資木瓜提取物在制藥中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種資木瓜提取物在制藥中的應(yīng)用，具體應(yīng)用表現(xiàn)為在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠致熱；或內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的PGE2升高；或內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的IL-1β升高；或內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的TNF-α升高；或內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠血清中的IL-1β升高的藥中的應(yīng)用。結(jié)果表明，資木瓜總黃酮能有效抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠致熱作用，與對(duì)抗發(fā)熱激活物，抑制內(nèi)生致熱源如白細(xì)胞介素IL-1β、腫瘤壞死因子TNF-α的致熱作用和減少致熱介質(zhì)PGE2和IL-1β在中樞的合成與釋放有關(guān)，具有明顯的解熱作用。
【專利說(shuō)明】資木瓜提取物在制藥中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及資木瓜提取物的新用途，具體涉及其提取物中槲皮素、槲皮素3-半乳糖苷、槲皮素3-鼠李糖苷等在制藥領(lǐng)域中的新用途。
技術(shù)背景
[0002]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研宄證實(shí)，發(fā)熱是機(jī)體的一種復(fù)雜生理反應(yīng)，當(dāng)外源的病原(內(nèi)毒素或病毒)侵犯機(jī)體后，可導(dǎo)致熱性細(xì)胞因子釋放，致熱細(xì)胞因子之間相互調(diào)節(jié)，識(shí)別靶細(xì)胞受體，尤其是前下丘腦視前葉區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞，受體介導(dǎo)活化磷脂酶八，并以花生四烯酸為底物激活環(huán)氧化酶通路，產(chǎn)生中樞發(fā)熱介質(zhì)前列腺素(^⑶一。一些細(xì)胞因子亦可直接使環(huán)氧化酶表達(dá)和花生四烯酸代謝增加，產(chǎn)生前列腺素？現(xiàn)2容易彌散透過(guò)血腦屏障，從而影響體溫調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)元，導(dǎo)致體溫上升。目前認(rèn)為，白細(xì)胞介素-1〔11-0、腫瘤壞死因子
),幾-6、干擾素(1即)屬致熱性細(xì)胞因子。
[0003]資木瓜來(lái)源于薔薇科植物貼梗海棠01361101116168 8^601088 (8^661:) ^8^81的干燥近成熟果實(shí)。資木瓜為常用中藥，味酸，性溫，入肝脾經(jīng)。具有平肝舒筋，和胃化濕之功效，用于濕痹拘攣、腰膝酸重疼痛、吐瀉轉(zhuǎn)筋、腳氣水腫等的治療。現(xiàn)代研宄表明，資木瓜含有皂苷、有機(jī)酸、黃酮、生物堿、糖類、鞣質(zhì)、果膠、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等多種成分，具有抗炎鎮(zhèn)痛、保肝、胃腸解痙、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等多種藥理活性。資木瓜長(zhǎng)期以來(lái)被用作祛風(fēng)濕中藥，是中醫(yī)治療“痹癥”復(fù)方用藥中的主要成分，對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有顯著療效。但是，迄今沒(méi)有對(duì)其解熱作用的相關(guān)報(bào)導(dǎo)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供資木瓜總黃酮提取物的新用途，即在制備解熱藥中的新應(yīng)用。
[0005]實(shí)際上本發(fā)明涉及資木瓜總黃酮提取物包括槲皮素、槲皮素3-半乳糖苷、槲皮素
3-鼠李糖苷一種或多種，該資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠致熱的藥中的應(yīng)用。
[0006]涉及資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠體溫升高藥中的應(yīng)用。
[0007]涉及資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中？現(xiàn)2升高藥中的應(yīng)用。
[0008]涉及資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中幾-1 0升高藥中的應(yīng)用。
[0009]涉及資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠血清中1^-0升高藥中的應(yīng)用。
[0010]涉及資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠血清中11-10升高藥中的應(yīng)用。為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用資木瓜提取物的藥理試驗(yàn)及結(jié)果來(lái)說(shuō)明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。
[0011]1.實(shí)驗(yàn)材料
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物級(jí)30大鼠，體重180『2208，由三峽大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(動(dòng)物質(zhì)量合格證書:42010200000022^
[0012]1.2藥物和試劑:資木瓜總黃酮(純度為96.63^0，臨用時(shí)用雙蒸水配成所需濃度，溶液邱7.4 ；內(nèi)毒素(193)，81卿21公司；大鼠白介素-10 (11-1 0 )、腫瘤壞死因子(1^- 3 )、？622^1？0檢測(cè)試劑盒，8181118公司；10342%型電子體溫計(jì)，歐姆龍公司。
[0013]2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1動(dòng)物分組:隨機(jī)分成6組，空白組、模型組、對(duì)乙酰氨基酚組、資木瓜總黃酮高劑量組(200呢/!^)、資木瓜總黃酮中劑量組(100呢/!^)、資木瓜總黃酮低劑量組(50呢/!^)?？瞻捉M不作任何處理。
[0014]2.2實(shí)驗(yàn)方案:除空白組外，其余各組均腹腔注射70 4/?的內(nèi)毒素仏⑶建立大鼠發(fā)熱模型。造模后半小時(shí)開(kāi)始灌胃給藥，每半小時(shí)灌藥一次，每半小時(shí)測(cè)量一次肛溫，4小時(shí)后最后1次測(cè)肛溫后立即將動(dòng)物快速斷頭取腦，以灰結(jié)節(jié)及視交義之間的中心點(diǎn)為中心確定下丘腦的位置，切取大鼠下丘腦，下丘腦組織此法檢測(cè)？現(xiàn)2、幾-10含量。同時(shí)留取外周血，￡118^法檢測(cè)丁0和11-1 0含量。
[0015]3.結(jié)果
3.1資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠體溫的作用(見(jiàn)圖1)
內(nèi)毒素致熱作用隨著時(shí)間增強(qiáng)，模型組4小時(shí)后接近381，與空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(代0.05):用藥后，資木瓜總黃酮高、中、低劑量組體溫降低明顯，最低可達(dá)341，與模型組相比有顯著性差異(代0.05),結(jié)果表明，資木瓜總黃酮能有效抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠致熱作用。
[0016]3.2資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠下丘腦組織中？(?和11-10的影響(見(jiàn)圖2,3)；
內(nèi)毒素致熱4小時(shí)后，模型組下丘腦組織？現(xiàn)2、11-10含量明顯上升，與空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(代0.05)；用藥后，資木瓜總黃酮高、中、低劑量組下丘腦組織？現(xiàn)2、
11-10含量明顯降低，與模型組相比有顯著性差異(代0.05),
結(jié)果表明，資木瓜總黃酮能有效減少致熱介質(zhì)？現(xiàn)2和11-10在中樞的合成與釋放。
[0017]3.3資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠血清中I即-0和1卜1 0的影響(見(jiàn)圖4,5), 內(nèi)毒素致熱4小時(shí)后，模型組外周血清中1即-0和11-10含量明顯上升，與空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(代0.05)；用藥后，資木瓜總黃酮高、中、低劑量組下丘腦組織1^-0和幾-10含量明顯降低，與模型組相比有顯著性差異(代0.05),結(jié)果表明，資木瓜總黃酮能有效減少致熱介質(zhì)了即-0和11-10在外周的合成與釋放。
[0018]4 結(jié)論
綜上所述，資木瓜總黃酮能有效抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠致熱作用，與對(duì)抗發(fā)熱激活物，抑制內(nèi)生致熱源如白細(xì)胞介素11-10、腫瘤壞死因子1即-0的致熱作用和減少致熱介質(zhì)？現(xiàn)2和11-10在中樞的合成與釋放有關(guān)，具有明顯的解熱作用。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019]圖1為資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠體溫的作用。
[0020]圖2為資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠下丘腦組織中？現(xiàn)2 (^/1)的影響。
[0021]圖3資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠下丘腦組織中幾-1 0 (^/1)的影響。
[0022]圖4資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠血清中1即-0的影響。
[0023]圖5資木瓜總黃酮對(duì)內(nèi)毒素致熱大鼠血清中11-1 0 (^/1)的影響。
具體實(shí)施例
[0024]下面將描述本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。
[0025]實(shí)施例1
取資木瓜飲片504，放入提取罐中，加1.0%纖維素酶進(jìn)行酶解，酶解溫度控制在551，酶解5分鐘；將酶解后分離得到的沉淀物，放入提取罐中，加5001的50%乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，上0101大孔吸附樹(shù)脂柱，用水充分洗脫至流出液為澄清且無(wú)還原糖反應(yīng)后，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮全無(wú)醇味，濾過(guò)，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)邱值為9.0，加2倍量水飽和正丁醇萃取兩次，合并正丁醇液，減壓濃縮至近干，減壓干燥，得資木瓜醇提取物0.851?，經(jīng)測(cè)定，其中資木瓜總皂苷含量為51.9%，制成膠囊劑。
[0026]實(shí)施例2:
取資木瓜飲片504，放入提取罐中，加1.0%纖維素酶進(jìn)行酶解，酶解溫度控制在551，酶解時(shí)間至少5分鐘；將酶解后分離得到的沉淀物，放入提取罐中，加5001的70%乙醇提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，上0101大孔吸附樹(shù)脂柱，用水充分洗脫至流出液為澄清且無(wú)還原糖反應(yīng)后，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮全無(wú)醇味，濾過(guò)，加入10%氫氧化鈉溶液調(diào)邱值為8.0，加1倍量水飽和正丁醇萃取三次，合并正丁醇液，減壓濃縮至近干，減壓干燥，得資木瓜醇提取物1.01匕，經(jīng)測(cè)定，其中資木瓜總皂有含量為55.2%，用標(biāo)準(zhǔn)凹沖壓成片。
[0027]實(shí)施例3:
取資木瓜飲片504，放入提取罐中，加1.0%纖維素酶進(jìn)行酶解，酶解溫度控制在551，酶解時(shí)間至少5分鐘；將酶解后分離得到的沉淀物，放入提取罐中，加5001 80%乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，上0101大孔吸附樹(shù)脂柱，用水充分洗脫至流出液為澄清且無(wú)還原糖反應(yīng)后，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮至無(wú)醇味，濾過(guò)，加入10%氫氧化鉀溶液調(diào)邱值為9.0，加2倍量水飽和正丁醇萃取兩次，合并正丁醇液，減壓濃縮至近干，減壓干燥，得資木瓜醇提取物0.75^,經(jīng)測(cè)定，其中資木瓜總皂苷含量為53.2%，消毒制成口服溶液劑。
[0028]實(shí)施例4:
在凈化車間，將上述資木瓜總皂苷與適宜輔料混合后，加入70%乙醇作為潤(rùn)濕劑，擠壓制粒，干燥，填充膠囊，制成膠囊劑，每粒膠囊含藥量為0.1-0.3克，患者每次服用1-4粒，每日服用2-3次。
【權(quán)利要求】
1.資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠致熱的藥中的應(yīng)用。
2.資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的？現(xiàn)2升高的藥中的應(yīng)用。
3.資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的11-10升高的藥中的應(yīng)用。
4.資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠下丘腦組織中的1^-0升高的藥中的應(yīng)用。
5.資木瓜提取物在制備治療抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)致熱大鼠血清中的11-10升高的藥中的應(yīng)用。
6.一種權(quán)利要求1~5中任意一項(xiàng)所述的資木瓜提取物為資木瓜總黃酮提取物，其中，資木瓜總黃酮提取物包括槲皮素、槲皮素3-半乳糖苷、槲皮素3-鼠李糖苷中的一種或多種。
【文檔編號(hào)】A61K36/73GK104491047SQ201410755413
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月11日
【發(fā)明者】李世剛, 張永琦, 柳蔚, 喻玲玲, 賈云莉, 曾小威, 陳先勇, 鄭倩倩 申請(qǐng)人:三峽大學(xué)