本發(fā)明涉及合生元產(chǎn)品，具體涉及一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊及其制備方法與應用。

背景技術(shù)：

1、自閉癥(autism?spectrum?disorders，asd)，又稱孤獨癥，是一種終身性神經(jīng)發(fā)育障礙疾病，其特征是社交溝通和互動方面的缺陷以及行為或興趣模式的局限性和重復性。目前，asd已成為影響兒童健康的重要公共衛(wèi)生議題，它不僅極大地增加了家庭的經(jīng)濟負擔，也給社會帶來了沉重的經(jīng)濟壓力。

2、asd的確切發(fā)病機制尚不清楚，大量研究表明遺傳和環(huán)境因素的相互作用是asd的主要影響因素。具有特定遺傳或染色體特征，如脆性x染色體綜合征(fragile?x?syndrome，fxs)的人群更容易患自閉癥。環(huán)境因素例如妊娠期暴露于脂多糖、丙戊酸(valproic?acid，vpa)等外源性化學物質(zhì)，會直接影響胎兒神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，增加asd的易感性。由于asd患者普遍存在胃腸道疾病，且胃腸道癥狀與asd的社交狀態(tài)具有一定的的相關(guān)性。

3、大量研究表明，益生元、益生菌、特殊膳食以及糞便微生物群移植等針對改善腸道菌群的干預手段可以在一定程度上緩解自閉癥的癥狀。cn112384081b公開了一組包含人乳低聚糖的營養(yǎng)組合物，其對哺乳動物、出生至7歲之間的早產(chǎn)或足月的人類嬰兒或幼兒具有改善、增強、促進或調(diào)節(jié)cns中的血清素能功能的作用。然而，尚未有關(guān)于改善神經(jīng)發(fā)育障礙相關(guān)的自閉樣行為的功能。鼠李糖乳桿菌也被證明可以改善焦慮和抑郁相關(guān)行為，然而尚未有鼠李糖乳桿菌相關(guān)產(chǎn)品在干預神經(jīng)發(fā)育障礙疾病中的應用。

4、目前，國內(nèi)外市場上主要是添加單一或多種常見益生菌和益生元產(chǎn)品，而大多數(shù)益生菌口服后定植能力較差，益生菌作為重要的活性物質(zhì)，其活力在定植過程中會受到多種因素影響，如胃腸道分泌的胃酸及膽汁酸、極端ph、抗菌肽、微生物之間的拮抗作用都極大的抑制了益生菌的定植，從而導致無法長期有效的定植在腸道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊及其制備方法與應用，有效解決了現(xiàn)有的益生菌由于胃腸道分泌的胃酸及膽汁酸、極端ph、抗菌肽、微生物之間的拮抗作用，導致益生菌無法長期有效地定植在腸道，從而減弱益生菌產(chǎn)品對asd的改善作用的技術(shù)問題，同時提供了一種具有改善神經(jīng)發(fā)育障礙的自閉樣行為的合生元，且制備的鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊具有更好的耐胃酸能力和腸液釋放能力。

2、本發(fā)明的第一個目的是提供了一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊，其特征在于，包括以下質(zhì)量百分比的原料：鼠李糖乳桿菌65％～84％，益生元5％～10％，果膠3％～9％、甘油1％～5％、l-抗壞血酸鈉1％～5％、脫脂乳粉6％～14％，合計100％；所述鼠李糖乳桿菌的活菌數(shù)≥1×1010cfu/g。

3、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述鼠李糖乳桿菌為鼠李糖乳桿菌c502，于2024年2月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為gdmccno.64357。

4、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述益生元為谷物β-葡聚糖，包括青稞β葡聚糖或燕麥β葡聚糖。

5、本發(fā)明的第二個目的是提供一種上述鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊的制備方法，包括以下步驟：

6、稱取以下質(zhì)量百分比的原料：鼠李糖乳桿菌65％～84％，益生元5％～10％，果膠3％～9％、甘油1％～5％、l-抗壞血酸鈉1％～5％、脫脂乳粉6％～14％；

7、將益生元溶解于水中形成益生元溶液，將鼠李糖乳桿菌接種至mrs液體培養(yǎng)基中，于37℃培養(yǎng)24～48小時，離心，得到菌泥，將所述菌泥溶解于所述益生元溶液中，得到合生元混合液；

8、將果膠溶解于水中形成果膠溶液，將所述合生元混合液加入所述果膠溶液，殺菌，加入無菌cacl2溶液，固化，得到合生元微膠囊；

9、向所述合生元微膠囊加入甘油、l-抗壞血酸鈉和脫脂乳粉，孵育，真空冷凍干燥，得到鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊。

10、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述益生元溶液為谷物β-葡聚糖溶液，所述益生元溶液的濃度為50～100g/l。

11、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述果膠溶液的質(zhì)量濃度為1％～3％，所述果膠溶液與合生元混合液的體積比為2～3:1。

12、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述無菌cacl2溶液的濃度為200～300mmol/l，所述合生元混合液與無菌cacl2溶液的體積比為1:10～20。

13、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述固化的時間為20～30min。

14、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述孵育的時間為10～20min。

15、作為一種優(yōu)選的實施方式，所述真空冷凍干燥的條件為：-80℃預凍6～10小時，冷凍干燥溫度-40～-60℃，真空度10～20pa，冷凍干燥時間36～48小時。

16、本發(fā)明的第三個目的是提供一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊在制備干預神經(jīng)發(fā)育障礙的自閉樣行為藥物中的應用，其特征在于，所述神經(jīng)發(fā)育障礙的自閉樣行為為重復性刻板行為和/或社交能力障礙。

17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

18、本發(fā)明提供了一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊及其制備方法與應用，以鼠李糖乳桿菌、益生元、果膠、甘油、l-抗壞血酸鈉、脫脂乳粉為原料制備得到合生元凍干微膠囊，本發(fā)明制備的合生元作為一種靶向腸道的微生態(tài)制劑，在到達腸道后實現(xiàn)了良好的定植效果。將所述合生元制備為凍干微膠囊，利用天然或人工合成的高分子化合物作為壁材將活性物質(zhì)包裹起來，使得活性物質(zhì)鼠李糖乳桿菌克服環(huán)境變化而不失活，并遞送到目標位置發(fā)揮作用，從而增強了鼠李糖乳桿菌在胃腸道的耐受能力，大大提高其穩(wěn)定性和活性。

技術(shù)特征：

1.一種鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊，其特征在于，包括以下質(zhì)量百分比的原料：鼠李糖乳桿菌65％～84％，益生元5％～10％，果膠3％～9％，甘油1％～5％，l-抗壞血酸鈉1％～5％，脫脂乳粉6％～14％，合計100％；以每克所述鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊計，所述鼠李糖乳桿菌的活菌數(shù)≥1×1010cfu/g。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊，其特征在于，所述鼠李糖乳桿菌為鼠李糖乳桿菌c502，于2024年2月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為gdmcc?no.64357。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊，其特征在于，所述益生元為谷物β-葡聚糖。

4.一種權(quán)利要求1～3任一項所述的鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述益生元溶液為谷物β-葡聚糖溶液，所述益生元溶液的濃度為50～100g/l。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述果膠溶液的質(zhì)量濃度為1％～3％，所述果膠溶液與合生元混合液的體積比為2～3:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述無菌cacl2溶液的濃度為200～300mmol/l，所述合生元混合液與無菌cacl2溶液的體積比為1:10～20。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述固化的時間為20～30min，所述孵育的時間為10～20min。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述真空冷凍干燥的條件為：-80℃預凍6～10小時，冷凍干燥溫度-40～-60℃，真空度10～20pa，冷凍干燥時間36～48小時。

10.一種權(quán)利要求1所述的鼠李糖乳桿菌合生元凍干微膠囊在制備干預神經(jīng)發(fā)育障礙的自閉樣行為藥物中的應用，其特征在于，所述神經(jīng)發(fā)育障礙的自閉樣行為為重復性刻板行為和/或社交能力障礙。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了鼠李糖乳桿菌及其合生元凍干微膠囊、制備方法與應用，屬于合生元產(chǎn)品技術(shù)領(lǐng)域。以鼠李糖乳桿菌、益生元、果膠、甘油、L?抗壞血酸鈉、脫脂乳粉為原料制備得到合生元凍干微膠囊，本發(fā)明制備的合生元作為一種靶向腸道的微生態(tài)制劑，在到達腸道后實現(xiàn)了良好的定植效果。將所述合生元制備為凍干微膠囊，利用天然或人工合成的高分子化合物作為壁材將活性物質(zhì)包裹起來，使得活性物質(zhì)鼠李糖乳桿菌克服環(huán)境變化而不失活，并遞送到目標位置發(fā)揮作用，從而增強了鼠李糖乳桿菌在胃腸道的耐受能力，大大提高其穩(wěn)定性和活性。

技術(shù)研發(fā)人員：劉志剛,郭瑞,何財安,劉鈺彤,徐宜曈,楊聰,張滋龍
受保護的技術(shù)使用者：西北農(nóng)林科技大學深圳研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10