專利名稱：新型胞壁酰二肽衍生物以及含該衍生物的流行性感冒疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及胞壁酰二肽衍生物，這類衍生物具有輔藥活性并適于作流行性感冒病毒顆粒類的人工膜疫苗(即通常所說的病毒顆粒疫苗)的一個(gè)成份。本發(fā)明還涉及含該胞壁酰二肽衍生物和一種流行性感冒病毒抗原的復(fù)合物的流行性感冒疫苗。
由于在流行性病毒的血球凝集素分子上發(fā)生了突變，致使目前使用的流行性感冒HA疫苗的有效性起了變化，因此人們渴望開發(fā)出較常規(guī)疫苗更加有效的疫苗。
作為最近流行性感冒疫苗的發(fā)展方向，人們已經(jīng)知道了一種由HA(血球凝集素)和NA(神經(jīng)氨(糖)酸苷酶)作為主要成分而構(gòu)成的合成疫苗，或由6-0-(2-十四烷基十六酰)-N-乙酰胞壁?；?L-丙氨?；?D-異谷氨酰胺制成的流行性感冒病毒顆粒類的人工膜疫苗，即所謂病毒顆粒疫苗[見未審查的日本專利公開申請(qǐng)(下文稱“J.P.公開”)61-282321]。人們已經(jīng)知道特別是后一種疫苗在改善血液中的抗體值方面顯示出優(yōu)良的效果，因此它的利用是期望中的。
然而，這種疫苗對(duì)部分人體有刺激性，用于人體會(huì)引起不希望有的有害反應(yīng)，皮膚會(huì)產(chǎn)生紅色，因此作為藥它是不能令人滿意的。
本發(fā)明的目的是提供可以作為病毒顆粒疫苗中一個(gè)成分的有實(shí)用價(jià)值的新型胞壁酰二肽衍生物。
本發(fā)明另一個(gè)目的是提供一種具有杰出的抗體產(chǎn)生能力和安全性的流行性感冒疫苗。
本發(fā)明這些目的及其它目的根據(jù)下列描述和實(shí)例將是顯而易見的。
為解決上述問題而進(jìn)行了緊張的研究，之后，本發(fā)明者才完成了本發(fā)明。
按本發(fā)明的第一個(gè)目的，它提供了具有下列通式(Ⅰ)的胞壁酰二肽衍生物及其鹽類
(Ⅰ)式中R表示具有2-6個(gè)碳原子的?；琗表示L-氨基丙酸殘基、L-絲氨酸殘基、L-纈氨酸殘基或甘氨酸殘基，A表示具有10-60個(gè)碳原子的脂肪酸殘基，以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子、取代的或未取代的低級(jí)烷基、取代的或未取代的環(huán)烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、氨基或低級(jí)烷氨基或R1和R2可能與和它們直接相連的氮原子形成環(huán)氨基，所形成的環(huán)氨基可以具有的一個(gè)或多個(gè)選自氧、硫和氮原子的雜原子作為成環(huán)的原子并且可被取代也可不被取代。
按本發(fā)明的第二個(gè)目的，提供的流行性感冒疫苗包含上述通式(Ⅰ)的化合物或其鹽和流行性感冒病毒抗原的復(fù)合物。


圖1是本發(fā)明1號(hào)樣品疫苗的電子顯微照像(X95，000)。
圖2是本發(fā)明2號(hào)樣品疫苗的電子顯微照像(X95，000)。
下面將對(duì)上述通式(Ⅰ)中的取代基進(jìn)行描述。
具有2-6個(gè)碳原子的?；ㄒ阴；⒈；⒍□；?。脂肪酸殘基包括具有20-60個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪酸殘基，其中可以有一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵。其實(shí)例包括癸酰基、十二酰、十三酰、十四酰、十六酰、十八酰、二十酰、二十二酰、二十四酰、二十六酰、三十酰、四十酰、9-十六烯酰、9-十八烯酰、11，14-二十碳二烯酰、11-二十碳烯酰、11、14、17-二十碳三烯酰、2-十二烷基十六酰、2-十四烷基十六酰、2-十二烷基十四酰、2-十四烯基十六酰、2-十四烯基十六酰、2-十六烷基十八?；?。最好它們是具有20-40個(gè)碳原子的支鏈基。
低級(jí)烷基包括具有1-6個(gè)碳原子的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、叔-丁基及其類似物。低級(jí)烷基可以具有取代基如鹵原子、羥基、氨基及其類似物。取代基的數(shù)目通常最好是1-3。
環(huán)烷基是5-7節(jié)環(huán)的基，例如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基及其類似物。環(huán)烷基可以有一個(gè)或多個(gè)取代基，這些取代基包括低級(jí)烷基、鹵原子、羥基、氨基及其類似物。取代基的數(shù)目通常最好為1-3。
鹵原子的實(shí)例包括氯、溴、氟和碘原子。
芳基包括苯基、萘基、聯(lián)苯基及其類似物、芳基可有一個(gè)或多個(gè)取代基，這些取代基包括低級(jí)烷基、鹵原子、羥基、氨基及其類似物，取代基的數(shù)目通常最好為1-3。
芳烷基包括例如苯甲基、苯乙基、萘甲基及其類似物。芳烷基的芳基部分中可有一個(gè)或多個(gè)取代基，這些取代基包括低級(jí)烷基、鹵原子、羥基、氨基及其類似物。取代基的數(shù)目通常最好為1-3。
環(huán)氨基包括5-7節(jié)環(huán)的環(huán)氨基，如吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基及其類似物。環(huán)氨基可包括一個(gè)或多個(gè)雜原子，優(yōu)選地是一個(gè)選自氧、硫和氮原子中的雜原子作為成環(huán)的原子。其實(shí)例包括3-惡唑烷基、3-噻唑烷基、嗎啉代、硫代嗎啉代、1-吡唑烷基、1-咪唑烷基及其類似物。環(huán)氨基可有一個(gè)或多個(gè)取代基，這些取代基包括低級(jí)烷基、鹵原子、羥基、氨基及其類似物。取代基的數(shù)目通常最好為1-3個(gè)。低級(jí)烷氧基的例子包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基及其類似物，烷氨基意指-單低級(jí)烷氨基或雙低級(jí)烷氨基，其實(shí)例包括單甲氨基、單乙氨基、雙甲氨基、雙丙氨基、單丁氨基等。
通式(Ⅰ)化合物的部分結(jié)構(gòu)-NHCH(CONH2)CH2CH2CO-具有D-和L-異構(gòu)體，這是因?yàn)樗胁粚?duì)稱的碳原子。通常D-異構(gòu)體是優(yōu)選的。
至于通式(Ⅰ)化合物蔗糖部分中的1-位，具有異頭異構(gòu)體(α-和β-異構(gòu)體)，兩者對(duì)于本發(fā)明的疫苗來說都是有用的。
為了方便起見，本文中的兩種異頭異構(gòu)體同時(shí)表示成下列部分結(jié)構(gòu)式
下面將對(duì)通式(Ⅰ)化合物的生產(chǎn)方法進(jìn)行描述。
換句話說，通過經(jīng)常用于合成肽的縮合方法，如碳化二亞胺法、eintopf法或活性酯法，使通式(Ⅱ)化合物與通式(Ⅲ)化合物反應(yīng)生成所需的通式(Ⅰ)化合物。例如，當(dāng)通常使用活性酯法時(shí)，將通式(Ⅱ)化合物溶解于非活性有機(jī)溶劑如二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二惡烷、乙腈或其混合物中，并與試劑反應(yīng)生成活性酯如N，N-二琥珀酰亞氨基碳酸酯、N，N-羰基咪唑或N，N-二琥珀酰亞氨基草酸酯，最好是在有機(jī)堿如三乙胺、N-甲基嗎啉或4-二甲氨基吡啶存在下，在0℃-約60℃下反應(yīng)30分鐘到數(shù)小時(shí)以生成活性酯，在上述堿存在下，于約-15℃到約60℃優(yōu)選地是在0℃-25℃下將通式(Ⅲ)的胺化合物加入該活性酯中，并將反應(yīng)進(jìn)行數(shù)十分鐘到大約1天。上述生成活性酯的試劑其使用量與通式(Ⅱ)化合物等摩爾量。上述有機(jī)堿的使用量也可與通式(Ⅱ)化合物等摩爾或過量。之后將所得到的產(chǎn)物用硅膠柱色譜或諸如此類的方法純化以獲得通式(Ⅰ)的化合物。
通式(Ⅱ)起始化合物可按日本專利公開63-11359中所述的方法制備。
構(gòu)成本發(fā)明疫苗的復(fù)合物是通式(Ⅰ)的化合物或其鹽(如需要的話)與一種類脂聚集而形成一種封閉的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并且將流行性感冒病毒抗原引入到其膜內(nèi)。其典型實(shí)例是病毒顆粒類疫苗，即所謂的病毒顆粒。
下文將描述本發(fā)明疫苗中的抗原。
適用于本發(fā)明的抗原包括流行性感冒病毒的HA(血球凝集素)抗原、NA(神經(jīng)氨(糖)酸苷酶)抗原及其類似物。通常使用它們的混合物(即所謂的HANA抗原)是最理想的。通過對(duì)感染流行性感冒病毒的尿囊體液進(jìn)行低速和高速離心分離處理或化學(xué)處理來提純流行性感冒病毒、用表面活性劑如TritonX-100、膽酸鈉及其類似物溶解經(jīng)過純化的病毒、或用有機(jī)溶劑如醚分離病毒，再通過蔗糖密度-梯度離心法親合色譜法或諸如此類的方法進(jìn)行純化和分離而獲得HANA抗原。由此獲得的抗原其使用量通常為每份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的1/300-10份(重量計(jì))，最好為1/100-1份(重量計(jì))。
本發(fā)明的疫苗可通過各種方法如用于生產(chǎn)脂質(zhì)體的普通方法來生產(chǎn)。典型的方法實(shí)例將在下文描述。
將流行性感冒病毒抗原，通式(Ⅰ)化合物或其鹽以及優(yōu)選地一種磷脂于一種適當(dāng)?shù)木彌_溶液，如磷酸鹽緩沖溶液或諸如此類的溶液內(nèi)一塊混合，再將有效量的(優(yōu)選的0.1-20W/V%)表面活性劑如膽酸鈉、辛基葡糖苷及其類似物加入到混合物以使其溶解。然后將該混合物滲析以除去所用的表面活性劑，由此獲得本發(fā)明的流行性感冒疫苗?？梢詫⒁环N糖化物如葡萄糖、麥芽糖或乳糖，一種鹽如氯化鈉，或其混合物作為等滲劑(isotoniger)摻入所獲得的本發(fā)明的疫苗中。
磷脂的實(shí)例包括磷脂酰甘油，如二肉豆寇酰磷脂酰甘油和二棕櫚酰磷脂酰甘油;磷脂酰絲氨酸;磷脂酰膽堿如二棕櫚酰磷脂酰膽堿;磷脂酰乙醇胺;磷酯酰肌醇;磷脂酸及其類似物。它們可由天然物質(zhì)如蛋黃或大豆中獲得也可以通過合成得到。它們既可單獨(dú)使用也可以混合物形式使用。使用量通常為每1份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的1/20-20份(重量計(jì))，最好為1/4-3份(按重量)。
在上述方法中，可以將磷脂和膽甾醇、α-生育酚、聯(lián)十六烷基磷酸酯、硬脂酰胺或其類似物結(jié)合起來使用，這些化合物的使用量通常不超過每1份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的2份(重量計(jì))，最好1/10-1/2份(重量計(jì))。
由此產(chǎn)生的本發(fā)明的疫苗通常是這樣一種形式即通式(Ⅰ)化合物或其鹽和磷脂形成顆粒而將抗原引入其膜內(nèi)(所謂病毒顆粒)。病毒顆粒的平均粒徑和表面的
一電位可通過改變通式(Ⅰ)化合物或其鹽與磷脂的比例來控制。通常病毒顆粒的平均粒徑最好為40-300nm而其
一電位最好為-5--70mv。
本發(fā)明疫苗通常是通過皮下投藥，在一個(gè)季節(jié)中可以一次或分幾次施用350-12μg(用抗原蛋白表示)疫苗。
本發(fā)明的胞壁酰二肽衍生物具有杰出的輔藥活性并且是病毒顆粒疫苗優(yōu)良的成分。
本發(fā)明疫苗具有等于或高于常用的病毒顆粒疫苗的抗體產(chǎn)生能力而且在變紅和發(fā)熱方面其安全性很高。另外，本發(fā)明的疫苗在儲(chǔ)藏期具有很高的穩(wěn)定性它可以以冷凍形式或凍干形式保存。
下列實(shí)例用來進(jìn)一步說明本發(fā)明，然而并不意味著限制本發(fā)明。
例1將1.0g[6-0-(2-十四(烷)基十六酰)-N-乙酰胞壁酰基]-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺溶解于100ml的四氫呋喃中。將0.3gN，N-二琥珀酰亞氨基碳酸酯和0.15ml三乙胺加入該溶液中并將其在室溫下攪拌1.5小時(shí)。然后加入0.22ml128%的氫氧化銨水溶液再于室溫下攪拌30分鐘。
降壓下將該反應(yīng)液濃縮，對(duì)其殘余物進(jìn)行硅膠柱色譜。用氯仿/甲醇洗脫純化后緊接著凍干除去水/二惡烷，獲得0.44g[6-0-(2-十四(烷)基十六酰)-N-乙酰胞壁酰基]-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺。
熔點(diǎn)155-165℃分子量926(C49H91N5O11)FAB Mas m/z 927(M+1)1H-NMR(DMSO-d6)δ0.85(6H，t，J＝7Hz)，1.2-1.3，1.39，1.50(58H，m)，1.72(1H，m)，1.80(3H，s)，1.93(1H，m)，2.08(2H，t，J＝8Hz)，2.30(1H，m)，3.28(1H，t，J＝9Hz)，3.46(1H，t，J＝9Hz)，3.67(1H，m)，3.81(1H，m)，4.02(1H，d-d，J＝12Hz，5Hz)，4.12(1H，d-q，J＝9Hz，5Hz)，4.31(2H，m)，4.34(1H，d，J＝10Hz)，4.44和4.98(1H)，5.43(1H，d，J＝4Hz)，6.67(1H，d，J＝4Hz)，6.74(1H，s)，7.01(1H，s)，7.27(1H，s)，7.30(1H，s)，7.65(1H，d，J＝7Hz)，8.08(1H，d，J＝8Hz)，8.17(1H，d，J＝8Hz)。
例2將1.0g[6-0-(2-十四(烷)基十六酰)-N-乙酰胞壁酰基]-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺溶解于100ml的四氫呋喃中。往該溶液中加入0.3gN，N-二琥珀酰亞氨基碳酸酯和0.15ml的三乙胺。在室溫下將它們攪拌1.5小時(shí)。再往所獲溶液添加0.2ml40%的甲胺水溶液再于室溫下攪拌30分鐘。
降壓下濃縮該反應(yīng)溶液，對(duì)其殘余物進(jìn)行硅膠柱色譜。用氯仿/甲醇洗脫純化后，緊接著冷凍干燥除去水/二惡烷，獲得0.5g的[6-0-(2-十四(烷)基十六酰)-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-N-甲基-D-谷氨酰胺。
熔點(diǎn)95-100℃
分子量939(C50H93N5O11)FAB Mas m/z 940(M+1)1H-NMR(DMSO-d6)δ0.85(6H，t，J＝7Hz)，1.2-1.3，1.39，1.50(58H，m)，1.73(1H，m)，1.79(3H，s)，1.93(1H，m)，2.07(2H，t，J＝8Hz)，2.30(1H，m)，2.55(3H，d，J＝5Hz)，3.26(1H，t，J＝9Hz)，3.46(1H，t，J＝9Hz)，3.68(1H，m)，3.82(1H，m)，4.03(1H，d-d，J＝12Hz，5Hz)，4.12(1H，d-q，J＝9Hz，5Hz)，4.30(2H，m)，4.36(1H，d，J＝10Hz)，4.98(1H，t，J＝3.5Hz)，5.43(1H，d，J＝7Hz)，6.67(1H，d，J＝4Hz)，7.01(1H，s)，7.31(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7Hz)，7.71(1H，d，J＝5Hz)，8.07(1H，d，J＝8Hz)，8.17(1H，d，J＝8Hz)。
例3按與例2相同的方法制備[6-0-(2-十四(烷)基十六酰)-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-N-乙基-D-谷氨酰胺。
分子量953(C51H95N5O11)FAB Mas m/z 954(M+1)1H-NMR(DMSO-d6)δ0.85(6H，t，J＝7Hz)，0.99(3H，t，J＝7Hz)，1.2-1.3，1.39，1.50(58H，m)，1.71(1H，m)，1.79(3H，9)，1.93(1H，m)，2.06(2H，t，J＝8Hz)，2.29(1H，m)，3.04(2H，d-q，J＝3Hz)5Hz，7Hz)，3.28(1H，t，J＝9Hz)，3.45(1H，t，J＝9Hz)，3.68(1H，m)，3.81(1H，m)，4.03(1H，d-d，J＝12Hz，5Hz)，4.12(1H，d-q，J＝9Hz，5Hz)，4.29(2H，m)，4.35(1H，d，J＝10Hz)，4.97(1H，t，J＝3.5Hz)，5.44(1H，d，J＝7Hz)，6.68(1H，d，J＝4Hz)，7.01(1H，s)，7.30(1H，s)，7.64(1H，d，J＝7Hz)，7.76(1H，d，J＝5.5Hz)，8.07(1H，d，J＝8Hz)，8.16(1H，d，J＝8Hz)。
例4制備流行性感冒HANA抗原由感染流行性感冒A/yamagate/120/86菌株的尿囊體液通過高速離心處理(23000rpm，90分鐘)，低速離心處理(6000rpm，60分鐘)和蔗糖密度一梯度離心(30000rpm，3h)獲得純化病毒。然后往病毒溶液添加TritonX-100，其用量應(yīng)使TritonX-100的濃度為1%。徹底將其攪拌以溶解病毒然后通過蔗糖密度一梯度平衡法獲得純化的HANA抗原溶液。
制備病毒顆粒疫苗由上述獲得的純化HANA抗原溶液，按下列方式制備每種都含有表1所列成分的4種疫苗樣品將各個(gè)成分混合在一起然后往該混合物中添加辛基葡糖苷，其用量為使其濃度為4%以溶解各成分。然后按常規(guī)方法用含5%蔗糖的磷酸鹽緩沖溶液(PH7.4)進(jìn)行滲析。將由此獲得的每個(gè)樣品的HANA抗原濃度調(diào)節(jié)至70μg/ml。在所獲得的樣品中觀察病毒顆粒的形成過程。將本發(fā)明1號(hào)和2號(hào)樣品中的病毒顆粒示于圖1和圖2中。
將本發(fā)明的病毒顆粒疫苗(1號(hào)或2號(hào))和對(duì)照疫苗稀釋至前疫苗溶液濃度的1/15，而后經(jīng)皮下接種到一組10頭幾內(nèi)亞豬的每只豬背部中，用量為0.5ml。接種后的三周以相同劑量再接種一次。3周和5周后，由幾內(nèi)亞豬采血并按WHO法進(jìn)行血球凝集素抑制試驗(yàn)以測(cè)定其抗體生成能力。結(jié)果列于表1。
＊對(duì)照化合物6-0-(2-十四烷基十六酰)-N-乙酰胞壁酰基-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺。
顯紅反應(yīng)試驗(yàn)在顯紅反應(yīng)試驗(yàn)中，經(jīng)皮下向5只兔子中的每只兔子的背部接種0.5ml的樣品，每天測(cè)量每只兔的顯紅表面區(qū)，計(jì)算5只兔子的總面積，而后計(jì)算兔子的平均顯紅表面積。結(jié)果列于表2。
根據(jù)上表，很顯然由本發(fā)明疫苗引起的顯紅程度低于由對(duì)照疫苗引起的顯紅程度。
發(fā)熱試驗(yàn)在發(fā)熱試驗(yàn)中，按照生物制品標(biāo)準(zhǔn)通用法向兔子引入各種樣品1ml。當(dāng)3只兔由于反應(yīng)使總熱度提高1.3℃或更低時(shí)，則發(fā)熱試驗(yàn)結(jié)果表示為陰性，而當(dāng)提高2.5℃或高于此值時(shí)，結(jié)果則顯示為陽性。結(jié)果列于表3。
根據(jù)上表，很顯然由本發(fā)明疫苗引起的發(fā)熱升高程度低于由對(duì)照疫苗所引起的發(fā)熱升高程度。
權(quán)利要求
1.具有下列通式(Ⅰ)的胞壁酰二肽衍生物及其鹽
(1)式中R代表具有2-6個(gè)碳原子的?；?，X代表L-丙氨酰殘基、L-絲氨酸殘基、L-纈氨酸殘基或甘氨酸殘基，A代表具有10-60個(gè)碳原子的脂肪酸殘基，以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子、取代的或未取代的低級(jí)烷基、取代的或未取代的環(huán)烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、氨基或低級(jí)烷氨基或R1和R2與和它們直接相連的氮原子一起形成環(huán)氨基，該環(huán)氨基可以有一個(gè)或多個(gè)選自氧、硫和氮原子的雜原子作為成環(huán)原子，并可被取代或不被取代。
2.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中A表示具有20-40個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸殘基。
3.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中X表示L-丙氨酸殘基。
4.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中R1和R2獨(dú)立地代表氫原子或低級(jí)烷基。
5.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中該低級(jí)烷基具有1-6個(gè)碳原子。
6.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中該環(huán)烷基具有一個(gè)5-7節(jié)環(huán)。
7.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中該環(huán)氨基具有一個(gè)5-7節(jié)環(huán)。
8.權(quán)利要求1中的胞壁酰二肽衍生物，其中R表示具有2-6個(gè)碳原子的?；琗表示L-丙氨酸殘基，A表示具有20-40個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸殘基以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子或低級(jí)烷基。
9.一種胞壁酰二肽衍生物，它選自[6-0-(2-十四烷基十六?；?-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺、[6-0-(2-十四烷基十六?；?-N-乙酰胞壁酰基]-L-丙氨酰-N-甲基-D-谷氨?；蚚6-0-(2-十四烷基十六酰基)-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-N-乙基-D-谷氨酰胺。
10.一種流行性感冒疫苗，它由通式(Ⅰ)化合物或其鹽和流行性感冒病毒抗原的復(fù)合物組成，所述通式(Ⅰ)為式中R表示具有2-6個(gè)碳原子的?；?，X表示L-丙氨酸殘基、L-絲氨酸殘基L-纈氨酸殘基或甘氨酸殘基，A表示具有10-60個(gè)碳原子的脂肪酸殘基以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子，取代的或未取代的低級(jí)烷基、取代的或未取代的環(huán)烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳烷基、羥基、低級(jí)烷氧基、氨基或低級(jí)烷氨基或R1和R2與和它們直接相連的氮原子一起形成環(huán)氨基，該環(huán)氨基可有一個(gè)或多個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子作為成環(huán)原子并可被取代或不被取代。
11.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中A表示具有20-40個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸殘基。
12.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中X表示L-丙氨酸殘基。
13.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中R1和R2獨(dú)立地代表氫原子或低級(jí)烷基。
14.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中R表示具有2-6個(gè)碳原子的酰基，X表示L-丙氨酸殘基，A表示具有20-40個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸殘基以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子或低級(jí)烷基。
15.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中流行性感冒病毒的抗原是流行性感冒HANA抗原。
16.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中該抗原的使用量為每份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的1/300-10份(重量計(jì))。
17.權(quán)利要求10中的流行性感冒疫苗，其中通式(Ⅰ)化合物或其鹽和磷脂生成封閉的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)而流行性感冒病毒被引入其膜內(nèi)。
18.權(quán)利要求17中的流行性感冒疫苗，其中疫苗是病毒顆粒疫苗。
19.權(quán)利要求17中的流行性感冒疫苗，其中R表示具有2-6個(gè)碳原子的酰基，X表示L-丙氨酸殘基，A表示具有20-40個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸殘基以及R1和R2獨(dú)立地代表氫原子或低級(jí)烷基。
20.權(quán)利要求17中的流行性感冒疫苗，其中流行性感冒病毒的抗原是流行性感冒HANA抗原。
21.權(quán)利要求17中的流行性感冒疫苗，其中該類脂是磷脂且其使用量為每份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的1/20-20份(重量計(jì))。
22.權(quán)利要求21中的流行性感冒疫苗，其中該類脂的使用量為每份通式(Ⅰ)化合物或其鹽重量的1/4-3份(重量計(jì))。
全文摘要
本發(fā)明提供了新型胞壁酰二肽衍生物如[6-O-(2-十四烷基十六酰基)-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺和[6-O-(2-十四烷基十六?；?-N-乙酰胞壁?；鵠-L-丙氨酰-N-甲基-D-谷氨酰胺。胞壁酰二肽衍生物作為輔藥或顆粒病毒疫苗的組成成分是優(yōu)良的化合物。流行性感冒疫苗由該胞壁酰二肽衍生物和流行性感冒疫苗抗原的復(fù)合物組成。所述流行性感冒疫苗具有優(yōu)良的抗體產(chǎn)生能力和安全性。
文檔編號(hào)A61K38/00GK1062146SQ91111449
公開日1992年6月24日 申請(qǐng)日期1991年10月30日 優(yōu)先權(quán)日1990年10月30日
發(fā)明者沖正信, 柘植英哉, 大隈邦夫, 岡徹也 申請(qǐng)人:第一制藥株式會(huì)社, 化學(xué)及血清療法研究所