專利名稱：6－芳基吡唑并[3,4－d]嘧啶－4－酮和它們的組合物和使用方法
背景技術(shù)：
(a)發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及6-芳基吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮類化合物、含有它們的藥物組合物和抑制c-GMP磷酸二酯酶以及治療心力衰竭和/或高血壓的方法。
(b)資料內(nèi)容陳述1865年1月12日頒布的Schmidt等人的US3165520公開(kāi)了用作冠狀擴(kuò)張藥的如下通式的吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物
其中R1表示氫原子或烷基、羥基烷基、鹵代烷基或氧雜烷基或環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳烷基或雜環(huán)基烷基或至多雙核芳基或雜環(huán)基；R3表示氫原子或低級(jí)烷基；R5表示脂族、環(huán)脂族、環(huán)脂族-脂族、芳脂族或雜環(huán)-脂族基團(tuán)；和R6表示脂族基團(tuán)或芳烷基或雜環(huán)-烷基，這些基團(tuán)可以被取代。
該專利較具體地公開(kāi)了如下尤其有價(jià)值的化合物，其中R1表示氫原子或低級(jí)烷基或環(huán)烷基、羥基低級(jí)烷基或鹵代低級(jí)烷基，或氧雜低級(jí)烷基或芳基，它是未取代的或被鹵素、烷氧基、烷基、亞甲二氧基、三氟甲基、硝基、氨基或吡啶基單、二或三取代；R3表示氫原子或低級(jí)烷基；R5表示低級(jí)烷基或低級(jí)烷基氨基；和R6表示低級(jí)烷基或芳烷基。
其它公開(kāi)的化合物是一組1-R1-3-R3-4-羥基-6-R6-吡唑并[3，4-d]嘧啶，這些化合物被認(rèn)為是在合成最終產(chǎn)物中有用的中間體。在這些中間體中，具體公開(kāi)的是1-環(huán)戊基-4-羥基-6-芐基-吡唑并[3，4-d]嘧啶和1-異丙基-4-羥基-6-間-甲氧基芐基吡唑并[3，4-d]嘧啶類。
1965年10月12日頒布的Sdhmidt等人的US3211731公開(kāi)了用作冠狀擴(kuò)張藥的如下通式的吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物
其中R1表示氫原子、烷基、羥基烷基、鹵代烷基或氧雜烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳烷基、雜環(huán)基-烷基或至多雙核的芳基或雜環(huán)基；R3表示氫原子或其次是低級(jí)烷基；R6表示可能取代的芳烷基或雜環(huán)基烷基。
該專利較具體地公開(kāi)了如下尤其有價(jià)值的化合物，其中R1表示氫原子或低級(jí)烷基、環(huán)烷基、羥基低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基，氧雜低級(jí)烷基或芳基；R3表示氫原子或低級(jí)烷基；和R6表示取代或未取代的芳烷基。在這些化合物中，具體公開(kāi)的是1-異丙基-4-羥基-6-3′-甲氧基苯基甲基)吡唑并[3，4-d]嘧啶、1-環(huán)戊基-4-羥基-6-芐基-吡唑并[3，4-d]嘧啶、1-異丙基-4-羥基-6-(β-苯基乙基)吡唑并[3，4-d]嘧啶和1-異丙基-4-羥基-6-(4-氨基芐基)吡唑并[3，4-d]嘧啶。
1965年10月12日頒布的Sdhmidt等人的US3211732公開(kāi)了用作中間體的1-R1-3-R3-6-R6-4-羥基-吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物，其中R1表示氫原子、未取代的或被羥基或低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，或環(huán)戊基或環(huán)己基或苯基或苯基低級(jí)烷基；R3表示氫原子或低級(jí)烷基；R6表示取代或未取代的苯基低級(jí)烷基。
具體公開(kāi)的是1-異丙基-4-羥基-6-芐基吡唑并[3，4-d]嘧啶。
還公開(kāi)了用作中間體的1-R1-3-R3-6-R6-4-羥基-吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物，其中R1表示氫原子、低級(jí)烷氧基-低級(jí)烷基或羥基-低級(jí)烷基、環(huán)戊基或環(huán)己基或苯基或被取代的苯基低級(jí)烷基；R3具有如上所述的定義；和R6表示被取代的苯基。具體公開(kāi)的是1-異丙基-4-羥基-6-苯基吡唑并[3，4-d]嘧啶。
1973年5月8日頒布的Breuer等人的US3732225公開(kāi)了用作降血糖藥和消炎藥的下式吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物
其中R是氫或低級(jí)烷基；R1是低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基或取代的苯基；R2是苯基、取代的苯基或環(huán)烷基；和R3是氫、低級(jí)烷基、環(huán)烷基、苯基或取代的苯基。具體公開(kāi)的是1-甲基-6-苯基和1-甲基-6-(4-氯苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
1963年9月25日公開(kāi)的CIBA LIMITED的GB937722公開(kāi)了用作冠狀擴(kuò)張藥的1-異丙基-4-羥基-6-芐基-吡唑并[3，4-d]嘧啶。
1987年5月19日頒布的Hamilton的US4666908公開(kāi)了下式的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮類化合物
其中R1是1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，1-6個(gè)碳原子的低級(jí)亞烷基、1-6個(gè)碳原子的低級(jí)羥基烷基、1-6個(gè)碳原子的低級(jí)羥基亞烷基、1-6個(gè)碳原子的低級(jí)氨基烷基、1-6個(gè)碳原子的低級(jí)氨基亞烷基；n是0-4；和Ar是R2
或2，3或4-吡啶基，其中X、Y和Z獨(dú)立地是(1)氫；(2)1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基；(3)鹵素；(4)羥基；(5)1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基；(6)硝基；(7)氨基；(8)NR′R″，其中R′和R″每個(gè)獨(dú)立地是(a)氫或(b)1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，包括任選地被(i)氨基、(ii)嗎啉代或(iii)5-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基取代的低級(jí)烷基，(9)磺?；?10)-SO2NR′R″，其中R′和R″是如上定義的。
該專利較具體地描述了其中Ar是R2的優(yōu)選化合物。據(jù)說(shuō)該化合物在治療心血管疾病中是有效的。
Miyashita等人在期刊“雜環(huán)化合物”1990，31，1309-1314描述了制備一系列如下通式的吡唑并[3，4-d]嘧啶類化合物的方法
其中R是苯基或甲基；和R1是氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、芐基、乙基羧酸酯或苯基。未公開(kāi)其用途。
1988年1月14日出版的Hamilton的PCT申請(qǐng)WO88 00192公開(kāi)了一系列5-取代的吡唑并[3，4-d]嘧啶-7-酮類化合物，據(jù)說(shuō)可用作強(qiáng)心劑、CNS刺激劑、抗變態(tài)反應(yīng)藥、鎮(zhèn)喘藥或識(shí)別活化劑。
1992年1月2日出版的Bell等人的EP專利申請(qǐng)0463756公開(kāi)了一系列5-(2，5-二取代的苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-7-酮類化合物，據(jù)說(shuō)可用于治療心血管疾病。
1973年11月13日頒布的Podesva等人的US3772294公開(kāi)了制備式I化合物的方法
其中X表示鹵素原子、游離或取代羥基、氨基或巰基和R表示氫原子或低級(jí)烷基或取代或未取代的芳基。這些化合物被披露潛在地用于與痛風(fēng)和其它癥狀有關(guān)的高尿酸血，并且，通式中X表示鹵素原子的化合物被認(rèn)為是合成其它式I化合物的中間體。具體公開(kāi)的是4-羥基-6-苯基-1-吡唑并[3，4-d]嘧啶。
1991年12月24日頒布的Coates和Rawlings的US5075310(1989年6月23日申請(qǐng)，申請(qǐng)系列號(hào)為370494)公開(kāi)和要求保護(hù)了下式的化合物和其可藥用的鹽
其中
是如下式(a)、(b)或(c)的環(huán)
X是氧或硫；和R1是C1-C6烷基、C2-6鏈烯基、C3-5環(huán)烷基-C1-4烷基或被1-6個(gè)氟取代的C1-4烷基。具體公開(kāi)的是6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4(5H)-酮。這些化合物被認(rèn)為可用作支氣管擴(kuò)張藥和心血管擴(kuò)張藥。
1994年3月15日頒布的Bacton等人的US5294612(1992年3月30日申請(qǐng)，申請(qǐng)系列號(hào)為859770)公開(kāi)了一系列6-雜環(huán)基-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮類化合物，例如1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(3-吡啶基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。這些化合物被披露用于治療心力衰竭和高血壓。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明涉及式I化合物或其可藥用的酸加成鹽和/或水合物
其中R1是叔丁基或環(huán)戊基；R3是低級(jí)烷基或苯基-低級(jí)烷基；和R6是苯基或被1-3個(gè)相同或不同的取代基取代的苯基，這些取代基選自低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基、羥基、1-咪唑基、低級(jí)鏈烯氧基、二低級(jí)烷基氨基-低級(jí)烷氧基、4-嗎啉基-低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基-低級(jí)烷氧基、羧基低級(jí)烷氧基、三氟甲基、1-哌啶基低級(jí)烷氧基、1-吡咯烷基低級(jí)烷氧基、硝基、鹵素、氨基、-(CH2)2O-、低級(jí)烷基磺?；被⒌图?jí)烷氧基低級(jí)烷氧基、低級(jí)鏈烯基、二低級(jí)烷基氨基、-OCH(CH3)CH2-、4-嗎啉基羰基低級(jí)烷氧基、4-硫代嗎啉基低級(jí)烷氧基、吡啶基低級(jí)烷氧基、1-低級(jí)烷基-3-六氫吖庚因基氧基和1-低級(jí)烷基-4-哌啶基氧基。
式I化合物被發(fā)現(xiàn)具有c-GmP-PDE V抑制活性，因而用于治療心力衰竭和/或高血壓。
上述尤其優(yōu)選的式I化合物是如下化合物，其中R1是環(huán)戊基；
R3是甲基或乙基；和R6是苯基或被1-2個(gè)相同或不同的取代基取代的苯基，這些取代基選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、甲基、羥基、1-咪唑基、CH2＝CHCH2O-、2-(二甲基氨基)乙氧基、3-(二甲基氨基)丙氧基、2-(4-嗎啉基)乙氧基、3-(4-嗎啉基)丙氧基、乙氧基羰基甲氧基、羧基甲氧基、三氟甲基、2-(1-哌啶基)乙氧基、2-(1-吡咯烷基)乙氧基、硝基、氯、氨基、-(CH2)2O-、甲基磺酰基氨基、2-(甲氧基)乙氧基、CH2＝CH2CH2-、二乙基氨基、-OCH(CH3)CH2-、4-嗎啉基羰基甲氧基、2-(4-硫代嗎啉基)乙氧基、4-吡啶基甲氧基、1-甲基-3-六氫吖庚因基氧基和1-甲基-4-哌啶基氧基。
本發(fā)明尤其優(yōu)選的化合物是1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-丙氧基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(2-(4-嗎啉基)乙氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-乙氧基-4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，和1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(CH2＝CHCH2O)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，它含有式I化合物與可藥用的載體、助劑、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明還涉及抑制哺乳動(dòng)物cGMP磷酸二酯酶的方法，它包括向上述生物體賦給有效量的式I化合物。
優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述式I化合物可與相應(yīng)的烯醇形式呈互變平衡存在
盡管該化合物被認(rèn)為主要呈酮的形式，并在整個(gè)說(shuō)明書中如此表示，但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明包括了兩種形式和它們的混合物。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)低級(jí)烷基指的是具有1至約4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，因此包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基等。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)低級(jí)烷氧基指的是具有1至約4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基取代基，因此包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基等。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)鹵素、鹵化物或鹵代指的是溴、氯、碘或氟。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)低級(jí)鏈烯基指的是具有2至約4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈不飽和烴基，因此包括1-乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、異丙烯基、2-丁烯基、異丁烯基等。
本發(fā)明的化合物的合成方法可由如下方案A說(shuō)明方案A
適當(dāng)取代的5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(II)與過(guò)量的式III的適當(dāng)取代的醛反應(yīng)，反應(yīng)任選地在合適的有機(jī)溶劑，優(yōu)選是二甲苯或苯存在下，使用或不用酸性催化劑，優(yōu)選為對(duì)甲苯磺酸、乙酸或甲磺酸，任選地在以碳為載體的鉑存在下，在室溫至反應(yīng)混合物的沸點(diǎn)的溫度下，優(yōu)選在反應(yīng)混合物的沸點(diǎn)下進(jìn)行以得到式I化合物。
另外，用過(guò)量的式IV的酯R6C(O)OR(其中R是低級(jí)烷基，優(yōu)選為乙基)處理適當(dāng)取代的5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(II)，反應(yīng)在堿，優(yōu)選乙醇鈉存在下，在醇溶劑，例如乙醇中，在室溫至所用的溶劑的沸點(diǎn)的溫度下，優(yōu)選在所用的溶劑的沸點(diǎn)下進(jìn)行以得到式I化合物。
式I化合物也可以如方案B中所述合成方案B
用過(guò)量的式V的腈處理式II的適當(dāng)取代的5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺，反應(yīng)在合適的有機(jī)溶劑，優(yōu)選二甲基甲酰胺(DMF)或二氧雜環(huán)己烷中，在過(guò)量的合適的堿，優(yōu)選氫化鈉存在下，在室溫至所用的溶劑的沸點(diǎn)的溫度下進(jìn)行以直接得到式I的化合物，或式I的化合物與式VI的吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的混合物。隨后可用過(guò)量亞硝酸鈉在1/1水/酸混合物中，優(yōu)選1/1水/硫酸混合物中，在約-10℃至室溫的溫度下處理該混合物以得到式I化合物。
對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是常規(guī)和熟知的簡(jiǎn)單化學(xué)轉(zhuǎn)變過(guò)程可用于改變式I化合物的官能基團(tuán)。例如芳基醚的脫烷基得到相應(yīng)的酚衍生物、酯的水解得到相應(yīng)的酸、硝基衍生物的催化還原得到相應(yīng)的胺和胺的磺?；玫较鄳?yīng)的磺酰胺衍生物。
式I化合物在游離堿形式和酸加成鹽形式時(shí)都是有用的，兩種形式都包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。酸加成鹽是使用的更方便的形式；在實(shí)踐中，使用鹽的形式本來(lái)就相應(yīng)于使用堿形式?？捎糜谥苽渌峒映甥}的酸優(yōu)選包括與游離堿結(jié)合時(shí)產(chǎn)生可藥用的鹽的酸，即鹽的陰離子在鹽的藥用劑量時(shí)對(duì)動(dòng)物生物是相當(dāng)無(wú)害的，因而在游離堿中固有的有益性質(zhì)不被起因于陰離子的副作用損害。在本發(fā)明的實(shí)踐中，方便的是使用游離堿形式或鹽酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽或馬來(lái)酸鹽。然而，在本發(fā)明范圍內(nèi)的其它合適的可藥用鹽是由其它無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸得到的鹽。堿性化合物的酸加成鹽通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中已知的標(biāo)準(zhǔn)方法制備，其中包括，但不限制于，將游離堿溶解在含有合適酸的含水醇溶液中，通過(guò)蒸發(fā)溶液分離出鹽，或使游離堿與酸在有機(jī)溶劑中反應(yīng)，在這種情況下直接分離出鹽，或用第二種有機(jī)溶劑沉淀出，或可通過(guò)濃縮溶液得到。雖然堿性化合物的可藥用的鹽是優(yōu)選的，但所有酸加成鹽包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。所有酸加成鹽可作為游離堿形式的來(lái)源，即使特殊的鹽本身僅作為中間體產(chǎn)物，例如，當(dāng)鹽是為了純化或鑒定而形成時(shí)或當(dāng)鹽用作例如通過(guò)離子交換方法制備可藥用鹽的中間體時(shí)。
式II的適當(dāng)取代的5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺是已知的，因此通過(guò)已知方法制備(例如參見(jiàn)，1994年3月15日頒布的US5294612，其全文列為本文參考文獻(xiàn))，或它們可通過(guò)在如下實(shí)施例中描述的方法制備。式III的醛、式IV的酯和式V的腈或是商業(yè)上可得到的，或它們可通過(guò)在現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法制備，或通過(guò)如下實(shí)施例中描述的方法制備。
本發(fā)明的化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)合成方式、通過(guò)一種或多種元素分析、紅外、核磁共振和質(zhì)譜確定。反應(yīng)進(jìn)程和產(chǎn)物的鑒定和均勻性通過(guò)一種或多種薄層色譜法(TLC)、高壓液相色譜法(HPLC)或氣液色譜法(GLC)測(cè)試。
如下實(shí)施例將進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不是將本發(fā)明限制于這些實(shí)施例。所有熔點(diǎn)(m.p.)用℃表示，是未校正的。
實(shí)施例1在冰/水浴中在氬氣氣氛中冷卻水楊醛(12.21g，0.1mol)在DMF(65ml)中的溶液，分幾批加入在礦物油(4.0g，0.1mol)中的60％氫化鈉。將混合物攪拌1小時(shí)，然后在室溫下加入碘丙烷(16.99g，0.1mol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，傾入水(800ml)中并攪拌。用氯仿提取三次混合物，真空濃縮氯仿層，真空蒸餾(92-94℃，1.15mmHg)所得到的黑色油狀物，得到12.68g(77％)2-丙氧基苯甲醛(b)在冰浴中冷卻KOH(12.16g，184.2mmol)溶在水(150ml)中的溶液，然后加入1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-腈(5.0g，26.3mmol)和過(guò)氧化氫(13.5ml，131.6mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢柽^(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾收集沉淀物并用乙醚洗滌，得到1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺，為白色固體。通過(guò)濃縮濾液得到附加的產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，共得到4.46g產(chǎn)物。
另外，甲酰胺可如下制備將濃硫酸溶液(50ml)冷卻至-5℃，加入1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.0g，10.5mmol)。將混合物攪拌2小時(shí)，然后在室溫下過(guò)夜。將反應(yīng)混合物傾入400ml冰和NH4OH(100ml)中并攪拌1小時(shí)。產(chǎn)物沉淀，通過(guò)過(guò)濾收集。通過(guò)用乙酸酸化濾液至pH5，然后用氯仿提取得到附加的產(chǎn)物。真空濃縮氯仿層，用乙醚處理，過(guò)濾和在100℃干燥過(guò)夜后，得到1.67g(76％)1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺，m.p.191-192℃。
(c)將1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.98g，0.019mol)、2-丙氧基苯甲醛(6.35g，0.038mol)、二甲苯(150ml)和甲磺酸(0.5ml)的混合物加熱回流39小時(shí)，同時(shí)共沸除去水。真空濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用10％碳酸鉀和乙醚處理。分層，水層用乙醚提取，真空濃縮合并的乙醚層。用TLC分析反應(yīng)混合物表明反應(yīng)還未完全。因而，將混合物在180℃的油浴上加熱，將殘余物溶解在氯仿中，用硅膠柱色譜法純化，依次用己烷(100％)和乙醚(100％)洗脫得到2.67gl-環(huán)戊基-3-甲基-6-(2-丙氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.130-132℃。
另外，最終產(chǎn)物制備如下將1-環(huán)戊基-3-甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.0g，4.8mmol)和2-丙氧基苯甲醛(10.6g，10mmol)的混合物在160℃油浴上加熱4小時(shí)，隨后在170℃加熱48小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，加入氯仿(5ml)，在硅膠柱中用乙醚(100％)洗脫溶液，在從環(huán)己烷中重結(jié)晶后得到0.16gl-環(huán)戊基-3-甲基-6-(2-丙氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例2將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-(4-喹啉基-CH＝N)-1H吡唑-4-甲酰胺(6.34g，0.018mol)、苯甲醛(0.96g，0.009mol)、二甲苯(150ml)和甲磺酸(0.5ml)的混合物加熱回流過(guò)夜。真空濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用乙醇(200ml)處理，并共沸蒸餾。殘余物隨后用10％碳酸鉀(100ml)處理，用乙醚研制，過(guò)濾和用水洗滌。產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，在100℃干燥得到2.68g粗產(chǎn)物，用硅膠柱色譜法純化，得到0.603gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-苯基-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.221-222℃。
另外，最終產(chǎn)物優(yōu)選可按照類似于實(shí)施例1(c)的方法由1-環(huán)戊基-3-乙基-5-(4-喹啉基-CH＝N)-1H吡唑-4-甲酰胺和苯甲醛制備。
實(shí)施例3將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H吡唑-4-甲酰胺(2.0g，9mmol)、鄰甲苯甲醛(2.16g，18mmol)、甲磺酸(0.5ml)和二甲苯(50ml)的混合物回流加熱32小時(shí)。除去溶劑，殘余物用乙醇(100ml)處理，然后蒸發(fā)至干。黑色殘余物用10％碳酸鉀和氯仿處理，分離出有機(jī)層，水層用氯仿(2×100ml)提取。合并有機(jī)層，濃縮至約20ml，然后加入硅膠(30g)。將預(yù)載硅膠放入硅膠柱中，用乙醚/己烷(2/8)至(5/5)洗脫得到1.10g(40％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-甲基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.133-134℃。
實(shí)施例4將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H吡唑-4-甲酰胺(2.0g，9mmol)、鄰乙氧基苯甲醛(2.7g，18mmol)、甲磺酸(5滴)和二甲苯(50ml)的混合物回流加熱48小時(shí)。汽提反應(yīng)混合物至干，用10％碳酸鉀和氯仿(100ml)處理。分層，水層用氯仿(2×100ml)提取。合并有機(jī)層，真空濃縮。將得到的黑色油狀物溶解在二氯甲烷(30ml)中，與硅膠(30g)混合。將預(yù)載硅膠放入硅膠柱中，用乙醚/己烷(20/80)至乙醚(100％)洗脫得到1.41g(45％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-乙氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.146-147℃。
實(shí)施例5將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H吡唑-4-甲酰胺(2.0g，9mmol)、對(duì)甲氧基苯甲醛(2.45g，18mmol)、二甲苯(50ml)和對(duì)甲苯磺酸(0.5g)的混合物回流加熱32小時(shí)。汽提反應(yīng)混合物至干，用乙醇(100ml)處理，然后再次濃縮至干。殘余物用氯仿(100ml)和10％碳酸鉀(100ml)處理，分層，水層用氯仿(3×100ml)提取。濃縮合并的有機(jī)層至約25ml，然后與硅膠(30g)混合。將預(yù)載硅膠放入硅膠柱中，用乙醚/己烷(8/10)至乙醚(100％)洗脫，在從環(huán)己烷重結(jié)晶后得到1.25g(41％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-甲氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.135-136℃。
實(shí)施例6將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H吡唑-4-甲酰胺(1.0g，4.5mmol)、2-丙氧基苯甲醛(1.5g，9mmol)、對(duì)甲苯磺酸(0.5g)和二甲苯(50ml)的混合物回流加熱20小時(shí)。汽提反應(yīng)混合物至干，用乙醇處理，然后再次濃縮至干。殘余物用氯仿(100ml)處理，用飽和的碳酸氫鈉洗滌。濃縮有機(jī)層得到黑色油狀物，將其溶解在二氯甲烷(30ml)中，與硅膠(50g)混合。將預(yù)載硅膠放入硅膠柱中，用10％乙醚/己烷至乙醚(100％)洗脫，在從環(huán)己烷重結(jié)晶后得到0.492g(30％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-丙氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.93-94℃。
實(shí)施例7在1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-甲氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(0.5g，1.5mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入氫化鈉(0.15g，3.75mmol，在礦物油中的60％氫化鈉)。將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘，然后加入丙硫醇(0.228g，3.0mmol)，混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，然后在110℃下攪拌9小時(shí)。將反應(yīng)混合物汽提至干，加入水(15ml)和乙酸(1ml)。形成沉淀，通過(guò)過(guò)濾收集沉淀，用水洗滌，從用乙酸乙酯處理的DARCO中重結(jié)晶，得到0.28g(58％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-羥基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.272-273℃，為白色針狀物。
實(shí)施例8(a)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.18g，5.32mmol)、 4-(1-咪唑基)苯甲醛(1.37g)和二甲苯(8ml)溫?zé)嶂?30℃30分鐘，然后在160℃保持3天。冷卻反應(yīng)混合物，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，用乙醚洗滌得到1.88gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，為6，7-飽和衍生物。將該衍生物與乙醇(300ml)和30％過(guò)氧化氫(3.0ml)混合，回流過(guò)夜。加入附加的30％過(guò)氧化氫(3ml)，混合物回流8小時(shí)。加入附加的10ml30％過(guò)氧化氫，混合物回流過(guò)夜。仍存在起始物料，因此加入附加的10ml30％過(guò)氧化氫，混合物回流4小時(shí)，然后加入附加的30％過(guò)氧化氫(10ml)，混合物攪拌1小時(shí)，隨后在室溫下靜置過(guò)夜。汽提反應(yīng)混合物得到黃色液體，用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯(100％)，然后用5％甲醇/乙酸乙酯洗脫得到0.4gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)苯基]-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/2水合物，m.p.＞300℃。
(b)另外，產(chǎn)物可如下制備在咪唑(5.13g，75.35mmol)、碳酸鉀(11.45g)和DMSO(50ml)的混合物中在室溫下一次加入4-氟芐腈(10.04g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后用蒸汽溫?zé)?小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，傾入冷水中。沉淀形成，經(jīng)過(guò)濾收集，用水洗滌和從氯仿/己烷中重結(jié)晶得到4.07g4-(1-咪唑基)芐腈，m.p.146-148℃。
在4-(1-咪唑基)芐腈(0.9g，5.27mmol)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.17g)在DMF(20ml)中的混合物中在室溫下加入氫化鈉(0.63g，在礦物油中的60％分散液)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，加入附加的氫化鈉(0.5g)，混合物在室溫下攪拌約2天。將反應(yīng)混合物傾入冰/水(500ml)中，用乙酸中和，所形成的沉淀經(jīng)過(guò)濾收集，用己烷洗滌，溶解在氯仿中，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和真空濃縮。殘余物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，與兩次類似實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物合并，從乙腈/氯仿中重結(jié)晶，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.＞300℃實(shí)施例9(a)向水楊酸乙酯(100g，0.602mol)在DMF(400ml)中的溶液中加入碳酸鉀(150g)，然后滴加烯丙基溴(87.5g，0.723mol)。將反應(yīng)混合物在蒸汽浴上加熱2小時(shí)，過(guò)濾除去碳酸鉀，將反應(yīng)混合物傾入水中用乙酸乙酯(3×300ml)提取。有機(jī)層鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)溶劑，得到122g(98％)2-(2-丙烯氧基)苯甲酸乙酯。
(b)將鈉球(207mg)溶解于乙醇(15ml)中，加入1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1g，45mmol)，然后加入2-(2-丙烯氧基)苯甲酸乙酯(1.85g，9mmol)。反應(yīng)混合物回流加熱過(guò)夜，冷卻，汽提乙醇，加入水。調(diào)節(jié)pH至約7，經(jīng)過(guò)濾分離出固體。將固體溶解于乙醚中，用稀鹽酸洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和除去溶劑，固體殘余物從乙醚中重結(jié)晶得到0.56gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(CH2＝CH-CH2O)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.119-120℃。
實(shí)施例10將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.03g，9.14mmol)，4-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯甲醛(2.76ml)和二甲苯的混合物在120℃加熱1小時(shí)，隨后在160℃加熱6小時(shí)。加入對(duì)甲苯磺酸(300ml)，混合物在160℃下加熱直至反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，形成乳白色固體，通過(guò)過(guò)濾收集固體，用甲醇洗滌，從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-[3-(二甲基氨基)丙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.175-178℃。
實(shí)施例11(a)在水楊醛(2ml)在乙腈(20ml)中的溶液中加入碳酸鉀(5.71g)，然后加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(3.5g)，混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過(guò)濾，真空濃縮濾液得到2-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛，黃色油狀物。
(b)+(c)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(0.95g，4.28mmol)，2-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(1.51g)和二甲苯(15ml)的混合物在120℃加熱1小時(shí)，然后在160℃加熱直至反應(yīng)完成。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空除去溶劑，殘余物用硅膠色譜法純化，用乙酸乙酯(100％)，然后用乙醇/乙酸乙酯(1/1)洗脫，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(實(shí)施例11(b))，油狀物。然后將游離堿轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽，并從乙醇中重結(jié)晶，在110℃高真空下干燥得到0.5g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮單鹽酸鹽，為灰白色粉末，m.p.235-237℃，實(shí)施例11(c)。
實(shí)施例12(a)將2-甲?；窖趸宜?9.01g，0.05mol)、乙醇(4.6g)、濃硫酸(0.4ml)和甲苯(40ml)的混合物回流加熱1小時(shí)，同時(shí)共沸蒸餾除去水。將反應(yīng)混合物傾入10％碳酸氫鉀(100ml)中，分層，水層用乙醚(2×75ml)提取。合并有機(jī)層，真空濃縮，得到9.1g(95％)2-(乙氧基羰基甲氧基)苯甲醛。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(5.26g，23.7mmol)、2-(乙氧基羰基甲氧基)苯甲醛(9.10g，47.3mmol)、對(duì)甲苯磺酸(0.2g)和二甲苯(100ml)的混合物回流加熱18小時(shí)，同時(shí)共沸蒸餾除去水。真空除去溶劑，殘余物用乙醇處理并蒸發(fā)至干。將殘余物在氯仿和10％碳酸鉀水溶液之間分配，分層，水層用氯仿(100ml)提取。合并有機(jī)層，濃縮至干。殘余物用硅膠預(yù)載，然后用硅膠柱色譜法純化，用己烷(100％)至20％乙醚/己烷洗脫，得到3.74g(38％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(乙氧基羰基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.116-117℃。
實(shí)施例13(a)向3-羥基苯甲醛(3.05g，24.97mmol)在乙腈(15ml)中的溶液中加入碳酸鉀(7.6g)，然后加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(4.65g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后回流加熱過(guò)夜。加入附加的N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(0.93g)和碳酸鉀(0.7g)，混合物再回流加熱6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過(guò)濾，真空濃縮濾液。殘余物在水和氯仿之間分配，分層，水層用氯仿(2×75ml)提取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提，得到7.3g3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛，為琥珀色液體。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.05g，4.73mmol)、3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(1.67g)和二甲苯(7ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。再加入醛(0.4g)將混合物在160℃加熱直至反應(yīng)完全。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用過(guò)濾收集形成的固體，用乙醚洗滌。濃縮濾液至干，殘余物與固體合并，經(jīng)硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯/乙醇(60/40)洗脫。由此得到的固體產(chǎn)物用乙醚洗滌，從乙酸乙酯中重結(jié)晶，然后再次用乙醚洗滌得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.173-176℃。
實(shí)施例14將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.19g，5.38mmol)、2-甲氧基-4-羧基甲氧基苯甲醛(1.13g)和冰醋酸(25ml)的混合物溫?zé)嶂粱亓?天。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，汽提溶劑后得到漿狀物，將其用甲醇洗滌，過(guò)濾收集，和用乙醚洗滌。產(chǎn)物從乙醇中重結(jié)晶，用乙醚洗滌得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[(2-甲氧基-4-羧基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例15將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(0.59g，2.65mmol)、2-三氟甲基苯甲醛(0.5ml)和冰醋酸(25ml)的混合物回流過(guò)夜，再加入0.5當(dāng)量的附加的醛，將混合物回流加熱約3天。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，汽提乙酸，將殘余物冷卻，用乙醚漂洗得到白色固體，經(jīng)過(guò)濾收集固體，，從叔丁基二甲基醚/己烷中重結(jié)晶得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-三氟甲基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.201-202℃。
實(shí)施例16將1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(乙氧基羰基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(3.0g，7.3mmol)、碳酸鉀(3.04g)、水(20ml)和乙醇(50ml)的混合物回流加熱1.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，真空除去溶劑，殘余物與水形成漿液，并酸化。經(jīng)過(guò)濾收集形成的沉淀，從異丙醇中重結(jié)晶，在90℃下干燥。將固體溶解在10％碳酸鉀(100ml)中，用DARCO處理，過(guò)濾，用乙酸酸化濾液，形成沉淀，經(jīng)過(guò)濾收集沉淀，在110℃干燥。與由類似實(shí)驗(yàn)得到的固體產(chǎn)物合并，與6N鹽酸(100ml)一起攪拌，過(guò)濾和用五氧化二磷在100℃真空干燥，得到2.09g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(羧基甲氫基)苯基]-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮半水合物，m.p.208-209℃。
實(shí)施例17(a)在0℃下，在水(500ml)和85％KOH(37.91g)的混合物中加入30％過(guò)氧化氫(49.4ml，483mmol)，隨后加入1-叔丁基-5-氨基-1H-吡唑-4-腈(15.83g，96.5mmol)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌4小時(shí)，然后在室溫下攪拌1小時(shí)。形成黃色沉淀，通過(guò)過(guò)濾收集，空氣干燥得到13.2g1-叔丁基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺，m.p.193-195℃。
(b)將2-丙氧基苯甲醛(3.0g，18.27mmol)、1-叔丁基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.5g，13.7mmol)、甲磺酸(0.2ml)和二甲苯(50ml)的混合物回流加熱過(guò)夜。汽提反應(yīng)混合物至干，用乙醇處理，再次汽提至干。殘余物在氯仿和10％碳酸氫鉀之間分配，分層，水層用氯仿(2×100ml)提取。合并有機(jī)層，真空濃縮，殘余物溶解在二氯甲烷(30ml)中，與硅膠(20g)混合。將預(yù)載的硅膠放在硅膠柱中，用70％乙醚/己烷洗脫，然后用乙醚(100％)洗脫，得到0.98g(22％)1-叔丁基-6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/100水合物，m.p.130-131℃。
(c)將1-叔丁基-6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/100水合物(0.68g，2.1mmol)和三氟乙酸(50ml)的混合物在蒸汽浴中加熱3.5小時(shí)，將反應(yīng)混合物汽提至干，殘余物用硅膠柱色譜法純化，用乙醚洗脫，得到0.45g(79％)6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/4水合物，m.p.170-171℃。
實(shí)施例18(a)在4-羥基苯甲醛(4.04g，33.08mmol)溶于乙腈(50ml)中的溶液中加入碳酸鉀(10.1g)，然后加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(6.16g)。將反應(yīng)混合物回流加熱過(guò)夜，再加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(0.6g)和碳酸鉀(0.5g)，混合物再回流加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過(guò)濾，濾液用DARCO處理，過(guò)濾并汽提溶劑。殘余物在飽和碳酸氫鈉(150ml)和乙酸乙酯(300ml)之間分配。分層，有機(jī)層用1N氫氧化鈉洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提，得到6.41g4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛，為琥珀色油狀物。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.19g，9.86mmol)、4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(3.5g)和二甲苯(10ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。加入對(duì)甲苯磺酸(0.2g)，混合物在160℃下加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，形成的沉淀與甲醇形成漿狀物，過(guò)濾收集沉淀，用甲醇然后用醚洗。產(chǎn)物從乙腈中重結(jié)晶得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例19(a)在3-羥基苯甲醛(5.42g，44.38mmol)、碳酸鉀(13.5g)和乙腈的混合物中加入N-(2-氯乙基)哌啶鹽酸鹽(9.8g)。將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜，冷卻至室溫，過(guò)濾。汽提濾液得到油狀物，將其在氯仿(350ml)和1M氫氧化鈉(200ml)之間分配。分離有機(jī)層，用1M氫氧化鈉(2×200ml)洗滌，用DARCO處理，然后用硫酸鎂處理，過(guò)濾和汽提，得到6.28g3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲醛，為黑色油狀物。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.02g，9.09mmol)、3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲醛(3.18g)和二甲苯(10ml)的混合物回流過(guò)夜。加入附加的醛(0.5g)，混合物在160℃加熱6小時(shí)。反應(yīng)仍未完成，因此，加入附加的醛(0.5g)，混合物回流約2天。將反應(yīng)混合物冷卻，過(guò)濾和汽提，得到油狀殘余物。殘余物用乙腈處理，冷卻，經(jīng)過(guò)濾收集形成的沉淀，用乙醚洗滌。產(chǎn)物用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯/己烷(1/1)洗脫，然后從乙腈中重結(jié)晶，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，白色固體，m.p.180℃。
實(shí)施例20(a)在3-羥基苯甲醛(5.17g，42.34mmol)、碳酸鉀(5.85g)和丙酮(50ml)的混合物中加入溴代乙酸乙酯(5.2ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，加入附加的碳酸鉀(1當(dāng)量)，混合物攪拌1小時(shí)，然后加入附加的溴代乙酸乙酯(0.5當(dāng)量)，混合物在室溫下攪拌直至反應(yīng)完全。過(guò)濾反應(yīng)混合物，在濾液中加入水，除去溶劑。將殘余物溶解在乙醚中，用1M氫氧化鈉(2×100ml)提取，乙醚層用硫酸鎂干燥，汽提，得到7.89g3-(乙氧基羰基甲氧基)苯甲醛，液體。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.54g，15.95mmol)、3-(乙氧基羰基甲氧基)苯甲醛(4.3g)和二甲苯(20ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，經(jīng)過(guò)濾收集形成的固體，用甲醇洗滌，然后用乙醚洗滌。產(chǎn)物從乙腈中重結(jié)晶得到2.48gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(乙氧基羰基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。從重結(jié)晶的濾液中還得到附加的0.3g產(chǎn)物，總共2.78g。
實(shí)施例21在1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(乙氧基羰基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.23g，3.0mmol)在乙醇(10ml)中的漿液中加入水(100ml)和85％KOH(0.4g)。反應(yīng)混合物在蒸汽浴中加熱3小時(shí)，冷卻至室溫并過(guò)濾。將濾液冷卻，用乙酸酸化，得到白色沉淀物，通過(guò)過(guò)濾收集沉淀物，依次用水、乙醇和乙醚洗滌。產(chǎn)物與另外的實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物合并隨后從DMF/乙腈中重結(jié)晶，得到0.98gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(羧基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.299-300℃。
實(shí)施例22(a)在3-羥基苯甲醛(4.15g，33.98mmol)、KOH(4.93g)和DMSO(50ml)的混合物中加入N-(2-氯乙基)吡咯烷鹽酸鹽(6.94g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后傾入水(750ml)中，加入乙酸乙酯(350ml)。分層，水層用乙酸乙酯提取，合并的有機(jī)層用水(2×1000ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提，得到7.12g3-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯甲醛。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.32g，10.45mmol)、3-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯甲醛(2.98g)和二甲苯(10ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。加入附加的醛(0.5g)和對(duì)甲苯磺酸(0.5g)，在160℃持續(xù)加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻，汽提溶劑，殘余物用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯，然后用乙醇/乙酸乙酯(1/1)洗脫，然后產(chǎn)物從乙腈中重結(jié)晶。從重結(jié)晶步驟的母液中經(jīng)制備性薄層色譜法得到附加的產(chǎn)物，用乙酸乙酯洗脫，總共得到0.6g(14％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例23在3-羥基苯甲醛(5.44g，44.55mmol)、碳酸鉀(13.6g)和DMF(50ml)的混合物中分批加入2-二甲基氨基乙基氯鹽酸鹽(7.1g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，過(guò)濾并汽提濾液。殘余物用1N鹽酸(300ml)稀釋，用乙醚提取，乙醚層用硫酸鎂干燥并汽提。將酸性水層冷卻，用8N氫氧化鈉處理直至堿性，隨后用乙醚(3×150ml)提取。合并乙醚層，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并汽提，得到1.43g3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯甲醛，油狀液體。
(b)+(c)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.50g，15.74mmol)、3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯甲醛(3.95g)和二甲苯(10ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻到室溫，汽提溶劑，殘余物在氯仿和水之間分配。分層，水層用氯仿提取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并汽提，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮油狀物，如在[實(shí)施例23(b)]所標(biāo)記的。游離堿用鹽酸乙醇溶液處理得到產(chǎn)物鹽酸鹽[如在實(shí)施例23(c)所標(biāo)記的]。
實(shí)施例24(a)將3-氟芐腈(18ml，168.38mmol)、咪唑(11.46g)、碳酸鉀(25.59g)、銅(1.75g)、碘化鉀(1.75g)和DMF(125ml)的混合物回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，傾入冰/水(600ml)中。形成沉淀，經(jīng)過(guò)濾收集沉淀，用水洗滌，溶解于乙醇(25ml)/氯仿(500ml)中，過(guò)濾。濾液在水中分配，分出有機(jī)層，用硫酸鎂干燥和汽提。將殘余物與其它實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物合并，從氯仿/己烷中重結(jié)晶，得到134g3-(1-咪唑基)芐腈。
(b)在3-(1-咪唑基)芐腈(3.16g)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.77g，16.98mmol)和DMF(75ml)的混合物中加入氫化鈉(0.78g，在礦物油中的60％分散液)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)2天，加入附加的腈(0.1當(dāng)量)和氫化鈉(0.2當(dāng)量)，混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。汽提溶劑，殘余物在氯仿(150ml)和水(350ml)之間分配。分層，水層用氯仿(2×100ml)提取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提。將產(chǎn)物溶解于熱叔丁基二甲基醚中，過(guò)濾和汽提。殘余物用乙腈處理，經(jīng)過(guò)濾收集形成的固體，得到2.10gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(1-咪唑基)]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。
(c)在乙醇/冰浴中向在45ml水/硫酸(1∶1)中的1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(1-咪唑基)]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(6.24g，16.7mmol)的溶液中在1.5小時(shí)內(nèi)以小批量加入溶在水(5ml)中的亞硝酸鈉(5.77g)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物傾入冰/水(500ml)中，用NH4OH中和得到黃色沉淀，通過(guò)過(guò)濾收集沉淀，用水洗滌，然后用醚洗滌。產(chǎn)物從乙酸乙酯/甲醇中，然后從甲醇中重結(jié)晶，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(1-咪唑基)]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.264-265℃。
實(shí)施例25(a)向3，4-二羥基苯甲醛(3.46g，15.05mmol)、碳酸鉀(11.08g)和DMF(50ml)的在室溫下攪拌1小時(shí)的混合物中加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(9.79g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后在蒸汽浴中攪拌6小時(shí)。仍存在起始物料，因此加入附加的碳酸鉀(1.73g)和N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(4.66g)，混合物在蒸汽浴中加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，汽提濾液，將殘余物溶解在2N鹽酸(200ml)中，用氯仿(100ml)提取。水層用氯仿(2×150ml)提取，合并有機(jī)層。冷卻水層，然后用濃氨水處理直至中性。水層用氯仿提取(3×150ml)，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提，得到3，4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.09g，9.4mmol)、3，4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(5.14g)和二甲苯(25ml)的混合物在160℃加熱2天。仍存在起始物料，因此加入對(duì)甲苯磺酸(6.0g)，混合物在160℃下加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入水和甲醇，汽提混合物得到油狀殘余物。殘余物在1N氫氧化鈉(300ml)和乙酸乙酯(100ml)之間分配，分層，水層用乙酸乙酯(1×150ml)提取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾和汽提。固體產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到1.51g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3，4-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例26(a)在2-羥基苯甲酸乙酯(2.4ml，16.38mmol)、碳酸鉀(4.98g)和DMF(30ml)的混合物中加入N-(3-氯丙基)嗎啉鹽酸鹽(3.93g)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘，在蒸汽浴中溫?zé)徇^(guò)夜。冷卻反應(yīng)混合物，過(guò)濾并汽提，得到液體，將其在乙酸乙酯(350ml)和水之間分配。分離有機(jī)層，用水(2×200ml)洗滌，用硫酸鎂干燥和汽提，得到2-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]苯甲酸乙酯。
(b)+(c)將鈉球(0.42g)溶解于乙醇(20ml)中，加入1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.02g，9.10mmol)，然后加入2-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]苯甲酸乙酯(5.33g)。反應(yīng)混合物回流加熱3天，然后在室溫下攪拌，然后汽提溶劑。將殘余物溶解在水(250ml)中，用乙酸酸化至約pH7，用氯仿提取。有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，汽提，得到油狀物，將油狀物溶解在乙醚中，過(guò)濾并汽提濾液，用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯(100％)，然后用乙酸乙酯/甲醇(80/20)洗脫，得到2.71gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮液體，[如實(shí)施例26(b)中所標(biāo)記的]。游離堿用乙醇·鹽酸處理，得到1.14g鹽酸鹽[如實(shí)施例26(c)所標(biāo)記的]，m.p.220-221℃。
實(shí)施例27(a)向KOH(5.81g)在DMSO(15ml)中的攪拌溶液中加入咪唑(5.0g，73.4mmol)。將混合物攪拌1小時(shí)，然后在20分鐘內(nèi)滴加溶于DMSO(10ml)中的2-氟芐腈(8.76ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，用水洗滌，得到10.91g2-(1-咪唑基)芐腈，白色固體。
(b)在2-(1-咪唑基)芐腈(3.14g)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.75g，16.59mmol)和DMF(75ml)的混合物中加入60％氫化鈉(0.78g在礦物油中的60％分散液)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，傾入冰/水(600ml)中，用乙酸處理直至pH7。經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，從乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，得到2.82gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(1-咪唑基)]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的1/4水合物。
(c)在乙醇/冰浴中，向1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(1-咪唑基)]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的1/4水合物(2.55g，6.837mmol)在35ml水/硫酸(1/1)中的溶液中在2小時(shí)內(nèi)滴加溶于水(10ml)中的亞硝酸鈉(2.36g)。將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜，傾入冰水(750ml)中并用氨水中和。通過(guò)過(guò)濾收集形成的沉淀，用水洗滌，然后用乙醚洗滌，得到0.75g產(chǎn)物。由濾液中提取附加的1.74g產(chǎn)物，合并的產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，隨后溶解于氯仿中，汽提，得到1.42g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(1-咪唑基)]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.192-194℃。
實(shí)施例28將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.0g，9mmol)、4-硝基苯甲醛(2.04g，13.5mmol)、甲磺酸(0.25ml)和二甲苯(50ml)的混合物回流加熱過(guò)夜，再另加6小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入乙醇(200ml)，然后回流，隨后用DARCO處理。過(guò)濾反應(yīng)混合物，濃縮至100ml，隨后冷卻。形成黃色針狀物，通過(guò)過(guò)濾收集，用乙醚洗滌，得到0.53g(17％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-硝基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.321-323℃(分解)。
實(shí)施例29(a)向在冰浴中冷卻的1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(5.0g，22.5mmol)、4-氯-2-乙氧基苯甲酸乙酯(5.4g，23.6mmol)和DMF(50ml)的混合物中加入NaH(3.9g，97.5mmol，在礦物油中60％的分散液)。反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。真空濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用水(100ml)處理，用乙酸酸化。反應(yīng)混合物用氯仿(2×150ml)提取，真空濃縮有機(jī)層，油狀殘余物用乙醚結(jié)晶。經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物并干燥。產(chǎn)物從異丙醇/乙醚中重結(jié)晶，得到6.2g1-環(huán)戊基-3-乙基-5-(4-氯-2-乙氧基苯基甲酰氨基(carboxamido))-1H-吡唑-4-甲酰胺，m.p.175-177℃。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-(4-氯-2-乙氧基苯基甲酰胺基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.0g，2.11mmol)和N-甲基-2-吡咯烷酮(3ml)的混合物在185-190℃加熱6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用水(25ml)處理，經(jīng)過(guò)濾收集沉淀，從異丙醇中重結(jié)晶，得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-氯-2-乙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.185-187℃。
實(shí)施例30將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-(4-氯-2-乙氧基苯基甲酰胺基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(4g，9.8mmol)、咪唑(5.0g，73.5mmol)、KF(4.5g，77.5mmol)和N-甲基-2-吡咯烷酮(10ml)的混合物在185-190℃下加熱2.5小時(shí)，然后在室溫下加熱過(guò)夜。在反應(yīng)混合物中加入水(30ml)，混合物用乙酸酸化，經(jīng)過(guò)濾收集所形成的沉淀，用水洗滌，得到2.8gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-氯-2-羥基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，白色針狀物，m.p.＞300℃。實(shí)施例31在1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-硝基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.38g，3.9mol)、SnCl.2H2O(2.64g，11.72mmol)、乙醇(24ml)和水(10ml)的混合物中加入濃鹽酸(14.5ml)。反應(yīng)混合物回流2小時(shí)，冷卻，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，真空干燥得到0.85g(67％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-氨基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮鹽酸鹽的1/3水合物，m.p.279℃(分解)。實(shí)施例32將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.0g，9.0mmol)、2，3-二羥基苯并[b]呋喃-5-甲醛(1.73g，11.7mmol)、甲磺酸(0.25ml)和二甲苯(50ml)的混合物回流20小時(shí)，然后靜置約2天。用乙醚稀釋反應(yīng)混合物，通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物，干燥得到1.65g(52％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2，3-二羥基苯并[b]呋喃-5-基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/10水合物，m.p.253-254℃。
實(shí)施例33在冰浴中，向1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(4-氨基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮鹽酸鹽的1/3水合物(0.61g，1.7mmol)溶于無(wú)水吡啶(20ml)中的混合物中加入甲磺酰氯(0.49g，4.25mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約2天，汽提溶劑至干，殘余物用水處理。經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，從乙醇中重結(jié)晶，經(jīng)DARCO處理后，得到0.49g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(甲磺酰氨基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.325℃(分解)。
實(shí)施例34(a)在氬氣氣氛和冰浴中，向2-羥基苯甲醛(6.11g，0.05mol)溶于DMF(50ml)中的溶液中加入NaH(2.0g，0.05mol，在礦物油中的60％分散液)，1小時(shí)后加入2-氯乙基甲基醚(4.73g，0.05mol)。將反應(yīng)混合物靜置約2天，然后在70℃加熱7小時(shí)。將反應(yīng)混合物汽提至干，殘余物在水和氯仿之間分配，分層，水層用氯仿(2×75ml)提取，產(chǎn)物存在于兩層中，將它們真空濃縮，殘余物用硅膠柱色譜法純化，用乙醚洗脫，得到1.5g2-[2-(甲氧基)乙氧基]苯甲醛。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.07g，4.8mmol)、2-[2-(甲氧基)乙氧基]苯甲醛(1.31g，7.2mmol)、二甲苯(40ml)和甲磺酸(0.25ml)回流過(guò)夜。將反應(yīng)混合物汽提至干，殘余物在二氯甲烷和水之間分配，分層，水層用二氯甲烷(2×100ml)提取。合并有機(jī)層，真空濃縮，與硅膠(30g)混合。將預(yù)載的硅膠放入硅膠柱中，用己烷/乙醚(1/1)洗脫，在從己烷/叔丁基甲基醚(25/1)中結(jié)晶后，得到0.305g(17％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-[2-(甲氧基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.71-72℃。
實(shí)施例35(a)向3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(8.56g，56.26mmol)在乙腈(50ml)中的溶液中加入碳酸鉀(17.1g)和乙腈(20ml)，20分鐘后，加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(11.52g)。將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜，然后冷卻至室溫，過(guò)濾和汽提溶劑，得到琥珀色液體的4-甲氧基-3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛。
(b)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.25g，5.63mmol)、4-甲氧基-3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(1.64g)和二甲苯(12ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。加入附加的醛(0.5g)，將混合物回流加熱直至反應(yīng)完全，隨后冷卻至室溫。汽提溶劑，殘余物與乙酸乙酯形成漿液，通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物，與類似實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物合并。合并的產(chǎn)物從乙腈中重結(jié)晶得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-甲氧基-3-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.205-206℃。
實(shí)施例36將1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(CH2＝CH-CH2O)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(5.84g)在210℃加熱2小時(shí)，加入乙醚，將混合物過(guò)濾，產(chǎn)物先后從乙醇和DMF中重結(jié)晶，得到3.42g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-羥基-3-(2-丙烯基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.＞280℃。
實(shí)施例37(a)在2-羥基-4-(二乙基氨基)苯甲醛(10.0g，51.57mmol)、碳酸鉀(14.3g)和DMF(150ml)的混合物中在室溫下加入乙基碘(4.1ml)。反應(yīng)混合物攪拌約2天，過(guò)濾并真空濃縮濾液。殘余物在乙醚和飽和碳酸鈉之間分配，分出有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，用活性炭處理，過(guò)濾和真空濃縮。固體產(chǎn)物從己烷中重結(jié)晶得到9.8g桃紅結(jié)晶固體的2-乙氧基-4-(二乙基氨基)苯甲醛，m.p.58-59℃。
(b)將2-乙氧基-4-(二乙基氨基)苯甲醛(7.87g，35.56mmol)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.95g，17.78mmol)、對(duì)甲苯磺酸單水合物(0.05g)、10％披鈀炭(0.11g)和苯(150ml)的混合物回流過(guò)夜，同時(shí)共沸蒸餾除去水。經(jīng)過(guò)濾除去催化劑，真空濃縮濾液。殘余物與類似實(shí)驗(yàn)得到的殘余物混合，溶解于二氯甲烷中，裝入硅膠柱中。用乙醚/己烷(60/40)洗脫，得到綠色泡沫，將其用回流的己烷處理，冷卻，通過(guò)過(guò)濾收集產(chǎn)物，得到1.19g(8％)淡黃色針狀物1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-乙氧基-4-(二乙基氨基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.138-139℃。
實(shí)施例38(a)向碳酸鉀(82.88g，0.6mol)在乙腈(300ml)中的懸浮液中加入3，5-二羥基苯甲酸(4.62g，0.03mol)，10分鐘后加入N-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(18.42g，0.099mol)。將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜，冷卻，過(guò)濾并真空濃縮濾液。油狀殘余物用硅膠柱色譜法純化，用丙酮洗脫，隨后在＞195℃和0.2mmHg下進(jìn)行Kugelrohr蒸餾得到9.45g 3，5-二-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲酸4-嗎啉基乙基酯。
(b)4-嗎啉基乙基3，5-二-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯甲酸酯(2.0g，4mmol)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(0.46g，2mmol)、甲醇鈉(0.23g，4mmol)和乙醇(50ml)的混合物回流96小時(shí)。反應(yīng)未完成，因此，加入附加當(dāng)量的苯甲酸和甲醇鈉，將反應(yīng)混合物回流48小時(shí)。汽提反應(yīng)混合物至干，殘余物用水處理，用乙酸酸化。將混合物冷卻，經(jīng)過(guò)濾分離產(chǎn)物，在90℃干燥得到0.61g(54％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3，5-二-[2-(4-嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.182-183℃。
實(shí)施例39在冰浴中冷卻條件下，向1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-羥基-3-(2-丙烯基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.0g)在乙酸(15ml)的懸浮液中加入硫酸(15ml)。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物傾入冰/水中，經(jīng)過(guò)濾收集形成的沉淀，用水洗滌。產(chǎn)物通過(guò)從乙醚中重結(jié)晶純化，然后用硅膠柱色譜法純化，用25％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到0.5gl-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-甲基-2，3-二氫苯并[b]呋喃-5-基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.164-165℃。
實(shí)施例40(a)將3-(乙氧基羰基甲氧基)苯甲醛(9.55g，45.91mmol)溶解于乙醇(75ml)和水(25ml)中，加入KOH(3.02g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至反應(yīng)完全，然后經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，干燥得到3.78g白色粉末3-(羧基甲氧基)苯甲醛鉀鹽。
(b)將3-(乙氧基羧基甲氧基)苯甲醛鉀鹽溶解于水中，用9N硝酸處理。通過(guò)過(guò)濾收集得到的沉淀，用水洗滌，在高真空下和75℃下干燥，得到1.66g3-(羧基甲氧基)苯甲醛。
(c)將3-(羧基甲氧基)苯甲醛(1.63g，9.05mmol)溶解于對(duì)二氧雜環(huán)己烷(20ml)中并在冰浴中冷卻，然后一次加入N，N’-羰基二咪唑(1.9g)。反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，加入嗎啉(0.8ml)，將混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌直至反?yīng)完全。真空除去溶劑，殘余物在氯仿(100ml)和2N鹽酸(75ml)之間分配，分層，水層用氯仿(2×75ml)提取。合并有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，汽提得到油狀物，將其與類似實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物混合，用硅膠柱色譜法純化，用氯仿洗脫，得到2.1g3-[4-嗎啉基羰基甲氧基]苯甲醛。
(d)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.87g)、3-[4-嗎啉基羰基甲氧基]苯甲醛(2.1g，8.43mmol)和二甲苯(20ml)的混合物在160℃加熱約2天。除去溶劑，在殘余物中加入甲醇，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物。由濾液得到附加的產(chǎn)物，將產(chǎn)物合并，從乙腈/氯仿中重結(jié)晶得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(4-嗎啉基羰基甲氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.212-213℃。
實(shí)施例41(a)將3-羥基苯甲醛(5.17g，42.33mmol)、碳酸鉀(58.5g)和乙腈(100ml)的混合物在室溫下攪拌15分鐘，隨后加入二溴乙烷(18.3ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后回流3-4小時(shí)。加入附加的二溴乙烷，反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。冷卻反應(yīng)混合物，過(guò)濾和汽提濾液得到油狀物。將油狀物溶解于乙醚(300ml)中，用5N氫氧化鈉洗滌(2×75ml)，乙醚層用硫酸鎂干燥，汽提。殘余物用硅膠柱色譜法純化，用10％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到5.23g3-(2-溴乙氧基)苯甲醛。
(b)將3-(2-溴乙氧基)苯甲醛(3.91g，17.07mmol)、碳酸鉀(3.1g)、硫代嗎啉(1.9ml)和DMF(30ml)的混合物在蒸汽浴中溫?zé)徇^(guò)夜。加入附加的碳酸鉀(0.7g)和硫代嗎啉(1.0ml)，反應(yīng)混合物在蒸汽浴中溫?zé)徇^(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，過(guò)濾和汽提濾液，得到琥珀色油狀物。將油狀物與類似實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物合并，經(jīng)硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯(100％)洗脫，得到油狀物3-[2-(4-硫代嗎啉基)乙氧基]苯甲醛。
(c)將3-[2-(4-硫代嗎啉基)乙氧基]苯甲醛(3.2g，12.75mmol)、將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.55g)和二甲苯(20ml)的混合物在160℃加熱過(guò)夜。將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻，除去溶劑得到油狀物，油狀物在靜置時(shí)結(jié)晶。產(chǎn)物用熱甲醇/乙醚處理，將混合物冷卻，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，用乙醚洗滌，得到0.51g所需產(chǎn)物。真空濃縮濾液得到5.0g6，7-二氫衍生物，將其溶解于二甲苯(25ml)中，用披鈀炭處理，在110℃加熱3小時(shí)。加入附加的披鈀炭(1.5g)，持續(xù)加熱2小時(shí)。用CELITE過(guò)濾混合物，汽提濾液。殘余物用甲醇處理，經(jīng)過(guò)濾收集產(chǎn)物，與如上得到的產(chǎn)物(0.51g)和類似實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物混合。合并的產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，用乙醚洗滌，在100℃高真空下加熱干燥得到1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[2-(4-硫代嗎啉基)乙氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例42(a)在氬氣下，向3-羥基芐腈(4.76，0.04mmol)、碳酸鉀(16.6g，0.12mmol)和DMF(100ml)的混合物中加入4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(6.56g，0.04mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約2天，蒸發(fā)溶劑，殘余物在水和二氯甲烷之間分配。有機(jī)層用2N氫氧化鈉水溶液(1×100ml)、鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥。真空除去溶劑，得到9.0g琥珀色固體3-(4-吡啶基甲氧基)芐腈。
(b)用雷內(nèi)鎳(2.0g)處理3-(4-吡啶基甲氧基)芐腈(2.5g，0.012mol)在75％甲酸(35ml)中的混合物，將混合物回流加熱4小時(shí)。通過(guò)SUPERCELL過(guò)濾反應(yīng)混合物，用5N氫氧化鈉使濾液達(dá)到pH8-9，用乙酸乙酯(3×150ml)提取，用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層，過(guò)濾并汽提。殘余物用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯(100％)洗脫，得到0.94g(37％)3-(4-吡啶基甲氧基)苯甲醛。
(c)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2.7g，0.124mol)、3-(4-吡啶基甲氧基)苯甲醛(3.95g，0.0185mol)和二甲苯(100ml)的混合物回流加熱過(guò)夜。加入附加的甲酰胺(1g)，混合物再回流2天。加入10％披鈀炭(1g)，混合物再回流3天。經(jīng)過(guò)濾除去催化劑，真空濃縮濾液，經(jīng)過(guò)濾收集固體殘余物。通過(guò)濃縮母液得到附加的產(chǎn)物，合并的產(chǎn)物從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到1.66g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[4-吡啶基甲氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.230-232℃。
實(shí)施例43(a)將3-羥基苯甲醛(3.66g，0.03mol)、碳酸鉀(12.43g，0.09mol)和乙腈(100ml)的混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后加入N-甲基-2-氯甲基哌啶鹽酸鹽(5.49g，0.03mol)。攪拌反應(yīng)混合物直到反應(yīng)完全，然后真空除去溶劑，殘余物在氯仿和水之間分配。用氯仿(3×100ml)提取水層，真空濃縮合并的有機(jī)層，得到3-(1-甲基-3-六氫吖庚因氧基)苯甲醛。
(b)將3-(1-甲基-3-六氫吖庚因氧基)苯甲醛(0.79g，3.4mol)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(0.5g，2.2mmol)、甲磺酸(0.25ml)和二甲苯(25ml)的混合物回流過(guò)夜。汽提溶劑，殘余物溶解在二氯甲烷中，通過(guò)硅膠柱色譜法純化，用乙醚洗脫，然后用丙酮洗脫，再用0.5％三乙胺/丙酮洗脫，得到0.43g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(1-甲基-3-六氫吖庚因氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.195-196℃。
實(shí)施例44向1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-[4-吡啶基甲氧基]苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.1g)在乙酸(100ml)/水(50ml)中的混合物中加入Pt2O(200mg)?；旌衔镌?0磅/英寸2下加熱氫化(自耦變壓器設(shè)為40)4小時(shí)。經(jīng)過(guò)濾除去催化劑，濃縮濾液，殘余物在NH4OH和乙酸乙酯之間分配。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮。殘余物用硅膠柱色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫，然后用制備性薄層色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫，從乙酸乙酯中重結(jié)晶得到64mg1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(3-羥基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.275-278℃(分解)。
實(shí)施例45(a)在35分鐘內(nèi)向3-羥基苯甲醛(8g，65mmol)、1-甲基-4-哌啶醇(7.5g，65mmol)、三苯膦(13.1g，65mmol)和THF(100ml)的攪拌溶液中加入偶氮二羧酸二乙酯(11.4g，65mmol)在THF(20ml)中的溶液。反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌3小時(shí)，隨后在室溫下攪拌5天。真空濃縮反應(yīng)混合物，在氯仿(300ml)和3N鹽酸(300ml)之間分配。真空濃縮水層，殘余物用10％碳酸鉀處理，用氯仿(2×100ml)提取，真空除去溶劑，得到7.4g3-(1-甲基-4-哌啶氧基)苯甲醛。
(b)將3-(1-甲基-4-哌啶氧基)苯甲醛(7.4g)、1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(2g)和二甲苯(200ml)回流31小時(shí)，然后在室溫下攪拌幾天。真空除去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜法純化，用乙醚(100％)至10％甲醇/乙醚洗脫，從異丙醇中重結(jié)晶后，得到2.3g1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(1-甲基-4-哌啶氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮的1/4水合物。
實(shí)施例46(a)在冰浴中，向2，4-二氟芐腈(25g，0.18mol)在對(duì)二氧雜環(huán)己烷(250ml)中的攪拌溶液中在45分鐘內(nèi)加入乙醇鈉(15g，0.22mol)。反應(yīng)混合物如此攪拌2小時(shí)，隨后在室溫下攪拌18小時(shí)。真空濃縮溶劑，殘余物在水(200ml)和二氯甲烷(400ml)之間分配，用乙酸酸化。分離出有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到26.7g黃色油狀物2-乙氧基-4-氟芐腈和4-乙氧基-2-氟芐腈的混合物。
(b)向?qū)嵤├?6(a)的芐腈(26.5g，0.16mol)、咪唑(11.5g，0.17mol)和對(duì)二氧雜環(huán)己烷(150ml)的在冰浴中冷卻的混合物中在30分鐘內(nèi)加入NaH(6.8g，在礦物油中的60％分散液)。反應(yīng)混合物如此攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌24小時(shí)，然后在室溫下靜置24小時(shí)。真空除去溶劑，殘余物在二氯甲烷(2×300ml)和水(100ml)之間分配。合并二氯甲烷提取物，真空濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜法純化，用乙醚(100％)至10％甲醇/乙醚洗脫，得到10.1g4-(1-咪唑基)-2-乙氧基芐腈，m.p.134-136℃。
(c)將1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺(1.5g，6.3mmol)、4-(1-咪唑基)-2-乙氧基芐腈(1.5g，7mmol)、NaH(0.84g，21mmol，在礦物油中的60％分散液)和對(duì)二氧雜環(huán)己烷(75ml)的混合物在蒸汽浴中加熱12小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物用乙酸酸化，真空濃縮，在殘余物中加入水。收集形成的膠狀固體，用水洗滌，干燥和通過(guò)硅膠柱色譜法純化，用乙醚(100％)至15％甲醇/乙醚洗脫，在從乙腈中重結(jié)晶后，得到0.78g(36％)1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)-2-乙氧基苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，m.p.204-206℃。
實(shí)施例47按照類似于實(shí)施例1(c)中描述的方法，但用1-叔丁基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺代替1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺，用2，4，6-三甲基苯甲醛代替2-丙氧基苯甲醛，可以預(yù)料可制備1-叔丁基-3-乙基-6-[2，4，6-三甲基苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
實(shí)施例48按照類似于實(shí)施例1(b)和1(c)中描述的方法，但用1-環(huán)戊基-3-苯基甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-腈代替在1(b)部分中的1-環(huán)戊基-3-乙基-5-氨基-1H-吡唑-4-腈，可以預(yù)料可制備(a)1-環(huán)戊基-3-苯基甲基-5-氨基-1H-吡唑-4-甲酰胺。
(b)1-環(huán)戊基-3-苯基甲基-6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
生物學(xué)試驗(yàn)結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)生物試驗(yàn)方法中，式I化合物被發(fā)現(xiàn)具有c-GMP-PDE V(先前稱為c-GMP-PDE I)抑制活性，因此，用于治療心力衰竭和高血壓。與硝酸結(jié)合的式I化合物己被發(fā)現(xiàn)用于逆轉(zhuǎn)或降低硝酸酯引起的耐受性，因此，將用于治療心絞痛、充血性心臟病和心肌梗塞形成。
環(huán)狀核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的多種同功酶形式在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)被識(shí)別。這些同功酶可將環(huán)式腺苷磷酸(cAMP)和/或環(huán)式鳥(niǎo)苷磷酸(cGMP)水解成可能生物失活的5′-核苷酸磷酸。在血管平滑肌內(nèi)細(xì)胞內(nèi)cGMP的升高觸發(fā)了一系列反應(yīng)，從而導(dǎo)致肌肉緊張性下降，而腎小管細(xì)胞cGMP的升高刺激了尿鈉排泄和多尿。血管平滑肌和腎細(xì)胞含有磷酸二酯酶同功酶，它具有低的水解cGMP的Km(1μM)。這種同功酶被稱為cGMP-PDE或cGMP-PDE V(由于它是在乙酸鈉濃度為150-200mM下在PDE活性的第一峰值中由離子交換瓊脂糖樹(shù)脂洗脫得到，先前被稱為cGMP-PDEI)。cGMP-PDE同功酶的抑制是可行的亞細(xì)胞機(jī)制，由此，通過(guò)增加cGMP可導(dǎo)致降低總外周耐受性和刺激尿鈉排泄和多尿。cGMP-PDE抑制劑的開(kāi)發(fā)代表了一種方法，以發(fā)現(xiàn)用于治療心力衰竭和高血壓的藥物。例如，具有高的cGMP-PDE抑制潛力的化合物可預(yù)期用于降低血壓和引起尿鈉排泄和多尿。
本發(fā)明的代表性的化合物的cGMP-PDE V抑制活性由如下方法說(shuō)明。
由各種動(dòng)物和人的心血管組織(心臟和主動(dòng)脈)通過(guò)陰離子交換和親合色譜法分離cGMP-PDE和其它PDE同功酶，如Silver等人在“Sec.Messeng.Phos.”1313-25，1991中所述；在存在或不存在試驗(yàn)化合物下的PDE活性基本上按Thompson等人在“環(huán)狀核苷酯研究進(jìn)展”期刊1069-92中所述方法測(cè)定。為測(cè)定化合物作為PDE抑制劑的效價(jià)和選擇性，通過(guò)在10μM下篩選化合物對(duì)環(huán)狀核苷酸水解的影響。如果觀察到≥50％的PDE活性抑制，則得到IC50值(導(dǎo)致PDE活性降低50％的化合物的濃度)和相應(yīng)的95％置信區(qū)間。由Tallarida和Murray在“采用計(jì)算機(jī)程序的藥理學(xué)計(jì)算手冊(cè)，方法8，分級(jí)劑量響應(yīng)”，第14-19頁(yè)，Springer-Verlag，紐約，1981中所述的方法由濃度響應(yīng)曲線計(jì)算IC50值。
下表概括了本發(fā)明代表性的化合物的試驗(yàn)結(jié)果。
在給定μM下的抑制百分?jǐn)?shù)或IC50(nM)實(shí)施例編號(hào) cGMP-PDE V1(c) 7/3*2 2503 2004 5.85 876 1.67 51％(10μM)或20％(1μM)8(a) 410/430*8(b) 70％(1μM)或32％(0.1μM)9(b) 4.910 85％(10μM)或15％(1μM)11(c) 2700/4500*12(b) 74％(1μM)或30％(0.1μM)13(b) 10714 81015 50016 68％(10μM)或19％(1μM)或780nM17(c) 14％(0.1μM)或19％(1μM)或39％(10μM)18(b) 37019(b) 7320(b) 94
在給定μM下的抑制百分?jǐn)?shù)或IC50(μM)實(shí)施例編號(hào) cGMP-PDE V21 9322(b) 14023(c) 54024(c) 13025(b) 14/51*26(c) 28％(1μM)27(c) 73％(1μM)或21％(0.1μM)28 40％(1μM)29(b) 7.4/8.4*30 53％(1μM)或9％(0.1μM)31 61％(1μM)或31％(0.1μM)32 47％(1μM)或23％(0.1μM)33 56％(1μM)或21％(0.1μM)34(b) 56％(0.1μM)或28％(0.01μM)35(b) 58％(0.1μM)或13％(0.01μM)36 0％(0.1μM)或4％(1μM)37(b) 73％(1μM)或31％(0.1μM)38(b) 63％(0.1μM)或11％(0.01μM)39 65％(0.1μM)或24％(0.01μM)40(d) 74％(1μM)或47％(0.1μM)41(c) 56％(1μM)或46％(0.1μM)42(c) 56％(0.1μM)或25％(0.01μM)43(b) 75％(1μM)或41％(0.1μM)44 56％(1μM)或29％(0.1μM)46(c) 26％(0.1μM)或76％(0.1μM)或90％(10μM)或18nM*該數(shù)值表示對(duì)分別實(shí)驗(yàn)的IC50(nM)值。
本發(fā)明的代表性的化合物的抗高血壓活性由如下方法說(shuō)明。
用戊巴比妥鈉(50mg/kg，ip)麻醉自發(fā)的高血壓大鼠(SHR)，在下方靜脈腔和腹主動(dòng)脈中插入導(dǎo)管，給藥和分別記錄動(dòng)脈壓力和心率。在手術(shù)2天后，在有意識(shí)的SHR中以5分鐘間隔測(cè)量基準(zhǔn)血壓。試驗(yàn)化合物或賦形劑以與劑量相關(guān)的方式(0.3-10mg/kg)靜脈內(nèi)給藥，同時(shí)，在多譜儀中連續(xù)記錄動(dòng)脈壓力。在試驗(yàn)化合物的每個(gè)劑量給藥后5分鐘測(cè)量平均動(dòng)脈壓力響應(yīng)，而下一次劑量以累積劑量方式給出。對(duì)試驗(yàn)化合物的每個(gè)劑量的響應(yīng)由與三個(gè)基準(zhǔn)測(cè)量結(jié)果的平均值的差值計(jì)算。
下表概括了本發(fā)明代表性化合物的試驗(yàn)結(jié)果。
SHR iv在給定mg/kg下的平均動(dòng)脈實(shí)施例編號(hào) 壓力百分變化或ED25(mg/kg)1(c) -5％(1mg/kg)3 -7％(1mg/kg)4 -13％(10mg/kg)5 -8％(1mg/kg)6 -1％(10mg/kg)8(a) 5.7或-35％(10mg/kg)或-20％(3mg/kg)或-81％(30mg/kg，po)9(b) -19％(10mg/kg)13(b) 9.5或-58％(30mg/kg，po)或-19％(3mg/kg)或-14％(1mg/kg)或-11％(0.3mg/kg)19(b) 12.5或-19％(10mg/kg)21 -1％(10mg/kg)22(b) 17.9％或-18％(10mg/kg)24(c) 12.7或-21％(10mg/kg)或-13％(3mg/kg)25(b) 4.5或-38％(10mg/kg)或-27％(3mg/kg)或-18％(1mg/kg)或-18％(10mg/kg，po)本發(fā)明代表性的化合物在逆轉(zhuǎn)或降低硝酸酯引起的耐受性方面的活性由如下方法說(shuō)明自發(fā)性高血壓大鼠(17-25周齡)通過(guò)重復(fù)給藥高劑量硝酸甘油(100mg/kg，s.c.，3次/天，連續(xù)3天)使之具有硝酸甘油耐受性。為證實(shí)耐受性，以1-300μg/kg的劑量靜脈內(nèi)給以刺激劑量的硝酸甘油，記錄每個(gè)劑量的平均動(dòng)脈壓力(MAP)中的最大變化。在給藥刺激劑量之前5-10分鐘，耐受性大鼠組用本發(fā)明的化合物(耐受性預(yù)處理組)或載體(0.05N氫氧化鈉)(耐受性載體預(yù)處理組)進(jìn)行靜脈內(nèi)預(yù)處理。向非耐受性大鼠(非耐受性組)給藥刺激劑量的硝酸甘油導(dǎo)致MAP在10-40mmHg之間依賴于劑量的下降。向耐受性載體預(yù)處理組給藥刺激劑量的硝酸甘油導(dǎo)致低血壓響應(yīng)的顯著下降。向用本發(fā)明化合物預(yù)處理的耐受性大鼠(耐受性預(yù)處理組)給藥刺激劑量的硝酸甘油導(dǎo)致低血壓響應(yīng)的不同程度的恢復(fù)。計(jì)算非耐受性組、耐受性載體預(yù)處理組和耐受性預(yù)處理組的劑量-MAP曲線下的面積。硝酸酯引起的耐受性的逆轉(zhuǎn)百分?jǐn)?shù)計(jì)算如下逆轉(zhuǎn)百分?jǐn)?shù)＝(AUC耐受性預(yù)處理-AUC耐受性載體)/(AUC非耐受性-AUC耐受性載體)×100其中AUC非耐受性＝非耐受性組的劑量-MAP曲線下的面積。
AUC耐受性載體＝耐受性載體預(yù)處理組的劑量-MAP曲線下的面積。
AUC耐受性預(yù)處理＝耐受性預(yù)處理組的劑量-MAP曲線下的面積。
100％或更大的逆轉(zhuǎn)百分?jǐn)?shù)反映了硝酸酯引起的耐受性完全逆轉(zhuǎn)，而0％的逆轉(zhuǎn)百分?jǐn)?shù)表示沒(méi)有發(fā)生任何硝酸酯引起的耐受性的逆轉(zhuǎn)。下表概括了本發(fā)明代表性化合物的試驗(yàn)結(jié)果。
硝酸甘油引起的實(shí)施例劑量(mg/kg) 耐受性的逆轉(zhuǎn)百公數(shù)(％)6 1.0 498(a)0.3 513(b) 0.3 58本發(fā)明的化合物可通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中已知的常規(guī)藥物制備方法，即通過(guò)配制藥物組合物以用于藥物用途；所述藥物組合物含有本發(fā)明的化合物或其可藥用的鹽和一種或多種以固體或液體形式用于口服給藥、腸胃外給藥、局部給藥或氣溶膠吸入給藥等等的可藥用的載體、助劑、稀釋劑或賦形劑。
用于口服給藥的固體組合物包括壓制的片劑、丸劑、粉劑和粒劑。在該固體組合物中，活性化合物與至少一種惰性稀釋劑，例如淀粉、碳酸鈣、蔗糖或乳糖混合。這些組合物也可含有除惰性稀釋劑之外的其它物質(zhì)，例如潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、滑石等等。
用于口服給藥的液體組合物包括可藥用的乳劑、溶液、分散液、糖漿和酏劑，它含有現(xiàn)有技術(shù)中常用的惰性稀釋劑，例如水和液體石蠟。除了惰性稀釋劑之外，這些組合物也可含有助劑，如增濕劑和懸浮劑、和增甜劑、色素、香料和防腐劑。本發(fā)明的用于口服給藥的化合物還包括可吸收材料的膠囊，如明膠，它含有所述活性組分，加入或不加稀釋劑或賦形劑。
用于腸胃外給藥的本發(fā)明的制劑包括無(wú)菌水溶液、水溶液有機(jī)和有機(jī)溶液、分散液和乳劑。有機(jī)溶劑或分散介質(zhì)的實(shí)例是丙二醇、聚乙二醇、植物油，例如橄欄油和可注射有機(jī)酯，例如油酸乙酯。這些組合物還可含有助劑，例如穩(wěn)定劑、防腐劑、增濕劑、乳化劑和分散劑。
本發(fā)明用于局部給藥或氣溶膠吸入給藥的制劑包括在可藥用的賦形劑，例如水、含水醇、二醇、油溶液或油-水分散液等中溶解或分散本發(fā)明的化合物。
如果需要，本發(fā)明的化合物可進(jìn)一步加入緩釋或有目標(biāo)地提供體系，例如聚合物基質(zhì)、脂質(zhì)體和微球。
在這些組合物中的活性組分百分?jǐn)?shù)可變化，使得得到合適的劑量。向特定患者給藥的劑量使用如下標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)臨床判斷改變給藥途徑、治療持續(xù)時(shí)間、患者的年齡和癥狀、活性組分的效價(jià)和患者對(duì)其的反應(yīng)。因此，在考慮所有標(biāo)準(zhǔn)和使用其對(duì)患者利益的最佳判斷后，在臨床上很容易確定活性化合物的有效劑量。
權(quán)利要求
1.式I化合物或其可藥用的酸加成鹽和/或水合物
其中R1是叔丁基或環(huán)戊基；R3是低級(jí)烷基或苯基低級(jí)烷基；和R6是苯基或被1-3個(gè)相同或不同的取代基取代的苯基，取代基選自低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基、羥基、1-咪唑基、低級(jí)鏈烯氧基、二低級(jí)烷基氨基低級(jí)烷氧基、4-嗎啉基低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基低級(jí)烷氧基、羧基低級(jí)烷氧基、三氟甲基、1-哌啶基低級(jí)烷氧基、1-吡咯烷基低級(jí)烷氧基、硝基、鹵素、氨基、-(CH2)2O-、低級(jí)烷基磺?；被?、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷氧基、低級(jí)鏈烯基、二低級(jí)烷基氨基、-OCH(CH3)CH2-、4-嗎啉基羰基低級(jí)烷氧基、4-硫代嗎啉基低級(jí)烷氧基、吡啶基低級(jí)烷氧基、1-低級(jí)烷基-3-六氫吖庚因基氧基和1-低級(jí)烷基-4-哌啶基氧基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是環(huán)戊基；R3是低級(jí)烷基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R3是甲基或乙基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R6是苯基或被1-2個(gè)相同或不同的取代基取代的苯基，取代基選自低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基、羥基、1-咪唑基、低級(jí)鏈烯氧基、二低級(jí)烷基氨基低級(jí)烷氧基、4-嗎啉基低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基低級(jí)烷氧基、羧基低級(jí)烷氧基、三氟甲基、1-哌啶基低級(jí)烷氧基、1-吡咯烷基低級(jí)烷氧基、硝基、鹵素、氨基、-(CH2)2O-、低級(jí)烷基磺?；被?、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷氧基、低級(jí)鏈烯基、二低級(jí)烷基氨基、-OCH(CH3)CH2-、4-嗎啉基羰基低級(jí)烷氧基、4-硫代嗎啉基低級(jí)烷氧基、吡啶基低級(jí)烷氧基、1-低級(jí)烷基-3-六氫吖庚因基氧基和1-低級(jí)烷基4-哌啶基氧基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R6是苯基或被1-2個(gè)相同或不同的取代基取代的苯基，其中取代基選自甲氧基、乙氧基、丙氧基、甲基、羥基、1-咪唑基、CH2＝CHCH2O-、2-(二甲基氨基)乙氧基、3-(二甲基氨基)丙氧基、2-(4-嗎啉基)乙氧基、3-(4-嗎啉基)丙氧基、乙氧基羰基甲氧基、羧基甲氧基、三氟甲基、2-(1-哌啶基)乙氧基、2-(1-吡咯烷基)乙氧基、硝基、氯、氨基、-(CH2)2O-、甲基磺?；被?、2-(甲氧基)乙氧基、CH2＝CH2CH2-、二乙基氨基、-OCH(CH3)CH2-、4-嗎啉基羰基甲氧基、2-(4-硫代嗎啉基)乙氧基、4-吡啶基甲氧基、1-甲基-3-六氫吖庚因基氧基和1-甲基-4-哌啶基氧基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其選自1-環(huán)戊基-3-乙基-6-(2-丙氧基苯基)吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[3-(2-(4-嗎啉基)乙氧基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-乙氧基-4-(1-咪唑基)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮，和1-環(huán)戊基-3-乙基-6-[2-(CH2＝CHCH2O)苯基]吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮。
7.藥物組合物，其含有權(quán)利要求1的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
8.藥物組合物，其含有權(quán)利要求2的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
9.藥物組合物，其含有權(quán)利要求3的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
10.藥物組合物，其含有權(quán)利要求4的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
11.藥物組合物，其含有權(quán)利要求5的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
12.藥物組合物，其含有權(quán)利要求6的化合物和可藥用的載體，助劑，稀釋劑或賦形劑。
13.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
14.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求2的化合物。
15.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求3的化合物。
16.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求4的化合物。
17.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求5的化合物。
18.抑制哺乳動(dòng)物中cGMP-磷酸二酯酶的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求6的化合物。
19.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1的化合物。
20.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求2的化合物。
21.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求3的化合物。
22.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求4的化合物。
23.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求5的化合物。
24.治療哺乳動(dòng)物中心力衰竭和/或高血壓的方法，該方法包括給所說(shuō)動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求6的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了6－芳基吡唑并[3,4－d]嘧啶－4－酮衍生物,含有它們的藥物組合物,和抑制c－GMP－磷酸二酯酶的方法和治療心力衰竭和/或高血壓的方法。
文檔編號(hào)A61K31/55GK1177963SQ96192463
公開(kāi)日1998年4月1日 申請(qǐng)日期1996年3月5日 優(yōu)先權(quán)日1996年3月5日
發(fā)明者E·R·巴肯, B·辛格 申請(qǐng)人:圣諾菲藥品有限公司