專利名稱:治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑及其制備方法和質(zhì)控方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
隨著生活節(jié)奏的加快，現(xiàn)代生活水平的提高，患有紅細(xì)胞增多癥的人越來越多。紅細(xì)胞增多癥是指紅細(xì)胞數(shù)目、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積和血液總?cè)萘匡@著地超過正常水平，可分為原發(fā)性與繼發(fā)性兩大類。其中繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥主要是由于組織缺氧所引起的，給患者的正常生活帶來極大的影響。因此，提供一種療效好，無毒副作用，安全性強的治療紅細(xì)胞增多癥的藥物顯得十分重要。
引起繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥的具體原因有如下幾種1.生理性紅細(xì)胞生成素適度增加，如動脈低氧血癥(高海拔、慢性肺部疾病、心血管分流、過度肥胖、體位性低氧血癥)、血紅蛋白釋放異常(遺傳性高氧親和性血紅蛋白、先天性紅細(xì)胞2，3-DPG降低、吸煙者紅細(xì)胞增多癥)、組織代謝受到干擾(鈷中毒)等情況；2.生理性紅細(xì)胞生成素產(chǎn)生失控，如某些腫瘤疾病、非腫瘤性腎臟疾病(囊腫、腎積水、Bartter綜合征、腎移植后)、無明確解剖學(xué)病變的自發(fā)性紅細(xì)胞生成素恒定增加(家族性)、紅細(xì)胞生成素基礎(chǔ)水平升高靜脈放血后進一步增加(家族性)等情況；3.服用雄性激素或某些其他皮質(zhì)類固醇，或體內(nèi)這些激素生成過多。繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥在中醫(yī)理論上屬“血證”范疇，因“氣陰不足、瘀血阻滯”引起，臨床上常表現(xiàn)有頭暈、心悸、胸悶、氣喘、乏力、頭痛等癥狀。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑；本發(fā)明的另一個目的是提供這種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的制備方法；本發(fā)明的第三個目的在于提供這種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明所述制劑為口服制劑，具體包括片劑、膠囊劑和顆粒劑。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量組份計算它由紅景天400-600、枸杞子150-300、沙棘鮮漿30-150和適量輔料制備而成。
具體的說，它由紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g及適量輔料制備成片劑或顆粒劑。
本發(fā)明所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的制備方法為紅景天加8-12倍量60-85％的乙醇回流提取1-5次，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10-12倍量水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓干燥，粉碎，加入輔料，混勻，按照常規(guī)方法制成不同的制劑。
準(zhǔn)確地說，紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入輔料，混勻，按照常規(guī)方法制成不同的制劑。
所述片劑這樣制備紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入淀粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、干燥、壓制成片，包薄膜衣，即得。
本發(fā)明制劑由中藥紅景天、枸杞子和沙棘鮮漿三味藥經(jīng)加工研制而成。三味藥配伍具有益氣養(yǎng)陰、活血化痰的功能，用于氣陰不足，瘀血阻滯所引起的頭暈，頭痛，心悸，氣喘，乏力，缺氧引起的紅細(xì)胞增多癥等見上述證候者。方中紅景天為組方君藥，性涼主降，味辛發(fā)散，微苦澀，有破堅、消積、活血、養(yǎng)血、破血、改善血液循環(huán)的作用；現(xiàn)代藥理研究證明紅景天含有2種不同的超氧化物歧化酶(SOD)同功酶，具有較強的清除氧自由基的能力，具有明確、肯定的抗高原缺氧作用。方中枸杞子有滋補的功效，具有一定的降血脂、血糖作用。沙棘鮮漿有活血化瘀的功效；含有醋柳酮，具有降低血粘度的作用，可改善血液流變學(xué)，促進心、腦血液循環(huán)。諸藥合用，共奏益氣養(yǎng)陰、活血化痰之效。是一種無毒副作用，安全性強的藥物。
本發(fā)明治療紅細(xì)胞增多癥的片劑、膠囊劑和顆粒劑的質(zhì)量控制方法為所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別是對制劑中枸杞子的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中紅景天所含紅景天苷的含量測定。
枸杞子的鑒別方法是以枸杞子對照藥材為對照，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；紅景天中紅景天苷的含量測定方法是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相的高效液相色譜法。
具體的鑒別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
更具體的鑒別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
紅景天苷的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
更具體的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內(nèi)容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，采用以下質(zhì)量控制方法將更容易控制這種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量，更利于保證該制劑的臨床療效。故所述質(zhì)量控制方法也可包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內(nèi)容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，以下質(zhì)量控制方法為最優(yōu)選擇，更容易控制本發(fā)明治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量，保證其臨床療效。故所述質(zhì)量控制方法還可以包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；
對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑3.6g、或膠囊劑的內(nèi)容物2.5g、或顆粒劑10g，研細(xì)，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.6g、膠囊劑取內(nèi)容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，蒸干；殘渣加流動相使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
申請人:對本發(fā)明制劑的制備工藝和質(zhì)量控制方法進行了相關(guān)的試驗研究，具體如下實驗例1提取工藝考察1、申請人在產(chǎn)品研究過程中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制劑的加水量影響到藥物的出膏率和有效成分的提取率，加水量少時提取物的出膏率低，有效成分的提取率也低，加水量多時提取物的出膏率較高，均會影響藥品的質(zhì)量。故本發(fā)明對制劑的加水量進行考察(1)紅景天醇提時加醇量考察稱取紅景天100g，共稱取3份，分別加70％乙醇6、8、10、12倍量回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，濾過，濾液回收乙醇、濃縮、減壓干燥、得到紅景天干膏。測定干膏中紅景天苷的含量
結(jié)果表明，加醇8倍量與10倍量及12倍量提取比較，無明顯差異，從生產(chǎn)實際考慮，最佳加醇量為8倍量。
(2)枸杞子水煎加水量的考察稱取枸杞子100g，共稱3份樣品，分別加水8、10、12倍量煎煮二次，每次2小時，濾過，合并濾液，加水，均稀釋至2500ml，攪拌均勻，各取100ml濃縮，減壓干燥，計算出膏量，結(jié)果見下表。
結(jié)果表明，加水10倍量與12倍量出膏總量相差不大，從生產(chǎn)實際考慮，確定加水量為10倍量。
2、干燥方法的研究稱取紅景天1000g、枸杞子500g、沙棘鮮漿143g，按本發(fā)明所述方法提取、混合，濃縮至相對密度為1.05～1.10(50℃)的清膏，分成兩組，每組平均分成4份，其中2份濃縮至1.25～1.30(50℃)減壓干燥，另2份分別加入24g淀粉，加熱混勻，噴霧干燥或減壓干燥，分別測定干膏得量和紅景天苷的含量。
注噴霧干燥的干膏量已減去加入淀粉量。
結(jié)果表明，減壓干燥得到的干膏量及紅景天苷含量均好于噴霧干燥，故確定干燥方法為減壓干燥，條件為壓力-0.1mpa，溫度60℃，干燥8小時。
3、稠膏濃縮密度考察將沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液的混合液濃縮成稠膏，當(dāng)相對密度大于1.35(50℃)時，稠膏流動性差，不便操作，故將其濃縮至相對密度1.30～1.35(50℃)時，備用。
實驗例2紅景天含量測定方法研究1、儀器與試藥1.1儀器Agilent 1100高效液相色譜儀(在線脫氣機、四元泵、自動進樣器、柱溫箱、VWD檢測器)；MILLIPORE Simplicity超純水器；超聲波清洗器(型號SK5200H，功率350W，頻率33kHz，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)。
1.2試劑甲醇(色譜純，F(xiàn)isher，批號031123)。
2、系統(tǒng)適用性試驗2.1檢測波長的選擇檢測波長為223nm。
2.2流動相的考察
結(jié)果以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；陰性樣品色譜圖在紅景天峰位置處無假陽性峰，紅景天峰和相近的雜質(zhì)峰分離完全(分離度＞1.5)，最佳流動相為甲醇∶水＝15∶85。
2.3色譜柱的考察在上述流動相條件下，考察以下色譜柱①Kromasil C18色譜柱(5μm，4.6×250mm，北京分析儀器廠，批號22198)；②Hypersil BDS C18色譜柱(5μm，4.6×250mm，ThermoQuest，SN3-18541)；③ZORBAX SB C18(5μm，4.6×250mm，Agilent，SNUSCL014736)。試驗結(jié)果表明以上三種色譜柱紅景天苷峰均可達到基線分離，且保留時間較合適，選擇色譜柱③進行試驗。
3、供試品溶液制備方法的考察3.1提取方法的確定取本制劑粉末，稱取供試品2份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇25ml，稱定重量，分別回流提取1小時和超聲30分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，蒸干。殘渣用流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中并定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結(jié)果見下表。
不同提取方法提取結(jié)果
由結(jié)果可知，超聲提取對紅景天苷的提取率較高，因此采用超聲提取。
3.2溶劑用量的考察稱取供試品3份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇15、25、50ml，稱定重量，各超聲處理30分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，分別精密量取續(xù)濾液6ml、10ml、20ml，蒸干。殘渣用流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中并定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結(jié)果見下表。
溶劑用量考察結(jié)果
試驗結(jié)果表明溶劑用量達到25ml時，紅景天苷即可提取完全。
3.3超聲時間的選擇稱取供試品3份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇25ml，稱定重量，分別超聲處理30分鐘、45分鐘、60分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，各精密量取續(xù)濾10ml，蒸干。殘渣用流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中并定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結(jié)果見下表。
超聲時間考察結(jié)果(n＝2)
由結(jié)果可知，超聲提取45分鐘最佳。
4、對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得。
5、空白試驗取陰性樣品(缺紅景天)，按供試品溶液制備方法制得空白溶液，精密量取空白溶液10μl，注入液相色譜儀，記錄液相圖譜。結(jié)果表明，與紅景天苷對照品色譜峰相應(yīng)的位置上，沒有出現(xiàn)色譜峰，說明陰性無干擾。
6、線性關(guān)系考察精密稱取紅景天苷對照品13.25mg，置50ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分別置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液各10μl注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。以進樣量(靏)為橫坐標(biāo)(X)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)(Y)，進行線性回歸，紅景天苷的回歸方程為Y＝1530.0138X+25.2889，r＝0.9999。擬合為過原點的回歸方程為Y＝1552.0360X，r＝0.9998，將1.590μg代入以上兩個回歸方程，峰面積分別為2458.011、2467.737，相對偏差為0.20％，因此采用一點法計算含量。
紅景天苷含量測定線性關(guān)系考察結(jié)果
結(jié)果表明紅景天苷含量在0.265～1.590μg范圍內(nèi)，峰面積與進樣量有良好的線性關(guān)系。
7、精密度試驗精密吸取紅景天苷濃度為0.106mg/ml的對照品溶液10μl，注入HPLC儀，連續(xù)進樣6針，記錄紅景天苷峰面積A值。
結(jié)果表明，其精密度良好。
8、穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液各10μl，分別在0、2、4、6、8h進樣測定，記錄紅景天苷的峰面積A值。
結(jié)果表明，供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。
9、重復(fù)性試驗取同一批號的本制劑粉末(批號041012)0.6g，精密稱定，共6份，依上述方法測定本制劑中紅景天苷的含量。
結(jié)果表明，本方法重復(fù)性試驗符合要求。
10、回收率試驗稱取同一批次樣品(批號041012)6份，每份0.3g，精密稱定，再分別精密添加一定量的紅景天苷對照品，按供試品處理方法提取后測定，按以下公式計算加樣回收率，結(jié)果見下表。
加樣回收率試驗結(jié)果
結(jié)果表明，本方法加樣回收率符合規(guī)定。
實驗例3枸杞子薄層鑒別研究供試品溶液制備方法一取本制劑，研細(xì)，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液。
供試品溶液制備方法二取本制劑，研細(xì)，加水50ml，搖勻，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液。
展開劑選擇分別以乙酸乙酯、三氯甲烷、甲酸不同比例的混合溶液；以氯仿、乙酸乙酯、甲醇不同比例的混合溶液為展開劑。
對照品溶液的制備取枸杞子對照藥材，加水煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液。
陰性對照溶液的制備取缺枸杞子陰性樣品，按供試品溶液制備方法分別制備陰性對照溶液。
分別吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，分別以不同的展開劑展開，取出，晾干，紫外光燈(365nm)下檢視，結(jié)果如下
結(jié)果表明，采用方法一制備供試品溶液，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑對本制劑中枸杞子進行薄層鑒別，結(jié)果薄層色譜斑點清晰，分離效果好，重現(xiàn)性好，陰性對照無干擾。最佳展開劑為乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1。
實驗例5沙棘鮮漿薄層鑒別研究供試品溶液制備方法取本制劑，研細(xì)，置具塞錐形瓶中，加乙醇50ml，加熱回流1小時，放冷，濾過。濾液加鹽酸7ml，在75℃水浴中加熱水解1小時，立即冷卻，將水解液濃縮至約5ml，加水25ml，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
展開劑選擇以甲苯、乙酸乙酯、甲酸不同比例的混合溶液為展開劑。
對照品溶液的制備取異鼠李素、槲皮素對照品加甲醇制成每1ml含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。
陰性對照溶液的制備取缺沙棘鮮漿陰性樣品，按供試品溶液制備方法分別制備陰性對照溶液。
分別吸取上述供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液各2μl，分別點于同一含3％醋酸鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，分別以不同的展開劑展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光(365nm)下檢視，結(jié)果如下
試驗表明供試品色譜中在與異鼠李素、槲皮素對照品色譜相應(yīng)的位置未顯相同顏色的熒光斑點，故本鑒別項目未列入本發(fā)明質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的制劑對紅細(xì)胞增多癥的療效好，無毒副作用，安全性強，攜帶、服用方便，成本低；本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，回收率高，提高了該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效保證產(chǎn)品質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
具體實施方式本發(fā)明的實施例1紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g紅景天加8倍量70％乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10倍量水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.30～1.35(50℃)的清膏，減壓干燥(壓力-0.1mpa，溫度60℃)8小時，粉碎成細(xì)粉，加入淀粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、干燥、壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。
本發(fā)明的實施例2紅景天600g、枸杞子150g、沙棘鮮漿150g紅景天加10倍量60％的乙醇回流提取4小時，提取液回收乙醇后備用；枸杞子加12倍量水煎煮3小時，煎液濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.30～1.35(50℃)的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入淀粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、干燥、壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。
本發(fā)明的實施例3紅景天600g、枸杞子300g、沙棘鮮漿150g
紅景天加12倍量85％的乙醇回流提取5次，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加12倍量水煎煮5次，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓干燥，粉碎，加入糊精和木糖醇，混勻，以85％乙醇制成顆粒，85℃干燥，整粒，分裝，即得顆粒劑。
本發(fā)明的實施例4紅景天400g、枸杞子150g、沙棘鮮漿30g紅景天加10倍量70％的乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加11倍量水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.05～1.10(50℃)的清膏，加入淀粉，加熱混勻，噴霧干燥(70-90℃)，加入淀粉，混勻，裝入膠囊，即得膠囊劑。
本發(fā)明的實施例5本發(fā)明治療紅細(xì)胞增多癥的片劑的質(zhì)量控制方法包括性狀產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡。
鑒別取片劑3.6g，研細(xì)，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
檢查應(yīng)符合中國藥典片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的片劑0.6g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，蒸干；殘渣加流動相使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發(fā)明片劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g。
本發(fā)明的實施例6本發(fā)明治療紅細(xì)胞增多癥的膠囊劑的質(zhì)量控制方法包括性狀其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡。
鑒別取膠囊劑的內(nèi)容物1g，研細(xì)，加水10ml，超聲1分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5ml振搖提取，提取液濃縮至0.5ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.1g，加水10ml，煮沸5分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
檢查應(yīng)符合中國藥典膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
含量測定紅景天苷 照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C4柱；以乙睛∶水＝1∶9為流動相；檢測波長為200nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的膠囊劑內(nèi)容物0.1g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5ml，密塞，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發(fā)明膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g。
本發(fā)明的實施例7本發(fā)明治療紅細(xì)胞增多癥的顆粒劑的質(zhì)量控制方法包括性狀產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
鑒別取顆粒劑20g，研細(xì)，加水200ml，超聲20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯50ml振搖提取，提取液濃縮至3ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材1g，加水200ml，煮沸20分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝10∶0.5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
檢查應(yīng)符合中國藥典顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C8柱；以甲醇∶水＝9∶1為流動相；檢測波長為500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的顆粒劑10g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發(fā)明顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
本發(fā)明的實施例8本發(fā)明所述質(zhì)量控制方法可以包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
鑒別取片劑1g、或膠囊劑的內(nèi)容物2.5g、或顆粒劑10g，研細(xì)，加水100ml，超聲10分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯30ml振搖提取，提取液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.8g，加水100ml，煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝2∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
本發(fā)明的實施例9所述質(zhì)量控制方法可以包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18柱；以乙睛∶水80∶20為流動相；檢測波長為365nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取1g、膠囊劑取內(nèi)容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇35ml，密塞，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
權(quán)利要求
1.一種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑，其特征在于按照重量組份計算它由紅景天400-600、枸杞子150-300、沙棘鮮漿30-150和適量輔料制備而成。
2.按照權(quán)利要求
1所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑，其特征在于它由紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g及適量輔料制備成片劑或顆粒劑。
3.如權(quán)利要求
1或2所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的制備方法，其特征在于紅景天加8-12倍量60-85％的乙醇回流提取1-5次，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10-12倍量水煎煮1-5次，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓干燥，粉碎，加入輔料，混勻，按照常規(guī)方法制成不同的制劑。
4.按照權(quán)利要求
3所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的制備方法，其特征在于紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入輔料，混勻，按照常規(guī)方法制成不同的制劑。
5.按照權(quán)利要求
3或4所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的制備方法，其特征在于片劑這樣制備紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合并提取液，回收乙醇后備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，加入淀粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、干燥、壓制成片，包薄膜衣，即得。
6.一種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，所述制劑包括片劑、膠囊劑和顆粒劑，其特征在于所述質(zhì)量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別是對制劑中枸杞子的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中紅景天所含紅景天苷的含量測定。
7.按照權(quán)利要求
6所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于枸杞子的鑒別方法是以枸杞子對照藥材為對照，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；紅景天中紅景天苷的含量測定方法是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相的高效液相色譜法。
8.按照權(quán)利要求
6或7所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
9.按照權(quán)利要求
8所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于更具體的鑒別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
10.按照權(quán)利要求
6或7所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于紅景天苷的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
11.按照權(quán)利要求
10所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于更具體的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內(nèi)容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
12.按照權(quán)利要求
6所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
13.按照權(quán)利要求
6或12所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑1-6g、或膠囊劑的內(nèi)容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細(xì)，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內(nèi)容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸干；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
14.按照權(quán)利要求
13所述治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法包括性狀對于片劑產(chǎn)品為薄膜衣片，除去包衣后顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對于膠囊劑其內(nèi)容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對于顆粒劑產(chǎn)品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑒別取片劑3.6g、或膠囊劑的內(nèi)容物2.5g、或顆粒劑10g，研細(xì)，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法制成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應(yīng)符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，制成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑，研細(xì)，片劑取0.6g、膠囊劑取內(nèi)容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，蒸干；殘渣加流動相使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本制劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少于0.3mg/g。
專利摘要
本發(fā)明提供了一種治療紅細(xì)胞增多癥的中藥制劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，按照重量組份計算它由紅景天400－600、枸杞子150－300、沙棘鮮漿30－150和適量輔料制備而成。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所提供的制劑對紅細(xì)胞增多癥的療效好，無毒副作用，安全性強，攜帶、服用方便，成本低；本發(fā)明質(zhì)量控制方法精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，回收率高，提高了該制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，可有效保證產(chǎn)品質(zhì)量，從而確保其臨床療效。
文檔編號G01N30/90GK1994398SQ200610201454
公開日2007年7月11日 申請日期2006年12月29日
發(fā)明者葉湘武, 簡高華, 陳孜孜 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan