本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種靈芝酸類化合物丹芝酸e抑制腫瘤細(xì)胞增殖的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、靈芝是一種具有多種生物活性的藥用真菌，其主要活性成分有靈芝多糖、靈芝三萜、核苷類、甾醇類及蛋白質(zhì)等，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、保肝、抗衰老、抗氧化、抗炎等作用。目前，已經(jīng)從靈芝中分離出400多種不同的化學(xué)實(shí)體，其中，靈芝多糖和三萜類化合物是靈芝的主要成分，而靈芝三萜中的靈芝酸具有重要的藥理價(jià)值。靈芝酸是一類高度氧化的羊毛甾烷型四環(huán)三萜類次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有降血壓、降血脂、護(hù)肝、抗氧化、抗癌等多種生物學(xué)功能，是開(kāi)發(fā)抗癌藥物的重要先導(dǎo)性化合物。目前靈芝酸人工合成可以提高其產(chǎn)量和純度，一直是研究的熱點(diǎn)問(wèn)題。

2、書(shū)籍：徐宏喜，馮奕斌，朱國(guó)福.抗腫瘤中藥現(xiàn)代研究與臨床應(yīng)用[m].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2018:668.記載了從靈芝的子實(shí)體、菌絲體、孢子粉以及發(fā)酵液的提取物中分離得到的100余種三萜類成分，多數(shù)為高度氧化的羊毛甾烷衍生物，已確定的結(jié)構(gòu)中包括丹芝酸e。丹芝酸e，分子式為c30h44o5，該成分是和合成其它有顯著抗腫瘤活性靈芝酸的關(guān)鍵中間體，但現(xiàn)有技術(shù)目前對(duì)于該成分的研究較少，尚未發(fā)現(xiàn)有丹芝酸e在抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖層面的研究。

3、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，尋找一種靈芝酸類化合物丹芝酸e的新用途，從而拓展該成分的應(yīng)用范圍較為必要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，提供了一種靈芝酸類化合物丹芝酸e抑制腫瘤細(xì)胞增殖的應(yīng)用，該丹芝酸e能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞，包括人肝癌細(xì)胞、人胰腺癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞、人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞等。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供的丹芝酸e能夠用于制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖的產(chǎn)品。

4、進(jìn)一步地，所述腫瘤細(xì)胞包括人肝癌細(xì)胞、人胰腺癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞、人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞中的一種或多種。

5、進(jìn)一步地，所述人肝癌細(xì)胞包括hepg2細(xì)胞、hlf細(xì)胞和lm3細(xì)胞中的一種或多種，所述人胰腺癌細(xì)胞包括panc1細(xì)胞、mia?paca-2細(xì)胞、bxpc-3細(xì)胞、sw-1990細(xì)胞和8988t/gem細(xì)胞中的一種或多種，所述人前列腺癌細(xì)胞包括pc-3細(xì)胞和/或du145細(xì)胞，所述人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞包括u87細(xì)胞，所述人骨肉瘤細(xì)胞包括u2os細(xì)胞，所述人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞包括rd細(xì)胞，所述人宮頸癌細(xì)胞包括hela細(xì)胞，所述人結(jié)腸癌細(xì)胞包括ht-29細(xì)胞。

6、值得說(shuō)明的是，本發(fā)明中記載的“8988t/gem細(xì)胞”具體指對(duì)吉西他濱(gem)耐藥的8988t細(xì)胞。

7、優(yōu)選地，所述腫瘤細(xì)胞為人宮頸癌細(xì)胞和/或人結(jié)腸癌細(xì)胞。

8、優(yōu)選地，所述腫瘤細(xì)胞包括hela細(xì)胞和/或ht-29細(xì)胞。

9、進(jìn)一步地，所述丹芝酸e利用米曲霉異源合成制得。

10、在一些具體的實(shí)施方式中，所述丹芝酸e的合成方法包括以下步驟：

11、在生產(chǎn)hldoa(靈芝酸)的米曲霉菌株中，導(dǎo)入?yún)⑴c靈芝酸前體生物合成的后修飾cyp450基因。通過(guò)對(duì)代謝產(chǎn)物的檢測(cè)與鑒定，確定細(xì)胞色素p450氧化酶能夠催化c11和c15位的氧化反應(yīng)，從而催化hldoa生成丹芝酸e。

12、值得說(shuō)明的是，本發(fā)明選用的利用米曲霉異源合成制得的丹芝酸e亦可替換為其他方式合成的丹芝酸e或天然提取的丹芝酸e。

13、進(jìn)一步地，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為20-100μm。

14、優(yōu)選地，當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞人胰腺癌細(xì)胞為時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞或人惡性胚胎橫紋肌肉瘤細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人宮頸癌細(xì)胞或人結(jié)腸癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為20-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人前列腺癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；

15、進(jìn)一步地，所述丹芝酸降低腫瘤細(xì)胞活性通過(guò)ic50值體現(xiàn)：添加丹芝酸處理后腫瘤細(xì)胞后，hepg2細(xì)胞的ic50值為66.28μm，lm3細(xì)胞的ic50值為93.35μm，hlf細(xì)胞的ic50值為67.61μm；panc1細(xì)胞的ic50值為170.2μm，mia?paca-2細(xì)胞的ic50值為54.79μm，bxpc-3細(xì)胞的ic50值為51.81μm，sw-1990細(xì)胞的ic50值為132.0μm，8988t/gem細(xì)胞的ic50值為105.7μm；u2os細(xì)胞的ic50值為80.60μm；rd細(xì)胞的ic50值為85.46μm；hela細(xì)胞的ic50值為34.16μm；u87細(xì)胞的ic50值為81.73μm；pc-3細(xì)胞的ic50值為92.63μm，du145細(xì)胞的ic50值為343.3μm；ht-29細(xì)胞的ic50值為30.83μm。

16、進(jìn)一步地，所述產(chǎn)品包括藥物。

17、進(jìn)一步地，所述藥物的成分包括丹芝酸e和藥學(xué)上可接受的輔料。

18、進(jìn)一步地，所述藥物的劑型包括口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、膏劑、粉劑、注射劑、噴霧劑或丸劑。

19、本發(fā)明所取得的技術(shù)效果是：

20、本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了丹芝酸e的新用途，該的丹芝酸e利用米曲霉異源合成制得，能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞，包括人肝癌細(xì)胞、人胰腺癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞、人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞等。

技術(shù)特征：

1.丹芝酸e在制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述腫瘤細(xì)胞包括人肝癌細(xì)胞、人胰腺癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞、人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞中的一種或多種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述人肝癌細(xì)胞包括hepg2細(xì)胞、hlf細(xì)胞和lm3細(xì)胞中的一種或多種，所述人胰腺癌細(xì)胞包括panc1細(xì)胞、mia?paca-2細(xì)胞、bxpc-3細(xì)胞、sw-1990細(xì)胞和8988t/gem細(xì)胞中的一種或多種，所述人前列腺癌細(xì)胞包括pc-3細(xì)胞和/或du145細(xì)胞，所述人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞包括u87細(xì)胞，所述人骨肉瘤細(xì)胞包括u2os細(xì)胞，所述人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞包括rd細(xì)胞，所述人宮頸癌細(xì)胞包括hela細(xì)胞，所述人結(jié)腸癌細(xì)胞包括ht-29細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述腫瘤細(xì)胞為人宮頸癌細(xì)胞和/或人結(jié)腸癌細(xì)胞。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述丹芝酸e利用米曲霉異源合成制得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為20-100μm。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人肝癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞人胰腺癌細(xì)胞為時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞或人惡性胚胎橫紋肌肉瘤細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人宮頸癌細(xì)胞或人結(jié)腸癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為20-100μm；當(dāng)所述腫瘤細(xì)胞為人前列腺癌細(xì)胞時(shí)，所述丹芝酸e在產(chǎn)品中的濃度為40-100μm。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述產(chǎn)品包括藥物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物的成分包括丹芝酸e和藥學(xué)上可接受的輔料。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述藥物的劑型包括口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、膏劑、粉劑、注射劑、噴霧劑或丸劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種靈芝酸類化合物丹芝酸E抑制腫瘤細(xì)胞增殖的應(yīng)用，涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，該丹芝酸E利用米曲霉異源合成制得，能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞，包括人肝癌細(xì)胞、人胰腺癌細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人骨肉瘤細(xì)胞、人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人前列腺癌細(xì)胞和人結(jié)腸癌細(xì)胞等。

技術(shù)研發(fā)人員：李振皓,李明焱,滕春波,徐靖,梁洋,周莎莎,崔潤(rùn)姿,劉成偉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：浙江壽仙谷醫(yī)藥股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9