本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，尤其涉及一種多功能無載體納米佐劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、癌癥作為一種易復(fù)發(fā)、難治愈的疾病嚴(yán)重威脅人類的健康。雖然近年來癌癥的治療方法和手段越來越多樣化，但單一的治療方法往往療效有限，不足以根除腫瘤，因此聯(lián)合療法逐漸被用于癌癥的治療。納米載體介導(dǎo)的光熱-免疫聯(lián)合療法不僅可以抑制近端腫瘤的生長并延緩遠(yuǎn)端腫瘤的生長，而且在預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移方面具有良好效果。其中ptt(光熱療法)是新興且高效的光激發(fā)癌癥治療方法，它可以利用光敏劑在特定波長的激光照射下將吸收的光子能量轉(zhuǎn)化為熱量，在一定時(shí)間內(nèi)導(dǎo)致腫瘤局部溫度升高殺死腫瘤細(xì)胞。研究證明腫瘤組織比正常組織對(duì)熱更敏感，更容易發(fā)生不可逆損傷，當(dāng)光熱治療將腫瘤局部溫度提升至48-60℃時(shí)，只需4-6min就會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的蛋白質(zhì)變性和dna損傷。而腫瘤疫苗作為一種可以誘導(dǎo)較強(qiáng)的抗腫瘤免疫的腫瘤免疫療法，受到了廣泛地關(guān)注。但腫瘤疫苗尚存在一些不足之處，如原發(fā)性腫瘤殺傷不徹底，免疫治療效果由于抗原提呈效率低、易引起腫瘤免疫逃逸而減弱等。因此，為了突破單一腫瘤疫苗療法難以根除原發(fā)性腫瘤的局限性，聯(lián)合消融性腫瘤療法的策略凸顯而出。

2、傳統(tǒng)的納米藥物遞送系統(tǒng)由于一些缺點(diǎn)限制了其臨床應(yīng)用，如復(fù)雜的制備過程、高生產(chǎn)成本、低載藥效率和潛在的納米材料相關(guān)毒性等。近年來，無載體納米藥物(完全由具有藥理活性的分子組成，不使用非治療性輔料)的概念引起了廣泛的關(guān)注，藥物分子通過氫鍵、疏水作用、靜電作用和π-π堆疊等驅(qū)動(dòng)力聚集形成均勻的納米結(jié)構(gòu)，具有制備工藝簡單、載藥效率高和可重復(fù)性大規(guī)模生產(chǎn)等顯著優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出了一種多功能無載體納米佐劑及其制備方法和應(yīng)用。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、一種多功能無載體納米佐劑的制備方法，包括以下步驟：

4、將氯化鈣和ind(吲哚莫德)溶解于有機(jī)溶劑中，在密封狀態(tài)下加入碳酸氫銨進(jìn)行反應(yīng)，離心，洗滌，烘干，得到icn(納米顆粒，為本發(fā)明自主命名，下同)；

5、將所述icn和氯化錳溶于有機(jī)溶劑中，超聲分散，調(diào)整ph至11，離心并洗滌，得到的沉淀即為micn(復(fù)合納米顆粒)；

6、將所述micn、鹽酸多巴胺、imq(咪喹莫特)溶于tris緩沖溶液中，攪拌，離心并洗滌，得到的沉淀即為micn@pi(即最終得到的多功能納米佐劑)。

7、進(jìn)一步地，在制備icn的過程中，所述氯化鈣和ind的質(zhì)量比為10∶1；

8、所述氯化鈣和有機(jī)溶劑的用量比為1mg∶(0.5-1.5)ml；

9、所述反應(yīng)的溫度為4℃，時(shí)間為1-2天；

10、所述離心的轉(zhuǎn)速為1000rpm，時(shí)間為10-20min。

11、進(jìn)一步地，所述icn、氯化錳、鹽酸多巴胺和imq的質(zhì)量比為1∶1∶0.2∶0.03；

12、所述icn與tris緩沖溶液的用量比為1mg∶1ml，tris緩沖溶液的濃度為0.01m。

13、進(jìn)一步地，在制備micn的過程中，所述icn與有機(jī)溶劑的用量比為1mg∶1ml；

14、所述超聲的參數(shù)為：采用3mm探頭，功率25-35％，處理時(shí)間1-3min，每間隔2s超聲2s。

15、進(jìn)一步地，在制備micn@pi的過程中，所述攪拌的轉(zhuǎn)速為3000rpm，時(shí)間為10-12h。

16、進(jìn)一步地，在制備micn@pi的過程中，還包括將所述imq先溶于dmso中。

17、本發(fā)明還提供一種利用上述制備方法制備得到的多功能無載體納米佐劑。

18、本發(fā)明還提供一種所述多功能無載體納米佐劑在制備提高機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)品中的應(yīng)用。

19、本發(fā)明還提供一種所述多功能無載體納米佐劑在制備治療腫瘤或抑制腫瘤轉(zhuǎn)移產(chǎn)品中的應(yīng)用。

20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)和技術(shù)效果：

21、本發(fā)明制備的無載體納米佐劑可以先通過ptt殺傷原位腫瘤，然后通過免疫治療進(jìn)一步抑制腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，具有實(shí)現(xiàn)光熱聯(lián)合免疫治療的時(shí)序性。

22、本發(fā)明制備的多功能納米佐劑可以引發(fā)系統(tǒng)性免疫應(yīng)答，單次治療抑制原發(fā)腫瘤，產(chǎn)生免疫記憶效應(yīng)，阻止腫瘤轉(zhuǎn)移。

技術(shù)特征：

1.一種多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，在制備icn的過程中，

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，在制備micn的過程中，

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，在制備micn@pi的過程中，所述攪拌的轉(zhuǎn)速為3000rpm，時(shí)間為10-12h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多功能無載體納米佐劑的制備方法，其特征在于，在制備micn@pi的過程中，還包括將所述imq先溶于dmso中。

7.一種利用權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的多功能無載體納米佐劑。

8.一種利用權(quán)利要求7所述的多功能無載體納米佐劑在制備提高機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)品中的應(yīng)用。

9.一種利用權(quán)利要求7所述的多功能無載體納米佐劑在制備治療腫瘤或抑制腫瘤轉(zhuǎn)移產(chǎn)品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種多功能無載體納米佐劑及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。該多功能納米佐劑最外層為光熱劑聚多巴胺與免疫激活劑IMQ，聚多巴胺可在近紅外激光照射下能夠熱消融局部腫瘤并產(chǎn)生特異性的腫瘤相關(guān)抗原，接著暴露納米佐劑內(nèi)核中的MnO<subgt;2</subgt;與IDO酶抑制劑IND，從而實(shí)現(xiàn)在緩解腫瘤缺氧的同時(shí)時(shí)序性發(fā)揮光熱?免疫聯(lián)合治療腫瘤的目的。

技術(shù)研發(fā)人員：張琳華,朱敦皖,楊凱悅,黃晨露,于慶雨
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10