本發(fā)明涉及一種包含通過新的制備方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡的用于治療傷口的組合物。

背景技術(shù)：

1、針對各種疾病已有報道利用干細(xì)胞，尤其是間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal?stemcells；msc)的治療方法以及積極的臨床結(jié)果。然而，干細(xì)胞治療劑存在作為副作用產(chǎn)生血管閉塞、形成腫塊、凝血障礙等細(xì)胞相關(guān)副作用的風(fēng)險，至今仍需通過臨床試驗(yàn)來驗(yàn)證功效。眾所周知，干細(xì)胞的旁分泌(paracrine)效果誘導(dǎo)周圍皮膚細(xì)胞再生以及增強(qiáng)血管再生能力，尤其，眾所周知，細(xì)胞外囊泡(extracellular?vesicles；ev)為旁分泌效果的主要功效因子。

2、細(xì)胞外囊泡根據(jù)大小分為外泌體(exosome)以及微囊泡(microvesicle)，外泌體的直徑為30～150nm，微囊泡的大小為100～1000nm。眾所周知，細(xì)胞外囊泡是釋放到血液中的細(xì)胞膜的一部分，由于包含蛋白質(zhì)以及核成分而介導(dǎo)細(xì)胞之間的通訊。使用細(xì)胞外囊泡代替干細(xì)胞不僅通過使因使用干細(xì)胞導(dǎo)致的副作用最小化來提高安全性，還有利于生物分布(biodistribution)以及生產(chǎn)工序。

3、然而，到目前為止尚未確立大量生產(chǎn)以及獲取方法等，以使用來源于干細(xì)胞的細(xì)胞外囊泡，并且關(guān)于可以在保持干細(xì)胞-來源細(xì)胞外囊泡的特性的同時進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)胞外囊泡所具有的功效的方法的研究并不多。

4、因此，需要一種進(jìn)一步增強(qiáng)功效的細(xì)胞外囊泡以及利用其的新型治療劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、技術(shù)問題

2、對此，為了制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體或其來源細(xì)胞外囊泡，本發(fā)明人研究出可以大量生產(chǎn)并縮短培養(yǎng)時間的方法，其結(jié)果，確認(rèn)到通過利用微孔的靜態(tài)培養(yǎng)來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體(3d-靜態(tài)-球狀體)，當(dāng)利用其制備細(xì)胞外囊泡時，制備提高傷口再生、傷口恢復(fù)能力的細(xì)胞外囊泡，從而完成了本發(fā)明。

3、因此，本發(fā)明的目的在于制備傷口治療能力得到提高的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡，并提供一種包含其的用于傷口治療、再生或恢復(fù)的組合物。

4、技術(shù)方案

5、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：步驟(a)，在直徑為200μm至800μm、深度為100μm至1000μm的微孔中三維(3d，3dimension)培養(yǎng)干細(xì)胞來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體；以及步驟(b)，從上述三維球狀體型細(xì)胞聚集體分離細(xì)胞外囊泡。

6、并且，本發(fā)明一種提供用于治療或恢復(fù)傷口的化妝品組合物，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：步驟(a)，在直徑為200μm至800μm、深度為100μm至1000μm的微孔中三維培養(yǎng)干細(xì)胞來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體；以及步驟(b)，從上述三維球狀體型細(xì)胞聚集體分離細(xì)胞外囊泡。

7、并且，本發(fā)明提供一種用于治療或恢復(fù)傷口的醫(yī)藥部外品組合物，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：步驟(a)，在直徑為200μm至800μm、深度為100μm至1000μm的微孔中三維培養(yǎng)干細(xì)胞來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體；以及步驟(b)，從上述三維球狀體型細(xì)胞聚集體分離細(xì)胞外囊泡。

8、并且，本發(fā)明提供一種包含三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡的用于治療或恢復(fù)傷口的組合物的制備方法，包括：步驟(a)，在直徑為200μm至800μm、深度為100μm至1000μm的微孔中三維培養(yǎng)干細(xì)胞來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體；以及步驟(b)，從上述三維球狀體型細(xì)胞聚集體分離細(xì)胞外囊泡。

9、并且，本發(fā)明提供一種傷口治療方法，包括：步驟(a)，在直徑為200μm至800μm、深度為100μm至1000μm的微孔中三維培養(yǎng)干細(xì)胞來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體；步驟(b)，通過從上述三維球狀體型細(xì)胞聚集體分離細(xì)胞外囊泡的步驟來制備三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡；以及步驟(c)，將通過上述步驟(b)制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡給藥到有需要的個體。

10、發(fā)明的效果

11、通過本發(fā)明的新方法制備的細(xì)胞外囊泡可以迅速促進(jìn)傷口的恢復(fù)，因此可以用作用于傷口治療、再生、恢復(fù)的多種藥品、化妝品、食品。

技術(shù)特征：

1.一種用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，上述干細(xì)胞為選自由間充質(zhì)干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞以及胚胎干細(xì)胞組成的組中的一種以上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，在上述步驟(a)中，三維培養(yǎng)為靜態(tài)培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，在上述步驟(a)中，在微孔中以100～1000個細(xì)胞/孔的密度分注間充質(zhì)細(xì)胞來執(zhí)行三維培養(yǎng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，上述細(xì)胞外囊泡增進(jìn)傷口部位的成纖維細(xì)胞或角質(zhì)形成細(xì)胞的遷移性。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療或恢復(fù)傷口的藥物組合物，其特征在于，上述細(xì)胞外囊泡促進(jìn)傷口部位的血管新生。

8.一種用于治療或恢復(fù)傷口的化妝品組合物，其特征在于，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：

9.一種用于治療或恢復(fù)傷口的醫(yī)藥部外品組合物，其特征在于，包含通過如下方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡：

10.一種包含三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡的用于治療或恢復(fù)傷口的組合物的制備方法，包括：

11.一種傷口治療方法，其特征在于，包括：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及包含通過新的制備方法制備的三維球狀體型細(xì)胞聚集體來源細(xì)胞外囊泡的用于治療或恢復(fù)傷口的組合物及傷口治療方法。通過本發(fā)明的新方法制備的細(xì)胞外囊泡可以迅速促進(jìn)傷口的恢復(fù)，因此可以有效地用作用于傷口治療、再生、恢復(fù)的多種藥品、化妝品、食品。

技術(shù)研發(fā)人員：金恩?,成知喜,慎恩憼,方午英,金智恩
受保護(hù)的技術(shù)使用者：S&E生物制藥股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/26