一種具有輔助降血糖活性的生姜提取物及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生姜精深加工和生物【技術(shù)領(lǐng)域】，提供一種具有輔助降血糖活性的生姜提取物及制備方法，本發(fā)明所提供的生姜提取物是采用去離子水提取生姜可食用部分，具體方法是按照液固比20∶1-40∶1，溫度40℃-60℃，提取2h-4h，提取后離心，取上清液，減壓干燥至干，得生姜提取物。所得的生姜提取物含有總酚類化合物含量≥0.55mg/g，總黃酮含量≥0.32mg/g，多糖含量≥150.0mg/g，經(jīng)活性測定表明生姜提取物具有輔助降血糖活性。
【專利說明】一種具有輔助降血糖活性的生姜提取物及制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生姜的精深加工和生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種既能抑制a-葡萄糖苷酶活性又能抑制a-淀粉酶活性的具有輔助降血糖活性的生姜提取物及制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]糖尿病是一種由于胰島素缺乏而引發(fā)的嚴(yán)重內(nèi)分泌及代謝性障礙疾病?，F(xiàn)今，糖尿病患病率日益增加，人數(shù)呈逐年上升趨勢，糖尿病已經(jīng)成為當(dāng)今全球最具挑戰(zhàn)性的疾病之一，多飲多食多尿是糖尿病的主要癥狀，給社會增加了巨大的醫(yī)療經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和人員壓力。有科學(xué)研究證明人體內(nèi)存在許多生物酶，如a-葡萄糖苷酶和醛糖還原酶等參與調(diào)節(jié)血糖水平。通過作用抗糖尿病的作用靶點(diǎn)，開發(fā)具有抑制a-淀粉酶和a-葡萄糖苷酶活性的生物制劑，可以實(shí)現(xiàn)口服降糖的效果。a-淀粉酶可以催化水解直鏈淀粉中的a-l，4-葡萄糖苷鍵生成a-麥芽糖和少量葡萄糖，通過抑制體內(nèi)異常的a-淀粉酶活性，減少體內(nèi)葡萄糖水平。a-葡萄糖苷酶抑制劑是一類以延緩腸道碳水化合物吸收而達(dá)到治療糖尿病的口服降糖活性物質(zhì)。植物提取物具有降血糖的功效已經(jīng)被廣泛接受，世界上大約有800種天然植物具有潛在的抗糖尿病活性，并且多以黃酮類化合物、多酚類化合物和多糖類化合物研究為主。據(jù)報(bào)道，仙人掌，山麥冬，灰兜巴，聚蟻樹，香菇，靈芝，玉米須，橄欖果，飛龍掌血等的水提取物對鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠具有良好的降血糖活性；紅景天，獐牙菜，紅球姜等的醇溶性物質(zhì)具有降血糖活性；核桃和斑鳩菊等的脂溶性物質(zhì)具有降血糖活性。目前，具有降血糖活性的成分物質(zhì)配以不同的劑型作為保健食品進(jìn)行銷售也已經(jīng)得到了人們的廣泛認(rèn)可。
[0003]生姜是一種多年生的草本植物，是一種原產(chǎn)于亞熱帶地區(qū)植物，同時(shí)兼有藥食同源性，姜經(jīng)過泡制可以作為中藥藥材之一，其具有味辛性微溫，歸肺、脾、胃經(jīng)，解表散寒，溫中止嘔，化痰止咳等多種功效，主要用于治療風(fēng)寒感冒、胃寒嘔吐、寒痰咳嗽，同時(shí)也可以作為烹飪用的食材，起到去腥調(diào)味的作用。生姜的根莖部分含有的營養(yǎng)成分主要包括了姜油(1-3%)，脂肪￠-8% )，氨基酸，維生素(主要是煙酸和維生素A)及含量高達(dá)50%的淀粉類物質(zhì)。生姜已經(jīng)成為非常重要的驅(qū)寒、暖胃的中草藥之一。生姜中含有大量的潛在的生物活性物質(zhì)，主要是姜辣素、多糖類、姜烯酚、姜酮和姜油等，具有抗氧化、抗腫瘤、調(diào)節(jié)膽固醇、抗過敏和止吐的作用。
[0004]文獻(xiàn)報(bào)道生姜的醇溶性提取物具有一定的抗腫瘤活性，將生姜醇提物灌胃荷瘤小鼠，分別受試低、中、高三個(gè)劑量的生姜醇提物，經(jīng)試驗(yàn)表明對H22實(shí)體瘤的抑瘤率分別是34.90%,43.42%和56.23%。生姜粗多糖具有抗氧化作用，通過對生姜粗多糖的還原能力、清除羥自由基OH和超氧自由基02_的能力及體外抗脂質(zhì)過氧化能力進(jìn)行測定。結(jié)果表明，生姜粗多糖具有一定的抗氧化能力，且隨其濃度的增加而增強(qiáng)。同時(shí)生姜多糖類化合物還對電擊蟾蜍產(chǎn)生的肌肉抗疲勞及自由基模型均有一定的抑制作用。但目前對于生姜提取物輔助降血糖活性的研究報(bào)道較少。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是制備一種生姜提取物，并對其進(jìn)行制備方法的優(yōu)化，同時(shí)采用制備工藝參數(shù)下獲得的提取物具有輔助降血糖的生物活性。
[0006]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種具有輔助降血糖活性的生姜提取物及其制備方法。
[0007]本發(fā)明所提供的具有輔助降血糖活性的生姜提取物是采用去離子水提取生姜的可食用部分，反復(fù)提取三次獲得，其中所得的提取物含有總酚類化合物含量> 0.55mg/g，總黃酮的含量彡0.32mg/g，多糖的含量彡150.0mg/g
[0008]本發(fā)明所采用的制備方法是將生姜洗凈后切片，于60°C烘箱中干燥24h，取出后磨成細(xì)粉，過60目篩，密封保存待用。按照液固比20: 1-40: 1，溫度40°C-60°C，提取2h-4h，提取后離心，取上清液，將濾渣按照上述制備參數(shù)再反復(fù)提取2次，合并濾液，減壓干燥至干，得生姜提取物。
[0009]具有輔助降血糖功能的生姜提取物，按照其特征可以為其開發(fā)片劑、膠囊劑、顆粒齊U、口服液、滴丸等保健型食品。
[0010]本發(fā)明采用生姜提取物對α -葡萄糖苷酶的抑制活性和α -淀粉酶的抑制活性來檢測生姜提取物的輔助降血糖活性，經(jīng)過研究和試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，生姜提取物分別作用α -葡萄糖苷酶和α -淀粉酶，其中對α -葡萄糖苷酶的半抑制濃度為1.65-2.51mg/mL，對α -淀粉酶的半抑制濃度為3.25-3.86mg/mL。
[0011]本發(fā)明所涉及的α -葡萄糖苷酶的抑制活性和α -淀粉酶的抑制活性測定方法如下:
[0012]1.抑制α -葡萄糖苷酶活性測定:
[0013]具體操作步驟為:取5 μ La-葡萄糖苷酶溶液(10unit/ml，溶解在0.lmol/L pH
6.8的磷酸鉀緩沖液)與10 μ L不同濃度的生姜提取物，依次加入到620 μ L mo I/L磷酸鉀緩沖液，在37.5°C下預(yù)熱20min后加入10 μ L對硝基苯基葡萄糖苷(pNPG，1mmoI/L)，反應(yīng)混合液置于37.5°C條件下反應(yīng)30min后，加入650 μ L的lmol/L Na2CO3終止反應(yīng)，使用紫外可見分光光譜儀在410nm處測定吸光度值，計(jì)算生姜提取物對葡萄糖苷酶的抑制活性。
[0014]對α -葡萄糖苷酶抑制活性計(jì)算公式如下:
[0015]葡萄糖苷酶抑制活性Y/%= (ODa-ODb)/ODaX 100
[0016]式中:0Da為空白對照組中反應(yīng)完成后在410nm處測定的吸光度；ODb為添加生姜提取物組中反應(yīng)完成后在410nm處測定的吸光度。
[0017]2.抑制α -淀粉酶活性測定:
[0018]具體步驟為:取10 μ L的α -淀粉酶水溶液(lunit/L)與10 μ L不同濃度生姜提取物，混合預(yù)熱15min后，加入500yL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的淀粉溶液(溶解于20mol/L pH 6.9的磷酸鈉緩沖液)，混合反應(yīng)物在37.5°C條件下進(jìn)行5min，滴加600 μ L DNS試劑(含質(zhì)量分?jǐn)?shù)I %的3，5- 二硝基水楊酸和質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%的酒石酸鉀鈉的0.4mol/L氫氧化鈉溶液)終止反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)混合物置于沸水浴中15分鐘，然后冷卻至室溫在540nm處用紫外可見分光光度計(jì)測定。
[0019]對淀粉酶的抑制活性按如下公式進(jìn)行計(jì)算:
[0020]淀粉酶抑制活性Y/%= (ODa-ODb)/ODaX 100
[0021]式中:0Da為空白對照組中反應(yīng)完成后在540nm處測定的吸光度；0Db為添加生姜提取物組中反應(yīng)完成后在540nm處測定的吸光度。

【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步闡述，但不限于此。
[0023]實(shí)施例1、將清洗干燥后的生姜切片，干燥粉碎后，過60目篩，稱取5g生姜粉，按照固液比為20: I加入去離子水，在40°C下提取2h，提取后，按照4000r/min進(jìn)行離心，取上清液，將濾渣按照上述參數(shù)反復(fù)提取2次，合并濾液，減壓干燥至干，得生姜提取物；再將所述的生姜提取物作為原料，測定其α-葡萄糖苷酶的半抑制濃度為2.51mg/mL，α -淀粉酶的半抑制濃度為3.86mg/mL。
[0024]實(shí)施例2、將清洗干燥后的生姜切片，干燥粉碎后，過60目篩，稱取5g生姜粉，按照固液比為30: I加入去離子水，在50°C下提取3h，提取后，按照4000r/min進(jìn)行離心，取上清液，將濾渣按照上述參數(shù)反復(fù)提取2次，合并濾液，減壓干燥至干，得生姜提取物；再將所述的生姜提取物作為原料，測定其α -葡萄糖苷酶的半抑制濃度為2.01mg/mL, α -淀粉酶的半抑制濃度為3.52mg/mL。
[0025]實(shí)施例3、將清洗干燥后的生姜切片，干燥粉碎后，過60目篩，稱取5g生姜粉，按照固液比為40: I加入去離子水，在60°C下提取4h，提取后，按照4000r/min進(jìn)行離心，取上清液，將濾渣按照上述參數(shù)反復(fù)提取2次，合并濾液，減壓干燥至干，得生姜提取物；再將所述的生姜提取物作為原料，測定其α -葡萄糖苷酶的半抑制濃度為1.65mg/mL，α -淀粉酶的半抑制濃度為3.15mg/mL。
【權(quán)利要求】
1.一種具有輔助降血糖活性的生姜提取物，其特征在于:提取物中總酚類化合物含量^ 0.55mg/g，總黃酮的含量> 0.32mg/g，多糖的含量> 150.0mg/g，提取物對α -葡萄糖苷酶的半抑制濃度為1.65-2.51mg/mL，對α -淀粉酶的半抑制濃度為3.25-3.86mg/mL。
2.如權(quán)利要求1所述的生姜提取物，其特征在于，制備方法如下:將生姜洗凈后切片，于60°C烘箱中干燥24h，取出后磨成細(xì)粉，過60目篩，密封保存待用；按照液固比20: 1-40: 1，溫度40°C-60°C，提取2h-4h，提取后按照4000r/min進(jìn)行離心，取上清液，將濾渣按照上述參數(shù)反復(fù)提取2次，合并濾液，減壓干燥至干，得生姜提取物；再將所述的生姜提取物作為原料，測定其對α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性。
【文檔編號】A61P3/10GK104436144SQ201410804865
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月11日
【發(fā)明者】趙文竹, 于志鵬, 勵(lì)建榮 申請人:渤海大學(xué)