專利名稱：新的β-內(nèi)酰胺抗菌素-水合物和溶劑化物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的β-內(nèi)酰胺抗菌素的一水合物和溶劑化物，更具體地說，涉及1-碳代頭孢菌素的新晶狀一水合物以及單和雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物。
式Ⅰ所示的β-內(nèi)酰胺抗菌素是一種有效的新口服活性抗菌素，
其中的星號表示R-絕對立體化學(xué)構(gòu)型。例如美國專利4，335，211曾介紹過該種抗菌素，為了簡便起見，將無水形式的上述化合物將指定為Lilly系列號LY213735。
本發(fā)明目的在于LY213735的晶狀一水合物和晶狀單和雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物。后面兩種溶劑化物以下將分別稱為“單(DMF)”和“雙(DMF)”溶劑化物。
LY213735的晶狀一水合物是LY213735的優(yōu)良的藥用水合物。該一水合物提供了在制造各種劑量形式抗菌素時需要使用的LY213735形式。晶狀單(DMF)和雙(DMF)溶劑化物，一般來說對LY213735、和具體地說對晶狀一水合物，是方便的中間體。
本發(fā)明的一個目的在于LY213735的晶狀一水合物。LY213735的結(jié)構(gòu)式如上式Ⅰ所示。更具體地說，本發(fā)明目的在于具有下面表1所列的X-射線粉末衍射圖的LY213735晶狀一水合物。與此相關(guān)的是LY213735晶狀一水合物的藥物制劑，其中則以包含具有表1所列X-射線衍射圖的晶狀LY213735一水合物的藥物制劑較好。
本發(fā)明的另一方面是LY213735的晶狀單(DMF)溶劑化物。較好的單(DMF)溶劑化物形式是具有下面表2所示X-射線粉末衍射圖譜的晶狀化合物。
本發(fā)明的又一方面是LY213735的晶狀雙(DMF)溶劑化物。雙(DMF)溶劑化物的較好形式是具有下面表3所示X-射線粉末微射圖譜的晶狀化合物。
晶狀單(DMF)和雙(DMF)溶劑化物是相應(yīng)的LY213735的晶狀一水合物的方便的中間體。該一水合物是LY213735的穩(wěn)定的、容易處理的形式，而LY213735至今為止還是既難以純化又難以制成好的藥用形式的化合物。
該溶劑化和一水合物(及一水合物的藥物組合物)包括式Ⅰ化合物的兩性離子形式。本發(fā)明化合物是指一水合物或這兩種溶劑化物的晶狀或微晶形式。
最后，本發(fā)明還包括晶狀的LY213735一水合物的藥物組合物，最好是展現(xiàn)出下面表1所示晶體圖譜的一水合物的藥物組合物。
本發(fā)明較好的實例是展現(xiàn)出表1所示X-射線粉末衍射圖譜的晶狀一水合物
表1一水合物d I/I112.99.1710.761.009.11.337.43.146.65.125.75.055.24.045.06.164.87.244.74.234.41.234.30.184.13.123.90.273.59.223.37.533.20.122.94.102.86.062.73.06表1中的衍射圖譜是用波長λ＝1.5406A的鎳過濾幅射線得到的。晶面間距列在“d”欄，相對強(qiáng)度列在“I/I1”欄。
本發(fā)明的另一較好實例是展現(xiàn)在下面表2所示的X-射線粉末衍射圖譜的晶狀單(DMF)溶劑化物。
表2單(DMF)溶劑化物d I/I113.18.1210.901.007.69.116.80.076.02.205.37.075.12.104.90.074.69.274.37.433.93.253.57.153.40.233.22.103.08.052.85.072.74.15表2中的X-射線數(shù)據(jù)是按照采集表1中數(shù)據(jù)時所用的相同儀器參數(shù)采集的。
本發(fā)明還另一個較好實例，即展現(xiàn)出下述表3所示X-射線線粉末衍射數(shù)據(jù)的晶狀形式的雙(DMF)溶劑化物。
表3雙(DMF)溶劑化物d I/I120.1.0312.441.0010.27.078.58.086.91.036.60.056.23.085.43.134.74.094.41.094.19.403.62.053.52.053.39.033.34.033.14.103.02.072.86.06表3中的X-射線數(shù)據(jù)是按照采集表1中數(shù)據(jù)時所用的相同的儀器參數(shù)采集的。
本發(fā)明的又一方面是一種藥物組合物，它含有式(Ⅰ)所示化合物的晶狀一水合物作為活性成分、并含有一種或多種可作藥用的載體、媒介物或賦形劑。具體說，這些藥物組合物可用于抑制溫血動物中革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細(xì)菌感染，并且含有適當(dāng)?shù)妮d體，媒介物或賦形劑和治療有效量的LY213735一水合物。
對于供口服的組合物(如片劑和膠囊)，“適當(dāng)載體、媒介物或賦形劑”意思是通常的賦形劑，象粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、聚乙烯吡咯烷(Povidone)、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、蔗糖、和淀粉;填充劑和載體，如玉米淀粉、明膠、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸二鈣、氯化鈉、和藻酸;崩解劑如交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉(Croscarmel-losesodium)、微晶纖維素、玉米淀粉、羥基乙酸淀粉鈉、藻酸和可變的潤濕劑如十二烷基硫酸鈉;和潤滑劑如硬脂酸鎂和其它金屬硬脂酸鹽、硬脂酸、聚硅氧烷流體、滑石、蠟、油和膠體二氧化硅。調(diào)味劑如薄荷、冬青油、櫻桃香料等都可使用?？赡苓€需要加入著色劑，使得劑量形式外表更美觀或幫助鑒別出不同的產(chǎn)品。片劑也可通過技術(shù)上熟知的方法包衣。
本發(fā)明的藥物組合物也可制成口服液體制劑形式，可以是a)水基或油基的懸浮液、溶液、乳液或糖漿;也可以是b)供使用前用水或其它適當(dāng)媒介物配制用的干粉。以口服液體制劑形式使用時，“適當(dāng)?shù)妮d體、媒介物或賦形劑”是指通常的添加劑，象懸浮劑如阿拉伯膠、甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、帶有羧甲基纖維素鈉的纖維素(Avicel )、漢生膠(Xantham gum)或淀粉;增甜劑如蔗糖、糖漿、葡萄糖、糖精、山梨糖醇(Sorbital)或天冬酰苯丙氨酸甲酯;潤濕劑如十二烷基硫酸鈉、硅油、各種Pluromics表面活性劑或甘油;保存劑如對羥基苯甲酸甲基、丙基或丁基酯，或山犁酸;染料，調(diào)味劑和鹽如氯化鈉，檸檬酸，冬青油或檸檬酸鈉;以及水，油和酯如杏仁油，分餾的椰子油，氫化蓖麻油，卵磷脂，硬脂酸鋁等。
該藥物組合物也可靜脈內(nèi)使用。具體說，水溶性的一水合物可溶于一種通常使用的靜脈內(nèi)用液體中并可通過輸注給藥。當(dāng)用作靜脈內(nèi)輸注組合物時，“適當(dāng)?shù)妮d體、媒介物或賦形劑”是指生理鹽水，Ringer′s溶液或5%葡萄糖溶液等液體。
局部用組合物可用“適當(dāng)?shù)妮d體、媒介物或賦形劑”如疏水或親水基質(zhì)加工成制劑。這些基質(zhì)包括軟膏、乳膏劑或洗劑。
該晶狀一水合物的獸用藥物組合物可通過飼養(yǎng)動物的飼料或飲用水給藥。或者將化合物與“適當(dāng)載體、媒介物或賦形劑”如長時間或快速釋放基質(zhì)一起制成乳房內(nèi)制劑。
式(Ⅰ)化合物的晶狀一水合物也可以制成單位劑量形式，裝在無菌藥瓶中、具有帶隔膜出口的無菌塑料袋中，或無菌密封的安瓿瓶中。每單位劑量中一水合物的量可約為100毫克至約10克。
該晶狀一水合物的“治療有效量”是每千克體重每劑量約為2.5毫克至約70毫克化合物。對于一個成年人，通常的總劑量為約1克至5克/天。
這一劑量可以按每日單劑量或每日多劑量形式服用。用該制劑進(jìn)行治療的方案可能要求在較長的階段時間內(nèi)給藥，例如幾天或二至三周。每劑給藥量或給藥總量將取決于下列因素，如感染的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，病人的年齡和總的健狀況以及病人和與感染有關(guān)的微生物兩者對一水合物的耐受性。
較好的一組藥物制劑是含有適當(dāng)載體、媒介物或賦形劑和展現(xiàn)出上述表1所示X-射線圖案的晶狀一水合物的制劑。
本發(fā)明還提供了制備式(Ⅰ)化合物的晶狀一水合物的方法，包括將含有式(Ⅰ)化合物的水溶液的pH值調(diào)至約2-7。
該晶狀一水合物可由單(DMF)或雙(DMF)溶劑化物來制備。例如，將雙(DMF)溶劑化物與EDTA四鈉鹽和少量濃鹽酸一起在水中混合。當(dāng)此懸浮液成為溶液后，將溶液冷卻(至約10℃)，加入堿(例如三乙胺)使其pH值慢慢升高，直到形成懸浮液(最好pH3.6)。濾集懸浮的固體(此為一水合物)，用通常方式洗滌并干燥?；蛘撸谵D(zhuǎn)變雙(DMF)溶劑化物時的類似條件下，也可將單(DMF)化合物轉(zhuǎn)變成一水合物。通過加入堿，對于相似量的堿，單(DMF)溶劑化物溶液的pH值最好是能升高到比雙(DMF)溶劑化物溶液pH值更高的數(shù)值(如pH5.8)。
本發(fā)明還提供了式(Ⅰ)化合物的晶狀雙-(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的制備方法，包括使式(Ⅱ)的7β-氨基化合物
(其中R1是羧基保護(hù)基)在二甲基甲酰胺中與下式所示酰化劑反應(yīng)
(其中X是離去基團(tuán)，而R2是保護(hù)基團(tuán))然后脫去保護(hù)基。
雙(DMF)溶劑化物可由式(Ⅱ)的7β-氨基(“核”)化合物經(jīng)?；磻?yīng)
然后除去上面R1表示的羧基保護(hù)基制得。這一核及其合成方法公開在美國專利4，734，494。
式Ⅱ中的羧基保護(hù)基R1是通常的羧基保護(hù)基，而最好是沒有空間位阻的。這類基團(tuán)的實例是芐基和取代的芐基，如4-甲氧芐基、4-硝基芐基、4-甲基芐基、3，5-二甲基芐基和4-氯芐基;甲硅烷基如三烷基甲硅烷基(特別是三甲基甲硅烷基);和囟代烷基如2，2，2-三氯乙基，2，2，2-三溴乙基和2-碘乙基。較好的酯基是芐基或取代的芐基酯基(如對硝基芐基)。
具體地說，在冷DMF中(如-20℃)，使對硝基芐基核化合物(R1是對硝基芐基)發(fā)生酰作用。將?；瘎?、2-(R)-2-(對羥基苯基)-2-氨基乙酸的一種活化衍生物加到冷的DMF中。較好的?；瘎┦鞘?Ⅲ)所示化合物。
將反應(yīng)溶液冷卻，當(dāng)Ⅲ是?；瘎r，迅速地連續(xù)加入甲磺酸、二甲基芐胺和氯甲酸甲酯。將溶液攪拌并維持在很低(約-50℃)的溫度，然后在攪拌下加入核的對硝基芐酯。將反應(yīng)液在低溫(如-45℃)下攪拌，直到?；磻?yīng)基本完全(可用通常方法如薄層層析測定)。然后將該混合物慢慢溫?zé)嶂良s-10℃，并保持溶液在此溫度下慢慢加入用以除去氨基和羧基保護(hù)基的試劑(如對于對硝基芐酯可用水，濃鹽酸和鋅粉)。在室溫下攪拌溶液直至反應(yīng)完全。當(dāng)R1是對硝基芐酯時，加入堿如三乙胺，使pH升高(例如到2.9)，過濾除去鋅殘余物。將pH值逐步升高到白色懸浮液形成，不再加堿，保持穩(wěn)定的pH值(通常約5.6)。(在pH4.6混合物中加入LY213735晶種，誘導(dǎo)結(jié)晶作用)。濾集懸浮液中的固相。將濕的濾餅懸浮在9∶1DMF/H2O的90∶10混合物中，加濃鹽酸使其溶解。將溶液冷卻蔥∨康丶蛹睿ㄈ野罰┞遬H值，直到形成懸浮液，再加入一些堿，使pH穩(wěn)定(如pH值約為5.7)。再次濾集晶體并干燥之，得到雙(DMF)溶劑化物。
另外，該雙(DMF)溶劑化物也可由單(DMF)溶劑化物的濃DMF溶液制備。具體說，在濃DMF溶液中加入等體積的反抽提溶劑(最好是乙腈)，將混合物冷卻(如至0℃)。如上方法濾集固體雙(DMF)溶劑化物沉淀。本發(fā)明還提供了制備式(Ⅰ)化合物物晶狀雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法，包括在含有式(Ⅰ)化合物的單(DMF)溶劑化物的DMF濃溶液中加入反抽提溶劑。
該單(DMF)溶劑化物常常產(chǎn)生于用于制備雙(DMF)溶劑化物的?；磻?yīng)。因此，本發(fā)明還提供了制備式(Ⅰ)化合物的晶狀單(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法，包括在DMF中使式(Ⅱ)的7β-氨基化合物
(其中R1是羧基保護(hù)基)與下式所示?；噭┓磻?yīng)
(其中X是離去基團(tuán)，而R2是保護(hù)基)然后脫去保護(hù)基。
另一種制備單(DMF)溶劑化物的方法要求將雙(DMF)溶劑化物懸浮在最小量的冷的9∶1DMF∶H2O中，然后用最小量的酸使之溶解(如加濃鹽酸)。加堿(如三乙胺)使溶液pH慢慢升高，直至形成淺色的懸浮液(一般pH3.0左右)。將懸浮液過濾(除去氯化三乙銨)然后加入堿，使濾液pH慢慢升至約5-6(最好是5.8)。濾集單(DMF)溶劑化物晶體并干燥。因此，本發(fā)明也提供了制備上述式(Ⅰ)化合物的單(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法，包括在DMF∶水(9∶1，體積比)中將式(Ⅰ)化合物的雙(DMF)溶劑化物溶液的pH調(diào)至5-6。
許多可供選擇的方法都可用來?；嘶衔颷式(Ⅱ)]以制得LY213735。由這些替代方法制得的LY213735可以轉(zhuǎn)變成這兩種DMF溶劑化物中的任何一種，轉(zhuǎn)變方法如上所述，將?；a(chǎn)物懸浮在水/DMF混合物中，然后加酸使之溶解，再加堿誘導(dǎo)沉淀發(fā)生。?；疞Y213735的方法類似于?；?-氨基青霉烷酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢菌烷酸和7-氨基頭孢菌素烷酸的方法。一種?；椒ㄊ窃谒崆宄齽┐嬖谙潞唵蔚鼗旌?β-氨基核化合物和酰氯或酰溴。酰氯或酰溴可現(xiàn)場形成。另一種方法是將7β-氨基核化合物與側(cè)鏈的游離羧酸型(或其酸式鹽)和一縮合劑混合。適合的縮合劑包括N，N′-二取代碳化二亞胺如N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺、N，N′-二乙基碳化二亞胺、N，N′-二(正丙基)碳化二亞胺、N，N′-二(異丙基)碳化二亞胺、N，N′-二烯丙基碳化二亞胺、N，N′-雙(對二甲氨基苯基)碳化二亞胺、N-乙基-N′-(4″-乙基嗎啉基)碳化二亞胺等。Sheehan在美國專利2，938，892和Hofmann等人在美國專利3，065，224中公開了一些其它合適的碳化二亞胺縮合劑。氮雜茂化物(Azolides)，如N，N′-羰基二咪唑和N，N′-亞硫?；溥蛞部捎米骺s合劑。也可以用脫水劑如三氯氧磷、烷氧基乙炔和2-鹵代吡啶鎓鹽(如2-氯吡啶鎓鹽甲基碘化物，2-氟吡啶鎓甲基碘化物等)將游離酸或其酸式鹽與7β-氨基核偶連起來。
另一種?；椒ㄒ笙葘Ⅴ；鶄?cè)鏈的游離羧酸型(或相應(yīng)的鹽)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的活性酯衍生物，接著用它來?；?β-氨基核。該活性酯衍生物可用下述化合物將游離酸型酯化而得，如用對硝基苯酚，2，4-二硝基苯酚、三氯苯酚、五氯苯酚、2-氯-4，6-二甲氧基三氮烯、N-氯琥珀酰亞胺、N-氯代苯馬來酰亞胺、N-氯鄰苯二甲酰亞胺、1-羥基-1H-苯并三唑或1-羥基-6-氯-1H-苯并三唑?；钚怎パ苌镆部梢允腔旌纤狒?，這些混合物酸酐是由如甲氧羰基、乙氧羰基、異丁氧羰基、三氯甲基羰基和異丁-2-基羰基等與酰基側(cè)鏈的羧酸形成的。這些混合酸酐通過酰化?；鶄?cè)鏈的羧酸來合成。
或者用?；鶄?cè)鏈的N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)衍生物?；?β-氨基核。一般說，?；鶄?cè)鏈的游離酸形式和EEDQ是在惰性的極性有機(jī)溶劑(如四氨呋喃、乙腈等)中進(jìn)行反應(yīng)的。所生成的EEDQ衍生物現(xiàn)場用于酰化7β-氨基核。
還有另一個酰化7β-氨基化合物的方法，它要求使用一種酶助過程。在1982年6月15日頒發(fā)的Hashimoto等人的美國專利4，335，211中敘述了這一方法，在此引入作為參考。
通過本領(lǐng)域熟知的方法除去氨基和羧基保護(hù)基。除去這兩種類型保護(hù)基的條件的實例可參見下述文獻(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，如E.Haslam，“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”，J.G.W.McOmie編輯，Plenum出版，紐約市、紐約州，1973，第2和5章，和T.W.Greene，“有機(jī)合成中的保護(hù)基”，JohnWiley父子公司，紐約市，紐約州，1981，第5和7章。
除去氨基和羧基保護(hù)基的方法實例也可參見實驗部分。例如，叔丁氧羰基氨基保護(hù)基可用三氟乙酸除去，以及對硝基芐基羧基保護(hù)基可用氫解法除去。
在下面的制備例和實例中，術(shù)語二甲基甲酰胺和核磁共振譜分別縮寫為DMF和n.m.r.。
在n.m.r.譜中，用到下面的縮寫“s”是單峰，“d”是雙峰，“dd”是兩次分裂的雙峰，“t”是三重峰，“q”是重峰，“m”是多重峰。
n.m.r.譜是用GeneralElectricQE-300300MHz儀器上測得的。用δ值表示化學(xué)位移(得自四甲基甲硅烷的ppm低磁場)。
實例1LY213735雙(DMF)溶劑化物A.?；磻?yīng)將DMF(81.2毫升)冷至-20℃，然后加入2-(R)-2-(對羥基苯基)-2-((Z)-丁-2-烯酸甲酯-2-基)氨基)乙酸鈉(5.70克，19.84毫摩爾)，得到白色懸浮液。將此懸浮液冷至-45℃。(溶液的pH約為7.5)于懸浮液中加入甲磺酸(17.1%，3.08毫摩爾，0.2毫升)，然后立即加入二甲基芐基胺(2%，0.054毫升，0.37毫摩爾)和氯甲酸甲酯(1.42毫升，18.4毫摩爾)，整個這段時間內(nèi)保持懸浮溫度低于-45℃。在-50°至-45℃溫度范圍內(nèi)再攪拌懸浮液50分鐘。保持懸浮液溫度低于-45℃，于其中加入7-(R)-7-氨基-3-氯-3-(1-碳代去硫頭孢烯)-4-羧酸對硝基芐酯(6.33克，18.4毫摩爾溶于20毫升DMF中)。將懸浮再攪拌1.5小時，然后用10分鐘時間溫至0℃，得到?；a(chǎn)物。
B.脫去保護(hù)基于得自上述A(“?；饔谩?的溶液中加入水(6.48毫升)、濃鹽酸(11.6毫升)和鋅粉(3.34克1，51.05毫摩爾，2.83當(dāng)量)，同時保持混合物于0至10℃之間。室溫下攪拌反應(yīng)混合物約5小時，得到紅橙色的pH3.8的溶液。再加入濃鹽酸(8.9毫升)，在約20℃再攪拌反應(yīng)混合物15分鐘。將反應(yīng)混合物冷至15℃，加入三乙胺(約14毫升)將混合物的pH從0.99升至2.9。將混合物攪拌15分鐘，然后通過Whatman濾紙和玻璃過濾器過濾，并用10毫升DMF洗滌之。將濾液置于干凈燒瓶中，冷至15℃，加入三乙胺使溶液pH升至4.6。溶液中加入LY213735晶種。將加了晶種的溶液攪拌30分，然后加入三乙胺使其pH升至5.6。將晶體正在長大的混合物攪拌35分鐘，然后過濾。收集的固體在室溫下和真空中干燥3天，得到LY213735雙(DMF)溶劑化物(2.99克，產(chǎn)率32.4%)。
將干燥的LY213735雙(DMF)溶劑化物懸浮在9∶1DMF∶水(30毫升)中，加入濃鹽酸將懸浮液的pH調(diào)到1.1。將懸浮液攪拌約10分鐘，直到形成溶液。保持溶液溫度在5℃，加入三乙胺，使溶液pH慢慢升至5.6，在pH達(dá)5.6之時，立即將混合物攪拌30分鐘并過濾。將收集的固體于室溫下真空干燥24小時，得到晶狀LY213735雙(DMF)溶劑化物。
n.m.r.(300MHz，D2O/DCl)δ8.1(s，7H)(過量的DMF);7.6(2H，d);7.1(2H，d);6.5(1H，d);6.3(1H，s);4.0(1H，m);3.1(25H(DMF)，s);2.9(27H(DMF)，s);2.6(2H，m).
實例2LY213735單(DMF)溶劑化物A.?；饔玫?dú)夥障?，?-(R)-2-(對羥基苯基)-2-(((Z)-丁-2-烯酸甲酯-2-基)氨基)乙酸鈉(40.57克，141.2毫摩爾)懸浮在已經(jīng)冷至-20℃的DMF(578毫升)中。將懸浮液進(jìn)一步冷至-45℃，用注射器加入甲磺酸(0.33毫升，5.14毫摩爾)、二甲基芐胺(0.41毫升，2.69毫摩爾)和氯甲酸甲酯(10.62毫升，137.4毫摩爾)。在加料過程中，DMF溶液的溫度維持在-45℃至-50℃范圍內(nèi)。在-50℃再攪拌所得懸浮液15分鐘。用50分鐘時間加入7-(R)-7-氨基-3-氯(1-碳代去硫頭孢烯)-4-羧酸對硝基芐酯(128.4毫摩爾，于190毫升DMF中)，然后在-45℃攪拌所得反應(yīng)混合物2小時。用20分鐘時間將反應(yīng)混合物溫至-10℃，得到酰化了的、羧基被護(hù)的產(chǎn)品的溶液。
B.脫保護(hù)基和結(jié)晶作用保持反應(yīng)混合物溫度在0到約10℃，用15分鐘時間，于得自上述A段的溶液中加入水(48.8毫升)、濃鹽酸(87.3毫升)和鋅粉(25.18克，285.2毫摩爾)。于溶液中加入最后一部分濃鹽酸(63.3毫升)，將溶液在室溫下攪拌4.75小時。將溶液冷至15℃，加入三乙胺(約100毫升)，將pH調(diào)至2.9，將此混合物再攪拌15分鐘。過濾此混合物，回收鋅殘余物，然后將濾液冷至15℃，加入三乙胺使濾液pH升至4.6。在此混合物中放入非溶劑化的LY213735作為晶種并攪拌15分鐘。用三乙胺慢慢處理晶體正在長大的懸浮液(1滴/3秒)，以得到pH5.65。將所得懸浮液攪拌幾分鐘。再加入三乙胺使懸浮液攪拌幾分鐘。再加入三乙胺使懸浮液pH升至5.866攪拌所得稠懸浮液20分鐘，其間pH穩(wěn)定在5.833。用1號Whatman濾紙過濾懸浮液，收集的固體在室溫下真空干燥過夜，得濕團(tuán)46.49克。
將濕餅懸浮在9∶1的DMF∶水(425毫升)中并將懸浮液的pH用濃鹽酸(14毫升)調(diào)至1.1，得到溶液。在已形成溶液并且其pH已經(jīng)穩(wěn)定后，用1號Whatman濾紙過濾溶液。濾液冷至5℃，加入三乙胺使pH升至5.2。從最早開始形成懸浮液的時刻開始，將混合物攪拌約30分鐘。在此30分鐘期間，混合物的pH降至4.4，然后再用三乙胺(總量為22毫升)調(diào)回到5.7。攪拌此懸浮液直至pH值相對穩(wěn)定，然后過濾。收集固體，用9∶1DMF∶水(20毫升)洗滌。洗過的固體在室溫和氮?dú)饬髦姓婵崭稍镞^夜，得1.83克物質(zhì)，產(chǎn)率27.9%，為晶狀LY213735單(DMF)溶劑化物。
n.m.r.(300MHz，D2O/DCl)δ7.94(1H，s，(DMF));7.24(2H，d);6.94(2H，d);5.14(2H，d);3.94(1H，m);2.97(3H，s(DMF));2.89(3H，s(DMF));2.50(2H，m);and2.61(1H，m).
實例3由雙(DMF)溶劑化物制LY213735一水合物將水(16.4毫升)和EDTA四鈉鹽(0.03克)在濃鹽酸(0.8毫升)中的溶液合并，然后加入LY213735雙(DMF)溶劑化物(3.0克)攪拌所得懸浮液直到形成溶液。加入活性炭(Darco
，0.03克)，在15℃攪拌懸浮液10分鐘。然后通過HYFLO
助濾劑墊過濾。用3毫升水洗濾餅。將濾液(加洗滌液)冷至10℃。加入三乙胺將冷濾液的pH調(diào)至3.6，得到稠的白色懸浮液。將懸浮液攪拌2小時并過濾。用冷水洗滌濾餅，然后在室溫下真空干燥過夜，得1.05克晶狀LY213735一水合物費(fèi)歇爾法3.13%水;
n.m.r.(300MHz，D2O/DCl)δ7.03(2H，d);6.6(2H，d);5.0(1H，d);4.95(1H，s);3.6(1H，m);2.1(2H，m);1.0(2H，m);0.94(1H，t);
X-射線(粉末X-射線衍射參數(shù)和圖譜如上面表1所示)。
元素分析計算C16H18N3O6Cl理論值C，50.07;H，4.73;N，10.95;
實測值C，50.20;H，5.02;N，11.17。
實例4由相應(yīng)的雙(DMF)溶劑化物制LY213735單(DMF)溶劑化物將單(N′，N-二甲基甲酰胺)溶劑化物和雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的混合物(總量70.64克)混合在最小量的DMF(250毫升)中。將懸浮液冷至10-15℃之間。加入濃鹽酸將冷懸浮液的pH調(diào)至1.1。攪拌酸化的懸浮液直到形成溶液。用三乙胺將溶液的pH慢慢調(diào)到5.8，所有這段時間內(nèi)都非常慢亟漣樅芤海ㄔ 轉(zhuǎn)/秒)。將所得懸浮液慢慢攪拌15分鐘。此間使其pH值維持在5.7至5.8之間然后過濾。用乙酸乙酯洗滌濾餅并真空干燥過夜，得47.3克晶狀的LY213735單(DMF)溶劑化物。費(fèi)歇爾分析87.2%水。
n.m.r.(300MHz，D2O/DCl)δ7.9( 1/2 H，s(DMF));7.4(2H，d);6.75(2H，d);5.45(1H，d);4.6(1H，s);3.75(1H，m);2.75(2H，s(DMF));2.4(2H，s(DMF));2.55(2H，m);1.45(2H，m);
X-射線(該化合物的X-射線粉末衍射參數(shù)和圖譜見上面表2)。
實例5由相應(yīng)的單(DMF)溶劑化物制LY213735一水合物將去離子水(300毫升)、EDTA四鈉鹽1(0.52克，1.2毫摩爾)和濃鹽酸(14.2毫升)混合后先在室溫攪拌，然后冷至15℃。將LY213735單(DMF)溶劑化物(47.0克，0.107摩爾)加到溶液中，得到懸浮液在攪拌約10分鐘后變成溶液。加入活性炭(Darco ，0.5克)，然后在約15°至20℃之間攪拌懸浮液10分鐘。懸浮液通過0.5英寸HYFLO 助濾劑墊過濾。用水(約60毫升)洗滌濾餅。合并濾液和洗滌液，冷至15℃，加入三乙胺，使pH慢慢升到1.7(0.1單位/5分鐘)。將此渾濁的溶液攪拌約10分鐘，得到稠的白色懸浮液。將此懸浮液再攪拌45分鐘。然后加入三乙胺使懸浮液的pH慢慢升到3.5。懸浮液的pH值自發(fā)地持續(xù)升高到5.8，隨后加入幾滴濃鹽酸將pH穩(wěn)定在5.75。在此pH5.75條件下將懸浮液攪拌1.5小時，同時保持懸浮液溫度在約13至16℃之間，然后過濾。用水(60毫升)洗滌濾餅，在室溫下真空干燥過夜，得36.06克白色固體。
將上段最后一次過濾所得濾液用乙腈(400毫升)稀釋并冰凍過夜，得到白色懸浮。將此懸浮液過濾，并真空干燥過夜，得2.48克白色固體。
這兩批白色固體(得自上面第一和第二段)合并在200毫升水中。所得懸浮液在約10℃攪拌1小時，然后過濾。用水(約50毫升)洗滌濾餅并在室溫于真空中干燥過夜制得28.39克晶狀LY213735一水合物卡爾·費(fèi)歇爾分析2.6%水;
n.m.r.(300MHz，D2O/DCl)δ7.20(2H，d);6.75(2H，d);5.1(1H，d);5.0(1H，s);3.7(1H，m);2.7( 1/3 H，s);2.35(2H，m);1.05(2H，m).
實例6用下列成分制得硬明膠膠囊量(毫克/膠囊)LY213735晶狀一水合物200可流動淀粉200帶5%硅氧烷的流動型淀粉50硬脂酸鎂2.5將上述成分混合后按452.5毫克的量裝入硬明膠膠囊。
實例7
下列成分構(gòu)成一個片劑配方量(毫克/片)LY213735的晶狀一水合物200微晶纖維素200烘制過的二氧化硅10硬脂酸5將各成分混合并壓制成各每片415毫克的片劑。
實例8各含200毫克活性成分的栓劑制備如下LY213735晶狀一水合物200毫克飽和脂肪酸甘油酯至2000毫克將活性成分通過60目美國篩并懸浮在用必需的最少熱量預(yù)先融化的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物例入標(biāo)稱容量為2克的栓劑模中，并令其冷卻。
實例9可即用的水懸液200毫克/5毫升LY213735晶狀一水合物210毫克帶有羧甲基纖維素鈉的纖維素95毫克蔗糖1.85毫克Parafens3毫克硅氧烷乳液2.5毫克環(huán)氧乙烷-環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物(Pluronic)5毫克調(diào)味劑2毫克著色劑0.5毫克純化水適量至5毫升將活性成分過篩。將Parafens溶于熱的純水中，冷卻后，加入其它成分。加入足量的純水得到所需體積。然后可將此懸浮液通過膠體磨或均化器以制得更好的分散體。
實例10供再配制用的懸浮液LY213735晶狀一水合物210毫克蔗糖3克漢生膠5毫克改性淀粉10毫克硅氧烷乳液5毫克十二烷基硫酸鈉0.5毫克甲基纖維素2毫克調(diào)味劑0.5毫克染料將各成分過篩，并在適當(dāng)混合器中混合，如雙殼、雙芯Nauta 型或帶式混合機(jī)。配制時加入足夠體積的純水，達(dá)到所需的體積。
權(quán)利要求
1.制備式(Ⅰ)所示化合物的晶狀一水合物的方法
該方法包括將含式(Ⅰ)所示化合物的水溶液的pH值調(diào)到2至7。
2.制備式(Ⅰ)所示化合物的晶狀單(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法
該方法包括在DMF中使式(Ⅱ)所示7β-氨基化合物
(其中R1是羧基保護(hù)基)，與下式所示?；瘎┓磻?yīng)
(其中X是離去基團(tuán)，R2是保護(hù)基)，然后脫去保護(hù)基。
3.制備權(quán)利要求2所述的式(Ⅰ)所示化合物的單(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法，該方法包括調(diào)節(jié)式(Ⅰ)所示化合物的雙(DMF)溶劑化物在DMF∶水(9∶1，體積比)中的溶液的pH值到的5至6。
4.制備式(ⅰ)所示化合物的晶狀雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法
該方法包括在DMF中使式(Ⅱ)所示7β-氨基化合物
(其中R7是羧基保護(hù)基)與下式所示的?；噭┓磻?yīng)
(式中X是離去基團(tuán)，R2是保護(hù)基)然后脫去保護(hù)基。
5.制備權(quán)利要求4所述的式(Ⅰ)化合物的晶狀雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物的方法，該方法包括將反抽提溶劑加到濃的含權(quán)利要求2所述的式(Ⅰ)化合物單(DMF)溶劑化物的DMF溶液中。
全文摘要
7β-[2′-(R)-2′-(對羥苯基)-2′-氨基乙酰氨基]-3-氯-3-(1-碳代去硫頭孢烯)-4-羧酸(“LY213735”)的晶狀一水化合物、單(N，N′-二甲基甲酰胺)和雙(N，N′-二甲基甲酰胺)溶劑化物是具有優(yōu)良物理性質(zhì)的新化合物。還介紹了晶狀LY213735一水合物的藥物制劑。
文檔編號A61P31/04GK1032442SQ88109139
公開日1989年4月19日 申請日期1988年10月5日 優(yōu)先權(quán)日1987年10月7日
發(fā)明者約翰·布倫南 申請人:伊萊利利公司