專利名稱：附子多糖注射液及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療白血病、胸腹腔惡性腫瘤及放化療后貧血癥的附子多糖注射液及其制備工藝。
目前對附子的研究多是以常規(guī)方法提取其生物堿等活性成分，用于心血管系統(tǒng)等慢性病的防治，對其多糖成分未予重視，對附子多糖的分離提取工藝及其臨床應(yīng)用也未見研究報道。
本發(fā)明的目的在于提供一種治療白血病、胸腹腔惡性腫瘤及放化療后貧血的附子多糖注射液及其制備工藝，它能直接用于肌肉、靜脈注射，生物利用度高、作用迅速、療程短、療效好。
本發(fā)明是從附子中提取多糖制成的注射液。其原料用量是附子500～1000g。制備時取附子除去雜質(zhì)，機械粉碎得附子粗粉，再經(jīng)發(fā)酵將附子粗粉蒸透，按5～10％加入由曲霉菌制成的粕粉，拌勻，置30～37℃發(fā)酵室行深層固體通風(fēng)發(fā)酵4～6天得發(fā)酵附子粗粉，水提將發(fā)酵附子粗粉以3倍體積沸水?dāng)嚢柚筇?次，每次3小時，過濾棄去藥渣，合并3次濾液，濃縮將濾液經(jīng)濾布粗濾，薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)得濃縮液，醇沉將濃縮液加3倍量95％乙醇混勻，靜置24小時，過濾，棄去濾液，離心甩干得沉淀物，除雜將沉淀物加水溶解成5％溶液，再加1倍體積15％三氯醋酸，攪拌1小時，經(jīng)離子交換樹脂柱過濾得濾液，二次濃縮將濾液薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)的濃縮液，將此濃縮液同一次醇沉法二次醇沉，過濾，棄去濾液，得沉淀物，于40～50℃減壓干燥得附子多糖粗品，超濾將附子多糖粗品加水溶解成1～2％的溶液，加入微孔膜超濾系統(tǒng)分三級過濾得超濾液，將超濾液薄膜蒸發(fā)三次濃縮至1∶1(g/ml)，將此濃縮液同一次醇沉法三次醇沉，過濾，棄去濾液得沉淀物，于40～50℃減壓干燥得附子多糖精品5～15g，灌封將附子多糖精品加重蒸水500～1000ml溶解成1～1.5％溶液，分別灌裝入10ml、20ml、100ml安瓿內(nèi)，密封，滅菌，置100℃濕熱滅菌30分鐘，經(jīng)質(zhì)檢，包裝而成。
本發(fā)明的優(yōu)點在于附子經(jīng)發(fā)酵及酶化學(xué)處理可起助溶和化學(xué)修飾多糖分子結(jié)構(gòu)的雙重作用，有利于提高多糖產(chǎn)出率和增強療效，附子多糖經(jīng)微孔膜超濾分離，有利于控制分子量的大小，適宜工業(yè)化生產(chǎn)，附子多糖注射液具有免疫增強和調(diào)節(jié)作用，適用于白血病、胸腹腔惡性腫瘤及放化療后貧血癥，直接肌注或靜脈給藥有利于提高生物利用度，增強療效。實驗研究表明附子多糖注射液能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞和胸腹腔惡性腫瘤細(xì)胞向良性轉(zhuǎn)化，刺激骨髓細(xì)胞生長，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖并增強其免疫活性。


圖1是本發(fā)明的制備工藝流程方框圖。
圖中1是附子，2是粉碎，3是發(fā)酵，4是水提，5是一次濃縮，6是一次醇沉，7是除雜，8是二次濃縮，9是二次醇沉，10是超濾，11是三次濃縮，12是三次醇沉，13是灌封，14是滅菌，15是質(zhì)檢，16是包裝。
下面結(jié)合附圖以具體實施例對本發(fā)明作詳細(xì)說明本發(fā)明的原料用量是附子(1)500～1000g；粉碎(2)取附子(1)500～1000g除去雜質(zhì)后機械粉碎，得附子粗粉；發(fā)酵(3)將附子粗粉蒸透，按5～10％加入由曲霉菌制成的粬粉，拌勻，置30～37℃發(fā)酵室，行深層固體通風(fēng)發(fā)酵4～6天得發(fā)酵附子粗粉；水提(4)將發(fā)酵附子粗粉以3倍體積沸水?dāng)嚢柚筇?次，每次3小時，過濾，棄去藥渣，合并3次濾液；一次濃縮(5)將水提(4)所得濾液經(jīng)濾布粗濾，薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)得濃縮液；一次醇沉(6)將一次濃縮(5)所得濃縮液加3倍量95％乙醇混勻，靜置24小時，過濾，棄去濾液，離心甩干得沉淀物；除雜(7)將沉淀物加水溶解成5％，再加1倍體積15％三氯醋酸，攪拌1小時，經(jīng)離子交換樹脂柱過濾得濾液；二次濃縮(8)將除雜(7)所得濾液薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)的濃縮液；二次醇沉(9)同一次醇沉(6)法將二次濃縮(8)所得濃縮液醇沉，過濾，棄去濾液得沉淀物，于40～50℃減壓干燥得附子多糖粗品；超濾(10)將附子多糖粗品加水溶解成1～2％的溶液，加入微孔膜超濾系統(tǒng)，分三級過濾得超濾液；三次濃縮(11)將超濾液薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)濃縮液；三次醇沉(12)將三次濃縮(11)所得濃縮液同一次醇沉(9)法醇沉過濾，棄去濾液得沉淀物，于40～50℃減壓干燥得附子多糖精品約5～15g；灌封(13)將附子多糖精品加重蒸水500～1000ml溶解成1～1.5％溶液，分別灌裝入10ml、20ml、100ml安瓿內(nèi)，密封；滅菌(14)將灌封(13)的安瓿置100℃濕熱滅菌30分鐘；質(zhì)檢(15)將滅菌(14)后安瓿進(jìn)行質(zhì)量檢驗；包裝(16)將質(zhì)檢(15)合格后的產(chǎn)品包裝即得成品。
權(quán)利要求
1.一種治療白血病、胸腹腔惡性腫瘤和放化療后貧血的附子多糖注射液，其特征在于它是從附子(1)中提取多糖制成的注射液。
2.一種附子多糖注射液的制備工藝，其特征在于它是將附子(1)粉碎(2)成粗粉，經(jīng)發(fā)酵(3)將附子粗粉按5～10％加入由曲霉菌制得的粬粉，拌勻，置30～37℃發(fā)酵室，行深層固體通風(fēng)發(fā)酵4～6天得發(fā)酵附子粗粉，水提(4)將發(fā)酵附子粗粉以3倍體積沸水?dāng)嚢柚筇?次，每次3小時，過濾，棄去藥渣，合并3次濾液，一次濃縮(5)將濾液經(jīng)濾布粗濾，薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)得濃縮液，一次醇沉(6)將濃縮液加3倍量95％乙醇混勻，靜置24小時，過濾，棄去藥液，離心甩干得沉淀物，除雜(7)將沉淀物加水溶解成5％溶液，再加1倍體積15％三氯醋酸，攪拌一小時，經(jīng)離子交換樹脂柱過濾得濾液，二次濃縮(8)將濾液薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)的濃縮液，二次醇沉(9)同一次醇沉法(6)將濃縮液醇沉過濾，棄去濾液，于40～50℃減壓干燥得附子多糖粗品，超濾(10)將附子多糖粗品加水溶解成1～2％的溶液，加入微孔膜超濾系統(tǒng)，分三級過濾得超濾液，三次濃縮(11)將超濾液薄膜蒸發(fā)濃縮至1∶1(g/ml)的濃縮液，三次醇沉(12)同一次醇沉法(6)醇沉，過濾，棄去濾液，于40～50℃減壓干燥得附子多糖精品，再經(jīng)灌封(13)、滅菌(14)、質(zhì)檢(15)、包裝(16)而成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種附子多糖注射液及其制備工藝。它是將附子粉碎、發(fā)酵、水提、一次濃縮、一次醇沉、除雜、二次濃縮、一次醇沉、超濾、三次濃縮、三次醇沉得附子多糖精品，再經(jīng)灌封、滅菌、質(zhì)檢、包裝而成。該工藝提高多糖產(chǎn)出率，篩選多糖分子，適宜工業(yè)化生產(chǎn)；該注射液具有免疫增強和調(diào)節(jié)作用，能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞和胸腹腔惡性腫瘤細(xì)胞向良性轉(zhuǎn)化，適用于白血病、胸腹腔惡性腫瘤及放化療后貧血癥。
文檔編號A61K9/08GK1156614SQ96117809
公開日1997年8月13日 申請日期1996年12月3日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月3日
發(fā)明者曾升平 申請人:曾升平