本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及col4a1和/或itgb1的抑制劑在尿路上皮癌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、尿路上皮癌作為全球第九大常見腫瘤，每年全球新增病例接近600000例，死亡病例約為210000例。目前對于患者的治療通常以手術(shù)治療為主，輔以化療、放療、靶向治療、免疫治療等，然而每種治療方案收獲的治療效果均十分有限?；熥鳛樽畛Ｒ姷妮o助治療方式，約36-65％的患者可在最初的治療中獲益，但幾乎所有患者最終都會產(chǎn)生化療耐藥。隨著耐藥性的產(chǎn)生，患者一般將在1-2年內(nèi)再度發(fā)病，疾病將在更短期內(nèi)繼續(xù)進展，最終發(fā)展為轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌，患者總的中位生存期僅為1年左右。盡管近年來在治療晚期尿路上皮癌上取得了一些進展，但如今仍無顯著提高患者無進展生存期以及總生存期的治療策略。尿路上皮癌惡性進展以及化療耐藥所涉及的潛在分子機制非常復(fù)雜，目前尚未完全清楚。

2、隨著高通量測序技術(shù)的不斷發(fā)展，多位研究人員基于傳統(tǒng)組織測序已經(jīng)鑒定了大量腫瘤惡性進展以及化療耐藥相關(guān)基因，驗證了它們的臨床表達特征，并借助腫瘤細胞系模型證實了其促進腫瘤進展和化療抵抗的作用。然而，靶向這些候選關(guān)鍵基因的治療策略所收獲的臨床治療效果卻出奇的有限，遠未達到令人滿意。究其原因，可能在于：1)這些研究主要關(guān)注于癌細胞中基因表達量及其突變位點的變化，忽略了腫瘤微環(huán)境中腫瘤細胞與其它細胞之間的相互作用；2)這些研究主要在細胞系水平進行，與患者體內(nèi)的真實情況并不一致。因此，目前仍需研究尿路上皮癌腫瘤微環(huán)境與腫瘤細胞間的相互作用，以解決腫瘤惡性進展、耐藥與復(fù)發(fā)等問題。背景技術(shù)中的信息僅僅在于說明本發(fā)明的總體背景，不應(yīng)視為承認或以任何形式暗示這些信息構(gòu)成本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為解決上述現(xiàn)有技術(shù)中的至少部分問題，本發(fā)明通過特異性sirna或靶向性抗體阻斷腫瘤細胞與微環(huán)境間的關(guān)鍵細胞通訊：col4a1-itgb1，通過腫瘤大小、組織病理學(xué)變化以及血管形成等指標評估聯(lián)合治療效果，發(fā)現(xiàn)靶向阻斷col4a1-itgb1可抑制尿路上皮癌惡性進展，而聯(lián)合化療可顯著抑制尿路上皮癌化療耐藥。具體地，本發(fā)明包括以下內(nèi)容。

2、本發(fā)明的第一方面，提供col4a1和/或itgb1抑制劑在制備治療或改善尿路上皮癌，特別是化療耐藥尿路上皮癌的藥物中的應(yīng)用，其中，所述抑制劑能夠降低col4a1和/或itgb1的量，或以競爭性結(jié)合的方式降低結(jié)合的col4a1-itgb1復(fù)合物的量。

3、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述抑制劑包括小分子化合物、核酸、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、酶、多肽和基因編輯工具中的至少一種。

4、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述核酸選自核酶、反義寡核苷酸、適配體、microrna、sirna或shrna。

5、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述抗體包括單克隆抗體、多克隆抗體、雙特異性抗體、嵌合抗體、人源化抗體。

6、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述抗原結(jié)合片段包括fab片段、fab’片段、fd片段、fd’片段、fv片段、dab片段、f(ab’)2片段或scfv片段。

7、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述藥物包括編碼所述抗體或其抗原結(jié)合片段的核酸分子。

8、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述藥物包括含有所述核酸分子或sirna的載體。

9、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述藥物包括含有所述核酸分子或所述載體的宿主細胞。

10、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，通過向受試者施用治療有效量的所述藥物實現(xiàn)所述治療或改善。

11、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述的抗體或其抗原結(jié)合片段，或所述sirna通過人工合成或基因工程方式制備。

12、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的應(yīng)用，其中，所述藥物包含可選的藥學(xué)上可接受的輔料。

13、本發(fā)明的第二方面，提供抑制劑在制備治療或改善尿路上皮癌，特別是化療耐藥尿路上皮癌的藥物中的應(yīng)用，其中，所述抑制劑為第一方面中的抑制劑。

14、本發(fā)明的第三方面，提供一種篩選用于治療或改善尿路上皮癌，特別是化療耐藥尿路上皮癌的藥物中的應(yīng)用，其包括以下步驟：

15、a.在體外使待測藥物與col4a1和/或itgb1接觸；

16、b.測量待測藥物與col4a1和/或itgb1的結(jié)合能力，或測量col4a1和/或itgb1的量，或測量結(jié)合的col4a1-itgb1復(fù)合物的量；

17、c.當所述待測藥物能夠特異性結(jié)合col4a1和/或itgb1，或所述待測藥物能夠降低col4a1和/或itgb1的量，或所述待測藥物能夠降低結(jié)合的col4a1-itgb1復(fù)合物的量，則將所述待測藥物篩選為用于治療或改善尿路上皮癌的候選藥物。

18、在某些實施方案中，根據(jù)本發(fā)明所述的藥物篩選方法，其中，所述待測藥物包括小分子化合物、核酸、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、酶或多肽等。

19、本發(fā)明運用尿路上皮癌患者原位腫瘤組織構(gòu)建了異種移植瘤(patient-derivedtumor?xenograft，pdx)模型，極大程度地模擬了患者體內(nèi)腫瘤環(huán)境，通過靶向col4a1-itgb1的特異性抗體進行局部治療，發(fā)現(xiàn)雙向阻斷col4a1-itgb1可顯著抑制血管形成、腫瘤生長以及化療耐藥。

技術(shù)特征：

1.col4a1和/或itgb1抑制劑在制備治療或改善尿路上皮癌的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述抑制劑能夠降低col4a1和/或itgb1的量，或以競爭性結(jié)合的方式降低結(jié)合的col4a1-itgb1復(fù)合物的量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑制劑選自以下中的至少一種：

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑制劑包括小分子化合物、核酸、蛋白質(zhì)、抗體或其片段、酶、多肽和基因編輯工具中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核酸包括核酶、反義寡核苷酸、適配體、microrna、sirna和shrna中的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抗體包括單克隆抗體、多克隆抗體、雙特異性抗體、嵌合抗體和人源化抗體中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抗原結(jié)合片段包括fab片段、fab’片段、fd片段、fd’片段、fv片段、dab片段、f(ab’)2片段和scfv片段中的至少一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，通過向受試者施用治療有效量的所述藥物實現(xiàn)所述治療或改善。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述尿路上皮癌為化療耐藥尿路上皮癌。

9.抑制劑聯(lián)合其它藥物在制備治療或改善尿路上皮癌的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述抑制劑為權(quán)利要求1-8任一項中的抑制劑。

10.一種篩選用于治療或改善尿路上皮癌的藥物的方法，其特征在于，包括：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開靶向COL4A1和/或ITGB1的抑制劑在尿路上皮癌臨床治療中的應(yīng)用。本發(fā)明通過特異性siRNA或靶向抗體阻斷腫瘤細胞與微環(huán)境間的關(guān)鍵細胞通訊：COL4A1?ITGB1，通過腫瘤大小、組織病理學(xué)變化以及血管形成等指標評估聯(lián)合治療效果，發(fā)現(xiàn)靶向阻斷COL4A1?ITGB1可抑制尿路上皮癌惡性進展，而聯(lián)合化療可顯著抑制尿路上皮癌化療耐藥，具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：馬曉世,馮昌銀,趙霞,李宛瑩,孫宜康,邢繪濤,劉利明,羅繼平,成志強
受保護的技術(shù)使用者：深圳市第三人民醫(yī)院（深圳市肝病研究所）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10