專利名稱:夏枯草抗腫瘤有效部位的提取方法及其提取物在制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種夏枯草抗腫瘤有效部位提取方法及其在抗腫瘤方面的作用。
技術(shù)背景
夏枯草為唇形科植物夏枯草Prunella vulgaris L的干燥成熟果穗，主要產(chǎn)于河 南省確山縣等地，具有清熱解毒、散結(jié)消腫之功效，可用于治療瘰癘癭瘤、乳癰腫痛等病癥。 夏枯草治療惡性淋巴瘤由來(lái)已久，許多偏方、驗(yàn)方都把夏枯草作為治療惡性淋巴瘤的主藥。 本專利申請(qǐng)人根據(jù)多年應(yīng)用以夏枯草為主藥的復(fù)方中藥制劑治療惡性淋巴瘤的臨床觀察， 發(fā)現(xiàn)其可使惡性淋巴瘤瘤體消退?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，夏枯草煎劑在體外實(shí)驗(yàn)中能誘導(dǎo) SGC-7901癌細(xì)胞的凋亡，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對(duì)小鼠艾氏腹水瘤及肉瘤S180均有抑制作用。夏枯 草提取物對(duì)小鼠白血病P388細(xì)胞及人肺腺癌A549細(xì)胞具有細(xì)胞毒樣作用。經(jīng)文獻(xiàn)檢索及 專利檢索尚沒(méi)有關(guān)于夏枯草有效提取部位抗惡性淋巴瘤的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)告。
以下是與本申請(qǐng)專利最接近的技術(shù)現(xiàn)狀。
(1)許多偏方、驗(yàn)方應(yīng)用夏枯草治療惡性淋巴瘤，均是簡(jiǎn)單的水煮煎劑。例如李學(xué) 源等應(yīng)用夏枯草、半枝蓮、昆布、海藻、烏骨藤等草藥用水將藥材浸沒(méi)、浸泡，按照常規(guī)的中 藥口服煎制方法加熱煎熬后過(guò)濾得濾液，通常將藥份煎熬2次，再將2次濾液進(jìn)行混合勾 兌，口服制成治療癌癥的藥物(申請(qǐng)?zhí)?02109997. 9授權(quán)公告號(hào)CN1169556C)
(2)武漢理工大學(xué)樓一層發(fā)明提出了一種治療高血壓的復(fù)方夏枯草膠囊及其制備 方法。該復(fù)方夏枯草膠囊以夏枯草、曼陀羅花、羅布麻、香蕉皮或者還有鉤藤、山楂、決明子、 菊花為原料，運(yùn)用超臨界CO2萃取技術(shù)提取浸膏，經(jīng)噴霧干燥制成細(xì)粒，再用公知制膠囊技 術(shù)制成膠囊顆粒。本復(fù)方夏枯草膠囊含有效成分齊墩果酸>0.2mg/粒(0.33g)，還含金絲 桃甙及槲皮素，經(jīng)毒性檢驗(yàn)和臨床應(yīng)用表明，未見(jiàn)明顯毒性反應(yīng)，治療高血壓療效顯著(專 利號(hào) ZL03118626. 2 授權(quán)公告號(hào):CN1212854C)。
(3)江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司肖偉等人發(fā)明涉及一種夏枯草提取物。所述提取 物的活性成分總酚酸的含量為60% -70%，迷迭香酸的含量為14% -21%。本發(fā)明夏枯草 提取物的酚酸部位具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用，對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有確切的治療作用，且其酚酸 部位具有增強(qiáng)免疫抑制作用(專利號(hào)ZL200410014142.X公告號(hào)CN1331488C)。本發(fā)明還 公開(kāi)了該種方法與新用途。其夏枯草提取物的具體制備方法為①取夏枯草藥材，分別以藥 材4 12倍量的40% 85%乙醇回流提取2 4次，每次1 2. 5小時(shí)，濾過(guò)，合并醇提 液，回收乙醇至無(wú)醇味，濃縮至相對(duì)密度至1. 0 1. 15，靜置冷藏12 36小時(shí)，傾出上清 液，加醇至含醇量達(dá)60% 75 %，加入濃氨水使PH等于7-8，回收乙醇，濃縮液加5-15%的 HCL調(diào)PH為3-4，用乙酸乙酯萃取5-7次，每次用量為濃縮液的2-4倍，回收乙酸乙酯至密度 為1. 30-1. 40的稠膏，真空干燥，粉碎即得。②第2種制備方法取夏枯草藥材，分別以藥材 4 12倍量的40% 85%乙醇回流提取2 4次，每次1 2. 5小時(shí)，濾過(guò)，水煎液濃縮至 密度至1. 0 1. 15，上大孔樹(shù)脂柱，用8-10倍柱體積水洗脫，水洗液棄去，再用12-14倍柱
3體積的50% -70%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至密度為1. 30-1. 40的稠膏，真空干燥， 粉碎即得。③第3種制備方法取夏枯草藥材，分別以藥材4 12倍量的40% 85%乙酸 乙酯回流提取2 4次，每次1 2. 5小時(shí)，濾過(guò)，回收乙酸乙酯液并濃縮至密度至1. 3 1. 4的稠膏，加藥材0. 5-1. 0倍量的0. 1 % -0. 5 %的NaOH溶解，再用10 % -20 %的HCL調(diào) PH至3-4，加乙酸乙酯萃取5-7次，合并乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯至密度為1. 30-1. 40 的稠膏，真空干燥，粉碎即得。上述提取物的干膏得率為1. 5% -3. 5% .
(4)楊孟君發(fā)明公開(kāi)了一種納米復(fù)方夏枯草制劑藥物(中藥飲片、膠囊、注射劑 或膜劑)，它是以納米夏枯草、納米香附、納米甘草、納米僵蠶、納米白芍、納米當(dāng)歸、納米陳 皮、納米桔梗、納米川芎、納米紅花、納米昆布、納米浙貝母、納米玄參、納米烏藥為原料，按 比例配制，制成新的藥物制劑，其顆粒細(xì)度達(dá)1200-1500目，粒徑為0. l-200nm，其中絕大部 分粒徑小于lOOnm，并具有新的物性。采用微波萃取、減壓濃縮、超音速射流技術(shù)噴霧干燥 等步驟制成。該藥物生物利用度高，主治癭瘤瘰疬、結(jié)核作痛，治療效果顯著。(申請(qǐng)?zhí)?01100229. 8 公開(kāi)號(hào)CN1363306)
現(xiàn)有的專利技術(shù)表明，夏枯草多是作為治療高血壓，抗炎、鎮(zhèn)痛作用提取制作的。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是確定夏枯草的抗腫瘤有效部位，提供一種低毒高效的抗腫瘤新藥 的提取方法，以提高腫瘤的治愈率。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種夏枯草抗腫瘤有效部位的提取方法，取夏枯草花 穗，用85% 96%的乙醇浸泡于提取器內(nèi)，加熱、回流、提??；將所得提取液濃縮至干得浸 膏，用容積比為1 0.5 1.2的氯仿和水或乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集 有機(jī)相和水相，濃縮至干；取有機(jī)相，用容積比為5 10 2 5 2 6的氯仿、甲醇、水 進(jìn)行溶解，待靜置后，分出上層，將上層溶液濃縮至干；取上層殘留物加流動(dòng)相溶解，比例按 每毫克上層殘留物加0. 5 5毫升的流動(dòng)相，進(jìn)行反相柱層析，以甲醇-水流動(dòng)相洗脫，收 集30% 80%甲醇洗脫液，將各個(gè)相的洗脫液濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。
所述夏枯草花穗為干燥花穗，用85% 96%的乙醇浸泡于多功能提取器內(nèi)，24 36小時(shí)后加熱、回流3 6個(gè)小時(shí)得提取液；將提取液減壓濃縮至干得浸膏，用容積比為 1 0.5 1.2的氯仿和水或乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集有機(jī)相和水相， 減壓濃縮至干；取有機(jī)相，用容積比為5 10 2 5 2 6的氯仿、甲醇、水進(jìn)行溶解， 待靜置3 6小時(shí)后，分出上層，將上層溶液減壓濃縮至干；取上層殘留物加水或甲醇溶解， 比例按每毫克上層殘留物加0. 5 5毫升的水，用大孔吸附樹(shù)脂或ODS柱吸附，以甲醇-水 溶液洗脫，收集30% 80%甲醇洗脫液，將各個(gè)相的洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤有 效部位。
所述的夏枯草抗腫瘤有效部位在制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。
國(guó)外將夏枯草作為自愈性和保健性產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)將夏枯草作為蔬菜食用，說(shuō)明夏枯 草安全、毒性小。臨床觀察研究表明單用夏枯草治療淋巴瘤近期有效率為12%，夏枯草與 化療藥物合用治療復(fù)發(fā)性淋巴瘤有效率提高18%，患者生存期延長(zhǎng)。采用本發(fā)明所述技術(shù) 方案確定的夏枯草有效部位在體外實(shí)驗(yàn)中可明顯抑制人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤 Jurkat細(xì)胞、人白血病K562細(xì)胞和人乳腺癌435S細(xì)胞增殖；體內(nèi)初步的實(shí)驗(yàn)研究表明，夏枯草有效部位對(duì)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的小鼠具有明顯的抑瘤效應(yīng)，并可明顯延長(zhǎng)其生 存期。夏枯草有效部位抗腫瘤作用肯定，毒性相對(duì)較低，一旦開(kāi)發(fā)成功，將產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì) 效益和社會(huì)效益。
夏枯草主要產(chǎn)于河南，作為一傳統(tǒng)中藥，具有藥理作用廣泛、療效顯著、無(wú)明顯毒 副作用、資源豐富、價(jià)廉易得、可長(zhǎng)期使用等優(yōu)點(diǎn)，因其抗腫瘤作用明確，若從中開(kāi)發(fā)出低毒 高效的抗淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的藥物，必將大大提高淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的治療效果，為國(guó)家 節(jié)約大量的經(jīng)濟(jì)資源，并可將河南省豐富的夏枯草資源推向國(guó)際市場(chǎng)，為其進(jìn)一步的開(kāi)發(fā) 利用提供廣闊的空間。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一、提取步驟
a、河南確山縣采集的6月底7月初夏枯草花穗，用95%的乙醇浸泡于多功能提取 器內(nèi)，30小時(shí)后加熱、回流5個(gè)小時(shí)得提取液，減壓濃縮提取液得浸膏，將所得浸膏一部分 進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)，另一部分進(jìn)行下步提取。
b、將提取液減壓濃縮至干得浸膏，用1 1的乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取， 分別收集有機(jī)相和水相，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
C、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取有機(jī)相，用容積比為8 5 3的氯仿、 甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置5小時(shí)后，分別收集上、下層液，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì) 胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
d、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取上層殘留物，按1 3比例(重量mg:容積ml) 加水溶解，ODS柱吸附后，用60%甲醇洗脫，將洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。
e、所述的體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)的MTT法。
f、最終所得的有效部位進(jìn)行體內(nèi)外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。
二、夏枯草有效部位體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下
從上表體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出
1.夏枯草有效部位可明顯抑制人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞、人 白血病K562細(xì)胞和人乳腺癌435S細(xì)胞增殖。
2.夏枯草有效部位對(duì)人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞、人白血病 K562細(xì)胞和人乳腺癌435S細(xì)胞的抑制作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系。
三、夏枯草有效部位體內(nèi)初步實(shí)驗(yàn)表明
1.夏枯草有效部位對(duì)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的C57小鼠具有明顯的抑瘤效應(yīng)。 夏枯草有效部位高劑量組(500mg/kg/d)、中劑量組(300mg/kg/d)、低劑量組(100mg/kg/d) 和環(huán)磷酰胺組(20mg/kg/d)抑瘤率分別為39. 54%,65. 26%,22. 30%和89. 39%。與陰性 對(duì)照組平均瘤體積相比，夏枯草中劑量組和高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 05)。
2.夏枯草有效部位高劑量組(500mg/kg/d)、中劑量組(300mg/kg/d)、低劑量組 (100mg/kg/d)與陰性對(duì)照組相比可明顯延長(zhǎng)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的C57小鼠的生存 期。
實(shí)施例2
一、提取步驟
a、河南確山縣采集的6月底7月初夏枯草花穗，用85%的乙醇浸泡于多功能提取 器內(nèi)，24小時(shí)后加熱、回流3個(gè)小時(shí)得提取液，減壓濃縮提取液得浸膏，將所得浸膏一部分進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)，另一部分進(jìn)行下步提取。
b、將提取液減壓濃縮至干得浸膏，用1 0.5的氯仿和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分 別收集有機(jī)相和水相，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
C、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取有機(jī)相，用容積比為5 2 2的氯仿、 甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置3小時(shí)后，分別收集上、下層液，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì) 胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
d、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取上層殘留物，按1 0. 5比例(重量mg 容積ml) 加水溶解，大孔吸附樹(shù)脂柱吸附后，用30 %甲醇洗脫，將洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤 有效部位。
e、所述的體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)的MTT法。
f、最終所得的夏枯草有效部位進(jìn)行體內(nèi)外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。
二、夏枯草有效部位體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下

從上表體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出
1.夏枯草有效部位可明顯抑制人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞和 人白血病K562細(xì)胞增殖。
2.夏枯草有效部位對(duì)人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞和人白血病 K562細(xì)胞的抑制作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系。
三、夏枯草有效部位體內(nèi)初步實(shí)驗(yàn)表明
1.夏枯草有效部位對(duì)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的BALB/C小鼠具有明顯的抑瘤效 應(yīng)。夏枯草有效部位高劑量組(400mg/kg/d)、中劑量組(200mg/kg/d)、低劑量組(IOOmg/ kg/d)和環(huán)磷酰胺組(30mg/kg/d)抑瘤率分別為 28. 44%,67. 75%,22. 70%和 68. 90%。與 陰性對(duì)照組平均瘤體積相比，夏枯草中劑量組和高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 05)。
2.夏枯草有效部位高劑量組(400mg/kg/d)、中劑量組(200mg/kg/d)、低劑量組 (100mg/kg/d)與陰性對(duì)照組相比可明顯延長(zhǎng)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的BALB/C小鼠的生 存期。
實(shí)施例3
一、提取步驟
a、河南確山縣采集的6月底7月初夏枯草花穗，用96%的乙醇浸泡于多功能提取 器內(nèi)，36小時(shí)后加熱、回流6個(gè)小時(shí)得提取液，減壓濃縮提取液得浸膏，將所得浸膏一部分 進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)，另一部分進(jìn)行下步提取。
b、將提取液減壓濃縮至干得浸膏，用1 1.2的乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集有機(jī)相和水相，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
C、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取有機(jī)相，用容積比為10 5 6的氯仿、 甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置6小時(shí)后，分別收集上、下層液，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì) 胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
d、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取上層殘留物，按1 5比例(重量mg:容積ml) 加水溶解，ODS柱吸附后，用80%甲醇洗脫，將洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。
e、所述的體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)的MTT法。
f、最終所得的夏枯草有效部位進(jìn)行體內(nèi)外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。
二、夏枯草有效部位體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下

取，分別收集有機(jī)相和水相，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
C、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取有機(jī)相，用容積比為7 4 5的氯仿、 甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置4小時(shí)后，分別收集上、下層液，減壓濃縮至干，進(jìn)行體外腫瘤細(xì) 胞抑制率實(shí)驗(yàn)。
d、根據(jù)體外腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取上層殘留物，按1 2比例(重量mg 容積ml) 加甲醇溶解，ODS柱吸附后，用50%甲醇洗脫，將洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤有效部 位。
e、所述的體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞抑制率實(shí)驗(yàn)采用常規(guī)的MTT法。
f、最終所得的有效部位進(jìn)行體內(nèi)外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。
二、夏枯草有效部位體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下

從上表體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出
1.夏枯草有效部位可明顯抑制人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞、人 白血病K562細(xì)胞和人乳腺癌231細(xì)胞增殖。
2.夏枯草有效部位對(duì)人B淋巴瘤Raji細(xì)胞、人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞、人白血病 K562細(xì)胞和人乳腺癌231細(xì)胞的抑制作用呈明顯的劑量依賴關(guān)系。
三、夏枯草有效部位體內(nèi)初步實(shí)驗(yàn)表明
1.夏枯草有效部位對(duì)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的C57小鼠具有明顯的抑瘤效應(yīng)。 夏枯草有效部位高劑量組(500mg/kg/d)、中劑量組(300mg/kg/d)、低劑量組(100mg/kg/d) 和環(huán)磷酰胺組(20mg/kg/d)抑瘤率分別為34. 65%,60. 96%,19. 65%和83. 86%。與陰性 對(duì)照組平均瘤體積相比，夏枯草中劑量組和高劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0. 05)。
2.夏枯草有效部位高劑量組(500mg/kg/d)、中劑量組(300mg/kg/d)、低劑量組 (100mg/kg/d)與陰性對(duì)照組相比可明顯延長(zhǎng)接種荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞的C57小鼠的生存 期。
13
權(quán)利要求
一種夏枯草抗腫瘤有效部位的提取方法，其特征是取夏枯草花穗，用85％～96％的乙醇浸泡于提取器內(nèi)，加熱、回流、提取；將所得提取液濃縮至干得浸膏，用容積比為1∶0.5～1.2的氯仿和水或乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集有機(jī)相和水相，濃縮至干；取有機(jī)相，用容積比為5～10∶2～5∶2～6的氯仿、甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置后，分出上層，將上層溶液濃縮至干；取上層殘留物加流動(dòng)相溶解，比例按每毫克上層殘留物加0.5～5毫升的流動(dòng)相，進(jìn)行ODS反相柱層析，以甲醇-水溶液洗脫，收集30％～80％甲醇洗脫液，將各部分洗脫液濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。
2.如權(quán)利要求
1所述的夏枯草抗腫瘤有效部位的提取方法，其特征是所述夏枯草花穗 為干燥花穗，用85% 96%的乙醇浸泡于多功能提取器內(nèi)，24 36小時(shí)后加熱、回流3 6個(gè)小時(shí)得提取液；將提取液減壓濃縮至干得浸膏，用容積比為1 0.5 1.2的氯仿和水 或乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集有機(jī)相和水相，減壓濃縮至干；取有機(jī)相， 用容積比為5 10 2 5 2 6的氯仿、甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置3 6小時(shí)后，分 出上層，將上層溶液減壓濃縮至干；取上層殘留物加水或甲醇溶解，比例按每毫克上層殘留 物加0. 5 5毫升的水或2毫升的甲醇，用ODS柱吸附，以甲醇-水溶液洗脫，收集30% 80%甲醇洗脫液，將各部分洗脫液減壓濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1或2所述的夏枯草抗腫瘤有效部位在制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。
專利摘要
夏枯草抗腫瘤有效部位的提取方法，取夏枯草花穗，用乙醇浸泡于提取器內(nèi)，加熱、回流、提??；將所得提取液濃縮至干得浸膏，用氯仿和水或乙酸乙酯和水對(duì)所得浸膏進(jìn)行萃取，分別收集有機(jī)相和水相，濃縮至干；取有機(jī)相，用氯仿、甲醇、水進(jìn)行溶解，待靜置后，分出上層，將上層溶液濃縮至干；取上層殘留物加流動(dòng)相溶解，進(jìn)行反相柱層析，洗脫，收集30％～80％甲醇洗脫液，將各個(gè)相的洗脫液濃縮至干，即得抗腫瘤有效部位。采用本發(fā)明方案確定的夏枯草有效部位體外實(shí)驗(yàn)可明顯抑制Raji細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、K562細(xì)胞和435S細(xì)胞增殖；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)荷T淋巴瘤EL-4細(xì)胞小鼠具有抑瘤效應(yīng)，并可延長(zhǎng)其生存期；抗腫瘤作用肯定，毒性低。
文檔編號(hào)A61K133/00GKCN101461842 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請(qǐng)?zhí)朇N 200710300027
公開(kāi)日2010年11月24日 申請(qǐng)日期2007年12月21日
發(fā)明者劉宏民, 張明智 申請(qǐng)人:張明智;劉宏民導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (1), 非專利引用 (3),