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      一種豬博卡病毒卵黃抗體口服液及其制備方法

      文檔序號(hào):773503閱讀:328來源:國(guó)知局
      一種豬博卡病毒卵黃抗體口服液及其制備方法
      【專利摘要】本發(fā)明公開了一種豬博卡病卵黃抗體口服液及其制備方法。其配方在于,包括以下按照體積比計(jì)算的原料:含卵黃抗體的全蛋水溶液95-105、辛酸0.2-0.3、甲醛0.2-0.3、硫柳汞0.01-0.02;還包括800-1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。這種方法制備的卵黃抗體口服液不僅使生產(chǎn)過程中損失少、免疫活性物質(zhì)強(qiáng)多、生物活性高、無(wú)臨床副作用,同時(shí),含有蛋清中大量的各種蛋白質(zhì),可以減少口服時(shí)對(duì)抗體的不良影響。
      【專利說明】一種豬博卡病毒卵黃抗體口服液及其制備方法

      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001] 本發(fā)明屬于豬用生物制品【技術(shù)領(lǐng)域】,涉及一種豬博卡病卵黃抗體口服液及其制備 方法。

      【背景技術(shù)】
      [0002] 豬博卡病毒(Bocavirus)隸屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒亞科的博卡病毒屬,這種 DNA病毒是我國(guó)最近兩年發(fā)現(xiàn)的,具有局部高發(fā)性、高死率、高傳染性等臨床流行特征,主要 是針對(duì)于仔豬,在仔豬斷奶后易引發(fā)多系統(tǒng)衰竭綜合征、傳染性胃腸炎、流行性腹瀉等病混 合感染,造成高死亡率。
      [0003] 卵黃抗體IgY是的一種免疫球蛋白Ig,IgY在功能上相當(dāng)于哺乳動(dòng)物IgG,但結(jié)構(gòu) 上有所不同,具有典型的的免疫球蛋白的空間構(gòu)象。卵黃抗體具有很多優(yōu)越性。(1)由于鳥 類與哺乳類動(dòng)物種系發(fā)生學(xué)的差距,鳥類更適于生產(chǎn)抗哺乳動(dòng)物抗原的特異性抗體。卵黃 抗體不會(huì)激發(fā)補(bǔ)體系統(tǒng),不與抗哺乳動(dòng)物抗原的抗體發(fā)生反應(yīng),不與哺乳動(dòng)物和細(xì)菌的Fc 受體結(jié)合,這在免疫診斷中具有重要意義。(2)卵黃抗體作為一種具有生物活性的免疫球蛋 白,在貯存、生產(chǎn)、加工、攝食及消化過程中保證其穩(wěn)定性是非常關(guān)鍵的。多項(xiàng)試驗(yàn)表明,IgY 具有較好的穩(wěn)定性,耐酸、耐堿、耐熱。卵黃抗體較易保存,4°C條件下存放5年或室溫條件 下存放6個(gè)月對(duì)抗體活性無(wú)明顯影響。


      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0004] 本發(fā)明提供一種豬博卡病毒卵黃抗體口服液及其制備方法,解決注射用的豬博卡 病毒卵黃抗體使用不方便的問題。
      [0005] 本發(fā)明的目的是通過以下形式實(shí)現(xiàn)的: 一種豬博卡病卵黃抗體口服液,包括以下按照體積比計(jì)算的原料:含卵黃抗體的全蛋 水溶液95-105、辛酸0. 2-0. 3、甲醛0. 2-0. 3、硫柳汞0. 01-0. 02 ;還包括800-1000單位/毫 升口服液的青鏈霉素。
      [0006] 制備步驟是: 1) 采用豬博卡病毒滅活疫苗對(duì)雞只進(jìn)行強(qiáng)化免疫:采用三次免疫程序,每次間隔10 天,每只雞每次疫苗用量為2ml,當(dāng)抗體效價(jià)達(dá)到1:(128-256)時(shí),進(jìn)行高免蛋收集; 2) 使用0. 1-0. 2%新潔爾滅對(duì)高免蛋進(jìn)行消毒; 3) 將2)中高免蛋的全蛋液進(jìn)行乳化,乳化時(shí)間7-10min,然后加入pH為4. 2-4. 3的、 溫度為4-6°C的鹽酸酸化水,鹽酸酸化水的加入量為全蛋液體積的5. 5-6. 5倍,混勻后,降 溫至3-5°C,靜置18-24小時(shí); 4) 取3)中的上層清液,升溫到25-32°C,加入辛酸,攪拌l_2h,靜置10-12h,過濾;其中 辛酸體積量:上層清液體積量為(〇. 2-0. 3) : (95-105); 5) 加入甲醛、硫柳汞、青鏈霉素,使卵黃抗體的全蛋水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞的體積 比為(95-105) : (0· 2-0. 3) : (0· 2-0. 3) : (0· 01-0. 02),青鏈霉素的含量為 800-1000 單位 / 暈升口服液; 6)分裝,保存。
      [0007] 步驟4)過濾時(shí)依次通過I. 0mm、0. 45mm、0. 22mm的濾膜進(jìn)行過濾。
      [0008] 本發(fā)明通過對(duì)高免蛋全蛋提取、低溫酸化處理、辛酸處理后得到澄清卵黃抗體口 服液。本發(fā)明將全蛋使用到卵黃抗體的提取中,可以直接在臨床上進(jìn)行口服使用,蛋清中含 有大量的各類蛋白質(zhì),可充分利用高免蛋的價(jià)值,提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力和應(yīng)激能力,生物 利用度高,具有生物活性不受影響的優(yōu)點(diǎn)。

      【具體實(shí)施方式】[0009]實(shí)施例1 : 一種豬博卡病毒卵黃抗體口服液的配方包括以下原料:含卵黃抗體的全蛋水溶液105L、辛酸0. 2L、甲醛0. 3L、硫柳汞0. 02L,以及1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。
      [0010] 其制備方法包括以下步驟: 1)采用市售的豬博卡病毒滅活疫苗進(jìn)行強(qiáng)化免疫,每只雞每次疫苗用量為2ml,每次間 隔10天,進(jìn)行三次免疫程序,當(dāng)抗體效價(jià)達(dá)到I:256時(shí),開始收集高免蛋。
      [0011] 2)將收集高免蛋整理,0. 2%新潔爾滅消毒,備用。
      [0012] 3)水稀釋法酸化處理:將2)步高免蛋全蛋打入巴氏罐體內(nèi)進(jìn)行充分乳化,乳化時(shí) 間7min,然后將乳化后的全蛋液加入pH為4. 2、溫度為4°C的鹽酸酸化水,鹽酸酸化水加入 量為全蛋液體積的6倍,混勻,放置4°C環(huán)境中18小時(shí)靜置沉淀,取上清液;鹽酸酸化水是 在水中加入鹽酸使其PH值達(dá)到4. 2。
      [0013] 4)辛酸處理;將步驟3)的上清液,即含卵黃抗體的全蛋水溶液進(jìn)行稱量,升溫到 25°C,加入辛酸,充分混勻lh,然后靜置IOh;其中,按體積比,上層清液:辛酸=105 :0. 2 ; 5) 對(duì)步驟4)所得澄清液依次用I. 0_、0. 45mm、0. 22mm的濾膜過濾,留取濾液; 6) 向步驟5)所得濾液加入甲醛、硫柳汞、青鏈霉素;按體積比,含卵黃抗體的全蛋全 蛋水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞=105 :0. 2 :0. 3 :0. 02 ;青鏈霉素在該口服液中的含量為1000 單位/毫升; 7) 分裝,保存。
      [0014] 為確定卵黃抗體口服液在常溫下的放置有效期,做了以下試驗(yàn):將本品保存在 37°C培養(yǎng)箱中,保存24個(gè)月,分別1周、2周、1月、2月、4月、8月、12月、16月、20月、24月 后,用瓊脂擴(kuò)散(AGP)法,測(cè)定每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣品的卵黃抗體效價(jià)變化,結(jié)果見表1。
      [0015] 表1.常溫放置口服液不同時(shí)間段效價(jià)的變化

      【權(quán)利要求】
      1. 一種豬博卡病卵黃抗體口服液,其特征在于:包括以下按照體積比計(jì)算的原料:含 卵黃抗體的全蛋水溶液95-105、辛酸0. 2-0. 3、甲醛0. 2-0. 3、硫柳汞0. 01-0. 02 ;還包括 800-1000單位/暈升口服液的青鏈霉素。
      2. -種如權(quán)利要求1所述豬博卡病卵黃抗體口服液的制備方法,其特征在于具體步驟 是: 1) 采用豬博卡病毒滅活疫苗對(duì)雞只進(jìn)行強(qiáng)化免疫:采用三次免疫程序,每次間隔10 天,每只雞每次疫苗用量為2ml,當(dāng)抗體效價(jià)達(dá)到1 :(128-256)時(shí),進(jìn)行高免蛋收集; 2) 使用0. 1-0. 2%新潔爾滅對(duì)高免蛋進(jìn)行消毒; 3) 將2)中高免蛋的全蛋液進(jìn)行乳化,乳化時(shí)間7-10min,然后加入pH為4. 2-4. 3的、 溫度為4-6°C的鹽酸酸化水,鹽酸酸化水的加入量為全蛋液體積的5. 5-6. 5倍,混勻后,降 溫至3-5°C,靜置18-24小時(shí); 4) 取3)中的上層清液,升溫到25-32°C,加入辛酸,攪拌l_2h,靜置10-12h,過濾;其中 辛酸體積量:上層清液體積量為(〇. 2-0. 3) : (95-105); 5) 加入甲醛、硫柳汞、青鏈霉素,使卵黃抗體的全蛋水溶液:辛酸:甲醛:硫柳汞的體積 比為(95-105) : (0? 2-0. 3) : (0? 2-0. 3) : (0? 01-0. 02),青鏈霉素的含量為 800-1000 單位 / 暈升口服液; 6) 分裝,保存。
      3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的豬博卡病卵黃抗體口服液的制備方法,其特征在于:步驟 4)過濾時(shí)依次通過1. 0mm、0. 45mm、0. 22mm的濾膜進(jìn)行過濾。
      【文檔編號(hào)】A61P31/20GK104399080SQ201410762710
      【公開日】2015年3月11日 申請(qǐng)日期:2014年12月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月14日
      【發(fā)明者】徐進(jìn), 郭俊清 申請(qǐng)人:鄭州后羿制藥有限公司
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