本發(fā)明屬于組織修復材料制備技術領域，尤其涉及一種刺身膠原蛋白復合再生纖維修復材料的制備方法。
背景技術：
纖維素作為天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及獨特的物理、化學和機械性能，已成為新型生物醫(yī)學材料領域的研究熱點。而現(xiàn)有技術多是采用再生纖維素與其他材料共混，冷凍干燥制備復合膜，采用此方法制得的復合膜均勻性、穩(wěn)定性較差，且組織修復能力及藥物附著性有待進一步的提高。
技術實現(xiàn)要素：
為了解決現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明提供了一種具有良好的組織修復能力及藥物附著性的刺身膠原蛋白復合再生纖維修復材料的制備方法。
本發(fā)明采用以下技術方案：
一種刺身膠原蛋白復合再生纖維修復材料的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：稱取干刺參50g，60℃水發(fā)兩天，每天換水3次，再于500ml無水乙醇中40℃下連續(xù)浸提兩天，每天更換1次乙醇，最后于常溫下晾干；
步驟二：取晾干后的刺參在超氧化物歧化酶作用酶解反應4h，超氧化物歧化酶與底物質量比為1:6、ph6.5、溫度45℃，反應完成后，煮沸5min滅酶，并迅速冷卻至室溫，2000r/min離心處理30min，取上清液加200ml無水乙醇沉淀過夜，再3000r/min離心處理30min，取上清液40℃旋轉蒸發(fā)1h，得刺身膠原蛋白；
步驟三：將殼聚糖與質量濃度1％的醋酸按重量比1:8混合，常溫下磁力攪拌2h，轉速1000r/min，制成殼聚糖醋酸溶液；
步驟四：將蠶繭去蛹，置入煮沸的質量濃度為0.5％的碳酸鈉水溶液中，浴比為1:50，除去蠶繭表面絲膠,將已成絲狀的蠶繭撈出并擰干，再重復上述操作一次后，用去離子水洗凈，風干后得到脫膠絲素；
步驟五：將cacl2在室溫狀態(tài)下溶解于甲酸中，攪拌30min，制得濃度為5wt.％的cacl2-fa溶液，然后將脫膠絲素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力攪拌3h，獲得再生絲素蛋白溶液，室溫下干燥成膜，將膜用去離子水浸泡3h，再干燥，獲得再生絲素蛋白膜，將再生絲素蛋白膜在室溫狀態(tài)下二次溶解于甲酸中，浴比為1:10，溶解時間為2h，得再生絲素蛋白紡絲液；
步驟六：取棉短絨5g，將其溶解在甲酸中，配制成質量濃度4％的纖維素溶液；
步驟七：將再生絲素蛋白紡絲液與纖維素溶液按重量比4:1混合均勻得再生纖維素紡絲液；
步驟八：將刺身膠原蛋白、殼聚糖醋酸溶液、再生纖維素紡絲液按質量比3:3:20混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續(xù)攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中，通過靜電紡絲制得修復材料，高壓裝置電壓為20kv，紡絲流量2ml/h，將制得的材料置于體積濃度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處。
優(yōu)選的，步驟八中所述的醫(yī)用針管的針頭內徑為0.41mm。
本發(fā)明的有益效果在于：
1)刺身膠原蛋白作為一種天然的高分子生物材料，具有較低的免疫原性、優(yōu)異的生物相容性和生物降解性，可引導組織再生，促進細胞增殖生長和止血作用等特性，是一種理想的組織工程支架材料。
2)絲素蛋白及殼聚糖具有良好的抗菌性、生物相容性及一定的組織修復能力。
3)纖維素具有良好的生物相容性、可降解性及優(yōu)良的機械性能。
4)纖維素可以改善材料的機械性能，刺身膠原蛋白、絲素蛋白及殼聚糖可以改善材料的組織修復能力。
5)采用靜電紡絲技術制備的材料，進一步提高了材料的孔隙率，有利于藥物的附著。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的描述。
實施例1
一種刺身膠原蛋白復合再生纖維修復材料的制備方法，包括以下步驟：
步驟一：稱取干刺參50g，60℃水發(fā)兩天，每天換水3次，再于500ml無水乙醇中40℃下連續(xù)浸提兩天，每天更換1次乙醇，最后于常溫下晾干；
步驟二：取晾干后的刺參在超氧化物歧化酶作用酶解反應4h，超氧化物歧化酶與底物質量比為1:6、ph6.5、溫度45℃，反應完成后，煮沸5min滅酶，并迅速冷卻至室溫，2000r/min離心處理30min，取上清液加200ml無水乙醇沉淀過夜，再3000r/min離心處理30min，取上清液40℃旋轉蒸發(fā)1h，得刺身膠原蛋白；
步驟三：將殼聚糖與質量濃度1％的醋酸按重量比1:8混合，常溫下磁力攪拌2h，轉速1000r/min，制成殼聚糖醋酸溶液；
步驟四：將蠶繭去蛹，置入煮沸的質量濃度為0.5％的碳酸鈉水溶液中，浴比為1:50，除去蠶繭表面絲膠,將已成絲狀的蠶繭撈出并擰干，再重復上述操作一次后，用去離子水洗凈，風干后得到脫膠絲素；
步驟五：將cacl2在室溫狀態(tài)下溶解于甲酸中，攪拌30min，制得濃度為5wt.％的cacl2-fa溶液，然后將脫膠絲素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力攪拌3h，獲得再生絲素蛋白溶液，室溫下干燥成膜，將膜用去離子水浸泡3h，再干燥，獲得再生絲素蛋白膜，將再生絲素蛋白膜在室溫狀態(tài)下二次溶解于甲酸中，浴比為1:10，溶解時間為2h，得再生絲素蛋白紡絲液；
步驟六：取棉短絨5g，將其溶解在甲酸中，配制成質量濃度4％的纖維素溶液；
步驟七：將再生絲素蛋白紡絲液與纖維素溶液按重量比4:1混合均勻得再生纖維素紡絲液；
步驟八：將刺身膠原蛋白、殼聚糖醋酸溶液、再生纖維素紡絲液按質量比3:3:20混合均勻，使用超聲波震蕩對其進行分散，50℃條件下磁力攪拌1h，再在室溫下繼續(xù)攪拌8h，得到粘稠溶液置于與高壓裝置連接的醫(yī)用針管中，通過靜電紡絲制得修復材料，高壓裝置電壓為20kv，紡絲流量2ml/h，將制得的材料置于體積濃度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
步驟八中所述的醫(yī)用針管的容量為20ml，所述的醫(yī)用針管的針頭固定在距離靜電紡絲接收板20cm處，針頭內徑為0.41mm。