本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體涉及ml216在制備抗豬德爾塔冠狀病毒藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、豬德爾塔冠狀病毒(porcine?delta?coronavirus,pdcov)是一種新型豬腸道致病性冠狀病毒，能引起5～15日齡仔豬水樣腹瀉、嘔吐甚至死亡。各年齡段豬均易感pdcov，且pdcov不僅能單獨感染豬群使其患病，還可與其他致病病毒，例如，豬流行性腹瀉病毒(pedv)、豬傳染性胃腸炎病毒(tgev)等混合感染，混合感染率達(dá)44.4％。自發(fā)現(xiàn)以來，pdcov給各國豬養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，且目前尚無有效的疫苗和抗病毒藥物來控制pdcov感染。

2、pdcov為冠狀病毒科δ病毒屬，是一種包膜的陽性單鏈rna病毒，其基因組長度為25.4kb，是已知冠狀病毒中基因組最小的；其病毒粒子的形態(tài)具有多型性，且外膜上有若干棒狀突起結(jié)構(gòu)，呈典型的“皇冠”狀。pdcov編碼四種主要結(jié)構(gòu)蛋白，分別為刺突糖蛋白(s)，包膜蛋白(e)，膜蛋白(m)和核衣殼蛋白，同時編碼三種輔助蛋白，ns6、ns7和ns7a。國內(nèi)外針對pdcov藥物開發(fā)均做了大量的研究工作，但尚未研制出特別有效的特效藥物，這也給該病的防治帶來了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。

3、ml216[1-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-3-(5-(吡啶-4-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)脲]是針對blm(bloom’s?syndrome?protein，布盧姆綜合征蛋白)解旋酶活性的小分子抑制劑，其是recq?dna解旋酶家族的成員。由blm突變引起的bloom綜合癥與癌癥易感性、生長遲緩、免疫缺陷、日光敏感性和生育能力缺陷有關(guān)。相對于recq家族的其他成員，ml216對于blm具有選擇性，尤其是在體內(nèi)，ml216可能是在blm核酸底物結(jié)合位點起作用，抑制dna結(jié)合并阻斷blm的解旋酶活性，抑制細(xì)胞的增殖?；诖耍琺l216在癌癥等相關(guān)疾病或病癥治療領(lǐng)域受到廣泛的關(guān)注。例如，xiao-yan?ma,jia-fu?zhao等揭示ml216與順鉑(cisplatin，一種dna交聯(lián)劑)聯(lián)合使用，在前列腺癌細(xì)胞中顯示出協(xié)同作用，能夠增強抗腫瘤效果(doi:10.3390/molecules27248790)；ml216還被研究用于與parp抑制劑聯(lián)合使用，在非小細(xì)胞肺癌中具有放射增敏效果；yangyang?kong,chang?xu等揭示ml216與parp抑制劑聯(lián)合使用時，在非小細(xì)胞肺癌(nsclc)細(xì)胞中顯示出放射增敏效果(doi:10.20892/j.issn.2095-3941.2021.0178)；中國專利文獻(xiàn)cn113797338b公開的dbc1調(diào)控細(xì)胞衰老及其應(yīng)用，提供了ml216在制備預(yù)防或治療衰老相關(guān)疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用，所述衰老相關(guān)疾病或病癥包括肺疾病和病癥、腎臟疾病和病癥。然而，ml216對于治療病毒引起的各種疾病或病癥的應(yīng)用尚未有見于報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對上述的目前尚無有效的疫苗和抗病毒藥物來控制pdcov感染，且也尚未研制出針對pdcov的特效藥物的問題，本發(fā)明提供了ml216在制備抗豬德爾塔冠狀病毒藥物中的應(yīng)用，首次驗證ml216可抑制病毒的解旋酶，可達(dá)到抗病毒控制pdcov感染的效果。

2、本發(fā)明目的之一是提供ml216作為解旋酶抑制劑在制備治療或預(yù)防病毒感染藥物中的應(yīng)用。

3、優(yōu)選的，前述的應(yīng)用，所述病毒為豬病毒，進(jìn)一步優(yōu)選為豬冠狀病毒，最優(yōu)選為豬德爾塔冠狀病毒(pdcov)。

4、優(yōu)選的，前述的應(yīng)用，所述ml216作為有效成分或是有效成分之一在抗豬德爾塔冠狀病毒(pdcov)中的應(yīng)用。

5、本發(fā)明目的之二是提供ml216在以非治療為目的抑制豬德爾塔冠狀病毒產(chǎn)品或方法中的應(yīng)用。

6、本發(fā)明的有益效果：

7、1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)ml216具有抑制病毒體外感染的作用，為抗病毒藥物制備提供了一種新方案新思路。

8、2)本發(fā)明綜合利用細(xì)胞生物學(xué)和病毒學(xué)等技術(shù)，首次發(fā)現(xiàn)并驗證ml216具有抑制pdcov體外感染的作用，為pdcov的控制和治療提供了新方案新思路。

9、3)本發(fā)明提供了ml216在制備抗豬德爾塔冠狀病毒藥物中的應(yīng)用。

10、4)本發(fā)明利用llc-pk1細(xì)胞和雞胚驗證了ml216細(xì)胞毒性及其對pdcov抑制效果，結(jié)果顯示ml216在100μg/kg濃度下治療感染雞胚，能夠顯著延長雞胚死亡時間及降低死亡率。

11、5)本發(fā)明首次驗證了ml216作為解旋酶抑制劑，具有抗病毒增殖作用，可作為有效成分或是有效成分之一制備治療與預(yù)防豬德爾塔冠狀病毒藥物中的應(yīng)用或非治療為目的研究和應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.ml216作為解旋酶抑制劑在制備治療或預(yù)防病毒感染藥物中的應(yīng)用。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述病毒為豬病毒。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：所述病毒為豬冠狀病毒。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：所述病毒為豬德爾塔冠狀病毒。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于：所述ml216作為有效成分或是有效成分之一，在抗豬德爾塔冠狀病毒中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：所述ml216的濃度為0.5～200μm。

7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于：所述ml216的濃度為10～200μm。

8.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述ml216抑制pdcov的復(fù)制及釋放階段。

9.ml216在以非治療為目的抑制豬德爾塔冠狀病毒產(chǎn)品或方法中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開ML216在制備抗豬德爾塔冠狀病毒藥物中的應(yīng)用，特別是所述ML216作為有效成分或是有效成分之一，在制備抗豬德爾塔冠狀病毒（PDCoV）藥物中的應(yīng)用。首次揭露了ML216具有抑制病毒體外感染的作用，為抗病毒藥物制備提供了一種新方案新思路。且本發(fā)明綜合利用細(xì)胞生物學(xué)和病毒學(xué)等技術(shù)，首次發(fā)現(xiàn)并驗證ML216具有抑制PDCoV體外感染的作用，并利用LLC?PK1細(xì)胞和雞胚驗證ML216細(xì)胞毒性及其對PDCoV抑制效果，從而驗證了ML216作為解旋酶抑制劑，具有抗病毒增殖作用，可作為有效成分或是有效成分之一制備治療與預(yù)防豬德爾塔冠狀病毒藥物，具有重要的實用及經(jīng)濟(jì)價值。

技術(shù)研發(fā)人員：位燈國,劉國月,郭亮榮,孫巨,朱芾
受保護(hù)的技術(shù)使用者：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9