專利名稱：龍牙楤木葉總皂甙及其提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤作用的植物及其有效物質(zhì)的提取工藝。
龍牙楤木系五加科楤木屬植物，又名遼東楤木。在祖國醫(yī)學(xué)中，以龍牙楤木的根皮和樹皮入藥，稱為刺老鴉，其性味辛苦、有小毒，具有補(bǔ)氣安神、祛風(fēng)活血等功效，主要治療神經(jīng)衰弱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝炎、糖尿病等癥。目前國內(nèi)外尚沒有對(duì)龍牙楤木葉的抗腫瘤作用及其有效物質(zhì)進(jìn)行研究。
本發(fā)明的任務(wù)是提出龍牙楤木葉總皂甙的抗腫瘤作用及其有效物質(zhì)的提取工藝。
本發(fā)明的任務(wù)是以如下方式實(shí)現(xiàn)的龍牙楤木葉分離出葉皂甙A、B、C和D四種單體化合物，總皂甙具有抗腫瘤作用。其提取工藝是a、將龍牙楤木葉干燥，粉碎為粗粉；b、將龍牙楤木葉粗粉用乙醇浸泡2小時(shí)；c、以92％藥用乙醇回流提取三次，每次2小時(shí)；d、過濾；e、合并乙醇液，低溫減壓回收乙醇至稠膏狀，得乙醇提取物；f、將此提取物加水懸浮，以石油醚萃取3次，水層再用氯仿萃取3次，水層繼續(xù)用水飽和正丁醇萃取5次；g、正丁醇萃取液合并后，減壓回收溶劑至干，得正丁醇提取物(總皂甙類成份)。
龍牙楤木葉總皂甙經(jīng)生物活性研究試驗(yàn)表明，該成分具有明顯的抗腫瘤作用。體外試驗(yàn)證明，試管內(nèi)藥物濃度達(dá)0.011、0.045和0.09mg/ml時(shí)，對(duì)S180和H22細(xì)胞的抑制率為95.7、99.5、100％和73.0、87.1、95.5％，表明本發(fā)明藥物具有細(xì)胞毒作用。體內(nèi)試驗(yàn)證明，口服給藥，小鼠按25-200mg/kg灌服，對(duì)S180實(shí)體瘤小鼠的抑瘤率在50-80％之間，對(duì)H22腹水瘤小鼠的生命延長率在20-40％之間，表明口服給予龍牙楤木葉總皂甙具有明顯的抗腫瘤作用。
本發(fā)明的最佳實(shí)施例，首先將龍牙楤木葉干燥后粉碎成為粗粉取1kg，在濃度為92％的乙醇中浸泡2小時(shí)，以濃度為92％的藥用乙醇回流提取三次，每次2小時(shí)，然后過濾，合并乙醇液，低溫減壓回收乙醇至稠膏狀，得乙醇提取物，將此提取物加水懸浮，以石油醚萃取3次，水層再用氯仿萃取3次，水層繼續(xù)用水飽和正丁醇萃取5次，將正丁醇萃取液合并后，80℃減壓回收溶劑至干，得正丁醇提取物55g，經(jīng)硅膠柱層析CHCl3∶MeOH∶H2O(5∶1∶0.1)得木葉皂甙A、B、C、D，楤木葉皂甙A為白色粉末，LiebermamBurchard反應(yīng)陽性，泡沫反應(yīng)陽性，Monsh反應(yīng)陽性，其快原子轟擊質(zhì)譜(FAB-MS)m/z997(m+k+)，(981M+Na+)峰表明木葉皂甙A的分子量為958，分子結(jié)構(gòu)為3-0-[β-D-葡萄吡喃基(1→2)][B-D-葡萄吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-常春藤皂甙元(3-0-[β-D-glucapyranasyl(1-2)][β-D-glucapyranasyl(1→3)]-β-D-glucapyranosylhederagenin)。
楤木葉皂甙B為白色針狀結(jié)晶，其分子量為472。
楤木葉皂甙C為淡黃色粉末，其分子量為1120。
楤木葉皂甙D為淡黃色粉末，其分子量超過1500。
經(jīng)過上述工藝1kg粉碎成粗粉楤木葉可得楤木葉皂甙。
權(quán)利要求
1.一種龍牙楤木葉的新用途，其特征在于將楤木葉干燥后粉碎經(jīng)過加工提取出龍牙楤木葉總皂甙，該總皂甙作為治療惡性腫瘤的中藥。
2.一種龍牙楤木葉總皂甙的提取工藝，其特征在于a、將龍牙楤木葉干燥，粉碎為粗粉；b、將龍牙楤木葉粗粉用乙醇浸泡2小時(shí)；c、以92％藥用乙醇回流提取三次，每次2小時(shí)；d、過濾；e、合并乙醇液，低溫減壓回收乙醇至稠膏狀，得乙醇提取物；f、將此提取物加水懸浮，以石油醚萃取3次，水層再用氯仿萃取3次，水層繼續(xù)用水飽和正丁醇萃取5次；g、正丁醇萃取液合并后，減壓回收溶劑至于，得正醇提取物。
全文摘要
一種龍牙楤木葉總皂甙及其提取工藝,是將龍牙楤木葉干燥,粉碎為粗粉,然后將龍牙楤木葉粗粉用乙醇浸泡2小時(shí),以92%的藥用乙醇回流提取三次,每次2小時(shí),過濾,合并乙醇液,低溫減壓回收乙醇至稠膏狀,得乙醇提取物,將其加水懸浮,以石油醚萃取3次,水層用氯仿萃取3次,水層繼續(xù)用水飽和正丁醇萃取5次,正丁醇萃取液合并后,減壓回收溶劑至干,得正丁醇提取物,這種物質(zhì)具有細(xì)胞毒作用、具有明顯的抗腫瘤作用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1184641SQ9611463
公開日1998年6月17日 申請(qǐng)日期1996年12月10日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月10日
發(fā)明者匡海學(xué), 肖洪彬, 李冀 申請(qǐng)人:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)