專利名稱：丙型肝炎的防治劑的制作方法
1964年由于Blumberg發(fā)現(xiàn)澳抗原，(以后得知這是乙型肝炎病毒[(HBVHepatitis B Virus)的外皮蛋白質(zhì)]，HBV的研究有了進(jìn)展，接著，在1973年發(fā)現(xiàn)了甲型肝炎病毒(HAVHepatitis A Virus)。然而，即使使用這些甲型、乙型肝炎病毒標(biāo)記也不能確定的病毒性肝炎還存在，因此引人注目。這種非甲型非乙型肝炎只根據(jù)排除法診斷是非常難以確定病毒的(現(xiàn)在靠其它肝炎病毒標(biāo)記是陰性，而丙型肝炎病毒抗體是陽性來進(jìn)行判斷)。
其原因是血液中的病毒量以及抗原量比HBV規(guī)定少，感染病毒時(shí)的免疫反應(yīng)弱，因此，要闡明其本來面目尚需長時(shí)間。
1988年，Choo等人使黑猩猩接種非甲非乙型肝炎的血友病患者的血液并使之感染，用感染后的黑猩猩血通過免疫篩選，成功地取出丙型肝炎病毒(HCVHepatitis C Virus)的cDNA片斷5-1-1。使用基因工程的方法從該片斷進(jìn)行HCV的核酸鑒定，從而使HCV抗體檢查、HCV的核酸檢測(cè)開始成為可能。
現(xiàn)在已知作為非甲非乙型肝炎者幾乎都是丙型肝炎，并且得知含有其它丁型、戊型五種肝炎病毒。
甲型、乙型、丙型肝炎的特征綜述于下表。
表1基因組 結(jié)構(gòu)感染途徑等甲約7.5Kb的線狀 直鏈27nm的正20面 在肝細(xì)胞中繁殖后型單鏈RNA體結(jié)構(gòu)。沒有被膜，經(jīng)由膽汁、腸道而肝 由五種結(jié)構(gòu)蛋白和 從便中排出，經(jīng)口炎 六種非結(jié)構(gòu)蛋白所 感染。并不變?yōu)槁龢?gòu)成 性肝炎，可完全治愈乙約3.2Kb的二支 直徑為42nm，具有 通過血液感染，三型鏈環(huán)狀DNA 被膜和包圍在被膜 歲以下兒童一經(jīng)感肝 中的直徑為27nm核 染就成為帶菌者，炎 心的雙重結(jié)構(gòu)。而在三歲以上即使感染并不成為帶菌者，只是免疫機(jī)能低下者持續(xù)感染。丙約9.5Kb的線狀 病毒粒子不分離， 通過血液感染。即型單鏈RNA現(xiàn)在可分類為I-IV 使是成人一經(jīng)感染肝 型。與類似病毒相 即成為帶菌者。當(dāng)炎 比較，可推定有結(jié) 輸血后發(fā)生急性肝構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋 炎時(shí)，60～70％將白。
轉(zhuǎn)向慢性肝炎，多出現(xiàn)自身抗體。
由于病毒使細(xì)胞免疫性降低而且使抗原性也降低，因此，HCV在宿主中持續(xù)感染，多成為慢性肝炎。實(shí)際上，作為中和抗體(與抗原特異性結(jié)合，使病毒的生物學(xué)活性消失或減退的抗體)的目標(biāo)物的丙型肝炎病毒被膜的抗原部分可能加速其變異速度，有避免通過抗體而對(duì)其識(shí)別的可能性。
通常，當(dāng)持續(xù)感染HCV時(shí)，雖然持續(xù)患急性肝炎，并產(chǎn)生肝疾病，但有數(shù)年平靜。如果隨后20～30年繼續(xù)無癥侯性的持續(xù)感染，則再度發(fā)生肝炎。如果強(qiáng)的肝病再持續(xù)，則從慢性活動(dòng)性肝炎向肝硬化進(jìn)行，最終生成肝細(xì)胞癌。
因此，在HCV感染初期有必要進(jìn)行病因療法，防止其慢性化。最理想的是首先要求有能抑制病毒增殖的選擇毒性優(yōu)良的藥物(抗病毒劑)。
現(xiàn)在，作為病因治療藥的干擾素(IFN)正在作為丙型肝炎治療的首選藥物使用。
IFN原來是作為抑制病毒增殖的物質(zhì)而被發(fā)現(xiàn)的，從開始就期望它能應(yīng)用于病毒病的治療。然而，由于它發(fā)揮極微量的抗病毒作用，并呈現(xiàn)多種生理作用，所以長時(shí)間以來難以掌握其實(shí)際情況。又由于大量生產(chǎn)的開發(fā)需耗費(fèi)很長時(shí)間，所以在實(shí)際上用于病毒病治療前需要預(yù)料之外的長時(shí)間。
IFN的作用機(jī)能次序可認(rèn)為是由于IFN分子在細(xì)胞表面的受體上特殊性結(jié)合，而在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生二次信號(hào)。這個(gè)信號(hào)作用于細(xì)胞內(nèi)的抗病毒作用物質(zhì)基因群，從而發(fā)現(xiàn)基因。
在其它丙型肝炎治療藥物中，使用作為對(duì)癥療法藥物的肝保護(hù)劑(可期待使肝炎平靜化，從而阻止肝病變的進(jìn)展)的甘草萃取物成分-甘草皂苷(glycyrrhizin)。
這樣，現(xiàn)在幾乎多以IFN作為唯一的治療藥物，但是該藥并非萬能，總的來說，治療有效者約占患者的半數(shù)。而且，在該半數(shù)中，癥狀有改善者當(dāng)不再給藥半年以內(nèi)也可再度發(fā)病。而且，即使給藥IFN也有很多癥狀沒有改善的實(shí)例。目前治療這種IFN無效的病癥的藥物尚未開發(fā)出來。
本發(fā)明人特別根據(jù)與IFN作用機(jī)序不同而提出對(duì)IFN無效病例也有效的藥物，為解決上述問題而反復(fù)專心研究抗丙型肝炎藥物。結(jié)果，發(fā)現(xiàn)由中國藥用植物水仙桃所提取的以下式表示的鞣花酸(ellazic acid)具有抗丙型肝炎活性，發(fā)現(xiàn)在作為其衍生物的具有苯并呋喃酮結(jié)構(gòu)的化合物的新型作用機(jī)理下，具有強(qiáng)的抗丙型肝炎活性并且作為藥物是有用的，從而完成本發(fā)明 鞣花酸本發(fā)明還涉及以選自下列通式(I)、(II)、(III)或(IV)所示的，具有苯并呋喃酮骨架的化合物以及其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分的丙型肝炎防治劑 式中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25和R26相同或不同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2、或者式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基，或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
本文所使用的術(shù)語，下面詳細(xì)說明R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25和R26各個(gè)相同或不同，它們各表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(這里，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2、或者式 (式中，L、M是相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基，或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
這里，以-OCOCH2表示酰氧基，以-NO2表示硝基，以-CO2H表示羧基，以-NH2表示氨基。
又，在-OQ中，當(dāng)Q為氫原子時(shí)，-OQ表示羥基，當(dāng)Q為低級(jí)烷基時(shí)，-OQ表示低級(jí)烷氧基。
低級(jí)烷基是具有碳原子數(shù)為1-6的直鏈或支鏈烷基，具體的是例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、仲戊基、叔戊基、新戊基、1-甲丁基、2-甲丁基、1，1-二甲丙基、1，2-二甲丙基、正己基、異己基、1-甲戊基、2-甲戊基、3-甲戊基、1，1-二甲丁基、1，2-二甲丁基、2，2-二甲丁基、1，3-二甲丁基、2，3-二甲丁基、3，3-二甲丁基、1-乙丁基、2-乙丁基、1，1，2-三甲丙基、1，2，2-三甲丙基、1-乙基-1-甲丙基、1-乙基-2-甲丙基等。
低級(jí)烷氧基是表示對(duì)應(yīng)于上述低級(jí)烷基的化合物，具體的是例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、異戊氧基、仲戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基、1-甲丁氧基、2-甲丁氧基、1，1-二甲丙氧基、1，2-二甲丙氧基、正己氧基、異己氧基、1-甲戊氧基、2-甲戊氧基、3-甲戊氧基、1，1-二甲丁氧基、1，2-二甲丁氧基、2，2二甲丁氧基、1，3-二甲丁氧基、2，3-二甲丁氧基、3，3-二甲丁氧基、1-乙丁氧基、2-乙丁氧基、1，1，2-三甲丙氧基、1，2，2-三甲丙氧基、1-乙基-1-甲丙氧基、1-乙基-2-甲丙氧基等。
其次，以式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基有無取代的氨基甲?；?、N-低級(jí)烷基取代的氨基甲?；騈，N-二低級(jí)烷基取代氨基甲?；?，具體的實(shí)例有氨基甲?；⒓谆被柞；?、二甲基氨基甲?；⒓谆一被柞；?、乙基氨基甲?；⒍一被柞；?、正丙基氨基甲?；?、甲基正丙基氨基甲酰基、乙基正丙基氨基甲酰基、二正丙基氨基甲酰基、異丙基氨基甲?；?、甲基異丙基氨基甲酰基、乙基異丙基氨基甲?；⒍惐被柞；?、正丙基異丙基氨基甲?；⒍』被柞；?、甲基丁基氨基甲?；?、乙基丁基氨基甲酰基、正丙基丁基氨基甲酰基、異丙基丁基氨基甲酰基、二丁基氨基甲酰基、戊基氨基甲?；?、甲基戊基氨基甲?；⒁一旎被柞；?、正丙基戊基氨基甲酰基、異丙基戊基氨基甲酰基、丁基戊基氨基甲?；⒍旎被柞；⒓夯被柞；?、甲基己基氨基甲酰基、乙基己基氨基甲酰基、正丙基己基氨基甲?；?、異丙基己基氨基甲?；?、丁基己基氨基甲?；?、戊基己基氨基甲?；?、二己基氨基甲?；?。
作為有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基上的取代基，其具體有例如羥基、硫醇基、硝基、嗎啉代基；硫代嗎啉代基；氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等的鹵素原子；腈基；疊氮基；甲?；?；甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基等烷基；乙烯基、烯丙基、丙烯基等鏈烯基；乙炔基、丁炔基、丙炔基等炔基；與低級(jí)烷基相對(duì)應(yīng)的甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等烷氧基；氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟乙基等鹵代烷基；羥甲基、羥乙基、羥丙基等羥烷基；胍基、亞胺甲基、亞氨代乙?；话被柞；?；硫代氨基甲?；?；氨基甲?；谆被柞；一劝被柞；榛?；硫代氨基甲酰基甲基、硫代氨基甲?；一攘虼被柞；榛患谆被柞；⒍谆被柞；?、甲基乙基氨基甲?；?、二乙基氨基甲?；韧榛被柞；?；甲基硫代氨基甲酰基、二甲基硫代氨基甲?；?、甲基乙基硫代氨基甲酰基、二乙基硫代氨基甲?；韧榛虼被柞；浑寤?；乙?；孺溚轷；话被?；甲氨基、乙氨基、異丙氨基等烷基氨基；二甲氨基、甲乙基氨基、二乙氨基等二烷基氨基；氨甲基、氨乙基、氨丙基等氨烷基；羧基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基等烷氧基羰基；甲氧基羰基乙基、乙氧基羰基甲基、丙氧基羰基甲基、甲氧基羰基乙基、乙氧基羰基乙基、丙氧基羰基乙基等烷氧基羰烷基；甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基甲基、乙氧基乙基等烷氧基烷基；甲基硫代甲基、甲基硫代乙基、乙基硫代甲基；乙基硫代乙基等烷基硫代烷基；氨甲基氨甲基、氨乙基氨甲基等氨烷基氨烷基；甲基羰氧基、乙基羰氧基、異丙基羰氧基等烷基羰氧基；氧甲基、芐氧基乙氧基乙基等芳基烷氧基烷氧基烷基；羥乙氧基甲基、羥乙氧基乙基等羥烷氧基烷基；芐氧基甲基、芐氧基乙基、芐氧基丙基等芳基烷氧基烷基；三甲銨基、甲基乙基甲銨基、三乙銨基等季銨基；環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等環(huán)烷基；環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基等環(huán)鏈烯基；苯基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基等芳基；甲基硫代基、乙基硫代基、丙基硫代基、丁基硫代基等烷基硫代基；苯基硫代基、吡啶基硫代基、噻吩基硫代基、呋喃基硫代基、吡咯基硫代基等芳基硫代基；芐基、三苯甲基、二甲氧基三苯甲基等的芳基低級(jí)烷基；磺?；⒓谆酋；?duì)位甲苯磺?；热〈幕酋；?；苯甲酰基等芳?；环交?、溴代苯基等鹵代芳基；甲二氧基等氧烷氧基等。具有一個(gè)以上取代基的是指可將這些基任意組合，例如本發(fā)明中含有以羥基、硫醇基、硝基、嗎啉代基、硫代嗎啉代基、鹵原子、腈基、疊氮基、甲?；被?、烷基氨基、二烷氨基、氨基甲?；?、磺酰基、乙?；⑼榛?、烷氧基所取代的芳環(huán)基或雜環(huán)基等。
又，作為芳環(huán)基具體的有苯基、萘基等；作為雜環(huán)基具體的有吡喃基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、咪唑基、吡唑基、呋咱基、噻二唑基等，優(yōu)選的是苯基、吡啶基。
因此，作為具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基的具體實(shí)例有例如苯基、4-羥苯基、3，4-羥苯基、2-吡啶基、3-羥基-4-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-羥苯基、3，4-二甲氧基苯基等。
作為藥理學(xué)上可容許的鹽并不予以特別限定，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽等無機(jī)鹽的加成鹽；醋酸鹽、馬來酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、三氟代醋酸鹽等有機(jī)羧酸的加成鹽；甲磺酸鹽、羥基甲磺酸鹽、羥基乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、?；撬岬扔袡C(jī)磺酸加成鹽；三甲胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽、普魯卡因鹽、吡啶甲基鹽、二環(huán)己胺鹽、N，N′-二芐基乙二胺鹽、N-甲基葡糖胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、三(羥基甲氨基)甲烷鹽、苯乙基芐胺鹽等胺的加成鹽；精氨酸鹽、賴氨酸鹽、絲氨酸鹽、甘氨酸鹽、天門冬氨酸鹽、谷氨酸鹽等氨基酸的加成鹽。
本發(fā)明也含有完全的對(duì)映異構(gòu)體和幾何的異構(gòu)體等的異構(gòu)體。
以下就本發(fā)明有關(guān)化合物的制備方法加以說明。
鞣花酸可由水仙桃的提取液中制得。具體的制法是使用水、低級(jí)脂族醇類、含水的低級(jí)脂族醇類、芳香族醇類、含鹵素溶劑以及它們的混合溶劑在0℃左右至沸點(diǎn)范圍內(nèi)，在減壓、常壓或加壓下對(duì)水仙桃的全草以及其根、莖、葉等進(jìn)行提取，可得到含活性物質(zhì)的萃取物。對(duì)該萃取物進(jìn)行各種分離精制法就可得到作為活性物質(zhì)的鞣花酸。
再者，本發(fā)明所涉及的化合物是公知化合物，以現(xiàn)有技術(shù)可以進(jìn)行制備，以下實(shí)例作為參考的一般制備方法。
通式(I) (式中，R1、R2、R3、R4、R5和R6分別表示與前述定義相同的基)所表示的具有苯并吡喃酮骨架的化合物及其藥理學(xué)上可容許的鹽可通過將上述萃取所得的鞣花酸進(jìn)行直接的官能基轉(zhuǎn)換而制得，例如使用烷化劑進(jìn)行羥基的烷基化；使用無水羧酸進(jìn)行羥基的?；取?br> 這樣，通過常用方法對(duì)鞣花酸進(jìn)行官能基轉(zhuǎn)換就可簡單地得到下列化合物 (式中，Me為甲基、Ac為?；?還有，用下列反應(yīng)式所表示的制備方法也可得到上述通式(I)所示的化合物。 (式中R1、R2、R3、R4、R5以及R6分別表示與上述定義相同的基)例如，通過下列反應(yīng)式所表示的反應(yīng)可得到上述通式(I)中所含的二個(gè)化合物。這反應(yīng)是使聯(lián)苯甲酸硝化，其次通過縮合而形成內(nèi)酯環(huán)，再使硝基還原為氨基。 再有，通過下列反應(yīng)式所表示的制備方法也可得到上述通式(I)所示的化合物 (式中，R1、R2、R3、R4、R5、R6和Me分別表示與上述定義相同的基。)將安息香酸衍生物的羧基進(jìn)行4，4-二甲基噁唑啉化，然后，通過鹵化得到化合物(A)，同樣，得到化合物(B)，將這樣得到的化合物(A)、(B)進(jìn)行反應(yīng)，以常用方法進(jìn)行官能基轉(zhuǎn)換，即得上述通式(I)所表示的化合物。
以具體化合物表示，通過下列反應(yīng)式所表示的反應(yīng)可得到上述通式(I)所包括的化合物 (式中，Me表示與上述定義相同的基。)下列通式(II)所表示的具有苯并吡喃酮骨架的化合物及其藥理學(xué)上容許的鹽可用以下反應(yīng)式表示的方法進(jìn)行合成 (式中，R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13及R14和Me分別表示與上述定義相同的基，Et表示乙基。)用二乙胺使安息香酸衍生物的羧基進(jìn)行酰胺化，再經(jīng)鹵化，即得化合物(C)；另一方面，使甲氧基苯衍生物鹵化，再將該鹵原子以氫氧化硼取代，即得化合物(D)。
將這樣所得的化合物(C)、(D)按照以下反應(yīng)式所示進(jìn)行反應(yīng)，可制備通過式(II)所表示的化合物 (式中，R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、Me以及Et分別表示與上述定義相同的基。)以具體化合物表示，則使用下列反應(yīng)式所表示的反應(yīng)可得到化合物(C′)、(D′) (式中Me、Et表示與上述定義相同的基，n是1或2)按照下列反應(yīng)式所表示的方法進(jìn)行反應(yīng)，可制備上述通式(II)的化合物 (式中，Me、Et和n表示與上述定義相同的基和數(shù)值)通式(II)所表示的化合物還可通過下列反應(yīng)式所表示的方法進(jìn)行合成 (式中，R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、Me和Et表示與上述定義相同的基。)使用二乙胺將安息香酸衍生物的羧基進(jìn)行酰胺化，再通過使與三溴化硼反應(yīng)而得到化合物E；另一方面，通過甲氧基苯衍生物的鹵化而得到化合物(F)。
將這樣得的化合物(E)、(F)按照下列反應(yīng)式進(jìn)行反應(yīng)，可制備上述通式(II)所表示的化合物 (式中，R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14和Et分別表示與上述定義相同的基。)具體化合物的實(shí)例可通過下列反應(yīng)式所表示的方法進(jìn)行反應(yīng)，可制備通式(II)所包括的化合物 根據(jù)上述制備方法，例如可制備下式所表示的化合物等 以通式(III) (式中，R15、R16、R17、R18、R19和R20、分別表示與上述定義相同的基。)所表示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物及其藥理學(xué)上可容許的鹽可按照下列反應(yīng)式所表示的方法進(jìn)行合成 (式中，R15、R16、R17、R18、R19、R20、和Et分別表示與上述定義相同的基。)通過使苯酚衍生物和β-酮酯衍生物反應(yīng)而制備以通式(III)表示的化合物。
具體的，通過下列反應(yīng)式所表示的反應(yīng)，可制備通式(III)中所包含的化合物 例如，可制造下式所表示的化合物 通式(III)中所包含的化合物還可通過下列合成法進(jìn)行制備反應(yīng)式 (式中，R17、R18、R19和R20分別表示與上述定義相同的基；X表示N或CH；Y1、Y2、Y3和Y4分別表示氫原子或表示具有上述一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基的取代基。)通過使二個(gè)化合物的閉環(huán)反應(yīng)，來制備本發(fā)明所涉及的化合物。
具體地，通過下列反應(yīng)式所表示的反應(yīng)而進(jìn)行 (式中，Me和X表示與上述定義相同的基。)可制備下式所表示的化合物
通式(III)中包含的化合物可通過現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行修飾而制備下式所表示的市售化合物 例如以下式所表示的化合物等 (式中，Me表示與上述定義相同的基)另外，以通式(IV)所表示的具有苯并吡喃酮骨架的化合物及其藥理學(xué)上可容許的鹽可通過公知技術(shù)進(jìn)行制備。 (式中，R21、R22、R23、R24、R25和R26、分別表示與上述定義相同的基。)在上述反應(yīng)中，根據(jù)需要，在官能基上的有機(jī)合成是使用常用保護(hù)基來進(jìn)行合成，用適當(dāng)硅膠的柱色譜法，也可用常規(guī)方法精制后進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)。
本發(fā)明所涉及的抗丙型肝炎劑的給藥量視癥狀的程度、年齡、性別、體重、給藥方式、疾病的種類等而不同，通常成人一天為1mg到5g，分成1到數(shù)次給藥。
本發(fā)明所涉及的抗丙型肝炎劑的給藥方式并不特別限定，可按通常方法經(jīng)口服或非腸胃給藥。
這種制劑通常使用賦形劑、粘合劑、潤滑劑、著色劑、調(diào)味調(diào)臭劑等，必要時(shí)也可使用安定劑、乳化劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑等。通常將作為醫(yī)藥品制劑所使用的原料按常規(guī)方法配合而制成藥劑。
作為這些成分例如有動(dòng)植物油(豆油、牛油、合成的甘油脂)、烴類(液體石蠟、鯊烯、固態(tài)石蠟等)、酯油(肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、肉豆蔻酸異丙基酯等)、高級(jí)醇(十八醇十六醇混合物、山萮醇等)、硅樹脂、硅油、表面活性劑(聚氧乙烯脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、丙三醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚氧乙烯聚丙烯嵌段共聚物等)、水溶性高分子(羥乙基纖維素、聚丙烯酸、羧基乙烯基聚合物、聚乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、甲基纖維素等)、醇類(甲醇、異丙醇等)、多元醇(甘油、丙二醇、二丙二醇、山梨醇等)糖(葡萄糖、蔗糖等)、無機(jī)粉(無水硅酸、硅酸鋁鎂、硅酸鋁等)、精制水等。為調(diào)整pH可用無機(jī)酸(鹽酸、磷酸等)、無機(jī)酸的堿金屬鹽(磷酸鈉等)、無機(jī)堿(氫氧化鈉等)、有機(jī)酸(低級(jí)脂肪酸、檸檬酸、乳酸等)、有機(jī)酸的堿金屬鹽(檸檬酸鈉、乳酸鈉等)、有機(jī)堿(精氨酸、乙醇胺等)等。此外，在必要時(shí)還可添加防腐劑、抗氧化劑等。
關(guān)于本申請(qǐng)發(fā)明的作用效果是，本申請(qǐng)發(fā)明所涉及的化合物是基于與IFN不同的新作用機(jī)理，具有抗丙型肝炎作用。本發(fā)明人通過抑制HCV基因的翻譯階段而成功地抑制HCV的發(fā)生。
在真核細(xì)胞的90％以上的mRNA中，40S核糖體在5′末端的帽狀結(jié)構(gòu)上結(jié)合后，移動(dòng)到最后AUG，翻譯性的帽依賴性蛋白質(zhì)開始進(jìn)行合成。
然而，以脊髓灰質(zhì)炎病毒為首的微小RNA病毒屬的病毒染色體組是正單鏈RNA，使5′末端的帽狀結(jié)構(gòu)有缺陷，并具有長的5′側(cè)非翻譯區(qū)域(5′UTR)(在脊髓灰質(zhì)炎病毒約為750堿基)。更且，在5′UTR中，存在有多數(shù)的AUG，HCV-RNA的5′UTR也長達(dá)340堿基，其中，存在有2～3個(gè)AUG。
已知在此病毒上的翻譯是以5′UTR結(jié)構(gòu)作為如原核生物(prok-aryote)的Shine-Dargano排列那樣的核糖體的識(shí)別的機(jī)構(gòu)，也就是，核糖體識(shí)別5′UTR內(nèi)部而開始所謂的內(nèi)部起始(internal init-iation)這樣的非帽依賴性的新機(jī)理而進(jìn)行的。
HCV-RNA 5′UTR在結(jié)構(gòu)上的特征，與其是帽依賴性蛋白質(zhì)合成，還不如認(rèn)為是進(jìn)行內(nèi)部起始的mRNA的非帽依賴性蛋白質(zhì)合成。
中國產(chǎn)的藥用植物水仙桃(Jussiaea suffruticosa毛草龍、仙芳塔花)在中國用于治療感冒和口腔炎等。本發(fā)明人在基于新機(jī)理研制抗丙型肝炎劑過程中發(fā)現(xiàn)，在水仙桃的萃取物中含有抗丙型桿炎活性，并成功地分離出其活性本體。這種化合物就是鞣花酸。已知鞣花酸具有各種生理活性。
例如，曾有報(bào)道它能抑制人類免疫缺陷病毒(HIV)的反向復(fù)制酶和DNA聚合酶的活性，抑制小鼠的癌細(xì)胞的增殖，以及其它抗菌作用、抗真菌作用、抗氧化作用等。
本申請(qǐng)發(fā)明所涉及的鞣花酸及其衍生物在病毒增殖過程中，通過對(duì)核糖體識(shí)別RNA的部位(內(nèi)核糖體進(jìn)入部位(internal nibosmeentry site)；IRES)進(jìn)行的抑制而發(fā)揮抗丙型肝炎活性。
下面列出本發(fā)明所涉及的化合物藥理實(shí)驗(yàn)例，以便闡明本發(fā)明化合物的有用性。
根據(jù)以下方法測(cè)定由鞣花酸及其衍生物的IRES依賴翻譯抑制活性所致的抗丙型肝炎活性，結(jié)果示于表2。
進(jìn)行體外翻譯的鞣花酸及其誘導(dǎo)體的帽依賴性的翻譯以及IRES依賴性翻譯對(duì)抑制活性的測(cè)定方法
1)觀察本底的反應(yīng)性(于試驗(yàn)管不加帽狀球蛋白(Capped-glo-lin)mRNA或IRES-HCV mRNA)的試驗(yàn)在主混合物(master corktail)(在無細(xì)胞翻譯系中必要因子中混入除細(xì)胞內(nèi)的宿主蛋白、mRNA和鹽以外的必要成分儲(chǔ)液，它含有ATP、GTP、二硫蘇糖醇、肌磷酸、肌酸激酶、精胺四鹽酸)中混入Mg(CH3COO)2、CH3COOK、35S蛋氨酸等的反應(yīng)液中并不加入蛋白質(zhì)的翻譯造型，而加入宿主因子的RRL(兔子網(wǎng)狀紅血球溶血液，在兔身皮下注射數(shù)次苯肼后，進(jìn)行采全血調(diào)制)，在30℃下培養(yǎng)50分鐘。
在這種情況下，由于mRNA本來就不存在，因此完全不引起蛋白的翻譯，它作為本底的反應(yīng)，僅呈現(xiàn)翻譯產(chǎn)物，此值以“A”表示。
2)觀察作為正對(duì)照的(加入帽狀球蛋白mRNA或者IRES-HCVmRNA)反應(yīng)性的試驗(yàn)對(duì)于混有主混合物、Mg(CH3COO)2、CH3COOK、35S蛋氨酸和帽狀球蛋白mRNA或IRES-HCV mRNA的反應(yīng)液按上述1)相同方法測(cè)定其反應(yīng)性。
在這種情況下，有mRNA存在，由于未加入一切藥物，所以可認(rèn)為反應(yīng)100％地進(jìn)行。當(dāng)將這里所顯示的蛋白質(zhì)合成反應(yīng)值作為“B”時(shí)，這里的真翻譯反應(yīng)值“C”則是從B減去A的值，C＝B-A。
3)觀察被檢藥物抑制活性的試驗(yàn)對(duì)于混入主混合物，Mg(CH3COO)2、CH3COOK、35S蛋氨酸、帽狀球蛋白mRNA或IRES-HCV mRNA以及被檢藥物的反應(yīng)液按上述1)相同的方法測(cè)定其反應(yīng)性。
當(dāng)將所得的蛋白質(zhì)合成反應(yīng)值作為“D”時(shí)，真翻譯反應(yīng)值“E”就是從D減去A的值，
即 E＝D-A從而被檢藥物的抑制活性可用下式求得抑制活性(％)＝(1-E/C)×100此外，當(dāng)以帽狀球蛋白作為mRNA使用時(shí)，對(duì)球蛋白有抑制；而當(dāng)使用IRES-HCV的情況下，則對(duì)HCV有抑制活性。
表2抗IRES活性和選擇性球蛋白抑制性(％) IRES-HCV抑制率(％)鞣花酸 22 45化合物1 -10 30化合物2 -33 47化合物3 -21 70在上表中，所謂“球蛋白抑制率”表示球蛋白的帽依賴性的翻譯抑制率，所謂“IRES-HCV抑制率”表示丙型肝炎病毒的IRES依賴性的翻譯抑制率。此外，化合物1～3以下構(gòu)造式表示。
化合物1 化合物2 化合物3
因此，可知本申請(qǐng)發(fā)明所涉及的化合物具有的選擇性是它強(qiáng)力地抑制IRES依賴性的翻譯，但是并不抑制帽狀依賴性的翻譯。
這樣，本申請(qǐng)發(fā)明所涉及的化合物具有優(yōu)良抗丙型肝炎活性，對(duì)預(yù)防及治療丙型肝炎是有用的。
實(shí)施例為了更加詳細(xì)說明本發(fā)明，以下列出幾個(gè)本申請(qǐng)發(fā)明有關(guān)化合物的實(shí)施例，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。在實(shí)施例中的1H-NMR譜是用Varian公司的NMR(400MHz)測(cè)定的。
此外，本中請(qǐng)發(fā)明有關(guān)化合物的合成所用原料制備例也一并列出。
在下例中，Me代表甲基，Et代表乙基，Ac代表?；?，Bn代表芐基。
制備例1N，N-二乙基-3-甲氧基苯甲酰胺 將5.0g 3-甲氧基安息香酸懸浮于100ml甲苯中，滴加4.4ml亞硫酰氯和數(shù)滴二甲基甲酰基。在60℃下攪拌3.25小時(shí)后，冷卻到室溫。在該溶液中加入100ml四氫呋喃和6.8ml二乙胺，在室溫下攪拌45分鐘后，再加入5.7ml二乙胺，在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取，將有機(jī)層用水、飽和食鹽水依次洗滌，以無水硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸餾掉，將殘留物用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，得到4.0g(收率為58％)的油狀標(biāo)題化合物。1H-NMR(CDCl3)δppm；1.08～1.23(6H，m)，3.19～3.28(2H，m)，3.42～3.58(2H，m)，3.78(3H，s)，6.83～6.94(3H，m)，7.26(1H，dd，J＝7.7Hz，7.7Hz)制備例2N，N-二乙基-2-溴代-5-甲氧基苯甲酰胺 將2.0g N，N-二乙基-3-甲氧基苯甲酰胺溶于20ml乙酸中，在冰冷卻下，加入0.55ml溴，升到室溫，攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取，將有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(己烷醋酸乙酯系)精制殘留物，得到油狀物的標(biāo)題化合物2.60g(收率94％)。1H-NMR(CDCl3)δppm；1.07(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25(3H，t，J＝6.2Hz)，3.05～3.10(2H，m)，3.22～3.37(1H，m)，3.78(3H，s)，3.78～3.83(1H，m)，6.74～6.79(2H，m)，7.40～7.44(1H，m)制備例32，4-二甲氧基苯基硼酸 將1.0g 2，4-二甲氧基溴代苯溶于5.0ml無水四氫呋喃中，在氮?dú)饬飨?，冷卻到-78℃。在該溶液中滴加3.17ml 1.6M正丁基鋰的己烷溶液。在-78℃下攪拌40分鐘后，加入1.57ml三甲氧基硼，慢慢升溫到室溫，攪拌過夜。在冰冷卻下，加入1N鹽酸直到溶液澄清，以二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮，得到無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物0.94g，該物不精制就可用于以下反應(yīng)。
制備例42-二乙基氨基甲?；?2′，4，4′-三甲氧基聯(lián)苯 在氮?dú)夥障?，?45mg四(三苯基膦)鈀溶于40ml二甲氧基乙烷中，向其中加入685mg N-二乙基-2-溴代-5-甲氧基苯甲酰胺的二甲氧基乙烷溶液，在室溫下攪拌1小時(shí)，隨后，在該溶液中加入940mg 2，4-二甲氧基苯基硼酸的乙醇(6ml)溶液和4.2ml的2M碳酸氫鈉水溶液，加熱回流22小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層在飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮。殘留物用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，并以己烷-乙酸乙酯結(jié)晶，得到結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物320mg(收率39％)。
熔點(diǎn)98～98.5℃。1H-NMR(CDCl3)δppm；0.82(3H，t，J＝7.2Hz)，0.83(3H，t，J＝6.8Hz)，2.64～2.79(1H，m)，2.86～3.00(1H，m)，3.08～3.22(1H，m)，3.66～3.78(1H，m)，3.72(3H，s)，3.80(3H，s)，3.83(3H，s)，6.46(1H，dd，J＝8.4Hz，2.5Hz)，6.48(1H，d，J＝2.4Hz)，6.90(1H，dd，J＝8.8Hz，2.4Hz)，6.92(1H，d，J＝2.5Hz)，7.20(1H，d，J＝8.8Hz)，7.26(1H，d，J＝8.4Hz)實(shí)施例13，8-二羥基-6H-二苯并[b，d]吡喃-6-酮 在氮?dú)夥障?，?20mg 2-二乙基氨基甲?；?2′，4，4′-三甲氧基聯(lián)苯懸浮于10ml無水二氯甲烷中，冷卻到-78℃。在該懸浮液中加入4.2ml 1M三溴化硼的二氯甲烷溶夜，緩慢升溫到室溫，攪拌過夜。冷卻到-78℃，加入2ml甲醇后，升到室溫，加入1N鹽酸，使pH值為1，將所生不溶物過濾，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物78mg(收率37％)。
熔點(diǎn)＞300℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.70(1H，d，J＝2.4Hz)，6.79(1H，dd，J＝8.6Hz，2.4Hz)，7.30(1H，dd，J＝8.8Hz，2.7Hz)，7.49(1H，d，J＝2.7Hz)，8.00(1H，d，J＝8.6Hz)，8.10(1H，d，J＝8.8Hz)·MS(FAB)；229(MH+)制備例5N，N-二乙基-2-甲氧基苯甲酰胺 將5.0g 2-甲氧基安息香酸懸浮于70ml甲苯中，滴加入4.4ml亞硫酰氯和數(shù)滴二甲基甲酰胺。在60℃下攪拌2小時(shí)后，冷卻到室溫。在該溶液中加入100ml四氫呋喃和12.5ml二乙胺，在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取，將有機(jī)層依次用水，飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸餾掉、殘留物用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，得到油狀的標(biāo)記化合物4.3g(收率63％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；1.02(3H，t，J＝7.1Hz)，1.23(3H，t，J＝7.1Hz)，3.13(2H，q，J＝7.1Hz)，3.48～3.64(2H，m)，3.81(3H，s)，6.89(1H，d，J＝8.4Hz)，6.96(1H，ddd，J＝7.5Hz，7.5Hz，0.9Hz)，7.23(1H，dd，J＝7.5Hz，2.0Hz)，7.30(1H，ddd，J＝8.4Hz，7.5Hz，2.0Hz)制備例62-二乙基氨基甲?；?3-甲氧基苯基硼酸 在氮?dú)夥障?，?.3ml四甲基乙二胺溶于130ml無水四氫呋喃中，冷卻到-60℃。緩慢滴加入22.2ml 1.3M固體丁基鋰的環(huán)己烷溶液后，在-60℃攪拌10分鐘。在該溶液中滴加入5.0g N，N-二乙基-2-甲氧基苯甲酰胺的四氫呋喃(13ml)溶液后，在65℃攪拌1小時(shí)。在該溶液中加入7.5ml三甲氧基硼，緩慢升到室溫，攪拌過夜。在冰冷卻下，加入100ml 1N鹽酸，將反應(yīng)混合物減壓濃縮后，以二氯甲烷萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮。將所得殘留物用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，得到油狀物的標(biāo)記化合物5.2g(收率85％)。
制備例72-二乙基氨基甲?；?2′，3，4′-三甲氧基聯(lián)苯 在氮?dú)夥障?，?86mg四(三苯基膦)鈀溶于40ml二甲氧基乙烷中，在其中加入896mg 2，4-二甲氧基溴代苯，在室溫?cái)嚢?0分鐘。隨后，在該溶液中加入上面反應(yīng)所得的1140mg 2-二乙基氨基甲酰基-3-甲氧基苯基硼酸的乙醇(6ml)溶液以及2.3ml的2M碳酸氫鈉水溶液，回流加熱9小時(shí)。9小時(shí)后，加入100mg四(三苯基膦)鈀，再回流加熱20小時(shí)。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮。將殘留物用硅膠柱色譜法(己烷醋酸體系)精制，得到油狀物的標(biāo)題化合物500mg(收率32％)。·1H-NMR(CDCl3)δppm；0.73(3H，t，J＝7.1Hz)，0.89(3H，t，J＝7.1Hz)，2.66～2.82(1H，m)，2.86～2.92(1H，m)，3.13～3.24(1H，m)，3.72(3H，s)，3.76～3.88(1H，m)，3.81(3H，s)，3.84(3H，s)，6.46～6.50(2H，m)，6.88(1H，d，J＝8.2Hz)，6.93(1H，dd，J＝7.7Hz，0.9Hz)，7.24～7.34(2H，m)實(shí)施例23，7-二羥基-6H-二苯并[b，d]吡喃-6-酮 在氮?dú)夥障?，?00mg 2-二乙基氨基甲?；?2′，3，4′-三甲氧基聯(lián)苯懸浮在15ml無水二氯甲烷中，在-78℃下冷卻。在該懸浮液中加入6.6ml三溴化硼1M的二氯甲烷溶液，緩慢升溫到室溫，攪拌過夜。在-78℃下冷卻，加入甲醇后，升溫到室溫，加入1N鹽酸使pH成為1。將水層用二氯甲烷萃取，用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮，將所得粗結(jié)晶用己烷洗滌，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物48mg(收率14％)。
熔點(diǎn)229.5～230.0℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.77(1H，d，J＝2.4Hz)，6.85(1H，dd，J＝8.8Hz，2.4Hz)，6.96(1H，d，J＝8.4Hz)，7.68(1H，d，J＝8.0Hz)，7.75(1H，dd，J＝8.4Hz，8.0Hz)，8.11(1H，d，J＝8.4Hz)·MS(FAB)；229(MH+)制備例82-溴代-6-甲氧基苯酚 將34ml叔丁胺溶解在1200ml甲苯中，在-30℃下，冷卻，用30分鐘滴入8.8ml溴。將反應(yīng)混合物在-60℃下冷卻，將20g愈創(chuàng)木酚的二氯甲烷(100ml)溶液在10分鐘內(nèi)滴入。隨后，緩慢升溫到室溫，攪拌5小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入500ml醚，以1N鹽酸、水依序洗滌，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮，得到固態(tài)的標(biāo)題化合物16.5g(收率50％)。·1H-NMR(CDCl3)δppm；3.90(3H，s)，6.75(1H，dd，J＝8.2Hz，8.0Hz)，6.81(1H，dd，J＝8.2Hz，1.4Hz)，7.09(1H，dd，J＝8.0Hz，1.4Hz)制備例92，3-二甲氧基溴代苯的合成 將5.0g 2-溴代-6-甲氧基苯酚溶于50ml甲醇中，加入4.1ml硫酸二甲酯和1.7g氫氧化鉀，回流加熱5小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻到室溫，加水，以醚萃取。將有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮，用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)將所得粗產(chǎn)物精制，得到油狀的標(biāo)題化合物3.3g(收率62％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.85(3H，s)，3.86(3H，s)，6.85(1H，dd，J＝8.4Hz，1.2Hz)，6.92(1H，dd，J＝8.4Hz，8.0Hz)，7.12(1H，dd，J＝8.0Hz，1.2Hz)制備例10N，N-二乙基-4-甲氧基苯甲酰胺 將10g 4-甲氧基安息香酸懸浮于140ml甲苯中，滴入8.9ml亞硫酰氯和數(shù)滴二甲基甲酰胺。在60℃下攪拌2小時(shí)后，冷卻到室溫。在該溶液中加入200ml四氫呋喃和25ml二乙胺，在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用水、飽和食鹽水依次洗滌，用無水硫酸鎂干燥。將溶液減壓蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)將殘留物精制，得到油的狀的標(biāo)題化合物14.1g(收率定量)·1H-NMR(CDCl3)δppm；1.00～1.60(6H，m)，3.20～3.65(4H，m)，3.81(3H，s)，6.88(2H，d，J＝8.8Hz)，7.33(2H，d，J＝8.8Hz)制備例112-二乙基氨基甲?；?5-甲氧基苯基硼酸 在氮?dú)夥障?，?.18ml四甲基乙二胺溶于150ml無水四氫呋喃中，在-60℃下冷卻。在10分鐘內(nèi)滴入27.6ml 1.3M固體丁基鋰的環(huán)己烷溶液后，在-60℃下攪拌10分鐘。在該溶液中，用15分鐘滴入6.0g N-二乙基-4-甲氧基苯甲酰胺的四氫呋喃(15ml)溶液后，在-65℃下攪拌45分鐘。在其中加入8.63ml三甲基硼，緩慢升溫到室溫，攪拌過夜。在冰冷卻下，加入1N鹽酸，使成為pH5后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮后，以二氯甲烷萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮，得到油狀標(biāo)題化合物。該化合物不再精制，就可用于以下反應(yīng)。
制備例122-二乙基氨基甲?；?2′，3′，5-三甲氧基聯(lián)苯 在氮?dú)夥障?，?32mg四(三苯基膦)鈀溶于270ml二甲氧基乙烷中，在其中加入3.33g 2，3-二甲氧基溴代苯，在室溫下攪拌30分鐘。隨后，在此溶液中加入上面反應(yīng)所得的2-二乙基氨基甲?；?5-甲氧基苯基硼酸的乙烷(16ml)溶液和15.3ml的2M碳酸氫鈉水溶液，回流加熱21小時(shí)。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取，以飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)將殘留物精制，得到油狀標(biāo)題化合物2.81g(二個(gè)階段收率30％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；0.83(3H，t，J＝7.1Hz)，0.95(3H，t，J＝7.0Hz)，3.20～3.80(4H，m)，3.74(3H，s)，3.84(3H，s)，3.89(3H，s)，6.86～6.94(4H，m)，7.01(1H，dd，J＝8.0Hz，7.6Hz)，7.29(1H，dd，J＝8.4Hz，0.4Hz)制備例132-二乙基氨基甲酰基-2′，3′，5-三羥基聯(lián)苯 在氮?dú)夥障拢瑢?65mg 2-二乙基氨基甲?；?2，3′，5-三甲氧基聯(lián)苯懸浮于12ml無水二氯甲烷中，在-60℃下冷卻。在該懸浮液中加入7.96ml 1M三溴化硼的二氯甲烷溶液，緩慢升溫到室溫，攪拌過夜。在-60℃下冷卻。加入5ml甲醇后，升溫到室溫，加入1N鹽酸使pH成1。以二氯甲烷萃取水層，有機(jī)層以飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮，得固態(tài)標(biāo)題化合物493mg(收率定量)。該化合物不精制而可用于以下反應(yīng)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；0.90～0.99(6H，m)，3.01～3.07(2H，m)，3.20～3.50(2H，m)，6.60(1H，dd，J＝8.2Hz，1.6Hz)，6.72(1H，d，J＝2.4Hz)，6.78～6.90(2H，m)，6.93(1H，dd，J＝7.6Hz，1.6Hz)，7.10(1H，d，J＝8.2Hz)實(shí)施例34，9-二羥基-6H-二苯并[b，d]吡喃-6-酮 將493mg 2-二乙基氨基甲?；?2′，3′，5-三羥基聯(lián)苯溶于25ml乙酸中，回流加熱過夜。將所生成不溶物濾去時(shí)，得到標(biāo)題化合物150mg。再將濾液減壓濃縮，通過硅膠柱色譜法(二氯甲烷-甲醇體系)將殘留物精制，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物115mg(合計(jì)收率71％)。
熔點(diǎn)110～112℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.02(1H，dd，J＝8.0Hz，1.2Hz)，7.06(1H，dd，J＝8.8Hz，2.2Hz)，7.15(1H，dd，J＝8.0Hz，8.0Hz)，7.54(1H，d，J＝2.2Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.0Hz，1.2Hz)，8.10(1H，d，J＝8.8Hz)制備例144-羥基-3-甲氧基安息香酸乙酯 將5.0g 4-羥基-3-甲氧基溶于50ml甲醇中，加入1g硫酸，回流加熱22小時(shí)。將反應(yīng)混合物放冷到室溫，濃縮到約一半量，加入5倍量的水和固體碳酸氫鈉，使中和。用乙酸乙酯萃取反應(yīng)混合物，以飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮。通過硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)將殘留物精制，得到油狀標(biāo)題化合4.9g(收率85％)。·1H-NMR(CDCl3)δppm；1.37(3H，t，J＝7.0Hz)，3.94(3H，s)，4.34(2H，q，J＝7.0Hz)，6.07(1H，br-s)，6.93(1H，d，J＝8.2Hz)，7.54(1H，d，J＝2.0Hz)，7.64(1H，dd，J＝8.2H z，2.0Hz)制備例154-芐氧基-3-甲氧基安息香酸乙酯
將4.9g 4-羥基-3-甲氧基安息香酸乙酯溶于80ml丙酮中，加入3.60ml芐基溴和10.8g碳酸鉀，回流加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硅藻土(celite)過濾并減壓濃縮。加入1N鹽酸，用醚萃取，有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮。用己烷-石油醚洗滌所得粗結(jié)晶，得到結(jié)晶的標(biāo)題化合物5.02g(收率73％)。
熔點(diǎn)78.0～79.5℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；1.37(3H，t，J＝7.0Hz)，3.94(3H，s)，4.34(2H，q，J＝7.0Hz)，5.22(2H，s)，6.89(1H，d，J＝8.4Hz)，7.28～7.43(5H，m)，7.56(1H，d，J＝1.6Hz)，7.61(1H，dd，J＝8.4Hz，1.6Hz)制備例164-芐氧基-3-甲氧基安息香酸 將5.02g 4-芐氧基-3-甲氧基安息香酸乙酯溶于90ml二甲基亞砜中，加入18ml水和4.0g氫氧化鈉，在100℃下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)混合物在冰中冷卻下，加入1N鹽酸，使pH為1，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮，得到結(jié)晶的標(biāo)題化合物(收率定量)。該化合物不再精制，就可用于下列反應(yīng)。
熔點(diǎn)173.0～173.5℃·1H-NMR(CDCl3)δppm；3.95(3H，s)，5.24(2H，s)，6.93(1H，d，J＝8.4Hz)，7.28～7.46(5H，m)，7.61(1H，d，J＝2.0Hz)，7.70(1H，dd，J＝8.4Hz，2.0Hz)制備例17雙[4-(芐氧基)-3-甲氧基安息香酸]無水物 使700mg 4-芐氧基-3-甲氧基安息香酸懸浮于10ml 1，2-二氯乙烷中，加入0.23ml亞硫酰氯，在60℃下攪拌3.5小時(shí)。在其中再加入0.3ml亞硫酰氯，在60℃下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物減壓濃縮。另一方面，將700mg 4-芐氧基-3-甲氧基安息香酸溶于12ml四氫呋喃中，加入0.40ml三乙胺，隨后加入調(diào)制的4-芐氧基-5-甲氧基苯甲酰氯，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾后，濾液減壓濃縮，則得到固體的標(biāo)題化合物1456mg(定量)。所得固體不再精制，可用于以下反應(yīng)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.95(6H，s)，5.25(4H，s)，6.93(2H，d，J＝8.4Hz)，7.30～7.46(10H，m)，7.63(1H，d，J＝2.0Hz)，7.69(1H，dd，J＝8.4Hz，2.0Hz)制備例182′，6′-二羥基-2，4′-二甲氧基乙酰苯 將1000mg 5-甲氧基間苯二酚溶于150ml二氯甲烷中，在-5℃下冷卻。在該溶液中加入7.85ml 1M四氯化鈦的二氯甲烷溶液后，在-15℃下攪拌5.5小時(shí)。在-20℃下放置過夜后，在反應(yīng)混合物中加入冰和1N鹽酸，以二氯甲烷萃取。將有機(jī)層用水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸餾掉，殘留物溶于甲醇中，并吸附于硅膠中，通過硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，得到油狀物的標(biāo)題化合物772mg(收率51％)。·1H-NMR(CDCl3)δppm；3.40(3H，s)，3.75(3H，s)，4.62(2H，s)，5.92(2H，s)實(shí)施例44′-(芐氧基)-5-羥基-3，3′，7-三甲氧基黃酮 將202mg 2′，6′-二羥基-2，4′-二甲氧基乙酰苯、1005mg雙[(4-芐氧基)-3-甲氧基安息香酸]無水物以及301mg 4-[芐氧基)-3-甲氧基安息香酸鈉鹽的混合物在減壓下于180～185℃加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物加入水中，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥。將溶劑減壓蒸餾掉，將所得殘留物溶于甲醇中，經(jīng)重氮甲烷處理后，將溶劑減壓蒸餾掉，將殘留物用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯體系)精制，將含目的物的餾分減壓蒸餾。將殘留物溶于3.0ml乙醇中，加入10％氫氧化鉀的乙醇溶液，在氮?dú)夥障禄亓骷訜?0分鐘。放冷后，加入2ml 1N鹽酸，以三氯甲烷萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后，減壓濃縮，通過硅膠柱色譜法(二氯甲烷-甲醇體系)將殘?jiān)?，得到固體的標(biāo)題化合物38mg(收率9.2％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.86(3H，s)，3.88(3H，s)，3.98(3H，s)，5.22(2H，s)，6.36(2H，d，J＝1Hz)，6.44(2H，d，J＝1Hz)，7.00(1H，d，J＝4Hz)，7.30～7.48(5H，m)，7.66(1H，dd，J＝4Hz，1Hz)，7.72(1H，d，J＝1Hz)
實(shí)施例54′，5-二羥基-3，3′，7-三甲氧基黃酮 將38mg 4′-(芐氧基)-5-羥基-3，3′，7-三甲氧基黃酮懸浮于10ml乙醇中，在10g 5％鈀的活性炭存在下，在常壓常溫下加氫過夜。將反應(yīng)混合物以硅藻土過濾，乙醇洗滌，將濾液減壓濃縮，通過硅膠柱色譜法(二氯甲烷-甲醇體系)將殘留物精制，得到結(jié)晶的標(biāo)題化合物5.5mg(收率18％)。
熔點(diǎn)169～171℃。·1H-NMR(CDCl3)δppm；3.86(3H，s)，3.88(3H，s)，4.00(3H，s)，6.04(1H，br-s)，6.36(1H，d，J＝2.4Hz)，6.50(1H，d，J＝2.4Hz)，7.05(1H，d，J＝8.4Hz)，7.67(1H，dd，J＝8.4Hz，2.0Hz)，7.70(1H，d，J＝2.0Hz)·MS(FAB)；345(MH+)制備例19N，N-二乙基-3，4-二甲氧基苯甲酰胺(藜蘆酸二乙酰胺) 將22.5g藜蘆酸溶于200ml二氯甲烷中，室溫下緩慢地加入90ml亞硫酰氯，回流加熱四小時(shí)。在減壓下將溶劑蒸餾掉后，將殘留物溶于100ml四氫呋喃中，冷卻到0℃。在其中加入200ml含46g二乙胺的四氫呋喃溶液，升溫到室溫，攪拌2.5小時(shí)。隨后，使反應(yīng)液倒入冰水中，將有機(jī)層取出，水洗后再用飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鎂干燥。其后在減壓下將溶劑蒸餾掉，用硅膠柱色譜法(二氯甲烷/甲醇＝100/1)精制，得到油狀標(biāo)題化合物22.023g(收率75％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；6.96(1H，dd，J＝8.8Hz，2.0Hz)，6.96(1H，d，J＝2.0Hz)，6.86(1H，d，J＝8.8Hz)，3.90(3H，s)，3.90(3H，s)，3.60～3.30(4H，br)，1.28～1.15(6H，br)制備例20N，N-二乙基-2-溴代-4，5-二甲氧基苯甲酰胺
將997mg藜蘆酸二乙酰胺溶于10ml乙酸中，加入0.25ml溴，在室溫放置2小時(shí)，然后在50℃下攪拌17小時(shí)。在其中再加入0.23ml溴，在50℃下攪拌7小時(shí)后，在減壓下將溶劑蒸餾掉。將所得殘留物溶于乙酸乙酯，水洗，再用硫代硫酸鈉水溶液洗滌，再次用水、飽和食鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥后，在減壓下將溶劑蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(二氯甲烷/甲醇＝100/1)精制，得到蠟狀固體的標(biāo)題化合物1.223g(收率92％)。·1H-NMR(CDCl3)δppm；7.00(1H，s)，6.75(1H，s)，3.89(3H，s)，3.86(3H，s)，3.37～3.16(4H，br)，1.27(3H，t，J＝7.0Hz)，1.08(3H，t，J＝7.0Hz)制備例212，3，4-三甲氧基溴代苯 將10g 1，2，3-三甲氧基苯溶于100ml三氯甲烷中，按催化量加入47％溴氫酸水溶液。在其中加入3ml溴，在室溫下攪拌35分鐘后，將反應(yīng)液倒入水中，以碳酸氫鈉中和。有機(jī)層分離，水洗，再用飽和食鹽水洗滌。無水硫酸鎂干燥后在減壓下將溶劑蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝20∶1)精制，得到油狀標(biāo)題化合物12.908g(收率88％)?！?H-NMR(CDCl3)δppm；7.21(1H，d，J＝9.2Hz)，6.59(1H，d，J＝9.2Hz)，3.91(3H，s)，3.89(3H，s)，3.85(3H，s)制備例222，3，4-三甲氧基苯基硼酸 在氮?dú)饬飨?，?.05g 2，3，4-三甲氧基溴代苯溶于50ml四氫呋喃中，在-78℃將14ml正丁基鋰(1.66N己烷溶液)緩慢加入。在該相同溫度下攪拌15分鐘后，緩慢加入10ml三甲氧基硼，升溫到室溫，攪拌過夜。加入1N鹽酸使反應(yīng)中止后，以乙酸乙酯萃取，水洗、再以飽和食鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥后，減壓下蒸餾除去溶劑，得到油狀標(biāo)題化合物3.15g，該化合物不再精制，可用于以下的反應(yīng)。
制備例23N，N-二乙基-2′，3′，4′，4，5-五甲氧基-2-聯(lián)苯羧基酰胺 將2.94g N，N-二乙基-2-溴代-4，5-二甲氧基苯甲酰胺溶于30ml 1，2-二甲氧基乙烷中，加入538g四(三苯基膦)鈀，在室溫下攪拌10分鐘，在其中加入3.15g 2，3，4-三甲氧基苯基硼酸，再加入10ml 2當(dāng)量碳酸鈉的水溶液，回流加熱。在回流加熱開始的2.5小時(shí)和4.5小時(shí)后分別加入2，3，4-三甲氧苯基硼酸1.5g和280mg，27小時(shí)后回流停止。將反應(yīng)液用硅酸鎂載體墊片過濾，蒸餾除去溶劑后，將殘留物用乙酸乙酯溶解，水洗，其次用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后，減壓下蒸去溶劑，通過硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝1/2)精制，得到蠟狀固體的標(biāo)題化合物1.601g?！?H-NMR(CDCl3)δppm；7.01(1H，d，J＝8.8Hz)，6.89(1H，s)，6.87(1H，s)，6.64(1H，d，J＝8.8Hz)，3.92(3H，s)，3.90(3H，s)，3.88(3H，s)，3.86(3H，s)，3.81(3H，s)，3.38～2.71(4H，br)，0.98～0.84(6H，m)實(shí)施例63，4，8，9-四羥基-6H-二苯并[b，d]呋喃-6-酮 將1.6g N，N-二乙基-2′，3′，4′，4，5-五甲氧基-2-聯(lián)苯羧基酰胺溶于15ml二氯甲烷中，在-78℃下冷卻。在其中加入30ml三溴化硼(1.0M二氯甲烷溶液)，升溫到室溫，攪拌3小時(shí)。再度在-78℃下冷卻，加入甲醇10ml，再加水10ml后，在減壓下將溶劑蒸掉。將所得殘留物溶于20ml乙酸中，整夜回流加熱。隨后在減壓下將溶劑蒸掉，通過硅膠柱色譜法精制，得到作為針狀結(jié)晶的標(biāo)題化合物730mg。
熔點(diǎn)＞290℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；10.58～8.82(4H，br)，7.48(1H，s)，7.39(1H，s)，7.29(1H，d，J＝8.8Hz)，6.77(1H，d，J＝8.8Hz)·13C-NMR(DMSO-d6)δppm；160.650，153.815，147.132，146.585，140.934，133.136，130.086，114.626，112.692，112.662，111.220，111.053，107.526·MS261(MH+)
實(shí)施例77，8-二甲氧基香豆素和7(8)-甲氧基-8(7)羥基香豆素
在3.5ml含176mg氫氧化鈉(60％分散于礦物油中)的二甲基甲酰胺的溶液中，加入356mg 7，8-二羥基香豆素(按照Aust.J.Chem.，Vol 27，PP 2697所述方法合成的)，在室溫?cái)嚢?分鐘。在其中加入156ml甲基碘，在冰中冷卻下攪拌1小時(shí)。用水稀釋，加入300μl乙酸中和，用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)層水洗二次、飽和食鹽水洗滌一次后，用硫酸鎂干燥，將溶劑減壓蒸掉。用硅膠柱色譜法(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1中淋洗)分離生成物，分別得到含有7，8-二甲氧基香豆素和7(8)-羥基-8(7)甲氧基香豆素[可能是一種位置異構(gòu)體(a)]的低極性部分(205mg)以及7(8)-羥基-8(7)甲氧基香豆素[可能是另一種位置異構(gòu)體(b)]的高極性部分(79mg)。將低極性部分用硅膠柱色譜法(二氯甲烷∶乙酸乙酯＝9∶1淋洗)分離，分別得到7，8-二甲氧基香豆素(72mg)以及7(8)-羥基-8(7)-甲氧基香豆素(位置異構(gòu)體(a))(58mg)。
7，8-二甲氧基香豆素 形狀結(jié)晶熔點(diǎn)118.7～119.6℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.95(3H，s)，4.00(3H，s)，6.26(1H，d，J＝9.6Hz)，6.87(1H，d，J＝8.8Hz)，7.17(1H，d，J＝8.8Hz)，7.62(1H，d，J＝9.6Hz)7(8)-羥基-8(7)甲氧基香豆素(b) 形狀結(jié)晶熔點(diǎn)160.4～160.9℃·1H-NMR(CDCl3)δppm；4.00(3H，s)，5.83(1H，br-s)，6.27(1H，d，J＝9.4Hz)，6.87(1H，d，J＝8.4Hz)，7.02(1H，d，J＝8.4Hz)，7.64(1H，d，J＝9.4Hz)7(8)-羥基-8(7)甲氧基香豆素(a) 形狀結(jié)晶熔點(diǎn)158.3～159.1℃·1H-NMR(CDCl3)δppm；4.13(3H，s)，6.24(1H，d，J＝9.6Hz)，6.24(1H，s)，6.90(1H，d，J＝8.6Hz)，7.11(1H，d，J＝8.6Hz)，7.63(1H，d，J＝9.6Hz)
實(shí)施例84-苯基-7，8-二羥基香豆素 將2.52g焦棓酚、3.46ml苯甲?；宜嵋阴ト苡?ml三氟乙酸中，加熱回流二小時(shí)。冷卻到室溫后，加入50ml水，將所生成沉淀過濾，用水再用己烷洗滌，減壓干燥后，分散于100ml二氯甲烷中，濾取其沉淀，得到結(jié)晶的標(biāo)題化合物2.04g。
熔點(diǎn)116.4～118.8℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；6.22(1H，s)，6.86(1H，d，J＝8.8Hz)，7.00(1H，d，J＝8.8Hz)，7.43～7.47(2H，m)，7.50～7.54(3H，m)實(shí)施例94-(3，4-二甲氧基苯基)-7，8-二羥基香豆素 將4.33g 3，4-二甲氧基苯甲?；宜嵋阴ズ?.16g焦棓酚加入45ml三氟乙酸中，回流加熱8小時(shí)。倒入150ml冰水中，濾取所生的沉淀，依次用水、二異丙醚、水洗滌。在室溫減壓干燥，得到粗制品1.7g。從甲醇中再結(jié)晶，得到結(jié)晶狀的純標(biāo)題化合物350mg。
熔點(diǎn)274.1～274.4(分解)·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；3.79(3H，s)，3.81(3H，s)，6.12(1H，s)，6.77(1H，d，J＝8.8Hz)，6.90(1H，d，J＝8.8Hz)，7.04(1H，dd，J＝1.8Hz，8.4Hz)，7.07(1H，d，J＝1.8Hz)，7.09(1H，d，J＝8.4Hz)，9.36(1H，br-s)，10.14(1H，br-s)實(shí)施例104-(3，4-二羥基苯基)-7，8-二羥基香豆素 將157mg(0.5mmol)4-(3，4-二甲氧基苯基)-7，8-二羥基香豆素懸浮于3ml二氯甲烷中，在氮?dú)饬飨?，滴?.5ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)。在室溫?cái)嚢?.25小時(shí)后，再滴入1.0ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)。在室溫?cái)嚢?5分鐘后，加水，濾取析出的固體，用水洗，得到結(jié)晶的標(biāo)題化合物137mg。
熔點(diǎn)288℃(分解)·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；5.98(1H，s)，6.75～6.80(2H，m)，6.84～6.86(2H，m)，6.91(1H，d，J＝8.8Hz)，8.30(1H，dd，J＝10.8Hz)，9.25(1H，s)，9.33(1H，s)，9.39(1H，s)，10.09(1H，s)實(shí)施例113-(3，4-二甲氧基苯基)-7，8-二甲氧基香豆素 在11ml含有394mg 3，4-二甲氧基-2-羥基苯甲醛的二氯甲烷溶液中加入30ml 20％碳酸鉀水溶液和220mg硫酸氫四丁基銨，再加入11ml含有511mg 3，4-二甲氧基苯乙酰氯的二氯甲烷溶液，在室溫下激烈攪拌3小時(shí)。將有機(jī)層取出，再將水層用二氯甲烷再萃取一次，將合并的有機(jī)層用水洗、用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，將溶劑減壓蒸餾除去，通過硅膠柱色譜法(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1→1∶1→乙酸乙酯)精制，得到固體標(biāo)題化合物220mg?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.93(3H，s)，3.95(3H，s)，3.97(3H，s)，4.04(3H，s)，6.90(1H，d，J＝8.8Hz)，6.93(1H，d，J＝8.4Hz)，7.23(1H，d，J＝8.8Hz)，7.26(1H，dd，J＝8.4Hz，2.0Hz)，7.29(1H，d，J＝2.0Hz)，7.71(1H，s)實(shí)施例123-(3，4-二羥基苯基)-7，8-二羥基香豆素 在4.4ml含有220mg 3-(3，4-二甲氧基苯基)-7，8-二甲氧基香豆素的二氯甲烷溶液中滴入3.86ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)在室溫下攪拌1小時(shí)。加入水和乙酸乙酯，濾去不溶物，將有機(jī)層用水和飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，將溶劑減壓蒸餾掉。在殘留物中加入二氯甲烷，并濾取其析出的結(jié)晶，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物140mg。
熔點(diǎn)297℃(分解)·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.05(1H，d，J＝8.4Hz)，7.16(1H，d，J＝2.4Hz)，7.93(1H，s)，6.75(1H，d，J＝8.4Hz)，6.79(1H，d，J＝8.4Hz)，6.97(1H，dd，J＝2.4Hz，8.4Hz)，9.00(1H，br-s)，9.10(1H，br-s)，9.33(1H，br-s)，10.02(1H，br-s)實(shí)施例134-(4-甲氧基苯基)-7-羥基香豆素 將2.22g間苯二酚和1.21g(4-甲氧基苯基)乙酰乙酸乙酯溶于11ml三氟乙酸中，加熱回流2小時(shí)。使反應(yīng)液冷卻后，加入水和二異丙醚，濾取析出的固體，在二乙醚中洗滌，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物1.00g。
熔點(diǎn)268.2～268.7℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；3.82(3H，s)，6.08(1H，s)，6.76(2H，d，J＝9.2Hz)，6.77(1H，s)，7.09(2H，dd，J＝6.5Hz，2.2Hz)，7.33(1H，d，J＝9.2Hz)，7.46(2H，dd，J＝2.2Hz，6.5Hz)，10.60(1H，br-s)實(shí)施例144-(4-羥基苯基)-7-羥基香豆素 將536mg 4-(4-甲氧基苯基)-7-羥基香豆素在氮?dú)夥障聭腋∮?0.7ml二氯甲烷中，在室溫滴入7.2ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)，在室溫下攪拌半小時(shí)后，滴入2.0ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)，在室溫下攪拌1小時(shí)。加水使反應(yīng)停止，濾取所生成的結(jié)晶，以水和二乙醚依次洗滌，干燥，得到結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物363mg。
熔點(diǎn)248.6～249.1℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.05(1H，s)，6.74～6.78(2H，m)，6.90(2H，dd，J＝6.8Hz，2.0Hz)，7.34(2H，dd，J＝6.8Hz，2.0Hz)，7.37(1H，d，J＝9.2Hz)，9.93(1H，s)，10.59(1H，br-s)實(shí)施例153-(4-羥基苯基)-7-羥基香豆素 將1.00g(3.55mmol)3-(4-甲氧基苯基)-7-甲氧基香豆素懸浮于10ml二氯甲烷中，滴入14.2ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。再加入10ml二氯甲烷和4.0ml三溴化硼二氯甲烷溶液(1.0M)，在室溫?cái)嚢?小時(shí)。滴入水使反應(yīng)中止，濾取所析出的固體，干燥，從甲醇中再結(jié)晶，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物538mg。
熔點(diǎn)＞300℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.71(1H，d，J＝2.4Hz)，6.78～6.80(3H，m)，7.51(2H，m)，7.54(1H，d，J＝8.4Hz)，8.00(1H，s)，9.64(1H，br-s)，10.50(1H，br-s)實(shí)施例163-(4-甲氧基苯基)-8-甲氧基香豆素 在20ml含有1.754g 2-羥基-3-甲氧基苯甲醛的二氯甲烷溶液中加入150ml 20％碳酸鉀水溶液和1.0g硫酸氫四丁基銨，滴入20ml含2.694g 4-甲氧基苯乙酰氯的二氯甲烷溶液，在室溫?cái)嚢柽^夜。以二氯甲烷萃取二次，將有機(jī)層水洗，飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，減壓蒸餾除去溶劑。在甲醇中再結(jié)晶，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物1.235g。
熔點(diǎn)145.2～146.1℃。·1H-NMR(CDCl3)δppm；3.86(3H，s)，3.99(3H，s)，6.97(2H，m)，7.06(1H，dd，J＝1.2Hz，8.0Hz)，7.10(1H，dd，J＝1.2Hz，8.0Hz)，7.21(1H，t，J＝8.0Hz)，7.60(2H，m)，7.74(1H，s)實(shí)施例173-(2-吡啶基)-7-甲氧基香豆素 將1.00g 2-羥基-4-甲氧基苯甲醛、0.66g(2-吡啶基)-乙酸乙酯、0.1ml哌啶溶于20ml異丙醇中，在100℃下加熱19小時(shí)，冷卻到室溫，濾取所析出的結(jié)晶，用異丙醇洗滌，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物980mg。
熔點(diǎn)149.3～149.7℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；3.90(3H，s)，6.87(1H，d，J＝2.4Hz)，6.89(1H，dd，J＝2.4Hz，8.4Hz)，7.27(1H，ddd，J＝1.0Hz，4.2Hz，8.8Hz)，7.55(1H，d，J＝8.4Hz)，7.77(1H，dt，J＝2.0Hz，4.2Hz)，8.40(1H，td，J＝1.0Hz，8.4Hz)，8.67(1H，qd，J＝1.0Hz，4.2Hz)，8.73(1H，s)實(shí)施例183-(2-吡啶基)-7-羥基香豆素
將510g 3-(2-吡啶基)-7-甲氧基香豆素和2.0g吡啶鹽酸鹽混合，在210℃下加熱30分鐘。反應(yīng)混合物冷卻到室溫后，加水，濾取所析出的固體，水洗，干燥，得到結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物479mg。
熔點(diǎn)＞300℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.81(1H，d，J＝2.0Hz)，6.88(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)，7.55(1H，dd，J＝5.6Hz，6.8Hz)，7.74(1H，d，J＝8.4Hz)，8.08(1H，dd，J＝6.8Hz，8.4Hz)，8.30(1H，d，J＝8.4Hz)，8.73(1H，d，J＝5.6Hz)，8.82(1H，s)實(shí)施例193-(4-羥基苯基)-8-羥基香豆素 將1.128g 3-(4-甲氧基苯基)-8-甲氧基香豆素懸浮于22ml二氯甲烷中，在氮?dú)饬飨拢稳肴寤鸬亩燃淄槿芤?1.0M)。在室溫下攪拌5小時(shí)后，滴入水使反應(yīng)停止，濾取所析出的固體，水洗，得到結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物804mg。
熔點(diǎn)257.7℃(分解)·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；6.82(2H，d，J＝8.6Hz)，7.04(1H，dd，J＝3.2Hz，6.4Hz)，7.10～7.15(2H，m)，7.57(1H，d，J＝8.6Hz)，8.06(1H，s)，9.70(1H，br-s)，10.16(1H，br-s)制備例242-(3，4-二甲氧基苯基)-4，4-二甲基噁唑啉 在90ml含有9.11g 3，4-二甲氧基安息香酸的二氯甲烷溶液中加入4.35ml亞硫酰氯(60mmol)，在50℃下加熱1小時(shí)。減壓蒸餾后，將殘留物溶于20ml二氯甲烷中，冰中冷卻下，滴入20ml含有11.4ml 2，2-二甲基氨基乙醇的二氯甲烷溶液，在冰冷卻下攪拌1小時(shí)。濾出不溶物，將濾液減壓干燥。將殘留物溶于40ml二氯甲烷中，在冰冷卻下滴加8.7ml亞硫酰氯，攪拌5分鐘后，減壓蒸餾。將殘留物溶于水中，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH到8。用乙酸乙酯萃取二次，有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，得到粗制品11.7g。將殘留物從二氯甲烷-己烷再結(jié)晶，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物9.5g。
熔點(diǎn)63.0～63.5℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；1.38(6H，s)，3.92(3H，s)，3.94(3H，s)，4.09(2H，s)，6.87(1H，d，J＝8.4Hz)，7.46(1H，d，J＝2.0Hz)，7.53(1H，dd，J＝2.0Hz，8.4Hz)制備例252-(3，4-二甲氧基-2-碘苯基)-4，4-二甲基噁唑啉 將3.00g 2-(3，4-二甲氧基苯基)-4，4-二甲基噁唑啉溶于100ml四氫呋喃中，在氮?dú)饬飨?，使用冷卻劑邊冷卻，邊滴入8.8ml內(nèi)溫為-15℃到-11℃的正丁基鋰己烷溶液(1.6M)，攪拌1.5小時(shí)，滴入60ml含3.78g碘的四氫呋喃溶液，使溫度升到室溫，攪拌1.5小時(shí)。在冷卻下，加入水5ml，再加硫代硫酸鈉水溶液(5.4g/30ml)，以乙酸乙酯萃取。有機(jī)層水洗，飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，將溶劑減壓蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(己烷∶乙酸乙酯＝3∶1→3∶2淋洗出)精制，得到油狀物的標(biāo)題化合物2.585g?！?H-NMR(CDCl3)δppm；1.41(6H，s)，3.82(3H，s)，3.88(3H，s)，4.12(2H，s)，6.88(1H，d，J＝8.5Hz)，7.31(1H，d，J＝8.5Hz)制備例262，2′-雙(2-(4，4-二甲基噁唑啉)-3，3′，4，4′-四甲氧基苯基 將1.04g 2-(3，4-二甲氧基-2-碘苯基)-4，4-二甲基噁唑啉溶于1.5ml二甲基甲酰胺中，加入1.01g銅粉，在110℃下和140℃下分別攪拌2.5小時(shí)和1.5小時(shí)。加入20ml二氯甲烷，濾去不溶物，殘留物用180ml的二氯甲烷洗滌。將洗滌和濾液合并，用氨水(100ml×3)洗滌，水洗，硫酸鎂干燥，將溶劑減壓蒸餾掉，通過硅膠柱色譜法(用二氯甲烷∶甲醇＝100∶1→50∶1→10∶1淋洗)精制，得到結(jié)晶狀標(biāo)題化合物364mg。
熔點(diǎn)90.6～92.4℃?！?H-NMR(CDCl3)δppm；1.14(6H，s)，1.26(6H，s)，3.57(2H，d，J＝8.2Hz)，3.65(6H，s)，3.74(1H，d，J＝8.2Hz)，3.93(6H，s)，6.92(2H，d，J＝8.8Hz)，7.62(2H，d，J＝8.8Hz)實(shí)施例205，10-二羥基-1，6-二氧雜-2，7-二氧代-1，2，6，7-四氫吡喃酮 將120mg 2，2′-雙(2-(4，4-二甲基噁唑啉基))-3，3′，4，4-四甲氧基聯(lián)苯和490mg吡啶鹽酸鹽混合，在200℃下加熱20分鐘。冷卻到室溫后，加水5ml，離心分離(2500rps，5分鐘)析出的固體，用乙醚、水洗后，干燥，得到結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物50mg。
熔點(diǎn)＞300℃。·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.31(2H，d，J＝8.6Hz)，7.96(2H，d，J＝8.6Hz)，11.4～12.0(2H，br-s)·13C-NMR(DMSO-d6)δppm；110.3，119.6，127.0，137.0，150.9，159.3實(shí)施例21鞣花酸四乙酸鹽 將5.0g鞣花酸二水合物懸浮于125ml吡啶中，加入無水乙酸，加熱回流3小時(shí)。趁熱將析出的生成物過濾，以二乙醚洗滌，干燥，得到作為淡黃色結(jié)晶的標(biāo)題化合物4.47g，再將冷卻母液中析出的結(jié)晶過濾，得到0.58g標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)＞300℃。
·1H-NMR(CDCl3)δppm；2.39(6H，s)，2.47(6H，s)，8.07(2H，s)·MS471(M+H)+
實(shí)施例22鞣花酸4，4′-二乙酸鹽 將2.0g鞣花酸四乙酸鹽懸浮于10ml吡啶中加熱。從回流開始起同時(shí)加水5ml，隨后加熱回流4分鐘，使在此期間一旦溶解后所析出的結(jié)晶冷卻后過濾，用水、甲醇、丙酮洗滌，干燥，當(dāng)從二甲基甲酰胺中再結(jié)晶時(shí)，得到無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物800mg。
熔點(diǎn)＞300℃。
·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；2.89(6H，s)，7.95(2H，s)·MS；387(M+H)+制備例274，4′，6，6′-四硝基-2，2′-聯(lián)苯二羧酸 當(dāng)將220ml發(fā)煙硝酸在冰冷卻下加入到165ml濃硫酸中時(shí)，內(nèi)溫上升到35℃。在其中一點(diǎn)一點(diǎn)地加入2，2′-聯(lián)苯二羧酸22.22g，加熱使其內(nèi)溫升到85℃。在該溫度下攪拌7小時(shí)后，使反應(yīng)液冷卻，加入二升冰水，以500ml乙酸乙酯萃取二次。將萃取液用500ml飽和食鹽水洗滌二次，以硫酸鎂干燥后將溶劑蒸餾除去，得到黃色不定形固體的標(biāo)題化合物33.43g?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；9.11(2H，d，J＝2.5Hz)，8.94(2H，d，J＝2.5Hz)實(shí)施例234，4′-二硝基-6，6′-二羥基二苯酸2，6，2′，6′-二內(nèi)酯
將29.8g 4，4′，6，6′-四硝基-2，2′-聯(lián)苯二羧酸溶于50ml二甲基甲酰胺中，在130℃下攪拌9小時(shí)。冷卻后，從反應(yīng)液中將溶劑蒸餾除去，加入甲醇100ml，將析出的結(jié)晶過濾。以乙醇、再以正己烷洗滌，干燥，得到褐色粉末的標(biāo)題化合物14.74g。
熔點(diǎn)＞300℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；8.84(2H，d，J＝2.0Hz)，8.76(2H，d，J＝2.0Hz)·MS(EI)；328(M+)實(shí)施例243，3′-二-O-甲基鞣花酸(R＝R′＝H)和3，3′，4-三-O-甲基鞣花酸(R＝H，R′＝Me) 將2.0g鞣花酸懸浮于30ml二甲基甲酰胺中，加入2.0g碳酸鉀，在室溫?cái)嚢?0分鐘。在其中加入3.5g甲基碘，在60℃下攪拌5小時(shí)。冷卻后，在反應(yīng)液中加入1N鹽酸，使成酸性，加入300ml乙酸乙酯和300ml冰水的混合液，將有機(jī)酸分離取出，用硫酸鎂干燥后，蒸餾除去溶劑將所得殘留物用柱色譜法(三氯甲烷∶甲醇＝98∶2)精制，得到35mg黃色粉末的二甲基體，58mg黃色粉末的三甲基體。
3，3′-二-O-甲基鞣花酸·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.51(2H，s)，4.02(6H，s)熔點(diǎn)＞320℃。
MS331(M+H)+3，3′，4-三-O-甲基鞣花酸·1H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.55(1H，s)，7.50(1H，s)，4.02(3H，s)，4.01(3H，s)，4.00(3H，s)熔點(diǎn)＞320℃。
MS345(M+H)+實(shí)施例254，4′-二氨基-6，6′-二羥基二苯酸2，6，2′，6′-二內(nèi)酯 將330g鈀-碳(10％)懸浮于10ml四氫呋喃、5ml水、5ml乙酸的混合溶液中，在其中加入100ml有1.42g 4，4′-二硝基-6，6′-二羥基二苯酸2，6，2′，6′-二內(nèi)酯在四氫呋喃中的懸浮液，在氫氣流下，在常溫常壓下進(jìn)行催化還原過夜。注意將溶劑蒸餾掉三分之二，在其中加入200ml二甲基甲酰胺，加熱將析出的生成物溶解。趁熱過濾，以濾去鈀-碳，將母液濃縮。在所得殘留物中加入20ml甲醇，濾取不溶的固體，得到赤褐色粉末狀的標(biāo)題化合物400mg。
熔點(diǎn)＞300℃?！?H-NMR(DMSO-d6)δppm；7.18(2H，d，J＝2.0Hz)，6.91(2H，d，J＝2.0Hz)，6.02(4H，s)·MS(EI)；268(M+)
權(quán)利要求
1.丙型肝炎防治劑，其特征在于它是以選自通式(I)、(II)、(III)或(IV)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分 式中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25和R26分別相同或不同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2、或者式 (式中L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基、或也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
2.丙型肝炎防治劑，其特征在于以通式(I)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分 式中，R1、R2、R3、R4、R5和R6分別相同或不同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2或者式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基、或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
3.丙型肝炎防治劑，其特征在于以通式(II)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分 式中，R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14分別相同或不相同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、NO2、-CO2H、-NH2或者式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基、或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
4.丙型肝炎防治劑，其特征在于以通式(III)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分 式中，R15、R16、R17、R18、R19和R20分別相同或不同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2或者式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基、或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
5.丙型肝炎防治劑，其特征在于以通式(IV)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上可容許的鹽作為有效成分 式中，R21、R22、R23、R24、R25和R26分別相同或不同，它們分別表示氫原子、-OCOCH3、-OQ(其中，Q表示氫原子或低級(jí)烷基)、-NO2、-CO2H、-NH2或者式 (式中，L、M相同或不同，表示氫原子或低級(jí)烷基)所表示的基、或者也可以是具有一個(gè)以上取代基的芳環(huán)基或雜環(huán)基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述丙型肝炎防治劑，其特征在于在通式(I)中，R1、R2、R5和R6是羥基，R3和R4是氫原子。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述丙型肝炎防治劑，其特征在于在通式(II)中，R7、R8、R12和R13是羥基，R9和R10、R11和R14是氫原子。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述丙型肝炎防治劑，其特征在于在通式(III)中，R19和R20是羥基，R16、R17和R18是氫原子，R15是3，4-二羥基苯基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述丙型肝炎防治劑，其特征在于在通式(III)中，R19和R20是羥基，R15、R17和R18是氫原子，R16是3，4-二羥苯基。
全文摘要
本發(fā)明涉及丙型肝炎防治劑。本防治劑是以選自通式(I)～(IV)所示的、具有苯并吡喃酮骨架的化合物或其藥理學(xué)上容許的鹽作為有效成分，其中，R
文檔編號(hào)A61K31/44GK1137895SQ96102899
公開日1996年12月18日 申請(qǐng)日期1996年3月26日 優(yōu)先權(quán)日1995年3月31日
發(fā)明者池田信, 酒井孝, 蔡少青, 趙玉英, 梁鴻, 楊秀偉, 甲斐康信, 加來由美子, 冢田格, 柳澤學(xué), 谷口博之 申請(qǐng)人:衛(wèi)材株式會(huì)社, 北京醫(yī)科大學(xué)