本發(fā)明屬于哺乳動(dòng)物斷肢再生研究,具體是一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法。
背景技術(shù):
1、哺乳動(dòng)物在進(jìn)化過程中逐漸失去了再生肢體的能力,而一些低等的脊椎動(dòng)物,如蠑螈,卻很容易再生出失去的那部分肢體。研究表明,低等脊椎動(dòng)物之所以能夠再生出失去的肢體是因?yàn)槠鋽嘀珨喽说摹⒎只说募?xì)胞能夠?qū)崿F(xiàn)“去分化”變回胚胎樣的細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)的,而哺乳動(dòng)物的組織細(xì)胞卻失去了這個(gè)去分化的功能。
2、有意思的是,鹿茸作為大型哺乳動(dòng)物的器官,卻能夠在失去后實(shí)現(xiàn)完全再生,因此為我們提供了一個(gè)難得的研究其他哺乳動(dòng)物不能實(shí)現(xiàn)器官再生機(jī)制的天然模型。最近我們的研究表明,鹿茸的完全再生與低等脊椎動(dòng)物的斷肢再生完全不同,但與一些哺乳動(dòng)物斷肢斷端愈合、長(zhǎng)骨骨折修復(fù)和小鼠指尖再生的過程極為相似:都是同時(shí)激活了斷端骨膜細(xì)胞的分裂、分化,從而建立生長(zhǎng)中心,形成環(huán)形軟骨圍繞在斷端的周圍。在鹿茸再生過程中,這個(gè)軟骨環(huán)與緊密包裹的皮膚互作,使之形成再生的“芽基”(生長(zhǎng)中心和軟骨出現(xiàn)在斷端的頂部),導(dǎo)致鹿茸再生。在長(zhǎng)骨骨折修復(fù)過程中,骨折線兩端的源于骨膜的軟骨環(huán)互作誘導(dǎo)橋連軟骨(修復(fù)芽基)形成,從而成功修復(fù)骨折。在小鼠指尖斷端有指甲根與軟骨環(huán)互作、形成再生芽基、導(dǎo)致受損的指尖再生。而在哺乳動(dòng)物,如鼠的斷肢斷端,由于沒有與軟骨環(huán)互作的適宜組織,所以軟骨環(huán)很快出現(xiàn)退化,導(dǎo)致出現(xiàn)斷端傷疤愈合。
3、基于此,如果要實(shí)現(xiàn)哺乳動(dòng)物斷肢再生,就必須探索一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢的斷端再生的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此,本發(fā)明的目的在于提供一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,以使大鼠斷肢斷端能夠有效再生。
2、本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:
3、一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,包括如下步驟:
4、s1將大鼠麻醉,然后選一側(cè)上肢脫毛;
5、s2?將脫毛后的大鼠腕關(guān)節(jié)處做一個(gè)環(huán)形切口,使上臂皮膚和鼠掌部皮膚完全斷開,并從上肢皮膚內(nèi)側(cè)由腕部沿著尺骨長(zhǎng)軸向近端做一個(gè)切口,沿切口將皮膚從肌肉層分離,并將分離后的皮膚拽向下方以暴露肌肉和結(jié)蹄組織層;
6、s3將尺骨和橈骨包裹的肌肉和結(jié)締組織層剔除掉,其后從腕關(guān)節(jié)下方將鼠掌鋸掉,讓剝離的皮膚重新恢復(fù)到原來的位置,將皮膚與橈骨、尺骨緊密貼合,其后將斷端兩側(cè)的皮膚閉合,使皮膚相對(duì)緊密地固定在橈骨和尺骨上,剪去多余的皮膚并進(jìn)行縫合。
7、作為本申請(qǐng)的一種實(shí)施方式,步驟s2中,切口的長(zhǎng)度為1.5?cm。
8、作為本申請(qǐng)的一種實(shí)施方式,步驟s3中,將尺骨和橈骨包裹的肌肉和結(jié)蹄組織層剔除掉時(shí),保留皮下毛細(xì)血管和神經(jīng),并暴露出尺骨和橈骨骨膜。
9、作為本申請(qǐng)的一種實(shí)施方式,步驟s3中,鼠掌鋸掉的位置為腕關(guān)節(jié)下方0.5?cm處。
10、相較現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的具有的有益效果是:
11、發(fā)明人通過對(duì)大鼠斷肢的斷端進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)形成的軟骨環(huán)與包裹的皮膚之間相隔著肌肉層和疏松結(jié)締組織層,基于現(xiàn)有技術(shù)中,大鼠的斷肢斷端軟骨環(huán)由于有夾層相隔不能與包裹皮膚互作,導(dǎo)致大鼠斷肢斷端不能再生。發(fā)明人在實(shí)際研發(fā)時(shí),將肌肉層和疏松結(jié)締組織層進(jìn)行剔除,使軟骨環(huán)與皮膚變的緊密相貼,從而人為地促進(jìn)了這兩種組織互作,成功實(shí)現(xiàn)了斷肢再生,至少是部分再生的目的。通過在大鼠斷肢再生上取得突破,能夠在后續(xù)中將該技術(shù)應(yīng)用于臨床,有望更多哺乳動(dòng)物包括人類實(shí)現(xiàn)斷肢、斷指再生夢(mèng)想。如今,由于交通事故和戰(zhàn)爭(zhēng)導(dǎo)致的斷肢斷指人數(shù)劇增。如果能通過人為干預(yù)的條件下,實(shí)現(xiàn)斷肢和斷指的再生,將對(duì)人類的健康做出巨大的貢獻(xiàn)。
1.一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,其特征在于,包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,其特征在于,步驟s2中,切口的長(zhǎng)度為1.5?cm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,其特征在于,步驟s3中,將尺骨和橈骨包裹的肌肉和結(jié)蹄組織層剔除掉時(shí),保留皮下毛細(xì)血管和神經(jīng),并暴露出尺骨和橈骨骨膜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種有效誘導(dǎo)大鼠斷肢部分再生的方法,其特征在于,步驟s3中,鼠掌鋸掉的位置為腕關(guān)節(jié)下方0.5?cm處。