專利名稱：含有降鈣素的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有降鈣素的新的藥物組合物以及增進(jìn)降鈣素穿過(guò)粘膜被吸收的新方法。
降鈣素是一類具有藥理活性的肽類，其來(lái)源有天然的也有人工合成的，這些肽含有大約32個(gè)氨基酸，能夠調(diào)節(jié)血清鈣水平。
現(xiàn)在，各種降鈣素在市場(chǎng)上均有銷售，包括(例如)自然人、鮭和鰻類降鈣素以及人工合成的鰻類降鈣素類似物-依降鈣素(elcatonin)，這些降鈣素通常用來(lái)(例如)治療佩吉特氏病、祖德克氏病和骨質(zhì)疏松癥等。
用肽類給藥存在一個(gè)不可忽視而眾所周知的問(wèn)題，即口服給藥時(shí)它們?nèi)菀装l(fā)生因酸和酶-誘導(dǎo)的快速降解。由于這個(gè)原因，迄今為止使用最廣泛的給藥方式一直是非腸道給藥，就具有較高分子量的肽類(例如降鈣素)而言，非腸道給藥已是唯一的一種特別有效的給藥方式。
人們普遍認(rèn)識(shí)到注射給藥既不方便又令病人討厭，特別在不得不以一定時(shí)間間隔長(zhǎng)期地反復(fù)用藥時(shí)更是如此，例如用降鈣素治療絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松癥。因此，人們對(duì)于通過(guò)更可接受的非侵入式的另一種可選擇的方式將肽給藥表現(xiàn)出日益增加的興趣，例如以下列的給藥形式舌下、片劑、栓劑、肺內(nèi)粉劑、鼻內(nèi)滴劑、噴霧劑、粉劑、凝膠劑、軟膏劑和植入物。
對(duì)于許多肽，特別是較高分子量的肽來(lái)說(shuō)，一個(gè)重要的問(wèn)題是，它們穿過(guò)生物膜，例如粘膜時(shí)被吸收得不好，因而這種肽的生物利用率往往是非常低的。因此為了找到改善肽的經(jīng)上皮吸收的方法，人們進(jìn)行了大量的研究工作。一種方法是采用輔藥或吸收增強(qiáng)劑，目前已有許多研究報(bào)告發(fā)表，聲稱所報(bào)告的化合物具有增強(qiáng)肽吸收的性質(zhì)。
因此已被提出作為吸收增強(qiáng)劑的有，例如膽堿酯類(EP214898)、?；舛緣A類(EP215697)、醛糖類和葡萄糖胺類(日本專利申請(qǐng)No.61126034)、抗壞血酸酯類和水楊酸酯類(EP37943)、α-環(huán)糊精(EP0094157)、焦谷氨酸酯類(EP173990)、螯合劑(US4，476，116)、乙醇、芐醇和聚乙二醇400(EP371010)。
有許多已發(fā)表的報(bào)告指出，表面活性劑能增強(qiáng)多肽類的吸收，例如參見EP115627(Armour)、GB2，127，689(Sandoz)、US4，548，922(Carey等)以及Hirai等人，Int.J.Pharm.，9，165-184，1981。但是，使用表面活性劑吸收促進(jìn)劑的一個(gè)公認(rèn)的問(wèn)題是，它們可以在給藥部位引起刺激作用和組織損傷(histolesion)。在某些情況下，這種現(xiàn)象的發(fā)生可能取決于用藥量。若長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)經(jīng)常地使用肽給藥，則這些問(wèn)題更為突出。
現(xiàn)在，我們發(fā)現(xiàn)，如果將依降鈣素以與聚乙二醇化的甘油酯(polyglycolysedglyceride)形成的制劑的形式給藥，那么，在直腸給藥后依降鈣素的吸收會(huì)驚人地增強(qiáng)，并且這種制劑不會(huì)引起刺激作用或組織損傷。我們還發(fā)現(xiàn)，將依降鈣素以與聚乙二醇化的甘油酯形成的制劑的形式對(duì)結(jié)腸粘膜給藥時(shí)，其吸收會(huì)驚人的增加。
本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供了一種組合物，它含有降鈣素、聚乙二醇化的甘油酯以及可藥用的載體。
本發(fā)明還提供了一種增強(qiáng)降鈣素透過(guò)粘膜的吸收方法，該方法包括，將降鈣素與有效量的吸收增強(qiáng)劑-聚乙二醇化的甘油酯一起給藥。
本發(fā)明的聚乙二醇化的甘油酯可以是飽和的也可以是不飽和的。飽和的聚乙二醇化的甘油酯可以通過(guò)用聚乙二醇將氫化的植物油部分醇解而得到，或者通過(guò)用聚乙二醇和丙三醇將飽和脂肪酸酯化而得到。不飽和的聚乙二醇化的甘油酯可以通過(guò)用聚乙二醇將非氫化的植物油部分醇解而得到。
可以在本發(fā)明中使用的聚乙二醇化的甘油酯包括由C8-C18甘油酯和聚乙二醇酯構(gòu)成的飽和的聚乙二醇化的甘油酯，例如以商品名Gelucire(如Geluc ire 33/01、35/10、37/02和44/14)和Labrafil(如Labrafil WL2514CS)銷售的產(chǎn)品;由C16-C20甘油酯和聚乙二醇酯構(gòu)成的不飽和的聚乙二醇化的甘油酯，例如以商品名Labrafil銷售的產(chǎn)品(如Labrafil WL2609BS，或M2125CS);以及飽和的聚乙二醇化的C8-C10甘油酯，例如以商品名Labrasol銷售的產(chǎn)品。如果需要，可以使用各種聚乙二醇化的甘油酯的混合物。在本發(fā)明中特別優(yōu)選使用的聚乙二醇化的甘油酯包括Gelucire44/14和Labrasol。
聚乙二醇化的甘油酯占賦形劑總重量的5-100%，例如5-50%。因此它可以用來(lái)作為降鈣素的唯一載體，或者也可以與其它賦形劑混合起來(lái)使用?；诮碘}素的效力可以了解到它在制劑中的重量相對(duì)于賦形劑的重量來(lái)說(shuō)是非常低的。
這里所用的術(shù)語(yǔ)降鈣素意指這樣一類具有藥理活性的多肽，它不僅包括天然存在的降鈣素類，而且還包括其各種衍生物和類似物，例如其中天然存在的一個(gè)或多個(gè)氨酸酯殘基或序列被刪除、取代、逆轉(zhuǎn)或衍生，或者在其中的N或C末端進(jìn)行修飾。
下文中所用的通用術(shù)語(yǔ)降鈣素意指所有這些降鈣素類，不論是天然存在的或者人工合成的。
天然存在的降鈣素類的實(shí)例包括人降鈣素，ChemicalAbstractServiceRegistryNumber(CASRN)＝21215-62-3，其結(jié)構(gòu)是
H-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Met-Leu-Gly--Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-His--Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly--Ala-Pro-NH2;
大鼠降鈣素(CASRN＝11118-25-5)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Met-Leu-Gly--Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Leu-Asn-Lys-Phe-His--Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ser-Ile-Gly-Val-Gly--Ala-Pro-NH2;
鮭降鈣素(CASRN＝47931-85-1)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly--Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln--Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly--Thr-Pro-NH2;
鰻類降鈣素(CASRN＝57014-02-5)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly--Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln--Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly--Thr-Pro-NH2;
還原的雞降鈣素Ⅰ(CASRN＝96157-98-1)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ala-Ser-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly--Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln--Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly--Thr-Pro-NH2;
雞降鈣素Ⅱ(CASRN＝103468-65-1)，其結(jié)構(gòu)為
牛降鈣素(CASRN＝26112-29-8)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser--Ala-Tyr-Trp-Lys-Asp-Leu-Asn-Asn-Tyr-His--Arg-Phe-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu--Thr-Pro-NH2;
豬降鈣素(CASRN＝12321-44-7)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser--Ala-Tyr-Trp-Arg-Asn-Leu-Asn-Asn-Phe-His--Arg-Phe-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu--Thr-Pro-NH2;和綿羊降鈣素(CASRN＝40988-57-6)，其結(jié)構(gòu)為
H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser--Ala-Tyr-Trp-Lys-Asp-Leu-Asn-Asn-Tyr-His--Arg-Tyr-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu--Thr-Pro-NH2;
降鈣素中的一個(gè)或多個(gè)氨基酸已被刪除的實(shí)例有US4，597，900中所描述的脫-[Ser2，Tyr22]-Gly8-降鈣素類和US4，304，692中所描述的脫-[Tyr22]-鮭降鈣素類。
降鈣素中天然存在的序列已被修飾的實(shí)例包括1，7-亞烷基降鈣素類，例如鰻類1，7-亞烷基降鈣素(依降鈣素，CASRN＝60731-46-6)，其結(jié)構(gòu)為
CO-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Val-Leu-Gly--Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln--Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asp-Val-Gly-Ala-Gly--Thr-Pro-NH2;
鮭1，7-亞烷基降鈣素(CASRN＝60864-37-1)，其結(jié)構(gòu)為
CO-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Val-Leu-Gly--Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln--Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly--Thr-Pro-NH2;和人1，7-亞烷基降鈣素(CASRN＝66811-56-1)，其結(jié)構(gòu)為
CO-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-NH-CH-CO-Met-Leu-Gly--Thr-Tyr-Thr-Gln-Asp-Phe-Asn-Lys-Phe-His--Thr-Phe-Pro-Gln-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly--Ala-Pro-NH2.
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，特別優(yōu)選的降鈣素是依降鈣素(CASRN＝60731-46-6)。依降鈣素及相關(guān)的1，7-亞烷基降鈣素的制備和性質(zhì)在英國(guó)專利No.1，516，947(ToyoJozo)中進(jìn)行了描述。
另一種優(yōu)選的降鈣素是天然存在的鰻類降鈣素(CASRN＝57014-02-5)，鰻類降鈣素的制備和性質(zhì)在US3，988，309(Matsuda等)中進(jìn)行了描述。
本發(fā)明的組合物適于采用本領(lǐng)域中已知的，其中藥理活性物質(zhì)經(jīng)粘膜和經(jīng)皮傳遞的方法進(jìn)行給藥，例如，可以將該組合物對(duì)直腸粘膜、陰道粘膜、鼻粘膜、舌下粘膜、頰粘膜和結(jié)腸粘膜以及皮膚進(jìn)行給藥。它們可以采用滴劑、氣霧劑、片劑、膠囊劑、包有腸溶衣的固體口服組合物、糯米紙囊劑、凝膠劑、軟膏劑、植入物、栓劑、陰道栓劑、貼劑和膜等劑型。
特殊的組合物是那些用于對(duì)直腸粘膜和陰道粘膜給藥的組合物。當(dāng)打算將組合物施用于直腸粘膜或陰道粘膜時(shí)，其特殊的劑型包括陰道栓劑、栓劑、溶液泡沫劑(foams)、懸浮液、凝膠劑、軟膏劑、片劑和軟明膠膠囊劑。
用于直腸或陰道給藥的組合物通常是以固體栓劑或者是半固體或液體制劑(裝入軟明膠膠囊中)的形式提供使用。因此，應(yīng)該了解的是，需要選擇適于在這些栓劑或膠囊制劑中使用的賦形劑，必要時(shí)將它們混合起來(lái)，在室溫和體溫條件下制成具有所要求的稠度的制劑。因此，栓劑基質(zhì)可以(例如)包含選自油、脂肪和聚乙二醇的一種或多種組合構(gòu)成，可以將它們與聚乙二醇化的甘油酯混合在一起。所述的油和/或脂肪優(yōu)選包含一種或多種甘油三酯作為主要成分，例如椰子油、分餾的椰子油(如Miglyol)、棕櫚仁油、棕櫚脂肪、可可脂或豬脂。硬脂栓劑基質(zhì)的實(shí)例包括Witepsol和Suppocire。對(duì)于在膠囊制劑中的使用來(lái)說(shuō)，聚乙二醇組分在室溫下優(yōu)選為液態(tài)的，例如聚乙二醇-200、300、400或600，而對(duì)于固體栓劑來(lái)說(shuō)，較高分子量的聚乙二醇是優(yōu)選的。當(dāng)然，各種賦形劑的相對(duì)比例尤其取決于所需制劑的稠度。必要時(shí)，聚乙二醇化的甘油酯可以用作膠囊制劑中唯一載體。
如上所述，適于直腸給藥的組合物是特別優(yōu)選的。
此外，優(yōu)選的還有將活性成分傳遞到結(jié)腸粘膜上的組合物。這些組合物包括用于口服給藥的包有腸溶衣的組合物，這些組合物可以(例如)采用涂覆了包衣劑的膠囊劑的形式，所述的包衣劑確保降鈣素通過(guò)胃，隨后優(yōu)選在結(jié)腸中釋放出來(lái)。適宜的包衣劑包括陰離子聚合物，例如丙烯酸/甲基丙烯酸酯共聚物(如EudragitS)。另一種可選擇的方式是，這種制劑可以以控制釋放傳送的形式摻入，例如按WO90/09168中所述的形式?？梢砸赃@種腸膠囊或控制釋放的形式摻入的賦形劑包括(例如)上述用于直腸和陰道制劑的那些賦形劑。
若打算將這種組合物施用于鼻粘膜，那么具體的劑型是溶液、氣霧劑、滴劑和凝膠劑。
適于頰和吞下給藥的具體劑型是凝膠劑、懸浮液、片劑、貼劑、軟膏劑、溶液、氣霧劑和糯米紙囊劑。
氣霧劑制劑典型地包含由活性物質(zhì)在生理學(xué)上可接受的水溶劑或非水溶劑中形成的溶液或精細(xì)懸浮液，通常是盛在密封的容器中，以單劑量或多劑量形式提供使用。密封的容器可以是配有噴霧裝置使用的藥筒或再裝容器，或者是一個(gè)整體配藥裝置和單劑量鼻吸入器(參見法國(guó)專利申請(qǐng)F(tuán)R2578426)或裝有計(jì)量閥的氣霧劑配藥器，一旦容器內(nèi)的藥物用盡就可以用此閥處理。如果劑型包含氣霧劑配藥器，它將含有推進(jìn)劑，該推進(jìn)劑可以是一種壓縮氣體(如壓縮空氣)或一種有機(jī)推進(jìn)劑(如氟氯烴)。這些氣霧劑配藥器在本領(lǐng)域中是公知的。氣霧劑劑型也可以采用唧筒-噴霧器的形式，而這種形式也是本領(lǐng)域中所公知的。用于配藥氣霧劑噴霧器的噴霧或配藥裝置典型地設(shè)計(jì)成配藥顆粒的尺寸大于10微米。為了確保有效量的組合物與口腔或鼻粘膜保持接觸，而不被吸入體內(nèi)，顆粒的大小以10-160微米為宜。
若該組合物打算以液體噴霧劑的形式給藥時(shí)，可以根據(jù)需要按已知的方法調(diào)整液體組合物的粘度，以保證該組合物是可以噴霧的。
以糯米紙囊劑形式存在的組合物(例如)可以是PCT/GB91/00651中所述的那樣。這些糯米紙囊劑主要由淀粉制成，稠度以0.3-1.0mm為宜。
本發(fā)明的組合物還可以含有水溶劑或者生理學(xué)上可以接受的非水溶劑或液體載體。非水溶劑或載體的實(shí)例有醇類，特別是多羥基醇類(例如丙二醇和丙三醇)以及植物油和礦物油。如果需要，可以將這些非水溶劑或載體與水混合形成(例如)乳劑。
本發(fā)明的制劑還可以含有下列賦形劑，例如抗氧化劑、穩(wěn)定劑、防腐劑(如對(duì)羥基苯甲酸酯類或芐醇)、表面活性劑(如十二烷基硫酸鈉)、粘度調(diào)節(jié)劑、肌肉的正常張力調(diào)節(jié)劑(如氯化鈉、甘氨酸或甘露糖醇)以及緩沖劑。
這些組合物還可以含有甘草酸或甘草酸鹽，例如甘草酸鈉、甘草酸鉀或甘草酸銨。通常，甘草酸鹽的濃度至少是組合物總重量的0.1%(W/W)，適宜的濃度為0.1-10%(W/W)，優(yōu)選的是0.2-5%(W/W)。在栓劑和用于直腸或陰道給藥的軟明膠膠囊中，甘草酸鹽存在的適宜數(shù)量為每100g組合物中含有0.1-2g，甘草酸鹽的優(yōu)選存在量為每100g組合物中含有0.2-1g。
這些組合物還可以含有蛋白酶抑制劑，優(yōu)選非表面活性劑蛋白酶抑制劑，例如EP127535中所述的這類抑制劑。
本發(fā)明的組合物，根據(jù)其中所含的各種不同成分的化學(xué)物理學(xué)性質(zhì)，其pH值可以在寬范圍內(nèi)變動(dòng)。然而，該組合物適宜的pH值范圍是pH為3-8，優(yōu)選pH約為3.5至約為7。為了調(diào)整pH值并使之保持在一適宜的值，該組合物中可以含有一種緩沖劑?？梢允褂玫木彌_劑的實(shí)例包括檸檬酸鹽(如檸檬酸和檸檬酸鈉的混合物)、乙酸鹽、磷酸鹽和己二酸鹽。除了緩沖劑(如上面所述的那些緩沖劑)之外，為了調(diào)整pH值還可以摻入堿金屬氫氧化物(如氫氧化鈉)。
為了避免出現(xiàn)疑問(wèn)，含有降鈣素、Gelucire、甘草酸銨和芐醇組合成分的組合物被排除于本申請(qǐng)之外，這種制劑在國(guó)際申請(qǐng)WO93/06854號(hào)中已有記載。
一般地說(shuō)，上面所述的組合物可以按照公知藥物生產(chǎn)工藝來(lái)制備，例如參見Remington′sPharmaceuticalSciences，17thEdition，MackPublishingCompany，1985。軟明膠膠囊(例如)可以按WO84/03417或EPA122463中所述的方法制造。
本發(fā)明的組合物可用于治療象下面這樣一些疾病佩吉特氏病(畸形性骨炎)、骨質(zhì)疏松癥(包括絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松癥)、祖德克氏病和各種高鈣血癥(參見(例如)thePhysician′sDeskReference，42ndEdition，1988，pages1796-1797)。
在單位劑量的本發(fā)明組合物中藥理活性物質(zhì)的數(shù)量依據(jù)降鈣素的效力大小和組合物的性質(zhì)而有所不同。但是，一般地說(shuō)，供人使用的單位劑量組合物典型地含有1-1000國(guó)際單位(I.U.)的降鈣素。就依降鈣素來(lái)說(shuō)，單位劑量通常含有5-200I.U.。用于結(jié)腸給藥的單位劑量組合物優(yōu)選含有40-800I.U.的依降鈣素。可將這種組合物以含有治療上述疾病有效量的降鈣素的劑量給病人用藥。依降鈣素的典型劑量形式是每天5-200I.U.(或者對(duì)于結(jié)腸給藥是40-800I.U.)，可以以單劑量或分開的劑量給藥，例如連續(xù)每天給藥或隔天給藥。
術(shù)語(yǔ)“國(guó)際單位”指的是人、鮭或豬降鈣素或依降鈣素的適宜的InternationalReferencePreparation(I.R.P)，是由NationalInstituteforBiologicalStandardsandControl，BlancheLane，SouthMimms，PottersBar，Hertfordshire，EN63QG，UnitedKindom制定的。
現(xiàn)在通過(guò)下面實(shí)施例更加詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明。
用于陰道、直腸或口服給藥的制劑實(shí)施例1ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6聚乙二醇600(g)550.0550.0Gelucire44/14(g)400.0400.0蒸餾水(g)44.149.1甘草酸銨(g)5.0-氯化鈉(g)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5氫氧化鈉(mg)350-檸檬酸(mg)18.518.5方法將檸檬酸、檸檬酸鈉二水合物、氯化鈉、蒸餾水、依降鈣素，如果適宜的話還有甘草酸銨和氫氧化鈉，在溫度調(diào)節(jié)在約70℃的水浴中一起混合，然后冷卻到約55℃。在約50～60℃下使Gelucire熔化，加入聚乙二醇600，冷卻至約45～50℃，然后在攪拌條件下加入上述溶液。
將所得混合物冷卻至約30℃，填入軟明膠膠囊中(每個(gè)膠囊1g制劑(a))供直腸或陰道給藥，或者填入軟明膠膠囊中(每個(gè)膠囊300mg制劑(b))用于口服給藥。任選地，也可以將該混合物在真空下干燥，填入硬明膠膠囊中(每個(gè)膠囊290mg制劑(b))用于口服給藥。用于口服給藥的膠囊可以涂覆下列包衣mg/膠囊EudragitS33.0滑石9.0鄰苯二甲酸二丁酯6.6PEG6000.9實(shí)施例2ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6聚乙二醇600(g)580.0580.0Gelucire44/14(g)420.0420.0方法將Gelucire于約50～60℃下熔化，加入聚乙二醇，冷卻至約45～50℃，然后加入依降鈣素。把所得混合物裝入軟明膠膠囊中用于直腸、陰道或口服給藥，對(duì)于口服給藥來(lái)說(shuō)可任選地按實(shí)施例1所述進(jìn)行包衣。另外，對(duì)于口服給藥來(lái)說(shuō)，可將該混合物裝入經(jīng)過(guò)上述包衣的硬明膠膠囊中。
實(shí)施例3ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire35/10(g)950.0950.0蒸餾水(g)44.149.1甘草酸銨(g)5.0-氯化鈉(g)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5氫氧化鈉(mg)350-檸檬酸(mg)18.518.5方法除了不包含聚乙二醇外，按照與實(shí)施例1類似的方法制備制劑。
實(shí)施例4ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire35/10(g)1000.01000.0方法將Gelucire于約50～60℃下熔化，冷卻至約45～50℃，并加入依降鈣素。所得混合物裝入明膠膠囊中，任選地按實(shí)施例1和2所述方式進(jìn)行包衣。
實(shí)施例5ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire37/02(g)950.0950.0蒸餾水(g)49.144.1甘草酸銨(g)-5.0氯化鈉(mg)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5氫氧化鈉(mg)-350.0檸檬酸(mg)18.518.5方法除了不包含聚乙二醇外，按照與實(shí)施例1類似的方法制備制劑。
實(shí)施例6ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire37/02(g)1000.01000.0方法將Gelucire于約50～60℃下熔化，冷卻至約45～50℃，然后加入依降鈣素。把所得混合物裝入明膠膠囊中，任選地按實(shí)施例1和2所述方式進(jìn)行包衣。
實(shí)施例7ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire44/14(g)450.0450.0LabrafilM2125CS(g)500.0500.0蒸餾水(g)44.149.1甘草酸銨(g)5.0-氯化鈉(mg)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5氫氧化鈉(mg)350.0-檸檬酸(mg)18.518.5方法將Gelucire于約50～60℃下熔化，加入Labrafil，冷卻至約45～50℃，按實(shí)施例1所述添加緩沖的依降鈣素溶液。所得混合物按實(shí)施例1所述方式裝入膠囊中。
實(shí)施例8ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Gelucire44/14(g)500.0500.0LabrafilM2125CS(g)500.0500.0方法將Gelucire于約50～60℃下熔化，加入Labrafil，冷卻至約45～50℃，在攪拌條件下加入依降鈣素。按實(shí)施例1和2所述方法把這一混合物裝入膠囊中。
實(shí)施例9ab依降鈣素(mg)7.4,14.8或25,50或100(6500I.U./mg效力)29.6Labrasol(g)950.0950.0蒸餾水(g)49.149.1氯化鈉(mg)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5檸檬酸(mg)18.518.5方法按實(shí)施例1所述制備緩沖的依降鈣素溶液，然后在攪拌下加入Labrasol。所得混合物按實(shí)施例1所述方式裝入膠囊中。
實(shí)施例10ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Labrasol(g)1000.01000.0方法將Labrasol和依降鈣素在攪拌下進(jìn)行混合。所得混合物可以按實(shí)施例1和2中所述方式裝入膠囊中。
實(shí)施例11ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6聚乙二醇600(g)550.0550.0Labrasol(g)400.0400.0蒸餾水(g)49.144.1甘草酸銨(g)-5.0氯化鈉(mg)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5氫氧化鈉(mg)-350.0檸檬酸(mg)18.518.5方法將Labrasol與聚乙二醇進(jìn)行混合。在攪拌條件下加入緩沖的依降鈣素溶液。所得混合物可以按實(shí)施例1中所述方式裝入膠囊中。
實(shí)施例12ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6聚乙二醇600(g)580.0580.0Labrasol(g)420.0420.0方法與實(shí)施例2類似。
實(shí)施例13
ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6LabrafilM2125CS(g)1000.01000.0方法與實(shí)施例10類似。
實(shí)施例14ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6LabrafilWL2609BS(g)1000.01000.0方法與實(shí)施例10類似。
實(shí)施例15ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Labrasol(g)667.0667.0Gelucire44/14(g)333.0333.0方法與實(shí)施例8類似。
實(shí)施例16ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6LabrafilWL2609BS(g)500.0500.0Gelucire35/10(g)500.0500.0方法與實(shí)施例8類似。
實(shí)施例17ab依降鈣素(mg)7.4,14.825,50或100(6500I.U./mg效力)或29.6Labrasol(g)500.0500.0Gelucire35/10(g)500.0500.0方法與實(shí)施例8類似。
用于直腸或陰道給藥的栓劑實(shí)施例18依降鈣素(mg)15.4(6500I.U./mg效力)硬脂肪(g)750.0LabrafilWL2514CS(g)750.0方法將硬脂肪和Labrafil在50～60℃下熔化并混合，冷卻至45～50℃，在攪拌條件下加入依降鈣素。將所得物料注入栓劑模中，冷卻至室溫，得到栓劑(每個(gè)1.5g)。
用于鼻、舌下、頰、直腸或陰道給藥的溶液實(shí)施例19abc依降鈣素(mg)369073803690(6500I.U./mg效力)Gelucire44/14(g)8.08.08.0聚乙二醇600(g)11.011.011.0檸檬酸(mg)37.037.037.0檸檬酸鈉二水合物(mg)463.0463.0463.0氯化鈉(mg)600.0600.0600.0芐醇(g)2.0--對(duì)羥基苯甲酸甲酯(mg)-130.0-對(duì)羥基苯甲酸丙酯(mg)-20.0-氯芐烷胺(mg)--10.0蒸餾水適量至100ml1N氫氧化鈉適量至pH6方法在約35-40℃溫度下，將除依降鈣素外的所有組分溶解于80%的水中，將所得溶液冷卻至室溫。把依降鈣素溶解于剩下的20%的水中。在攪拌條件下將這兩種溶液混合起來(lái)。對(duì)于鼻、舌下或頰的使用來(lái)說(shuō)，該溶液可以以100μl的體積給藥，而對(duì)于直腸或陰道使用來(lái)說(shuō)則以200-400μl體積給藥。
用于經(jīng)皮給藥的劑型實(shí)施例20依降鈣素(mg)依降鈣素(mg)(6500I.U./mg效力)6.06.0Gelucire44/14或35/10(g)8.08.0聚乙二醇600(g)11.011.0甘草酸銨(g)2.0-聚羧乙烯934(g)2.02.0檸檬酸(mg)37.037.0檸檬酸鈉二水合物(mg)463.0463.0氯化鈉(mg)600.0600.0蒸餾水適量至100g1NNaOH適量至pH6方法在溫度調(diào)節(jié)在約70℃的水浴中，將Gelucire、聚乙二醇600、檸檬酸、檸檬酸鈉二水合物、氯化鈉、聚羧乙烯934、氫氧化鈉、甘草酸銨(如果使用的話)和部分蒸餾水混合到一起以制備實(shí)施例20的制劑。所得凝膠冷卻至室溫，然后向其中加入依降鈣素在剩余的部分蒸餾水中形成的溶液。最終得到的凝膠填入每個(gè)500mg的貼劑中。
用于直腸或陰道給經(jīng)的制劑實(shí)施例21依降鈣素(mg)(6500I.U./mg效力)14.8聚乙二醇600(g)550.0
Gelucire44/14(g)400.0蒸餾水(g)49.449氯化鈉(mg)300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5檸檬酸(mg)18.5氫氧化鈉(mg)1.0方法在溫度約為55℃的水浴中將檸檬酸、檸檬酸鈉二水合物、氯化鈉、氫氧化鈉、蒸餾水和依降鈣素混合到一起。把Gelucire于約50～60℃下熔化，加入聚乙二醇600。將所得混合物冷卻至約45～50℃，然后在攪拌下將其加到上述溶液中。
最終得到的混合物待冷卻至約30℃后填入軟明膠膠囊中(每個(gè)膠囊1g)供直腸或陰道給藥。
用于陰道、直腸或口服給藥的制劑實(shí)施例22ab依降鈣素(mg)7.4,14.850,100,200(6500I.U./mg效力)或29.6或400Labrasol(g)500.0500.0聚乙二醇600(g)398.5398.5聚乙二醇200(g)100.0100.0十二烷基硫酸鈉(g)1.51.5方法將依降鈣素溶解在聚乙二醇200中，然后加入所有其它組分，將它們混合到一起。
將所得混合物按實(shí)施例1中所述方式填入膠囊中。
實(shí)施例23依降鈣素(mg)(6500I.U./mg效力)2.55Labrasol(g)500.0聚乙二醇600(g)398.5聚乙二醇200(g)100.0十二烷基硫酸鈉(g)1.5方法按實(shí)施例22中所述方式制備實(shí)施例23的制劑。
實(shí)施例24ab依降鈣素(mg)7.4,14.850,100,200(6500I.U./mg效力)或29.6或400Labrasol(g)500.0500.0聚乙二醇600(g)348.5348.5聚乙二醇200(g)100.0100.0十二烷基硫酸鈉(g)1.51.5蒸餾水(g)44.4544.45甘草酸銨(g)5.05.0氯化鈉(mg)300.0300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5231.5檸檬酸(mg)18.518.5
方法在溫度約為55℃的水浴中將檸檬酸、檸檬酸鈉二水合物、氯化鈉、甘草酸銨、蒸餾水和依降鈣素混合到一起。再把聚乙二醇200、聚乙二醇600和Labrasol混合到一起。把這兩種混合物摻混到一起并冷卻到室溫。
最終得到的混合物可以按實(shí)施例1中所述方式填入膠囊中。
實(shí)施例25ab依降鈣素(mg)7.4,14.850,100,200(6500I.U./mg效力)或29.6或400Labrasol(g)857.0857.0聚乙二醇200(g)33.033.0十二烷基硫酸鈉(g)10.010.0蒸餾水(g)50.050.0己二酸(g)40.040.0乙酸鈉三水合物(g)10.010.0方法將依降鈣素溶解在聚乙二醇200和蒸餾水中，然后加入Labrasol、十二烷基硫酸鈉、己二酸和乙酸鈉三水合物并將它們混合到一起。
最終得到的混合物可以按實(shí)施例1中所述方式填入膠囊中。
試驗(yàn)A通過(guò)下述試驗(yàn)，證明了聚乙二醇化的甘油酯(Gelucire44/14)的增強(qiáng)吸收的性質(zhì)。
將實(shí)施例21的所報(bào)告的含40%Gelucire44/14的制劑以及具有下列成分的、不含Gelucire的參比制劑分別對(duì)兔子進(jìn)行藥效活性試驗(yàn)(即降低血清中鈣濃度的試驗(yàn))，然后加以比較。
參比制劑依降鈣素(mg)(6500I.U./mg效力)14.8聚乙二醇600(g)880.0聚乙二醇4000(g)70.0蒸餾水(g)49.449氯化鈉(mg)300.0檸檬酸鈉二水合物(mg)231.5檸檬酸(mg)18.5氫氧化鈉(mg)1.0(加入聚乙二醇4000為的是使參比制劑具有與實(shí)施例21的制劑相類似的粘度;制備方法與實(shí)施例21的制備方法相似)。
借助一個(gè)小導(dǎo)管，以0.5g/kg體重(相當(dāng)于約50I.U./kg的用量，將上述制劑對(duì)幾組6只清醒的、禁食過(guò)夜的新西蘭兔(體重約2kg)進(jìn)行直腸給藥。
將產(chǎn)物給藥后0、60、120、180和240分鐘，從每只兔的耳側(cè)靜脈采集血樣，在所取得的血樣上測(cè)定血清鈣濃度(使用原子吸收分光光度計(jì)VARIAN30/40)。
結(jié)果表示與基準(zhǔn)值(時(shí)間為0)相比較的血清鈣濃度的剩余百分?jǐn)?shù)，列于表1中。
表1與基準(zhǔn)值相比較的血清鈣的剩余百分?jǐn)?shù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差)0分鐘60分鐘120分鐘180分鐘240分鐘實(shí)施例21的制劑100.077.281.692.894.7±2.5±2.6±1.3±1.3不含Gelucire的參比制劑100.083.793.995.197.5±2.8±1.1±2.6±3.6試驗(yàn)B通過(guò)本試驗(yàn)證明聚乙二醇化的甘油酯(Labrasol)的增強(qiáng)吸收的性質(zhì)。
用實(shí)施例23中所述含50%Labrasol的制劑和不含Labrasol的參比制劑(Labrasol完全被聚乙二醇600所取代)分別對(duì)大鼠進(jìn)行藥效活性試驗(yàn)，即降低血清中鈣濃度的試驗(yàn)。
借助一個(gè)小的導(dǎo)管，以2ml/kg體重的體積(相當(dāng)于大約30I.U./kg)，將上述制劑對(duì)幾組4只清醒的、禁食過(guò)夜的SpragueDawley大鼠(體重約220±20g)進(jìn)行結(jié)腸內(nèi)給藥。
將產(chǎn)物給藥后0、60和120分鐘，從每只大鼠的尾靜脈采集血樣，對(duì)所取得的血樣測(cè)定血清鈣濃度(使用原子吸收分光光度計(jì)VARIAN30/40)。
結(jié)果表示為與基準(zhǔn)值(時(shí)間為0)相比較的血清鈣濃度的剩余百分?jǐn)?shù)，列于表2中。
表2與基準(zhǔn)值相比較的血清鈣的剩余百分?jǐn)?shù)(平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差)0分鐘60分鐘120分鐘實(shí)施例23的制劑100.079.588.2±3.0±5.8不含Labrasol的參比制劑100.096.099.1±2.5±1.權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，它含有降鈣素和聚乙二醇化的甘油酯。
2.權(quán)利要求1的一種組合物，其中所述的聚乙二醇化的甘油酯是飽和的聚乙二醇化的甘油酯。
3.權(quán)利要求2的一種組合物，其中所述的飽和的聚乙二醇化的甘油酯由C8-C18甘油酯類和聚乙二醇酯類構(gòu)成。
4.權(quán)利要求2的一種組合物，其中所述的飽和的聚乙二醇化的甘油酯由C8-C18甘油酯類。
5.權(quán)利要求1的一種組合物，其中所述的聚乙二醇化的甘油酯是不飽和的。
6.權(quán)利要求5的一種組合物，其中所述不飽和的聚乙二醇化的甘油酯由C16-C20甘油酯類和聚乙二醇酯類構(gòu)成。
7.權(quán)利要求1-6中任何一項(xiàng)的一種組合物，其中所述的降鈣素是依降鈣素。
8.權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的一種組合物，它適于直腸、陰道、鼻、舌下、頰、口服、經(jīng)皮或者結(jié)腸給藥。
9.權(quán)利要求8的一種組合物，它包含一種控制釋放傳遞的劑型，該劑型適于口服給藥，隨后在結(jié)腸粘膜區(qū)域內(nèi)釋放出活性成分。
10.權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的一種組合物，它采用含有1-1000LU.降鈣素的單位劑量形式。
11.權(quán)利要求1-10中任何一項(xiàng)的一種組合物，其pH值在約3.5至約7的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物組合物，它們含有降鈣素和聚乙二醇化的甘油酯。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1091314SQ9311848
公開日1994年8月31日 申請(qǐng)日期1993年10月18日 優(yōu)先權(quán)日1992年10月20日
發(fā)明者L·齊奧丁尼, G·蘭卡蒂, T·馮尼奧 申請(qǐng)人:史密絲克萊恩比徹姆制藥股份公司