24h ;使用12000rpm離心后除去溶液層，將沉淀層冷凍干燥，得到靶向性長循環(huán)脂質(zhì)體復(fù)合的熒光S12ODox納米顆粒(RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox)。
[0028]納米粒子的DOX釋放行為考察:將實(shí)施例1，3，5制得的S12ODox, mPEG-DSPE/S12ODox 和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox，溶于 ImL PBS(pH 7.4)中，然后裝于透析袋中于37°C、100r/min振蕩的條件下，在9mL PBS(pH 7.4)中進(jìn)行透析。每隔一段時(shí)間取出200 μ L透析液，同時(shí)補(bǔ)充200 μ L PBS以維持透析液的總體積不變。用紫外-可見分光光度計(jì)檢測(cè)透析液中DOX的累積釋放量，檢測(cè)波長為570nm，檢測(cè)結(jié)果以時(shí)間-累積釋放率下的釋放曲線表示，如圖4所示。由圖4可見，在前8小時(shí)內(nèi)，累積釋放率與時(shí)間呈近似線性的變化，S12ODOX釋放速度較快，累積釋放率為15%，mPEG-DSPE/S12ODox和RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox累積釋放率達(dá)到8%和7.5%。在8小時(shí)至32小時(shí)時(shí)間段內(nèi)，釋放速度相對(duì)減緩，Si02@D0X，mPEG-DSPE/S12ODox 和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox 累積釋放率達(dá)到18%，14%和10.7%ο在32小時(shí)至126小時(shí)時(shí)間段內(nèi)，釋放速度進(jìn)一步減緩mPEG-DSPE/S12ODox 和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox 累積釋放率達(dá)到 19.8 %，14.8% 和10.9%。
[0029]納米粒子的體外靶向性考察:在無血清培基中(200 μ L)，將實(shí)施例2，4，6制得的具有熒光發(fā)光性能 Si02@D0X，mPEG-DSPE/Si02@D0X，和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox 分別與靶向性細(xì)胞U87mg (105/mL)在0)2孵育箱下25°C孵育I hour ;然后用SOOyL的PBS溶液液離心清洗細(xì)胞兩次，將非特異性吸附在細(xì)胞表面的納米顆粒清除；第二次離心后，用200 yL的PBS重新將細(xì)胞分散并在在激光共聚焦顯微鏡下觀察S12ODOX,mPEG-DSPE/S12ODOX，和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox,對(duì)靶向性細(xì)胞 U87mg 的識(shí)別情況，其觀察結(jié)果如圖5所示。由圖5中的未修飾脂質(zhì)體分子的S12，即本發(fā)明實(shí)施例1制得的S12ODOX對(duì)U87mg細(xì)胞的吞噬率為45%，mPEG-DSPE/S12ODOX對(duì)細(xì)胞的吞噬率為73%，RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODOX對(duì)細(xì)胞的吞噬率為90% ;這說明實(shí)施例3中修飾到Si納米顆粒表面的脂質(zhì)體會(huì)增強(qiáng)U87mg細(xì)胞攝取的被動(dòng)EPR效應(yīng)。與實(shí)施例5中比較，脂質(zhì)體表面的穿膜肽介導(dǎo)作用進(jìn)一步增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)于藥物顆粒的胞吞效果。
[0030]納米粒子對(duì)腫瘤細(xì)胞靶向殺傷效果的評(píng)價(jià):參照實(shí)施例1，3，5的步驟制備S12ODox, mPEG-DSPE/S12ODox 和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox。為考察其選擇性殺傷效果，選取對(duì)U87mg細(xì)胞，以2X104個(gè)細(xì)胞/孔的濃度接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)(每孔100 μ L培基)，加入10 UL不同濃度的藥物材料，在無血清培基中37°C、5%的CO2條件下孵育32小時(shí)；共孵育后75 μ L無血清培養(yǎng)基溶液去除，補(bǔ)充含10%血清的新鮮培基至100 μ L，繼續(xù)培養(yǎng)4h ；10yL Cell Counting Kit單溶液細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒加入每孔，孵育4h ；直接在酶標(biāo)儀490nm處讀數(shù)據(jù)，計(jì)算出細(xì)胞在不同濃度作用下的存活率。由圖6可見，游離阿霉素藥物、Si02@Dox、mPEG-DSPE/S12ODox 和 RGERPPR-PEG-DSPE/S12ODox 在 10 ?60 μ g/mL的濃度范圍內(nèi)U87mg細(xì)胞的影響。隨著藥物濃度增大，細(xì)胞的存活率呈下降趨勢(shì)，由于游離阿霉素藥物與細(xì)胞直接接觸，32小時(shí)后U87mg細(xì)胞存活率為56.4%，由于二氧化硅及脂質(zhì)體的包覆作用，藥物具有緩釋效果，對(duì)于細(xì)胞的殺傷率與等當(dāng)量游離阿霉素相比有所下降。由圖7可見，細(xì)胞殺傷率高低順序依次為RGERPPR-PEG-DSPE/Si02@DoX >mPEG-DSPE/S12ODox > S12ODox,溶液在60 μ g/mL的濃度時(shí)，其對(duì)靶向的U87mg細(xì)胞的存活率為72%相比于mPEG-DSPE/S12ODox的存活率78%和S12ODox的存活率81%，殺傷效果有所增加。
【權(quán)利要求】
1.一種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/ 二氧化硅復(fù)合體的制備方法，其特征在于，具體步驟如下: (1)二氧化硅顆粒包埋阿霉素藥物: 將10體積的環(huán)己烷、2.2?2.6體積的聚乙二醇對(duì)異辛基苯基醚和2.0?2.4體積的正己醇混合均勻，向混勻后的混合液中加入0.5?I體積、濃度為10-20mg/mL的氟化鈉溶液，攪拌均勻后形成反乳相微乳液；向該反相微乳液中加入0.1?0.13體積、0.01?0.05mol/L的阿霉素溶液和0.13?0.27體積的正硅酸乙酯(TEOS)，反應(yīng)完全后得到包埋阿霉素的二氧化硅納米顆粒(DOX-SiNP)微乳液體系；在破乳前加入0.02?0.05的氨丙基三乙氧基硅烷，室溫下攪拌至反應(yīng)完全；然后加入乙醇破乳，離心收集納米顆粒，洗滌后制得包埋藥物阿霉素的Si02m米顆粒； (2)革El向性脂質(zhì)體的制備: 將腫瘤細(xì)胞穿膜肽溶于PH7.0的2毫升PBS溶液中，取馬來酰亞胺-聚乙二醇-磷脂復(fù)合物(DSPE-PEG-MAL)，其摩爾當(dāng)量為腫瘤細(xì)胞穿膜肽的0.8倍，溶于0.5毫升二甲基甲酰胺(DMF)，加入多肽水溶液中，超聲去除氣泡，攪拌反應(yīng)I小時(shí)至DSPE-PEG-Mal反應(yīng)完全，透析，截留分子量3500Da，透析介質(zhì)為水，去除過量的腫瘤細(xì)胞穿膜肽和DMF，冷凍干燥，得到腫瘤細(xì)胞穿膜肽-PEG-DSPE材料；將處方的摩爾組成為氫化大豆磷脂/膽固醇/mPEG-DSPE/RGERPPR-PEG-DSPE=55:45:2:1,將各組分用氯仿溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除溶劑，加水溶液至脂質(zhì)膜中，超聲分散并在水浴60度旋轉(zhuǎn)震蕩，得脂質(zhì)體混懸液；擠壓過50nm孔徑大小的碳酸脂膜，得到粒徑大小均勻的靶向性脂質(zhì)體； (3)靶向性脂質(zhì)/S12復(fù)合體的制備: 將上述兩種溶液混合，脂質(zhì)與二氧化硅治療比為1:10，后經(jīng)漩渦震蕩5分鐘后，靜止放置24小時(shí)，經(jīng)12000rpm離心后除去上層游離的脂質(zhì)層，將沉淀部分冷凍干燥，既得靶向性脂質(zhì)/3102復(fù)合體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/二氧化硅復(fù)合體的制備方法，其特征在于，所述的腫瘤靶向細(xì)胞穿膜肽為C-RGERPPR，Lyp-1, RPARPAR，RGERPPR，cRGD，NGR,ang1prep-2中的一種或其組合。
3.—種運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/ 二氧化硅復(fù)合體，其特征在于，根據(jù)上述任一權(quán)利要求所述方法制備得到。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述運(yùn)載阿霉素的靶向性脂質(zhì)/二氧化硅復(fù)合體針對(duì)腦膠質(zhì)瘤、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌治療的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K47/42GK104434801SQ201410661330
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月19日
【發(fā)明者】何丹農(nóng), 嚴(yán)一楠, 王萍, 夏智偉, 顏娟, 金彩虹 申請(qǐng)人:上海納米技術(shù)及應(yīng)用國家工程研究中心有限公司