本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物細(xì)菌性疾病防控，涉及漆黃素的新適應(yīng)癥，具體涉及漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、“弧菌病”，即弧菌屬細(xì)菌引起的疾病，目前該病在全世界范圍內(nèi)的海水養(yǎng)殖場(chǎng)廣泛流行?；【〈蠖嗑哂邪l(fā)病快、感染力強(qiáng)、發(fā)病率和死亡率高的特點(diǎn)，給海水養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟(jì)損失。其中哈維氏弧菌(vibrio?harveyi)是弧菌病的主要病原，哈維氏弧菌可以感染凡納對(duì)蝦、大菱鲆、石斑魚等養(yǎng)殖動(dòng)物，感染魚類主要癥狀有體色變黑、眼球突出、體表潰瘍、肝脾組織充血和腸炎等癥狀。目前海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病的防治仍以免疫和抗生素為主，血清學(xué)多樣性和遺傳變異限制了弧菌疫苗的開發(fā)和降低其應(yīng)用效果，而抗生素和化學(xué)類藥物的長(zhǎng)期使用和濫用，使得弧菌對(duì)該類產(chǎn)生耐藥性，耐藥譜不斷擴(kuò)大，用藥效果不斷下降，導(dǎo)致養(yǎng)殖戶不得不加大用藥劑量，造成藥物殘留、環(huán)境污染、養(yǎng)殖環(huán)境微生態(tài)失衡和耐藥因子傳播至人畜病原等負(fù)面影響，嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全和公眾健康。天然化合物是生物體內(nèi)的次生代謝物或內(nèi)源性活性物質(zhì)，具有綠色安全、低殘留、低毒、多功能和低耐藥等優(yōu)勢(shì)。

2、病原微生物致病主要依賴于其毒力因子，包括粘附、定植、侵染、傳播、擴(kuò)散、免疫逃避和耐藥等相關(guān)毒力因子。生物膜是哈維氏弧菌的主要毒力因子之一。哈維氏弧菌在水體中主要以菌體聚集粘結(jié)在一起分泌黏性物質(zhì)形成生物膜的形式生存。其生物膜主要成分為多糖、核酸、脂類和蛋白等。哈維氏弧菌生物膜的功能主要包括：增強(qiáng)哈維氏弧菌對(duì)抗生素、外界環(huán)境壓力及宿主免疫的抵抗力；降低哈維氏弧菌的營(yíng)養(yǎng)消耗，延長(zhǎng)其生存時(shí)間；增強(qiáng)哈維氏弧菌對(duì)ph、滲透壓、營(yíng)養(yǎng)和氣體交換等外界環(huán)境條件的應(yīng)答能力；提高哈維氏弧菌菌體抗藥、抗機(jī)體免疫等。有研究表明生物膜上菌體耐藥率相比浮游菌高達(dá)1000倍。因此，抑制哈維氏弧菌生物膜的形成或降解已形成的哈維氏弧菌生物膜是降低其致病力和耐藥性的重要策略。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明解決的技術(shù)問題是提供一種防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物哈維氏弧菌病的天然藥物，即漆黃素。

2、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，漆黃素可應(yīng)用于制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病藥物中。

3、在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述的海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病的致病菌為哈維氏弧菌。

4、在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述海水養(yǎng)殖動(dòng)物為石斑魚。在一個(gè)具體實(shí)施例中，所述海水養(yǎng)殖動(dòng)物為珍珠龍膽石斑魚。

5、在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，將漆黃素制備成浸泡藥液或?qū)⑵狳S素與藥學(xué)上可接受的載體和賦形劑一起制備的不同劑型藥物。

6、在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，浸泡藥液的制備方法包括：稱取適量的漆黃素用無水乙醇助溶后，加到海水里使漆黃素終濃度為32μg/ml或64μg/ml，而無水乙醇終濃度為0.5％。

7、在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，漆黃素浸泡藥液的有效治療濃度為32μg/ml。

8、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

9、1.本發(fā)明首次將漆黃素作為藥浴的藥物應(yīng)用于防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病，尤其防治于石斑魚的哈維氏弧菌病，在有效劑量?jī)?nèi)可以提高感染哈維氏弧菌石斑魚的存活率，相對(duì)保護(hù)率達(dá)到45％～50％。

10、2.本發(fā)明中的漆黃素來源廣、殘留低、無污染、綠色安全、可工業(yè)化生產(chǎn)工藝、質(zhì)量可控、療效穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。

11、3.本發(fā)明所公開的防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病漆黃素對(duì)哈維氏弧菌的最小抑菌濃度(mic)和最小殺菌濃度(mbc)分別為64μg/ml和256μg/ml。漆黃素對(duì)哈維氏弧菌生物膜的半數(shù)有效濃度(median?effective?concentration，ec50)是9.53±1.32μg/ml。意味著在合適的劑量下，漆黃素可以在不殺死哈維氏弧菌的情況下，大大降低該菌的致病性，在不誘導(dǎo)菌生存壓力產(chǎn)生耐藥突變的情況下控制其感染。漆黃素有望作為開發(fā)新病原菌毒力抑制劑的先導(dǎo)化合物，有效解決當(dāng)前弧菌乃至細(xì)菌性疾病耐藥的難題。

技術(shù)特征：

1.漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病的應(yīng)用，特征在于：所述的海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病的致病菌為哈維氏弧菌。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病中的應(yīng)用，其特征在于：所述海水養(yǎng)殖動(dòng)物為石斑魚。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病中的應(yīng)用，其特征在于：所述海水養(yǎng)殖動(dòng)物為珍珠龍膽石斑魚。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病中的應(yīng)用，其特征在于：將漆黃素制備成浸泡藥液或?qū)⑵狳S素與藥學(xué)上可接受的載體和賦形劑一起制備的不同劑型藥物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病中的應(yīng)用，其特征在于：浸泡藥液的制備方法包括：稱取適量的漆黃素用無水乙醇助溶后，加到海水里使漆黃素終濃度為32μg/ml或64μg/ml，而無水乙醇終濃度為0.5％。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病中的應(yīng)用，其特征在于：漆黃素浸泡藥液的有效治療濃度為32μg/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物細(xì)菌性疾病防控技術(shù)領(lǐng)域，涉及漆黃素的新適應(yīng)癥，具體涉及漆黃素在制備防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)天然化合物漆黃素抑制哈維氏弧菌毒力因子生物膜形成，應(yīng)用于防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物類弧菌病，尤其防治于石斑魚的哈維氏弧菌病，最高可提高感染哈維氏弧菌病石斑魚的相對(duì)存活率50％。本發(fā)明中漆黃素作為一種抑制弧菌主要毒力因子生物膜形成的天然化合物，具有綠色、安全、高效、低耐藥概率等優(yōu)勢(shì)，在防治海水養(yǎng)殖動(dòng)物弧菌病、水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病方面具有很好的應(yīng)用潛力。

技術(shù)研發(fā)人員：郭偉良,王琰,林明孝,周永燦,趙子晨,向明麗,鄧恒為,鐘志鴻,王世鋒,孫云,張冬冬,李建龍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：海南大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19