本發(fā)明涉及制備基于膠原樣蛋白的海綿的方法，其包括以下步驟：i)提供包含至少一種膠原樣蛋白和任選存在的至少一種添加劑的水性溶液；ii)經(jīng)由孵育用至少一種交聯(lián)劑將所述至少一種膠原樣蛋白交聯(lián)，以獲得水凝膠；iii)任選地，用緩沖液洗滌所述水凝膠；iv)執(zhí)行凍干步驟以獲得所述海綿；v)任選地加入至少一種添加劑；和vi)任選地對(duì)獲得的海綿滅菌。此外，本發(fā)明涉及通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的海綿，和所述海綿的用途，其用于傷口密封、止血、傷口堵塞、愈合促進(jìn)、骨再生、軟骨修復(fù)、細(xì)胞培養(yǎng)、素食肉類或嚴(yán)格素食肉類的生產(chǎn)、對(duì)生物流體例如血液或傷口滲出物的吸收。

背景技術(shù)：

1、本發(fā)明的目的是提供衍生自動(dòng)物的膠原海綿的替代物，該替代物可以用于醫(yī)療領(lǐng)域中，例如以用于傷口密封、止血、傷口堵塞、愈合促進(jìn)、骨再生、軟骨修復(fù)、細(xì)胞培養(yǎng)、或?qū)ι锪黧w例如血液或傷口滲出物的吸收。當(dāng)被應(yīng)用于醫(yī)療應(yīng)用中時(shí)，替代海綿應(yīng)至少具有類似的特性，并且另外避免衍生自動(dòng)物膠原的海綿的挑戰(zhàn)和問(wèn)題，例如過(guò)敏或不耐受。

2、另外，動(dòng)物膠原在水中表現(xiàn)出差的溶解性，并且在乙酸或鹽酸中形成粘稠溶液。通過(guò)首先冷凍干燥所述粘稠溶液，然后交聯(lián)經(jīng)冷凍干燥的材料，實(shí)現(xiàn)了交聯(lián)劑溶液與蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的直接接觸(固-液穩(wěn)定化)。該程序比交聯(lián)劑通過(guò)粘稠溶液的擴(kuò)散更快。然而，因?yàn)榻?jīng)干燥的蛋白質(zhì)部分地重新進(jìn)入溶液，所以所述經(jīng)冷凍干燥的材料的初始網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)不能被有效地保存。最終，在交聯(lián)經(jīng)冷凍干燥的材料之后，交聯(lián)產(chǎn)物再次處于濕潤(rùn)狀態(tài)并需要進(jìn)一步的冷凍干燥步驟。

3、在這點(diǎn)上，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了，根據(jù)本發(fā)明的基于膠原樣蛋白的海綿不僅可以克服上述問(wèn)題中的一個(gè)或多個(gè)，而且獲得的海綿在與液體接觸之后與基于衍生自動(dòng)物的膠原的海綿相比還出人意料地顯示出改善的形式穩(wěn)定性。此外，根據(jù)本發(fā)明的海綿顯示出改善的剛度、楊氏模量性質(zhì)以及開(kāi)孔孔隙率。此外，鑒于用于衍生自動(dòng)物膠原的海綿的“常見(jiàn)”方法，本發(fā)明的方法通過(guò)需要更少的方法步驟而也得到了改善。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、因此，在第一方面，本發(fā)明涉及制備基于膠原樣蛋白的海綿的方法，其包括以下步驟：

2、i)提供包含至少一種膠原樣蛋白和任選存在的至少一種添加劑的水性溶液；

3、ii)經(jīng)由孵育用至少一種交聯(lián)劑將所述至少一種膠原樣蛋白交聯(lián)，以獲得水凝膠；

4、iii)任選地，用緩沖液洗滌所述水凝膠；

5、iv)執(zhí)行凍干步驟以獲得所述海綿；

6、v)任選地加入至少一種添加劑；和

7、vi)任選地，對(duì)獲得的海綿滅菌，優(yōu)選地經(jīng)由等離子體、γ或uv處理對(duì)獲得的海綿滅菌。

8、在第二方面，本發(fā)明涉及通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的海綿。

9、最后，在第三方面，本發(fā)明涉及根據(jù)本發(fā)明的海綿的用途，其用于傷口密封、止血、傷口堵塞、愈合促進(jìn)、骨再生、軟骨修復(fù)、細(xì)胞培養(yǎng)、素食肉類或嚴(yán)格素食肉類的生產(chǎn)、對(duì)生物流體例如血液或傷口滲出物的吸收。

技術(shù)特征：

1.制備基于膠原樣蛋白的海綿的方法，其包括以下步驟或由以下步驟組成：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中彼此發(fā)生反應(yīng)的所述至少一種膠原樣蛋白的官能團(tuán)與所述至少一種交聯(lián)劑的官能團(tuán)是以1∶0.01至1∶5的比率存在。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，所述至少一種膠原樣蛋白是：

4.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述至少一種交聯(lián)劑

5.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述孵育被執(zhí)行5分鐘至48h和/或在4至37℃執(zhí)行。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述緩沖液具有5.5至8.2的ph值，和/或選自2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙烷-1-磺酸緩沖液、2-嗎啉-4-基乙烷磺酸緩沖液、和磷酸鹽緩沖鹽水。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求中的任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述凍干步驟在-40至-60℃執(zhí)行；和/或

8.海綿，所述海綿是通過(guò)根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任意一項(xiàng)所述的方法獲得的。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的海綿，所述海綿具有：

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的海綿的用途，其用于傷口密封、止血、傷口堵塞、愈合促進(jìn)、骨再生、軟骨修復(fù)、細(xì)胞培養(yǎng)、素食肉類或嚴(yán)格素食肉類的生產(chǎn)、對(duì)生物流體例如血液或傷口滲出物的吸收。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及制備基于膠原樣蛋白的海綿的方法，其包括以下步驟：i)提供包含至少一種膠原樣蛋白和任選存在的至少一種添加劑的水性溶液，所述水性溶液優(yōu)選地具有6至8的pH值；ii)經(jīng)由孵育用至少一種交聯(lián)劑將所述至少一種膠原樣蛋白交聯(lián)，以獲得水凝膠；iii)任選地，用緩沖液洗滌所述水凝膠；iv)執(zhí)行凍干步驟以獲得所述海綿；v)任選地加入至少一種添加劑；和vi)任選地，對(duì)獲得的海綿滅菌，優(yōu)選地經(jīng)由等離子體、γ或UV處理對(duì)獲得的海綿滅菌。此外，本發(fā)明涉及通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法獲得的海綿，和所述海綿的用途，其用于傷口密封、止血、傷口堵塞、愈合促進(jìn)、骨再生、軟骨修復(fù)、細(xì)胞培養(yǎng)、素食肉類或嚴(yán)格素食肉類的生產(chǎn)、對(duì)生物流體例如血液或傷口滲出物的吸收。

技術(shù)研發(fā)人員：M·揚(yáng)納施,S·韋伯,M·蒙特羅米拉貝特
受保護(hù)的技術(shù)使用者：贏創(chuàng)運(yùn)營(yíng)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10