專利名稱：苯并二氮雜衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作對促胃酸激素和/或CCK-B受體有拮抗作用的藥物的苯并二氮雜_衍生物及其制備方法。
在用作中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)“苯并二氮雜卓受體”激動劑的影響神精的藥物的發(fā)展過程中，公開過許多苯并二氮雜_衍生物，最近又評述了苯并二氮雜卓可作為CCK-A(縮膽囊素-A)和CCK-B受體的拮抗劑，而且還報(bào)道了對CCK-B受體有選擇拮抗作用的那些化合物在施用五肽促胃酸激素時(shí)能夠減少胃酸的分泌(V J Lotti&RS L Chang，Eur JPharmacol 1989，162，273-280)，例如，用作CCK-B受體拮抗劑的苯并二氮雜_衍生物的實(shí)例公開于USP№.4,820,834中。
大部分本發(fā)明化合物是新的，它們不同于USP№4,820,834中記載的化合物，特別是在苯并二氮雜_環(huán)的1-和5-位的取代基的性質(zhì)方面。本發(fā)明包括比USP№4,820,834中所述的化合物具有更好藥理學(xué)性質(zhì)的化合物，本發(fā)明的優(yōu)選化合物比以前記載的化合物對CCK-B受體具有更高的親和力和/或能更選擇性地區(qū)別CCK-B和CCK-A受體。
本發(fā)明提供下式X的苯并二氮雜_衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中(a)R4是烷基，環(huán)烷基或芳基；(b)取代基R10的實(shí)例是F，Cl，Br，I，OH，CH3，OCH3，NO2，NHCHO，CO2H，CN和NR11R12，其中R11和R12獨(dú)立地選自H和烷基(C1-C5)，或者NR11R12一起形成環(huán)結(jié)構(gòu)XI 其中a是1-6；(c)R2是含至少兩個(gè)雜原子的取代或未取代的5-或6-元芳雜環(huán)，其中至少一個(gè)雜原子是氮原子。本文中‘烷基’和‘環(huán)烷基’優(yōu)選至多8個(gè)碳原子，當(dāng)R4是芳基時(shí)，它可以是單取代或雙取代的，優(yōu)選單取代的。
優(yōu)選的R10取代基處于苯環(huán)的間位。
優(yōu)選的R2是未取代或單取代的含兩個(gè)雜原子的雜環(huán)，其中一個(gè)雜原子是氮原子。
最優(yōu)選的R4是叔丁基或2-，3-或4-甲基苯基。
最優(yōu)選的R2選自2-嘧啶，4-嘧啶，2-哌嗪，6-噠嗪，2-噻唑，4-噻唑，2-惡唑，4-惡唑，3-吡唑，5-吡唑，3-異惡唑，3-異噻唑，2-咪唑，4-咪唑，5-咪唑，2-(N-甲基)咪唑，4-(N-甲基)咪唑和5-(N-甲基)咪唑。
本發(fā)明的化合物至少有一個(gè)立體異構(gòu)中心，因此存在光學(xué)異構(gòu)體，應(yīng)該理解為這些異構(gòu)體無論單獨(dú)存在或以混合物存在都屬于本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明的優(yōu)選化合物中，苯并二氮雜_3-位的絕對構(gòu)型是R(如式XII) 本發(fā)明的優(yōu)選化合物及其鹽列于下表，其中的某些如以下指出的個(gè)別關(guān)注的化合物有實(shí)施例。表A1.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例3)；2.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例4)；3.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例1)；4.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例2)；5.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例7)；6.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例8)；7.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例10)；8.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例11)；9.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例13)；10.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；11.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲12.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；13.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲14.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；15.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲16.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；17.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例5)18.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例6)；19.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲(實(shí)施例9)20.N-((3RS)-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-1-(4-甲基苯基羰基甲基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例12)；本發(fā)明化合物能按照下式通常方法制備(反應(yīng)式1)當(dāng)R2含NH作為雜環(huán)的一部分時(shí)，對于反應(yīng)式1所述的部分或全部合成方法需要適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基，并且需要最后的脫保護(hù)步驟，如以前報(bào)道的，氨基苯甲?；峡捎梦墨I(xiàn)方法制備；以前未報(bào)道的原料用標(biāo)準(zhǔn)方法制備，詳見下述在苯并二氮雜卓作為CCK-A，CCK-B或促胃酸激素受體拮抗劑的報(bào)道中，最經(jīng)常遇到的取代方法是使3-乙酰氨基-5-芳基-2，3-二氫-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮在N-1位取代，以前所述的3-氨基-5-芳基取代的2，3-二氫-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮或者通過亞硝化并還原3-未取代的苯并二氮雜卓引入3-氨基官能基，或者從α-烷基硫代甘氨酸衍生物開始并使其環(huán)化直接得到被保護(hù)的3-氨基苯并二氮雜卓。當(dāng)5-芳基取代基不是(取代的)苯基時(shí)，亞硝化/還原方法是不行的，而烷基硫代甘氨酸方法使用使人不愉快的烷基硫醇并需要毒性很高的汞鹽調(diào)節(jié)，本發(fā)明方法避免了使用環(huán)境不能接受的試劑并且對于任何5-芳基取代基一般均可適用。反應(yīng)式1 試劑(a)id="d17"> NH3，MeOH；(c)NH4OAc，AcOH；(d)NaH，DMF；(e)R4COCH2Br；(f)HBr，DCM orH2，Pd/C；(g)
本發(fā)明提供了制備通式V的苯并二氮雜卓及藥學(xué)上的活性鹽的方法，它包括用芳香的或雜環(huán)氨基酮(III)偶合任意取代的N-保護(hù)α-(1-苯并三唑基)甘氨酸衍生物(II)，然后使中間體(IV)和氨反應(yīng)，再酸催化環(huán)化所得氨-酮。 其中R2是任意取代的芳香碳環(huán)或雜環(huán)基；R8是低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芳烷基，芳基或雜芳基；R9是H，低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)或CH2COR4，其中R4是烷基(優(yōu)選C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(優(yōu)選C3-C8)，或任意取代的芳基，雜芳基或飽和雜環(huán)基；X1是H，烷基(C1-C3)，烷氧基(C1-C3)，F(xiàn)，Cl，Br；Y是-O-，-NH-，或單鍵；優(yōu)選R8是低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芐基，苯基或雜芳基；R9是H或低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)；X1是H；。Y是-O-本發(fā)明的方法當(dāng)然能夠得到上述式X化合物，包括它們特別優(yōu)選的化合物。
其中的芳基是指芳環(huán)并包括碳環(huán)和雜環(huán)芳基。
本發(fā)明方法得到的或用上述方法的產(chǎn)品容易制備的苯并二氮雜卓包括式I化合物及鹽 其中(a)-NHR1是烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芳烷基，芳基或雜芳基氨基甲酸酯基或者R1是H或-CONHR5，其中R5是烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芳香碳環(huán)或雜環(huán)基或芳烷基；(b)R2是任意取代的芳香碳環(huán)或雜環(huán)基；(c)R3是H，烷基(C1-C6，線型或支鏈)或CH2COR4，其中R4是低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芳基(例如苯基)，雜芳基或飽和雜環(huán)基；優(yōu)選R1是H，叔丁氧羰基，甲氧羰基，乙氧羰基或芐氧羰基或-CONHR5。
優(yōu)選R2是吡啶基，噠嗪基，嘧啶基，哌嗪基，噻唑基，異噻唑基，甲基-咪唑基，惡唑基，異惡唑基，任意保護(hù)的吡唑基或咪唑基，或任意取代的苯基。
優(yōu)選的R3是H或CH2COR4。
優(yōu)選的R4是叔丁基，環(huán)烷基(C3-C7)或2-，3-，或4-甲基苯基。
優(yōu)選的R5是3-位取代的苯基，取代基選自F，Cl，Br，OH，OCH3，NO2，CH3，CO2H，SO3H，四唑基及NR6R7，其中R6和R7分別是H，C1-C3烷基，可識別的N保護(hù)基或與N一起形成3-7元環(huán)。
最優(yōu)選的R2是2-，3-，或4-取代的吡啶基或苯基。
最優(yōu)選的R5是3-位取代的苯基，取代基選自CH3和NR6R7，其中R6和R7分別優(yōu)選自H，CH3，乙基，甲酰基，叔丁氧羰基及芐氧羰基，或者是亞烷基鏈和N一起形成3-6元環(huán)。
式V和式I化合物及其鹽至少有一個(gè)立體異構(gòu)中心，因此存在光學(xué)異構(gòu)體，應(yīng)該理解為這些異構(gòu)體的制備，無論是個(gè)別的或是混合物，均屬于本發(fā)明的范圍。式X，V和I化合物和有機(jī)或無機(jī)酸，在某些情況下和堿能形成鹽，這些鹽的實(shí)例包括氯化物，硫酸鹽及乙酸鹽，或者鈉和鉀鹽，這些鹽及其制備也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
式X，V和I化合物及其鹽包括能作為CCK-B和/或促胃酸激素受體拮抗劑并能用作藥物的化合物，治療受促胃酸激素控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病。上述疾病包括胃和十二指腸潰瘍，胃炎，反流食管炎，胃癌和結(jié)腸癌以及Zollinger-Ellison綜合癥，不存在由于CCK-A受體相互作用引起的副反應(yīng)。這些藥物可用于治療受中樞的CCK-B受體控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病(例如減少焦慮和調(diào)節(jié)食欲)。
式V或I的優(yōu)選化合物及其鹽列于下表，其中指出的個(gè)別化合物用實(shí)施例說明上述方法的范圍和用途。表B1.(3RS)-(乙氧羰基)氨基-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例16)；2.(3RS)-(乙氧羰基)氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例17)；3.(3RS)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-(1H)-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例18)；4.(3R)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-(1H)-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例19)；5.(3S)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-(1H)-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例20)；6.N((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-((3-二甲氨基)苯基)脲(實(shí)施例22)；7.N((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(N-甲?；?N-甲基氨基)苯基)脲(實(shí)施例25)；8.N((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-((3-甲氨基)苯基)脲(實(shí)施例26)；9.N((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-氨基苯基)脲(實(shí)施例28)；10.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例1C)；11.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例1D)；12.(3RS)-3-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例1E)；13.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例1F)；14.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例2)；15.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例3B)；16.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例3C)；17.(3RS)-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例3D)；18.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例3E)；19.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例4)；20.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例5D)；21.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例5E)；22.(3RS)-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例5F)；23.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例5G)；24.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例6)；25.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-2-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例7E)；26.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-2-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例7F)；27.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-2-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例7G)；28.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例7H)；29.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-2-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例8A)；30.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例8B)；31.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-2-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲(實(shí)施例9B)；32.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲(實(shí)施例9C)；33.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-4-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例10F)；34.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-4-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例10G)；35.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-4-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例10H)；36.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例10I)；37.(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑-4-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；38.(3RS)-1-叔丁基羰基氨基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例11B)；39.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡唑-3-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例13G)；40.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡唑-5-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例13H)；41.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡唑-3-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例13I)；42.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)吡唑-5-基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例13J)；43.(3RS)-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例13K)；44.N-(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例13L)；45.(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例32)；46.(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例33)；47.N-(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(實(shí)施例34)；48.N-(3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-哌啶基)苯基)脲(實(shí)施例40)；49.(3RS)-1-叔丁基羰基氨基-2，3-二氫-2-氧代-5-苯基-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例41)；50.((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-比啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(實(shí)施例42)；51.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲氨基苯基)脲(實(shí)施例52)；以及上述化合物7和8的N-((3R)-異構(gòu)體。
本發(fā)明優(yōu)選的方法如反應(yīng)式2反應(yīng)式2
其中R2定義如上；R8是烷基(C1-C6)，環(huán)烷基(C3-C8)任意取代的芐基或任意取代的芳基；R9是H或烷基(C1-C6)；X1是H，烷基(C1-C3)，烷氧基(C1-C3)或鹵素；Y是-O-，-NH-或單鍵。優(yōu)選的R8是甲基，以及，叔丁基或芐基；R9是H或甲基；X1是H及Y是-O-。
在步驟(i)中，被保護(hù)的α苯并三唑甘氨酸衍生物II和胺III進(jìn)行縮合，使用任何公知的形成酰胺鍵的方法可完成這一步驟。可以將酸轉(zhuǎn)變成其活性衍生物(例如通過用二氯亞硫?；虿蒗Ｂ忍幚磙D(zhuǎn)變成酰氯；和例如氯代甲酸乙酯或氯代甲酸異丁酯反應(yīng)生成混合酸酐，用例如乙酸酐或二環(huán)己基碳化二亞胺處理得到對稱酸酐)，或者和胺III混合并將混合物用縮合劑處理?？s合劑可選自但不限于碳化二亞胺(例如二環(huán)己基碳化二亞胺，N-乙基-N′-二甲氨基丙基碳化二亞胺)，BOP-Cl(雙(2-氧代-3-惡唑烷基)磷酰氯)EEDQ(2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氫喹啉)，PyBroP(溴代-三-吡咯烷-磷六氟磷酸酯)以及HBTU(O-苯并三唑基-四甲基異脲鎓六氟磷酸酯。在某些上述試劑中加入一種催化劑是有利的，這些催化劑是公知的，例如包括DMAP(4-二甲氨基吡啶)，羥基苯并三唑及五氟苯酚，偶爾往反應(yīng)中加堿也是必要的。在這種情況中堿一般是有機(jī)堿如三乙胺或N-甲基嗎啉。反應(yīng)的溶劑是任何不和所有試劑反應(yīng)的有機(jī)溶劑或它們的混合物，合適的溶劑包括，但不限于二氯甲烷，氯仿，乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，四氫呋喃和甲苯。優(yōu)選使用碳化二亞胺處理II和III的混合物進(jìn)行反應(yīng)，最優(yōu)選使用二環(huán)己基碳化二亞胺或N-乙基-N′-二甲氨基丙基碳化二亞胺，在DMAP作為催化劑存在下用二氯甲烷作溶劑。根據(jù)所用試劑性質(zhì)及存在的取代基，反應(yīng)進(jìn)行的溫度為-80℃至所用溶劑沸點(diǎn)之間，優(yōu)選在-20℃至溶劑沸點(diǎn)之間進(jìn)行，最優(yōu)選-5℃至25℃。
酰胺IV例如可用結(jié)晶或色譜法提純，但一般并不必要，優(yōu)選將粗產(chǎn)品IV直接用于步驟(ii)。
在步驟(ii)中，苯并三唑基酰胺IV首先和氨反應(yīng)，用液體氨不用溶劑或者將氨溶在溶劑中，溶劑是水或優(yōu)選有機(jī)溶劑如醇，THF，乙醚或二惡烷，更優(yōu)選的溶劑是醇，最優(yōu)選甲醇或乙醇或它們的混合物(如工業(yè)乙醇)。
在步驟(ii)的第二部分中，環(huán)化和氨反應(yīng)的產(chǎn)物得到苯并二氮雜卓V，優(yōu)選用酸處理進(jìn)行反應(yīng)，更優(yōu)選用有機(jī)羧酸，最優(yōu)選乙酸。加入乙酸銨也是有利的，當(dāng)酸是液體時(shí)，此反應(yīng)不必使用溶劑；當(dāng)酸是固體或其他反應(yīng)組份不溶解在液體中時(shí)，可使用溶劑?？捎萌魏斡袡C(jī)溶劑，在用乙酸的優(yōu)選情況下，不使用溶劑并且不加入其他物質(zhì)。
步驟(ii)的每一部分均可在-80℃至溶劑沸點(diǎn)之間進(jìn)行，優(yōu)選-20℃至溶劑沸點(diǎn)之間，第一部分優(yōu)選在-5℃至30℃之間進(jìn)行，第二部分優(yōu)選10℃至30℃。
經(jīng)常苯并二氮雜卓V不作為最終活化的CCK或促胃酸激素受體拮抗劑，而是用作合成這種化合物的中間體，優(yōu)選的這種轉(zhuǎn)換于反應(yīng)式3和4中說明反應(yīng)式3 其中R4定義如上，X2選自鹵原子(氯化物，溴化物，碘化物)或有機(jī)磺酸(如甲磺酸，對甲苯磺酸，三氟甲磺酸)，優(yōu)選的X2是鹵素，最優(yōu)選溴。
在步驟(iii)中，苯并二氮雜卓VI被烷基化，這需要使用堿使反應(yīng)中的氮原子脫質(zhì)子，或者在加入烷基化試劑前將堿加到VI中進(jìn)行脫質(zhì)子，或者將堿加到VI和烷基化試劑的混合物中，所用的堿可用任何強(qiáng)堿，優(yōu)選金屬氫化物(例如氫化納或氫化鉀)，金屬烷氧化物(例如甲氧基鈉，叔丁氧基鉀)，金屬胺化物(例如氨基鈉)或金屬氫氧化物(例如氫氧化鈉)，最優(yōu)選氫化納。反應(yīng)的溶劑是任何和所用的堿相容的溶劑，優(yōu)選偶極非質(zhì)子溶劑，最優(yōu)選二甲基甲酰胺，另一優(yōu)選的溶劑是水和有機(jī)溶劑如甲苯的混合物。上述溶劑混合物需要使用相轉(zhuǎn)移催化劑(選自任何已知的相轉(zhuǎn)移催化劑)并適用于用氫氧化鈉作為堿的時(shí)候。反應(yīng)于-80℃至溶劑沸點(diǎn)之間的任何溫度下進(jìn)行，優(yōu)選-10℃至30℃。
在步驟(iv)中，氨基甲酸酯保護(hù)基被除去，適合的條件依賴于R8的性質(zhì)，通常是公知的，例如用強(qiáng)酸(如HCl，HBr，CF3CO2H)強(qiáng)堿(如NaOH)及用催化劑氫化(例如Pt/C，Pd/C)，對于大多數(shù)優(yōu)選的R8所用的一套優(yōu)選條件是在二氯甲烷中使用HBr。反應(yīng)式4 其中R5定義如上。
外消旋的胺VIII可通過拆分胺的任何公知方法拆分為兩個(gè)對映體，優(yōu)選在單個(gè)手性酸存在下用結(jié)晶方法拆分，可從任何公知的手性酸中選擇這種酸，例如酒石酸，乳酸及樟腦磺酸，優(yōu)選扁桃酸，最優(yōu)選(R)扁桃酸，此時(shí)當(dāng)R2是2-吡啶基時(shí)，可結(jié)晶出(R)氨基苯并二氮雜卓的鹽。
胺VIII以及優(yōu)選的單個(gè)對映體VIII能和異氰酸酯R5NCO反應(yīng)得到脲IX，該反應(yīng)優(yōu)選在溶劑中進(jìn)行，優(yōu)選不和反應(yīng)組份反應(yīng)的普通有機(jī)溶劑，例如甲苯，THF，二氯甲烷和乙酸乙酯，最優(yōu)選氯代烴如二氯甲烷。
反應(yīng)在-80℃至溶劑沸點(diǎn)之間的任何溫度下進(jìn)行，優(yōu)選在-20℃至溶劑沸點(diǎn)之間進(jìn)行，最優(yōu)選-10℃至30℃。
當(dāng)雜環(huán)氨酮III含活性氮原子時(shí)，該原子在合成(i)-(vi)過程中可用適當(dāng)?shù)姆枷愕颖Ｗo(hù)基(例如三甲基甲硅烷基乙氧甲基)保護(hù)，該基團(tuán)能在以后的階段或優(yōu)選在步驟(i)-(vi)之后脫保護(hù)，以便得到所需的苯并二氮雜卓衍生物。
本發(fā)明用下述非限制性實(shí)施例進(jìn)一步說明，在實(shí)施例中用r.t表示室溫。
實(shí)施例1N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物3) 1A2-氨基苯基-1-甲基-2-咪唑基酮按照Fryer et al的方法(Synth Commun 1993，23，985)制備標(biāo)題化合物，從DCM/己烷中游離出黃色針狀物(1.72g，85％)，m.p88-90℃，Lit.91-92℃。1B2-(1-苯并三唑基)-2-芐氧羰基氨基乙酸按照Katrisky的方法(J Org Chem 1990，55，2206)制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)率81％。1C(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮實(shí)施例1A的氨基酮(1.015g，5mmol)和實(shí)施例1B的苯并三唑衍生物(2.28g，7mmol)于0℃懸浮于DCM(20ml)中，分步用水溶性碳化二亞胺(1.34g，7mmol)和DMAP(100mg)處理，將混合物于0.5小時(shí)溫?zé)嶂潦覝?，倒?％KHCO3中，用EtOAc(2×50ml)萃取，合并的萃取液用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，殘留物用硅膠色譜法提純(洗脫液75/25v/v，乙酸乙酯/己烷)，得到黃色泡沫狀物(2.20g，86％)，將其溶在冰冷卻的飽和氨/甲醇溶液(30ml)中，塞好并于室溫?cái)嚢?小時(shí)，蒸發(fā)混合物，于室溫用10％乙酸銨/乙酸溶液處理1小時(shí)，蒸發(fā)所得混合物，殘留物在乙酸乙酯和1M氫氧化鈉之間分配，過濾有機(jī)相(Whatman IPS相分離器)，蒸發(fā)，從乙酸乙酯/己烷中結(jié)晶出產(chǎn)品，為白色固體(905mg，總轉(zhuǎn)化率47％)1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.94(1H，br.s.)；7.5-7.0(m，10H)；6.68(2H，m)；5.2-5.0(3H，m)；3.92(3H，s)ppm.1D(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將實(shí)施例1D的苯并二氮雜卓(850mg，2.174mmol)于0℃氮?dú)夥障氯苡贒MF(8ml)中，攪拌下用NaH(85mg，油中80％分散體，1.3eq)處理該溶液1小時(shí)，加入1-溴代頻哪酮(506mg，1.3eq)于室溫繼續(xù)攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)混合物，在鹽水和乙酸乙酯之間分配殘留物，過濾有機(jī)相(Whatman IPS相分離器)，蒸發(fā)，殘留物用硅膠色譜法提純(洗脫液∶乙酸乙酯)，用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶(610mg，58％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.62(1H，m)；7.50(1H，m)；7.4-7.0(9H，m)；6.64(1H，d，J＝8Hz)；5.41(1H，d，J＝8Hz)；5.16(2H，s)；5.02(1H，d，J＝17Hz)；4.32(1H，d，J＝17Hz)；3.93(3H，s)；1.22(9H，s)ppm.1E(3RS)-3-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將實(shí)施例1D的苯并二氮雜卓于0℃溶于DCM(20ml)中，溶液用干燥的HBr飽和，塞好并于0℃攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)混合物，于1MHCl和乙醚之間進(jìn)行分配，堿化水相，用氯仿萃取(3×50ml)過濾氯仿萃取液(Whatman IPS濾紙)，蒸發(fā)得到淡黃色泡沫狀物(420mg，96％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.62(1H，m)；7.48(1H，m)；7.26(1H，m)；7.1-7.0(3H，m)；5.08(1H，d，J＝16Hz)；4.61(1H，s)；4.29(1H，d，J＝16Hz)；4.02(3H，s)；2.37(2H，br.s.)；1.25(9H，s)ppm.1F(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲將實(shí)施例1E的苯并二氮雜卓(210mg，0.5915mmol)溶于DCM(3ml)中，用異氰酸間甲苯基酯(0.085ml，0.65mmol)于室溫處理1小時(shí)，將混合物冷至0℃，用己烷(8ml)稀釋，收集所得沉淀，得到標(biāo)題化合物(250mg，87％)。1H NMR(270MHz，CD3OD)δ7.7-7.1(9H，m)；6.80(1H，d，J＝8.5Hz)；5.48(1H，s)；5.08(1H，d，J＝16.5Hz)；4.81(1H，d，J＝16.5Hz)；3.94(3H，s)；2.28(3H，s)；1.25(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝487.4.
實(shí)施例2N-(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲 將實(shí)施例1E的苯并二氮雜卓(210mg，0.5915mmol)溶于DCM(5ml)中，加入到m-(二甲氮基)苯甲酸(305mg)，三乙胺(360μl)和二苯基磷?；B氮化物(0.71g)的混合物中，于氮?dú)夥栈亓飨录訜?小時(shí)，蒸發(fā)，于室溫?cái)嚢杷没旌衔?小時(shí)，蒸發(fā)，色譜法提純(洗脫劑乙酸乙酯---6％甲醇/乙酸乙酯)從MeCN中重結(jié)晶產(chǎn)品，得到無色固體(254mg，83％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.63(1H，d，J＝8Hz)；7.48(1H，m)；7.3-6.9(8H，m)；6.42(2H，m)；5.61(1H，d，J＝7.5Hz)；4.95(1H，d，J＝17.7Hz)；4.28(1H，d，J＝17.7Hz)；3.96(3H，s)；2.90(6H，s)；1.22(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝516.5.
實(shí)施例3N-(3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物1) 3A 2-氨基苯基-2-噻唑基-酮按照Kaish et al.的方法(J Heterocyclic Chem1975 12 49)分三步制備。3B(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮按照實(shí)施例1C的方法，使用2-氨基苯基2-噻唑基酮(2.04g，10mmol)制備，用乙酸乙酯重結(jié)晶后得到淡黃色結(jié)晶(1.96g，50％)1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.20(1H，s)；8.00(2H，m)；7.70-7.30(9H，m)；6.70(1H，d，J＝8Hz)；5.55(1H，d，J＝8Hz)；5.25(2H，s).3C(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-三唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮按照實(shí)施例1D的方法，標(biāo)題化合物從實(shí)施例3B的苯并二氮雜卓(1.96，5mmol)制備，所得產(chǎn)品用硅膠閃式色譜法提純(洗脫劑50％乙酸乙酯-己烷Fr)，得到標(biāo)題化合物，淡黃色固體(2.00g，82％)1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.80-7.05(11H，m)；6.55(1H，d，J＝8Hz)；5.45(1H，d，J＝8Hz)；5.05(2H，s)；4.95(1H，d，J＝17Hz)；4.35(1H，d，J＝17Hz)；1.20(9H，s).3D(3RS)-3-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮按照實(shí)施例1E的方法，標(biāo)題化合物從實(shí)施例3C的苯并二氮雜卓(1.00g，2.04mmol)制備，處置后得到黃色固體產(chǎn)品，無需進(jìn)一步加工即可使用(300mg，41％)1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.70-7.05(6H，m)；5.00(1H，d，J＝17Hz)；4.65(1H，s)；4.35(1H，d，J＝17Hz)；2.40(2H，s)；1.20(9H，s).3E N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲按照實(shí)施例1F的方法，標(biāo)題化合物從DCM中的實(shí)施例3D的苯并二氮雜卓(150mg，0.42mmol)和異氰酸間甲苯基酯(0.077ml，0.6mmol)制備，往反應(yīng)混合物中加己烷Fr，得到標(biāo)題化合物，淡黃色結(jié)晶(127mg，62％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.75-7.10(10H，m)；7.60(1H，d，J＝8Hz)；6.65(1H，d，J＝8Hz)；6.00(1H，d，J＝8Hz)；5.00(1H，d，J＝17Hz)；4.35(1H，d，J＝17Hz)；2.30(3H，s)；1.25(9H，s).M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝490.3.
實(shí)施例4N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(化合物2)
按照實(shí)施例2的方法，標(biāo)題化合物從實(shí)施例3D的苯并二氮雜卓(150mg，0.42mmol)制備，粗產(chǎn)品用閃式硅膠色譜法提純(洗脫劑75％乙酸乙酯-己烷Fr.)，從乙腈中結(jié)晶得到標(biāo)題化合物，淡黃色固體(80mg，37％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.00-7.10(10H，m)；6.62(1H，d，J＝8Hz)；6.58(1H，d，J＝8Hz)；5.95(1H，d，J＝8Hz)；5.05(1H，d，J＝17Hz)；4.55(1H，d，J＝17Hz)；3.05(6H，s)；1.35(9H，s).M.S.(+ve FAB)[M+H]+＝519.3.
實(shí)施例5N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物17) 5A苯甲酰甲基哌嗪苯甲酰甲基哌嗪按照Behun和Levine所述的方法(J Am ChemSoc1959，81，5157)從甲基哌嗪和苯甲酸甲酯制備，產(chǎn)率68％(硅膠色譜法提純，洗脫劑60％乙酸乙酯-己烷)。5B 2-苯基-3-哌嗪基吲哚實(shí)施例5A的酮(3.62g，18.4mmol)和新蒸餾的苯肼(1.9ml，18.4mmol)于迪安-斯達(dá)克裝置內(nèi)在回流甲苯中一起攪拌1小時(shí)，直到用t.l.c.證明沒有酮?dú)埩簦尤肼然\(II)(272mg，2mmol)繼續(xù)回流3小時(shí)，蒸發(fā)混合物，在乙酸乙酯和鹽水之間分配，過濾有機(jī)相(Whatman IPS相分離器)并蒸發(fā)，殘留物用硅膠色譜法提純(洗脫劑45％乙酸乙酯-己烷)，得到標(biāo)題化合物，為蓬松褐色固體(2.0g，40％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.45(1H，br.s.)；8.52(1H，t，J＝1.5Hz)；8.43(1H，d，J＝1.5Hz)；8.23(1H，d，J＝1.5Hz)；8.10(1H，m)；7.4-7.2(8H，m)ppm.5C 2-氨基苯甲?；哙簩?shí)施例5B的吲哚(813mg，3mmol)用乙酸中的CrO3處理，如Ockennden和Schofield對于制備3-吡啶基類似物所述(J Chem Soc1953，3440)，得到標(biāo)題化合物的芐基胺，產(chǎn)率40％(色譜法提純，洗脫劑55％乙酸乙酯-己烷)，將產(chǎn)品(370mg，1.22mmol)溶于乙醇(4ml)中，用5MKOH(10ml)于70℃處理4小時(shí)，混合物用鹽水(50ml)稀釋，用氯仿(×3)萃取，過濾合并的萃取液(WhatmanIPS相分離器)，蒸發(fā)，硅膠色譜法提純(洗脫劑40％乙酸乙酯-己烷)，得到標(biāo)題化合物，為黃色結(jié)晶固體(120mg，60％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.02(1H，d，J＝1.7Hz)；8.71(1H，d，J＝1.7Hz)；8.65(1H，t，J＝1.7Hz)；7.63(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；7.33(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；6.75(1H，d，J＝8Hz)；6.61(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；6.40(2H，br.s.)ppm.5D(3RS)-3-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-哌嗪基-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮標(biāo)題化合物用實(shí)施例5C的氨基酮和實(shí)施例1B的苯并三唑衍生物按照實(shí)施例1C的方法制備，產(chǎn)品用硅膠色譜法提純(洗脫劑85％乙酸乙酯-己烷)，產(chǎn)率58％。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.78(1H，br.s.)；9.28(1H，d，J＝1.5Hz)；8.61(1H，t，J＝1.5Hz)；8.55(1H，d，J＝1.5Hz)；7.5-7.1(8H，m)；7.06(1H，d，J＝8Hz)；6.90(1H，d，J＝8Hz)；5.40(1H，d，J＝8Hz)；5.18(2H，s).5E(3RS)-3-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-哌嗪基-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮于0℃氮?dú)夥障聦?shí)施例5D的苯并二氮雜卓(120mg，0.31mmol)溶于無水DMF中(4ml)，往攪拌著的混合物中加入氫化納(13mg，分散于油中，80％)，45分鐘后加入1-溴代頻哪酮，將混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)，蒸發(fā)，硅膠色譜法提純(洗脫劑75％乙酸乙酯-己烷)，得到無色膜(146mg，97％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.37(1H，d，J＝1.3Hz)；8.64(1H，d，J＝1.3Hz)；8.55(1H，t，J＝1.4Hz)；7.6-7.2(8H，m)；7.14(1H，d，J＝8Hz)；6.74(1H，d，J＝8Hz)；5.55(1H，d，J＝8Hz)；5.14(2H，s)；4.95(1H，d，J＝16Hz)；4.66(1H，d，J＝16Hz)；1.23(9H，s)ppm.5F(3RS)-3-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-哌嗪基-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮按照實(shí)施例1E的方法將實(shí)施例5E的苯并二氮雜卓于DCM中用HBr脫保護(hù)，棕色油狀產(chǎn)品是不均勻的，但不用提純即可用于下一步反應(yīng)。5G N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲用間甲苯基異氰酸酯于0℃處理實(shí)施例5F的苯并二氮雜卓(0.15mmol)的DCM溶液(3ml)制備標(biāo)題化合物，1小時(shí)后蒸發(fā)混合物，用硅膠色譜法提純(洗脫劑75％--90％乙酸乙酯-己烷)，得到無色固體(44mg，61％，兩步產(chǎn)率)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.37(1H，d，J＝1Hz)；8.62(1H，d，J＝1.5Hz)；8.54(1H，t，J＝1.5Hz)；7.54(1H，t，J＝8Hz)；7.4-7.0(8H，m)；6.82(1H，d，J＝7Hz)；5.77(1H，d，J＝8Hz)；4.89(1H，d，J＝18Hz)；4.66(1H，d，J＝18Hz)；2.26(3H，s)；1.20(9H，s)ppm.M.S.(+ve FAB)[M+H]+＝485.2.
實(shí)施例6N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(化合物18) 按照實(shí)施例2的方法用實(shí)施例5F的苯并二氮雜卓制備標(biāo)題化合物，用硅膠色譜法提純(洗脫劑80％乙酸乙酯-己烷--100％乙酸乙酯)，得到無色固體(34mg，44％，)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.37(1H，d，J＝1.5Hz)；8.62(1H，d，J＝1.5Hz)；8.54(1H，t，J＝1.5Hz)；7.50(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；7.4-7.0(6H，m)；6.89(1H，m)；6.51(1H，d，J＝8Hz)；6.43(1H，d，J＝8Hz)；5.77(1H，d，J＝8Hz)；4.87(1H，d，J＝17.5Hz)；4.63(1H，d，J＝17.5Hz)；2.90(6H，s)；1.19(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝514.3.
實(shí)施例7N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物5) 7A 2-(羥基-(2-硝基苯基))甲基-N，N-二甲基咪唑-1-磺酰胺N，N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(Chadwick&Ngochindo，J ChemSoc Perkin Trans 1 1984，481)(4.0g，23.2mmol)于-70℃氮?dú)夥障氯苡跓o水THF(40ml)中，滴加正丁基鋰(16ml，1.6M的己烷溶液)，于-70℃攪拌混合物20分鐘，加入THF(20ml)中的2-硝基苯甲醛(5.6g，37mmol)，2小時(shí)內(nèi)將混合物溫?zé)嶂潦覝兀舭l(fā)混合物，在5％KHCO3和乙酸乙酯之間進(jìn)行分配，用鹽水洗滌有機(jī)相，過濾(Whatman IPS，相分離器)蒸發(fā)并用硅膠色譜法提純(洗脫劑85％乙酸乙酯-己烷)，得到標(biāo)題化合物，黃色泡沫(3.31g，44％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.10(1H，d，J＝8Hz)；7.95(1H，d，J＝8Hz)；7.72(1H，t，J＝8Hz)；7.54(1H，t，J＝8Hz)；7.21(1H，s)；6.85(1H，s)；6.80(1H，d，J＝2Hz)；4.45(1H，d，J＝2Hz)；3.02(6H，s)ppm.7B 2-(2-硝基苯甲酰基)咪唑?qū)?shí)施例7A的磺酰胺(3.30g，10.12mmol)于60℃氮?dú)夥障氯苡诒宜?50ml)中，加入CrO3(2g)，于100℃攪拌混合物0.5小時(shí)，冷至室溫，殘留物倒入1MKOH(500ml)中，用乙酸乙酯(2×100ml)萃取，合并的萃取液用鹽水洗滌，過濾(Whatman IPS，相分離器)并蒸發(fā)，產(chǎn)品用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶，得到淡綠色固體(1.72g，77％)，不用進(jìn)一步提純即可使用。1H NMR(270MHz，CD3OD)δ8.30(1H，d，J＝7Hz)；8.0-7.7(3H，m)；7.53(1H，br.s.)；7.24(1H，br.s.)ppm.7C 2-(2-硝基苯甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑?qū)?shí)施例7B的咪唑(1.70g，7.83mmol)于0℃氮?dú)夥障氯苡跓o水DMF(15ml)中，攪拌下分批加入氫化納(260mg，80％，分散在油中，8.6mmol)，于室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，加入[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基氯化物(1.5g，8.6mmol)，于室溫繼續(xù)攪拌3小時(shí)，蒸發(fā)混合物，在5％KHCO3和乙酸乙酯之間進(jìn)行分配，有機(jī)相用鹽水洗滌，蒸發(fā)，用硅膠色譜法提純(洗脫劑45％乙酸乙酯-己烷)得到標(biāo)題化合物，無色油狀物(1.51g，56％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.14(1H，d，J＝8Hz)；7.8-7.6(3H，m)；7.34(1H，s)；7.11(1H，s)；5.97(2H，s)；3.67(2H，m)；0.96(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.7D 2-(2-氨基苯甲?；?-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑?qū)?shí)施例7C的硝基化合物(1.50g，4.32mmol)溶于無水THF(60ml)中，將溶液脫氣，加入5％Pd/C(800mg)混合物在壓力器中于30psi，室溫下氫化2小時(shí)，過濾(硅藻土)并蒸發(fā)，所得黃色油狀物用硅膠色譜法提純(洗脫劑40％乙酸乙酯-己烷)，得到純的標(biāo)題化合物(1.15g，84％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.38(1H，d，J＝8Hz)；7.35(3H，m)；6.77(2H，m)；6.20(2H，br.s.)；5.75(2H，s)；3.60(2H，m)；0.96(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.7E(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將實(shí)施例7D的氨基酮(1.10g，3.47mmol)用實(shí)施例1C所述方法轉(zhuǎn)變成標(biāo)題化合物，產(chǎn)品用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶，得到無色固體(720mg，41％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.63(1H，br.s.)；7.6-7.2(10H，m)；6.78(1H，d，J＝8Hz)；6.67(1H，d，J＝8Hz)；5.90(1H，d，J＝11Hz)；5.63(1H，d，J＝11Hz)；5.2(3H，m)；3.60(2H，m)；0.96(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.7F(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將實(shí)施例7E的苯并二氮雜卓(505mg，1mmol)用實(shí)施例1D所述方法用1-溴代頻哪酮烷基化，產(chǎn)品用硅膠色譜法提純(洗脫劑75％乙酸乙酯/己烷)，得到淡黃色油狀物(420mg，70％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.63(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；7.52(1H，m)；7.4-7.3(7H，m)；7.18(1H，s)；7.07(1H，d，J＝8Hz)；6.71(1H，d，J＝7.5Hz)；5.91(1H，d，J＝10Hz)；5.67(1H，d，J＝10Hz)；5.43(1H，d，J＝7.5Hz)；5.15(2H，s)；5.06(1H，d，J＝18Hz)；4.36(1H，d，J＝18Hz)；3.60(2H，m)；1.28(9H，s)；0.95(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.7G N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲將實(shí)施例7F的苯并二氮雜卓(95mg，0.157mmol)溶于乙醇/乙酸(95/5，v/v，5ml)中，混合物被脫氣，加入5％Pd/C(40ml)，于大氣壓及室溫下將混合物氫化45分鐘，過濾(硅藻土濾墊)，蒸發(fā)，用甲苯共沸兩次，殘留物溶于DCM(2ml)中，加入間甲苯基異氰酸酯(24μl，0.19mmol)，于室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，蒸發(fā)，用硅膠色譜法提純(洗脫劑80％乙酸乙酯/己烷)，得到標(biāo)題化合物，無色固體(69mg，73％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.63(1H，d，J＝8Hz)；7.55(1H，t，J＝8Hz)；7.4-7.0(9H，m)；6.86(1H，d，J＝7.2Hz)；5.97(1H，d，J＝10.5Hz)；5.73(1H，d，J＝10.5Hz)；5.63(1H，d，J＝7.2Hz)；4.94(1H，d，J＝18Hz)；4.28(1H，d，J＝18Hz)；3.67(2H，m)；2.31(3H，s)；1.26(9H，s)；0.96(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.7H N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲將實(shí)施例7G的苯并二氮雜卓(69mg，0.1146mmol)溶于乙醇(8ml)中，加入濃鹽酸(2ml)，于70℃加熱混合物1小時(shí)，冷卻并蒸發(fā)，殘留物在1M鹽酸和乙醚之間分配，堿化水相，用乙酸乙酯萃取(×3)，過濾合并的萃取液(Whatman IPS，相分離器)，并蒸發(fā)，用MPLC反相色譜法進(jìn)一步純化，(C18，梯度洗脫，MeCN/H2O，20％--100％)，得到無色固體(5mg，9％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.07(1H，d，J＝8Hz)；7.6-6.9(10H，m)；6.63(1H，d，J＝7Hz)；5.62(1H，d，J＝7Hz)；5.41(1H，d，J＝17Hz)；4.20(1H，d，J＝17Hz)；2.18(3H，s)；1.25(9H，s).
實(shí)施例8N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲 8A N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(化合物6)將實(shí)施例7F中所述苯并二氮雜卓(140mg，0.232mmol)溶于乙醇/乙酸(95/5，v/v，8ml)中，將溶液脫氣，然后加入5％Pd/C(60mg)。將所述混合物于室溫和常壓下氫化45分鐘，然后過濾(硅藻土助濾劑)，蒸發(fā)并與甲苯(×2)共沸。將所得的胺溶于DCM中并在室溫下用過量的3-(二甲氨基)苯基異氰酸酯(在N2氣氛下通過將3-二甲氨基苯甲酸(120mg)、三乙胺(147μl)和二苯基磷?；B氮化物(280mg)的混合物進(jìn)行回流制得)處理4小時(shí)。將所述混合物蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用90％EtOAc的己烷溶液EtOAc洗脫)，得到無色固體(106mg，72％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.65(1H，d，J＝8Hz)；7.54(1H，t，J＝8Hz)；7.36-7.23(4H，m)；7.12-7.05(3H，m)；6.91(1H，m)；6.51-6.43(2H，m)；5.95(1H，d，J＝10.6Hz)；5.76(1H，d，J＝10.6Hz)；5.63(1H，d，J＝8Hz)；4.95(1H，d，J＝17.8Hz)；4.22(1H，d，J＝17.8Hz)；3.66(2H，m)；2.95(6H，s)；1.26(9H，s)；0.95(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.8B N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲將實(shí)施例8A中所述的苯并二氮雜卓(106mg，0.168mmol)溶于無水DCM(20ml)中并將溶液冷卻至0℃，于0℃所述混合物中緩慢地通入干燥的HBr氣0.5小時(shí)，將混合物塞好并于0℃下繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)。然后將所述混合物脫氣并蒸發(fā)，所述殘余物用1M KOH和EtOAc配分。有機(jī)相用鹽水洗滌，過濾(Whatman 1PS，分相器)并蒸發(fā)。產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用2％MeOH的EtOAc溶液洗脫)并經(jīng)乙腈-水中冷凍干燥后，得到無色固體狀所述標(biāo)題化合物(48mg，60％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.11(1H，d，J＝8Hz)；7.62(1H，t，J＝8Hz)；7.48-7.31(3H，m)；7.05-6.93(4H，m)；6.70(1H，br.s)；6.32(1H，d，J＝8Hz)；6.27(1H，br.d.)；5.73(1H，d，J＝7.4Hz)；5.40(1H，d，J＝17.5Hz)；4.48(1H，d，J＝17.5Hz)；2.89(6H，s)；1.16(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝502.3實(shí)施例9N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲(化合物19) 9A 3-(1-吡咯烷基)苯甲酸將間氨基苯甲酸(13.7g，0.1mol)溶于甲醇(150ml)中并冷卻至0℃。滴加乙酰氯(10ml)，然后將混合物加熱至回流，在氮?dú)夥障逻M(jìn)行14小時(shí)。將所述混合物冷卻，蒸發(fā)并用EtOAc和5％KHCO3配分。有機(jī)相用鹽水洗滌，過濾(Whatman 1PS，分相器)并蒸發(fā)，得到褐色油狀物，將其靜置析晶(13.2g，88％)。將部分氨基酯(5.45g，36.1mmol)溶于無水DMF(70ml)中并于0℃氮?dú)夥障掠脷浠c(3.78g，80％油分散體，126mmol)處理1.5小時(shí)，加入1，4-二溴代丁烷(14.05g，65mmol)和碘化鉀(0.6g，3.7mmol)并將混合物于80℃下加熱72小時(shí)。將混合物冷卻，蒸發(fā)并用EtOAc和5％KHCO3配分。有機(jī)相用鹽水洗滌，過濾(Whatman，1PS，分相器)并蒸發(fā)。殘余物于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用8％EtOAc/己烷洗脫)，得到淺黃色固體(1.70g，23％)。將所述固體溶于二烷/水(40ml)中并于室溫下用LiOH.7H2O(1.75g，5當(dāng)量)處理10分鐘，然后于40℃下處理30分鐘。加入乙酸(10ml)并將混合物蒸發(fā)，與甲苯共沸并由AcOH/水/二烷中析晶，得到淺褐色固體(1.26g，80％)，將其于真空下用P2O5干燥。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.4-7.2(3H，m)；6.78(1H，m)；3.35(4H，m)；2.02(4H，m)ppm.9B N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲將實(shí)施例7F中所述苯并二氮雜卓(140mg，0.232mmol)溶于乙醇/乙酸(95/5，v/v，8ml)中并在常壓和室溫下用5％Pd/C(60mg)氫化45分鐘。將混合物過濾(硅藻土，助濾劑)，蒸發(fā)并于甲苯(×2)共沸。將殘余物溶于DCM(4ml)中并用3-(1-吡咯烷基)苯基異氰酸酯(通過將實(shí)施例9A中所述的酸(140mg)、三乙胺(147μl)和二苯基磷?；B氮化物(280mg)在苯中的混合物回流2小時(shí)制得)處理4小時(shí)。將所述混合物蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用90％EtOAc的己烷溶液EtOAc洗脫)，得到無色固體(110mg，72％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.65(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.7Hz)；7.54(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.8Hz)；7.4-7.0(7H，m)；6.75(1H，m)；6.43(1H，d，J＝8Hz)；6.31(1H，d，J＝8Hz)；5.95(1H，d，J＝10.4Hz)；5.75(1H，d，J＝10.4Hz)；5.63(1H，d，J＝7.2Hz)；4.96(1H，d，J＝17.SHz)；4.26(1H，d，J＝17.8Hz)；3.63(2H，m)；3.29(4H，m)；2.00(4H，m)；1.27(9H，s)；0.95(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.9C N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲如實(shí)施例8B所述，將實(shí)施例9B中所述的苯并二氮雜卓(110mg，0.1674mmol)用HBr進(jìn)行脫保護(hù)。所述產(chǎn)物于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用2％MeOH的EtOAc溶液洗脫)并由乙腈-水中冷凍干燥，得到淺黃色固體(46mg，55％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.11(1H，d，J＝7Hz)；7.62(1H，t，J＝7Hz)；7.47-7.2(4H，m)；7.09-6.80(4H，m)；6.23-6.13(2H，m)；5.74(1H，d，J＝7.2Hz)；5.36(1H，d，J＝17.5Hz)；4.49(1H，d，J＝17.5Hz)；3.21(4H，m)；1.95(4H，m)；1.16(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝528.8.
實(shí)施例10N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物12) 10A 5-(羥基(2-硝基苯基)甲基-N，N-二甲基咪唑-1-磺酰胺于-78℃，氮?dú)夥障?，將N，N-二甲基咪唑-1-磺酰胺(Chad-wick和Ngochinodo，J Chem Soc Perkin Trans I 1984，481)(6.0g，34.8mmol)溶于無水THF(150ml)中。滴加正丁基鋰(24ml，1.6M己烷溶液)并于-78℃下繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)。然后加入三乙基氯硅烷(11.7ml，69.6mmol)，令混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。然后，在高真空低于50℃下將混合物蒸發(fā)，以除去所有揮發(fā)物。于-78℃氮?dú)夥障?，將殘余物再溶于無水THF(100ml)中并通過滴加仲丁基鋰(53ml，1.3M環(huán)己烷溶液)進(jìn)行處理。于-78℃，將混合物攪拌45分鐘，然后加入鄰硝基苯甲醛(10.5g)的TH(40ml)溶液。令混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?2小時(shí)。然后將所述混合物蒸發(fā)并用2M HCl(100ml)和乙醚(150ml)配分，將水相堿化并用EtOAc(×2)萃取。將合并的萃取液過濾(Whatman 1PS，分相器)并蒸發(fā)，產(chǎn)物由EtAOc/己烷中析晶，得到淺黃色固體(3.86g，34％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.13(1H，d，J＝8Hz)；8.12(1H，d，J＝8Hz)；7.92(1H，d，J＝1Hz)；7.79(1H，t，J＝8Hz)；7.57(1H，t，J＝8Hz)；6.70(1H，s)；6.28(1H，s)；3.08(6H，s)ppm.10B 4-(2-硝基苯甲?；?咪唑于40℃下將實(shí)施例10A中所述咪唑(3.8g，11.66mmol)溶于乙酸(60ml)中。加入四氧化鉻(2.3g)并將混合物于100℃下加熱1小時(shí)，然后冷卻并傾入冰-水中。將混合物堿化并用EtOAc(×3)萃取。將合并的萃取液蒸發(fā)，與甲苯共沸并將殘余物由EtOAc/己烷中析晶，得到灰白色固體(725mg，29％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.81(1H，d，J＝7Hz)；7.5-7.3(5H，m)；3.25(6H，s)ppm.10C 4-(2-硝基苯甲?；?-1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑和10D 5-(2-硝基苯甲酰基)-1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑于0℃氮?dú)夥障?，將?shí)施例10B中所述咪唑(700mg，3.226mmol)溶于無水DMF(15ml)中。滴加氫化鈉(106mg，80％油分散體)并將混合物于0℃至室溫下攪拌1個(gè)多小時(shí)。加入[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]氯代甲烷(620mg，3.55mmol)并于室溫下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。然后將混合物傾入5％KHCO3中，并用EtOAc萃取。所述萃取液用鹽水洗滌，過濾(Whatman 1PS，分相器)并蒸發(fā)。殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用80％EtOAc的己烷溶液洗脫，直至除去第一批產(chǎn)物，然后再用EtOAc洗脫)，得到兩個(gè)無色油狀物。較快洗脫出的異構(gòu)體為10C，產(chǎn)率為29％(320mg)，而較慢洗脫出的異構(gòu)體為10D，產(chǎn)率為31％(350mg)。10C1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.15(1H，d，J＝7.5Hz)；7.86(1H，s)；7.78-7.58(3H，m)；7.53(1H，s)；5.31(2H，s)；3.52(2H，m)；0.92(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.10D1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.17(1H，d，J＝7.5Hz)；7.91(1H，s)；7.79-7.64(2H，m)；7.53(1H，dd，J1＝7.5Hz，J2＝1.5Hz)；7.18(1H，s)；5.85(2H，s)；3.70(2H，m)；0.97(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.10e 4-(2-氨基苯甲酰基)-1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-咪唑?qū)?shí)施例10C中所述咪唑(320mg，0.922mmol)溶于無水THF(25ml)中并于室溫25psi下用5％Pd/C氫化2小時(shí)。將混合物過濾(硅藻土，助濾劑)并蒸發(fā)，得到黃色油狀物(286mg，98％)，無需進(jìn)一步純化，將其用于下一步反應(yīng)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.42(1H，dd，J1＝8.2Hz，J2＝1.6Hz)；7.69(2H，m)；7.27(1H，m)；6.70(2H，m)；6.03(2H，br.s.)；5.32(2H，s)；3.54(2H，m)；0.95(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.10F(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(4-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮用實(shí)施例1C中所述方法，將實(shí)施例10中所述咪唑(286mg，0.902mmol)轉(zhuǎn)變?yōu)樗霰讲⒍s卓標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用3％MeoH的EtOAc溶液洗脫)，得到淺黃色油狀物(300mg，66％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.75(1H，s)；7.66-7.13(10H，m)；6.96(1H，d，J＝8Hz)；6.62(1H，d，J＝8Hz)；5.38-5.07(5H，m)；3.52(2H，t，J＝8Hz)；0.92(2H，t，J＝8Hz)；0.00(9H，s)ppm.10G(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮如實(shí)施例1D所述，將實(shí)施例10F中所述苯并二氮雜卓(300mg，0.594mmol)用1-溴代頻哪酮進(jìn)行烷基化。將所述產(chǎn)物進(jìn)行色譜分離(用2％MeOH的EtOAc溶液洗脫)，得到無色泡沫狀物(305mg，85％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.68(1H，d，J＝7.6Hz)；7.60(1H，s)；7.49(1H，t，J＝7.6Hz)；7.35-7.22(6H，m)；7.05(1H，d，J＝8Hz)；6.63(1H，d，J＝8Hz)；5.46(1H，d，J＝8Hz)；5.27(2H，s)；5.10(2H，m)；5.03(1H，d，J＝17.8Hz)；4.38(1H，d，J＝17.8Hz)；3.51(2H，t，J＝8Hz)；1.24(9H，s)；0.92(2H，t，J＝8Hz)0.00(9H，s)ppm.10H N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲用實(shí)施例7G中所述的方法，由實(shí)施例10G中所述苯并二氮雜卓(150mg，0.249mmol)制得所述標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用EtOAc5％MeOH的EtOAc溶液洗脫)，得到無色固體(97mg，65％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.77(1H，s)；7.71(1H，d，J＝8Hz)；7.62(1H，s)；7.51(1H，t，J＝7Hz)；7.33-6.93(7H，m)；6.77(1H，d，J＝7Hz)；5.70(1H，d，J＝8.2Hz)；5.21(2H，s)；4.87(1H，d，J＝17.8Hz)；4.41(1H，d，J＝17.8Hz)；3.51(2H，t，J＝7.5Hz)；2.24(3H，s)；1.20(9H，s)；0.91(2H，t，J＝7.5Hz)；0.00(9H，s).10I N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲如實(shí)施例8B所述，用HBr處理實(shí)施例10H中所述苯并二氮雜卓制得所述標(biāo)題化合物，并將所述產(chǎn)物由DCM/己烷中析晶，得到白色固體(44mg，58％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.69(1H，d，J＝7Hz)；7.56-7.19(8H，m)；6.91-6.85(3H，m)；6.86(1H，d，J＝7Hz)；5.53(1H，d，J＝7Hz)；5.22(1H，br.d.)；4.41(1H，d，J＝17.5Hz)；2.07(3H，s)；1.06(9H，s)ppm.M.S. ·(+ve FAB)[M+H]+＝473.3.
實(shí)施例11N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(化合物8) 11A N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-(1-((2-三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲用實(shí)施例8A所述的方法，由實(shí)施例10G中所述苯并二氮雜卓(150mg，0.249mmol)制得所述標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用EtOAc5％MeOH的EtOAc溶液洗脫)，得到無色固體(130mg，83％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.78(1H，s)；7.71(1H，d，J＝8Hz)；7.65(1H，s)；7.50(1H，t，J＝7Hz)；7.38-7.25(3H，m)；7.06-6.96(2H，m)；6.89(1H，s)；6.42-6.32(2H，m)；5.70(1H，d，J＝8Hz)；5.22(2H，s)；4.85(1H，d，J＝17.8Hz)；4.26(1H，d，J＝17.8Hz)；3.51(2H，t，J＝8Hz)；2.86(6H，s)；1.20(9H，s)；0.91(2H，t，J＝8Hz)；0.00(9H，s)ppm.11B N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲如實(shí)施例8B所述，由實(shí)施例11A中所述苯并二氮雜卓制得所述標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物由EtOAc/己烷中析晶，得到灰白色固體(69mg，70％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.87(1H，d，J＝7.8Hz)；7.71-7.03(10H，m)；6.48-6.39(2H，m)；5.71(1H，d，J＝7Hz)；5.22(1H，br.d.)；4.66(1H，d，J＝17.6Hz)；2.92(6H，s)；1.25(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝502.3.
實(shí)施例12N-((3RS)-1-(4-甲基苯基)羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物20) 12A 5-(2-氨基苯甲?；?-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)咪唑如實(shí)施例10E所述，將實(shí)施例10D中所述咪唑(350mg，1.009mmol)用5％Pd/C進(jìn)行氫化。無需純化，將所述黃色油狀產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.89(1H，s)；7.81(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.6Hz)；7.53(1H，s)；7.34(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.6Hz)；6.77-6.68(2H，m)；6.00(2H，br.s.)；5.77(2H，s)；3.62(2H，m)；0.96(2H，m)；0.00(9H，s).12B(3RS)-3-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮用實(shí)施例1C所述方法，將實(shí)施例12A中所述咪唑(313mg，0.98mmol)轉(zhuǎn)變?yōu)樗霰讲⒍s卓標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物進(jìn)行色譜分離(用2％MeOH的EtOAc溶液洗脫)，得到黃色油狀物(204mg，41％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.89(1H，s)；8.58(1H，d，J＝8Hz)；7.94-7.0(10H，m)；6.67(1H，d，J＝8Hz)；5.92(1H，d，J＝10.5Hz)；5.59(1H，d，J＝10.5Hz)；5.29(1H，d，J＝8Hz)；5.17(2H，s)；3.63(2H，t，J＝8Hz)；0.93(2H，t，J＝8Hz)；0.00(9H，s)ppm.12C(3RS)-3-芐氧羰基氨基-1-((4-甲基苯基)羰基甲基)-2，3-二氫-5-(5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮于0℃N2氣氛下，將實(shí)施例12C中所述苯并二氮雜卓(60mg，0.118mmol)溶于DMF(5ml)中。加入氫化鈉(15mg，80％油分散體)并將混合物于室溫下攪拌40分鐘。然后加入2-溴代-(4′-甲基)苯乙酮(110mg，0.515mmol)并于室溫下繼續(xù)攪拌2小時(shí)。將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和鹽水配分，將有機(jī)相過濾(Whatman1PS，分相器)并蒸發(fā)，產(chǎn)物于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用90％EtOAc的己烷溶液EtOAc洗脫)，得到淺黃色油狀所述標(biāo)題化合物(35mg，48％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.85-7.80(3H，m)；7.63(1H，d，J＝7.5Hz)；7.55(1H，t，J＝7.5Hz)；7.37-7.23(8H，m)；6.99(1H，s)；6.63(1H，d，J＝8Hz)；5.92(1H，d，J＝10Hz)；5.61(1H，d，J＝10Hz)；5.45(1H，d，J＝8Hz)；5.37(1H，d，J＝17.5Hz)；5.19-5.13(3H，m)；3.63(2H，m)；2.40(3H，s)；0.93(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.12D N-((3RS)-1-(4-甲基苯基)羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲如實(shí)施例7G所述，將實(shí)施例12C中所述苯并二氮雜卓(35mg，0.055mmol)轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基苯基脲。將所述產(chǎn)物于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用95％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到無色油狀物(30mg，86％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.88-7.73(3H，m)；7.13(1H，d，J＝8Hz)；7.58(1H，t，J＝8Hz)；7.39-7.11(7H，m)；6.97(1H，d，J＝7Hz)；6.90(1H，d，J＝7Hz)；6.68-6.57(2H，m)；6.00(1H，d，J＝10Hz)；5.72(1H，d，J＝7Hz)；5.57(1H，d，J＝10Hz)；5.34(2H，s)；3.65(2H，m)；2.47(3H，s)；2.35(3H，s)；0.92(2H，m)；0.00(9H，s)ppm.12E N-((3RS)-1-(4-甲基苯基)羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-咪唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲如實(shí)施例8B所述，將實(shí)施例12D中所述苯并二氮雜卓(30mg，0.047mmol)用HBr氣處理。所述產(chǎn)物經(jīng)反相色譜柱(C18，用20％MeCN的水溶液至100％MeCN梯度洗脫)上經(jīng)MPLC純化，冷凍干燥后，得到無色固體(10mg，42％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.70-6.40(17H，m)；5.76(1H，d，J＝17Hz)；5.64(1H，d，J＝8Hz)；5.01(1H，d，J＝17Hz)；2.26(3H，s)；2.10(3H，s)ppm.
實(shí)施例13N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲(化合物9) 13A 3-(羥基-(2-硝基苯基))甲基脲于-70℃N2氣氛下，將1-(1-吡咯烷基)甲基吡唑(Katritsky等人，J Org Chem1988，53，5685；5.54g，36.7mmol)溶于無水乙醚(120ml)中，并滴加正丁基鋰(25.2ml，1.6M己烷溶液)處理。將混合物于-70℃攪拌1.5小時(shí)，然后加入鄰硝基苯甲醛(6.1g，40.4mmol)的無水THF(25ml)溶液。令所述混合物于0.5小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝夭⒃贁嚢?小時(shí)。然后，加入2M HCl(100ml)并于室溫下繼續(xù)攪拌10分鐘。將兩相分開并將水相用濃氨水中和，用CHCl3(×2)萃取。將萃取液干燥(MgSO4)，蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用40％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到淺褐色油狀所述標(biāo)題化合物(2.51g，31％)。13B 3-(2-硝基苯甲?；?-吡唑用實(shí)施例7B所述方法，將實(shí)施例13A中所述吡唑(2.5g，11.4mmol)用CrO3氧化。所述產(chǎn)物由DCM-己烷中析晶，得到灰白色固體(1.78g，72％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ13.5(1H，br.s.)；8.18(1H，d，J＝8Hz)；7.95-7.7(4H，m)；6.94(1H，s)ppm.13C 3-(2-硝基苯甲?；?-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-吡唑和13D 5-(2-硝基苯甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-吡唑于室溫氮?dú)夥障?，將?shí)施例13B中所述吡唑(1.70g，7.835mmol)分小批量加入到攪拌下的NaH(260mg，80％油分散體-己烷洗滌過)在無水DMF(20ml)中的混合物中。于室溫下將混合物攪拌2小時(shí)，然后滴加((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)氯代甲烷(1.5g，8.6mmol)。于室溫下，再繼續(xù)攪拌2小時(shí)，然后將混合物傾入到水(200ml)中并用EtOAc(×2)萃取。將所述萃取液過濾(Whatman 1PS，分相器)，蒸發(fā)并于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用30％EtOAc的己烷溶液洗脫)，以1∶1的混合比例得到所述兩個(gè)標(biāo)題化合物(2.35g，86％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.24(0.5H，d，J＝8Hz)；8.16(0.5H，d，J＝8Hz)；7.8-7.5(4H，m)；7.08(0.5H，d，J＝1Hz)；6.33(0.5H，d，J＝1Hz)；6.00(1H，s)；5.39(1H，s)；3.77(1H，m)；3.46(1H，m)；1.02(1H，m)；0.92(1H，m)；0.04(4.5H，s)；0.00(4.5H，s)ppm.13E 3-(2-氨基苯甲酰基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-吡唑和13F 5-(2-氨基苯甲?；?-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-吡唑?qū)?shí)施例13C和13D中所述吡唑(2.35g，6.772mmol)溶于無水THF(100ml)中并脫氣。加入5％Pd/C(1.2g)并將混合物于室溫30psi下氫化2小時(shí)，將混合物過濾(硅藻土，助濾劑)并蒸發(fā)，然后進(jìn)行色譜分離(用30％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到等摩爾量混合的所述兩個(gè)標(biāo)題化合物(1.05g，49％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.43(0.5H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；7.76-7.65(1.5H，m)；7.39(1H，m)；6.98(0.5H，d，J＝2.3Hz)；6.81-6.63(2.5H，m)；6.26(2H，br.s.)；5.85(1H，s)；5.60(1H，s)；3.75-3.60(2H，m)；1.02-0.90(2H，m)；0.08(4.5H，s)；0.00(4.5H，s)ppm.13G(3RS)-3-叔丁氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(3-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮和13H(3RS)-3-叔丁氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮用實(shí)施例1C所述方法，將實(shí)施例13E和13F中所述吡唑混合物(1.0g，3.155mmol)轉(zhuǎn)變?yōu)樗霰讲⒍s卓標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物在硅膠上經(jīng)色譜法純化(用55％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到所述標(biāo)題化合物的等摩爾量混合物(1.21g，76％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.64(1H，m)；8.32(1H，br.s.)；7.8-7.05(9H，m)；6.96(0.5H，d，J＝1.4Hz)；6.62(1H，m)；6.41(0.5H，br.s.)；5.96(1H，s)；5.52-5.46(1.54，m)；5.21(2H，s)；5.09(0.5H，br.s.)；3.56(2H，m)；0.96(2H，m)；0.09(4.5H，s)；0.00(4.5H，s)ppm.13I(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(3-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮和13J(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(5-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基))吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮用實(shí)施例1D所述方法，將實(shí)施例13G和13H中所述苯并二氮雜卓的1∶1混合物(1.10g，2.178mmol)用1-溴代頻哪酮進(jìn)行烷基化。將東歐是產(chǎn)物進(jìn)行色譜分離(用45％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到等摩爾量混合的所述標(biāo)題化合物(860mg，66％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.71(1H，d，J＝8Hz)；7.6-7.0(9H，m)；6.90(1H，d，J＝1.7Hz)；6.67(1H，d，J＝8Hz)；5.50(1H，d，J＝8Hz)；5.43(2H，m)；5.12(2H，s)；5.02(1H，d，J＝17.5Hz)；4.37(1H，d，J＝17.5Hz)；3.59(2H，m)；1.26(9H，s)；0.94(2H，m)；0.01(4.5H，s)；0.00(4.5H，s)ppm.13k(3RS)-氨基-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將實(shí)施例131和13J中的苯并二氮雜卓混合物((350mg，0.58mmol)溶于DCM(10ml)中并冷卻至0℃。攪拌下向所述混合物中緩慢通入干燥的HBr氣25分鐘，將混合物塞好并于0℃下再攪拌2小時(shí)。將所述混合物蒸發(fā)，溶于1M HCl中并用乙醚洗滌。將水相堿化并用CHCl3(×3)萃取。合并的萃取液用鹽水洗滌，過濾(What-man，1PS分相器)并蒸發(fā)。無需進(jìn)一步純化，殘余物的純度足可用于下一步反應(yīng)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.67(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；7.60(1H，d，J＝2Hz)；7.32-7.24(2H，m)；7.09(1H，d，J＝8Hz)；6.50(1H，d，J＝2Hz)；5.09(1H，d，J＝17.5Hz)；4.64(1H，s)；4.41(1H，d，J＝17.5Hz)；1.27(9H，s)ppm.13L N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲將實(shí)施例13K中所述苯并二氮雜卓(70mg，0.2065mmol)溶于DCM(2ml)中并加入異氰酸間甲苯基酯(32μl)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用80％EtOAc的己烷溶液洗脫)，由乙腈-水中冷凍干燥，得到所述標(biāo)題化合物(22mg，23％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.57-7.51(3H，m)；7.35-7.02(11H，m)；6.76(1H，m)；6.38(1H，d，J＝2Hz)；5.67(1H，d，J＝8Hz)；4.8(2H，m)；2.21(3H，s)；1.19(9H，s)ppm.M.S. (+ve FAB)[M+H]+＝473.2按照上述實(shí)施例中所述相似方法，可獲得表A中化合物10-16。
實(shí)施例14Etoc-(1-苯并三唑基)甘氨酸按照Katritsky的方法(J Org Chem1990，55，2266)制得所述標(biāo)題化合物。在迪安-斯達(dá)克條件下，將氨基甲酸乙酯(1.80g，20mmol)、二羥乙酸(1.84g，20mmol)和苯并三唑(2.38g，20mmol)于苯(60ml)中一起回流加熱2小時(shí)，將混合物冷卻，用乙醚(120ml)稀釋并過濾，得到無色固體狀所述標(biāo)題化合物(3.73g，85％)，1H NMR(270MHz，CD3OD)δ7.65(1H，d，J＝8Hz)；7.55(1H，d，J＝8Hz)；7.22(1H，t，J＝8Hz)；7.09(1H，t，J＝8Hz)；6.83(1H，s)；3.67(2H，m)；0.84(3H，m)ppm.
實(shí)施例152-(2-氨基苯甲?；?吡啶氮?dú)夥障?，?-溴代吡啶(13.11g，83.0mmol)溶于甲苯(50ml)中，在低于-60℃下向此溶液中滴加正丁基鋰(1.6M正己烷溶液；50ml，80.0mmol)。在此溫度下再繼續(xù)攪拌15分鐘后，在8分鐘內(nèi)向此溶液中滴加氨基苯甲腈(4.25g，36.0mmol)的甲苯(25ml)溶液。加完后，將混合物于-60℃下攪拌15分鐘，然后令其溫?zé)嶂?℃。在5℃下再攪拌2小時(shí)后，將混合物傾入冰冷卻的3NHCl(80ml)中并于室溫下攪拌1小時(shí)。分出的有機(jī)相用1N HCl(40ml)萃取。合并的水相用甲苯(20ml)洗滌并于0-5℃下用25％氨水堿化至pH9。在此溫度下再繼續(xù)攪拌1小時(shí)，過濾收集所得沉淀，用水洗滌并干燥，得到固體粗品(7.09g)。于異丙醇中重結(jié)晶，得到結(jié)晶產(chǎn)物(I)(6.10g，86％)。實(shí)施例16(3RS)-(乙氧羰基)氨基-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮于0℃下，將2-(2-氨基苯甲?；?吡啶(1.39g，7mmol)和Etoc-(1-苯并三唑基)二羥乙酸(2.47g，11.2mmol)在DCM(25ml)中混合，加入DMAP(100mg)，隨后價(jià)是水溶性碳化二亞胺(1.95g，10mmol)。除去冰水浴并繼續(xù)攪拌30分鐘。將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和5％NaHCO3配分，有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。將產(chǎn)物溶于冰冷卻的飽和氨甲醇溶液(60ml)中，塞好并于室溫下攪拌1小時(shí)。將混合物濃縮并溶于乙酸(80ml)中，于室溫下攪拌4小時(shí)。將混合物濃縮并用CHCl3和1M KOH配分，有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥并濃縮，由EtOAc/己烷中析晶，得到白色固體狀所述產(chǎn)物(1.25g，55％)。1H NMR(270MHz，CHCl3)δ8.69(1H，s)；8.62(1H，d，J＝1.5Hz)；8.10(1H，d，J＝8Hz)；7.83(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；7.50-7.17(4H，m)；7.00(1H，d，J＝8.2Hz)；5.36(1H，d，J＝8.2Hz)；4.17(2H，q，J＝7Hz)；1.29(3H，t，J＝7Hz)ppm.實(shí)施例17(3RS)-乙氧羰基氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將(3RS)-(乙氧羰基)氨基-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(1.1g，3.395mmol)與DMF共沸，然后于0℃氮?dú)夥障氯苡跓o水DMF(25ml)中。加入氫化鈉(142mg，4.75mmol)并將混合物于45分鐘內(nèi)溫?zé)嶂潦覝兀尤?-溴代頻哪酮(760mg，4.25mmol)并于室溫下繼續(xù)攪拌45分鐘?；旌衔镉盟E冷并蒸發(fā)，殘余物在CHCl3和鹽水間配分，將有機(jī)相干燥并蒸發(fā)。由EtOAc/己烷中析晶得到灰白色固體狀產(chǎn)物(1.22g，85％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.60(1H，d，J＝4Hz)；8.15(1H，d，J＝8Hz)；7.80(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.6Hz)；7.52(1H，t，J＝7Hz)；7.40-7.20(3H，m)；7.11(1H，d，8.2Hz)；6.60(1H，d，J＝8.2Hz)；5.49(1H，d，J＝8.2Hz)；5.03(1H，d，J＝17.5Hz)；4.48(1H，d，J＝17.5Hz)；4.15(2H，q，J＝7Hz)；1.29-1.24(12H，m)ppm.實(shí)施例18(3RS)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮于0℃下，將(3RS)-乙氧羰基氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(IV，250mg，0.592mmol)溶于無水DCM(10ml)中并用干燥的HBr氣飽和。將混合物蓋好并于室溫下攪拌64小時(shí)。蒸除溶劑并將產(chǎn)物用1M HClH EtOAc配分，將酸的部分堿化并用CHCl3(×3)萃取。將萃取液合并并用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，得到褐色泡沫狀物，(188mg，91％)，無需進(jìn)一步純化。1H NMR(CDCl3，270MHz)δ8.58(1H，m)；8.08(1H，d，J＝8Hz)；7.72(1H，t，J＝8Hz)；7.41(1H，t，J＝8Hz)；7.3-7.0(5H，m)；5.00(1H，d，J＝17Hz)；4.60(1H，s)；4.38(1H，d，J＝17Hz)；2.2(2H，br.s)；1.22(9H，s)ppm.實(shí)施例19和20(3R)和(3S)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮于-5℃下，將(3RS)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(2.2g，6.28mmol)溶于MeCN(8ml)中。加入(R)-扁桃酸(440mg，3.14mmol)，將混合物于-5℃下攪拌并接種晶種。當(dāng)開始形成粘稠沉淀時(shí)，滴加MeCN(8ml)，以便容易過濾。于-5℃1小時(shí)后，將混合物過濾并用少量冷MeCN洗滌，將所得白色沉淀(0.92g，30％)于MeCN中重結(jié)晶。將所述的鹽用堿洗滌，得到游離的(R)-胺[α]D＝+212.6°(c＝0.715，CHCl3)。
將上述濾液用堿洗滌并溶于MeCN(6ml)中。加入(S)-扁桃酸，用相同的方法得到(S)-胺(0.85mg，28％)。將其于MeCN中重結(jié)晶并用堿洗滌，得到游離的(S)-胺[α]D＝+213.4°(c＝0.671，CHCl3)。
每一種胺的1H NMR均與(R，S)-混合物一致。實(shí)施例213-(二甲氨基)苯基異氰酸酯將3-(二甲氨基)苯甲酸(350g，2.12mol)溶干丙酮(2.8L)中，在低于10℃下向所述溶液中滴加Et3N(249g，2.46mol)，隨后在低于5℃下加入氯代甲酸乙酯(287g，2.65mol)的丙酮(875ml)溶液。攪拌30分鐘后，在低于5℃下滴加NaN3(201g，3.18mol)的水(570ml)溶液。將反應(yīng)混合物于0-5℃下再攪拌1小時(shí)，然后傾入甲苯-冰水(2∶3，11L)中。水相用少量夾針萃取并將合并的有機(jī)相用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。過濾除去MgSO4，將濾液加入到熱甲苯(1.5L)中。將混合物回流1小時(shí)，然后減壓蒸發(fā)。將殘余物蒸餾(0.6-0.8mmHg，74-77℃)，得到黃色油狀純的異氰酸酯(252g，74％)。實(shí)施例22N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-((3-二甲氨基)苯基)脲將實(shí)施例19中所述(R)-胺(410mg，1.17mmol)于DCM(5ml)中用實(shí)施例8中所述異氰酸酯(1.05當(dāng)量)處理并將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)。于乙醇中析晶，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物(550mg，91％)。[α]D＝+123.4(c＝0.316，CHCl3).1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.78(1H，d，J＝2Hz)；8.27(1H，d，J＝8Hz)；7.95(1H，m)；7.65-6.6(11H，m)；5.83(1H，d，J＝8Hz)；5.05(1H，d，J＝16Hz)；4.60(1H，d，J＝16Hz)；3.0(6H，s)；1.40(9H，s)ppm.Mass Spec(+FAB)[M+H]+＝513.4.
實(shí)施例233-(甲酰氨基)苯甲酸將乙酸酐(76ml)加入到98％甲酸(130ml)中并將混合物于室溫下攪拌30分鐘，然后加入3-氨基苯甲酸(15g，109.5mmol)。將混合物于室溫下攪拌1小時(shí)，然后加入水(1.3L)并繼續(xù)攪拌過夜。收集所生成的白色沉淀，用水洗滌并在真空下用P2O5干燥(15.4g，85％)。實(shí)施例24N-甲酰基-N-甲氨基苯甲酸將3-甲酰氨基苯甲酸(2.28g，13.8mmol)溶于DMF(25ml)中于0℃下并滴加氫化鈉(1.05g，80％油分散體)的DMF(15ml)懸浮液。令混合物于1小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝?，然后加入碘甲?0.95g)。1小時(shí)后，加入第二份碘甲烷(0.95g)并將混合物于室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)除去容積并將產(chǎn)物用乙酸乙酯和1M HCl配分，有機(jī)層用鹽水洗滌，然后過濾(Whatman 1PS分相器)并蒸發(fā)。殘余物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用60％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)，得到無色固體狀所述標(biāo)題化合物(2.30g，86％)。將部分酯(900mg，4.66mmol)溶于二烷/水(2/1，v/v.30ml)并于室溫?cái)嚢柘掠肔iOH.H2O(378mg，9mmol)，混合物用1M HCl酸化并用EtOAc萃取兩次。合并的萃取液用鹽水洗滌，過濾(Whatman 1PS分相器)并蒸發(fā)。無需純化，將所述酸(420mg，50％)用于下一步驟。實(shí)施例25N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(N-甲酰基-N-二甲氨基苯基)脲于氮?dú)夥障?，將?shí)施例11中所述苯甲酸衍生物((210mg，1.15mmol)懸浮于甲苯(25ml)中并用三乙胺(165μl，1.65mmol)和二苯基磷酰基疊氮化物(270μl，1.25mmol)處理。將混合物于室溫下攪拌1小時(shí)，然后在回流下加熱過夜。將混合物冷卻并蒸發(fā)，加入實(shí)施例5中所述胺(250mg，0.71mmol)的DCM(8ml)溶液。將所得混合物于室溫下攪拌6小時(shí)，然后蒸發(fā)并于硅膠上進(jìn)行色譜分離(用80/20 EtOAc/己烷純EtOAc洗脫)，得到淺黃色固體狀所述標(biāo)題化合物(185mg，50％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.62(1H，d，J＝2Hz)；8.42(1H，s)；8.01(1H，d，J＝8Hz)；7.79(1H，t，J＝8Hz)；7.15-6.70(10H，m)；6.78(1H，d，J＝7Hz)；5.76(1H，d，J＝7Hz)；5.01(1H，d，J＝17Hz)；4.63(1H，d，J＝17Hz)；3.21(3H，s)；1.36(9H，s)ppm.實(shí)施例26N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-(甲氨基)苯基)脲將實(shí)施例25中所述苯并二氮雜卓(185mg，0.35mmol)溶于丙酮(5ml)中并用4M HCl(3ml)處理?；旌衔镉谑覝叵聰嚢柽^夜，然后蒸發(fā)并用DCM和5％KHCO3配分。將有機(jī)相過濾(Whatman 1PS分相器)，蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用120/2/1，v/v/v，氯仿/甲醇/乙酸洗脫)，得到無色固體(67mg，88％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.69(1H，d，J＝2Hz)；8.24(1H，d，J＝8Hz)；7.82(1H，t，J＝8Hz)；7.59(1H，t，J＝8Hz)；7.46-7.0(9H，m)；6.80(1H，br.s)；6.58(1H，d，J＝8Hz)；6.37(1H，d，J＝8Hz)；5.80(1H，d，J＝8Hz)；4.99(1H，d，J＝17Hz)；4.58(1H，d，J＝17Hz)；2.82(3H，s)；1.30(9H，s)ppm.Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝499.3.
實(shí)施例273-(叔丁氧羰基氨基)苯甲酸將3-氨基苯甲酸(4.11g，30mmol)溶于2M KOH(30ml)和二烷(30ml)中。將溶液冷卻至0℃并加入二碳酸二叔丁基酯(6.98g，32mmol)。令混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。蒸除二烷并將溶液用1H KOH(50ml)稀釋，混合物用乙醚(×2)夕并用濃HCl酸化。過濾收集所生成的沉淀并用P2O5干燥(5.35g，75％)。實(shí)施例28N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-氨基苯基)脲將實(shí)施例27中所述苯甲酸衍生物(1.19g，5mmol)溶于苯(20ml)和三乙胺(1.2ml)中并用二苯基磷?；B氮化物(2.25g)處理。將混合物于80℃下加熱過夜，然后冷卻并蒸發(fā)。加入實(shí)施例6中所述手性胺(850mg，2.43mmol)的CHCl3(10ml)溶液并將混合于室溫下攪拌3小時(shí)。將混合物蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用70％EtOAc的己烷溶液EtOAc洗脫)，得到無色油狀物(1.4g)。將此殘余物榮譽(yù)DCM(10ml)中并在室溫氮?dú)夥障掠肨FA(30ml)處理45分鐘，將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和5％KHCO3配分。將有機(jī)相過濾(Whatman 1PS，分相器)，蒸發(fā)并進(jìn)行色譜分離(用6％MeOH的CHCl3溶液洗脫)，得到吸濕性無色固體(788mg，67％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.59(1H，d，J＝2Hz)；8.08(1H，d，J＝8Hz)；7.62(1H，t，J＝8Hz)；7.44(1H，t，J＝8Hz)；7.4-6.8(12H，m)；5.68(1H，d，J＝8Hz)；4.80(1H，d，J＝16Hz)；4.60(1H，d，J＝16Hz)；1.40(9H，s)ppm.Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝485.3.實(shí)施例293-苯甲酰甲基哌嗪根據(jù)實(shí)施例5A所述方法，制得3-苯甲酰甲基哌嗪，產(chǎn)率為53％。
實(shí)施例303-((2-苯甲酰氨基)苯甲?；?哌嗪在迪安-斯達(dá)克條件下，將實(shí)施例29中所述酮(5.5g，27.8mmol)和新蒸的苯基肼(2.75ml，27.8mmol)于回流的甲苯中一起攪拌4小時(shí)。加入氯化鋅(2.5g)并繼續(xù)回流過夜。令攪拌下的混合物冷卻至室溫，將所得沉淀過濾，得到鋅鹽混合物形式的吲哚粗品(9.25g)。將所述粗產(chǎn)物(3g)溶于乙酸(80ml)中，加入CrO3(4.8g)并將混合物于70℃下攪拌3小時(shí)，然后冷卻，用3M KOH堿化并用EtOAc萃取。將合并的萃取液干燥(MgSO4)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用80％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到黃色固體(1.466g，44％，兩步)。引哚粗品的1H NMR(270MHz，d6DMSO)δ11.90(1H，br.s)；9.07(1H，dt，Jd＝8Hz，Jt＝1.5Hz)；7.95(1H，d，J＝8Hz)；7.6-7.3(8H，m)；7.23(1H，t，J＝8Hz)；7.14(1H，t，J＝8Hz)ppm.3-(2-氨基苯甲?；?噠嗪的1H NMR(270MHz，CDCl3)δ12.16(1H，br.s)；9.34(1H，dd，J1＝5Hz，J2＝1.5Hz)；8.97(1H，d，J＝8Hz)；8.10-7.40(9H，m)；7.15(1H，t，J＝8Hz)ppm.
實(shí)施例313-(2-氨基苯甲?；?哌嗪將實(shí)施例30中所述苯甲酰胺(700mg，2.31mmol)溶于乙醇(8ml)中并于80℃下用5M KOH(20ml)處理4小時(shí)。將混合物冷卻，用5％KHCO3稀釋并用EtOAc萃取。將萃取液過濾(Whatman1PS，分相器)，得到黃色結(jié)晶固體狀所述標(biāo)題化合物(160mg，32％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.30(1H，dd，J1＝5Hz，J2＝1.5Hz)；7.90(1H，dd，J1＝7.5Hz，J2＝1.5Hz)；7.75(1H，d，J＝7.5Hz)；7.68(1H，m)；7.33(1H，m)；6.73(1H.d.J＝9Hz)；6.62(1H.t，J＝7.5Hz)；6.40(2H，br.s)ppm.實(shí)施例32(3RS)-芐氧羰基氨基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮如實(shí)施例1C所述，由實(shí)施例31中所述氨基酮(160mg，0.805mmol)制得所述標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物由EtOAc/乙醚/己烷中結(jié)晶純化，得到淺黃色固體)91mg，30％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.25(1H，dd，J1＝5Hz，J2＝1.5Hz)；8.34(1H，d，J＝8Hz)；8.19(1H，br.s)；7.63-7.24(9H，m)；7.12(1H，d，J＝8Hz)；6.69(1H，d，J＝8Hz)；5.47(1H，d，J＝8Hz)；5.17(2H，s)ppm.實(shí)施例33(3RS)-芐氧羰基氨基-1-叔丁基羰基氨基-2，3-二氫-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮如實(shí)施例1D所述，用1-溴代頻哪酮將實(shí)施例32中所述苯并二氮雜卓(85mg，0.2196mmol)進(jìn)行烷基化，所述產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用EtOAc洗脫)，得到黃色固體(75mg，70％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.23(1H，dt，Jt＝5Hz，Jd＝1.5Hz)；8.37(1H，d，J＝9.5Hz)；7.62-7.50(3H，m)；7.37-7.23(6H，m)；7.13(1H，d，J＝8Hz)；6.75(1H，d，J＝8Hz)；5.57(1H，d，J＝8Hz)；5.14(2H，s)；5.01(1H，d，J＝17.8Hz)；4.46(1H，d，J＝17.8Hz)；1.25(9H，s)ppm.實(shí)施例34N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲用實(shí)施例5F和6中所述的方法，由實(shí)施例33中所述的苯并二氮雜卓(70mg，0.144mmol)制得所述標(biāo)題化合物。將所述產(chǎn)物經(jīng)色譜法純化(用3％MeOH的EtOAc溶液洗脫)并將所得固體于MeCN/乙醚中析晶(12mg，17％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.19(1H，d，J＝5Hz)；8.33(1H，d，J＝8.5Hz)；7.6-7.48(2H，m)；7.30-7.00(6H，m)；7.90(1H，br.s)；6.60-6.44(2H，m)；5.77(1H，d，J＝8Hz)；4.95(1H，d，J＝18Hz)；4.53(1H，d，J＝18Hz)；2.91(6H，s)；1.22(9H，s)ppm.Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝514.5.
實(shí)施例353-(4-戊烯酰氨基)苯甲酸甲酯于0℃，將(3-氨基)苯甲酸甲酯(4.5g，29.8mmol)溶于DCM(10ml)和吡啶(1ml)中，滴加戊烯酰氯(由4-戊烯酸(3.0g，29.97mmol)和亞硫酰氯(6.6ml)于室溫下反應(yīng)1小時(shí)，蒸發(fā)并與DCM共沸現(xiàn)制備)的DCM(3ml)溶液。令混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和1M HCl配分，有機(jī)相用5％KHCO3和鹽水洗滌，過濾(whatmanR 1PS分相器)并蒸發(fā)。將殘余物進(jìn)行色譜分離(用30％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到無色油狀物(2.20g，32％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.05(1H，t，J＝1.5Hz)；7.93(1H，d，J＝8Hz)；7.79(1H，d，J＝8Hz)；7.56(1H，br.s)；7.42(1H，t，J＝8Hz)；5.92(1H，m)；5.2-5.0(2H，m)；3.93(3H，s)；2.51(4H，m)ppm.
實(shí)施例363-(5-溴代戊酰氨基)苯甲酸甲酯于室溫氮?dú)夥障?，將?shí)施例35中所述化合物(1.7g，7.3mmol)溶于無水THF(25ml)中，加入9-BBN(20ml，0.5M溶液)并于室溫下攪拌3小時(shí)。加入1M NaOH(8ml)，然后加入27％過氧化氫(2.5ml，滴加)。于40℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后將混合物蒸發(fā)，溶于EtOAc中并用5％KHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相過濾(Whatman_1PS，分相器)，蒸發(fā)并進(jìn)行色譜分離(用95％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到硼酸鹽混合物形式的醇。將所述產(chǎn)物溶于DCM(120ml)中并于室溫?cái)嚢柘拢萌交?5g)和四溴化碳(6.2g)處理2小時(shí)。然后，將混合物2蒸發(fā)并進(jìn)行色譜分離(用40％EtOAc的己烷溶液洗脫)，靜置結(jié)晶，得到無色油狀物(1.54g，67％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ9.62(1H，br.s)；8.26(1H，t，J＝1.5Hz)；7.95-7.8(2H，m)；7.4(1H，m)；3.96(3H，s)；3.44(2H，m)；2.66(2H，m)；1.98(4H，m)ppm.
實(shí)施例373-(2-氧代-1-哌啶基)苯甲酸甲酯將實(shí)施例36中所述溴化物(1.50g，4.88mmol)溶于無水DMF(40ml)中并于0℃下用NaH(160mg，80％油分散體)處理。將混合物于室溫氮?dú)夥障聰嚢?0分鐘，然后加入KI(80mg)并將混合物于70℃下加熱4小時(shí)。將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和1M HCl配分，有機(jī)相用5％KHCO3和鹽水洗滌，過濾(Whatman_1PS，分相器)并蒸發(fā)。將殘余物進(jìn)行色譜分離(用2％MeOH的EtOAc溶液洗脫)，得到無色油狀物(640mg，56％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.1-7.95(2H，m)；7.60-7.50(2H，m)；3.98(3H，s)；3.75(2H，m)；2.64(2H，m)；2.03(4H，m)ppm.
實(shí)施例383-(1-哌啶基)苯甲酸甲酯將實(shí)施例37中所述化合物(640mg，2.75mmol)溶于無水THF(30ml)中并加入甲硼烷-四氫呋喃復(fù)合物(5ml，1M THF溶液)。將混合物于氮?dú)夥障禄亓鳡顟B(tài)下攪拌1小時(shí)，然后冷卻并蒸發(fā)。殘余物溶于MeOH/乙酸(6/1，v/v，70ml)并回流加熱3小時(shí)，然后蒸發(fā)并進(jìn)行色譜分離(用10％EtOAc的己烷溶液洗脫)，得到無色油狀物(540mg，90％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.59(1H，t，J＝1.5Hz)；7.46(1H.dd.J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；7.28(1H，t，J＝8Hz)；7.11(1H，m)；3.89(3H，s)；3.18(2H m)1.75-1.62(4H，m)；1.61-1.55(2H，m)ppm.
實(shí)施例393-(1-哌啶基)苯甲酸將實(shí)施例38中所述化合物(540mg，2.466mmol)溶于兒(12ml)和水(8ml)中，加入氫氧化鋰水合物(300mg，7.143mmol)并將混合物于40℃下攪拌1小時(shí)?；旌衔镉靡宜崴峄?，蒸發(fā)，與甲苯共沸并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用60/40/2，v/v/v，E-tOAc/己烷/AcOH洗脫)，得到無色固體(450mg，90％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.66(1H，s)；7.54(1H，d，J＝8Hz)；7.32(1H，t，J＝8Hz)；7.17(1H，dd，J1＝8Hz，J2＝1.5Hz)；3.22(4H，m)；1.72(4H，m)；1.61(2H，m)ppm.實(shí)施例40N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲用實(shí)施例2所述方法，將3-(1-哌啶基)苯甲酸(225mg，1.097mmol)轉(zhuǎn)變?yōu)楫惽杷狨ァＯ蛩霎惽杷狨サ腄CM(5ml)溶液中加入實(shí)施例19的苯并二氮雜卓(220mg，0.6286mmol)，將混合物于室溫下攪拌1小時(shí)，然后蒸發(fā)并進(jìn)行色譜分離(用90％EtOAc的己烷溶液洗脫)，于MeCN中重結(jié)晶，得到白色固體(180mg，52％)。[α]D＝+117°(c＝0.296，CHCl3).1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.59(1H，d，J＝6Hz)；8.15(1H，d，J＝8Hz)；7.75(1H，t，J＝6Hz)；7.50(1H，t，J＝6Hz)；7.4-6.9(8H，m)；6.61(2H，m)；5.73(1H，d，J＝8Hz)；4.96(1H，d，J＝17.5Hz)；4.50(1H，d，J＝17.5Hz)；3.12(4H，m)；1.73-1.52(6H，m)；1.22(9H，s)ppm.Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝553.4.實(shí)施例41(3RS)-叔丁氧羰基氨基-2，3-二氫-2-氧代-5-苯基-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮將氨基甲酸叔丁基酯(15g)、苯并三唑(15.26g)和二羥乙酸(11.8g)在苯(250ml)中一起混合并如Katritsky J OrG，Chem1990，55，2266所述，在迪安-斯達(dá)克分水器輔助下回流加熱。
將混合物冷卻并用5％NaHCO3萃取兩次，合并的水萃取液用乙醚洗滌，然后酸化并用EtOAc萃取。EtOAc萃取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘余物溶于DCM(80ml)并用DMAP(0.4g0和2-氨基苯酮(8g，40.4mmol)處理。攪拌下將混合物冷卻至0℃并加入水溶性碳化二亞胺(10g)。于室溫下繼續(xù)攪拌3小時(shí)，此后，將混合物蒸發(fā)并用EtOAc和5％KHCO3配分。有機(jī)相用1M HCl和鹽水洗滌，干燥并過濾(Whatman 1PS分相器)，然后蒸發(fā)至干。將殘余物溶于冰冷卻的飽和氨甲醇溶液中，蓋好并于室溫下攪拌45分鐘。將混合物再次冷卻并蒸發(fā)，殘余物懸浮于乙醚(100ml)和1MHCl(250ml)中，潷析出乙醚并將水相堿化，用EtOAc(×2)萃取。合并的萃取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。所得固體于E-tOAc/己烷中重結(jié)晶，得到白色固體(8.62g，61％)。1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.41(1H，br.s)；7.60-7.14(9H，m)；6.36(1H，d，J＝8.8Hz)；5.32(1H，d，J＝8.8Hz)；1.48(9H，s).實(shí)施例42N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲于0℃將實(shí)施例19的水性(R)-胺(750mg，2.14mmol)溶于無水DCM(10ml)中并用異氰酸間甲苯基酯(0.33ml，2.57mmol)處理。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)，然后蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行色譜分離(用70％EtOAc的己烷溶液洗脫)。將殘余物于E-tOAc/己烷中重結(jié)晶，得到白色結(jié)晶狀固體(955mg，92％)。Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝484.2.1H NMR(270MHz，CDCl3)δ8.79(1H，d，J＝3Hz)；8.30(1H，d，J＝8Hz)；7.96(1H，t，J＝8Hz)；7.63(1H，t，J＝8Hz)；7.55-6.95(10H，m)；5.83(1H，d，J＝8Hz)；5.08(1H，d，J＝17Hz)；4.71(1H，d，J＝17Hz)；2.41(3H，s)；1.38(9H，s)ppm.[α]D＝+119.8°(c＝0.272，CHCl3).
實(shí)施例43乙氧羰基-(1-苯并三唑基)甘氨酸
(實(shí)施例14的另一種方法)將氨基甲酸乙酯(69.0g，774.5mmol)、二羥乙酸(71.3g，774.5mmol)和苯并三唑(92.0g，774.5mmol)溶于甲苯(2.3L)中并將混合物蒸餾加熱3小時(shí)，以沉淀出產(chǎn)物。所述混合物用甲苯稀釋(總共2.3L)并于15℃下攪拌過夜。過濾收集所生成的沉淀，用甲苯(160ml)洗滌并干燥，得到所述標(biāo)題化合物(196.06g，96％)mp.189-192℃。
實(shí)施例442-(2-氨基苯甲?；?吡啶(實(shí)施例15的另一種方法)將2-氨基苯并三唑(58.3g，493.6mmol)和2-溴代吡啶(132.5g，838.6mmol)溶于甲苯(875ml)并在氮?dú)夥障聦⒒旌衔锢鋮s至低于-30℃。在低于-30℃下，向所述混合物中滴加正丁基鋰(15％正己烷溶液；700ml，1.09mol)。令混合物溫?zé)嶂?℃并繼續(xù)攪拌1.5小時(shí)，將混合物傾入3M HCl(800ml)，溫度低于15℃，并攪拌15分鐘。分出的有機(jī)相用3M HCl(200ml)萃取，合并的水相用甲苯(200ml)洗滌，在低于5℃下用25％NaOH堿化至pH 9并于室溫下攪拌過夜。過濾收集所生成的沉淀，將其于異丙醇(880ml)中重結(jié)晶，得到所述標(biāo)題化合物(70.05g，72％)mp.145-146℃。實(shí)施例45(3RS)-乙氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例16的另一種方法，用DCC代替WSC和DMAP)于DCM(850ml)中將2-(2-氨基苯甲?；?吡啶(56.4g，284.5mmol)和EtOC-(1-苯并三唑基)甘氨酸(94.1g，356.1mmol)混合，于0-5℃下滴加DOC(83.8g，406.1mmol)的DCM(80ml)溶液并將混合物攪拌1小時(shí)。向所述混合物中加入5％NaH-CO3(1L)并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。將所生成的沉淀過濾并將有機(jī)相用鹽水(600ml)洗滌，濃縮至約300ml?；旌衔镉眉状?500ml)稀釋并濃縮至3約500ml。
在低于5℃下，向所述溶液中加入20％氨甲醇溶液(600ml)并在低于10℃下將混合物攪拌3小時(shí)。在低于15℃下向所述溶液中加入乙酸(500ml)，并將混合物于0℃攪拌過夜并蒸發(fā)。向殘余物中加入CHCl3(1.5L)和水(500ml)并用25％NaOH堿化至pH9。有機(jī)相用鹽水(700ml)洗滌并濃縮至約500ml。將混合物用EtOAc(1.5L)稀釋，常壓下濃縮至約1.5升，并于0℃攪拌過夜。過濾收集所生成的沉淀，得到所述標(biāo)題化合物(70.55g，77％)mp.220-223℃。實(shí)施例46(3RS)-乙氧羰基氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(對實(shí)施例17作微小變化)將(3RS)-乙氧羰基氨基-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(14.6g，45.0mmol)溶于無水DMF(73ml)中，在低于5℃下分批加入氫化鈉(1.4g，58.5mmol)并將混合物于室溫下攪拌1小時(shí)。然后，在低于10℃下滴加1-溴代頻哪酮(10.21g，57.0mmol)并在室溫下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。將混合物蒸發(fā)，溶于DCM(73ml)中并用5％NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相蒸發(fā)并于EtOAc/己烷(1∶1，v/v，146ml)中重結(jié)晶，得到白色固體狀所述標(biāo)題化合物(15.4g，81％)mp.214-216℃。實(shí)施例47(3RS)-氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(實(shí)施例18的另一種方法，用TMS-I代替HBr，以較干凈的反應(yīng)得到較高的產(chǎn)率)于30-35℃下，將六甲基乙硅烷(4.36g，29.8mmol)滴加到碘(7.51g，29.6mmol)的DCM(27ml)溶液中并將混合物于30℃下攪拌1小時(shí)。
在低于25℃下，向上述溶液中加入(3RS)-乙氧羰基氨基-1-(叔丁基羰基甲基)-2，3-二氫-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮(10.0g，23.7mmol)的DCM(40ml)溶液并將混合物攪拌50小時(shí)。然后，在低于25℃下將混合物傾入3MHCl(80ml)中并將水相用DVM(10ml×2)洗滌。合并的有機(jī)相用3M HCl(20ml)萃取。向合并的水相中加入DCM(50ml)并在低于5℃下將混合物用25％NaOH堿化至pH10。有機(jī)相用鹽水(50ml)洗滌并蒸發(fā)。加入CH3CN(50ml)并將混合物過濾以除去少量的不溶物。將濾液蒸發(fā)，得到褐色泡沫狀所述標(biāo)題化合物(7.75g，93％)，無需進(jìn)一步純化。實(shí)施例483-叔丁氧羰基氨基苯甲酸(對實(shí)施例27作微小變化)將3-氨基苯甲酸(24.69g，180.0mmol)溶于2M KOH(180ml)和二烷(180ml)中，并在室溫下用二碳酸二叔丁基酯(53.03g，243.0mmol)處理過夜。蒸除二烷并將溶液用1M KOH(300ml)稀釋。水相用乙醚(200和300ml)洗滌并用濃HCl酸化至pH4。過濾收集所生成的白色沉淀，用水洗滌并干燥(P2O5)，得到所述標(biāo)題化合物(38.97g，91％)。
實(shí)施例49N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲鹽酸鹽將N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲(70g，136.6mmol)溶于乙醇(1L)中并滴加2.26M HCl/乙醇(63.5ml，143.4mmol)。將混合物溫?zé)嶂?0℃，得到一澄清溶液，將其接種晶種，冷卻至0℃并在相同溫度下攪拌過夜。過濾收集所生成的沉淀，得到白色晶體狀所述標(biāo)題化合物(62.4g，82％)mp.181-184℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.46(1H，br.s)；8.61(1H，d，J＝5Hz)；8.02(2H，m)；7.66(3H，m)；7.57(1H，t，J＝6Hz)；7.45(1H，d，J＝8Hz)；7.34(3H，m)；7.20(1H，br.s)；7.07(1H，br.s)；5.41(1H，d，J＝8Hz)；5.05(1H，d，J＝18Hz)；4.85(1H，d，J＝18Hz)；3.02(6H，s)；1.17(9H，s)ppm.
實(shí)施例503-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)苯甲酸在低于10℃下，將氫化鈉(18.33g，60％油分散體，458.3mmol)分批加到3-叔丁氧羰基氨基苯甲酸(43.48g，183.3mmol)的DMF(600ml)溶液中并在攪拌下1小時(shí)內(nèi)將混合物溫?zé)嶂潦覝?。?℃30分鐘內(nèi)，向所述溶液中滴加MeI(84.54g，595.6mmol)并將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。將所述混合物蒸發(fā)并將殘余物用EtOAc(1.2L)和水(600ml)配分，有機(jī)相用飽和NaHCO3(100ml)和水(200ml×5)洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。
將殘余的油狀物溶于甲醇(1L)，于5℃下向所述溶液中加入1MLiOH(185ml)并將混合物于室溫下攪拌12小時(shí)。將溶液蒸發(fā)以除去甲醇，用水稀釋并用EtOAc/己烷(1∶2，v/v，300和500ml)洗滌。水相用濃HCl酸化至pH 4并用EtOAc(400和200ml)萃取。合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘余物于EtOAc/己烷(1∶20，v/v，420ml)中重結(jié)晶，得到所述標(biāo)題化合物(36.08g，78％)。實(shí)施例513-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)苯基異氰酸酯在低于5℃下，將Et3N(3.71g，336.7mmol)和氯代甲酸乙酯(4.31g，39.7mmol)的丙酮(10ml)溶液依次滴加到3-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)苯甲酸(8.0g，31.8mmol)的丙酮(64ml)溶液中。攪拌30分鐘后，在低于5℃下向所述溶液中加入NaN3(3.10g，47.7mmol)的水(10ml)溶液，將混合物于相同溫度下再攪拌1小時(shí)，然后傾入甲苯(80ml)和水(160ml)中。有機(jī)相用鹽水洗滌，回流2小時(shí)并蒸發(fā)，將殘余物蒸餾(100-105℃/0.9-1.0mmHg)，得到黃色油狀所述標(biāo)題化合物(6.2g，78％)。實(shí)施例52(N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓-3-基)-N′-(3-甲氨基苯基)脲在低于20℃下，將3-(N-叔丁氧羰基-N-甲氨基)苯基異氰酸酯(19.30g，77.7mmol)滴加到實(shí)施例19的手性-胺(27.19g，77.6mmol)的DCM(200ml)溶液中并的混合物于室溫下攪拌30分鐘，然后蒸發(fā)。將殘余物溶于EtOAc(200ml)和水(100ml)中，在低于20℃下向所述混合物中滴加濃HCl(120ml)并攪拌3小時(shí)。向分出的水相中加入DCM(500ml)并在低于20℃下用20％NaOH堿化至pH10。有機(jī)相用鹽水(300ml)洗滌，蒸發(fā)并于乙醇中析晶。過濾收集所生成的沉淀并于乙醇(1.8L)中重結(jié)晶，得到白色晶體狀所述標(biāo)題化合物(27.30g，72％)mp.243-246℃。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(1H，d，J＝5Hz)；8.15(1H，d，J＝8Hz)；7.77(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；7.51(1H，dt，Jt＝8Hz，Jd＝1.5Hz)；7.39-6.76(9H，m)；6.54(1H，d，J＝8Hz)；6.30(1H，dd，J＝8，1.5Hz)；5.72(1H，d，J＝8Hz)；4.96(1H，d，J＝18Hz)；4.54(1H，d，J＝18Hz)；2.78(3H，s)；1.23(9H，s)ppm.Mass Spec(+ve FAB)[M+H]+＝499.
本發(fā)明化合物以及本發(fā)明制備的化合物對CCK-B受體具有有效并且選擇性拮抗作用，同時(shí)可抑制由五肽促胃酸激素激活的胃酸分泌作用。此活性的測定方法如下文所述。CCK-B受體結(jié)合親合性測定無需進(jìn)行麻醉，將約100只SD鼠斷頭，立刻由每只鼠上切除全腦并用特氟隆包覆的均漿器將其在10-倍體積的0.32M蔗糖水溶液中勻化。將如此獲得的勻漿用帶有冷卻裝置的離心機(jī)以900G離心10分鐘，并將上清液在11500G再離心15分鐘。將如此獲得的沉淀懸浮于含有0.08％Triton X-100的50mM Tris-HCl緩沖液(pH7.4)中，令此懸浮液靜置30分鐘并再以11500G離心15分鐘。以離心分離的方法，將如此獲得的沉淀用5mM Tris-HCl緩沖液洗滌兩次并用50mM Tris-HCl緩沖液洗滌兩次。經(jīng)洗滌的沉淀懸浮于50mM Tris-HCl緩沖液中，并將如此獲得的懸浮液于-80℃貯存，直至得到所需的膜制劑。
將所述膜制劑溫?zé)嶂潦覝?，?0mM HEPES緩沖液(含有130mM NaCl、5mM MgCl2、1mM EGTA和0.25mg/ml桿菌肽；pH6.5)稀釋并在[125I]BH-CCK-8和所試化合物存在下，于25℃孵育120分鐘，然后通過吸濾進(jìn)行分離。在1μM CCK-8存在下測定非特異性結(jié)合。用γ-計(jì)數(shù)器測定結(jié)合到所述受體上的經(jīng)標(biāo)記的配體的量，確定IC50值，即50％抑制特異性結(jié)合所需所試化合物的濃度。
本發(fā)明化合物的IC50值在0.1至＜100nM范圍內(nèi)；有代表性實(shí)施例的IC50值如下所示
>通過比較在鼠身上的所述CCK-A受體結(jié)合作用，測定CCK-B受體的選擇性用Polytrone-型均漿器將SD鼠的胰腺在20-倍體積的50mMTris-HCl緩沖液(pH7.7)中勻化，用超離心機(jī)以50000G將所述勻漿離心兩次，進(jìn)行10分鐘。將如此獲得的沉淀懸浮于40-倍體積的50mMTris-HCl緩沖液(含有0.2％BSA、5mM MgCl2、0.1mg/ml桿菌肽和5mM DTT；pH7.7)中，有將所述懸浮液于-80℃下貯存，直至得到所需的膜制劑。
然后，將所述膜制劑溫?zé)嶂潦覝?，?∶10用所述緩沖液稀釋并在[3H]1-364，718和所試化合物存在下，于37℃孵育30分鐘，然后通過吸濾進(jìn)行分離。在1μM L-364，718存在下，測定非特異性結(jié)合。用液體閃爍計(jì)數(shù)器測定結(jié)合到所述受體上經(jīng)標(biāo)記的配體的量，確定IC50值，即50％抑制特異性結(jié)合所需所試化合物的濃度。
在CCK-B/促胃酸激素拮抗劑中，對CCK-A受體的高親合性是所不希望的，因?yàn)椋鼤?dǎo)致副作用例如膽汁積郁以及在治療過程中形成膽結(jié)石。因此，對于治療劑來講，較優(yōu)選的是對所述CCK-B受體具有選擇性。此選擇性用IC50(CCK-A)/IC50(CCK-B)的比來表示；所述比值越大，則所述選擇性越好。
下表中總結(jié)了優(yōu)選實(shí)施例化合物的CCK-B和CCK-A結(jié)合數(shù)據(jù)，以及A/B比。與美國專利4,820,834中實(shí)施例281化合物(也稱作L365，260)相比，許多化合物的CCK-B受體結(jié)合親合性均表現(xiàn)出有較明顯的提高。與美國專利4,820,834中實(shí)施例281化合物相比，某些化合物還表現(xiàn)出與CCK-B受體比CCK-A受體具有更高的選擇性。
受體結(jié)合親合性IC50值(nM)化合物CCK-B CCK-A A/B比美國專利4,820,834中29 12,000 410實(shí)施例281化合物實(shí)施例1的化合物4.52 844187實(shí)施例2的化合物2.08 495238實(shí)施例3的化合物0.80 433540實(shí)施例4的化合物0.63 441700實(shí)施例22的化合物 0.20 113565實(shí)施例52的化合物 0.10 5025020在鼠身上測定由五肽促胃酸激素-激活的胃酸分泌的抑制作用用烏拉坦(腹膜內(nèi)注射1.25g/kg)將鼠麻醉，將導(dǎo)管插入氣管中，切開腹腔壁，露出胃和部分十二指腸，并在將賁門結(jié)扎后，將聚乙烯導(dǎo)管插入前胃。然后將十二指腸輕輕地切開一小口，由切口處向胃的方向插入聚乙烯導(dǎo)管，并將幽門結(jié)扎，以固定所述導(dǎo)管。
由前胃向幽門方向以3ml/min的速度灌注生理鹽水(將pH調(diào)至7.0)，用pH儀(AUT-201；Toa Electrnics，Ltd.生產(chǎn))通過對所述灌注液進(jìn)行連續(xù)滴定，測定胃酸分泌情況。所述連續(xù)滴定用25mMNaOH溶液進(jìn)行，直至pH達(dá)到7.0，結(jié)果用10分鐘內(nèi)胃酸分泌量的形式表示(μEq/10min)。以15μg/kg/hr的速度靜脈內(nèi)輸注五肽促胃酸激素。
胃酸的分泌隨輸注五肽促胃酸激素而提高，60分鐘后達(dá)到最大水平，此后將穩(wěn)定地維持在這一水平。然后靜脈內(nèi)輸注所試藥物并測定胃酸分泌情況。測定ED50值，即將胃酸分泌量由最大受平降低50％所需所述藥物的量。有關(guān)的IC50值如下所示。
下表顯示了所觀測到的具有代表性實(shí)施例的最大抑制作用。每一結(jié)果均為3-5只動物的平均值。
上述試驗(yàn)表明，本發(fā)明化合物和本發(fā)明制備的化合物是有效的CCK-B抑制劑，并且它們能夠抑制由五肽促胃酸激素引起的胃酸釋放的刺激作用。因此，它們可用于治療與作為媒體的CCK-B或促胃酸激素受體有關(guān)的疾病，此類疾病應(yīng)包括胃-十二指腸紊亂、例如胃和十二指腸潰瘍、胃炎、消化性食管炎、佐樸林-埃利森綜合癥、對促胃酸激素敏感的胰腺疾病和對促胃酸激素敏感的癌癥。本發(fā)明化合物還應(yīng)能治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂例如焦慮癥和精神病。本發(fā)明化合物還可用于控制食欲和疼痛。
本發(fā)明化合物及其鹽可以片劑、粉劑、膠囊劑、顆粒劑、液體、注射液、栓劑、軟膏劑和膠粘劑的形式通過口服(包括舌下用藥)或非腸道用藥。
適于藥物生產(chǎn)用的載體和賦形劑可以是固體或液體、無毒制藥材料例如乳糖、硬脂酸鎂、淀粉、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、橄欖油、芝麻油、可可脂、乙二醇和其它常規(guī)使用的材料。
本發(fā)明化合物的制劑實(shí)施例如下所示。片劑制劑實(shí)施例
20mg片劑制劑用流動制粒包衣機(jī)(Ohgawara Seisakusho生產(chǎn))將實(shí)施例4的化合物(100g)、乳糖(367g)和玉米淀粉(90g)一起混合均勻，向混合物中噴灑10％羥丙甲基纖維素(200g)水溶液，然后進(jìn)行制粒。干燥后，將顆粒濾過20目篩，然后加入20g羧甲基纖維素鈣和3g硬脂酸鎂，將混合物在裝有7mm×8.4R研棒的旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)(HataTekkosho生產(chǎn))中進(jìn)行加工，如此制備每片片劑重量為120mg。40mg片劑制劑用流動制粒包衣機(jī)(Ohgawara Seisakusho生產(chǎn))將實(shí)施例4的化合物(140g)、乳糖(280g)和玉米淀粉(70g)一起混合均勻，向混合物中噴灑10％羥丙甲基纖維素(175g)水溶液，然后進(jìn)行制粒。干燥后，將顆粒濾過20目篩，然后加入14.7g羧甲基纖維素鈣和2.8g硬脂酸鎂，將混合物在裝有7.5mm×9R研棒的旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)(HataTekkosho生產(chǎn))中進(jìn)行加工，如此制備每片片劑重量為150mg。
本發(fā)明化合物的臨床劑量由醫(yī)師根據(jù)確診的疾病以及所治療患者的體重、年齡、性別、病史和其它因素而定。通常，口服劑量為1—1000mg/天，以單劑量或分成較小的多劑量形式施用。
權(quán)利要求
1.式X的苯并二氮雜_衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中(a)R4是烷基，環(huán)烷基或芳基；(b)R10選自鹵素，OH，CH3，OCH3，NR11R12，NO2，NHCHO，CO2H，CN，其中R11和R12獨(dú)立地選自H和烷基(C1-C5)，或者NR11R12一起形成環(huán)結(jié)構(gòu)XI 其中a是1-6；(c)R2是含至少兩個(gè)雜原子的取代或未取代的5-或6-元芳雜環(huán)，其中至少一個(gè)雜原子是氮原子。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R10取代基處于苯環(huán)的間位。
3.按照權(quán)利要求1或2的化合物，其中R4是叔丁基或2-，3-或4-甲基苯基。
4.按照前述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中R10是CH3或NMe2。
5.按照前述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中R2選自2-嘧啶，4-嘧啶，2-哌嗪，6-噠嗪，2-噻唑，4-噻唑，2-惡唑，4-惡唑，3-吡唑，5-吡唑，3-異惡唑，3-異噻唑，2-咪唑，4-咪唑，5-咪唑，2-(N-甲基)咪唑，4-(N-甲基)咪唑和5-(N-甲基)咪唑。
6.按照前述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中苯并二氮雜卓環(huán)3-位的絕對構(gòu)型是R型(如式XII所示)。
7.至少一個(gè)選自下述的按照權(quán)利要求1的化合物及藥學(xué)上可接受的鹽1.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；2.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-噻唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；3.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；4.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-(1-甲基)咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；5.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；6.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；7.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；8.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；9.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；10.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-吡唑基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；11.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲12.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(3-噠嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；13.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲14.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；15.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲16.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(4-嘧啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；17.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；18.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-哌嗪基)-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-二甲氨基苯基)脲；19.N-((3RS)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-5-(2-咪唑基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-(1-吡咯烷基)苯基)脲；20.N-((3RS)-2，3-二氫-5-(4-咪唑基)-1-(4-甲基苯基羰基甲基)-2-氧代-1H-1，4-苯并二氮雜_-3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲。
8.含前述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物作為活性成分的藥物組合物。
9.按照權(quán)利要求8的藥物組合物，它能作為CCK-B和/或促胃酸激素受體拮抗劑并能用作藥物，治療受促胃酸激素控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病，上述疾病包括胃和十二指腸潰瘍，胃炎，反流食管炎，胃癌和結(jié)腸癌以及Zollinger-Ellison綜合癥，或者它可以用作治療受中樞的CCK-B受體控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病的藥物(例如減少焦慮和調(diào)節(jié)食欲)。
10.制備通式V的苯并二氮雜_或其藥學(xué)上的活性鹽的方法，包括用芳香的或雜環(huán)氨基酮(III)偶合任意取代的N-保護(hù)α-(1-苯并三唑基)甘氨酸衍生物(II)，然后使中間體(IV)和氨反應(yīng)，再酸催化環(huán)化所得的氨-酮， 其中R2是任意取代的芳香碳環(huán)或雜環(huán)基；R8是低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芳烷基，或任意取代的芳基或雜芳基；R9是H，低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)或CH2COR4，其中R4是烷基，環(huán)烷基，或任意取代的芳基，雜芳基或飽和雜環(huán)基；X1是H，烷基(C1-C3)，烷氧基(C1-C3)，F(xiàn)，Cl，Br；Y是-O-，-NH-，或單鍵。
11.按照權(quán)利要求10的方法，其中R8是低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)，環(huán)烷基(C3-C8)，或任意取代的芐基，苯基或雜芳基；R9是H或低級烷基(C1-C6，線型或支鏈)；X1是H；Y是-O-。
12.制備下述任何化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的包括權(quán)利要求10的步驟的方法1.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓3-基)-N′-((3-二甲氨基)苯基)脲；2.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓3-基)-N′-(3-甲基(甲酰氨基)苯基)脲；3.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜卓3-基)-N′-((3-甲基氨基)苯基)脲；4.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-吡啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_3-基)-N′-(3-氨基苯基)脲；5.N-((3R)-1-叔丁基羰基甲基-2，3-二氫-2-氧代-5-(2-比啶基)-1H-1，4-苯并二氮雜_3-基)-N′-(3-甲基苯基)脲；
13.制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括下述反應(yīng)步驟 試劑(a) (b)NH3，MeOH；(c)NH4OAc，AcOH；(d)NaH，DMF；(e)R4COCH2Br；(f)HBr，DCM or H2，Pd/C；(g)
14含前述權(quán)利要求10-13中任何一項(xiàng)制備的化合物作為活性成分的藥物組合物。
15.按照權(quán)利要求14的藥物組合物，它能作為CCK-B和/或促胃酸激素受體拮抗劑并能用作藥物，治療受促胃酸激素控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病，上述疾病包括胃和十二指腸潰瘍，胃炎，反流食管炎，胃癌和結(jié)腸癌以及Zollinger-Ellison綜合癥，或者它可以用作治療受中樞的CCK-B受體控制的生理學(xué)功能失調(diào)引起的疾病的藥物(例如減少焦慮和調(diào)節(jié)食欲)。
全文摘要
式I的苯并二氮雜衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽其中(a)R其中a是1-6；(c)R這些化合物是促胃酸激素和/或CCK-B受體拮抗劑。
文檔編號A61P3/04GK1129442SQ9419313
公開日1996年8月21日 申請日期1994年8月25日 優(yōu)先權(quán)日1993年8月25日
發(fā)明者G·森普爾, H·里德, M·徹爾克, M·佐藤, M·太田, K·宮田, A·西田, M·石井 申請人:山之內(nèi)制藥株式會社, 佛靈研究有限公司