本發(fā)明涉及基因治療的藥物，特別是涉及cap-gly功能肽在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、代謝相關(guān)脂肪性肝病(metabolic?dysfunction-associated?fatty?liverdisease，mafld)存在高度異質(zhì)性，是病因極其復(fù)雜的代謝性疾病。目前臨床上僅有一款甲狀腺受體激動(dòng)劑用于治療代謝紊亂相關(guān)性脂肪肝炎合并肝纖維化，但是該藥物療效不佳，且適應(yīng)群體相當(dāng)狹窄。

2、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(low-density?lipoprotein?receptor-relatedprotein，lrp1)作為重要的脂蛋白受體，在肝臟中高表達(dá)，參與調(diào)控糖脂代謝。提高lrp1受體活性或增強(qiáng)lrp1介導(dǎo)的信號(hào)通路，可以有效的防治糖脂代謝紊亂帶來(lái)的不良后果，這一全新的分子機(jī)制為臨床診斷和治療提供了新的治療思路。

3、驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員13b(kif13b)作為支架蛋白可以有效地促進(jìn)lrp1在caveolae上的募集，從而增強(qiáng)lrp1在脂膜上的內(nèi)吞作用。lrp1依靠clathrin和caveolin途徑實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)吞，從而完成對(duì)脂蛋白、蛋白酶、蛋白酶抑制劑復(fù)合物、細(xì)菌毒素、病毒等多種配體的轉(zhuǎn)運(yùn)和調(diào)控。hirokawa等人[1]的研究發(fā)現(xiàn)kif13b基因(即kif13b基因)敲除小鼠血漿總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇ldl-c、高密度脂蛋白膽固醇hdl-c和凝血因子fⅷ水平較對(duì)照組顯著升高；同時(shí)，kif13b基因敲除小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞ldl攝入量只有野生型小鼠的胚胎成纖維細(xì)胞ldl攝入量的60％，提示該現(xiàn)象可能與lrp1轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程異常相關(guān)。在另一個(gè)獨(dú)立研究中，chishti等人[2]在kif13b基因特異性敲除的小鼠中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)外周血中fⅷ水平的明顯變化，但是同樣觀察到血漿總膽固醇和ldl-c水平較野生型小鼠升高的現(xiàn)象。但遺憾的是，之前所有的研究均未報(bào)道kif13b基因缺失是否與肝臟脂質(zhì)代謝紊亂和代謝相關(guān)脂肪性肝病存在關(guān)聯(lián)，但kif13b基因及其功能域是否能作為藥物靶點(diǎn)來(lái)開(kāi)發(fā)治療代謝相關(guān)脂肪性肝病尚不清楚。

4、[1]y.kanai,d.wang,n.hirokawa,kif13b?enhances?the?endocytosis?oflrp1byrecruiting?lrp1?to?caveolae,the?journal?of?cell?biology,204(2014)395-408.

5、[2]j.mills,t.hanada,y.hase,l.liscum,a.h.chishti,ldl?receptor?relatedprotein?1requires?the?i(3)domain?of?discs-large?homolog?1/dlg1?forinteraction?with?the?kinesin?motor?protein?kif13b,biochim?biophys?acta?molcell?res,1866(2019)118552.

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了cap-gly功能肽在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)kif13b蛋白的cap-gly功能肽可以有效的減少肝細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積，為臨床上脂肪肝(特別是代謝相關(guān)脂肪性肝病)患者的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)和新策略。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供了cap-gly功能肽或提高cap-gly功能肽表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述cap-gly功能肽的氨基酸序列如seq?id?no.23所示。

4、本發(fā)明提供了含有cap-gly功能肽的蛋白或提高含有cap-gly功能肽的蛋白表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述cap-gly功能肽的氨基酸序列如seq?idno.23所示。

5、優(yōu)選的，所述蛋白包括驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員13b。

6、優(yōu)選的，所述治療脂肪肝的藥物為治療代謝相關(guān)脂肪性肝病(mafld)的藥物。

7、優(yōu)選的，所述治療脂肪肝的藥物為減少肝臟細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的藥物。

8、優(yōu)選的，所述治療脂肪肝的藥物為增加單磷酸腺苷激活的蛋白激酶α磷酸化的藥物。

9、優(yōu)選的，所述cap-gly功能肽的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no.20所示。

10、優(yōu)選的，所述提高cap-gly功能肽表達(dá)量的試劑包括過(guò)表達(dá)cap-gly的重組載體，所述cap-gly為cap-gly功能肽的編碼基因。

11、優(yōu)選的，提高含有cap-gly功能肽的蛋白表達(dá)量的試劑包括過(guò)表達(dá)編碼基因的重組載體，所述編碼基因?yàn)榫幋a含有cap-gly功能肽的蛋白的基因。

12、優(yōu)選的，所述重組載體的出發(fā)載體包括pcdna3.1表達(dá)載體。

13、有益效果：

14、本發(fā)明提供了cap-gly功能肽或提高cap-gly功能肽表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述cap-gly功能肽的氨基酸序列如seq?idno.23所示。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)在小鼠中過(guò)表達(dá)kif13b蛋白或其cap-gly功能肽可以有效地減少肝細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積，增加單磷酸腺苷激活的蛋白激酶α的磷酸化，為臨床上脂肪肝(特別是代謝相關(guān)脂肪性肝病)患者的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)和新策略。

技術(shù)特征：

1.cap-gly功能肽或提高cap-gly功能肽表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述cap-gly功能肽的氨基酸序列如seq?id?no.23所示。

2.含有cap-gly功能肽的蛋白或提高含有cap-gly功能肽的蛋白表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述cap-gly功能肽的氨基酸序列如seq?id?no.23所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蛋白包括驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員13b。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療脂肪肝的藥物為治療代謝相關(guān)脂肪性肝病的藥物。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療脂肪肝的藥物為減少肝臟細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的藥物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述治療脂肪肝的藥物為增加單磷酸腺苷激活的蛋白激酶α磷酸化的藥物。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述cap-gly功能肽的編碼基因的核苷酸序列如seq?id?no.20所示。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述提高cap-gly功能肽表達(dá)量的試劑包括過(guò)表達(dá)cap-gly的重組載體，所述cap-gly為cap-gly功能肽的編碼基因。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，提高含有cap-gly功能肽的蛋白表達(dá)量的試劑包括過(guò)表達(dá)編碼基因的重組載體，所述編碼基因?yàn)榫幋a所述含有cap-gly功能肽的蛋白的基因。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述重組載體的出發(fā)載體包括pcdna3.1表達(dá)載體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及基因治療的藥物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及CAP?Gly功能肽在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了CAP?Gly功能肽或提高CAP?Gly功能肽表達(dá)量的試劑在制備治療脂肪肝的藥物中的應(yīng)用，所述CAP?Gly功能肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.23所示。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)在小鼠中過(guò)表達(dá)KIF13B蛋白或其CAP?Gly功能肽可以有效地減少肝細(xì)胞中脂質(zhì)蓄積，增加單磷酸腺苷激活的蛋白激酶α的磷酸化，為臨床上脂肪肝(特別是代謝相關(guān)脂肪性肝病)患者的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)和新策略。

技術(shù)研發(fā)人員：冼勛德,王宇輝,黃薇,張玲,苗國(guó)琳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19