一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種靜電紡絲溶液，特別涉及一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]人表皮生長(zhǎng)因子(hEGF)是一個(gè)具有53個(gè)氨基酸殘基，分子量6045道爾頓的單鏈多肽。它能夠有效地刺激或抑制細(xì)胞的增殖、促進(jìn)細(xì)胞的分化，具有非常高的生物活性。同時(shí)，極微量的hEGF就能強(qiáng)烈地促進(jìn)表皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，還能有效地刺激細(xì)胞外透明質(zhì)酸等大分子物質(zhì)的分泌與合成。臨床醫(yī)學(xué)表明，hEGF具有極強(qiáng)的促進(jìn)表皮生長(zhǎng)代謝的作用，主要用于促進(jìn)外科手術(shù)傷口及創(chuàng)面的提前愈合，并且hEGF可使皮膚細(xì)嫩光滑，具有顯著的美容效果。
[0003]但是，由于hEGF在常溫下裸露空氣中難以維持其生物學(xué)活性、易被蛋白酶降解而失去活性及難以透皮吸收等一系列問(wèn)題，極大地限制了 hEGF的實(shí)際應(yīng)用。
[0004]姜黃素是從姜科植物姜黃中提取的一種活性成分，具有抗炎、抗氧、抗菌、抗腫瘤等活性。然而，研究表明，姜黃素水溶性差、難以透皮吸收等缺點(diǎn)，從而限制了姜黃素的實(shí)際應(yīng)用。
[0005]此外，銀一來(lái)自土壤的天然無(wú)機(jī)抗菌劑，作用十分廣泛，能夠殺死650多種致病菌，抗菌率達(dá)99.9%以上。微量濃度的銀離子對(duì)人體基本無(wú)毒害作用，具有安全性高、抗菌持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。但是，由于銀容易與靜電紡絲裝置中的金屬針頭發(fā)生置換反應(yīng)，從而降低銀的殺菌效率。
[0006]我們知道，作為傷口包覆材料必須要有較高的氣體透過(guò)性，能夠阻隔細(xì)菌侵染和防止脫水等作用。但是，一般的傷口包覆材料功能單一、抗菌效果差、氣體透過(guò)性不好、不易保持藥物活性因子的活性且藥物活性因子不易被表皮細(xì)胞吸收。
[0007]然而，靜電紡絲作為一種制備聚合物納米纖維的技術(shù)，利用電場(chǎng)力對(duì)聚合物溶液進(jìn)行紡絲的過(guò)程中，可以得到孔隙率小、比表面積大、直徑在納米級(jí)的超細(xì)納米纖維。從病理學(xué)理論可知，藥物和藥物載體的表面積越大，藥物顆粒的分解速率和透皮吸收效果就越好。而且，納米纖維材料能夠均勻地黏附在傷口上，使傷口血液很快凝結(jié)，起到止血的作用。因此，借助靜電紡絲技術(shù)將藥物和藥物載體制成納米纖維能夠有效解決上述問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題與缺陷，提出了一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法。
[0009 ]本發(fā)明擬采用以下技術(shù)方案:
一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成靜電紡絲溶液:
人表皮生長(zhǎng)因子50-100ug、透皮吸收促進(jìn)劑l-8g、活性穩(wěn)定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進(jìn)劑l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF) 0
[0010]所述醋酸銀為弱電解質(zhì)醋酸銀，且其摩爾濃度為0.04-0.18 mol/L;所述乙醇濃度90%以上;所述活性促進(jìn)劑是純度大于95%的水溶性膠原蛋白；所述PBS溶液PH值為4.8-7.5;所述PAN的分子量為Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促進(jìn)劑是丙二醇、巰基乙酸|丐中任一種;所述活性穩(wěn)定劑是透明質(zhì)酸、右旋糖酐中任一種;所述蛋白酶抑制劑是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一種。
[0011]將上述各組分按以下步驟制備:
(I)人表皮生長(zhǎng)因子溶液配制
將透皮吸收促進(jìn)劑l_8g、活性穩(wěn)定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進(jìn)劑HOg加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5-8ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2_8°C。隨后向制品中添加50-100ug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2_8°C溫度下保存?zhèn)溆谩?br>[0012](2)專(zhuān)用溶媒配制
將薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、姜黃素5_20mg加入到70_100ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I。取醋酸銀6-12ml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒。
[0013](3)紡絲溶液制備
將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7wt%-9wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為40-55%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。
[0014]本發(fā)明外觀為淡黃色透明液體，具有良好的穩(wěn)定性。
[0015]有益效果:中國(guó)專(zhuān)利《便攜式大氣輝光放電等離子體射流及靜電紡絲一體裝置》(申請(qǐng)?zhí)?201410704814.3，申請(qǐng)公布號(hào):CN 104372423 A)，公布了一種便攜式大氣輝光放電等離子體射流及靜電紡絲一體裝置。利用靜電紡絲技術(shù)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行紡絲，可以得到比表面積大、孔隙率小的藥物和藥物載體納米纖維。人表皮生長(zhǎng)因子在納米纖維中可以保持其活性，并且由于納米纖維比表面積大、孔隙率小的特點(diǎn)，納米纖維中的藥物顆粒分解速率和透皮吸收效果好，生物利用率高和氣體透過(guò)性好等優(yōu)點(diǎn)。此外，本發(fā)明采用弱電解質(zhì)醋酸銀作為銀源，可以有效減小或者防止銀離子跟靜電紡絲裝置中的金屬針頭發(fā)生置換反應(yīng)，從而提高銀離子的殺菌效率。因此，本發(fā)明利用靜電紡絲技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)、美容等領(lǐng)域具有良好的市場(chǎng)前景。
【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為本發(fā)明通過(guò)靜電紡絲裝置制備納米纖維的示意圖。其中，靜電紡絲裝置(1)，紡絲溶液(2)，納米纖維(3)，接收物體(4)。
【具體實(shí)施方式】
[0017]以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，但是，應(yīng)當(dāng)理解為，這些實(shí)施例僅用于更詳細(xì)具體地說(shuō)明之用，而不應(yīng)理解為用于以任何形式限制本發(fā)明。
[0018]實(shí)施例1
精確稱(chēng)取巰基乙酸I丐3g、透明質(zhì)酸23g、N-乙酰半胱氨酸5g、水溶性膠原蛋白3g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加68ug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2-8°C溫度下保存?zhèn)溆?。將薰衣草精?.01ml、維生素E 3mg、姜黃素Smg加入到75ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I。取醋酸銀7ml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7.3wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為42%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0019]實(shí)施例2
精確稱(chēng)取丙二醇4g、透明質(zhì)酸27g、硼酸亮氨酸6g、水溶性膠原蛋白4.3g加入到10mlPBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加71ug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2_8°C溫度下保存?zhèn)溆谩⑥挂虏菥?.01ml、維生素E 5mg、姜黃素6mg加入到75ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I。取醋酸銀7ml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7.5wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為45%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。
[0020]實(shí)施例3
精確稱(chēng)取丙二醇5.5g、右旋糖酐31g、N-乙酰半胱氨酸7g、水溶性膠原蛋白5.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加76ug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2-8°C溫度下保存?zhèn)溆?。將薰衣草精?.01ml、維生素E 8mg、姜黃素12mg加入到80ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I。取醋酸銀6ml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為8wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為49%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0021 ] 實(shí)施例4
精確稱(chēng)取巰基乙酸鈣7.2g、右旋糖酐36g、硼酸亮氨酸8g、水溶性膠原蛋白7.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加7ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加Slug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2-8°C溫度下保存?zhèn)溆?。將薰衣草精?.02ml、維生素E 12mg、姜黃素9.3mg加入到90ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I。取醋酸銀Ilml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為8.5wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為53%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0022]使用時(shí)，將以上制備好的紡絲溶液通過(guò)靜電紡絲裝置制備成納米纖維，該納米纖維可用于包敷傷口、美容等等。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成靜電紡絲溶液: 人表皮生長(zhǎng)因子50-100ug、透皮吸收促進(jìn)劑l-8g、活性穩(wěn)定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進(jìn)劑l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF); 將上述各組分按以下步驟制備: 精確稱(chēng)取透皮吸收促進(jìn)劑l_8g、活性穩(wěn)定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進(jìn)劑1-1Og加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5_8ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機(jī)中將制品降溫至2_8°C;隨后向制品中添加50-100ug人表皮生產(chǎn)因子并混勻，制成人表皮生長(zhǎng)因子溶液，并在2-8°C溫度下保存?zhèn)溆?；將薰衣草精?.01-0.03ml、維生E 1-20mg、姜黃素5-20mg加入到70-100ml乙醇中混勻后用過(guò)濾機(jī)過(guò)濾得到過(guò)濾液I;取醋酸銀6-12ml與過(guò)濾液I混勻后得到專(zhuān)用溶媒;將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF沖，配制成濃度為7wt%-9wt%的溶液I;然后，將配制好的人表皮生長(zhǎng)因子溶液、專(zhuān)用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為40-55%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于各原料的重量配比的優(yōu)先范圍是: 人表皮生長(zhǎng)因子60-85ug、透皮吸收促進(jìn)劑3-7.5g、活性穩(wěn)定劑22-38g、蛋白酶抑制劑5-8g、活性促進(jìn)劑2-8g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-14mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇6-7.5ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DM1。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于各原料的重量配比的最佳配方是: 人表皮生長(zhǎng)因子76ug、透皮吸收促進(jìn)劑5.5g、活性穩(wěn)定劑31g、蛋白酶抑制劑7g、活性促進(jìn)劑5.5g、薰衣草精油0.01ml、維生素E 8mg、醋酸銀6ml、姜黃素12mg、乙醇80ml、PBS溶液100ml、丙三醇6ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF)。4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于所述醋酸銀為弱電解質(zhì)醋酸銀，且其摩爾濃度為0.04-0.18 mol/L;所述乙醇濃度90%以上；所述活性促進(jìn)劑是純度大于95%的水溶性膠原蛋白；所述PBS溶液PH值為4.8-7.5;所述PAN的分子量為Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促進(jìn)劑是丙二醇、巰基乙酸鈣中任一種;所述活性穩(wěn)定劑是透明質(zhì)酸、右旋糖酐中任一種;所述蛋白酶抑制劑是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一種。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種基于人表皮生長(zhǎng)因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，該紡絲溶液是按以下重量比的原料制成：人表皮生長(zhǎng)因子50?100ug、透皮吸收促進(jìn)劑1?8g、活性穩(wěn)定劑20?40g、蛋白酶抑制劑5?10g、活性促進(jìn)劑1?10g、薰衣草精油0.01?0.03ml、維生素E 1?20mg、醋酸銀6?12ml、姜黃素5?20mg、乙醇70?100ml、PBS溶液100ml、丙三醇5?8ml、適量聚丙烯腈（PAN）、適量二甲基甲酰胺（DMF）。利用靜電紡絲技術(shù)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行紡絲，得到比表面積大、孔隙率小的藥物和藥物載體納米纖維，從而提高藥物顆粒分解速率、藥物活性和透皮吸收效果。由本發(fā)明制成的納米纖維具有藥物利用率高、氣體透過(guò)性好、藥物穩(wěn)定性高以及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，在臨床醫(yī)學(xué)、美容等領(lǐng)域具有良好的市場(chǎng)前景。
【IPC分類(lèi)】D01F1/10, A61L15/40, A61L15/24, D01F6/54, A61K47/42, A61L15/42, A61L15/32, A61L15/44, A61L15/20, A61K47/32
【公開(kāi)號(hào)】CN105709260
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610241394
【發(fā)明人】陳兆權(quán), 丘漢標(biāo), 洪伶俐
【申請(qǐng)人】陳兆權(quán), 丘漢標(biāo)