專利名稱：三氟甲基酮衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的三氟甲基酮衍生物。
具體地講，本發(fā)明涉及具有抑制人體白細(xì)胞彈性蛋白酶活性的新的三氟甲基酮衍生物及其可藥用鹽、它們的制備方法，以及含有這類化合物的藥用組合物及其應(yīng)用方法。
下式(Ⅰ)代表本發(fā)明的新的三氟甲基酮衍生物
式中R1是帶有1或2個(gè)取代基的低級(jí)烷基，所述取代基選自羧基、酯化羧基和二低級(jí)烷基氨甲?；交?低級(jí))烷基，其苯基部分可帶有鹵素、硝基或氨基，而其烷基部分可帶有羧基或酯化羧基;鹵代苯基;嗎啉代或嗎啉代(低級(jí))烷基，R2和R3各自為低級(jí)烷基，X是-或-NH-，Y是
按照本發(fā)明，采用下述反應(yīng)式示出各種方法均可制得所述新的三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其鹽。
方法1
在上述各式中，R1a是一或二-酯化羧基(低級(jí))烷基，R1b是一或二-羧基(低級(jí))烷基，R1c是低級(jí)亞烷基，R1d是低級(jí)烷基，R1至R3、x和y各自的定義如前文所述。
新的式(Ⅰ)三氟甲基酮衍生物的可藥用鹽可以包括與無(wú)機(jī)或有機(jī)堿形成的鹽，以及與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸形成的酸加成鹽，所述與堿形成的鹽的例子有堿金屬鹽(如鈉鹽、鉀鹽、等)、堿土金屬鹽(如鈣鹽、等)、銨鹽、乙醇胺鹽、三乙胺鹽、二環(huán)己基胺鹽等等，所述酸加成鹽的例子有甲磺酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等。
下文詳細(xì)解釋屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的、前文所述的各種定義的優(yōu)選實(shí)例及有關(guān)說(shuō)明。
術(shù)語(yǔ)“低級(jí)”除另有指明外意指1-6個(gè)碳原子。
“鹵素”的優(yōu)選實(shí)例是氧、氯、溴和碘。
“低級(jí)烷基”的優(yōu)選實(shí)例可以包括含有1-6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷烴殘基，例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基等等，其中更加優(yōu)選的是含1-4個(gè)碳原子的烷基。
“酯化羧基”的優(yōu)選實(shí)例可以包括烷基酯，即，烷氧羰基，例如，低級(jí)烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基等);苯基(低級(jí))烷基酯，即，苯基(低級(jí))烷氧羰基，例如，芐氧羰基;和苯甲酰基(低級(jí))烷基酯，即，苯甲酰基(低級(jí))烷氧羰基，例如，苯甲?；籽豸驶鹊?。
“低級(jí)亞烷基”的優(yōu)選實(shí)例可以包括亞甲基、亞乙基、亞丙基、異亞丙基、等等。
“二-低級(jí)烷基氨甲?；钡膬?yōu)選實(shí)例可以包括N，N-二甲基氨甲?；?、N，N-二乙基氨甲?；鹊?。
下文詳細(xì)解釋了制備本發(fā)明目標(biāo)化合物(Ⅰ)或其鹽的方法。
在下文對(duì)方法1-5的解釋中，化合物(Ⅰ)，(Ⅰa)至(Ⅰf)，以及(Ⅱ)至(Ⅴ)的鹽可以包括前文描述三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)的可藥用鹽時(shí)所例舉的那些鹽。
(1)方法1化合物(Ⅱ)+化合物(Ⅲ)→化合物(Ⅰ)由化合物(Ⅱ)或其鹽與化合物(Ⅲ)或其鹽反應(yīng)可以制得化合物(Ⅰ)或其鹽。
該方法的反應(yīng)可按如下方式進(jìn)行。
即，第一種方式是，在第一步反應(yīng)中，通常以常規(guī)方法活化化合物(Ⅱ)或其鹽中的羧基，例如，制成其酰鹵、疊氮化物、酸酐或混合酸酐、活化酯、等等。再使其與化合物(Ⅲ)反應(yīng)，得到化合物(Ⅰ)。第二種方式是在下述常規(guī)縮合劑存在下使化合物(Ⅱ)或其鹽與化合物(Ⅲ)或其鹽直接反應(yīng)，所述縮合劑的例子是N，N-二環(huán)己基碳化二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺等等。
該反應(yīng)優(yōu)選在下述溶劑中，在冰冷卻至環(huán)境溫度的條件下進(jìn)行，所述溶劑的例子有N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二噁烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、水等等，而在縮合劑存在下的反應(yīng)通常在無(wú)水(但并不嚴(yán)格)條件下進(jìn)行。
(2)方法2化合物(Ⅳ)→化合物(Ⅰ)將化合物(Ⅳ)或其鹽氧化可以制得化合物(Ⅰ)及其鹽。
通過(guò)常規(guī)方法，使用可以將羥甲基轉(zhuǎn)化為羰基的氧化劑即可進(jìn)行該氧化反應(yīng)，所述氧化劑的例子有高錳酸鉀、鉻類化合物(如鉻酸、鉻酸鈉、重鉻酸、重鉻酸鈉、氯鉻酸吡啶鎓、重鉻酸吡啶鎓等等)、Swern試劑(二甲亞砜和草酰氯)、瓊氏試劑等等。
該反應(yīng)通常在常用溶劑中進(jìn)行，所述溶劑的例子有水、丙酮、二噁烷、二甲基甲酰胺、吡啶或不會(huì)給該反應(yīng)帶來(lái)有害影響的任何其他有機(jī)溶劑，或者是這些溶劑的混合物。
該反應(yīng)優(yōu)選在稍溫和的條件下進(jìn)行，例如，在冷卻、室溫或溫?zé)嵯逻M(jìn)行。
(3)方法3化合物(Ⅰa)→化合物(Ⅰb)使化合物(Ⅰa)或其鹽經(jīng)去酯化反應(yīng)，即可制得式(Ⅰb)化合物。
通過(guò)諸如水解、還原等常規(guī)方法進(jìn)行該去酯化反應(yīng)，下文詳細(xì)解釋這些方法
1)水解優(yōu)選在酸或堿存在下進(jìn)行水解。
適宜的酸包括無(wú)機(jī)酸(如鹽酸、氫溴酸、硫酸、等)，有機(jī)酸(如甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸等)等等。
適宜的堿包括無(wú)機(jī)堿，例如，堿或堿土金屬氫氧化物或相應(yīng)的碳酸鹽或碳酸氫鹽(例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈣等)、氫氧化銨等等;有機(jī)堿，例如，上述金屬的醇鹽或酚鹽(如乙醇鈉、甲醇鈉、等)，胺，例如，一，二或三烷基胺(如甲胺、乙胺、N，N-二甲基-1，3-丙二胺、三甲胺、三乙胺等)等等。
該水解優(yōu)選在比較溫和的條件(如冷卻或溫?zé)?下，在不會(huì)對(duì)該反應(yīng)產(chǎn)生有害影響的溶劑中進(jìn)行，所述溶劑的例子有水、親水性溶劑例如醇(如甲醇、乙醇、丙酮等)、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺等等。呈液體狀態(tài)的上述酸和堿也可用作溶劑。
2)還原按慣用方法進(jìn)行還原，其中包括化學(xué)還原和催化還原。
用于化學(xué)還原的適宜還原劑是金屬(如錫、鋅、鐵等)、或者是這類金屬和/或金屬化合物(如氯化鉻、乙酸鉻等)與下述有機(jī)或無(wú)機(jī)酸的組合，所述酸的例子有甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、對(duì)甲苯磺酸、鹽酸等等。
用于催化還原的適宜催化劑是慣用的催化劑，例如，鉑催化劑(如鉑片、海綿狀鉑、鉑黑、膠體鉑、氧化鉑等)、鈀催化劑(如海綿狀鈀、鈀黑、氧化鈀、鈀-炭、膠體鈀等)等等。
通常在諸如水、醇(如甲醇、乙醇等)等之類的溶劑中進(jìn)行還原。
最好在稍溫和的條件(如冷卻、室溫或溫?zé)?下進(jìn)行還原。
4).方法4化合物(Ⅰc)→化合物(Ⅰd)將化合物(Ⅰc)或其鹽還原可以制得化合物(Ⅰd)或其鹽。
按常規(guī)方法進(jìn)行還原，其中包括化學(xué)還原和催化還原。
適宜的還原劑可以包括在方法3中所例舉的那些還原劑。
通常在溶劑，例如，水、醇(如甲醇、乙醇等)等中進(jìn)行還原。
最好在比較溫和的條件(如冷卻，室溫或溫?zé)?下進(jìn)行還原。
5)方法5化合物(Ⅰe)+化合物(Ⅴ)→化合物(Ⅰf)將化合物(Ⅰe)或其鹽與化合物(Ⅴ)或其鹽反應(yīng)，可以制得化合物(Ⅰf)及其鹽。
按照基本上與方法1相同的方法進(jìn)行該反應(yīng)。
按照常規(guī)的方法，即，用酸或堿處理化合物(Ⅰ)可以制得三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)的可藥用鹽。酸或堿的適宜實(shí)例可以包括在解釋方法3的“水解”時(shí)所例舉的那些酸或堿。
起始化合物(Ⅱ)至(Ⅴ)各自包括新化合物，它們可采用下文所述制備例中的方法以及與其類似方法制得。
目標(biāo)化合物(Ⅰ)(包括化合物(Ⅰa至(Ⅰf))及起始化合物(Ⅱ)、和(Ⅳ)包括由于不對(duì)稱碳原子而形成的一個(gè)或多個(gè)異構(gòu)體，并且，所有這些異構(gòu)體均屬于本發(fā)明的范疇。
按照本發(fā)明，由于在所述化合物的手性中心(在下文式子中標(biāo)有△)有R和S構(gòu)型，所以可得到非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，并且，也可以得到光學(xué)純的化合物。
應(yīng)該注意到，在含水和/或有機(jī)溶液中，所說(shuō)光學(xué)純化合物變?yōu)樗龇菍?duì)映異構(gòu)體的混合物。
此外，還應(yīng)注意到，本發(fā)明的目標(biāo)化合物(Ⅰ)在含水溶液中形成成水合物，后者也屬于本發(fā)明的范疇。
三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其可藥用鹽具有抑制人類白細(xì)胞彈性蛋白酶的活性，并可作為人類白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制劑用于治療或預(yù)防退化性疾病，例如，肺氣腫、粥樣動(dòng)脈硬化、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)硬化、骨關(guān)節(jié)病、牛皮癬、胰腺炎、牙周病、肺纖維化、囊纖維化、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、彌散性全毛細(xì)支氣管炎(diffuse panbronchioli-tis)、呼吸道損傷、老年性呼吸窘迫綜合癥等等，并且，還可用于治療或防止氣喘、移植排斥、腎炎、水皰病、彌散性血管內(nèi)凝血、休克、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、克隆病、局部缺血-復(fù)注損傷(ischemia-reperfusioninjury)、慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纖維細(xì)胞增生(眼內(nèi)凝血、燒傷、機(jī)械和化學(xué)操作、角膜-結(jié)膜炎等)，和膿毒病。
為了說(shuō)明三氟甲基酮衍生物(Ⅰ)及其可藥用鹽的有用性，下文示出了它們的藥理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
實(shí)驗(yàn)1.蛋白酶抑制測(cè)試(體外)
(1)方法.
在整個(gè)測(cè)試過(guò)程中使用的緩沖液是含有1.5M NaCl，pH7.5的0.1M HEPES(4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸)。將25微升2mM甲氧基琥珀?；?(丙)2-脯-纈-對(duì)硝基N-酰苯胺(用緩沖液稀釋100mM二甲亞砜溶液)和50μl樣品(將10μl在有機(jī)溶劑中的樣品用緩沖液稀釋5-倍)在96孔微量滴定板中混合。通過(guò)微量滴定板讀數(shù)器(Corona Electric Co.，Ibaraki，Japan)測(cè)定該混合物在波長(zhǎng)為415nm處的吸收。測(cè)定后，加入25μl濃度為6μg/ml人類唾液彈性蛋白酶(HSE)，將該混合物在室溫下放置30分鐘。然后測(cè)定在415nm處的吸收。按照100×(1-“r”抑制劑/“r”無(wú)抑制劑)計(jì)算藥物的百分抑制率，其中，“r”是保溫30分鐘后的吸收減去在加入酶之前的吸收。按類似的方法，采用N-琥珀酰基-(丙)3-對(duì)硝基苯胺測(cè)定抑制劑對(duì)豬胰彈性蛋白酶(Ⅳ型、最終濃度5μg/ml)的抑制作用。HSE是從Elastin Products company Inc.，MO，U.S.A.得到的。所有的其他底物和蛋白酶購(gòu)自Sigma Chemical Co.。
對(duì)幾種血液蛋白酶活性的抑制作用IC50(M)受試化合物 人類唾液彈 豬胰彈性(實(shí)施例號(hào)) 性蛋白酶 蛋白酶1 4.5×10-74.4×10-63 9.8×10-78.7×10-64 1.4×10-62.9×10-65 3.0×10-75.1×10-66 4.3×10-76.9×10-67 3.2×10-73.8×10-68 8.7×10-71.6×10-59 8.7×10-79.5×10-610 8.0×10-63.1×10-413 7.2×10-73.3×10-615 6.1×10-72.0×10-616 7.1×10-63.0×10-517 1.1×10-63.4×10-618 6.1×10-73.8×10-619 6.8×10-73.0×10-620 8.9×10-72.4×10-621 1.2×10-63.7×10-622 6.8×10-74.9×10-623 8.1×10-72.4×10-624 1.4×10-63.8×10-627 2.4×10-61.6×10-529 2.4×10-61.9×10-5
實(shí)驗(yàn)2.對(duì)彈性蛋白酶誘發(fā)的肺損傷測(cè)定生活性(1)方法采用經(jīng)戊巴比妥麻醉的倉(cāng)鼠。在倉(cāng)鼠的腹面頸部切開(kāi)一個(gè)小口，用帶27號(hào)針頭的1-ml注射器經(jīng)該切口由氣管滴注鹽水或含人類唾液彈性蛋白酶的鹽水。3小時(shí)后，用CO2窒息法將動(dòng)物處死，再次暴露每只動(dòng)物的氣管。用2.5ml等份鹽水灌洗肺臟，然后排出鹽水，由每只動(dòng)物得到最后體積約為1.5ml的支氣管肺泡洗出液(BAL)。
離心收集BAL液中的細(xì)胞，然后用蒸餾水稀釋使之破裂，用分光光度法在541nm處測(cè)定血紅蛋白含量。
將受試藥物溶解在鹽水或甲基纖維素中，在滴注彈性蛋白酶前5分鐘，按照與滴注彈性蛋白酶相同的方法給氣管內(nèi)滴注受試藥物。
(2)結(jié)果對(duì)彈性蛋白酶誘發(fā)的肺出血的抑制作用受試化合物 5分鐘(實(shí)施例號(hào)) 預(yù)劑量出血 %抑制 ED50(μg/位點(diǎn)) (OD541nm) (μg/位點(diǎn))正常 0.6449±0.173＊＊＊-對(duì)照 14.66±1.68 -13 1 11.63±1.99 21.6 3.010 4.217±1.02＊＊74.5100 0.6384±0.222＊＊＊100.0
正常 0.8352±0.423＊＊＊-對(duì)照 12.89±1.4419 1 11.59±1.40 10.810 1.663±0.690＊＊＊93.1 2.4100 0.2141±0.020＊＊＊105.2正常 0.8352±0.423＊＊＊-對(duì)照 12.89±1.44 -20 1 10.94±1.35 16.110 2.522±0.803＊＊＊86.0 2.5100 0.2680±0.050＊＊＊104.7正常 0.6449±0.173＊＊＊-對(duì)照 14.66±1.6821 1 12.76±1.11 13.610 5.372±2.06＊＊66.3 4.5100 0.6476±0.129＊＊＊100.0正常 0.9424±0.403＊＊＊-對(duì)照 11.05±1.40 -23 1 9.435±0.941 16.010 3.412±1.31＊＊75.6 3.2100 0.7258±0.303＊＊＊102.1正常 0.3203±0.159＊＊-對(duì)照 14.11±1.80 -27 1 10.68±1.25 24.810 4.878±0.917＊＊66.9 3.7100 0.3451±0.084＊＊＊99.8正常 0.3199±0.159＊＊＊-對(duì)照 14.11±1.80 -29 1 12.05±1.95 14.910 8.155±1.76＊43.2 17.9100 4.545±1.49＊＊69.4＊P<0.05，＊＊P<0.01，＊＊＊P<0.001(“學(xué)生”t檢驗(yàn))
實(shí)驗(yàn)3對(duì)由人類唾液彈性蛋白酶誘發(fā)的小鼠爪水腫的作用(1)材料和方法由Japan Clear Inc，得到7-8周齡的雄性C57BL小鼠。
人類唾液彈性蛋白酶(HSE)購(gòu)自Elastin Products Company，Inc，。經(jīng)皮下給予受試藥物，15分鐘后，按照20μg/位點(diǎn)的劑量將HSE注入右后爪足底，并且在左后爪足底注入鹽水作為對(duì)照。注入HSE兩小時(shí)后，用帶刻度的厚度測(cè)量?jī)x(dial thickness gage)測(cè)量爪的水腫程度，計(jì)算左右后爪足底之間的厚度差別。
(2)結(jié)果對(duì)由彈性蛋白酶誘發(fā)的小鼠爪水腫的作用用實(shí)施例19的 n 足底厚度 對(duì)爪水腫化合物處理 (×10-2mm) 的%抑制(mg/Kg)對(duì)照 5 46.8±5.761 5 43.8±5.67 6.410 5 37.0±13.41 20.9100 5 27.0±4.66＊42.3＊相對(duì)于對(duì)照組，P<0.05(“學(xué)生”t檢驗(yàn))實(shí)驗(yàn)4對(duì)由實(shí)驗(yàn)誘發(fā)的倉(cāng)鼠肺氣腫的作用(1)材料與方法從Japan SLC Inc.得到體重約為120g的雄性Golden Syrian倉(cāng)鼠。
豬胰彈性蛋白酶(PPE)購(gòu)自Elastin Products Company，Inc.。Dialferin購(gòu)自Japan ROche INc.。
用戊巴比妥通過(guò)腹膜內(nèi)給藥將倉(cāng)鼠麻醉。將實(shí)施例19化合物溶解在鹽水中。將先有技術(shù)化合物A和B懸浮于0.5%甲基纖維素中。通過(guò)口腔經(jīng)氣管滴入藥物，5分鐘后，以0.2ml鹽水滴注液形式給予PPE，劑量為100μg/位點(diǎn)。在滴入PPE三周后，用戊巴比妥將倉(cāng)鼠麻醉。采用整體、恒容、可變壓力的體積描記器測(cè)量體積，研究仰臥倉(cāng)鼠的呼吸力學(xué)。采用注水食管測(cè)量胸膜壓。經(jīng)腹膜內(nèi)給予Dialferin，抑制肺葉自發(fā)性呼吸膨脹，使肺壓差(PL)達(dá)到30cmH2O，然后緩慢減壓使PL達(dá)0cmH2O，再輕輕地抽氣，使PL達(dá)-20cmH2O，由此得到準(zhǔn)靜態(tài)減壓壓力-體積(P-V)曲線。準(zhǔn)靜態(tài)肺柔量(Cst)的定義是在中間體積的范圍內(nèi)減壓P-V曲線陡斜部分的斜率。肺活量的定義為肺體積在TLC25(PL＝25cmH2O時(shí)的體積)和RV-20(PL-20cmH2O時(shí)的體積)之間的差值。
(2)結(jié)果以與劑量相關(guān)的方法，用實(shí)施例19化合物預(yù)處理防止了PPE誘發(fā)的肺力學(xué)增加，如下表所示。根據(jù)Cst和VC值，實(shí)施例19化合物的效力優(yōu)于先有技術(shù)化合物A和B。
對(duì)由實(shí)驗(yàn)誘發(fā)的倉(cāng)鼠肺氣腫的影響處理 Cst VC(μg/位點(diǎn)) n (ml/cm H2O) (ml)實(shí)施例1正常 8 0.53±0.02＊＊＊4.9±0.1＊＊＊對(duì)照 8 1.54±0.10 7.3±0.2實(shí)施例19化合物1 8 1.39±0.05(15%) 7.0±0.1(12%)10 8 0.70±0.04(84%)＊＊＊5.8±0.1(65%)＊＊＊100 7 0.53±0.02(100%)＊＊＊5.0±0.1(97%)＊＊＊實(shí)施例2正常 8 0.51±0.02＊＊＊4.6±0.1＊＊＊對(duì)照 8 1.62±0.12 6.8±0.1先有技術(shù)化合物A100 8 1.55±0.11(7%) 6.9±0.2(-1%)1000 8 1.22±0.15(37%) 6.6±0.2(9%)實(shí)施例3正常 8 0.49±0.02＊＊4.6±0.2＊＊＊對(duì)照 6 1.18±0.21 7.0±0.2先有技術(shù)化合物B32 8 1.95±0.08(32%) 6.1±0.3(39%)＊320 8 0.74±0.05(63%)＊5.8±0.2(49%)＊＊Cst＝準(zhǔn)靜態(tài)肺柔量，VC＝肺活量(%)＝抑制＊P<0.05，＊＊P<0.01，＊＊＊P<0.001相對(duì)于對(duì)照組(“學(xué)生”t檢驗(yàn))
先有技術(shù)化合物A(日本公開(kāi)特評(píng)公告No，61-218518)
先有技術(shù)化合物B(日本公開(kāi)特評(píng)公告No，2.256657)
可以以慣用藥物劑型使用本發(fā)明的藥物組合物，例如，粉劑、細(xì)顆粒劑、顆粒劑、片劑、糖錠劑、注射劑、吸入劑、微囊劑、膠囊劑、栓劑、溶液、懸浮液、乳劑、糖漿等等。如有必要，可在所說(shuō)組合物中加入稀釋劑或崩解劑(如蔗糖、乳糖、淀粉、結(jié)晶纖維素、低-取代的羥丙基纖維素、合成硅酸鋁等)、粘合劑(如纖維素、甲基纖維素、羥丙基纖維、羥丙基甲基纖維素、聚丙吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、阿拉伯膠、聚乙二醇等)、著色劑、甜味劑、潤(rùn)滑劑(如硬脂酸鎂，等)等等。
所說(shuō)本發(fā)明組合物的劑量取決于患者的年齡、體重、狀況等等，并且，通常通過(guò)口服或吸入給藥，其日劑量按目標(biāo)化合物或其可藥用鹽計(jì)算為1mg至1g，優(yōu)選10mg至500mg，每天分1至3次服用。典型的單位劑量可以是5mg、10mg、20mg、50mg、100mg等，但這些僅為舉例說(shuō)明并且是非限定性的。
給出下述制備和實(shí)施例的目的在于說(shuō)明本發(fā)明。
在制備和實(shí)施例中，采用了下述縮寫WSCD1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺HOBTN-羥基苯并三唑DMFN，N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜制備1.
在冰浴冷卻下，將HOBT(6.76g)和WSCD(7.76g)加到N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨酸(10.86g)和L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽(12.09g)在DMF(50ml)中的溶液中。于室溫下攪拌18小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物在減壓下濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯(400ml)中，用5%檸檬酸水溶液(200ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)洗滌。將該溶液用硫酸鎂干燥，減壓蒸發(fā)，得到20.06g油狀的N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨酰基-L-脯氨酸芐基酯。
TLC(Kiesel gel 60 F254硅膠板，Merck)(除特別指明外，在下文制備及實(shí)施例中含意相同)Rf0.62(己烷∶AcOEt＝2∶1)按類似于制備1的方法制得了下述化合物。
制備24-(甲氧羰基)苯基羰基-L-纈氨酰基-L-脯氨酸芐酯，油狀物。TLC Rf0.89(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制備33(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷，m.p64-67℃，TLC Rf0.63和0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)。
制備43(R或S)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷，m.p.65-75℃，TLC Rf0.65(CHCl3∶MeOH＝10∶1)，[α]22D-56.23°(C＝0.14，MeOH)。
制備53(R或S)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷。
mp70-80℃TLC Rf0.65(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-46.59°(C＝0.165，MeOH)制備63(R或S)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷mp80-90℃TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-27.59°(C＝0.165，MeOH)
制備7.
3(R或S)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷mp68-85℃TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-42.63°(C＝0.175，MeOH)制備8將N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨?；?L-脯氨酸芐酯(20.0g)溶解在冰浴冷卻下的4N氯化氫-二噁烷(30ml)溶液中。于室溫下攪拌1小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物在減壓下蒸發(fā)。用乙醚將殘余物研碎，得到L-纈氨?；?L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽(14.56g)。
mp66-69℃TLC Rf0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備9在10%鈀-炭(1.0g)存在下，于3個(gè)大氣壓的氫壓下，將N-4-(甲氧羰基)苯基羰基-L-纈氨?；?L-脯氨酸芐酯(18.53g)在甲醇(150ml)中的溶液在室溫下氫化1.5小時(shí)。濾除催化劑，減壓下蒸發(fā)濾液，得到4-(甲氧基羰基)苯基羰基-L-纈氨?；?L-脯氨酸(14.20g)。
mp68-71℃TLC Rf0.27(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制備10在-70℃下，在草酰氯(0.82ml)的二氯甲烷(5ml)溶液中依次加入二甲亞砜(1.34ml)和3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷(2.5g)的二氯甲烷(10ml)溶液。將該混合物在-40℃攪拌1小時(shí)后，加入三乙胺(2.63ml)。將該混合物在同一溫度下再攪拌30分鐘，依次用0.5N鹽酸(15ml)和5%碳酸氫鈉水溶液(15ml)洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)層，減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠(50g)柱層析(氯仿∶甲醇＝50∶1)純化，得到3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(2.18g)。
mp67-70℃TLC Rf0.51(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備11在冰浴冷卻下，向3(RS)-[[4-(4-甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(2.1g)的甲醇(40ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(15ml)。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)后，蒸掉甲醇。用乙醚(30ml)洗滌濃縮液，然后用1N鹽酸將其酸化至pH2。用乙酸乙酯(20ml)提取該水溶液。用鹽水(10ml)洗滌提取液，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得到3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(1.94g)。
mp215-220℃TLC Rf0.63(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶2∶1)按照類似于制備11的方法，制得了下述化合物。
制備12.
3(R或S)-[[4-(羧基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷(0.61g)mp266-269℃TLC Rf0.42(苯∶EtOAc∶AcOH＝20∶20∶1)[α]22D-49.71°(C＝0.1，MeOH)制備133(R或S)-[[4-(羧基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷mp265-268℃TLC Rf0.40(苯∶EtOAc∶AcOH＝20∶20∶1)[α]22D-64.25°(C＝0.16，MeOH)制備14于室溫下，將28%的甲醇鈉甲醇溶液(3.0ml)加到3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷鹽酸鹽(3.2g)的乙醇(30ml)溶液中。過(guò)濾除去沉淀出的氯化鈉，然后在濾液中加入(2R，3R)-L-酒石酸(2.3g)。將該混合物溫?zé)?，直到酒石酸溶解為止，過(guò)濾。將濾液在室溫下放置5小時(shí)，過(guò)濾收集沉淀出的結(jié)晶(1.94g)，并將其溶解在1N氫氧化鈉水溶液中。用乙酸乙酯(10ml)提取該溶液，將提取液與4N-氯化氫的乙酸乙酯溶液混合，除去乙酸乙酯，用異丙醚(10ml)將殘余物粉化，得到3(R或S)-氨基-1，1，1-三氟-2-(R或S)-4-甲基戊烷鹽酸鹽(1.03g)。
mp165-170℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D+11.39°(C＝0.13，MeOH)按照類似于制備14的方法，制得了下述化合物。
制備153(R或S)-氨基-1，1，1-三氟-2-(R或S)-4-甲基戊烷鹽酸鹽mp165-170℃TLC Rf0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-10.56°(C＝1.05，MeOH)制備16.
在對(duì)氨基苯甲酸甲酯(0.4g)的四氫呋喃(10ml)溶液中加入氯甲酸三氯甲酯(0.31g)，并將該混合物在室溫下放置過(guò)夜。在該溶液中加入L-纈氨酸芐酯(0.54g)，并用三乙胺將該混合物的pH調(diào)至中性。在室溫下攪拌30分鐘后，在減壓下濃縮該混合物，用乙酸乙酯(10ml)提取殘余物。用1N鹽酸(10ml)和碳酸氫鈉水溶液(10ml)洗滌提取液，濃縮至干。得到4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-纈氨酸芐酯(1.17g)。
TLCRF0.55(CHCl3∶MeOH＝10∶1，v/v)。
制備17.
按照類似于制備9的方法，由4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-纈氨酸芐酯(1g)制得了4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-纈氨酸(0.83g)。
TLC Rf0.3(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)油制備18按照類似于制備1的方法，由4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基-L-纈氨酸(0.83g)和L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽(0.65g)制得了[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酸芐酯(1.0g)。
TLC Rf0.60(CHCl3∶MeOH＝10∶1)油制備19.
按照類似于制備9的方法，由[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酸芐酯(1.0g)制得了[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨酸(0.69g)。
TLC Rf0.35(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)油制備20按照類似于制備1的方法，由[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酸(0.69g)和3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷鹽酸鹽(0.37g)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-(RS)-羥基-4-甲基戊烷(1.03g)。
TLC Rf0.45(CHCl3∶MeOH＝10∶1)油制備21.
按照類似于制備10的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷(1.0g)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.98g)。
mp90-100℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備22.
按照類似于制備11的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.3g)制得了3(RS)-[[4-(羧基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.2g)。
mp125-130℃TLC Rf0.50(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)制備23.
將N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨酸(4.35g)和三乙胺(2.13g)溶解在無(wú)水CH2Cl2(40ml)中，于-20℃下加入氯甲酸異丁酯(2.87g)。在同一溫度下攪拌30分鐘后，在-20℃加入N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯(5.37g)在無(wú)水CH2Cl2(20ml)中的溶液。將該反應(yīng)混合物在-10℃攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌4小時(shí)，減壓下蒸發(fā)反應(yīng)混合物，然后將殘余物溶解在乙酸乙酯(100ml)中，用飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml×2)洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)層，減壓蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠(50g)柱層析(CHCl3∶AcOEt＝10∶1)純化，得到2.20g油狀的N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯。
TLC Rf0.78(己烷∶AcOEt＝2∶1)制備24.
按照類似于制備8的方法，由N-(叔丁氧羰基)-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯(2.14g)制得了L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯鹽酸鹽(1.83g)。
mp162-163℃TLC Rf0.58(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
制備25.
按照類似于制備1的方法，由L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯鹽酸鹽(1.80g)和對(duì)苯二酸單甲酯(0.86g)制得了N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯(1.24g)。
mp72-76℃TLC Rf0.29(CHCl3)制備26.
按照類似于制備9的方法，由N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨酸芐酯(1.20g)制得了N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酸(0.83g)。
mp163-164℃TLC Rf0.48(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備27.
按照類似于制備1的方法，由N-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酸(0.80g)和3(RS)-氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷鹽酸鹽(385mg)制得了3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷(1.06g)。
mp76-78℃TLC Rf0.71(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備28.
按照類似于制備10的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(RS)-羥基-4-甲基戊烷(1.03g)制得了3(RS)-[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.84g)。
mp62-64℃TLC Rf0.74(CHCl3∶MeOH＝10∶1)制備29.
按照類似于制備11的方法，由3(RS)-[[4-(甲氧羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.83g)制得了3(RS)-[[4-(羧基苯基羰基)-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.76g)。
mp84-86℃TLC Rf0.15(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
實(shí)施例1.
在冰浴冷卻下，將HOBT(26mg)和WSCD(30mg)加到甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(66mg)和3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(100mg)在DMF(6ml)中的混合物中。于室溫下攪拌4小時(shí)后，將該混合物減壓濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯(30ml)中，依次用5%檸檬酸水溶液(20ml)、水(20ml)、5%碳酸氫鈉水溶液(20ml)和鹽水(20ml)洗滌。將該溶液用硫酸鎂干燥，減壓蒸發(fā)，得到3(RS)-[[4-[(芐氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(125mg)。
mp77-78℃TLC Rf0.56(CHCl3∶MeOH＝10∶1)按照類似于實(shí)施例1的方法，制得了下述化合物。
實(shí)施例2.
3(RS)-[[4-[[2-(4-嗎啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨酰-L-脯氨酰]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp98-102℃TLC Rf0.24(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例3.
3(RS)-[[4-[(3-苯甲酰基甲氧羰基)丙基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp70-73℃TLC Rf0.71(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例4.
3(RS)-[[4-[(4-嗎啉代)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp191-193℃TLC Rf0.59(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例5.
3(RS)-[[4-[(4-氯芐基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp87-89℃TLC Rf0.43(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例6.
3(RS)-[[4-[(4-硝基芐基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷
mp94-96℃TLC Rf0.57(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例7.
3(RS)-[[4-[(4-氯苯基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp71-72℃TLC Rf0.79(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例8.
3(RS)-[[4-[[(1(R)-芐氧羰基)-2-苯基]乙基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp65-67℃TLC Rf0.82(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例9.
3(RS)-[[4-[[(1(S)-芐氧羰基)-2-苯基]乙基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp108-110℃TLC Rf0.82(CHCl3∶MeOH＝10∶1)
實(shí)施例10.
3(RS)-[[4-[[1(S)，3-二(芐氧羰基)丙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp58-60℃TLC Rf0.83(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例11.
在-70℃下，在草酰氯(0.09ml)的二氯甲烷(2ml)溶液中依次加入二甲亞砜(0.15ml)和3(R或S)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2(R或S)-羥基-4-甲基戊烷(0.35g)的二氯甲烷(4ml)溶液。將該混合物在-40℃下攪拌1小時(shí)后，加入三乙胺(0.29ml)。在同一溫度下將該混合物再攪拌30分鐘，然后依次用0.5N鹽酸(15ml)和5%碳酸氫鈉水溶液(15ml)洗滌。用硫酸鎂干燥有機(jī)層，減壓下蒸發(fā)。殘余物經(jīng)硅膠(20g)柱層析(氯仿∶甲醇＝50∶1)純化，得到3(R或S)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.22g)。
mp159-161℃TLC Rf0.63(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-39.66°(C＝0.105，MeOH)按照類似于實(shí)施例11的方法，制備了下述化合物。
實(shí)施例12.
(3(R或S)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp141-143℃TLC Rf0.68(CHCl3∶MeOH＝10∶1)[α]22D-41.90°(C＝0.15，MeOH)實(shí)施例13.
在10%鈀-炭(1.0g)存在下，于室溫、3個(gè)大氣壓的氫壓下，將3(RS)-[[4-[(芐氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(70mg)在甲醇(10ml)和水(1ml)的混合物中的溶液氫化3小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑后，將濾液減壓蒸發(fā)，得到3(RS)-[[4-(羧基甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(61mg)。
mp99-103℃TLC Rf0.17(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)實(shí)施例14在冰浴冷下，將鋅粉(120mg)加到3(RS)-[[4-[(3-苯甲?；籽豸驶?丙氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(120mg)在乙酸(5ml)中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌2小時(shí)后，過(guò)濾除去鋅粉。將濾液減壓蒸發(fā)，得到3(RS)-[[4-[(3-羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(95mg)。
mp84-86℃TLC Rf0.32(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)按照類似于實(shí)施例13的方法，制得了下述化合物。
實(shí)施例15.
3(R或S)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp75-120℃TLC(RP-18WF254S(由E.Morck公司制造)Rf0.55(MeOH∶H2O＝6∶5)[α]22D-35.10°(C＝0.105，MeOH)實(shí)施例163(R或S)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp90-110℃TLC(RP-18WF254S(由E.Morck公司制造)Rf0.50(MeOH∶H2O＝6∶5)[α]22D-50.04°(C＝0.115，MeOH)
實(shí)施例173(RS)-[[4-(1(S)，3-二羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷mp74-76℃TLC Rf0.13(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)實(shí)施例18在10%鈀-炭(10mg)存在下，在4個(gè)大氣壓的氫壓下，將3(RS)-[[4-[(4-硝基芐基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(50mg)在甲醇(10ml)中的溶液氫化2小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑，將濾液減壓蒸發(fā)，得到3(RS)-[[4-[(4-氨基芐基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(46mg)。
mp90-92℃TLC Rf0.44(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)實(shí)施例19.
在室溫下，將1N氫氧化鈉水溶液(0.88ml)加到3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(0.50g)的水(10ml)溶液中。將該溶液冷凍干燥，得到原料的鈉鹽(0.52g)。
mp>230℃TLC Rf0.17(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)按照類似于實(shí)施例19的方法，制得了下述化合物。
實(shí)施例20.
3(RS)-[[4-[(3-羧基丙基)氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷mp66-69℃TLC Rf0.32(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝8∶1∶1)實(shí)施例21.
在3(RS)-[[4-[[2-(4-嗎啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(80mg)的1，4-二噁烷(1ml)溶液中加入4N氯乙氫-二噁烷溶液(0.1ml)。將該混合物在室溫下攪拌10分鐘，蒸發(fā)，得到3(RS)-[[4-[[2-(4-嗎啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷鹽酸鹽(83mg)。
mp64-65℃TLC Rf0.24(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例22.
按照類似于實(shí)施例1的方法，由3(RS)-[[4-(羧基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.20g)和甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(0.13g)制得了3(RS)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.25g)。
mp65-70℃TLC Rf0.15(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例23.
按照類似于實(shí)施例13的方法，由3(RS)-[[4-(芐氧羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.2g)制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.14g)。
mp98-128℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶H2O＝65∶25∶4)實(shí)施例24.
按照類似于實(shí)施例1的方法，由3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.08g)和二甲胺鹽酸鹽(0.012g)制得了3(RS)-[[4-(二甲氨基羰基甲基氨基羰基)苯基氨基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-2-氧代-4-甲基戊烷(0.03g)。
mp115-125℃TLC Rf0.20(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例25.
按照類似于實(shí)施例1的方法，由甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(118mg)和3(RS)-[[4-(羧基苯基羰基)-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(206mg)制得了3(RS)-[[4-[(芐氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(250mg)。
mp64-66℃TLC Rf0.81(CHCl3∶MeOH＝10∶1)白色粉末實(shí)施例26.
按照類似于實(shí)施例3的方法，由3(RS)-[(4-[(芐氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(220mg)制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(195mg)。
mp88-91℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1)
實(shí)施例27.
按照類似于實(shí)施例19的方法，制得了3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷鈉鹽(160mg)。
mp203-205℃TLC Rf0.25(CHCl3∶MeOH∶AcOH＝16∶1∶1)實(shí)施例28按照類似于實(shí)施例1的方法，由4-(2-氨基乙基)嗎啉(46mg)和3(RS)-[(4-羧基苯基羰基)-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酰基[氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(206mg)制得了3(RS)-[[4-[[2-(4-嗎啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?N-(2-二氫化茚基)甘氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(180mg)。
mp76-80℃TLC Rf0.38(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例29.
按照類似于實(shí)施例21的方法，制得了3(RS)-[[4-[[2-(4-嗎啉代)乙基]氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨酰基-N-(2-二氫化茚基)甘氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷的鹽酸鹽(170mg)。
mp96-99℃TLC Rf0.38(CHCl3∶MeOH＝10∶1)實(shí)施例30按照類似于實(shí)施例1的方法，制得了3(RS)-[[4-(乙氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。m.p.96-99℃。
實(shí)施例31.
將3(RS)-[[4-(乙氧羰基)甲基氨基羰基]苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(5.0g)溶解在二氯甲烷(60ml)、甲醇(10ml)和水(25ml)的混合物中，然后在冰浴冷卻下加入氫氧化鈉水溶液(NaOH 0.6g的水15ml溶液)。將該反應(yīng)混合物在0-10℃攪拌10分鐘后，用6N鹽酸將其調(diào)至pH9，然后用二氯甲烷(60ml)洗滌該水溶液。在該水溶液中加入氯化鈉(5g)和乙酸乙酯(60ml)然后用6N鹽酸將該混合物酸化至pH2。用鹽水(30ml)洗滌該乙酸乙酯溶液，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮至20ml體積。在室溫下，將該濃縮液滴加到異丙醚(225ml)中，濾出沉淀，干燥，得到3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷(3.24g)。
m.p.99-103℃
權(quán)利要求
1.新的下式所示三氟甲基酮衍生物及其可藥用鹽
式中R1是帶有1或2個(gè)取代基的低級(jí)烷基，所述取代基選自羧基，酯化羧基和二低級(jí)烷基氨甲酰基；苯基(低級(jí))烷基，其中苯基部分可以帶有鹵素或硝基或氨基，而烷基部分可以帶有羧基或酯化羧基；鹵代苯基；嗎啉代；或嗎啉代(低級(jí))烷基，R2和R3各自為低級(jí)烷基，X為-或-NH-，而Y為
2.按照權(quán)利要求1的新的三氟甲基酮衍生物及其可藥用鹽，其結(jié)構(gòu)如下式所示
式中R1是帶有1或2個(gè)取代基的低級(jí)烷基，所述取代基選自羧基，酯化羧基和二低級(jí)烷基氨甲酰基;苯基(低級(jí))烷基，其中苯基部分可以帶有鹵素或硝基或氨基，而烷基部分可以帶有羧基或酯化羧基;鹵代苯基;嗎啉代;或嗎啉代(低級(jí))烷基;R2和R3各自為低級(jí)烷基。
3.按照權(quán)利要求2的新的三氟甲基酮衍生物，其中R1是帶有羧基或酯化羧基的低級(jí)烷基，R2和R3各自為低級(jí)烷基。
4.按照權(quán)利要求3的新的三氟甲基酮衍生物，其中，R1是羧甲基，R2和R3各自為異丙基。
5.按照權(quán)利要求4的新的三氟甲基酮衍生物，它是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨酰基-L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。
6.按照權(quán)利要求4的新的三氟甲基酮衍生物，它是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨?；鵠氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷鈉鹽。
7.制備下式所示三氟甲基酮衍生物或其鹽的方法
其中，R1是帶有1或2個(gè)取代基的低級(jí)烷基，所述取代基選自羧基，酯化羧基和二低級(jí)烷基氨甲?；?苯基(低級(jí))烷基，其中苯基部分可以帶有鹵素或硝基或氨基，而烷基部分可以帶有羧基或酯化羧基;鹵代苯基;嗎啉代;或嗎啉代(低級(jí))烷基;R2和R3各自為低級(jí)烷基;X是-或-NH-;Y是
該方法包括，使下式化合物或其鹽與式R1-NH2化合物或其鹽反應(yīng)
或者將下式化合物或其鹽氧化
或者使下式化合物或其鹽經(jīng)歷脫酯化反應(yīng)
或者還原下式化合物或其鹽
或者使下式化合物或其鹽與式(R1d)2NH化合物或其鹽反應(yīng)
在上述化學(xué)式中，R1a是一或二-酯化羧基(低級(jí))烷基，R1c是低級(jí)亞烷基，R1d是低級(jí)烷基，R1至R3、x和y各自的定義如前文所限定。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其中，R1是帶有羧基或酯化羧基的低級(jí)烷基，R2和R3各自為低級(jí)烷基，x是一，y是
9.按照權(quán)利要求7的方法，其中，R1是羧甲基，R2和R3各自為異丙基，x是一，y是
10.按照權(quán)利要求7的方法，其中，目標(biāo)化合物是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷。
11.按照權(quán)利要求7的方法，其中，目標(biāo)化合物是3(RS)-[[4-(羧甲基氨基羰基)苯基羰基]-L-纈氨?；?L-脯氨酰基]氨基-1，1，1-三氟-4-甲基-2-氧代戊烷的鈉鹽。
12.一種藥物組合物，包括作為有效成份的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可藥用鹽以及可藥用載體或賦形劑。
13.一種人體白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制，包括作為有效成份的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可藥用鹽以及可藥用載體或賦形劑。
14.一種用于治療或預(yù)防退化性疾病的藥物組合物，所述疾病的例子有肺氣腫、粥樣動(dòng)脈硬化。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)硬化、骨關(guān)節(jié)病、牛皮癬、胰腺炎、牙周病、肺纖維化、囊纖維化、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、彌散性全毛細(xì)支氣管炎(diffuse panbronchiolitis)、呼吸道損傷、老年性呼吸道窘迫綜合癥，該組合物包括作為有效成份的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其鹽以及可藥用載體或賦形劑。
15.一種用于治療或預(yù)防移植排斥的藥物組合物，它包括作為有效成份的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其鹽以及可藥用載體或賦形劑。
16.一種用于治療或預(yù)防下述疾病的藥物組合物，所述疾病包括腎炎、膿毒病、水皰病、彌散性血管內(nèi)凝血、休克、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、克隆病、局部缺血-復(fù)注性損傷(ischemia-reperfusion injury)，慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane)(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纖維細(xì)胞增生(眼內(nèi)凝血、燒傷、機(jī)械和化學(xué)損傷、角膜-結(jié)膜炎等等)、或哮喘，該組合
17.一種在有此必要的治療對(duì)象體內(nèi)治療或預(yù)防退化性疾病的方法，所述疾病包括肺氣腫、粥樣動(dòng)脈硬化、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)硬化、骨關(guān)節(jié)病、牛皮癬、胰腺炎、牙周病、肺纖維化、囊纖維化、慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、彌散性全毛細(xì)支氣管炎、呼吸道損傷、老年性呼吸道窘迫綜合癥，該方法包括給治療對(duì)象服用有效量的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可藥用鹽。
18.一種在有此必要的治療對(duì)象體內(nèi)治療或預(yù)防移植排斥的方法，該方法包括給治療對(duì)象服用有效量的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可藥用鹽。
19.一種在有必要的治療對(duì)象體內(nèi)治療或預(yù)防下述疾病的方法，所述疾病包括腎炎、膿毒病、水皰病、彌散性血管內(nèi)凝血、休克、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、克隆病、局部缺血-復(fù)注性損傷(ischemia-reperfu-sion injury)、慢性梗阻性肺病(COPD)、早熟性膜破裂(premature rupture of the membrane)(PROM)、角膜凝血(corneal sarring)或纖維細(xì)胞增生(眼內(nèi)凝血、燒傷、機(jī)械和化學(xué)操作、角膜-結(jié)膜炎等)，或哮喘，該方法包括給治療對(duì)象服用有效量的權(quán)利要求1至6限定的新的三氟甲基酮衍生物或其可藥用鹽。
20.權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述化合物及其可藥用鹽在制藥中的應(yīng)用，所述藥物用于治療或預(yù)防退化性疾病和腎炎、膿毒病、哮喘或移植排斥，其中所述退化性疾病的例子有肺氣腫、慢性支氣管炎、粥樣動(dòng)脈硬化、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)病、牛皮癬、胰腺炎及老年性呼吸道窘迫綜合癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及對(duì)人類白細(xì)胞彈性蛋白酶具有抑制作用的新的三氟甲基酮衍生物及其可藥用鹽、制備這些化合物的方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及它們的用途。
文檔編號(hào)A61K38/00GK1063108SQ9111261
公開(kāi)日1992年7月29日 申請(qǐng)日期1991年12月30日 優(yōu)先權(quán)日1990年12月31日
發(fā)明者逸見(jiàn)惠次, 一郎, 今井啟佑, 田中洋和 申請(qǐng)人:藤澤藥品工業(yè)株式會(huì)社