本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及一種抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、宮頸癌是女性中最常見的惡性腫瘤之一，已經(jīng)成為全球女性生命健康的重大威脅。研究發(fā)現(xiàn)，幾乎所有的宮頸癌病例都和人乳頭瘤病毒(hpv)感染有關(guān)，高危型hpv感染是宮頸癌的主要危險因素，其中16和18型hpv與宮頸癌發(fā)生密切相關(guān)。由于目前尚無特效藥和有效治療方案，因此尋找新的抗hpv藥物對于預(yù)防宮頸癌、提高宮頸癌患者的治療效果具有重要意義。

2、藥用蚯蚓在我國醫(yī)學(xué)里被稱為地龍，其具有較獨特的化學(xué)組成，如高的不飽和脂肪酸含量，相對高豐度的fe、mn、cu、zn和se等微量元素，以及蚯蚓素、蚯蚓解熱堿和嘌呤、膽堿、膽甾醇等多種活性成分。研究發(fā)現(xiàn)，地龍?zhí)崛∥镌隗w外對癌細胞有直接抑制作用，在體內(nèi)能調(diào)節(jié)荷瘤小鼠脾臟b細胞的增生和分化，增強荷瘤小鼠的特異性免疫功能。然而，在臨床應(yīng)用中，由于藥效發(fā)揮受限直接限制了地龍?zhí)崛∥锏氖褂茫绕涫窃诳筯pv中的應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、基于上述技術(shù)背景，本發(fā)明的主要目的在于提供一種抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠及其制備方法與應(yīng)用，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。

2、為實現(xiàn)前述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括：

3、本發(fā)明第一方面在于提供一種抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

4、步驟1、將性成熟的地龍體腔液離心，收集上清液過濾、冷凍干燥，即得地龍?zhí)崛∥铮?/p>

5、步驟2、將卵磷脂和膽固醇置于溶劑中溶解，減壓蒸發(fā)溶劑，得到脂質(zhì)層，將步驟1制得的地龍?zhí)崛∥锶苡谒袛嚢杈鶆颍缓蠹尤胫|(zhì)層水化，得到脂質(zhì)囊泡，然后經(jīng)膨脹、超聲處理、擠壓，即得地龍?zhí)崛∥飩鬟f體；

6、步驟3、將步驟2制得的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體加入凝膠中，混合均勻，即得抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠。

7、步驟1中，

8、優(yōu)選地，將性成熟的地龍體腔液于0～4℃離心；

9、優(yōu)選地，將收集的上清液通過0.20～0.25μm的微孔濾膜過濾。

10、步驟2中，

11、優(yōu)選地，將邊緣活化劑與卵磷脂和膽固醇置于溶劑中共同溶解；或者，

12、將邊緣活化劑與步驟1制得的地龍?zhí)崛∥锶苡谒袛嚢杈鶆颉?/p>

13、優(yōu)選地，所述卵磷脂、膽固醇、邊緣活化劑和地龍?zhí)崛∥锏馁|(zhì)量比為(5～9)∶1∶(0.6～1.4)∶1。

14、優(yōu)選地，將蛋黃卵磷脂和膽固醇置于乙醇中溶解，隨后于45～55℃減壓蒸發(fā)溶劑，得到脂質(zhì)層。

15、優(yōu)選地，將步驟1制得的地龍?zhí)崛∥镉谑覝叵氯苡谒校缓笥?5～45℃、70～80rpm攪拌速度下加入脂質(zhì)層水化，水化時間1～2h，得到脂質(zhì)囊泡。

16、優(yōu)選地，將脂質(zhì)囊泡于室溫下膨脹1～3h，然后在冰浴中超聲處理20～30min，隨后將囊泡依次擠壓通過0.70～0.90μm、0.40～0.50μm和0.20～0.25μm的微孔濾膜。

17、步驟3中，

18、優(yōu)選地，所述凝膠為卡波姆980；

19、向卡波姆中加入水完全溶脹，調(diào)節(jié)ph至6.0～6.5，然后以質(zhì)量比為1∶1加入步驟2制得的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體中進行混合。

20、本發(fā)明第二方面在于提供一種根據(jù)本發(fā)明第一方面所述制備方法制得的抗hpv地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠。

21、本發(fā)明第三方面在于提供一種本發(fā)明第二方面所述抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠在制備預(yù)防及治療hpv感染的宮頸癌藥物中的應(yīng)用。

22、本發(fā)明所具有的有益效果：

23、(1)本發(fā)明將地龍?zhí)崛∥镓撦d于傳遞體中，并與凝膠復(fù)合，得到的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠不僅可促進宮頸癌細胞皺縮死亡，還可有效進入細胞內(nèi)抑制hpv病毒表達，通過細胞實驗證明其作用于siha細胞和hela細胞后可以顯著降低hpvmrna基因的表達水平，從而達到預(yù)防和治療hpv病毒感染人體的目的。

24、本發(fā)明中先將地龍?zhí)崛∥锓稚⒂谒?，再加入邊緣活化劑混合，能夠提高地龍?zhí)崛∥锏陌饴?。將ph值為6.0-6.5卡波姆凝膠與地龍?zhí)崛∥飩鬟f體混合，能夠進一步提高地龍?zhí)崛∥飩鬟f體的黏度，提高地龍?zhí)崛∥飩鬟f體和陰道內(nèi)壁的貼合性，有利于延長藥物(地龍?zhí)崛∥飩鬟f體)在陰道內(nèi)的滯留時間，提高地龍?zhí)崛∥锏乃幮Оl(fā)揮時間和效果，進一步提高預(yù)防和治療hpv病毒感染的效果，同時可以減少給藥次數(shù)以及改善患者用藥順應(yīng)性，提高地龍?zhí)崛∥镌诳筯pv中的應(yīng)用。

25、(2)本發(fā)明所述制備方法簡單，原料易得，可實現(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，該傳遞體凝膠在預(yù)防及治療hpv感染的宮頸癌藥物中具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1中，

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2中，

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3中，

9.一種根據(jù)權(quán)利要求1至8之一所述的制備方法制得的抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠。

10.權(quán)利要求9所述的抗hpv的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠在制備預(yù)防及治療hpv感染的宮頸癌藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗HPV的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠及其制備方法與應(yīng)用。所述制備方法將地龍?zhí)崛∥锖椭|(zhì)層攪拌水化，得到脂質(zhì)囊泡，然后經(jīng)膨脹、超聲處理、擠壓，即得地龍?zhí)崛∥飩鬟f體，最后加入調(diào)節(jié)pH后的卡波姆混合均勻，即得抗HPV的地龍?zhí)崛∥飩鬟f體凝膠。本發(fā)明通過將卡波姆凝膠與地龍?zhí)崛∥飩鬟f體復(fù)合，提高了對HPV病毒的抑制作用，可促進宮頸癌細胞皺縮死亡，通過凝膠與地龍?zhí)崛∥飩鬟f體結(jié)合，進一步提高地龍?zhí)崛∥飩鬟f體的黏度，提高地龍?zhí)崛∥飩鬟f體和陰道內(nèi)壁的貼合性，從而提高預(yù)防和治療HPV病毒感染的效果。

技術(shù)研發(fā)人員：趙虹,喬華,解軍,尹航,郭鑫
受保護的技術(shù)使用者：山西醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10