本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，特別涉及可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、人類隨著年齡的增長，面臨著最大的不可避免的問題就是機(jī)體的衰老，人體中的肌肉和膠原蛋白組織會(huì)產(chǎn)生不同程度的功能性退化，從而導(dǎo)致皮膚產(chǎn)生凹陷，彈性變差等問題，因此，人們研發(fā)了各種填充劑，以此來在皮膚凹陷處填充或通過異物來刺激膠原蛋白和肌肉的再生長，如玻尿酸、牛膠原蛋白等，但這些物質(zhì)作為填充劑所起到的填充效果較差，需要頻繁注射來保持填充效果。因此人們探索了用生物不可降解的材料制作成微球作為填充劑，如：聚乙烯醇(pva)、聚甲基丙烯酸甲酯(pmma)等。雖然這些填充劑的填充時(shí)間得到了增長，但是材料在體內(nèi)過久的殘留，會(huì)釋放有害物質(zhì)，并因此引發(fā)一系列的副反應(yīng)，危害人體健康。

2、生物可降解的高分子材料是一類在醫(yī)用方面很有應(yīng)用前景的材料，該類型的材料在人體中無毒且不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，在一定時(shí)間后，可以在人體內(nèi)降解后被機(jī)體吸收或排出體外。通過調(diào)節(jié)材料的各項(xiàng)性能參數(shù)，還可以根據(jù)需要獲得對應(yīng)的性能，特別對降解時(shí)間的調(diào)控。

3、聚羥基脂肪酸酯，英文名為polyhydroxyalkanoates，簡稱pha，是一種天然的高分子生物材料，由微生物合成的一種細(xì)胞內(nèi)聚酯。由于pha具有良好的生物相容性能、生物可降解性，是當(dāng)下最為理想的生物醫(yī)學(xué)材料之一。pha在體內(nèi)與細(xì)胞具有良好的細(xì)胞相容性，細(xì)胞可以在此種支架上良好生長，且該種支架可以降解為co2和h2o。為了便于注射，人們通常將其制為微球，可以通過針頭進(jìn)行注射。因?yàn)槿梭w吞噬細(xì)胞的存在，微球直徑通常在20微米以上，但微球過大又會(huì)堵塞針頭，甚至引起皮膚破裂。因此用于注射的微球大小通常為60微米以下。

4、殼聚糖，英文名chitosan，簡稱cs，是一種天然的堿性多糖，具有優(yōu)良的生物降解性、抑菌性、無毒性、抗癌能力、細(xì)胞親和性和生物效應(yīng)等許多獨(dú)特的性質(zhì)。殼聚糖被廣泛應(yīng)用于生物產(chǎn)品中，將其與pha結(jié)合后的微球，可以起到很好的生物填充作用，同時(shí)能夠避免注射時(shí)可能引起的感染問題。

5、針對現(xiàn)有技術(shù)存在以下問題：

6、在將pha材料制備可注射微球時(shí)，容易遇到制得的微球十分容易團(tuán)聚、粘連，形成較大的塊狀物質(zhì)的問題，給后續(xù)注射帶來不便，并且所制備微球粘附細(xì)胞的能力不強(qiáng)，不能很好地與組織相容，極大的阻礙了生物可降解材料微球作為填充劑的應(yīng)用。因此，急需一種新型的微球制備方案，解決微球的細(xì)胞粘附性不高、易團(tuán)聚、粘連的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

2、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

3、可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，該制備方法包括以下步驟：

4、步驟一：制備油相：將pha溶于有機(jī)溶劑，制備10-60mg/ml的pha/有機(jī)溶劑溶液；

5、步驟二：配置1％的殼聚糖/乙酸溶液；

6、步驟三：水相：配置0.5-1％的聚乙烯醇(pva)溶液，溶液中加入0.5％的tween-20。聚乙烯醇溶液作為表面活性劑使用，利于微球的成型過程，不同濃度的聚乙烯醇溶液分別用于兩次乳化過程中；聚乙烯醇溶液的比例為0.5％濃度；

7、步驟四：通過控制pha/有機(jī)溶劑溶液與殼聚糖溶液的體積比，預(yù)先將殼聚糖溶液與pha/有機(jī)溶劑溶液超聲破碎混合得到混合相；pha/有機(jī)溶劑與殼聚糖溶液的比例為1：1；

8、步驟五：攪拌條件下將混勻的混合相溶液滴加到水相中形成w/0乳液，一段時(shí)間后，揮發(fā)有機(jī)溶劑，將溶液分散到大劑量的水中，得到可注射的納米級多孔微球；混合相與水相的體積比為1：2。

9、溶劑比例，配制10mg/ml的pha/有機(jī)溶劑。此時(shí)形成的微球粒徑合適分散性好、具有多孔性、不易粘連。具體地，聚乙烯醇水溶液中，聚乙烯醇可以是超高聚合度的聚乙烯醇(分子量25～30萬)、高聚合度的聚乙烯醇(分子量17～22萬)、中聚合度的聚乙烯醇(分子量12～15萬)和低聚合度的聚乙烯醇(分子量為2.5～3.5萬)，聚乙烯醇的醇解度為78％-98％。

10、優(yōu)選的，所述步驟四中，pha：cs的濃度比為1：1。

11、優(yōu)選的，所述所選溶劑為二氯甲烷或三氯甲烷。

12、優(yōu)選的，所述pha材料為天然或非天然聚羥基脂肪酸酯。

13、優(yōu)選的，攪拌速率為500-800rpm。

14、可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球，由可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，制得可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球。

15、由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明相對現(xiàn)有技術(shù)來說，取得的技術(shù)進(jìn)步是：

16、1、本發(fā)明提供可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法，得到的微球，具有良好的生物相容性，分散性，具備多孔表面，親水性增強(qiáng)、粒徑適宜，且因與殼聚糖的結(jié)合從而具有了一定的抗菌抑菌性能。

17、2、本發(fā)明提供可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法，制得的可注射pha微球具有親水性、多孔結(jié)構(gòu)、適宜粒徑，可以用于組織填充等領(lǐng)域。

技術(shù)特征：

1.可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：該制備方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：所述步驟四中，pha：cs的濃度比為1：1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：所述所選溶劑為二氯甲烷或三氯甲烷。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：所述pha材料為天然或非天然聚羥基脂肪酸酯。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：攪拌速率為500-800rpm。

6.可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球，其基于權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球的制備方法，其特征在于：制備方法制得可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法，涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，該制備方法包括以下步驟：步驟一：制備油相：將PHA溶于有機(jī)溶劑，制備10?60mg/ml的PHA/有機(jī)溶劑溶液；步驟二：配置1％的殼聚糖/乙酸溶液；步驟三：水相：配置0.5?1％的聚乙烯醇(PVA)溶液，溶液中加入0.5％的Tween?20。本發(fā)明所述的可注射的殼聚糖復(fù)合聚羥基脂肪酸酯微球及其制備方法，得到的微球，具有良好的生物相容性，分散性，具備多孔表面，親水性增強(qiáng)、粒徑適宜，且因與殼聚糖的結(jié)合從而具有了一定的抗菌抑菌性能。

技術(shù)研發(fā)人員：高宏偉,劉柯雨,鄭亞鐸,王賽爭,于佳雯,張博雪,張紅蕾,張路路
受保護(hù)的技術(shù)使用者：高宏偉
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10