本發(fā)明屬于納米制劑藥物，具體涉及一種痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、特應(yīng)性皮炎(atopic?dermatitis，ad)是最常見的炎癥性皮膚病之一。通常在兒童期發(fā)病，可持續(xù)到成年期。這種疾病的特征是復(fù)發(fā)性、瘙癢性、局限性濕疹，經(jīng)常隨季節(jié)波動。許多患者還患有過敏性哮喘、過敏性鼻結(jié)膜炎等。在過去的幾十年里，特應(yīng)性皮炎的患病率不斷增加。全球疾病負擔(dān)研究顯示，特應(yīng)性皮炎已成為第15種最常見的非致命疾病和疾病負擔(dān)最高的皮膚病。特應(yīng)性皮炎的慢性和復(fù)發(fā)性濕疹、嚴重瘙癢、臨床癥狀、并存的內(nèi)科疾病和皮膚病并發(fā)癥導(dǎo)致患者及其家人的生活質(zhì)量下降。這些癥狀會擾亂睡眠，降低工作或?qū)W校的工作效率，對情緒和社交生活產(chǎn)生不利影響。抑郁、焦慮和自殺與長期存在的特應(yīng)性皮炎有關(guān)。

2、ad的發(fā)病與遺傳和環(huán)境等因素關(guān)系密切。父母親等家族成員有過敏性疾病史是本病的強風(fēng)險因素，遺傳因素主要影響皮膚屏障功能與免疫平衡。本病患者往往有多種免疫學(xué)異常，其中th2細胞活化為重要特征。環(huán)境因素包括氣候變化、生活方式改變、不正確的洗浴、感染原和變應(yīng)原刺激等?，F(xiàn)代生活方式(過于衛(wèi)生、西式飲食等)及環(huán)境暴露(環(huán)境污染、被動吸煙等)可能通過表觀遺傳修飾引起免疫系統(tǒng)與皮膚屏障異常，參與ad的發(fā)病。

3、雖然ad的確切發(fā)病機制尚不清楚，但目前研究認為，免疫異常、皮膚屏障功能障礙、皮膚菌群紊亂等因素是本病發(fā)病的重要環(huán)節(jié)。th2型炎癥是ad的基本特征，il-4和il-13是介導(dǎo)ad發(fā)病的重要細胞因子。filaggrin等基因突變導(dǎo)致的皮膚屏障功能障礙使外界環(huán)境物質(zhì)(如微生物和過敏原)易于侵入表皮而啟動th2型炎癥，朗格漢斯細胞和皮膚樹突細胞通過對變應(yīng)原的提呈參與了這一過程。th2型炎癥因子可以抑制角質(zhì)形成細胞屏障相關(guān)蛋白的表達，進一步破壞皮膚屏障功能。ad皮損和外觀正常皮膚常伴有以金黃色葡萄球菌定制增加和菌群多樣性下降為主要表現(xiàn)的皮膚菌群紊亂，以及所導(dǎo)致的代謝功能異常，促進了皮膚炎癥的發(fā)展。反復(fù)搔抓是導(dǎo)致皮膚炎癥加重和持續(xù)的重要原因，搔抓促使角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，也會導(dǎo)致自身抗原釋放，產(chǎn)生針對自身抗原的ige。非免疫性因素如神經(jīng)-內(nèi)分泌因素也可參與皮膚炎癥的發(fā)生和發(fā)展。

4、目前外用涂抹劑是治療特應(yīng)性皮炎的主要手段，現(xiàn)有的抹劑有外用糖皮質(zhì)激素、吡美莫司乳膏等。但考慮到藥物的副作用及機體的抗藥性，在綜合治療過程中外用藥的使用劑量和使用時限都需經(jīng)過慎重的考量。生物制劑是當(dāng)前制藥行業(yè)的熱門研究內(nèi)容，如dupilumab是白細胞介素4(il-4)/13受體α鏈的全人源單克隆抗體，可阻斷il-4和il-13的生物學(xué)作用，對成人中重度ad具有良好療效。但目前對ad所嘗試使用的分子制劑臨床數(shù)據(jù)較少，且造價高昂。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備方法。

2、本發(fā)明的另一目的在于提供上述制備方法制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的應(yīng)用。

3、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

4、一種痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備方法，包括如下步驟：

5、(1)將痤瘡丙酸桿菌在體外條件下進行冷凍干燥，獲得凍干痤瘡丙酸桿菌；

6、(2)將上述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂、丙二醇、邊緣激活劑和無菌水混合均勻后，用直徑為2-4mm的陶瓷研磨珠進行冷凍研磨后，去除陶瓷研磨珠，即得含有痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的分散液。

7、在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，所述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂和丙二醇的質(zhì)量比為0.01∶0.4∶2。

8、進一步優(yōu)選的，所述邊緣激活劑為吐溫80，其添加量為所述磷脂的25wt％。

9、更進一步優(yōu)選的，所述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂、丙二醇、邊緣激活劑和無菌水的總量以10g記，則步驟(2)所得的溶液含有凍干痤瘡丙酸桿菌10mg，磷脂400mg，丙二醇2g，吐溫80?100mg。

10、在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，所述冷凍研磨具體為：預(yù)冷至-40℃，在70hz頻率下震蕩120s，間隔10s后再震蕩120s，此為一循環(huán)；共進行12循環(huán)，循環(huán)之間間隔10s。

11、上述制備方法制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑在制備特應(yīng)性皮炎治療組合物中的應(yīng)用。

12、在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，所述特應(yīng)性皮炎治療組合物中還含有蜂海綿骨針。

13、一種特應(yīng)性皮炎治療組合物，其有效成分包括上述制備方法制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑。

14、在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中，還包括蜂海綿骨針。

15、本發(fā)明的有益效果是：

16、1、本發(fā)明制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑穩(wěn)定性好，粒徑合適。

17、2、本發(fā)明制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備過程添加磷脂，可以有效提高制劑的穩(wěn)定性，并盡可能保留有效的活性成分。

18、3、本發(fā)明制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑結(jié)合蜂海綿骨針能夠提高痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的滲透率，進而加快特應(yīng)性皮炎的修復(fù)。

技術(shù)特征：

1.一種痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂和丙二醇的質(zhì)量比為0.01∶0.4∶2。

3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述邊緣激活劑為吐溫80，其添加量為所述磷脂的25wt％。

4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂、丙二醇、邊緣激活劑和無菌水的總量以10g記，則步驟(2)所得的溶液含有凍干痤瘡丙酸桿菌10mg，磷脂400mg，丙二醇2g，吐溫80?100mg。

5.如權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的制備方法，其特征在于：所述冷凍研磨具體為：預(yù)冷至-40℃，在70hz頻率下震蕩120s，間隔10s后再震蕩120s，此為一循環(huán)；共進行12循環(huán)，循環(huán)之間間隔10s。

6.權(quán)利要求1至5中任一權(quán)利要求所述的制備方法制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑在制備特應(yīng)性皮炎治療組合物中的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于：所述特應(yīng)性皮炎治療組合物中還含有蜂海綿骨針。

8.一種特應(yīng)性皮炎治療組合物，其特征在于：其有效成分包括權(quán)利要求1至5中任一權(quán)利要求所述的制備方法制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑。

9.如權(quán)利要求8所述的一種特應(yīng)性皮炎治療組合物，其特征在于：還包括蜂海綿骨針。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的制備方法及其應(yīng)用，包括如下步驟：(1)將痤瘡丙酸桿菌在體外條件下進行冷凍干燥，獲得凍干痤瘡丙酸桿菌；(2)將上述凍干痤瘡丙酸桿菌、磷脂、丙二醇、邊緣激活劑和無菌水混合均勻后，用直徑為2?4mm的陶瓷研磨珠進行冷凍研磨后，去除陶瓷研磨珠，即得含有痤瘡丙酸桿菌納米化制劑的分散液。本發(fā)明制得的痤瘡丙酸桿菌納米化制劑穩(wěn)定性好，粒徑合適，結(jié)合蜂海綿骨針能夠提高其滲透率，進而加快特應(yīng)性皮炎的修復(fù)。

技術(shù)研發(fā)人員：陳銘,金悠美
受保護的技術(shù)使用者：廈門大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/6/30