專利名稱：水溶性棉酚制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬棉酚制劑及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域。
棉酚(Gossypol)存在于錦葵科植物草棉(GossypiumHerbaceum L.)中?！吨兴幋筠o典》曾指出棉酚有止咳作用和抗菌及抗病毒作用，還具有抗癌作用；此外，棉酚也曾被試用作為男用殺精子抗生育藥物。近些年來，對于棉酚的抗癌作用有了進(jìn)一步的研究，在臨床用于治療癌癥時，棉酚不但能專一性地殺滅癌細(xì)胞，在一定劑量條件下還能調(diào)節(jié)機體免疫狀態(tài)，升高白細(xì)胞數(shù)，改善正常細(xì)胞的代謝，具有扶正祛邪，增強體質(zhì)的作用。因而，特別適宜于因種種原因不能被化療或手術(shù)后替代化療的抑癌藥物，例如用于肺癌、食道癌、胃癌、腸癌、肝癌、白血病等癥，同時，由于藥物能突破機體內(nèi)多種血藥屏障，因此也適用于腦癌、前列腺癌、絨癌等癥，還可適用子宮肌瘤、頭部良性腫瘤等。
但是，由于棉酚的脂溶性，在制備時受到了劑型的限制，最初是制成口服膠囊，后經(jīng)改進(jìn)制成胃溶片或腸溶片.而這類劑型也存在一些缺點，影響了藥效的發(fā)揮，例如①在胃腸道中停留時間長，不容易溶解，不易被機體所吸收，不易發(fā)揮藥效，導(dǎo)致用藥劑量增加；②由于藥物溶解時局部濃度過高，易刺激胃腸道而產(chǎn)生副反應(yīng)如口干、訥呆、惡心、嘔吐、腹脹和腹瀉等。
本發(fā)明的目的為克服現(xiàn)有棉酚制劑的缺點，研制一種高效低毒的水溶性棉酚制劑。
本發(fā)明提供了一種水溶性棉酚制劑(商品名“古康”)，該制劑是以棉酚為活性成份與藥用載體組成的。
本發(fā)明的水溶性棉酚制劑中，棉酚與藥用載體的含量配比為含0.01-99.99％的棉酚與含99.99-0.01％的藥用載體以任意比例制成100％的組成。
本發(fā)明的水溶性棉酚制劑，其中的活性成份棉酚(藥用規(guī)格)可以市售得到，藥用載體有電解質(zhì)平衡液、緩沖劑、PH調(diào)節(jié)劑、粘結(jié)劑、潤滑劑、崩解劑、助溶劑、矯味劑等。其中所述的藥用載體電解質(zhì)平衡液可以是氯化鈉、復(fù)方氯化鈉(即每100ml中含氯化鈉0.82～0.90克、氯化鉀0.025～0.035克、氯化鈣結(jié)晶0.03～0.36克)、碳酸氫鈉--生理鹽水(即每100ml溶液含1.3克碳酸氫鈉)、乳酸鈉--生理鹽水(即每100ml溶液中含1.87克乳酸鈉)、直腸透析液(即每100ml溶液中含氯化鈉0.6克、碳酸氫鈉0.2克、氯化鉀0.048克，硫酸鎂0.031克、乳酸鈣0.077克、葡萄糖1.5克或Krebs-Henseleit溶液(即每1 00毫升溶液中含氯化鈉0.692克、氯化鉀0.035克、氯化鈣0.028克、磷酸二氫鉀0.016克、硫酸鎂·7H2O 0.029克、碳酸氫鈉0.21克、葡萄糖0.21克)等；緩沖劑為甘氨酸或除堿性氨基酸以外的其它各種氨基酸；PH調(diào)節(jié)劑為鹽酸；粘結(jié)劑為食用纖維素或淀粉等；潤滑劑為硬脂酸鎂或滑石粉等；崩解劑為干淀粉及改良型淀粉、海藻酸與膠、白陶土等；助溶劑為聚乙二醇、吐溫80、丙二醇或丙三醇等；矯味劑為蔗糖等。
本發(fā)明的水溶性棉酚制劑可以為口服液、散劑、硬膠囊、軟膠囊、片劑或針劑。
本發(fā)明的水溶性棉酚制劑經(jīng)與現(xiàn)有脂溶性棉酚片劑作的藥效對比試驗及毒理試驗，顯示其優(yōu)越性，見下列試驗結(jié)果一、水溶性棉酚制劑(古康)與脂溶性棉酚制劑(棉酚片)的藥效對比試驗1.比較古康與棉酚混懸液(代表棉酚片)的抗癌效應(yīng)。
2.比較古康與棉酚混懸液(代表棉酚片)對大白鼠的生物學(xué)效應(yīng)。
以往對棉酚生物學(xué)效應(yīng)或臨床的研究，都注重于它的殺精子抗生育作用，具代表性的動物模型是大白鼠。為了評價新的劑型古康的生物學(xué)效應(yīng)，故仍選擇對大白鼠的殺精子效應(yīng)，可與棉酚片作一直觀比較。見下表。
古康與棉酚混懸液對大白鼠精子生物學(xué)效應(yīng)的影響的比較
從實驗結(jié)果看出，棉酚片組中(以棉酚混懸液代表棉酚片灌服)，在低劑量的情況下，即每鼠每天一次灌胃6mg/Kg和12mg/Kg，連續(xù)灌四周，在該劑量條件下，大白鼠輸精管中的精子全部存活，尚未達(dá)棉酚殺滅精子的起效劑量；但古康在該種劑量條件下便可殺滅約一半的精子(37％，53％)，大約相當(dāng)于棉酚組一次灌胃18mg/Kg時的殺滅精子的效應(yīng)(50％)。當(dāng)一次灌胃量達(dá)30mg/Kg時，無論是古康或棉酚片均可100％殺滅精子，這即為二種劑型共同的抗生育劑量。說明古康較棉酚片有更低的生物學(xué)效應(yīng)起效濃度，但抗生育濃度二者相同。說明古康在體內(nèi)吸收較好。
3.古康與棉酚片在小白鼠肝臟中結(jié)合率的研究。
目的是比較在口服途徑下，古康與棉酚片在小白鼠腸胃中吸收的快慢，以及藥物進(jìn)入肝臟后，比較游離態(tài)和結(jié)合態(tài)數(shù)量的差別。
①肝臟中棉酚含量和吸收高峰的比較。
服藥后16小時中(共分7次測定)，古康進(jìn)入肝臟的量(7組測定總和)與棉酚懸浮劑相比較為88.16±2.69(古康)＞67.2±1.00(棉酚片)，(P＝0.0018＜0.01)，數(shù)值相差極顯著。因此推測棉酚片在腸道中可能溶解欠佳，會有一部分量在大便中被排泄而浪費。古康的肝中含量峰值約在灌服后的8小時，棉酚片約在灌服后的12小時達(dá)到高峰，棉酚片的峰值推遲4小時，表明古康在腸胃中無需花時溶解，因而吸收較棉酚為快。
②肝臟中結(jié)合率的比較。
在肝臟中棉酚的結(jié)合態(tài)與游離態(tài)含量的比值(結(jié)合態(tài)/游離態(tài))，灌服以棉酚片時，7次測定的平均值為1.78±0.09；灌服以古康時，平均值為1.24±0.04，兩者皆大于1，即在動物機體中棉酚主要以結(jié)合態(tài)的形式存在。1.24±0.04(古康)＜1.78±0.09(棉酚片)，(P＝0.0051＜0.01)，表示二者由于劑型不同，進(jìn)入肝臟后，古康的結(jié)合態(tài)少于棉酚片組，即古康的游離濃度高。同時在古康組中，在吸收高峰值時(灌服后8小時)，試驗數(shù)值顯示游離值大于結(jié)合值，結(jié)合態(tài)/游離態(tài)＝0.79±0.02，而棉酚片組則無此種現(xiàn)象。即由于古康組大量棉酚的快速良好吸收，棉酚在肝臟中與組織的結(jié)合受到時空的限制，從而涌現(xiàn)出更多的游離棉酚，通過血液循環(huán)后，達(dá)到靶細(xì)胞的濃度也高，利于生物效應(yīng)的發(fā)揮。③結(jié)論小白鼠在灌服棉酚后，前16小時中，棉酚吸收進(jìn)入肝臟的量，古康大于棉酚片，即古康容易被吸收，浪費少；進(jìn)入肝臟后，棉酚片的結(jié)合率大于古康。因此，古康一旦被吸收，會有更多的游離棉酚流向血液，進(jìn)入靶目標(biāo)。這表明古康在機體內(nèi)的生物學(xué)效應(yīng)優(yōu)于棉酚片劑。二、水溶性棉酚制劑(古康)的毒理試驗1、動物急性毒性試驗棉酚片對小白鼠的半致死劑量已有明確結(jié)論1973年上海醫(yī)藥工業(yè)研究院和漸江人民衛(wèi)生實驗院對小白鼠腹腔注射棉酚，LD50值為26mg/Kg。因此為了了解古康的急性毒性大小，仍以小白鼠為實驗動物，作腹腔注射的比較。結(jié)果顯示古康的小白鼠半致死量LD50＝118.5mg/Kg，約為棉酚片的5倍，即毒性大大低于棉酚片。2、動物長期毒性試驗以大白鼠為動物模型，研究口服古康的長期毒性。結(jié)果顯示在古康殺精子的起效劑量(6mg/Kg)的2倍與5倍劑量的條件下，六個月灌服期間及停服后一個月中，大白鼠的生長均優(yōu)于空白對照組，反應(yīng)靈敏，體質(zhì)強壯。在起效劑量10倍的劑量條件下，大白鼠前三個月體重增長高于對照組，后三個月的生長明顯下降，體重不如對照組。停藥后作精子存活率檢查，對照組精子100％存活，藥物組0％存活。表明長期口服古康，較低劑量有刺激生長，增強體質(zhì)的作用，且不會影響藥物的生物學(xué)效應(yīng)。較高劑量不利于機體的生長。建議臨床應(yīng)用古康，以較低劑量為宜。上述試驗結(jié)果表明本發(fā)明的水溶性棉酚制劑(古康)有下列優(yōu)點
1、本發(fā)明的水溶性棉酚制劑(古康)進(jìn)入腸胃道不會產(chǎn)生腸胃刺激反應(yīng)，這是因為它是以水溶液形式存在，且濃度很低，服用時可進(jìn)一步用水稀釋成稀溶液，機體對藥物的吸收迅速且充分，因此藥物擴散均勻。同時水溶液還具有相對片劑獨特的優(yōu)點，這便是可以按需任意控制口服藥物的劑量，從而避免用藥不足或由無必要的藥量過大而引起的對機體的損害。
2、本發(fā)明的水溶性棉酚制劑(古康)較棉酚片更易為機體吸收。從“對大白鼠生物學(xué)效應(yīng)的影響的比較”的試驗結(jié)果顯示它較棉酚片有更低的生物學(xué)起效劑量，因而口服劑量亦可降低，副反應(yīng)也隨之減小。從“在小白鼠肝臟中的結(jié)合率的研究”的試驗結(jié)果便可解釋上述現(xiàn)象相對棉酚片，古康中的棉酚可被機體快速良好地吸收，而進(jìn)入肝臟后與組織的結(jié)合率卻小于棉酚片，從而游離濃度較高。這是因為大量古康中的棉酚被快速吸收，棉酚在肝臟中與組織的結(jié)合受時空的限制，從而涌現(xiàn)出更多的游離棉酚進(jìn)入血液循環(huán)，達(dá)到靶細(xì)胞的濃度也高，利于生物效應(yīng)的充分發(fā)揮。以棉酚的抗腫瘤效應(yīng)為例，以往的臨床適用量為30～60mg/日，現(xiàn)以古康抗腫瘤，臨床對小孩的口服試用量是6mg/日、12mg/日兩種和對成人12mg/日、24mg/日、36mg/日三種劑量。由于低劑量的滋補作用，增強免疫機能的效應(yīng)，致使可以兼治各種病理癥狀如止痛、止血、消胸腹水、增強睡眠與食欲、增加正常血球和血小板的量、降低發(fā)熱病人的體溫等。
3、體內(nèi)外的試驗結(jié)果顯示本發(fā)明的水溶性棉酚制劑殺滅癌細(xì)胞的能力有提高。體外細(xì)胞培養(yǎng)試驗，由于它在水中的溶解大大改善，藥效增加10至20倍；對于動物體內(nèi)的抑癌試驗，也顯示藥物使半數(shù)癌細(xì)胞死亡的半致死劑量LD50，古康約為棉酚片的1/3，即藥效提高三倍。有利于用較少的藥物來達(dá)到治療的目的。同時，由于新劑型相對老劑型的毒副作用更小，藥效更高，因此對提高棉酚原有的所有治療功效，如抗菌、止咳、治療子宮出血、燙傷，以及男用殺精子抗生育等，都可起到一定的作用。
本發(fā)明的另一個目的是提供水溶性棉酚制劑的制備方法。本發(fā)明的水溶性棉酚制劑的制備方法是取總量9/10體積的水，煮沸后加入135～150mM量的電解質(zhì)平衡液和10％的助溶劑，攪拌冷卻至60℃～80℃，然后加入0.4～0.8mM量的棉酚和24mM量甘氨酸，攪拌1～2小時，冷卻至40℃，用鹽酸調(diào)節(jié)PH至6.0～7.0，最后以水稀釋至總量，經(jīng)冷卻、過濾及滅菌過濾后制成劑型。
本發(fā)明的水溶性棉酚制劑的制備中，棉酚可以市售得到，所述的水可以是去離子水、三蒸餾水或注射用水；所述的助溶劑為聚乙二醇、吐溫80、丙二醇或丙三醇等；所述的電解質(zhì)平衡液可以為氯化鈉溶液、復(fù)方氯化鈉溶液(含氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣)、碳酸氫鈉--生理鹽水、乳酸鈉--生理鹽水、直腸透析液(含氯化鈉、碳酸氫鈉、氯化鉀、硫酸鎂、乳酸鈣、葡萄糖)或仿血清的離子濃度電解質(zhì)平衡液如Krebs-Henseleit溶液；所述的緩沖劑為甘氨酸或除堿性氨基酸以外的其它各種氨基酸。
用本發(fā)明的方法可以制備水溶液棉酚日服液、針劑、散劑、硬膠囊、軟膠囊、片劑等。
本發(fā)明的水溶液棉酚制劑制備方法簡便，宜于規(guī)模型工業(yè)化生產(chǎn)。
實例1、制備水溶性棉酚口服液在二頸燒瓶中加入去離子水(或三蒸餾水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化鈉(或相當(dāng)量的其它電解質(zhì)平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不斷攪拌溶液，略候冷至80℃，加入0.62克棉酚和1.8克甘氨酸，在不斷攪拌中維持溫度80℃兩小時，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N鹽酸調(diào)pH至6.0～6.5，徐徐加入去離子水至總體積1000毫升。冷卻，布氏漏斗過濾，濾液再用細(xì)菌漏斗過濾。濾液裝瓶，100℃水浴20分鐘消毒。最后經(jīng)質(zhì)量檢測。實例2、制備水溶性棉酚口服液按實例一相同方法制備。不同之處是以直腸透析液即每100毫升中含氯化鈉0.6克、碳酸氫鈉0.2克、氯化鉀0.048克、硫酸鎂0.031克、乳酸鈣0.077克、葡萄糖1.5克來替代氯化鈉溶液。實例3、制備水溶性棉酚口服液按實例一相同方法制備。不同之處是以Krebs-Henseleit溶液即每100毫升溶液中含氯化鈉0.692克、氯化鉀0.035克、氯化鈣0.028克、磷酸二氫鉀0.016克、硫酸鎂·7H2O0.029克、碳酸氫鈉0.21克、葡萄糖0.21克來替代氯化鈉溶液。實例4、制備水溶性棉酚針劑除以下三點外，按實例一相同方法制備(1)水為預(yù)先制備的注射用水。(2)上述口服液中棉酚投料為0.62克，針劑改為0.12克。制得棉酚的濃度為0.1mg/ml。(3)濾液裝瓶用安培瓶。實例5、制備水溶性棉酚針劑按實例四相同方法制備。不同之處是以復(fù)方氯化鈉注射液，即每100ml中含氯化鈉0.82～0.9克、氯化鉀0.025～0.035克、氯化鈣結(jié)晶0.03～0.36克來替代氯化鈉溶液。實例6、制備水溶性棉酚針劑按實例四相同方法制備，不同之處是以碳酸氫鈉-生理鹽水即每100毫升溶液中含1.3克碳酸氫鈉來替代氯化鈉溶液。實例7、制備水溶性棉酚針劑按實例四相同方法制備，不同之處是以乳酸鈉-生理鹽水即每100毫升溶液中含1.87克乳酸鈉來替代氯化鈉溶液。實例8、制備水溶性棉酚散劑在二頸燒瓶中加入去離子水(或三蒸餾水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化鈉(或相當(dāng)量的其它電解質(zhì)平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不斷攪拌溶液，略待冷至80℃，加入1.23克棉酚和1.8克甘氨酸，在不斷攪拌中維持溫度80℃兩小時，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N鹽酸調(diào)pH至6.0～6.5，徐徐加入去離子水至總體積1000毫升。冷卻，布氏漏斗過濾，濾液再用細(xì)菌漏斗過濾。濾液裝瓶。將以下配方(氯化鈉0.30克，枸櫞酸鉀0.69克(或氯化鉀0.15克)，碳酸氫鈉0.25克，無水葡萄糖20克)混勻，粉碎并過80目篩。在混勻粉末中加入上述濾液10毫升，混勻。在冷凍干燥機中干燥，裝入鋁箔塑料袋或瓶中，密封瓶口。實例9、制備水溶性棉酚硬膠囊在二頸燒瓶中加入去離子水(或三蒸餾水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化鈉(或相當(dāng)量的其它電解質(zhì)平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不斷攪拌溶液，略待冷至80℃，加入2.45克棉酚和1.8克甘氨酸，在不斷攪拌中維持溫度80℃兩小時，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N鹽酸調(diào)pH至6.0～6.5，徐徐加入去離子水至總體積1000毫升。冷卻，布氏漏斗過濾，濾液再用細(xì)菌漏斗過濾。濾液裝瓶。在1000毫升濾液中，徐徐溶入甘氨酸20～100克，再加入食用纖維素50～200克，使成觸變流體藥物，灌注入已準(zhǔn)備的明膠藥用膠囊中，然后用冷凍干燥機冷凍干燥成冷凍干燥膠囊。實例10、制備水溶性棉酚軟膠囊按實例九相同方法制得同量觸變流體藥物向其中加入10～100克甘油或丙二醇，混勻，可防止軟膠囊的硬化作用。在全自動或半自動的壓模機內(nèi)，將混勻藥液置于已準(zhǔn)備的軟性明膠膠片中，于鋼板模內(nèi)進(jìn)行壓丸，經(jīng)表面清洗、干燥和檢驗后，即可包裝為成品。實例11、制備水溶性棉酚片劑在二頸燒瓶中加入去離子水(或三蒸餾水)900毫升，煮沸。溶入9克氯化鈉(或相當(dāng)量的其它電解質(zhì)平衡液)，再加入100克聚乙二醇2000，不斷攪拌溶液，略候冷至80℃，加入2.45克棉酚和1.8克甘氨酸，在不斷攪拌中維持溫度80℃兩小時，至棉酚全部溶解。待冷至40℃，用1N鹽酸調(diào)pH至6.0～6.5，徐徐加去離子水至總體積1 000毫升.冷卻，布氏漏斗過濾，濾液再用細(xì)菌漏斗過濾。濾液裝瓶。按下列組方配料
將以上材料攪拌均勻，制成軟材，通過14目篩制粒和整粒，濕顆粒應(yīng)均勻結(jié)實，入冷凍干燥機干燥，以φ6m/m深弧度沖模壓片。經(jīng)篩選合格的片劑用外包衣包裹。包衣材料用半薄膜衣的方式比較適合。即先按糖衣層方式，包隔離層、粉衣層，然后減少包糖衣的層次，2～3層即可，再包上薄膜衣料2～3層，這樣衣層牢固，保護(hù)性能好。薄膜衣料可選用各種甲基、乙基、丙基纖維素均可。經(jīng)外包衣包裹的藥片經(jīng)質(zhì)量檢查合格后，以鋁塑復(fù)合膜或金屬箔膜進(jìn)行單片包裝為宜，可再次與外界隔絕。每片含水溶性棉酚12mg。
權(quán)利要求
1.一種水溶性棉酚制劑，其特征在于該水溶性棉酚制劑是由棉酚作為活性成分與藥用載體組成的，其中棉酚與藥用載體的含量配比為含0.01～99.99％的棉酚與99.99～0.01％的藥用載體以任意比例制成100％的組成。
2.一種如權(quán)利要求1所述的水溶性棉酚制劑的制備方法，其特征在于該制備方法是取總量9/10體積的水，煮沸后加入135～150mM量的電解質(zhì)平衡液和10％的助溶劑，攪拌冷卻至60℃～80℃，然后加入0.4～0.8mM量的棉酚和24mM的量甘氨酸，攪拌1～2小時，冷卻至40℃，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0，最后以水稀釋至總量，經(jīng)冷卻、過濾及滅菌過濾后制成劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的水溶性棉酚制劑，其特征在于其中所述的藥用載體為電解質(zhì)平衡液、緩沖劑、PH調(diào)節(jié)劑、粘結(jié)劑、潤滑劑、崩解劑、助溶劑、矯味劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2和3所述的水溶性棉酚制劑，其特征在于其中所述的藥用載體電解質(zhì)平衡液可以是氯化鈉、復(fù)方氯化鈉(即每100ml中含氯化鈉0.82～0.90克、氯化鉀0.025～0.035克、氯化鈣結(jié)晶0.03～0.36克)、碳酸氫鈉-生理鹽水(即每100ml溶液含1.3克碳酸氫鈉)、乳酸鈉-生理鹽水(即每100ml溶液中含1.87克乳酸鈉)、直腸透析液(即每100ml溶液中含氯化鈉0.6克、碳酸氫鈉0.2克、氯化鉀0.048克、硫酸鎂0.031克、乳酸鈣0.077克、葡萄糖1.5克或KREBS-HENSELEIT溶液(即每100毫升溶液中含氯化鈉0.692克、氯化鉀0.035克、氯化鈣0.028克、磷酸二氫鉀0.016克、硫酸鎂·7H2O 0.029克、碳酸氫鈉0.21克、葡萄糖0.21克)；緩沖劑為甘氨酸或除堿性氨基酸以外的其它各種氨基酸；PH調(diào)節(jié)劑為鹽酸；粘結(jié)劑為食用纖維素或淀粉；潤滑劑為硬脂酸鎂或滑石粉；崩解劑為干淀粉及改良型淀粉、海藻酸與膠、白陶土；助溶劑為聚乙二醇、吐溫80、丙二醇或丙三醇；矯味劑為蔗糖。
全文摘要
本發(fā)明涉及水溶性棉酚制劑及其制備方法。該制劑是由作為活性成分的棉酚與藥用載體組成，它們是以含棉酚0.01～99.99％與含藥用載體99.99～0.01％以任意比例制成100％的組成。本發(fā)明的棉酚制劑具有良好的水溶性，利于機體吸收，降低胃腸道副反應(yīng)，提高藥效，減少用藥劑量。本發(fā)明提供了水溶性棉酚的口服液、針劑、散劑、片劑、膠囊等制劑的制備方法。
文檔編號A61K31/045GK1144089SQ9511174
公開日1997年3月5日 申請日期1995年9月1日 優(yōu)先權(quán)日1995年9月1日
發(fā)明者柯一保, 陳小章, 柯欣永 申請人:上海古康生物實業(yè)有限公司