專(zhuān)利名稱(chēng)：巰-亞硝基化合物及其醫(yī)學(xué)用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明系合成含有一氧化氮(Nitric Oxide，簡(jiǎn)稱(chēng)NO)的化合物，將其作為血管平滑肌、呼吸道平滑肌和消化道平滑肌的松弛劑，用于臨床和科學(xué)研究。
1980年，F(xiàn)urchgott首次發(fā)現(xiàn)完整的血管內(nèi)皮細(xì)胞是乙酰膽堿引起血管平滑肌松弛的重要因素。內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)釋放一種內(nèi)皮細(xì)胞松弛因子(endothelium-derivedrelaxing Factor，簡(jiǎn)稱(chēng)EDRF)而松弛血管平滑肌。1987年，F(xiàn)urchgott-和Ignarro等人分別證明EDRF是一種有NO基因的生物活性物質(zhì)。繼后，科學(xué)界證明NO不僅具有擬EDRF的舒張血管作用，而且是非腎上腺素能、非膽堿能(NANC)神經(jīng)釋放的主要抑制性遞質(zhì)，在抑制呼吸道平滑肌和胃腸運(yùn)動(dòng)中起重要作用。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，NO由于具有易于穿透血腦屏障，舒張腦血管和易化神經(jīng)遞質(zhì)的突觸聯(lián)系，而可望用于治療老年精神癡呆癥。
但是NO的生物半衰期短，約幾秒鐘，故難以應(yīng)用于臨床。將NO基因共價(jià)連接于含巰基的化合物所形成的S-亞硝基化合物(S-nitroso compound，簡(jiǎn)稱(chēng)RSNO)具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，半衰期可隨母體R不同而不同的特點(diǎn)，因而可用于疾病治療和科學(xué)研究。
本發(fā)明的目的旨在于提供這類(lèi)化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的RSNO，以供科學(xué)研究和臨床應(yīng)用。
含還原巰基(-SH)的有機(jī)物在一定條件下可與NO共價(jià)連接而成為NO的載體。Stamler等人在1992年曾報(bào)道體內(nèi)存在微摩爾濃度的RSNO和巰代亞硝基蛋白質(zhì)。現(xiàn)已知含巰基化合物可在偏酸性條件下與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成RSNO。其反應(yīng)通式為反應(yīng)產(chǎn)物RSNO的溶液外觀(guān)澄明，無(wú)沉淀產(chǎn)生，在毫摩爾濃度(mM)時(shí)呈紅色。但若R為N-乙酰青霉酸衍胺，RSNO溶液呈淺綠色。若反應(yīng)液PH值太低，將影響原R基因的生物活性。譬如，當(dāng)R為寡肽時(shí)，過(guò)酸將引起肽鍵斷裂，或在臨床應(yīng)用時(shí)患者產(chǎn)生取1.83g谷胱甘肽，攪拌加入含14.6毫克的EDTA的1L 0.2N HCl中(50mM EDTA)。制得澄明無(wú)色的5.95mM GSH溶液。另取0.41g NaNOa加入1L蒸餾水，制得5.95mM的NaNO2溶液。將GSH溶液緩慢地?cái)嚢杓尤隢aNO2液中，所得產(chǎn)品為澄明微紅色的GSNO(分子量336.3)，含量1g/l(2.98mM)。
實(shí)施例2 S-亞硝基-N-乙酰-L-半胱氨酸(SNAC)的制備。
取1.69g N-乙酰-L-半胱氨酸，攪拌加入到含14.6mg EDTA的1升0.2NHCL中，制得10.3mM的N-乙酰-L-半胱氨酸。另取0.71g NaNO2，加入1L蒸餾水，制得10.3mM的NaNO2液。將N-乙酰-L-半胱氨酸液緩慢地?cái)嚢杓尤隢aNO2液中，所得產(chǎn)品為澄明微紅色的SNAC(分子量193.2)，含量1g/L(5.17mM)。
實(shí)施例3 S-亞硝基半胱氨酸(Cys-NO)的制備。
取1.61gCys，攪拌加入到含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mM EDTA)，制得13.3mM的Cys溶液。另取0.92g NaNO2，加入到1L蒸餾水中，制得無(wú)色的NaNO2溶液(13.3mM)。將Cys溶液緩慢地?cái)嚢杓尤隢aNO2溶液中，所得產(chǎn)品為澄明微紅色的CsyNO(分子量150.2)，含量1g/L(6.65mM)。
實(shí)施例4S-亞硝基巰甲丙脯酸(NO-Captopril)的制備。
取1.76g Captopril，攪拌加入含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mN EDTA)，制得8mM的Captopril液。另取0.55g NaNO2，加入1L蒸餾水中，制得8mM的NaNO2溶液。將Captopril液緩慢地?cái)嚢杓尤隢aNO2液中，可得澄明微紅色的NO-Captopril，含量1g/L(4mM)。
實(shí)施例5 S-亞硝基甲巰咪啶(NO-methimazole)的制備。
取1.57g甲巰咪啶，攪拌加入含14.6mg EDTA的1L 0.2N Hcl中(50mM EDTA)，制得13.7mM的甲巰咪啶液，另取0.95g的NaNO2，加入1L蒸餾水，制得13.7mM的NaNO2溶液。將甲巰咪啶液緩慢地?cái)嚢杓尤隢aNO2液，可得澄明微紅色的NO-methimazole，含量1g/L(6.85mM)。酸性刺激，應(yīng)予避免。若溶液中含有微量金屬元素，尤其是過(guò)渡態(tài)金屬(transitionmetals)，如Hg2+，Cd2+等，則應(yīng)加入少量乙二胺四乙酸(ethylenediaminote-traacetic acid，簡(jiǎn)稱(chēng)EDTA)，整合這些過(guò)渡態(tài)金屬，避免巰氨鍵(S-N)的裂解。
本發(fā)明中，含S-H的有機(jī)物的母體可以是烷基，如二巰基丙醇；也可以是氨基酸及其衍生物，如半胱氨酸(Cys)，乙酰半胱氮酸(N-acetyl-LiCysteine)，同型半胱氨酸(L-homocysteine)，谷胱甘肽(GSH)和巰甲丙脯酸(Captopril)；或者是芳雜環(huán)類(lèi)化合物，如甲巰咪啶(methimazole)；或N-乙酰青霉酸衍胺(N-acetylpenicillamine)。
本發(fā)明提出的化合物RSNO可用于多種心血管系統(tǒng)疾病。如S-亞硝基半胱氨酸，S-亞硝基乙酰半胱氨酸可用于抗心絞痛，而不具有硝酸甘油樣耐受性現(xiàn)象和高鐵血紅蛋白血癥不良反應(yīng)。S-亞硝基谷胱甘肽可用于緩解高危妊娠時(shí)臍胎盤(pán)阻力增高引起的胎兒宮內(nèi)窘迫癥，改善胎兒宮內(nèi)狀態(tài)，避免剖腹產(chǎn)；亦可用于妊娠子癇高血壓危象(Hellp syndrome)，降低血壓和恢復(fù)血小板記數(shù)。RSNO化合物可用于代替硝普鈉治療高血壓危象，急、慢性心功能不全，避免硝普鈉引起的硫氰化物的蓄積。巰代亞硝酸巰甲丙脯酸具有直接舒張血管和無(wú)-SH特有的臭味等巰甲丙脯酸本身無(wú)法克服的缺點(diǎn)。RSNO的抑制消化道平滑肌、括約肌的作用可試用于胃腸絞痛，避免因使用阿托品類(lèi)藥物產(chǎn)生的全身性副作用。局部給予RSNO尚可使陰莖海綿體腔充盈，引起無(wú)痛性暫時(shí)性勃起而用于治療陽(yáng)萎。用RSNO包被內(nèi)窺鏡的纖維束，可使內(nèi)窺鏡易于通過(guò)泌尿道或消化道。以RSNO作為NO的供體，對(duì)NO在生命科學(xué)，尤其是神經(jīng)生物學(xué)中的作用，提供了一類(lèi)有用的工具藥。
本發(fā)明提出的RSNO溶液容易制備(反應(yīng)均可在室溫進(jìn)行)，僅需將用摩爾量的RSH和HaNO2分別溶于50mM EDTA的0.2N Hcl和蒸餾水中，再將以上RSH溶液與NaNO2溶液等體積混勻即可。制成的RSNO溶液應(yīng)用褐色玻璃容器包裝，以避免光裂解效應(yīng)。
以下列舉實(shí)例詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1 S-亞硝基谷胱甘肽(GSNO)的制備。
權(quán)利要求
1. S-亞硝基化合物是由含還原巰基(-SH)的組分RSH和組分NaNO2兩部分結(jié)合而成的。組分RSH為已知的化合物或藥物。包括二巰基丙醇、半胱氨酸(Cysteine)、乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-Cysteine)、同型半胱氨酸(L-homocysteine)、谷光甘肽(glutathione，GSH)、巰甲丙脯酸(Captopril)、甲巰咪啶、N-乙酰青霉酸衍胺(N-acetyl penicillamine)。
2.按照權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于RSH中的還原型-SH數(shù)應(yīng)與NaNO2數(shù)以相等的摩爾數(shù)混合。如1分子二巰基丙醇應(yīng)與2分子NaNO2混合；而1分子巰甲丙脯酸應(yīng)與1分子NaNO2混合。
3.按照權(quán)利要求1所述的S-亞硝基化合物，應(yīng)在弱酸性和50mM EDTA存在下合成。
4.按照權(quán)利要求1所述的S-亞硝基化合物，應(yīng)避光貯存。
5.權(quán)利要求1中所述的任何一種化合物可用于心腦血管性疾病、消化系統(tǒng)疾病、呼吸系統(tǒng)疾病和陽(yáng)萎，并可作為Nitric Oxide供體用于生命科學(xué)研究。
全文摘要
本發(fā)明巰-亞硝基化合物(RSNO)是由含還原型巰基的組分RSH和組分NaNO
文檔編號(hào)A61K31/095GK1141771SQ95109259
公開(kāi)日1997年2月5日 申請(qǐng)日期1995年8月2日 優(yōu)先權(quán)日1995年8月2日
發(fā)明者賈力 申請(qǐng)人:賈力