專利名稱：六氫苯并[f]喹啉酮的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及六氫苯并[f]喹啉酮，含有那些化合物的藥物制劑及其作為甾類化合物5α-還原酶抑制劑的應(yīng)用。
通常知道，某些不希望的生理癥狀如良性前列腺增生、男性型禿發(fā)、普通粉刺、多毛癥和前列腺癌均依賴于雄性激素5α-二氫睪酮(DHT)的調(diào)節(jié)狀況。
5α-還原酶在靶器官中局部地調(diào)節(jié)睪酮轉(zhuǎn)變?yōu)楦行ЯΦ男坌约に谼HT。已推定并證明，5α-還原酶抑制劑可阻止DHT的形成并使上述不希望的生理癥狀得到改善。
據(jù)報(bào)道，用于抑制5α-還原酶的化合物通常為甾類化合物的衍生物如氮甾類化合物，Rasmusson等人.，J.med.chem.，29，(11)，2298-2315(1986);及苯甲酰基氨基苯氧基丁酸衍生物如在EPO 291245中公開(kāi)的。
某些六氫苯并[f]喹啉酮類化合物是已知的，如見(jiàn)GB 2，207，135;和美國(guó)專利4，749，791。在GB2，207，135和美國(guó)專利4，749，791這兩個(gè)專利中，除了作為其它具有藥效化合物的制備的中間體外，均沒(méi)有公開(kāi)六氫苯并[f]喹啉酮的藥物用途。US4，511，569公開(kāi)了某些三環(huán)內(nèi)酰胺及其衍生物可用于增加心肌收縮力，但該文獻(xiàn)并沒(méi)有建議將本發(fā)明的六氫苯并[f]喹啉酮用于作為甾類化合物5α-還原酶抑制劑。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一個(gè)新的六氫苯并[f]喹啉酮，它是有效地、選擇性的甾類化合物-5α-還原酶抑制劑，用于治療良性前列腺增生，男性型禿發(fā)、普通粉刺、多毛癥及前列腺癌。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供治療所說(shuō)癥狀的治療組合物。
更進(jìn)一步的目的是提供治療所說(shuō)癥狀的方法。
其它目的、特征及優(yōu)點(diǎn)通過(guò)下列的描述和權(quán)利要求書使專業(yè)技術(shù)人員更清楚。
本發(fā)明提供新穎的1，2，3，4，5，6六氫苯并[f]喹啉-3-酮，它們是有效的甾類化合物5α-還原酶抑制劑。
更具體地講，本發(fā)明涉及具有下列結(jié)構(gòu)的化合物及其藥物制劑上可接受的鹽，
其中R是氫、C1-C4烷基、未取代或取代的苯(C1-C4)烷基;
Z和Z1獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基;
R1是氫或C1-C4烷基;
n為1或2;
X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫酰基、C1-C6烷基磺酰基或-A-R2基團(tuán)，其中A是C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基、R2是鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺酰氨基、氨基磺酰基或C1-C4烷基氨基磺?；?以下列為條件(a)當(dāng)R是氫，X不是氫、鹵素或甲氧基;
(b)當(dāng)R是甲基、乙基或芐基時(shí)，X不是甲氧基;及(c)當(dāng)R是甲基時(shí)，R1不是甲基。
本發(fā)明也提供了藥物制劑，它包括將具有下列結(jié)構(gòu)化合物或其藥劑上可接受的鹽與藥劑上可接受的載體，稀釋劑或賦形劑混合，
其中R是氫、C1-C4烷基、未取代或取代的苯(C1-C4)烷基;
Z和Z1獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基;
R1是氫或C1-C4烷基;
n為1或2;
X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫?；?、C1-C6烷基磺?；?、或-A-R2基團(tuán)，其中A是C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基;且R2為鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺酰基胺基、氨基磺?；駽1-C4烷基氨基磺?；?。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是用于抑制5α-還原酶的方法。更具體地說(shuō)，是用于治療一系列與哺乳動(dòng)物體內(nèi)5α-還原酶活性相關(guān)的疾病的方法，其中包括的疾病有良性前列腺增生、男性型禿發(fā)、普通粉刺、多毛癥及前列腺癌。這些方法包括給藥于需要5α-還原酶抑制劑的哺乳動(dòng)物、具有下列結(jié)構(gòu)化合物或其藥劑上可接受的鹽的抑制5α-還原酶的劑量，
其中，R是氫、C1-C4烷基、未取代或取代的苯(C1-C4)烷基;
Z和Z1獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基;
R1是氫或C1-C4烷基;
n為1或2;
X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫?；1-C6烷基磺?；?A-R2基團(tuán)，其中A是C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基;及R2是鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺?；被?、氨基磺?；駽1-C4烷基氨基磺?；?。
這里使用的，“烷基”的意思是具有上述碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈烷基，如烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基及更高級(jí)的同系物和異構(gòu)體如正戊基、正己基、2-甲基戊基和類似物。
“亞烷基”的意思是具有上述碳原子數(shù)目的二價(jià)直鏈烷基，如亞甲基、1，2-乙二基、1，3-丙二基、1，4-丁二基、1，5-戊二基、1，6己二基。同樣地，“亞烯基”的意思是含有上述數(shù)目碳原子和單個(gè)碳-碳雙鍵的二價(jià)不飽和直鏈烴，如亞乙烯基、1-丙烯-1，3-二基、2-丙烯-1，3-二基、2-丁烯-1，4-二基、1-丁烯-1，4-二基及其類似物。同樣地，“亞炔基”的意思是含有上述數(shù)目碳原子和單個(gè)碳-碳三鍵的二價(jià)直鏈烴，如1，2-乙炔二基、1-丙炔-1，3-二基、2-丁炔-1，4-二基及基類似物。
“苯(C1-C4)烷基”意思是指用苯環(huán)未取代或取代的1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈單取代烷基，其中該取代基是相同的或不同的鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、C1-C4烷基氨基或C1-C4二烷基氨基。典型的苯(C1-C4)烷基包括芐基、2-苯乙-1-基、2-苯丙-1-基、4-苯丁-1-基、1-苯乙-1-基、2-苯丙-1-基、2-(4-鹵代苯基)乙-1-基、4-鹵代芐基及類似物。
“烷氧基”的意思指任意的甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基及類似物。“鹵素”和“鹵代”是指任意的氟、氯、溴及碘。“烷硫基”的意思是指任意的甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基及類似物。
這里的“C1-C4二烷基氨基”(-N(C1-C4烷基)2)或“C1-C4二烷基酰胺基”(-C(O)N(C1-C4烷基)2)取代基表示每個(gè)烷基獨(dú)立地具有1-4個(gè)碳原子。
隨著R1、Z和Z1取代基的不同，結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物擁有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子，因此它們能以單獨(dú)非對(duì)映異構(gòu)體或那些非對(duì)映異構(gòu)體的消旋物的形式存在。本發(fā)明的化合物不僅包括兩個(gè)或多個(gè)此類非對(duì)映異構(gòu)體的混合物，而且也包括各自單獨(dú)的異構(gòu)體。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是那些結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物及其藥物制劑上可接受的鹽，其中R是氫或C1-C4烷基;
Z和Z1獨(dú)立地為氫或甲基;
R1是氫或甲基n為1或2、X是鹵素、CF3、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基或-A-R2基團(tuán)，其中A為C1-C4亞烷基及R2為C1-C4烷氧基羰基;并以下列為條件(a)當(dāng)R為氫時(shí)，X不是氫、鹵或甲氧基;
(b)當(dāng)R為甲基或乙基，X不是甲氧基;并且(c)當(dāng)R為甲基，R1不是甲基。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物是那些結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物及其藥物制劑上可接受的鹽，其中R是氫或甲基;
Z和Z1均為氫或甲基;
R1是氫或甲基;
n為1或2;
X是鹵素、CF3或C1-C4烷基;并以下列為條件(a)當(dāng)R為氫時(shí)，X不是鹵素;
(b)當(dāng)R為甲基時(shí)，R1不是甲基。
按上面所提到的，本發(fā)明包括上述結(jié)構(gòu)所定義的化合物的藥物制劑上可接受的鹽。雖然一般來(lái)說(shuō)是中性的，但本發(fā)明的特殊化合物能夠擁有足夠的酸性、堿性或兩性基團(tuán)，并可相應(yīng)地與任意的一定量的無(wú)毒的無(wú)機(jī)堿及無(wú)毒性的無(wú)機(jī)和有機(jī)酸反應(yīng)形成藥物制劑上可接受的鹽。通常用于加成鹽的酸為無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸及類似物，以及有機(jī)酸如對(duì)-甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對(duì)-溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸及類似物。該藥物制劑可接受鹽的實(shí)例有硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸-氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、g-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、灑石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、扁桃酸鹽及類似物。優(yōu)選的藥物制劑上可接受的酸加成鹽是那些與如鹽酸和氫溴酸的無(wú)機(jī)酸形成的，和那些與如馬尿酸和甲苯磺酸的有機(jī)酸形成的鹽。
堿加成鹽包括那些由無(wú)機(jī)堿衍生來(lái)的，如銨或堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽及類似物，也可從無(wú)毒的堿性有機(jī)胺衍生而來(lái)，如脂肪族或芳香族的胺、脂肪二胺、羥基烷基胺及類似物。制備本發(fā)明鹽的所用堿的實(shí)例包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、碳酸鈣、甲胺、二乙胺、乙二胺、環(huán)己胺、乙醇胺及類似物，特別優(yōu)選的是鉀或鈉鹽的形式。
采用本專業(yè)普通技術(shù)人員所知道的制備過(guò)程來(lái)制得本發(fā)明的化合物或它們的前體。更可取地根據(jù)下列工藝方法，來(lái)合成本發(fā)明的那些化合物或它們的前體。
這里X，n及R是按上述結(jié)構(gòu)式Ⅰ定義的，R-EAA為一種親電子烷基化試劑，其中EAA為離去基團(tuán)，并且Ra及Rb獨(dú)立地選自氫或C1-C4烷基，或者可與氮原子結(jié)合形成5-7元雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)也可以含有一個(gè)氧原子，其條件是Ra和Rb不能同時(shí)為氫。
六氫苯并[f]喹啉酮可從未取代的或適當(dāng)環(huán)取代的苯乙酰氯來(lái)制備。苯乙酰氯可購(gòu)得或通過(guò)本專業(yè)技術(shù)人員所熟知的方法而制得。有代表性的是適當(dāng)取代的苯乙酸與亞硫酰氯、三氯化磷、草酰氯、或五氯化磷，優(yōu)選亞硫酰氯反應(yīng)，在本專業(yè)技術(shù)人員已知的條件下，獲得相應(yīng)的苯乙酰氯。
在路易斯酸催化劑存在下并在惰性的或基本上惰性的溶劑或溶劑的混合物中，通過(guò)苯乙酰氯與乙烯的弗瑞德-克來(lái)福特(Friedel-Crafts)?；磻?yīng)，產(chǎn)生酰化作用以及后續(xù)閉環(huán)作用，獲得2-四氫萘酮。合適的路易斯酸催化劑包括AlBr3、AlCl3、GaCl3、FeCl3、SbCl5、ZrCl4、SnCl4、BCl3、BF3、SbCl3及類似物，優(yōu)選的是AlCl3。用于該反應(yīng)的溶劑包括二硫化碳、二氯甲烷、硝基甲烷、1，2-二氯乙烷、硝基苯及類似物，優(yōu)選的是二氯甲烷。苯乙酰氯與路易斯酸的活化作用是在約為-78℃到約25℃溫度下實(shí)現(xiàn)的。乙烯的加合反應(yīng)實(shí)際上是放熱的，因而通過(guò)常規(guī)的冷卻方法來(lái)將反應(yīng)溫度維持在約-78℃到30℃之間。
然后，將2-四氫萘酮反應(yīng)產(chǎn)物用一級(jí)或二級(jí)胺進(jìn)行胺化，優(yōu)選的胺為吡咯烷，在惰性或基本惰性的溶劑或溶劑的混合物中，獲得相應(yīng)的烯胺。至于一級(jí)胺，可通過(guò)亞胺的互變異構(gòu)體來(lái)完成。通過(guò)消除水推動(dòng)反應(yīng)的進(jìn)行，該反應(yīng)系用合適的aeotrope溶劑在約80°-110℃升高溫度的過(guò)程中來(lái)完成，或在室溫下，使用合適的脫水劑如分子篩或硫酸鎂來(lái)完成。合適的溶劑是非質(zhì)子傳遞有機(jī)溶劑如苯、甲苯、四氫呋喃、CH2Cl2和乙酸乙酯。
然后在酸存在下和在惰性或基本惰性的溶劑或溶劑的混合物存在或不存在下，反應(yīng)產(chǎn)物烯胺與丙烯酰胺反應(yīng)，獲得六氫-2-(1H)-苯并[f]喹啉酮。在該反應(yīng)中使用的酸包括強(qiáng)的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸，優(yōu)選的是對(duì)甲苯磺酸(pTSA)。雖然該反應(yīng)在溶劑中能夠進(jìn)行，優(yōu)選的是不使用溶劑。該反應(yīng)可在溫度從約90℃到約130℃下實(shí)現(xiàn)。
六氫-2(1H)-苯并[f]喹啉酮可被N-烷基化。該N-烷基化反應(yīng)是通過(guò)六氫苯并[f]喹啉酮與R-EAA化合物在惰性或基本惰性的溶劑或溶劑的混合物中反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的，其中R-EAA是按上述定義的并存在于堿中。對(duì)于本反應(yīng)來(lái)說(shuō)，優(yōu)選的EAA為吲哚。該堿通常為金屬氫化物、金屬的氨化物或金屬的醇鹽，優(yōu)選的是氫化鈉。一般地，該反應(yīng)可在從約-30℃到約溶劑的回流溫度下進(jìn)行。
除了在苯乙酰氯的Friedel-Crafts閉環(huán)反應(yīng)中使用一種合適的烯烴(工藝方法1中使用乙烯)外，基本上根據(jù)工藝方法1的制備過(guò)程來(lái)制得其中Z、Z1或二者為C1-C4烷基的本發(fā)明的那些化合物。用于該反應(yīng)合適的烯烴的實(shí)例包括丙烯、1-丁烯、2-丁烯、異丁烯、3，3-二甲基-1-丁烯、2-戊烯、4-甲基-2-戊烯、3-甲基-1-丁烯、2-甲基-2-丁烯、2，3-二甲基-2-丁烯及類似物。
結(jié)構(gòu)式Ⅰ中R1為C1-C4烷基的那些化合物可從工藝方法1中得到的化合物按下列工藝方法2所顯示的方法來(lái)制備
其中X、n、R及R1-EAA均按上述結(jié)構(gòu)式Ⅰ和工藝方法1來(lái)定義。
在從約-78℃到約25℃溫度下，結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物與堿在惰性或其本惰性的溶劑或溶劑的混合物中進(jìn)行反應(yīng)，該堿如金屬氨化物或金屬的醇鹽，優(yōu)選的是六甲基二硅疊氮鉀(potassium hexamethyldisilazide)。然后通過(guò)加入合適的親電子烷化劑來(lái)進(jìn)行烷基化反應(yīng)，優(yōu)選的烷化劑為烷基碘化物，獲得結(jié)構(gòu)式Ⅰ的2-(C1-C4烷基)化合物。
結(jié)構(gòu)式Ⅰ的4(H)化合物通常與氨基保護(hù)基團(tuán)反應(yīng)，如在2位烷基化之前的2-(三甲基甲硅烷基)乙基。用本專業(yè)技術(shù)人員所熟知的標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)步驟來(lái)進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)。2-位烷基化后，再次用本專業(yè)技術(shù)人員所熟知的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)步驟將4-位氮原子去掉保護(hù)。所使用的氨基保護(hù)基的種類并不是關(guān)鍵，只要衍生的氨基在隨后的反應(yīng)條件下是穩(wěn)定的并且在適當(dāng)?shù)臅r(shí)刻不破壞分子的剩余部分而能被消除。
根據(jù)工藝方法2的反應(yīng)和以上所描述的制備方法，結(jié)構(gòu)式Ⅰ的4(H)化合物選擇性地與兩個(gè)等量的堿反應(yīng)而不是一個(gè)堿和一個(gè)等量的R-EAA。
本發(fā)明外消旋物的旋光異構(gòu)體也屬于本發(fā)明考慮的部分。這些旋光異構(gòu)體可通過(guò)上述的制備方法或通過(guò)外消旋混合物的拆解從它們各自的旋光前體制得。通過(guò)與手性試劑的衍化接著經(jīng)色譜層析或反復(fù)結(jié)晶來(lái)完成這種拆解。通過(guò)常規(guī)方法除去手性輔助劑，基本上得到本發(fā)明化合物的純的旋光異構(gòu)體或它們的前體。有關(guān)拆解的更詳細(xì)的內(nèi)容可從Jacques等人.，Enantiomers，Racemates，and Resolu-tions，John wiley & Sons，1981中獲得。
用于本發(fā)明化合物合成的起始原料的化合物是公知的，而在商業(yè)上買不到但可通過(guò)使用本專業(yè)普通技術(shù)人員所共用的常規(guī)制備過(guò)程很容易合成。
本發(fā)明制劑上可接受的鹽，有代表性地是通過(guò)擁有合適的酸性或堿性功能團(tuán)的本發(fā)明的六氫苯并[f]喹啉酮與等摩爾量或過(guò)量的酸或堿反應(yīng)而形成的。反應(yīng)物通常在互溶劑中結(jié)合，如乙醚或苯用于與酸加成鹽，水或乙醇用于與堿加成鹽，并且該鹽通常在約1小時(shí)到10天時(shí)間內(nèi)從溶液中沉淀出來(lái)，然后經(jīng)過(guò)濾而分離。
另外，某些結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物和它們的鹽可與水形成水合物或與一般有機(jī)溶劑形成溶劑化物。這類溶劑化物或水合物均屬于本發(fā)明的化合物。
下面的實(shí)施例更進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的化合物和它們的合成方法。這些實(shí)施例在任何方面均不是限定本發(fā)明的范圍而且也不應(yīng)這樣解釋。
實(shí)施例18-溴-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備A.4-溴苯乙酰氯在裝有磁性攪拌器的250毫升圓底燒瓶中，加入4-溴苯乙酸(100，0克，0.465摩爾)和100毫升亞硫酰氯(163.1克，1.37摩爾)。將所得淤漿在室溫下攪拌22.5小時(shí)。在真空中蒸去過(guò)量的亞硫酰氯，得108.5克棕色液體的小標(biāo)題化合物。
B.6-溴-四氫萘酮在三氯化鋁(125克，0.94摩爾)的1.4升CH2Cl2冷混懸液中(-78℃，干冰/異丙醇浴)，加入溶于400毫升無(wú)水二氯甲烷的步驟A所得的酰氯化合物(108.5克，0.47摩爾)，同時(shí)攪拌并維持1小時(shí)。移去干冰/異丙醇浴并將溶液溫?zé)岬?10℃。然后在劇烈攪拌下，向燒瓶中吹入乙烯氣泡，反應(yīng)溫?zé)岬?0℃時(shí)，停止加入乙烯。該混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后冷卻到0℃并加冰直到不再放熱。用1升冰冷的水稀釋該反應(yīng)混合物并攪拌到所有固體物都溶解，分層后進(jìn)行分離并將有機(jī)層用1N鹽酸每次1升洗滌兩次，用1升的飽和碳酸鈉洗滌一次。該有機(jī)層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，并在真空中濃縮，得淺黃色晶體。
將6-溴-2-四氫萘酮結(jié)晶溶于最小量的乙醚中，小心加入己烷直到溶液剛開(kāi)始變混并將混合物冷藏4小時(shí)。經(jīng)過(guò)濾收集沉淀固體物并用冷己烷洗滌，得淺黃色結(jié)晶小標(biāo)題化合物75.6克(產(chǎn)率71%)，熔點(diǎn)71-73℃。
C.2-吡咯烷基-6-溴-3，4-二氫萘在250毫升圓底燒瓶中，加入5.00克(22.21毫摩爾)的上面步驟B中所得的6-溴四氫萘酮，70毫升無(wú)水甲苯和3.1克(3.7毫升)的吡咯烷。在燒瓶上安裝一個(gè)(Dean-Strak)迪安-斯達(dá)克榻分水器、一個(gè)冷凝器、氮?dú)馊肟诠芎痛判詳嚢杵鳎⒎磻?yīng)混合物回流4小時(shí)，在真空中蒸去溶劑，得棕色晶體小標(biāo)題化合物6.02克(97.0%)，該晶體不需進(jìn)一步純化即可使用。
D.8-溴-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮將由步驟C所得的烯胺(2.15克，7.73毫摩爾)、丙烯酰胺(1.10克，15.46毫摩爾)和100毫克的對(duì)甲苯磺酸(pTSA)用乳缽和研杵完全混合，該混合物被轉(zhuǎn)移到裝有磁性攪拌器和氮?dú)馊肟诘?50毫升圓底燒瓶中，攪拌并在礦物油浴中加熱到89℃，混合物可在該溫度下變黑并熔化，溫度恒定在89℃維持1.5小時(shí)。然后將溫度升高到130℃并維持半小時(shí)。移去油浴并小心加入60毫升水，所得暗灰色材料，用鋼鏟徹底混合并加入80毫升水以便過(guò)濾。經(jīng)過(guò)濾得棕色結(jié)晶(1.02克)。該結(jié)晶溶于氯仿中并加入活性炭。將該混合物攪拌15分鐘，過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)。殘?jiān)谡羝∠氯苡谛×康囊宜嵋阴ィ⑥D(zhuǎn)移到錐形瓶中，該瓶裝配一個(gè)磁性攪拌棒并在攪拌下浸入干冰/丙酮浴中，得白色晶體小標(biāo)題化合物(熔點(diǎn)215-217℃，分解)。產(chǎn)量1.12克。
元素分析C H N計(jì)算值56.14 4.35 5.04實(shí)測(cè)值56.40 4.58 5.07實(shí)施例28-溴-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮基本上再通過(guò)上面實(shí)施例1中所描述的步驟獲得5.17克8-溴-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮，將該六氫苯并喹啉酮(5.17克;19.6毫摩爾)溶于置于250毫升圓底燒瓶中的60毫升無(wú)水乙醚中，再加入1.2克氫化鈉(60%的礦物油混懸液)。該燒瓶安裝配有攪拌棒的回流冷凝器并將混合物回流2小時(shí)。然后該混合物被冷卻到室溫并加7.35毫升碘甲烷。加入后，該反應(yīng)混合物再被回流3小時(shí)。冷卻后，經(jīng)小心加入5毫升水使反應(yīng)混合物驟冷。然后該混合物在真空中濃縮，得蒼色固體，將其溶于乙酸乙酯/水混合物中并分層分離。有機(jī)層用水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，然后經(jīng)MgSO4干燥并在真空中濃縮，得黃色晶體5.22克。該固體用丙酮重結(jié)晶，得淺黃色晶體小標(biāo)題化合物3.55克(62%)。熔點(diǎn)126-128℃。
元素分析C H N計(jì)算值57.55 4.83 4.79實(shí)測(cè)值57.40 4.92 4.74實(shí)施例38，9-二氯-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備用3，4-二氯苯乙酸作為起始材料，按上面實(shí)施例1所描述的步驟，制備標(biāo)題化合物，得4.34克，熔點(diǎn)251-253℃分解。
元素分析C H N計(jì)算值58.23 4.14 5.22實(shí)測(cè)值58.36 4.37 5.36實(shí)施例4
8-氯-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2中所描述的步驟，用對(duì)四-氯苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率為62.5%，熔點(diǎn)為140-141℃。
元素分析C H N計(jì)算值67.88 5.70 5.65實(shí)測(cè)值67.64 5.70 5.62實(shí)施例54，8-二甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的方法步驟，用對(duì)-甲苯乙酸作為起始原料，制得標(biāo)題化合物，產(chǎn)率55%，熔點(diǎn)122℃。
元素分析C H N計(jì)算值79.26 7.54 6.16實(shí)測(cè)值79.03 7.48 6.09實(shí)施例68-氟-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用對(duì)-氟苯乙酸為起始原料，制得標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)108℃。
元素分析C H N計(jì)算值72.71 6.10 6.06實(shí)測(cè)值72.93 6.21 6.08
實(shí)施例74-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備。產(chǎn)率40.5%，熔點(diǎn)100℃。
按實(shí)施例1和2所描述的步驟，用苯乙酸為起始原料，制得標(biāo)題化合物。
元素分析C H N計(jì)算值78.84 7.09 6.57實(shí)測(cè)值79.04 7.17 6.58實(shí)施例81，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用苯乙酸為起始原料，制得標(biāo)題化合物1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮。熔點(diǎn)176-177℃。
元素分析C H N計(jì)算值78.36 6.58 7.03實(shí)測(cè)值78.29 6.71 7.04實(shí)施例98-氟-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用對(duì)-氟苯乙酸作為起始原料，制備標(biāo)題化合物。收率31.8%。熔點(diǎn)222-223℃。
元素分析C H N計(jì)算值71.87 5.57 6.45實(shí)測(cè)值72.10 5.54 6.30實(shí)施例108-氯-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用對(duì)-氯苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。收率35%。熔點(diǎn)229-230℃。
元素分析C H N計(jì)算值66.81 5.18 5.99實(shí)測(cè)值66.57 5.24 5.92實(shí)施例118-甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的方法步驟，用對(duì)-甲氧基苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。收率40%。熔點(diǎn)203-204℃。
元素分析C H N計(jì)算值73.34 6.59 6.11實(shí)測(cè)值73.20 6.45 5.91實(shí)施例128-甲氧基-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用對(duì)-甲氧基苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。
實(shí)施例138-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用對(duì)一甲苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。收率30%。熔點(diǎn)204-205℃。
元素分析C H N計(jì)算值78.84 7.09 6.57實(shí)測(cè)值78.63 7.24 6.44實(shí)施例148-溴-6，6-二甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備除了在步驟B中使用異丁烯而不用乙烯外，按實(shí)例1中步驟A和B所描述的步驟，制備4，4-二甲基-6-溴-2-四氫萘酮。然后按實(shí)施例1中步驟C和D所描述的步驟，由所得的四氫萘酮來(lái)制備標(biāo)題化合物，用DMF/H2O重結(jié)晶，得標(biāo)題化合物1.93克(收率為23%)。熔點(diǎn)263-265℃。
元素分析C H N計(jì)算值58.84 5.27 4.57實(shí)測(cè)值59.10 5.52 4.75實(shí)施例158-叔丁基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備A.6-叔丁基-2-萘酚將新鮮濃稠的氯化鋅(45.0克);b-萘酚(150.0克，1.04摩爾)和己烷(450毫升)置于2升的圓底燒瓶中。劇烈攪拌下，向混合物中滴加叔丁基氯(150.0克，1.62摩爾)，滴加時(shí)間應(yīng)不少于30分鐘。當(dāng)反應(yīng)混合物逐漸被加熱回流時(shí)，并未獲得溶液。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并加入100毫升的二氯甲烷。該反應(yīng)混合物被回流過(guò)夜，冷卻并在真空中濃縮，得一白色固體。該固體經(jīng)1800毫升10%的氫氧化鈉回流、過(guò)濾并使之冷卻。經(jīng)過(guò)濾收集沉淀的白色鈉鹽。在過(guò)濾收集的固體中加過(guò)量的5.0M鹽酸攪拌并經(jīng)過(guò)濾收集所得苯酚并用2升的水洗滌。用庚烷重結(jié)晶，得白色固體30.67克的小標(biāo)題化合物。
B.6-叔丁基-2-甲氧基萘在2升的圓底燒瓶中，加入6-叔丁基-2-萘酚(30.67克;0.153毫摩爾)和550毫升15%氫氧化鉀水溶液。攪拌該溶液，同時(shí)滴加硫酸二甲酯(6.0當(dāng)量)，滴加時(shí)間不少于30分鐘。加完后，將混合物攪拌2小時(shí)。在濾器上收集固體并用水洗滌，得小標(biāo)題化合物28.97克(88%的收率)。
C.6-叔丁基-2-四氫萘酮在6-叔丁基-2-甲氧基萘(28.97克，0.135毫摩爾)的350毫升無(wú)水乙醇攪拌溶液中，加入鈉顆粒(36克，11.5當(dāng)量)，加入時(shí)間不少于2小時(shí)以維持一種溫和的回流狀。攪拌粘稠的反應(yīng)混合物直到所有的鈉溶解。冷卻該混合物并小心地加入140毫升水。加濃鹽酸(275毫升)并將反應(yīng)混合物回流30分鐘，冷卻后，將反應(yīng)混合物過(guò)濾并將水層用甲苯提取3次。在真空中，蒸發(fā)揮發(fā)性成分得28.1克的紅色粘稠油狀物。該油狀物溶于300毫升乙醚并用50毫升飽和亞硫酸氫鈉水溶液攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)濾收集白色沉淀并用己烷洗滌幾次。將該材料不完全地溶于500毫升水并加入200毫升乙醚。劇烈攪拌該混合物并加300毫升飽和碳酸鈉水溶液。攪拌1小時(shí)，分層分離并用乙醚將水層提取三次。合并結(jié)合的有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在真空中濃縮，得5.74克桔黃色油狀小標(biāo)題化合物，該油狀物可在放置下緩慢結(jié)晶。
D.6-叔丁基-2-吡咯烷基-3，4-二氫萘在6-叔丁基-2-四氫萘酮(5.74克;28.37毫摩爾)的100毫升甲苯的攪拌溶液中，加入1.5當(dāng)量的吡咯烷(3.56毫升，42.56毫摩爾)。分步加入100克對(duì)甲苯磺酸并將混合物回流。反應(yīng)過(guò)程中消除的水經(jīng)迪安-斯達(dá)克榻分水器而被收集。回流3.5小時(shí)后，在真空中濃縮揮發(fā)物，得7.31克紫色固體小標(biāo)題化合物。
E.8-叔丁基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮在6-叔丁基-2-吡咯烷基-8，4-二氫萘(7.25克，28.37毫摩爾)中，加入3.0當(dāng)量的丙烯酰胺(6.05克，85.11毫摩爾)。將反應(yīng)混合物在89℃下攪拌過(guò)夜。然后將溫度升至130℃并維持20分鐘。小心加入水(100毫升)并將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。所得固體物用水研制并在濾器上收集，得棕色固體。所得固體物用二甲基甲酰胺(DMF)/水重結(jié)晶兩次，得小標(biāo)題化合物4.56克(63%的收率)。熔點(diǎn)265-268℃分解。
元素分析C H N計(jì)算值79.96 8.29 5.47實(shí)測(cè)值80.26 8.25 5.08實(shí)施例1610-溴-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1中所描述的步驟，用8-溴四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量20毫克。熔點(diǎn)189-189.5℃。
元素分析C H N計(jì)算值56.14 4.35 5.04實(shí)測(cè)值56.40 4.25 5.02實(shí)施例1710-氯-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用8-氯四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量750毫克，熔點(diǎn)184.5℃。
元素分析C H N計(jì)算值66.81 5.18 5.99實(shí)測(cè)值66.56 5.24 6.00實(shí)施例187-氟-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用3-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量265毫克(20%)，熔點(diǎn)233-234℃。
元素分析C H N計(jì)算值71.87 5.57 6.45實(shí)測(cè)值72.09 5.69 6.33實(shí)施例197-氟-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1和2所描述的方法步驟，用3-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)137-138℃，產(chǎn)量98毫克，62.8%。
元素分析C H N計(jì)算值72.71 6.10 6.06實(shí)測(cè)值72.42 6.26 5.94實(shí)施例2010-氟-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用2-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量180毫克，(8%)，熔點(diǎn)199℃。
元素分析C H N計(jì)算值71.87 5.57 6.45實(shí)測(cè)值71.84 5.39 6.35實(shí)施例219-氟-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用3-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量370毫克，69.5%，熔點(diǎn)122℃。
元素分析C H N計(jì)算值72.71 6.10 6.06實(shí)測(cè)值72.90 6.28 6.36實(shí)施例2210-氟-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用2-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量195毫克(36.7%)，熔點(diǎn)75-76℃。
元素分析C H N計(jì)算值72.71 6.10 6.06實(shí)測(cè)值72.63 6.31 6.11實(shí)施例238-氟-4-芐基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用4-氟苯乙酸為起始原料并以芐基氯為N-烷化劑，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量370毫克(41%)，熔點(diǎn)101-102℃。
元素分析C H N計(jì)算值78.15 5.90 4.56實(shí)測(cè)值78.38 5.83 4.59實(shí)施例248-氟-4-乙基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用4-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量66毫克(11%)，熔點(diǎn)72℃。
元素分析C H N計(jì)算值73.45 6.57 5.71實(shí)測(cè)值73.53 6.29 5.64實(shí)施例258-氟-4-正丁基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按照實(shí)施例1和2所描述的步驟，用4-氟苯乙酸為起始原料，制備標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)油狀。
元素分析C H N計(jì)算值74.70 7.37 5.12實(shí)測(cè)值74.49 7.27 5.09實(shí)施例269-甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用7-甲氧基-2-四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量4.5克(33%)，熔點(diǎn)227-228℃。
元素分析C H N計(jì)算值73.34 6.59 6.11實(shí)測(cè)值73.59 6.62 6.14實(shí)施例2710-甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用8-甲氧基-2-四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量110毫克(25%)，熔點(diǎn)190-190.5℃。
元素分析C H N計(jì)算值73.34 6.59 6.11實(shí)測(cè)值73.38 6.33 5.96實(shí)施例288，9-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用6，7-二甲氧基-2-四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量170毫克(50%)，熔點(diǎn)270-271℃。
元素分析C H N計(jì)算值69.48 6.61 5.40實(shí)測(cè)值69.62 6.88 5.66實(shí)施例2910-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮的制備按實(shí)施例1所描述的步驟，用8-甲基-2-四氫萘酮為起始原料，制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)量280毫克(23%)，熔點(diǎn)168-169℃。
元素分析C H N計(jì)算值78.84 7.09 6.57實(shí)測(cè)值79.03 7.09 6.49實(shí)際上，按照上面所描述的方法步驟，本專業(yè)技術(shù)人員能夠制備結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物。
按上面所提示的，本發(fā)明的化合物對(duì)抑制睪酮到5α-二氫睪酮(DHT)的轉(zhuǎn)化是有用的。因此，本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是用于抑制5α-還原酶的方法，它是通過(guò)向需要5α-還原酶抑制的哺乳動(dòng)物給予按結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的抑制5α-還原酶的劑量(有效量)。
在這里所用的“有效量”的意思是指本發(fā)明化合物的一個(gè)量，該量能夠抑制通過(guò)5α-還原酶催化將睪酮轉(zhuǎn)化為5α-二氫睪酮，尤其能夠抑制5α-還原酶。期待用本方法進(jìn)行5α-還原酶抑制者包括適當(dāng)?shù)乃幬镏委熀?或預(yù)防性處理。當(dāng)然，按本發(fā)明給予獲得治療和/或預(yù)防效果的化合物的特殊劑量將取決于周圍環(huán)境的特別情況，包括如所給予的化合物、給藥的途徑及所被治療的癥狀。有代表性的日劑量含有本發(fā)明的活性化合物為從約0.01到約50毫克/千克體重的無(wú)毒劑量水平。優(yōu)選的劑量為0.05-20毫克/千克體重。最優(yōu)選的是從0.1-10毫克/千克體重。
各種生理功能與5α-二氫睪酮相關(guān)，因此，相信本發(fā)明的化合物具有治療哺乳動(dòng)物的各種與5α-二氫睪酮相關(guān)疾病的能力。包括良性前列腺增生(或肥大)、男性型禿發(fā)、普通粉刺、多毛癥或前列腺癌。因此，本發(fā)明還提供治療上述疾病的方法，即按上述的方法抑制催化睪酮轉(zhuǎn)化到5α-二氫睪酮的5α-還原酶。
本化合物可通過(guò)各種途徑給藥，包括口服、直腸、透皮、皮下、靜脈、肌肉、鼻腔及用于男性型禿發(fā)、普通粉刺和多毛癥的局部給藥。本發(fā)明的化合物優(yōu)選的是給藥前做成制劑。所以，本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是藥物制劑包含一個(gè)有效量的結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和一個(gè)藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。優(yōu)選的是以單位劑量的形式提供所說(shuō)結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物從約0.01到約50毫克/公斤體重的每日劑量。
在此類制劑中，活性組分為該制劑重量的0.1%到99%。對(duì)于“藥學(xué)上可接受的”，其意思是指載體、稀釋劑或賦形劑與制劑中的其它組分是相容的且對(duì)其接受者是無(wú)害的。
本發(fā)明的藥物制劑通過(guò)使用公知的方法和易于購(gòu)得的組分來(lái)制備。在制備本發(fā)明的組合物中，活性組分通常與載體相混合，或由載體稀釋、或包于可形成膠囊、香囊、紙或其它容器的載體中。當(dāng)載體用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體材料，它可作為活性成分的媒介物、賦形劑或介質(zhì)。因此，本組合物可以是片劑、丸劑、粉劑、錠劑、香囊劑、扁膠囊、酏劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑(以固體或液體為介質(zhì))、含有如可達(dá)10%重量的活性化合物的軟膏劑、軟或硬明膠膠囊、栓劑、滅菌注射液、滅菌包裝粉針及類似形式。有代表性的局部給藥的制劑包括含有如可達(dá)10%重量的活性組分的軟膏劑、霜?jiǎng)?、膠劑或洗劑。
下列制劑的實(shí)例僅僅是說(shuō)明性的，在任何方式上均不能作為本發(fā)明范圍的限制。當(dāng)然，“活性組分”的意思是指一種結(jié)構(gòu)式Ⅰ或其藥學(xué)上可接受的鹽的化合物。
制劑1使用下列組分制備硬明膠膠囊量(毫克/膠囊)活性組分 250干淀粉 200硬脂酸鎂 10共計(jì) 460毫克制劑2使用以下組分制備片劑量(毫克/片)活性組分 250微晶纖維素 400霧狀二氧化硅 10硬脂酸 5共計(jì) 665毫克各成分被混合并壓制形成每片重665毫克的片劑。
制劑3制備含有下列組分的氣霧劑溶液重量活性組分 0.25乙醇 25.75噴射劑22(氯二氟代甲烷) 70.00共計(jì) 100.00將活性化合物與乙醇混合并加到部分噴射劑22中，冷卻到-30℃并轉(zhuǎn)移到填充器中，然后按所需量加到不銹鋼容器中并用剩余的噴射劑稀釋，然后將閥門組件裝配到容器上。
制劑4以下制備每片含有60毫克活性組分的片劑活性組分 60毫克淀粉 45毫克微晶纖維素 35毫克聚乙烯吡咯烷酮 4毫克(以10%的水溶液)羧甲基淀粉鈉 4.5毫克硬脂酸鎂 0.5毫克滑石粉 1毫克共計(jì) 150毫克將活性組分、淀粉和纖維素通過(guò)45目美國(guó)篩并完全混合。含有聚乙烯吡咯烷酮的水溶液與所得的粉末混合，然后將該混合物通過(guò)14目的美國(guó)篩。所生產(chǎn)的顆粒在50℃溫度下干燥并過(guò)18目美國(guó)篩整粒。將羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂及滑石粉過(guò)60目美國(guó)篩并加到顆粒中，混合物后，在壓片機(jī)上壓制成片重為150毫克的片劑。
制劑5制備每粒含有80毫克活性成分的膠囊活性成分 80毫克淀粉 59毫克微晶纖維素 59毫克硬脂酸鎂 2毫克共計(jì) 200毫克將活性成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，過(guò)45目美國(guó)篩，并填充在200毫克量的硬明膠膠囊中。
制劑6以下制備每粒含有225毫克活性組分的栓劑活性組分 225毫克飽和脂肪酸甘油酯 2，000毫克共計(jì) 2，225毫克將活性組分過(guò)60目美國(guó)篩，并混懸在預(yù)先剛好熱熔的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物傾入標(biāo)量為2克重的栓模中并使之冷卻。
制劑7以下制備每5毫升劑量含有50毫克活性組分的混懸液活性組分 50毫克羧甲基纖維素鈉 50毫克糖漿 1.25毫升苯甲酸溶液 0.10毫升食用香料 適量染料 適量純水加到總量為 5毫升活性組分過(guò)45目美國(guó)篩并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合而形成調(diào)勻的糊劑。苯甲酸溶液、食用香料和染料用部分水稀釋并在攪拌下加到糊劑中，然后加水到所需體積。
制劑8以下可制得靜脈制劑活性組分 100毫克等滲鹽水 1，000毫升以上組分的溶液一般以每分鐘1毫升的速度靜脈給予病人。
制備軟膏通常采用(1)一種含油基質(zhì)，即由固定油或碳?xì)浠衔锝M成的，比如白凡士林或礦物油，或(2)一種吸收性基質(zhì)，即由無(wú)水物或能吸收水的物質(zhì)組成，例如，無(wú)水羊毛脂。一般地，在形成基質(zhì)后，或者是含油的或者是吸收性的，加入一定量的活性組分獲得所需的濃度。
霜?jiǎng)┦怯?水乳劑。它們由一個(gè)油相(內(nèi)相)，包括有代表性的固定油，碳?xì)浠衔锛邦愃莆?，如蠟、凡士林、礦物油及類似物，和一個(gè)水相(連續(xù)相)，包括水及任何水溶性物質(zhì)，如加成的鹽。通過(guò)使用一種乳化劑使兩相穩(wěn)定。例如，表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉親水膠體，如阿拉伯膠態(tài)白土(acacia colloidal clays)、鋁硅酸鎂鹽及類似物。乳劑的形成上，一般將活性組分定量地加到乳劑中，以獲得所要求的濃度。
膠劑包括一個(gè)基質(zhì)，它選自含油基質(zhì)、水或如上面所描述的乳狀-混懸基質(zhì)。在基質(zhì)中加入一種膠化劑，它在基質(zhì)中可形成矩陣，以增加基質(zhì)的粘度。膠化劑的實(shí)例有羥丙基纖維素、丙烯酸聚合物及類似物。一般地，在加入膠化劑前，將活性組分加入制劑到所要求的濃度。
本發(fā)明制劑中加入活性組分的量并不是關(guān)鍵該濃度僅應(yīng)在一個(gè)范圍內(nèi)，足以允許迅速將一定量的制劑施于給藥位置，并將釋放所需量的活性組分。
進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)以便證明本發(fā)明化合物抑制5α-還原酶的能力。
細(xì)胞培養(yǎng)采用Hs68人體生殖皮膚纖維細(xì)胞，測(cè)定5α-還原酶的活性，該細(xì)胞購(gòu)于American Type Culture Collection(RocKville，MD)。將細(xì)胞在Dulbecco′s Modified Eagle′s培養(yǎng)基(DMEM)中生長(zhǎng)，該培養(yǎng)基中加入10%用兩性霉素B(0.25毫克/毫升)和慶大霉素(25.0毫克/毫升)(GIBCO，Grand Island，NY)補(bǔ)足的剝離牛胎兒血清。此血清是通過(guò)加介質(zhì)前用葡聚糖包裹的活性炭培養(yǎng)而奪去其內(nèi)源性甾體物。將細(xì)胞在37℃溫度和95%空氣、5%CO2環(huán)境中保存并每隔7-10天過(guò)一次暴露在胰蛋白酶-EDTA溶液(0.025%胰蛋白酶，0，265mM EDTA)測(cè)定前，將Hs68細(xì)胞收集并按每孔6×104細(xì)胞密度置于FaLcon 6孔板中(Becton Dic-kinson Labware，Lincoln ParK，NJ)。讓該細(xì)胞中生長(zhǎng)4-5天或直到它們約有80%達(dá)到融合。
測(cè)定方法Ⅰ通過(guò)將未標(biāo)記的睪酮(sigma chemical co.，st.Louis，MO)溶解在無(wú)水乙醇中再加入[7-3H(N)]-睪酮(23.3 Ci/毫摩爾，New England Nuclear，Boston，MA)的方法來(lái)制備底物。該甾體溶液在氮蒸汽中干燥然后在培養(yǎng)基中再生。
測(cè)定方法Ⅱ用于本方法的底物是[14C]-睪酮(50mCi/毫摩爾(New England Nuclear，Boston，MA)。部分底物在氮蒸汽下干燥。加30毫升乙醇后，將睪酮在合適體積的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
樣品制備試驗(yàn)化合物溶于無(wú)水乙醇中使之達(dá)到所需濃度。通過(guò)Biomek 1000 Automated Laboratory workstation(Beckman Instrum-ents，Palo Alto，CA)用培養(yǎng)基稀釋試驗(yàn)化合物。將樣品孔中的培養(yǎng)基吸出，然后加入新鮮的培養(yǎng)基。試驗(yàn)化合物加到孔中再加0.5毫升的底物。培養(yǎng)混合物的體積維持在2.0毫升。底物的最終濃度為12mM。試驗(yàn)化合物的濃度范圍為0.001-15mM。另外包含培養(yǎng)基和底物而不含細(xì)胞的三個(gè)孔(本底)也用于計(jì)算底物的非酶代謝。該板再置于培養(yǎng)器中并培養(yǎng)4小時(shí)。
培養(yǎng)結(jié)束后，收集培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到含有5毫升甲苯-乙醇(9∶1)的提取試管中。其中已加入40-250毫升各個(gè)未標(biāo)記的甾體化合物載體(雌三醇、雌二醇、雌酮、5α-雄烷基-3α，17b-二醇，5α-雄烷基-3b，17b-二醇，4-雄烷基-3，17-二酮，5α-雄烷基-3，17-二酮，睪酮及5α-二氫睪酮)(Steraloids，Inc.wilton，NH)。在這種條件下，測(cè)定方法Ⅰ提取試管中也分別含有1，000和10，000dpm的[4-14C]-二氫睪酮(50-60mci/毫摩爾)和[4-14C]-睪酮(50mci/毫摩爾)(New England Nuclear，Boston，MA)，[14C]-甾體物用作方法準(zhǔn)確性的回收標(biāo)準(zhǔn)。少量的NaCl也加到提取試管中以防起泡。將樣品渦流約30秒鐘，然后以500xg離心10分鐘。收集有機(jī)層并干燥，再溶解在二氯甲烷-甲醇(9∶1)中并采用以下所描述的薄層色譜法之一來(lái)分析樣品。
色譜方法Ⅰ(兩向色譜法)提取物樣品被點(diǎn)于硅膠60-F254，0.25毫米厚的薄層色譜板上(EM Science，Cincinnati，OH)。將該板在含有二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-乙酸(160∶38∶1.5∶0.5，Mallinckrodt Inc.，Paris，KY)的溶劑系統(tǒng)中第一維展開(kāi)。取出薄板并干燥，然后在含有二氯甲烷-甲醇-氫氧化銨(180∶19∶1，Mallinckrodt Inc，Paris，KY)溶劑系統(tǒng)中第二維展開(kāi)。
色譜方法Ⅱ(單向色譜法)將提取的樣品點(diǎn)于硅膠60F，0.25毫米厚的薄層色譜板上(EM Science，Cincinnati，OH)。該板在含有環(huán)己烷-乙酸乙酯(1∶1，Mallinckrodt Inc.，Paris，KY)或氯仿-乙酸乙酯(3∶1，Mallinckrodt Inc.，Paris，KY)的溶劑系統(tǒng)中展開(kāi)。這兩種溶劑系統(tǒng)均能獲得充分分離并與上面兩向色譜法比較可得較大的產(chǎn)率。
首先在254nm紫外光下觀察薄板并標(biāo)出可見(jiàn)點(diǎn)。然后用櫻草靈(Aldrich Chemical CO.，Milwaukee，WI)
按Wright，R，S的方法(“A reagent for the non-destructive loca-lization of steroids and some other lipophilic materials on silica gel thin-layer chromatograms，”J.Chromatogr.，59;220-221(1971))噴霧薄板，可在365nm紫外光下用于其它甾體物的鑒別。采用測(cè)定方法Ⅱ得到的樣品可直接按Ambis Radioanalytic Imaging System(Ambis System，Inc.，San Diego，CA)的方法直接進(jìn)行分析。至于采用測(cè)定方法Ⅰ的樣品，采用一個(gè)玻璃纖維塞緊的系于真空管上的巴斯德滴管將斑點(diǎn)從薄板上刮下來(lái)。通過(guò)加0.2毫升的二氯甲烷再用2.0毫升的甲醇洗兩次，將甾體物直接洗脫到閃爍管中。蒸去有機(jī)溶劑并加10.0毫升閃爍流體(Ready Organic，Beckman Instruments，Inc.Fullerton，CA)。經(jīng)液體閃爍分光計(jì)分析樣品。
在除去用于提取的培養(yǎng)基后，用磷酸緩沖鹽水洗滌細(xì)胞(PBS，PH7.4)然后經(jīng)曝露的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.025%胰蛋白酶，0.265mM EDTA)獲得。收集該細(xì)胞并以1400xg離心5分鐘。傾去上清液并將細(xì)胞重新混懸于PBS中。取部分細(xì)胞混懸液，并在Coulter Counter Model ZM(Coulter Electronics，Ltd.，Luton Beds，England)上進(jìn)行計(jì)數(shù)。用聲波處理剩余細(xì)胞，并按Bradford，M.M.，(“A rapid and Sensitive method for protein quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding，”Anal.Biochem.，72;248-254(1976).)的方法測(cè)定該蛋白質(zhì)。校正方法誤差，以10-12摩爾每毫克/蛋白質(zhì)或10-12摩爾/105細(xì)胞為甾體物的濃度按抑制百分?jǐn)?shù)來(lái)表達(dá)數(shù)值。
評(píng)價(jià)結(jié)果顯示在表Ⅰ中。抑制百分?jǐn)?shù)使用0-100%為標(biāo)度，這里0為無(wú)活性而100為總抑制。
表Ⅰ實(shí)施例濃度mM 抑制百分?jǐn)?shù)1 0.316 732 10.0 983 0.316 854 10.0 915 10.0 1006 10.0 817 1.00 488 10.0 639 10.0 7610 1.00 8111 1.00 2013 10.0 10014 0.316 30
15 3.16 3016 1.0 1417 1.0 0.318 1.0 3619 1.0 6120 1.0 2221 1.0 6022 1.0 3523 1.0 3724 1.0 3125 10.0 5626 1.0 1227 1.0 028 1.0 3329 1.0 41應(yīng)該了解，本說(shuō)明書和實(shí)施例是以說(shuō)明性而不是限制性的方式陳述的。在沒(méi)有違反附加的權(quán)利要求所定義的本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍下，可作各種修改和變化。
可以理解，本發(fā)明的化合物特別適用于與頭發(fā)生長(zhǎng)異常相關(guān)的美容問(wèn)題的治療。例如，一些表現(xiàn)出男性型禿發(fā)的成年男子通過(guò)使用本發(fā)明的化合物有望得以改善或抑制。該美容治療包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，按本發(fā)明進(jìn)一步的目的，可提供一個(gè)美容的方法，該方法是按上面描述5α-還原酶抑制劑的給藥以治療不同程度的雄激素型禿發(fā)、男性型禿發(fā)或成年人多毛癥。
權(quán)利要求
1.一種制備具有下列結(jié)構(gòu)化合物的方法
其中R是氫、C1-C4烷基、未取代或取代的苯(C1-C4)烷基；z和z＇獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基；R1是氫或C1-C4烷基；n為1或2；X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫?；?、C1-C6烷基磺酰基或-A-R2基團(tuán)其中A為C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基；和R2為；鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺酰氨基、氨基磺?；駽1-C4烷基氨基磺?；?；以下列為條件(a)當(dāng)R是氫，X不是氫、鹵或甲氧基；(d)當(dāng)R是甲基、乙基或芐基時(shí)，X不是甲氧基；并且(c)當(dāng)R是甲基時(shí)，R＇不是甲基；其方法包括(1)烯胺與丙烯酰胺在酸存在下和在一種惰性或基本惰性溶劑或溶劑的混合物存在或不存在下反應(yīng)而獲得單一的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的六氫苯并[f]喹啉酮，其中R和R＇為氫；或(2)通過(guò)將所說(shuō)六氫苯并[f]喹啉酮與化合物R-EAA在堿存在下，在一種惰性或基本惰性溶劑或溶劑混合物中使六氫苯并[f]喹啉酮N-烷基化而獲得單一的N-烷基化的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的六氫苯并[f]喹啉酮，其中R是C1-C4烷基或未取代或取代的苯(C1-C)烷基和R＇是氫；或(3)將N-烷基化的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的六氫苯并[f]喹啉酮其中R提C1-C4烷基或未取代或取代的苯(C1-C4)烷基與C1-C4烷基碘化物在堿存在下并在惰性或基本上惰性的溶劑或溶劑的混合物中反應(yīng)而獲得單一的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的2-烷基-N-烷基六氫苯并[f]喹啉酮其中R＇是C1-C4烷基和R是C1-C4烷基或未取代或取代的苯(C1-C4)烷基；或(4)使2-烷基-N-(氨基保護(hù)基)去保護(hù)并分離出結(jié)構(gòu)式I的2-烷基六氫苯并[f]喹啉酮其中R是氫和R′為(C1-C4)烷基。
2.按權(quán)利要求1制備結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物的方法，其中R是氫或C1-C4烷基;Z和Z1獨(dú)立地選自氫或甲基;R1是氫或甲基;n為1或2;X是鹵素、CF3、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基或-A-R2其中A是C1-C4亞烷基和R2是C1-C4烷氧基羰基;以下列為條件(a)當(dāng)R是氫時(shí)，X不是氫，;鹵或甲氧基;(b)當(dāng)R是甲基或乙基時(shí)，X不是甲氧基;并且(c)當(dāng)R是甲基時(shí)，R′不是甲基。
3.按權(quán)利要求2制備結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物的方法，其中R是氫或甲基;Z和Z1是氫或甲基;R1是氫或甲基;n是1或2;X是鹵素、CF3、或C1-C4烷基;以下列為條件(a)當(dāng)R是氫時(shí)，X不是鹵素;(b)當(dāng)R是甲基時(shí)，R1不是甲基。
4.按權(quán)利要求3的方法制備8-溴-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮。
5.按權(quán)利要求3的方法制備4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮。
6.按權(quán)利要求3的方法制備8-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮。
7.一種制備藥物制劑的方法，包括將下列結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物或其藥劑上可接受的鹽與一種或多種藥劑上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑混合，
其中R是氫，C1-C4烷基、未取代或取代的苯(C1-C4)烷基;Z和Z′獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基;R1是氫或C1-C4烷基;n為1或2;X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基胺基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫?；1-C6烷基磺?；?A-R2基團(tuán)其中A是C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基;和R2是鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰氨基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺酰基氨基、氨基磺酰基或C1-C4烷基氨基磺?；?。
8.按權(quán)利要求7的方法，其中所說(shuō)的化合物選自8-溴-4-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮或其藥劑上可接受的鹽;4，8-二甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮或其藥劑上可接受的鹽;或者8-甲基-1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮或其藥劑上可接受的鹽。
9.一種美容治療雄激素型禿發(fā)、男性型禿發(fā)或成年人多毛癥的方法，該理想的治療包括給予下列結(jié)構(gòu)式的化合物及其藥劑上可接受的鹽治療，
其中R是氫、C1-C4烷基，未取代或取代的苯(C1-C4)烷基;Z和Z1獨(dú)立地選自氫和C1-C4烷基;R1是氫或C1-C4烷基;n為1或2;X是氫、鹵素、NO2、氰基、CF3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、巰基、C1-C6烷硫基、C1-C6烷基亞硫?；?、C1-C6烷基磺?；?、或-A-R2基團(tuán)其中A是C1-C6亞烷基、C2-C6亞烯基或C2-C6亞炔基;和R2是鹵素、羥基、CF3、C1-C6烷氧基、羧基、C1-C6烷氧基羰基、氨基、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、酰胺基、C1-C4烷基酰胺基、C1-C4二烷基酰胺基、C1-C4烷基磺?；被?、氨基磺酰基或C1-C4烷基氨基磺?；?以下列為條件(a)當(dāng)R是氫，X不是氫、鹵或甲氧基;(b)當(dāng)R是甲基、乙基或芐基時(shí)，X不是甲氧基;并且(c)當(dāng)R是甲基，R1不是甲基。
全文摘要
本發(fā)明涉及1，2，3，4，5，6-六氫苯并[f]喹啉-3-酮，含有那些化合物的藥物制劑和作為甾體物5a-還原酶抑制劑的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1069488SQ92109570
公開(kāi)日1993年3月3日 申請(qǐng)日期1992年8月20日 優(yōu)先權(quán)日1991年8月21日
發(fā)明者K·S·希爾施, C·D·瓊斯 申請(qǐng)人:伊萊利利公司