專利名稱：：牙科應(yīng)用中的局部藥物釋放組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及牙科應(yīng)用中的局部藥物釋放組合物，它含有一種活性抗菌成份，尤其是對于本發(fā)明的局部藥物釋放組合物，通過混合某些具有抗菌活性的組分，如四環(huán)素或二甲胺四環(huán)素以及某些人體適應(yīng)的聚合物來治療牙周病，使其具有釋放調(diào)節(jié)作用。近來，制藥工業(yè)中發(fā)展新藥的主題已引起了人們的興趣和關(guān)注，而經(jīng)濟開支和更完善的技術(shù)是必不可少的。為了妥善解決這個問題，一些制藥商行已集中努力發(fā)展不同品種的組合物，以調(diào)節(jié)給藥的釋放過程，以期進一步加強含有活性組分藥物的服用效果。已經(jīng)證實所述組合物在治療某些疾病，如糖尿病、高血壓和癌癥時有極好的效果。就牙科領(lǐng)域而言，人們建議采用通過保持氟化物濃度不變的方式來減少齲齒的釋放調(diào)節(jié)方法，直到最近發(fā)展了通過使用聚合物而局部施用某些抗生素的方法。局部給藥方法中使用的某些抗生素是四環(huán)素、甲硝噠唑、洗必太和二甲胺四環(huán)素;使用的材料有空心絲、單片膜、或凝膠;使用的聚合物，已研究的有甲基丙烯酸乙酯、乙基纖維素、聚乙烯、EVA、聚氨基甲酸乙酯等[美國專利4764377，4175326，3923939]。在我國國內(nèi)，發(fā)明家們研究了與齒斑相關(guān)的免疫學(xué)和與它相應(yīng)的抗菌素，以及治療方法[KoreaPeriodentologyScientificJournal17(1)，11(1987);15(1)，153(1985)]。特別是研究了抗菌素局部應(yīng)用的一種將四環(huán)素包在疏水性凝膠中的方法[KoreanMicroorganismSocietyJournal21，503(1986)]。然而，以上所提到方法的缺點是沒有考慮藥物本身的某些功效，藥物延長功效的明顯降低需要通過使用聚合物調(diào)整，以延長藥物的釋放時間。由于牙周炎發(fā)生在特殊的解剖部位，如牙周袋，所以系統(tǒng)服用抗生素不能很好的滲透到損傷部位，而且會加大系統(tǒng)的副作用。因此，不同于以往的發(fā)明，本發(fā)明的目的在于提供新型的通過混合具有抗菌活性的活性組分(如四環(huán)素或二甲胺四環(huán)素)和某些對人體適宜的聚合物材料來治療牙周疾病的局部藥物釋放組合物，從而使其對牙周炎發(fā)揮延長功效和局部緩釋作用成為可能。而且，所述組合物起到了減少系統(tǒng)毒性、最大發(fā)揮治療功效和盡可能經(jīng)濟用藥的作用。本發(fā)明參照附圖作了如下進一步描述，其中圖1涉及參照本發(fā)明組合物制備的聚合物載體(實施例4)，其中圖(a)代表初始的24小時二甲胺四環(huán)素從聚合物載體中釋放的比率，圖(b)代表隨著時間的延長，二甲胺四環(huán)素的釋放比率。圖2涉及兩幅圖，圖(a)代表從本發(fā)明實施例5測得的初始的24小時內(nèi)二甲胺四環(huán)素從聚己酸內(nèi)酯薄膜中釋放出來的比率，圖(b)代表7天時間內(nèi)含20%二甲胺四環(huán)素的聚己酸內(nèi)酯薄膜的釋放比率。圖3涉及四環(huán)素從參照本發(fā)明組合物制備的EVA聚合物載體(實施例8)上釋放下來的比率圖。圖4涉及二甲胺四環(huán)素從參照本發(fā)明組合物制備的EVA聚合物載體上(實施例13)釋放下來的比率圖。本發(fā)明涉及含有一種活性組分如四環(huán)素或二甲胺四環(huán)素的局部藥物釋放組合物，它具有抗菌活性，其特征如下上文所述活性組分與聚合物組分包括聚(乙烯乙酸乙烯酯)(下文簡稱“EVA”)，聚己酸內(nèi)酯(下文簡稱“PCL”)，和任何一種PCL與聚乙二醇(下文簡稱“PEG”)的混合物。所述聚合物成分用量占藥物釋放組合物中的20-30(重量)%。本發(fā)明還可以更具體地描述為本發(fā)明所述的局部藥物釋放組合物可制成適用的薄膜狀或圓錐形式，其中含有活性組分如四環(huán)素或二甲胺四環(huán)素。同時薄膜或圓錐的厚度應(yīng)為100-400μm，優(yōu)選的是150-250μm。由于本發(fā)明中所述聚合物成分是作為藥物載體和釋放調(diào)節(jié)劑使用的，所以優(yōu)選使用占所述EVA聚合物10-40(重量)%的乙酸乙烯酯，更優(yōu)選的是15-35(重量)%。如果所述EVA中乙酸乙烯酯含量為15(重量)%，則它幾乎沒有柔韌性;如果含量高于35(重量)%，則流動性太大。并且，本發(fā)明中PCL的分子量(“MW”)優(yōu)選的是50000-100000，而PEG的分子量最好是2000-30000。本發(fā)明所述PCL可以單獨使用或使用PCL和PEG的混合物，后者優(yōu)選的用量是重量比為5-7∶5-3;PCL和PEG的混合物可提高藥物的釋放速率。同時，對于本發(fā)明局部藥物釋放組合物，抗生素活性組分含量相對于所述聚合物的比例應(yīng)該是10-40(重量)%。如果所述活性組分遠低于這個含量，則其延長時間很短，如果含量過高，則沒有經(jīng)濟效益。具有抗菌活性的活性組分是四環(huán)素、二甲胺四環(huán)素、洗必太、血根堿、氯林可霉素、羥氨卡青霉素-克拉維酸復(fù)合片、ofloxacin、甲硝噠唑或磷霉素等。其中最優(yōu)選的是四環(huán)素或二甲胺四環(huán)素(或它們的鹽酸鹽)。本發(fā)明局部藥物釋放組合物從制備到給藥實驗的不同過程陳述如下[大批量原材料的選擇]-有效組分.四環(huán)素.二甲胺四環(huán)素/其鹽酸鹽-聚合物組分.聚(乙烯乙酸乙烯酯)乙酸乙烯酯含量為(15%，30%).聚乙二醇MW2000，6000，20000.聚(ε-己酸內(nèi)酯)MW6000[聚合物條(polymerStrip)的制備]將所述聚合物中的任何一種，每1克溶于5mlCHCl3溶劑中，然后與所述活性組分和CHCl3的溶液均勻混合24小時。于是在玻璃上制成條狀薄膜。將所選擇的聚合物溶解于5mlCHCl3中，在聚四氟乙烯薄膜上制成聚合物膜。用兩個腔擴散室進行滲透試驗，其中室的體積為8ml，有效滲透面積為1.33cm2。室為玻璃質(zhì)，其外部被水套包圍黑，以利用水循環(huán)有效地控制溫度。使用美國CrownGlass公司生產(chǎn)的擴散控制臺(diffusionconsole)，可以同時操作九個擴散室(diffusioncell)。為了建立滲透試驗，將所述制備的聚合物膜插入兩個室之間，聚合物膜的每一側(cè)都用O形環(huán)固定。在供體分隔室中，將藥物以過飽和狀態(tài)溶解于蒸餾水中;在受體分隔室中灌入8ml蒸餾水。恒溫槽中將水在36-38℃循環(huán)以控制溫度。在用磁攪拌器攪拌每個室的同時，在所述受體部分收集一定時間的樣品，同時也加入與被收集樣品同樣量的蒸餾水，該樣品在下述數(shù)據(jù)分析過程中有所調(diào)整。使用連續(xù)擴散儀進行藥物(活性組分)對所述條狀薄膜的滲透試驗。設(shè)置該儀器的室，使儲存溶液流入緊靠室的入口，然后再流出至上層出口。室內(nèi)容積大約應(yīng)為500ml。將整個室浸入水套中，并使水循環(huán)以保持溫度在37℃以內(nèi)。同時蒸餾水用作儲存溶液，其流速應(yīng)保持在3-4ml/小時。將此條狀薄膜放入室內(nèi)，在室底部用磁棒攪拌以混合從條狀薄膜中釋放出來的藥物，并使室內(nèi)的氣泡容易進入出口。用紫外/可見分光光度計測定本發(fā)明中的四環(huán)素和二甲胺四環(huán)素。用0.1NHCl將pH值調(diào)至1.2，在268nm波長處對四環(huán)素進行檢測，同時在273nm波長處對二甲胺四環(huán)素進行檢測。通過溶液排空方法，在37℃分別將所述聚合物組分浸入四環(huán)素和二甲胺四環(huán)素溶液中，當(dāng)活性組分與大量溶液平衡時，測定活性組分在所述聚合物組分和溶液中的分配度。用下列公式計算分配系數(shù)、擴散系數(shù)和滲透度作為試驗結(jié)果。分配系數(shù)公式KD＝(Vs(Co-Cs))/(VmCs)這里，Kd是分配系數(shù);Vs是藥物溶液體積;Vm是聚合物體積;Co是原始藥物溶液濃度;Cs是達到平衡后溶液中藥物的濃度。滲透度公式P=(V受傷(dC/dt))/(Am(C供體－C受體))這里，P是滲透度;V受體是下分隔室體積，Am是滲透面積;C供體是上分隔室的藥物濃度;C受體是下分隔室的藥物濃度。擴散系數(shù)公式t＝l2/6DP＝DKd/l這里，t是滲透延遲時間;D是擴散系數(shù);P是滲透度;l是聚合物膜厚度。相對于1g所述聚合物組分，分別按比例加入10(重量)%、20(重量)%、30(重量)%和40(重量)%的四環(huán)素和二甲胺四環(huán)素，以制備條狀薄膜。在37℃測定每小時四環(huán)素和二甲胺四環(huán)素從條狀薄膜釋放的比率。實驗結(jié)果是，對于四環(huán)素，活性組分的量增加得越多，初始的突發(fā)效果就越大。經(jīng)過7-8小時后，不管再加入多少活性組分，釋放比率保持不變。然而當(dāng)釋放比率恒定時，每小時活性組分的釋放量或多或少地變少了，對于二甲胺四環(huán)素，最初的釋放過量，而隨著時間的延長，釋放速度緩慢降低，活性組分從120小時到168小時的釋放比率是5±1-10±2μg/cm2/小時。特別是混合的PCL與PEG聚合物組分表明，上述活性組分增加的量越多，初始的過量突發(fā)效果就越大，大約10小時后，顯示出相似的釋放比率，而且聚合物組分的分子量(MW)越大，初始的過量突發(fā)效果就越大。試驗表明，在下列情況下出現(xiàn)所希望的突發(fā)效果1)使用二甲胺四環(huán)素作為本發(fā)明組合物中的活性組分，2)使用PCL和PEG混合物作為聚合物組分，3)含有低含量的活性組分，4)如果聚合物組分具有低分子量。如上所述，本發(fā)明局部藥物釋放組合物在組成上不同于以往的藥物;通過改善釋放調(diào)節(jié)作用，保持藥物延長的效力，減少系統(tǒng)毒性，最大發(fā)揮經(jīng)濟用藥的治療效果。下面將通過具體實施例，對本發(fā)明進行更詳細的描述。實施例1-3含有二甲胺四環(huán)素的己酸內(nèi)酯薄膜的制備首先進行如下制備。單獨使用聚(ε-己酸內(nèi)酯;MW60000;Interrox-Chem.Ltd.)或混合所述聚(ε-己酸內(nèi)酯)和30%PEG(MW20000;WakoPureChemInd.Ltd.)，將其溶解于10ml氯仿中并攪拌3小時。將溶液混合24小時后使每個所述聚合物溶液沉淀。在大氣壓下室溫干燥該混合溶液，然后在真空下干燥3小時使其完全干燥，在聚四氟乙烯板上制備厚度為200μm的各種薄膜。實施例4二甲胺四環(huán)素體外釋放比率的測定將所述實施例2中制備的薄膜切成20mm(凈重30mg)的圓環(huán)，將其浸入擴散系統(tǒng)的蒸餾水中。同時，將體積為500μl的該系統(tǒng)在37℃聚積，并且此系統(tǒng)的蒸餾水用泵以3.5ml/小時的速度循環(huán)。用光譜分析儀(ShimadzuUV-240)在273nm波長處測定每小時二甲胺四環(huán)素從該系統(tǒng)中的釋放量。所得結(jié)果列于下面的表1和2中，同時描繪出表1(a)和(b)的圖。表1二甲胺四環(huán)素從PCL或PCL+PEG中釋放的量(μg/cm2/小時)PCL(60,000)PCL+PEG(20,000)PCL+PEG(2,O0O)＊MC(20%)MC(30%)MC(20%)MC(30%)MC(40%)MC(20%)1小時2704304505506007292小時3086566536621，4074443小時2494324319117422304小時2083981976325781585小時1823372243604381146小時163218167335268907小時146256141220155728小時136514117163111669小時124211101118925710小時1151928692794911小時1061797675704612小時100167756563441天661103563532222天414514141316PCL(60,000)PCL+PEG(20,000)PCL+PEG(2,000)＊MC(20%)MC(30%)MC(30%)MC(40%)MC(20%)3天302210119104天19145天6126天497天48＊MC膜中二甲胺四環(huán)素的含量表2二甲胺四環(huán)素從PCL或PCL+PEG中分離的突發(fā)比率(%)PCL(60,000)PCL+PEG(20,000)PCL+PEG(2,000)＊MC(20%)MC(30%)MC(20%)MC(30%)MC(40%)MC(20%)1小時986162小時241721254小時2017364035336小時2845403538PCL(60,000)PCL+PEG(20,000)PCL+PEG(2,000)＊MC(20%)MC(30%)MC(20%)MC(30%)MC(40%)MC(20%)8小時355054464010小時5657484212小時3242586049441天5057706653512天6877847359603天8385907862674天91895天95936天977天98＊MC膜中二甲胺四環(huán)素的含量實施例5抗生素活性的測定1)培養(yǎng)試驗細菌本實驗中使用下面的細菌蠟樣牙胞桿菌KCTS1012;KIST(BacilluscereusKCTS1012;KIST)，Bacteroidesgingivalis，BacteroidesintermediusNTCT9336，放線共生放線桿菌Y4(ActinobacillusactinomycetemcomitansY4);Socransky，WolinellarectaATCC33238，ActinomycesviscosusATCC19246，CapnocytophagagingivalisATCC33624，F(xiàn)usobacteriumnucleatumATCC25586，和EikenellaCorrodensATCC23834.-在37℃、10%濃度下，在營養(yǎng)肉湯(由美國底特律Difco實驗室制備)中培養(yǎng)蠟樣牙胞桿菌。-在Coy實驗室制備的真空室[Anarbor，MI，U.S.A.(80%N2，10%H2，和10%CO2;37℃)]中將放線共生放線桿菌Y4接種到一批NIHThioglycollatBroth(DifcoLabs)中進行培養(yǎng)。-將桿菌和其他口腔細菌接種到一種肉湯中，該肉湯由[2.5g酵母提取物;2.5g胰化胨，Difco產(chǎn)品;2.5g類胰蛋白酶，Difco產(chǎn)品;4.8gBHI;10mlslat溶液，Difco產(chǎn)品，每250ml蒸餾水中含有1ml刃天青，2.5g氯化血紅素，0.5g維生素K3和0.25g鹽酸半胱氨酸(Sigma產(chǎn)品);pH7.2]組，在37℃，真空狀態(tài)下培養(yǎng)兩天。2)用盤擴散方法分析生長抑制活性用盤擴散方法測定所用薄膜對蠟樣牙胞桿菌的抑制活性。將含有20%或30%分別從擴散系統(tǒng)中釋放1、3、4、7天的二甲胺四環(huán)素的PCL圓形膜(厚度1/4英寸)放入細菌培養(yǎng)皿中，在37℃、CO2存在下培養(yǎng)24小時，測定其抑制區(qū)。結(jié)果列于表3和表4，同時相應(yīng)地描繪出圖2(a)和2(b)。表3含20%二甲胺四環(huán)素的PCL+PEG樣品盤的生長抑制區(qū)直徑(盤直徑1/4吋，厚度200±10μm)(單位mm)樣品盤0天1天3天5天7天對照組PCL+PEG37.7522.2026.7524.0017.2517.00MC(20%)±0.25±0.00±1.70±0.25±1.00±0.25表4含20%和30%二甲胺四環(huán)素的PCL樣品的生長抑制區(qū)直徑(盤直徑1/4吋，厚度200±10μm)(單位mm)樣品盤0天1天4天5天7天PCL33.327.027.725.724.3MC(20%)±0.33±0.58±1.70±0.20±1.80PCL32.729.031.328.0MC(20%)±0.7±1.0±0.9±2.03)在培養(yǎng)基中生長抑制活性的分析分別在1、3、5、7天時測定PCL膜釋放給擴散細胞中所述試驗細菌的抗菌效果，以分析培養(yǎng)基中的生長抑制活性。首先，將含有30%二甲胺四環(huán)素(分別釋放了1、3、5、7天)的PCL樣品盤(直徑1.4英寸，凈重4mg)浸入接種有細菌的BIH培養(yǎng)基中。作為對照組，培養(yǎng)沒有PCL樣品盤的接種的培養(yǎng)基，在37℃的真空箱中再培養(yǎng)48小時，用分光鏡在60nm處測定肉湯組成物的濁度，結(jié)果列于表5。表5在真空箱中培養(yǎng)48小時后有/沒有二甲胺四環(huán)素的樣品盤上肉湯和對照組的密度菌株0天1天3天5天7天沒有MC對照組A.Act0.0000.0030.0000.0000.0000.0440.036B.gin0.0040.0020.0180.0060.0450.3930.326B.int0.0060.0270.0180.0180.0030.6580.623W.rec0.0040.0150.0210.0000.0000.6390.630A.vis0.0040.0000.0000.0000.0000.1460.097F.nuc0.0000.0000.0000.0000.0000.6190.613E.cor0.0000.0000.0000.0000.0000.0530.045C.gin0.0000.0000.0000.0000.0000.0970.107注意A.act;放線共生放線桿菌Y4B.gin;Bacteroidesgingivalis381B.int;BacteroidesintermediusNTCT9336W.rec;WolinellarectaATCC33238A.vis;ActinomycesviscosusATCC19246F.nuc;FusobacteriumnucleatumATCC25586E.cor;EikenellacorrodensATCC23834C.gin;CapnocytophagagingivalisATCC33624如上所示，即使在第七天，二甲胺四環(huán)素從含有20%和30%二甲胺四環(huán)素的PCL+PEG條中釋放的量依然是4-8μg/ml/小時，證明了延長的抗菌活性。因此，本發(fā)明所述的組合物對牙周疾病有極好的釋放調(diào)節(jié)作用。實施例6-7EVA聚合物膜上四環(huán)素的滲透試驗當(dāng)使用聚(乙烯乙酸乙烯酯EVA)作為聚合物成分，其中乙酸乙烯酯(VA)的含量分別為15%(實施例6)和33%(實施例7)，并且以四環(huán)素作為有抗菌活性的活性組分時，用上文所述公式計算EVA聚合物膜上四環(huán)素的下述結(jié)果，即分配系數(shù)，滲透度和擴散系數(shù)，結(jié)果列于表6。表6EVA聚合物上四環(huán)素的分配系數(shù)、滲透度和擴散系數(shù)＊EVA聚合物中VA的含量實施例8-10EVA聚合物條狀薄膜上四環(huán)素的釋放試驗按照與實施例1-3所述相同的方法制備EVA聚合物條狀薄膜。通過加入各個量即10%、20%和30%四環(huán)素制備該條狀薄膜，每克EVA聚合物中相應(yīng)地含有30%的VA，按照與實施例4相同的方法從該薄膜測定四環(huán)素的突發(fā)效果。結(jié)果表示在圖3中。實施例11-12EVA聚合物膜上二甲胺四環(huán)素的滲透試驗當(dāng)用乙酸乙烯酯(VA)含量分別為15%(實施例11)和33%(實施例12)的EVA聚合物作為聚合物組分，并用二甲胺四環(huán)素作為具有抗菌活性的活性組分時，用所述公式計算EVA聚合物膜上二甲胺四環(huán)素的結(jié)果，即分配系數(shù)、滲透度和擴散系數(shù)，結(jié)果列于表7。表7EVA聚合物上二甲胺四環(huán)素的分配系數(shù)、滲透度和擴散系數(shù)<tablesid="table2"num="002"><tablealign="center">VA含量＊(％)分配系數(shù)滲透度cm/秒擴散系數(shù)cm2/秒15332.02.064.41×10-59.5×10-57.28×10-81.02×10-7</table></tables>實施例13-15EVA聚合物條狀薄膜中二甲胺四環(huán)素的釋放試驗按照實施例8-10所述相同的方法進行EVA聚合物條狀薄膜中二甲胺四環(huán)素的釋放試驗，在此基礎(chǔ)上測定其突發(fā)效果。結(jié)果表示在圖4中。如實施例6-15所述，活性組分的含量增加越多，其最初的極度突發(fā)效果就越大。7小時后，不管加入多少活性組分，釋放速度保持恒定。然而，與上面實施例中PCL或PCL+PEG的相比，由于活性組分每小時的釋放量很小，因而在某種程度上減少了EVA聚合物的量。用含有30%二甲胺四環(huán)素的聚己酸內(nèi)酯條狀薄膜進行牙周袋中藥物釋放實驗(條狀薄膜直徑25mm×6mm，凈重2mg)，根據(jù)生物檢測確定二甲胺四環(huán)素隨著時間推移從插入牙周袋中的條狀薄膜上釋放出來的濃度。將一片條狀薄膜放入大于5mm的牙周袋中，通過每小時用濾紙(HarcoPeripaper)收集的齦縫液的體積得到牙周袋中二甲胺四環(huán)素的濃度。當(dāng)所收集的齦縫液體積達到條上的藍線時，測定收集量。在插入條狀薄膜后的1、2、4、8小時收集齦縫液，牙周膜裝袋后，每隔24小時使用該條，可使用7天。使用前將該條干燥并在-20℃下冷凍儲存。通過測定細菌生長抑制區(qū)的直徑得到每一條上二甲胺四環(huán)素的濃度，所述的每個條是由蠟樣牙胞桿菌培養(yǎng)得到的，方法如下37℃在二氧化碳培養(yǎng)基存在下，將被培養(yǎng)的蠟樣牙胞桿菌KC7C1012(由KISTGeneticEngineeringCenter提供)置于10ml培養(yǎng)溶液中(DifcoLabs，Detroit，Michigan)，用分光光度計在550nm處測得菌株濁度為0.3。對MuellerHinton肉湯(DifcoLabs，Detroit，Michigan)滅菌后，加入1.7%瓊脂，將其冷卻至50℃，向100ml瓊脂培養(yǎng)基中按比例加入2ml培養(yǎng)液，將7ml該混合物注入半徑為90mm的平板上使其變硬。收集標(biāo)準(zhǔn)條和牙周袋中的條，從藍線處切斷，將其放于平片培養(yǎng)基上，在二氧化碳培養(yǎng)基存在下培養(yǎng)24小時。用蒸餾水連續(xù)稀釋二甲胺四環(huán)素，使其濃度達到1000-1μg/ml，將吸附有此溶液的標(biāo)準(zhǔn)條進行干燥，直至其達到藍線。以1mm為單位用游標(biāo)卡尺從長軸到短軸測量細菌生長抑制區(qū)的直徑，計算其平均值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)條上生長抑制區(qū)直徑與二甲胺四環(huán)素濃度的關(guān)聯(lián)作用，通過線性回歸，同時對濃度值取對數(shù)制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，以計算牙周袋中游離的二甲胺四環(huán)素的濃度。該濃度可以通過下式計算logY＝A+BX其中，Y是二甲胺四環(huán)素的濃度;X是細菌生長-抑制面積的直徑;A值是-0.565218;B值是0.115161;r值是相關(guān)系數(shù)，為0.795。表8將含有30%二甲胺四環(huán)素的聚己酸內(nèi)酯插入牙周袋后根據(jù)線性回歸關(guān)系計算的每小時二甲胺四環(huán)素的游離濃度。時間對照區(qū)直徑SDN濃度(μg/ml)1小時25.331.5862252小時27.002.3163504小時25.502.716138.38小時23.53.536138.31-天22.002.31693.02－天18.673.35638.43－天18.002.00232.34－天16.804.42523.45－天17.500.50228.26－天10.000.5023.87－天12.001.5026.6表9用與體內(nèi)突發(fā)實驗相同大小的己酸內(nèi)酯膜(2.5mm×6mm)獲得的體外突發(fā)試驗結(jié)果(A′)。體內(nèi)突發(fā)試驗濃度(B)，是體外突發(fā)試驗中二甲胺四環(huán)素每小時釋放濃度的6.35倍時間體外休內(nèi)(B)C=()/()(A)(A＇)(B)(A＇)1小時43064.5225.13.52小時65693.4350.43.74小時39859.7138.32.38小時21432.1138.34.3時間體外體內(nèi)(B)C=()/()(A)(A＇)(B)(A＇)μg/cm2/小時0.15X(A)μg/ml1-天11016.593.05.62-天456.838.45.63－天223.332.29.84－天142.123.411.15-天121.828.215.86-天91.43.82.77-天81.26.65.5平均值＋標(biāo)準(zhǔn)誤差(SD)6.35+3.99由所述結(jié)果可知體外突發(fā)試驗中從含30%二甲胺四環(huán)素的聚己酸內(nèi)酯條狀薄膜上釋放出來二甲胺四環(huán)素的量與體內(nèi)突發(fā)試驗結(jié)果相同;最初兩個小時，顯現(xiàn)出最大突發(fā)效果，以后突發(fā)效果逐漸減少。在6或7天內(nèi)96%以上的二甲胺四環(huán)素釋放下來，每小時釋放量為8-9μg/cm2。在體內(nèi)突發(fā)實驗結(jié)果中最初兩小時內(nèi)，在牙周袋中從一片聚己酸內(nèi)酯膜(2.5mm×6mm，厚度200±10μm)中釋放出來的二甲胺四環(huán)素濃度為350μm/ml，顯現(xiàn)出最大突發(fā)效果，隨著時間的延長，突發(fā)效果逐漸減弱。到6-7天時，其濃度為3.8-6.7μg/ml(見表8，圖5)。牙周袋中，從聚己酸內(nèi)酯中釋放出來的二甲胺四環(huán)素的濃度與體外突發(fā)試驗中二甲胺四環(huán)素突發(fā)效果曲線相似(見圖5)。采用同等大小的聚己酸內(nèi)酯膜(2.5mm×6mm)，對體內(nèi)突發(fā)試驗和體外釋放試驗中每小時釋放的二甲胺四環(huán)素的量進行比較，試驗中二甲胺四環(huán)素的濃度是體外試驗中的濃度的6.35±3.99倍(見表9)如上所述可得出以下結(jié)論，該結(jié)論作為通過在聚己酸內(nèi)酯中包埋30%二甲胺四環(huán)素進行體外和體內(nèi)釋放試驗的結(jié)果，使本發(fā)明在治療牙周疾病方面得以應(yīng)用首先，在體外釋放試驗中，含30%二甲胺四環(huán)素的聚己酸內(nèi)酯(厚度200±10μm)的藥物釋放半衰期為16小時，其最大釋放時間是前兩個小時。釋放試驗進行到7天后，每小時釋放8μg/cm2的藥物。其次，在牙周袋中從一片聚己酸內(nèi)酯(2.5mm×6mm，厚度200±10μm)釋放藥物的突發(fā)效果表明，最初兩小時出現(xiàn)最大突發(fā)效果，其濃度為350μg/ml，隨著時間的延長，突發(fā)效果逐漸減小，到第6天或第7天，其濃度為3.8-6.7μg/ml。最后，體內(nèi)試驗中二甲胺四環(huán)素每小時釋放的濃度與體外釋放實驗的突發(fā)效果相類似，同時表明在體內(nèi)試驗中從相同大小的聚己酸內(nèi)酯膜中二甲胺四環(huán)素游離的突發(fā)效果是體外釋放試驗的6.35±3.99倍?？傊?，根據(jù)本發(fā)明，在治療牙周炎時，聚己酸內(nèi)酯膜作為釋放調(diào)節(jié)劑可以在牙周袋中連續(xù)七天釋放藥物。權(quán)利要求1.制備含有具有抗菌活性的二甲胺四環(huán)素活組分的局部藥物釋放組合物的方法，其特征在于所述活性組分和聚合物分包括聚(乙烯乙酸乙烯酯)，聚乙酸內(nèi)酯和任何一種聚已酸與聚乙二醇的混合物，同時包埋在局部用藥組合物中的活性組分相對于所述聚合組分的比例是20-30(重量)%。2.權(quán)利要求的方法，其中所述聚(乙烯乙酸乙烯酸(含有10-40(重量)%的乙酸乙烯酯。3.權(quán)利要求1的方法，其中所述聚己酸與聚乙二醇以重量比5-7∶5-3的比例混合。4.權(quán)利要求1或3的方法，其中所述聚己酸內(nèi)酯分子量為50000-100000，聚乙醇分子量為2000-3000。5.含有所述組合物的條狀薄膜，其特征在于將該膜制成厚度為100-400μm的薄膜狀或圓錐形所述活性組分的聚合組分包括聚(乙烯乙酸乙烯酯)、聚己酸內(nèi)酯和任何一種聚己酸內(nèi)酯與聚乙二醇的混合物，同時包埋在局部用藥組合物中的活性組分相對于所述聚合物組分的比例是20-30(重量)%。全文摘要本發(fā)明涉及一種含有具有抗菌活性的二甲胺四環(huán)素活性組分的局部藥物釋放組合物及其條狀薄膜，其特征在于所述活性組分和聚合物組分包括聚(乙烯乙酸乙烯酯)，聚己酸內(nèi)酯和任何一種聚己酸內(nèi)酯與聚乙二醇的混合物，同時包埋在局部藥用組合物中的活性組分相對于所述聚合物組分的比例是20—30(重量)％。文檔編號A61K9/22GK1059277SQ9110285公開日1992年3月11日申請日期1991年3月30日優(yōu)先權(quán)日1990年3月31日發(fā)明者鄭鐘平申請人:東國制藥株式會社