本發(fā)明屬于生物，具體涉及stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、自身免疫性疾病(autoimmune?disease，aid)是一類免疫系統(tǒng)失調(diào)所致的疾病，其特點(diǎn)是免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊自身組織，導(dǎo)致持續(xù)性的炎癥反應(yīng)和組織損傷，對(duì)患者的生活質(zhì)量和健康造成了嚴(yán)重影響。研究表明，aid的發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，涉及遺傳、激素、環(huán)境等多個(gè)因素。其中，免疫耐受的破壞被認(rèn)為是其中一個(gè)重要的致病機(jī)制。在正常情況下，機(jī)體能夠通過(guò)免疫耐受機(jī)制辨別自身和外來(lái)抗原，但在aid患者中，這一機(jī)制出現(xiàn)異常，導(dǎo)致免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織產(chǎn)生攻擊性反應(yīng)。針對(duì)aid的治療一直是醫(yī)學(xué)研究的焦點(diǎn)之一。

2、近年來(lái)，口服免疫耐受作為一種新型治療方法備受關(guān)注。它通過(guò)口服給藥的方式，誘導(dǎo)機(jī)體對(duì)特定抗原產(chǎn)生免疫耐受，從而抑制異常免疫反應(yīng)，減少或防止aid的發(fā)生和發(fā)展?？诜庖吣褪艿闹饕委煵课皇切∧c。小腸是免疫系統(tǒng)的重要器官之一，擁有大量的淋巴細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞，是機(jī)體對(duì)外界抗原進(jìn)行識(shí)別和調(diào)節(jié)的關(guān)鍵場(chǎng)所。在小腸黏膜中存在著特殊的免疫環(huán)境，其中的免疫細(xì)胞和結(jié)構(gòu)有助于維持免疫平衡和耐受狀態(tài)?？诜庖吣褪艿臋C(jī)制包括多個(gè)方面的相互作用，其中包括免疫調(diào)節(jié)作用、抗原處理和呈遞、免疫耐受細(xì)胞因子和腸道微生物調(diào)節(jié)等。這些機(jī)制共同調(diào)節(jié)著免疫系統(tǒng)的功能，可以減輕或預(yù)防aid的發(fā)生和發(fā)展。

3、斯鈣素1(stanniocalcin1，stc1)是一種分泌性糖蛋白，最初在魚(yú)類中發(fā)現(xiàn)，后證實(shí)在哺乳動(dòng)物中廣泛存在(ncbi登錄號(hào)nm_003155.3，gene?id:6781)。其具有兩個(gè)同源結(jié)構(gòu)域，廣泛表達(dá)于心臟、腎臟等組織中。stc1表達(dá)受激素和細(xì)胞應(yīng)激等調(diào)控，參與多種生物過(guò)程，如抗炎、抗氧化等。stc1通過(guò)磷酸化修飾或自分泌及旁分泌激活下游信號(hào)通路，影響免疫系統(tǒng)、細(xì)胞增殖等。

4、目前的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，強(qiáng)烈表明了stc1可能在免疫耐受中扮演著重要角色，特別是在腸道免疫耐受方面，stc1的功能尤為關(guān)鍵。因此，深入研究stc1在免疫耐受中的具體作用和機(jī)制，尤其是在腸道免疫耐受中的角色，對(duì)于理解免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)以及開(kāi)發(fā)新的自身免疫疾病治療策略具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用。

4、進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述藥物包含用于增加患者體內(nèi)stc1基因或蛋白的量的基因工程產(chǎn)品。

5、進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述基因工程產(chǎn)品為增加體內(nèi)stc?1基因或蛋白的量的促進(jìn)型化學(xué)類藥物。

6、進(jìn)一步，優(yōu)選的是，促進(jìn)型化學(xué)類藥物為氯化鈣或丹參酸b。

7、經(jīng)過(guò)本發(fā)明研究，可以通過(guò)提高患者體內(nèi)stc?1基因表達(dá)產(chǎn)物、促進(jìn)型mirna、促進(jìn)型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、用藥學(xué)上可接受的載體來(lái)實(shí)現(xiàn)；所述的載體包括質(zhì)粒載體、病毒類載體。即用于增加患者體內(nèi)stc?1基因或蛋白的量的試劑可以為提高患者體內(nèi)stc?1基因表達(dá)產(chǎn)物、促進(jìn)型mirna、促進(jìn)型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、用藥學(xué)上可接受的載體。

8、經(jīng)過(guò)本發(fā)明研究，可以在通過(guò)口服途徑誘導(dǎo)口服免疫耐受治療自身免疫疾病的同時(shí)，輔以促進(jìn)體內(nèi)stc1基因或蛋白表達(dá)的基因工程產(chǎn)品(包括載體藥物、化學(xué)藥物)，增強(qiáng)口服免疫耐受的誘導(dǎo)水平，治療自身免疫疾病。載體藥物為：即提高體內(nèi)stc?1基因表達(dá)產(chǎn)物、促進(jìn)型mirna、促進(jìn)型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、用藥學(xué)上可接受的載體。促進(jìn)型化學(xué)藥物如：氯化鈣(cacl2)、丹參酸b(sal?b)等。

9、本發(fā)明申請(qǐng)人在研究中發(fā)現(xiàn)，在成功誘導(dǎo)口服耐受小鼠的結(jié)腸組織及腸固有層淋巴細(xì)胞中stc1高表達(dá)，提示stc?1在口服耐受中發(fā)揮重要作用。本發(fā)明的目的是為了揭示stc?1的分子機(jī)制和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，深入了解腸道免疫耐受的分子機(jī)制，為自身免疫疾病的靶向治療提供初步的理論基礎(chǔ)，并為自免疾病的預(yù)防和治療機(jī)制提供部分見(jiàn)解。這些研究成果也將為臨床實(shí)驗(yàn)提供理論及依據(jù)，以最終實(shí)現(xiàn)預(yù)防和治愈自身免疫疾病的目標(biāo)。

10、本發(fā)明主要探討的是：

11、(1)stc1在口服耐受小鼠模型中高表達(dá)；

12、(2)向m2方向極化的巨噬細(xì)胞中stc1高表達(dá)；

13、(3)過(guò)表達(dá)stc1能夠抑制巨噬細(xì)胞的分化以及向m1方向的極化，促進(jìn)向m2方向極化；

14、(4)敲低stc1能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞的分化以及向m1方向的極化，抑制向m2方向極化。

15、(5)過(guò)表達(dá)stc1激活tgf-β信號(hào)通路。

16、本發(fā)明中，口服耐受小鼠模型為balb/c小鼠口服卵清蛋白(ova)后構(gòu)建的模型，檢測(cè)小鼠結(jié)腸和腸固有層淋巴細(xì)胞中stc1，il-10，tgf-β的表達(dá)水平。

17、接下來(lái)，在向m2方向分化的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(thp-1)中檢測(cè)stc?1基因和蛋白的表達(dá)情況。

18、經(jīng)本發(fā)明研究，在成功誘導(dǎo)免疫耐受的小鼠結(jié)腸組織中stc1的基因和蛋白都顯著高表達(dá)；另外，在向m2方向極化的thp-1細(xì)胞中stc1的基因和蛋白也都顯著高表達(dá)。

19、過(guò)表達(dá)或激活stc1可以抑制thp-1細(xì)胞向促炎的m1方向極化，促進(jìn)th?p-1細(xì)胞向抗炎的m2方向極化，減少促炎因子的產(chǎn)生；敲低或抑制stc1的表達(dá)可以促進(jìn)thp-1細(xì)胞向促炎的m1方向極化，抑制thp-1細(xì)胞向抗炎的m2方向極化，增加促炎因子的產(chǎn)生。

20、緊接著，所述的過(guò)表達(dá)或激活stc1能夠激活與耐受相關(guān)的tgf-β信號(hào)通路。檢測(cè)thp-1敲低和過(guò)表達(dá)的細(xì)胞中tgf-β信號(hào)通路相關(guān)的分子蛋白smad?2、smad3、以及其磷酸化蛋白和tgf-β蛋白，結(jié)果顯示在過(guò)表達(dá)stc1的th?p-1細(xì)胞中tgf-β通路被激活。

21、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為：

22、1.本發(fā)明確定了stc1與口服耐受的關(guān)系，其可以作為誘導(dǎo)口服耐受的靶點(diǎn)。本發(fā)明為研究口服耐受的機(jī)制提供了新的方向。

23、2.目前針對(duì)自身免疫性疾病的治療主要依靠非特異性的免疫抑制劑，具有加重感染或是腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；還有依靠單克隆抗體藥物進(jìn)行治療，雖然可以特異性作用于相關(guān)疾病靶點(diǎn)，但是價(jià)格高昂，令患者難以承受。本發(fā)明確定了過(guò)表達(dá)stc1能夠引起免疫耐受，那么利用為治療自身免疫性疾病提供了一條全新的途徑。

24、3.本發(fā)明提供的靶點(diǎn)stc1為制備自身免疫性疾病藥物提供新的方向；可以考慮將stc1與自身抗原聯(lián)用，能夠誘導(dǎo)自身抗原特異性的免疫耐受。

技術(shù)特征：

1.stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物包含用于增加患者體內(nèi)stc1基因或蛋白的量的基因工程產(chǎn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述基因工程產(chǎn)品為增加體內(nèi)stc1基因或蛋白的量的促進(jìn)型化學(xué)類藥物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的stc1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用，其特征在于，促進(jìn)型化學(xué)類藥物為氯化鈣或丹參酸b。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及STC1在制備用于治療自身免疫性疾病的藥物或維持腸道免疫耐受藥物中的應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了STC1基因或蛋白在口服耐受模型中的結(jié)腸組織和腸固有層淋巴細(xì)胞中高表達(dá)，進(jìn)一步明確STC1基因或蛋白在免疫耐受中的作用，具體地，過(guò)表達(dá)STC1基因能促進(jìn)或增加耐受細(xì)胞因子IL?10、TGF?β的表達(dá)，維持細(xì)胞的免疫耐受狀態(tài)；敲低STC1可以促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子TNF?α、IL?6、iNOS的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞的炎癥反應(yīng)；過(guò)表達(dá)STC1的THP?1細(xì)胞中TGF?β通路被激活。本發(fā)明提供的靶點(diǎn)STC1為誘導(dǎo)腸道免疫耐受及治療自身免疫性疾病藥物提供了新的方向。

技術(shù)研發(fā)人員：孫靜,王欣怡,謝孟鑫,李騰蛟,張?jiān)姾?烏美妮,李彥涵,李建芳,胡云章
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9