本發(fā)明屬于獸用中藥領(lǐng)域，涉及一種治療仔豬耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物，特別是一種用于治療仔豬耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物制劑、質(zhì)量標準及使用范圍。
背景技術(shù)：
：豬大腸桿菌病是由病原性大腸桿菌引起的仔豬一組腸道傳染性疾病。常見的有仔豬黃痢、仔豬白痢和仔豬水腫病三種，以發(fā)生腸炎、腸毒血癥為特征。仔豬黃痢又稱早發(fā)性大腸桿菌病，1-7日齡左右的仔豬發(fā)生的一種急性、高度致死性的疾病。臨床上以劇烈腹瀉、排黃色水樣稀便、迅速死亡為特征。剖檢常有腸炎和敗血癥，有的無明顯病理變化。仔豬白痢是由大腸桿菌引起的10日齡左右仔豬發(fā)生的消化道傳染病。臨床上以排灰白色粥樣稀便為主要特征，發(fā)病率高而致死率低。病原尚不完全肯定，豬腸道菌群失調(diào)、大腸桿菌過量繁殖是本病的重要病因，氣候變化、飼養(yǎng)管理不當是本病發(fā)生的誘因。豬水腫病是由溶血性大腸桿菌毒素所引起的斷奶仔豬眼瞼或其它部位水腫、神經(jīng)癥狀為主要特征的疾病。該病多發(fā)于仔豬斷奶后1～2周，發(fā)病率約5%～30%，病死率達90%以上。近年來本病又有新的流行特點：首先發(fā)病日齡不斷增加，據(jù)各地反饋情況80斤-100斤的豬都有水腫病的發(fā)生；其次吃的越多、長的越壯的豬發(fā)病率和死亡率越高。豬大腸桿菌病在世界各地均普遍存在，是仔豬最常見的傳染病，造成嚴重的經(jīng)濟損失。目前由于國內(nèi)抗生素的過量添加和濫用，造成大量耐藥菌株的出現(xiàn)，各地均出現(xiàn)了仔豬大腸桿菌病抗生素無效的情況，造成仔豬成窩死亡的后果，給養(yǎng)殖戶帶來的大量的損失，嚴重危害養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，為此本公司在臨床驗方的基礎(chǔ)上，經(jīng)過大量試驗研制成功有效治療耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明旨在發(fā)明一種有效治療耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物，其特征在于它的成分配比為：黃柏5-40%，黃芩5-40%，貫葉金絲桃5-40%，蜘蛛香5-40%，黃芪5-40%，石菖蒲5-40%。其中：黃柏：具有清熱。燥濕，瀉火，解毒的功效。主治熱痢，泄瀉，消渴，黃疸，痿躄，夢遺，淋濁，痔瘡，便血，赤白帶下，骨蒸勞熱，目赤腫痛，口舌生瘡，瘡瘍腫毒。黃芩：具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。主治溫熱病、上呼吸道感染、肺熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎動不安、高血壓、癰腫癤瘡等癥。黃芩、黃柏二藥合用具有良好的清熱燥濕，瀉火解毒作用，現(xiàn)代研究證明雙藥合用有明顯的抗菌抗病毒作用。貫葉金絲桃，具有“舒肝解郁，清熱利濕，消腫止痛”的功效。其代表成份金絲桃苷有保肝、保護心腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)、抗炎和抗病毒等作用；其另一種代表成份金絲桃素是一種具有比達菲更有效的抗禽流感病毒活性的成分。蛛蛛香：具有“理氣止痛，消食止瀉，祛風除濕，鎮(zhèn)驚安神”的功效，可用于脘腹脹痛，食積不化，腹瀉痢疾等癥的治療。現(xiàn)代研究證明，蛛蛛香還具有抗菌和抗輪狀病毒的作用，單味本藥材的口服液制劑和顆粒制劑已用于治療兒童輪狀病毒性腹瀉的治療。黃芪：具有有益氣固表、利水消腫、脫毒、生肌的功效，適用于自汗、盜汗、血痹、浮腫、癰疽不潰或潰久不斂等癥。方中選用黃芪用于加速自射修復，同時可提高機體自身免疫力。石菖蒲：具有“化濕行氣，祛風利痹，化痰開竅，消腫止痛”的功效。可用于脘腹脹痛、噤口痢、風濕痹痛、熱病神昏等癥的治療?，F(xiàn)代研究表明石菖蒲具有鎮(zhèn)靜作用；內(nèi)服石菖蒲能促進消化液的分泌及制止胃腸異常發(fā)酵，并有弛緩腸管平滑肌痙攣的作用。本發(fā)明公開的有效治療耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物可以制成散劑、口服液、顆粒劑、注射劑。本發(fā)明公開的有效治療耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物是以鹽酸小蘗堿、連翹苷或金絲桃苷作為定量指標，通過液相法進行檢驗；以鹽酸小檗堿、黃芩苷、貫葉金絲桃、蜘蛛香、黃芪和石菖蒲對照品為定性指標，以薄層色譜法進行檢驗，質(zhì)量標準和檢驗方法如下：鑒別黃柏：取本品0.5g，加甲醇-鹽酸（100﹕1）溶液25ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄31頁）試驗，吸取上述兩種溶液各1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10﹕7﹕1﹕1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。鑒別黃芩：取本品1g溶于10ml水中，取1ml，加75%乙醇9ml，搖勻，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄31頁）試驗，吸取上述二種溶液各2μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。鑒別貫葉金絲桃：取本品適量研細,取粉末約1g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取貫葉金絲桃對照藥材粉末0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(2010版獸藥典附錄32頁)試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（20∶10∶1）為展開劑，展開，取出，立即置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。鑒別蜘蛛香：取本品研細，取粉末約2g，加60%乙醇40ml，水浴加熱回流提取1小時，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取蜘蛛香對照藥材粉末1g，加60%乙醇40ml，同供試品溶液的制備法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取供試品溶液10ul，對照藥材溶液10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-醋酸乙酯（4：1）為展開劑，飽和30分鐘，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。鑒別黃芪：取本品10克，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱（100-120目，5克，內(nèi)徑10-15mm）上，用40%甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽合的正丁醇提取兩次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌兩次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照品溶液，照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取上述兩種溶液各2ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐主斑點，紫外燈（365nm）下，顯相同橙黃色熒光主斑點。鑒別石菖蒲：取本品適量研細，取粉末約2g，置具塞錐形瓶中，加石油醚(30～60℃)30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加石油醚(30～60℃)1ml使溶解，作為供試品溶液。另取石菖蒲對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯(4：1)為展開劑，飽和30分鐘，展開，取出，晾干，放置約1小時，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。鹽酸小蘗堿含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗　以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.03mol/L磷酸二氫鉀溶液（28﹕72）為流動相；檢測波長為345nm。理論板數(shù)以鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備　取鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇-鹽酸（100﹕1）溶液制成每1ml含28μg的溶液，即得。供試品溶液的制備　取本品0.5g，精密稱定，置50ml錐形瓶中，精密加入甲醇-鹽酸（100:1）溶液25ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，取出，放涼，稱定重量，用甲醇-鹽酸（100：1）溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得。測定法　分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品含黃柏以鹽酸小檗堿（C20H17NO4·HCl）計，每1g不得少于規(guī)定量。黃芩苷含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸（50:50:0.2）為流動相；檢測波長為274nm。理論塔板數(shù)按黃芩苷計算應(yīng)不低于1000。對照品溶液制備取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。供試品溶液制備精密量取本品10mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計，含黃芩苷（C21H18O11）不得少于規(guī)定量。金絲桃苷含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸溶液（16:84）為流動相；檢測波長360nm。理論板數(shù)按金絲桃苷峰計算應(yīng)不低于4000。對照品溶液的制備：取金絲桃苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含16μg的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的的制備：取裝量差異項下的本品，混勻，取適量，研細，取粉末約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計算，含貫葉金絲桃以金絲桃苷（C21H20O12）計，不得少于規(guī)定量。經(jīng)臨床實驗證實，本發(fā)明公開的有效治療耐藥性大腸桿菌病的中藥組合物，治療由耐藥性大腸桿菌引起的仔豬傳染病具有很好的療效，還具有治療傳染性胃腸炎病毒、流行性腹瀉病毒引起的仔豬傳染病的作用。臨床使用證明本發(fā)明的藥物在使用過程中安全、有效，且無藥殘，無耐藥性。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例來進一步說明本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案和細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。本發(fā)明產(chǎn)品可以制成包括散劑、口服液、顆粒劑和注射液，下面以顆粒劑為例來說明本產(chǎn)品。產(chǎn)品制備處方1：黃柏400g，黃芩300g，貫葉金絲桃100g，蜘蛛香100g，黃芪50g，石菖蒲50g。處方2：黃柏50g，黃芩50g，貫葉金絲桃400g，蜘蛛香300g，黃芪100g，石菖蒲100g。處方3：黃柏100g，黃芩100g，貫葉金絲桃50g，蜘蛛香50g，黃芪400g，石菖蒲300g。制備工藝：按處方取以上六味藥材，石菖蒲提取揮發(fā)油后，提取液經(jīng)濃縮、醇沉；其余五味藥用10倍、8倍、8倍60%乙醇回流提取三次，每次1.5小時。合并濾液，加入石菖蒲的醇沉上清液，回收乙醇，藥液濃縮成相對密度為1.25-1.30(25℃)的清膏，加入石菖蒲揮發(fā)油的β環(huán)糊精包合物及適當輔料混勻，過14目篩擠出制粒，干燥，再經(jīng)14目、40目篩整粒，包裝即得。檢驗方法2.1鑒別檢驗鑒別黃柏：取本品0.5g，加甲醇-鹽酸（100﹕1）溶液25ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄31頁）試驗，吸取上述兩種溶液各1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10﹕7﹕1﹕1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。鑒別黃芩：取本品1g溶于10ml水中，取1ml，加75%乙醇9ml，搖勻，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄31頁）試驗，吸取上述二種溶液各2μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。鑒別貫葉金絲桃：取本品適量研細,取粉末約1g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取貫葉金絲桃對照藥材粉末0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(2010版獸藥典附錄32頁)試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（20∶10∶1）為展開劑，展開，取出，立即置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。鑒別蜘蛛香：取本品研細，取粉末約2g，加60%乙醇40ml，水浴加熱回流提取1小時，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取蜘蛛香對照藥材粉末1g，加60%乙醇40ml，同供試品溶液的制備法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取供試品溶液10ul，對照藥材溶液10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-醋酸乙酯（4：1）為展開劑，飽和30分鐘，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。鑒別黃芪：取本品10克，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱（100-120目，5克，內(nèi)徑10-15mm）上，用40%甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽合的正丁醇提取兩次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌兩次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照品溶液，照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取上述兩種溶液各2ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐主斑點，紫外燈（365nm）下，顯相同橙黃色熒光主斑點。鑒別石菖蒲：取本品適量研細，取粉末約2g，置具塞錐形瓶中，加石油醚(30～60℃)30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加石油醚(30～60℃)1ml使溶解，作為供試品溶液。另取石菖蒲對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（2010版獸藥典附錄32頁）試驗，吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯(4：1)為展開劑，飽和30分鐘，展開，取出，晾干，放置約1小時，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。2.2含量檢驗鹽酸小蘗堿含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗　以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.03mol/L磷酸二氫鉀溶液（28﹕72）為流動相；檢測波長為345nm。理論板數(shù)以鹽酸小檗堿峰計算應(yīng)不低于2000。對照品溶液的制備　取鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇-鹽酸（100﹕1）溶液制成每1ml含28μg的溶液，即得。供試品溶液的制備　取本品0.5g，精密稱定，置50ml錐形瓶中，精密加入甲醇-鹽酸（100:1）溶液25ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，取出，放涼，稱定重量，用甲醇-鹽酸（100：1）溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，即得。測定法　分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品含黃柏以鹽酸小檗堿（C20H17NO4·HCl）計，每1g不得少于規(guī)定量。黃芩苷含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸（50:50:0.2）為流動相；檢測波長為274nm。理論塔板數(shù)按黃芩苷計算應(yīng)不低于1000。對照品溶液制備取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。供試品溶液制備精密量取本品10mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計，含黃芩苷（C21H18O11）不得少于規(guī)定量。金絲桃苷含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%磷酸溶液（16:84）為流動相；檢測波長360nm。理論板數(shù)按金絲桃苷峰計算應(yīng)不低于4000。對照品溶液的制備：取金絲桃苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含16μg的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的的制備：取裝量差異項下的本品，混勻，取適量，研細，取粉末約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用60%乙醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計算，含貫葉金絲桃以金絲桃苷（C21H20O12）計，不得少于規(guī)定量。體外抑菌試驗3.1菌液制備將篩選出的耐藥大腸桿菌和標準沙門氏菌接種于普通瓊脂斜面培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)18～24h，每支斜面加入1.5ml滅菌蒸餾水，洗下菌液，調(diào)整細菌濃度為1.5×108CFU/ml備用。3.2供試液的制備取50g本顆粒劑樣品，加蒸餾水200ml，加熱回流30min，過濾，濾液減壓濃縮至50ml，即得濃度為1g/ml的藥液，置于抗生素小瓶，120℃高壓滅菌20min，置4℃冰箱備用。3.3體外抑菌試驗采用平板打孔法測定連翁止痢顆粒對大腸桿菌、沙門氏菌的抑菌效果。試驗結(jié)果表明，本顆粒對大腸桿菌和沙門氏菌均有一定的抑菌作用，對大腸桿菌的抑菌圈直徑平均為8.9mm，對沙門氏菌的抑菌圈直徑平均為10.7mm。安全試驗本產(chǎn)品經(jīng)急性毒性試驗、亞慢性毒性試驗和靶動物安全試驗證明，5g/kg體重給藥劑量下，本產(chǎn)品對試驗性大鼠各項指標無不良影響，也未影響大鼠的正常生長發(fā)育。靶動物安全試驗時，在5倍使用劑量下給藥，本產(chǎn)品對靶動物的各項指標無不良影響，也未影響靶動物的正常生長發(fā)育。臨床治療試驗5.1耐藥性大腸桿菌病模型的建立：耐藥性大腸桿菌由遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學院動物疾病檢測與評價中心分離鑒定并經(jīng)耐藥性檢測，所選菌株對目前市場上常用的抗生素均具有不同程度的耐藥性。攻毒劑量經(jīng)預(yù)試驗后確定為2ml細菌培養(yǎng)液（活菌數(shù)約為2×1010cfu）。5日齡仔豬在攻毒約1小時后，仔豬的食欲明顯下降，1.5小時時攻毒仔豬發(fā)生腹瀉，2小時后出現(xiàn)水樣腹瀉。攻毒20小時后撲殺發(fā)病仔豬。發(fā)病仔豬出現(xiàn)如下解剖學病變：胃內(nèi)有多量凝乳塊，胃粘膜出血；小腸鼓氣，呈半透明，內(nèi)有黃色的液體，小腸腸壁菲薄，顯微鏡下觀察腸壁的絨毛粘膜上皮已基本沒有；大腸內(nèi)有多量黃色稀糞；腸系膜淋巴結(jié)腫脹，有輕微出血。5.2實驗臨床試驗，各試驗組處理方法如下：組別動物數(shù)處理方法空白對照組10不處理，隔離飼養(yǎng)陰性對照組10人工感染，1h后常規(guī)飲喂，隔離飼養(yǎng)，發(fā)病后以同體積溫開水經(jīng)口灌服，2次/d，連用5d。高劑量組10人工感染，1h后常規(guī)飲喂，隔離飼養(yǎng)，發(fā)病后以0.5g/kg劑量以適量溫開水化開，經(jīng)口灌服，2次/d，連用5d。中劑量組10人工感染，1h后常規(guī)飲喂，隔離飼養(yǎng)，發(fā)病后以0.25g/kg劑量以適量溫開水化開，經(jīng)口灌服，2次/d，連用5d。低劑量組10人工感染，1h后常規(guī)飲喂，隔離飼養(yǎng)，發(fā)病后以0.125g/kg劑量以適量溫開水化開，經(jīng)口灌服，2次/d，連用5d。實驗臨床試驗結(jié)果顯示：本產(chǎn)品高劑量組和中劑量組的治愈率(70.0%)、總有效率(90.0%、80.0%)高于低劑量組的治愈率(50.0%)、總有效率(60.0%)；陰性對照組的發(fā)病率100%。5.3擴大臨床試驗：多遼寧、吉林與河北地區(qū)選取大腸桿菌病發(fā)病癥狀仔豬，統(tǒng)計經(jīng)檢測與評價中心確診為耐藥性大腸桿菌病的病例共193頭，結(jié)果顯示：本產(chǎn)品按0.25g/kg體重灌服給藥，一天二次，連用5天，對耐藥性大腸桿菌病的治愈率為74.3%，總有效率為84.7%。在擴大臨床試驗治療的病例中，經(jīng)檢測中心檢驗發(fā)現(xiàn)有流行性腹瀉和傳染性胃腸炎病例的存在，經(jīng)統(tǒng)計：流行性腹瀉病例為103頭，治愈率為71.3%，有效率為80.7%；傳染性胃腸炎病例為107頭，治愈率為70.5%，有效率為82.5%。因此本產(chǎn)品對此二種疾病也有很好的治療效果。當前第1頁1 2 3