本發(fā)明涉及生物微球凝膠，尤其涉及用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠。

背景技術：

1、毛細胞損傷是臨床的棘手疾患。毛細胞損傷所致疾患包括耳鳴、突發(fā)性耳聾、爆震性聾等。目前的治療手段最有效的手段主要有兩種：激素治療以及高壓氧治療。激素治療包括全身用藥及局部用藥。全身用藥所致的全身副作用大。局部鼓室注射激素藥物(如地塞米松)需每日在鼓膜上打孔注射。高壓氧治療須每日均進入高壓氧倉治療。二者在不同的科室治療(耳鼻喉科及高壓氧科)，過程繁瑣，耗費人力、物力，常常需要住院治療，每日奔波于不同科室之間。局部用藥因其局部濃度高、全身副作用小，效果較好而被推崇。

2、然而目前尚無能將激素治療以及高壓氧治療復合在一次診療過程的治療方式。開發(fā)一種一次鼓室注射即可為患耳長期緩釋糖皮質激素及氧氣的生物復方制劑，是毛細胞損傷相關疾患的迫切需求。

技術實現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，以解決傳統(tǒng)的技術問題。

2、本發(fā)明采用如下技術方案實現(xiàn)：

3、一種用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，包括如下制備步驟：

4、分別取25-35mg?a組分、35-50mg?b組分、25-35mg?c組分與50-100ml?d組分混合后，吸入醫(yī)用注射器，通過雙母魯爾直通醫(yī)用接頭將各組分充分均勻混合，即得，其中，a組分為(cat@caco3)微球，b組分為dex/cao2-ptmc(地塞米松/二氧化鈣-聚三亞甲基碳酸酯)，c組分為dex-ha(地塞米松-透明質酸鈉)，d組分為人工外淋巴液。

5、進一步地，所述a組分的制備步驟為：

6、(1)稱量12.11g三羥甲基氨基甲烷(tris)置于100ml燒杯中，加入約40ml的去離子水，充分攪拌溶解，加入濃hcl，調節(jié)溶液ph值至7.35-7.45之間，再將溶液定容至100ml，得到tris-hcl緩沖液；

7、(2)稱取過氧化氫酶(cat)400mg，溶于40ml?tris-hcl緩沖液中，得到10mg/ml的游離cat酶液；

8、(3)稱取16.52mg脲酶溶于2ml的tris-hcl緩沖液中，振蕩至充分溶解，得到脲酶溶液；

9、(4)用tris-hcl緩沖液配制2ml底物溶液，其中，底物溶液含有質量比4.9：4的氯化鈣和尿素，如0.392g氯化鈣和0.32g尿素；

10、(5)取10μl游離cat酶液和170μl底物溶液，加入至320μl脲酶溶液中，再置于渦旋振蕩器中，以3000r/min充分振蕩2min，靜置反應1.5h后，以2000r/min離心3min，沉淀即為a組分。

11、進一步地，在步驟(5)中，還包括以下后處理步驟：

12、將沉淀用去離子水洗滌3次，再次2000r/min離心2min，放置在4°冰箱保存。

13、進一步地，所述b組分的制備步驟為：

14、a、稱取dex?30mg、ptmc?100mg，分別稱取4個不同量的10mg-50mg?cao2；

15、b、各量取10ml?dcm(二氯甲烷溶劑)于4個樣品瓶中，將dex?30mg、ptmc?100mg和各分量的cao2分別放入各個dcm樣品瓶中(即每個dcm樣品瓶中均含有dex、ptmc和cao2)，密封；然后，用磁力攪拌器攪拌至完全溶解；接著，真空干燥72小時后，反復研磨直至可過300目過篩(孔徑48微米)，4°冰箱保存，即得。

16、進一步地，在步驟b中，磁力攪拌器的攪拌轉速為800rpm。

17、進一步地，所述c組分的制備步驟為：稱取dex?30mg，透明質酸鈉凝膠干粉30mg，二者混合，4°冰箱保存，即得。

18、進一步地，所述d組分的制備步驟為：稱取0.0191g氯化鈣、0.0171g氯化鎂、0.0403g氯化鉀、0.8006g氯化鈉、0.0991g葡萄糖和0.1192g?hepes(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)，在100ml的去離子水中溶解，用磁力攪拌器攪拌至完全溶解，4°冰箱保存，即得。以上溶液在模擬內耳環(huán)境中配置所得的溶液。

19、進一步地，磁力攪拌器的攪拌轉速為800rpm。

20、相比現(xiàn)有技術，本發(fā)明的有益效果在于：

21、1、本發(fā)明的多功能生物微球凝膠可同時釋放氧氣及激素，將氧氣及激素的多頻次、多地點、短效的診療行為整合為一次診療行為，使用方便，只需要鼓室注射一次即可完成治療，可節(jié)省大量人力、物力。

22、2、本發(fā)明的多功能生物微球凝膠使用范圍廣泛，與毛細胞急性損傷相關的疾病均可以使用，如突發(fā)性耳聾、急性耳鳴、爆震性聾。

技術特征：

1.用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，包括如下制備步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，所述a組分的制備步驟為：

3.根據(jù)權利要求2所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，在步驟(5)中，還包括以下后處理步驟：

4.根據(jù)權利要求1所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，所述b組分的制備步驟為：

5.根據(jù)權利要求4所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，在步驟b中，磁力攪拌器的攪拌轉速為800rpm。

6.根據(jù)權利要求1所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，所述c組分的制備步驟為：稱取dex?30mg，透明質酸鈉凝膠干粉30mg，二者混合，即得。

7.根據(jù)權利要求1所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，所述d組分的制備步驟為：稱取0.0191g氯化鈣、0.0171g氯化鎂、0.0403g氯化鉀、0.8006g氯化鈉、0.0991g葡萄糖和0.1192ghepes，在100ml的去離子水中溶解，用磁力攪拌器攪拌至完全溶解，即得。

8.根據(jù)權利要求7所述的用于治療急性毛細胞損傷的cat/dex-ptmc/ha多功能生物微球凝膠，其特征在于，所述磁力攪拌器的攪拌轉速為800rpm。

技術總結
本發(fā)明公開了用于治療急性毛細胞損傷的CAT/Dex?PTMC/HA多功能生物微球凝膠，包括：分別取25?35mgA組分、35?50mg?B組分、25?35mg?C組分與50?100ml?D組分混合后，吸入醫(yī)用注射器，通過雙母魯爾直通醫(yī)用接頭將各組分充分均勻混合，其中，A組分為CAT@CaCO<subgt;3</subgt;微球，B組分為Dex/CaO<subgt;2</subgt;?PTMC，C組分為Dex?HA，D組分為人工外淋巴液。上述多功能生物微球凝膠可同時釋放氧氣及激素，將氧氣及激素的多頻次、多地點、短效的診療行為整合為一次診療行為，使用方便，只需要鼓室注射一次即可完成治療，可節(jié)省大量人力、物力。

技術研發(fā)人員：許木清,張宏征
受保護的技術使用者：南方醫(yī)科大學珠江醫(yī)院
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/10/10