專利名稱：抗美尼爾氏病藥青陽參、用途和制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及青陽參在制藥領域中的用途，具體地，涉及青陽參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應用，用青陽參作為原料制成的治療美尼爾氏的藥物和制備該藥物的方法。
美尼爾氏病是一種常見的多發(fā)病，患病率為總人口的0.5％，我世界約有2500-3000萬美尼耳氏病人，中年女性居多數(shù)。此病是一種突發(fā)性的疾病，其癥狀包括發(fā)作性的眩暈、惡心嘔吐、眼球呆視或震顫，有些不有波動性耳聾、耳鳴和耳脹滿感，少數(shù)病人(約20％的患者)留下到殘性眩暈和喪失聽力。此癥病因目前尚無確切的病理研究，因此沒有對癥有效的藥物。美尼耳病又稱美尼耳氏綜合癥(Menier′syndrome)，是一種病因不確切又無有效藥物的危害人類健康的疑難病癥。目前世界臨床上從東茛菪堿、暈海寧、山茛菪堿、鹽酸異丙嗪、阿托品、抗眩啶(betahistine)、敏克靜(mecligine)等藥物中選擇若于種藥進行試探性治療，效果不能令人滿意。但上述藥物大都有較大的毒副作用，長期藥物治療會有不可逆轉的毒副作用，如耳聾和經(jīng)常性的耳鳴等。因此研制療效高、毒副作用小的治療美尼爾病藥物已成急需解決的問題。從蘿摩科植物青陽參中提取藥用成分制成的片劑，在八十年代臨床功用僅用于清熱鎮(zhèn)驚，用于治療癲癇病。迄今沒有青陽參在制備抗美尼爾氏病炎藥物中的應用的報道。此外，抗癲癇藥青陽參藥效成分的提取方法復雜、得率低，該藥僅為片劑一種劑型。
本發(fā)明的目的在于提供青陽參在制藥領域中的一種新用途，即青陽參在制備抗美尼爾氏病藥物中的應用，提供新的提取青陽參藥效成分的方法和常規(guī)制劑方法結合制得的抗美尼爾氏病藥物片劑、口服液、膠囊，具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點；同時提供該藥物的制備方法。
本發(fā)明提供的技術方案如下一種抗美尼爾氏病的藥物，以青陽參為原料，先以下述方法制得藥效部位，再按常規(guī)制劑方法制成的青陽參片劑或口服液或膠囊取青陽參，用氯仿或乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物片劑的一種方法，取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑，制成片劑。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物膠囊的一種方法，取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽參膠囊。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物口服液的一種方法，取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物片劑的另一種方法，取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑，制成片劑。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物膠囊的另一種方法，取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽參膠囊。
制備本發(fā)明治療美尼爾氏病藥物口服液的另一種方法，取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
本發(fā)明同時提供了青陽參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應用。
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用抗美尼爾氏藥青陽參的免疫藥理、毒性來說明青陽參抗美尼爾氏病的新用途及其有益效果。
采用本發(fā)明的實施例制得的青陽參片劑、膠囊、口服液用于下述實驗一、急性毒性實驗用昆明種小鼠，體重18-24克，大鼠，體重200-250克，雌雄皆用，實驗前12小時禁食不禁水(下同)，均腹空注射不同劑量的青陽參，動物分成4組，每組10只，小鼠以24小時，大鼠以72小時的死亡為指標，以Weil’s氏法計算LD50，結果小鼠＝496.2(427.3-576.1)mg/kg，大鼠＝349.0-451.7mg/kg。
二、抗驚厥作用1、抗超強電休克發(fā)作(MES)作用
選用18-24克雄小鼠隨分組，每組10只，分別雌雄(ip)，本品40.80mg/kg，4h后實驗，結果證明，對WES無效，另取16組小鼠，每組5只，其中8組分別ip苯巴比妥鈉，另4組ip苯妥英納，lh后測其ED50，另外組分別ip本品青陽參80mg/kg，3h后4組即不同劑量的苯巴比妥鈉，另外4組ip不同劑量的苯妥英，再過1h測其抗MES的ED50。結果可見，本品單用對MES無效，但能加強苯巴比妥和苯妥英鈉的作用，結果如表1。
藥物ED501、青陽參 40-80mg/kg2、苯巴比妥鈉13.0(9.7-17.4)3、苯巴比妥鈉＋青陽參(800g/kg) 2.4(1.5-3.91)(1.5-3.91)4、苯荽英鈉 4.8(3.4-6.7)5、苯妥英鈉＋青陽參(80mg/kg) 2.0(1.8-3.4)2、抗聽源性發(fā)作作用實驗用聽源性發(fā)作敏感的Pπ-PMc大鼠，雌雄皆用，隨機分組，每組10只，本重200-270克，首先測定發(fā)作敏感性，連續(xù)3日，反應恒定者用于實驗，而后分組ip本品青陽參，4小時后再測其抗驚厥效應，以完全防止發(fā)作為指標，計算其ED50，結果證明其ED50為18.8mg/kg，用量在12.5mg/kg時已使發(fā)作明顯減輕(P＜0.01)。
3、對點燃效應發(fā)作的影響將點燃效應(KE)5-6級的大鼠分成2組，一組口服本品100mg/kg，在給藥后4.6小時和12小實驗，另一組口服60mg/kg，連用2日，每次組藥后4.6和12小時實驗，以完全對抗為指標，結果無效。
三、抗美尼爾氏綜合癥實驗(Meniere′s Disease)實驗用240-300克的豚鼠雌雄皆用，隨機分組，實驗前12小時禁食不禁水，對照組10只腹腔注射(ip)等容量的2％吐溫80，藥物組每組5只，第一組ip本品青陽參60mg/kg，第二組ip60mg/kg一周后再給60mg/kg，第三組ip120mg/kg，均在給藥后4小時實驗，第4組ip鹽酸地芬尼多(眩暈停)100mg/kg，90分鐘后實驗。
將20μL三氯甲烷用微量注射器通過一細塑管準確的注入外耳道深部，一般在給藥后10分鐘左右出現(xiàn)臨床癥狀全身迅速向給藥側旋轉，常在給三氯甲烷后15-20分鐘出現(xiàn)，而后時停時旋轉，約在60-80分鐘停止，這是最嚴重的癥狀；眼球震顫和頭向左右搖擺，為次要癥狀，后兩種指標在給三甲烷后20、40、60、80、100和120分各記數(shù)一次，取組間均值為指標。結果證明青陽參在60mg/kg，可使旋轉明顯減少，部分動物完全消失(P＜0.001)，但對眼球震顫和頭左右搖擺影響較輕，對癥狀持續(xù)時間也無影響，而60mg/kg一周后再給60mg/kg組，效果更好，旋轉完全消失，眼球震顫和頭左右搖擺明顯減少(P＜0.01)，癥狀維持時間也明顯縮短。120mg/kg給藥一次組旋轉基本消失，眼球震顫和頭左右搖擺次數(shù)明顯減少，癥狀持續(xù)時間縮短，一周后再約120mg/kg，效果與一次藥相似。眩暈停100g/kg也可使旋轉基本消失，眼球震顫和頭左右搖擺總人數(shù)明顯減少，持續(xù)時間明顯縮短，結果見表2
表2 青陽參藥物對三氯甲烷引起的豚鼠美尼爾氏病的影響藥物 對照組 青陽參 一周后再給120 一周后再給眩暈停(mg/kg) 60 60120 100旋轉2h 123.7＋27.4 10.8＋3.9** 0** 3.1＋2.3** 0** 9.4＋6.4**眼 20 150＋17.5133.2＋4.2 45.6＋8.9 110＋11.2 88＋17.587.6＋24.2*40 130＋23.2110＋10.132＋14.8* 76.8＋20.4* 46＋16.7* 40.8＋17*球 60 109＋6.7 95＋11.2 11.2＋11.2* 58.4＋158* 29.6＋12.3* 40＋14.3*80 78.4＋4.596.2＋22.3 0 18.6＋8.9* 6.0＋6.0* 18＋8.4*震 100 66.9＋24.4 75.2＋10.6 0 3.0＋3.0* 0 0顫 120 10.7＋5.630.4＋16.3 0 0 0 0頭 20 111＋28.699.6＋45 20＋20**56＋16.4* 28.6＋18.2* 54.4＋23.1*左 40 104＋20 78.4＋3.90 28.8＋14.8* 9.6＋9.6* 40.8＋17.0*右 60 95.9＋7.262.4＋6.60 18.6＋8.9 6.4＋6.4* 29.6＋13.2*搖 80 60.6＋23.8 52.8＋23.7 0 18.6＋8.9* 03.2＋3.2擺 100 29.4＋10.1 43.2＋9.40 3.0＋3.0 0 0120 22.3＋10.1 20＋13.8 0 0 0 0注x＋Sx**P＞0.001 *P＞0.01由以上結果可見青陽參對美尼爾氏病病理模型有很好的治療作用，療效近似眩暈停，60mg/kg一次給藥巳使嚴重癥狀基本消失，60mg/kg一周內(nèi)2次給藥效果更好，與120mg/kg一次給藥的效果近似，也與100mg/kg的眩暈停效果近似。
三、免疫藥理作用將動物(小鼠體重18-22克)隨機分組，每組10只，青陽參加環(huán)磷酰胺組(簡稱青陽參組)，溶劑聚乙二醇(PEG)加環(huán)磷酰胺組(簡稱CP組)，空白對照組每日注射生理鹽水0.2ml/只。青陽參組按1/4LD50(70mg/kg)每日肌肉注射，環(huán)磷酰胺于10日按100mg/kg皮下注射一次，于實驗第1，14，17，24，31日由尾靜脈采血測定白細胞總數(shù)，淋巴細胞百分比，ANAE陽性淋巴細胞百分比，淋巴細胞DNA含量(按計分法)1、對ANAE陽性淋巴細胞的影響于給CP后第4日，CP組ANAE陽性淋巴細胞百分比改變不大，但其絕對數(shù)明顯下降，在注射CP后第7日降到最低水平，然后逐漸恢復正常；青陽參級ANAE陽性淋巴細胞在注射CP后第4天下降不顯著，也在第7日下降到最低點，但下降程度較單用CP組明顯為輕。
2、青陽參對淋巴細胞DNA的保護作用CP組淋巴細胞DNA的含量于第4日開始下降，第7日下降到最低水平。青陽參組也是第4日開始下降，到7日下降到最低點，但均顯著高于CP組。淋巴細胞DAN的動態(tài)變化來看，CP組的DNA值的下降急劇，而且持續(xù)一段時間；青陽參組的DNA含量雖有下降，但急劇下降的時間發(fā) 生較冕，維持下降的最低點的時間短，就開始回升。CP組和PEG組淋巴細胞核內(nèi)DNA著色區(qū)均出現(xiàn)大量空泡，而青陽參組未觀察到這一現(xiàn)象，可見青陽參對淋巴細胞DNA有保護作用。
3、對血漿及尿液影響44例治療前后白細胞總數(shù)、分類、血小板計數(shù)，出凝血時間無明顯改變；尿常規(guī)檢查也無異常發(fā)現(xiàn)。
綜觀以上實驗結果，本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明的青陽參片劑、膠囊、口服液具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點本發(fā)明的青陽參具有免疫活性，對氯仿注入豚鼠外耳道深部造成的美尼爾氏病病理模型(豚鼠眩暈旋轉、眼球震顫、頭左右搖擺)有很好的治療作用。有效率為85-90％，與對照組有明顯差異；青陽參片劑、膠囊、口服液三種劑型副作用小，口服方便，是一個有效低毒的抗美尼爾氏藥。青陽參用乙酸乙酯或氯仿提取物，經(jīng)石油醚脫脂后的產(chǎn)物為青陽參藥效部位，簡稱為青陽參總甙，它不同于一般免疫藥物的單一免疫活性，它對免疫系統(tǒng)—中樞神經(jīng)—內(nèi)分泌同時起作用，這表現(xiàn)在藥理和臨床效果上，。用藥理實驗確認其免疫活性成分，結果證明該植物活性成分是C21-甾體酯甙類，進一步分離提純證實單體為該類化合物。臨床用青陽參總甙，腹腔注射有效劑量60mg/kg，其安全比為12-16倍，顯示此藥安全方便。綜合上述化學、藥理和臨床的結果，證實青陽參的C21-甾體成分具有免疫調(diào)節(jié)和增強作用，同時對美尼爾氏病有治療作用，而且青陽參抗美尼爾氏藥毒副作用小，其他類藥物大都有較大的毒副作用。
實施例一取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用氯仿在70℃熱提取2次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即藥效部位塊狀物200g，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2的比例加入賦形劑淀粉400g，制成2000片片劑。
實施例二取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用氯仿在70℃熱提取3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即藥效部位塊狀物300g，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得3000個青陽參膠囊。
實施例三取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用氯仿在65℃熱提取3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即為藥效部位塊狀物250g，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位制成濃度0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
實施例四取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用乙酸乙酯在65℃熱提取2次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即藥效部位塊狀物300g，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶4的比例加入賦形劑淀粉，制成片劑。
實施例五取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用乙酸乙酯在70℃熱提取3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即藥效部位塊狀物300g，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽參膠囊。
實施例六取蘿摩科鵝絨藤屬植物青陽參(Cynanchum otophyllum Schneid)根10kg，用乙酸乙酯在60℃熱提取3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，得底物即藥效部位塊狀物，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位塊狀物制成濃度0.2g/ml一支的糖漿口服液。
權利要求
1.一種抗美尼爾氏病的藥物，其特征是以青陽參為原料，先以下述方法制得藥效部位，再按常規(guī)制劑方法制成的青陽參片劑或口服液或膠囊取青陽參，用氯仿或乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位。
2.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑，制成片劑。
3.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽參膠囊。
4.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用氯仿在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
5.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按藥效部位與賦形劑重量比為1∶2-1∶4的比例加入賦形劑，制成片劑。
6.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，壓制成粉后裝入藥用膠囊制得青陽參膠囊。
7.制備權利要求1的藥物的方法，其特征是取青陽參，用乙酸乙酯在60-70℃熱提取2-3次，回收溶劑后的粘稠物用石油醚回流脫脂，底物即為藥效部位，按常規(guī)制劑方法，將藥效部位制成濃度0.1g-0.5g/10ml一支的糖漿口服液。
8.青陽參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及青陽參在制藥領域中的用途。具體地，涉及青陽參在制備抗美尼爾氏病的藥物中的應用，用青陽參作為原料制成的治療美尼爾氏的藥物和制備該藥物的方法。本發(fā)明的青陽參片劑、膠囊、口服液具藥源廣、藥效高、毒性低、穩(wěn)定性好、生物吸收利用度高的優(yōu)點。
文檔編號A61K9/48GK1149485SQ96111270
公開日1997年5月14日 申請日期1996年8月29日 優(yōu)先權日1996年8月29日
發(fā)明者木全章, 沈月毛, 周茜蘭, 郝小江 申請人:中國科學院昆明植物研究所