專利名稱：：鳥嘌呤衍生物的制作方法
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：本發(fā)明涉及抗病毒化合物纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的特殊結晶形式，并涉及制備這種結晶形式的方法?；衔?-〔(2-羥乙氧基)甲基〕鳥嘌呤，現(xiàn)已知為無環(huán)鳥苷，具有有效的抗病毒活性，并廣泛用于治療和預防人病毒感染，特別是由皰疹病毒引起的感染(參見，例如，Schaeffer等，自然，272，583-585(1978)，UK專利No.1523865，US專利No.4199574)。但是口服時無環(huán)鳥苷不易從胃腸道吸收，這種低生物利用度意味著可能需要給與多次高劑量的口服藥物以期實現(xiàn)并保持血漿中有效抗病毒水平，尤其是對于治療不敏感病毒或感染。無環(huán)鳥苷的L-纈氨酸酯，也就是L-纈氨酸(2-〔2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基酯(或者已知為纈無環(huán)鳥苷(Valaciclovir))顯示出在保持無環(huán)鳥苷抗病毒性的同時具有較大提高的生物利用度。這種化合物的優(yōu)選形式是其鹽酸鹽，或者已知為纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。無環(huán)鳥苷的L-纈氨酸酯和其鹽包括鹽酸鹽公開于美國專利No.4957924(特別參見實施例1B)，歐洲專利No.0308065(特別參見實施例IB)和Beauchamp等，抗病毒化學和化療(AntiviralChemistryandChemotherapy)，3(3)，157-164(1992)(特別參見第162頁第1欄)。我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽能以多種形式存在，而且我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一種無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽其出人意料地具有好的藥學性質。它特別穩(wěn)定并且?guī)缀醪晃鼭?。每批這種結晶形式能持續(xù)不斷地制成高結晶形式純度，即纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽其它非晶和結晶形式的比例是有限制的。而且這種無水結晶形式具有好的貯存性，且能容易配制成藥物組合物如片劑和膠囊。因此，本發(fā)明的第一方面提供了基本具有下面d間距圖譜()的基本上無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽10.20±0.08，8.10±0.06，7.27±0.06，6.08±0.05，5.83±0.03，5.37±0.02，5.23±0.02，4.89±0.02，4.42±0.02，4.06±0.02，3.71±0.02，3.39±0.02，3.32±0.02，2.91±0.02，2.77±0.02。根據(jù)本發(fā)明，下文“無水結晶形式”指基本具有圖1至3所示相同X-射線粉末衍射圖譜，或者基本具有如上所定義的相同d間距圖譜的結晶形式。一種分子的任何特定結晶形式都具有其本身獨特的d間距圖譜，這種圖譜能用Bragg等式從其粉末X-射線衍射圖譜測定。nλ＝2dsinθ其中n是衍射順序(通常為1)；λ是放射線波長；d是d間距()；和θ是放射線偏轉角。應該理解測定的d間距可根據(jù)粉末樣品裝載的程度而稍有變化。本發(fā)明涉及純化形式和與其它形式纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽如水合的結晶形式混合的無水結晶形式。例如在含有無水結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的任何批次中也可以有水合的結晶形式的該化合物。纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的任何藥物批量中結晶形式純度優(yōu)選是至少70％w/w，更優(yōu)選至少80％w/w，更優(yōu)選至少90％w/w，且最優(yōu)選至少95％w/w的無水結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽(如上所定義的)。在測定結晶形式純度的另一種方法中，因為無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽基本上沒有結合水，因此能通過每一批次中總的結合水含量來測定任何批次的化合物中水合形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的比例。本發(fā)明的第二方面提供了結合水含量不多于3％重量(w/w)且主要具有圖1至3的X-射線粉末衍射圖譜，或者主要具有上文所示相同d間距圖譜的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。更優(yōu)選的結合水含量不多于2％w/w，更優(yōu)選不多于1.5％w/w，更優(yōu)選不多于1％w/w，且最優(yōu)選不多于0.5％w/w。結合水含量通過本領域已知的KarlFischer方法測定，該方法描述于1990年美國藥典第1619～1621頁，和歐洲藥典，第二版(1992)，第二部，第十六分冊，第3、5、6-1卷。本發(fā)明另一方面提供了一種制備無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的方法，包括用增溶劑處理纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，將一定量纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽轉化成所述具有本發(fā)明第一方面中上文所示d間距圖譜的無水結晶形式，之后分離所述的無水結晶形式。本發(fā)明也提供了一種制備具有上文所示d間距的無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的方法，所述方法包括下面步驟a)在溶液中生成游離堿或鹽形式的纈無環(huán)鳥苷；b)將所述游離堿纈無環(huán)鳥苷或其鹽(當不是鹽酸鹽的時候)轉化為纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽；c)從溶液中分離纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，并可任選地去除背景(潮濕的，非溶劑化的)溶劑，得到基本干燥形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽；d)用增溶劑處理纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，將一定量任選被干燥的來自步驟c)的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽轉化為無水結晶形式；和e)分離所述的無水結晶形式?？梢杂帽绢I域已知的任何方法制備纈無環(huán)鳥苷，但優(yōu)選通過上文提到的參考文獻中描述的方法制備(美國專利no.4957924，歐洲專利no.0308065和Beauchamp等《(抗病毒化學和化療》，303，157-164(1992)，美國專利no.4957924的公開內容在這里引入作為參考)。優(yōu)選的是該方法自無環(huán)鳥苷開始，其合成描述于Schaeffer等，《自然》，272，583-585(1978)，UK專利no.1523865和美國專利no.4199574。無環(huán)鳥苷首先酯化成其L-纈氨酸酯(纈無環(huán)鳥苷)，使用可任選被保護的L-纈氨酸例如芐氧羰基-L-纈氨酸(CBZ-L-纈氨酸)，在合適的溶劑中如在吡啶或DMF中，在偶聯(lián)劑如N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺存在下，任選存在一種堿如4-二甲基氨基吡啶為催化劑下進行。保護基團可在酯化反應之后用已知方法去除(如通過在5％碳鈀存在下用甲酸處理)。自由堿或另一種酸的鹽(例如甲酸鹽)形式的纈無環(huán)鳥苷可以用常規(guī)方法，例如通過用鹽酸在一種溶劑中處理而轉化成鹽酸鹽。合成纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽一般導致在溶液中在反應混合物中生成該化合物，從混合物中可以分離并純化出固體產物。然后纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽可任意地干燥，如通過溶于丙酮或淤漿液后干燥。很多因素影響結晶形式的固體產物，根據(jù)本發(fā)明調節(jié)分離的條件和/或順序合成，以產生無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。例如纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的水合形式可以用合適的溶劑在合適的條件下被轉化成無水結晶形式。優(yōu)選的合適溶劑是一種水溶性有機溶劑，它應該是足以增溶的，并以使部分增溶以促進轉化和沉淀，例如從纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的水合的結晶形式轉化成所需的無水結晶形式的量使用。有利的是將溶劑通過真空干燥而完全去除。優(yōu)選的有機溶劑是一種醇，有利的是一種含有1至4個碳原子的低級醇或一種低級酮(含有3至6個碳原子)。最優(yōu)選的低級醇是乙醇或主要由乙醇組成的溶劑，例如變性酒精如SVM或工業(yè)甲基化醇的形式。最優(yōu)選的還有含有水的低級酮，優(yōu)選如具有大約6％至大約12％重量水含量的酮水溶液。優(yōu)選的是將藥物溶于低級酮成漿液。我們的早期研究還表明甲醇和異丙醇也應該是合適的低級醇。根據(jù)本發(fā)明的一個特定的實施方案，纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽是在溶液中，例如在乙醇/水中生成，例如通過上文指出的一般方法獲得，纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽通過蒸餾部分去除溶劑，接著例如通過加入丙酮而沉淀，而進行分離。纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽(如上面步驟c后被分離的)可以在此階段通過過濾而以不穩(wěn)定的溶劑化形式而被分離。然后任選干燥非所需形式的該產物，并如下所述處理成所需的無水結晶形式。優(yōu)選將第一次分離(如在上文步驟c中)后的濕潤的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽干燥；如通過溶于丙酮中成漿液后過濾，濕潤的固體例如在大約30°至大約70℃下干燥，得到基本上干燥的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。在此時，所得到的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽可以含有高比例的二水合形式，其理論結合水含量大約為9.8％。根據(jù)生成無水結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的方法，基本上干燥的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽(如上文所得到的)與一定量低級醇如乙醇或變性酒精優(yōu)選以大約15％至40％w/w，更優(yōu)選大約17％至30％w/w的量混合。之后該混合物例如由大約50℃被加熱至70℃，加熱幾小時。最后產物在真空下干燥去除殘留溶劑，例如在大約50℃至70℃下干燥。本發(fā)明也提供了無水結晶形式纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽(下文稱為“活性成分”)在藥物治療，例如在治療動物，例如哺乳動物如人的病毒性疾病中的用途。該化合物特別適用于治療由各種DNA病毒引起的疾病，如皰疹感染，例如單純性皰疹1和2，水痘帶狀皰疹，巨細胞病毒，EB病毒或人皰疹病毒-6(HHV-6)以及由乙肝引起的疾病。該活性化合物也用于治療乳頭瘤或疣病毒感染，并且還可以與其它治療劑一起給藥，例如與齊多夫定一起治療病毒后相關感染，特別是HIV感染。除用于人的藥物治療外，該活性化合物可以對其它動物給藥以治療病毒性疾病，例如用于對其它哺乳動物給藥。本發(fā)明還提供一種治療動物，例如哺乳動物如人的病毒感染，特別是皰疹病毒性疾病的方法，包括給與動物有效抗病毒量的該活性化合物。本發(fā)明也提供了該活性化合物在制備治療病毒感染的藥物中的用途。該活性化合物可以通過適于要治療癥狀的任何途徑給藥，但優(yōu)選的給藥途徑是口服。但是，應該理解，優(yōu)選的途徑可以根據(jù)例如受藥者的癥狀而不同。在上述應用和說明的每種情況下，所需活性成分(如上文所定義的)的量將取決于幾種因素，包括要治療癥狀的嚴重程度，受藥者的個異性，并且歸根到底要根據(jù)現(xiàn)場的醫(yī)生或獸醫(yī)自行處理的能力。但是一般情況下，對于每一種應用和情況下，合適的有效劑量將在每天每千克受藥者體重1至150mg的范圍內，優(yōu)選在每天每千克體重5至120mg范圍內(除另有說明，所有活性成分重量以游離堿纈無環(huán)鳥苷計算)。所需劑量優(yōu)選在一天中以合適的時間間隔以一、二、三或四或更多亞劑量給藥。這些亞劑量可以以單位劑量形式給藥，例如每單位劑量形式含有大約50至2000mg，優(yōu)選大約250、500、1000或2000mg活性成分。給出下面劑量方案作為指導治療單純性皰疹病毒1型和2型感染總日劑量大約為1或2g，一次500mg，一天兩次，或者一天兩次，一次1g給藥，5至10天；抑制單純性皰疹病毒1型和2型感染；總日劑量大約250mg至1g，用藥大約1至10年(取決于患者)。治療水痘帶狀皰疹病毒感染(例如帶狀皰疹)日劑量大約3g，一天三次，一次1g，用藥7天；抑制巨細胞病毒感染總日劑量大約8g，一天四次，一次2g給藥。對于移植患者，在危險期給藥該日劑量三至六個月；對于HIV陽性患者，按照通常指明的所述劑量給藥例如兩年或更長時間，以提高生活質量?，F(xiàn)在早期結果表明纈無環(huán)鳥苷可以以每日一次大約200mg至大約1000mg的劑量用藥一段有效治療期，用于有效抑制經(jīng)常發(fā)生的生殖器皰疹。最可能的日劑量是250mg，500mg或1000mg。盡管對于該活性成分可以單獨給藥，但優(yōu)選其以一種藥物制劑存在。該制劑含有上文定義的該活性成分，以及一種或幾種其藥學上可接受的賦形劑和任選的其它治療成分。這些賦形劑一定是“可接受的”，與該制劑的其它成分是兼容的，且對其受藥者無害。這些制劑包括那些適于口服給藥，并且可以合適地以單位劑量形式存在的制劑，所述單位劑量形式通過藥學領域任何已知的方法制備。這些方法包括將該活性成分與提供一種或幾種輔助成分的載體組合起來的步驟。一般情況下，該制劑通過均勻而完全地將該活性成分與液體載體或研細的固體載體或兩者組合起來，之后，如果需要，將產品成型而制備。適于口服給藥的本發(fā)明制劑可以作為各含有預定量活性成分的個別單位存在，如膠囊、扁囊劑、顆粒囊劑或片劑(如吞服的，可溶散的或口嚼片劑)；作為粉末劑或顆粒劑；作為含水液體或無水液體的溶液或懸浮液；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑存在。該活性成分也可以作為巨丸劑，藥糖劑或糊劑存在。片劑可以在有或沒有一種或幾種輔助成分的情況下通過壓制或模制而制備。壓制的片劑可以通過在合適的機器中壓制與任選一種粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、保鮮劑、表面活性劑或分散劑混合的自由流動狀態(tài)如粉末或顆粒狀態(tài)的活性成分而制備。模制片劑可以通過在合適的機器中將用惰性液體稀釋劑濕潤的粉末化的化合物的混合物成型而制備。片劑任選被包衣或刻痕，并且可以配制以提供其中活性成分的緩慢釋放或控制釋放。優(yōu)選的單位劑量制劑是含有日劑量或日單位亞劑量(如上文所詳述的)或其合適部分活性成分的那些制劑。應該理解除上面特別提到的成分外，本發(fā)明制劑可以根據(jù)所要求的制劑類型而含有本領域常用的其它試劑，例如適于口服給藥的制劑可以含有調味劑或矯味劑。通過下面的實施例詳細說明本發(fā)明實施例1A.2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-N-〔(苯氧基)羰基〕-L-纈氨酸酯CBZ-L-纈氨酸(170g)溶解于二甲基甲酰胺(DMF)(750m1)中并冷卻。加入N，N-二環(huán)己基-碳化二亞胺(DCC)(156.7g)的DMF(266ml)的冷溶液，并在冷卻下攪拌。在保持冷卻的同時一次加入無環(huán)鳥苷(10.1g)后加入4-(二甲基氨基吡啶)(9.4g)?；旌衔锢鋽嚢柽^夜，然后過濾去除白色沉淀副產物。真空蒸餾減少濾液體積，并用水(663ml)處理濃縮液后加熱至70℃。將所得的懸浮液冷卻至20℃，過濾，并用水洗滌得到的固體。此后，濕潤的粗產物通過重結晶從變性酒精(1.2升)中純化出來，得濕潤的白色結晶固體標題化合物(281.5g)。B.2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-L-纈氨酸酯鹽酸鹽2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-N-〔(芐氧基)羰基〕-L-纈氨酸酯(175g)加入到變性酒精水溶液(335ml/795ml)中，并加熱至回流。然后將溶液冷卻至40℃。所得懸浮液用5％碳鈀催化劑(35g濕重，50％重量的水)處理后在1小時的過程中加入甲酸(30.6ml，90％w/w)。將反應混合物又攪拌了1小時后加入第二批甲酸(19.5ml)，過濾混合物，去除催化劑。濾餅用變性酒精洗滌，合并的濾液用濃鹽酸(33.7ml)處理，所得混合物經(jīng)真空蒸餾濃縮。然后經(jīng)15分鐘加入丙酮(1295ml)，在濾出產物之前將懸浮液攪拌1小時。然后向所得固體中加入丙酮(大約530ml)成淤狀物，再過濾，并在60℃真空下干燥，得標題化合物(1123g81.6％)。該物質的15g樣品與變性酒精(大約7ml)混合至潮濕，在60℃下攪拌加熱過夜，這一步驟在一封閉的燒瓶中進行，以避免醇的流失，并保持混合物的濕潤。然后混合物在60℃真空中干燥，得所期形態(tài)形式的產物。物理數(shù)據(jù)費歇爾值0.9％w/w水。實施例1B產物的X-射線粉末衍射圖譜示于附圖的圖1。d間距和進一步的X-射線衍射數(shù)據(jù)見表1。表1峰號角度峰值d間距圖譜d的誤差I/Imax(度)(計數(shù))()(±)(％)13.5668024.80.52428.62115110.250.083939.42879.380.073410.8614388.140.0649512.108357.310.0628613.221986.690.056714.4921726.110.0575815.124555.850.0315915.903525.570.02121016.4519695.380.02681116.907445.240.02251217.331195.110.0241318.1210134.890.02351422.7114294.430.02491520.552564.320.0281621.213704.190.02121721.837534.070.02261822.71953.910.0231923.9528933.710.021002025.101713.540.0252126.2117843.400.02612226.894283.310.02142327.083733.290.02122428.021583.180.0252528.271613.150.0252628.913913.090.02132729.681913.010.0262830.555022.920.02172931.341102.850.023表1-續(xù)峰號角度峰值d間距圖譜d的誤差I/Imax(度)(計數(shù))()(±)(％)3031.58982.830.0233132.135972.780.02203232.962602.720.0283333.993442.640.02113434.383742.610.02123535.121412.550.0243636.784082.440.02143738.711012.320.023I/Imax＝(峰高/最大峰高)×100用來產生上面X-射線衍射數(shù)據(jù)的粉末樣品用和制備用來產生表2X-射線衍射數(shù)據(jù)的粉末樣品的相同方法制備(表2在下文中說明)，只是對于上述數(shù)據(jù)，用下面的制劑來制備該粉末樣品。樣品通過在一塑料杯中用化學混合光譜研磨機(ChemplexSpectromill)用兩個丙烯球將1g樣品研磨5分鐘而制備。然后將樣品裝回玻璃載片上，厚度2mm。用ScintagPADV衍射儀，以每步0.02°且每步10秒計數(shù)的掃描模式，獲得X-射線衍射掃描。在掃描過程中，持樣器以每秒一圈旋轉。其它條件如下所述。X-射線發(fā)生器45kv，40mA放射線銅Kα放射線固定的發(fā)散狹縫1mm入射散射狹縫2mm衍射散射狹縫0.5mm接收狹縫0.3mm晶體測角計半徑235mm檢測器帶有石墨單色器的閃爍檢測器以峰尖的絕對數(shù)值記錄峰強度。X-射線衍射圖上的強度單位是數(shù)值/秒。絕對數(shù)值＝數(shù)值/秒×計數(shù)時間＝數(shù)值/秒×10秒。表中的峰強度已對背景和銅KαIIX-射線波長干擾進行了校正。根據(jù)使用的具體的衍射儀和分析人員的樣品制備技術的不同，d間距會有稍許變化。相對峰強度也會有更大的變化。對一種藥物確切的結晶形式的鑒定應該主要以觀察的d間距為基礎，相對峰強度有較小的重要性。為了鑒別纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的無水結晶形式，15個最強衍射峰是合理的特征。這些峰出現(xiàn)在10.25±0.08、8.14±0.06、7.31±0.06、6.11±0.05、5.85±0.03、5.38±0.02、5.24±0.02、4.89±0.02、4.43±0.02、4.07±0.02、3.71±0.02、3.40±0.02、3.31±0.02、2.92±0.02和2.78±0.02。。測定d間距中的誤差隨著衍射掃描角度的增大或d間距的減小而減小。對于一種合理校準的衍射儀和合理制備的樣品，10.25峰的誤差可能大約是±0.08，2.78峰的誤差可能大約是±0.01。3.56度一行中列出的第一個峰是由于纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽水合結晶態(tài)，而不是由于無水結晶態(tài)。在另一個無水結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的實施例中，獲得下面的d間距10.20、8.10、7.27、6.68、6.08、5.83、5.56、5.37、5.23、5.10、4.89、4.42、4.31、4.18、4.06、3.91、3.71、3.64、3.54、3.39、3.35、3.32、3.28、3.22、3.18、3.14、3.08、3.00、2.97、2.91、2.85、2.77、2.70、2.63、2.60、2.55、2.44、2.42、2.37、2.32、15個最強特征峰是10.20±0.08、8.10±0.05、7.27±0.04、6.08±0.03、5.83±0.03、5.37±0.02、5.23±0.02、4.89±0.02、4.42±0.02、4.06±0.01、3.71±0.01、3.39±0.01、3.32±0.01、2.9±0.01和2.77±0.01。實施例2A.2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-N-〔(芐氧基)羰基〕-L-纈氨酸酯將CBZ-L-纈氨酸(167g)溶解于二甲基甲酰胺(DMF)(750ml)中并冷卻。加入N，N-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)(153.5g)的DMF(266ml)的冷溶液后一次加入無環(huán)鳥苷(111.7g)。然后加入4-(二甲氨基)吡啶(9.4g)。并將混合物冷攪拌過夜，然后過濾去除白色沉淀副產物。如前所述減少濾液體積得標題化合物(215.3g)。B.2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-L-纈氨酸酯鹽酸鹽將2-〔(2-氨基-1，6-二氫-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基〕乙基-N-〔(芐氧基)羰基〕-L-纈氨酸酯(200g)加到變性酒精水溶液(382ml/908ml)中，并加熱至回流以溶解固體。所得溶液冷卻至40℃。該懸浮液用5％碳鈀催化劑和水(40g)的50％w/w漿狀物處理后歷經(jīng)1小時加入甲酸(96％w/w，32.8ml)。將反應混合物再攪拌1小時后加入第二批甲酸(20.88ml)，過濾混合物以去除催化劑。濾液用濃鹽酸(38.56ml)處理，所得混合物在真空下蒸餾濃縮。之后，歷時15分鐘加入丙酮(1480ml)，并在濾出產物之前將懸浮液攪拌1小時。然后所得固體與丙酮(大約500ml)混合成淤狀物，再次過濾，并在60℃下真空干燥，得標題化合物(137.75g87.6％)。該物質的10g樣品與變性酒精(3.5ml)混合，在60℃加熱幾小時后真空去除溶劑，得到所需晶態(tài)形式的產物。結論獲得無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，基本上無其它形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽(即無水結晶形式純度高于大約90％w/w)。物理數(shù)據(jù)實施例2(B)產物的X-射線粉末衍射圖案見附圖的圖2和3，其中圖2是線性制圖X-射線衍射圖譜；圖3是平方根制圖X-射線衍射圖譜。d間距和進一步的X-射線衍射數(shù)據(jù)見表2。表2峰號角度峰值d間距圖譜I/Imax(度)(計數(shù))()(％)13.62267324.403527.2111912.26238.64191010.222549.431809.372510.8626528.1435612.127347.3010表2-續(xù)峰號角度峰值d間距圖譜I/Imax(度)(計數(shù))()(％)713.246156.688813.771066.421914.5023336.11311015.146355.8581115.895115.5771216.4426525.39351316.9012675.24171417.334755.1161518.1316484.89221620.0521724.43281720.566404.3281821.2010964.19141921.7820344.08272021.9013844.06182122.667293.92102223.9476213.711002324.3916243.65212425.119673.54132525.8624603.44322626.2151273.40672726.8218923.32252826.8919273.31252927.1914293.28193027.9911563.18153128.3510763.15143228.8717223.09233328.9415293.08203429.6212743.01173530.5616732.9222表2-續(xù)峰號角度峰值d間距圖譜I/Imax(度)(計數(shù))()(％)3631.309992.86133732.2525702.77343833.0413762.71183934.0018062.63244034.4512252.60164135.1311492.55154236.7716002.44214338.015762.3784438.767292.32104539.525242.2874640.707512.22104741.288702.19114841.886862.1694942.477182.1395043.405482.0875144.537292.0310實施例2B產物的衍射圖譜產生于PhillipsPW1800自動X-射線粉末衍射儀，自2至452θ掃描，每步間隔0.02度，積分時間為每步4秒。發(fā)生器置位40kv，45mA，Cuα1，2個波長1.54060，1.54439；步驟規(guī)格，樣品測試時間0.020度，4.00秒，0.005度/秒；是否使用單色儀是；發(fā)散狹縫自動的(輻射的樣品長度10.0mm)，峰角度范圍2.000-45.000度，D間距范圍44.1372-2.01289；峰位判據(jù)平位數(shù)據(jù)的頂部值；結晶峰寬度范圍0.00-2.00度；最小峰信號0.75最大強度7621cts，1905.3cps。如下制備粉末樣品將1g纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽樣品轉移到含有2個丙烯球ref26-253的Retsch10ml聚苯乙烯容器ref31-762中。然后用RetschMM2鉆頭研磨機設備以每五分鐘100％研成粉末的速度研磨成非常細的粉末。將磨細的樣品回載到PhillipsPW1811/10持樣器中，該持樣器已經(jīng)在非常平滑的表面上倒轉過來(例如由玻璃板或高拋光金屬片提供光滑平面)。然后將粉末裝回到持樣器中，并且再加入填入粉末，直至持樣器滿。然后用PhillipsPW181100底板固定住持樣器，然后在向上方向移動玻璃/金屬板之前將全部裝置倒轉，得到與持樣器表面持平的平滑的樣品表面。如上所述，纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽結晶形式可以通過它們的X-射線粉末衍射圖譜來表征。圖1至3給出作為線性制圖(圖1和2)和平方根制圖(圖3)的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽無水結晶形式的衍射圖譜。在每一種情況下，該衍射圖譜顯示對衍射角2θ的數(shù)值比(衍射的峰強度)。線性制圖使容易定量分配峰強，而平方根制圖使小峰減小，從而強調衍射圖譜中的主峰。實施例3無水結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽吸濕性和穩(wěn)定性測定吸濕性使用一聯(lián)合微平衡系統(tǒng)來測量平衡水吸著曲線(ModelMB300G，VTICorp.)，稱量大約20mg纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，并使用下面的條件干燥參數(shù)溫度65℃；加熱速度10℃/分鐘；平衡標準5μg；樣品間隔5分鐘吸著參數(shù)溫度25℃；平衡標準5μg；樣品間隔5分鐘。數(shù)據(jù)采集間隔2分鐘。圖4所示水吸著/解吸是等溫線。等溫線表明只吸收少量水。該吸收作用實際上是因為樣品中存在水合的結晶形式，這與KarlFischer滴定測得的0.9％w/w水相符合。少量該水合物的效果通過與用幾乎100％無水結晶形式產生的圖5的等溫線相比較，能更清楚地看到。X-射線粉末衍射最初的粉末圖譜和在40℃，室溫/60RH(相對濕度)，和40℃/75RH的條件下貯存了4星期的物質的圖譜之間沒有變化水百分含量最初0.940℃2星期0.840℃4星期0.8室溫/60％RH，2星期1.0室溫/60％RH，4星期0.940℃/75％RH，2星期1.140℃/75％RH，4星期1.1四星期化學物質穩(wěn)定性數(shù)據(jù)以無水為基礎％w/w初始40℃室溫/60％RH40℃/75％RHL-纈氨酸ND(＜0.1％)NDNDND纈氨酸2-羥乙酸酯鹽酸鹽ND(＜0.1％)NDNDND無環(huán)鳥苷0.90.90.90.9鳥嘌呤ND(＜0.1％)NDNDND纈無環(huán)鳥苷D異構體1.11.2*1.11.2*纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽97.397.898.297.5ND＝未檢測到，數(shù)據(jù)接近1.1％w/w左右*纈氨酸2-羥乙酯鹽酸鹽無明顯增加；最初樣品和四星期時間點樣品之間實際值相互差0.03％之內(在實驗誤差之內)。實施例4在30℃/75％RH(12個月)和40℃/75％RH(6個月)對幾乎100％無水結晶形式進行進一步的吸濕性和穩(wěn)定性研究。分別在30℃/75％RH和40℃/75％RH貯存了12個月和6個月的樣品在含濕量(KarlFischer)或結晶度(根據(jù)X-射線粉末衍射測量的)方面沒有明顯變化。使用聯(lián)合微平衡系統(tǒng)，在相對濕度高至90％下在25℃的吸收不多于0.5％w/w水。而且，在25℃和75％RH下貯存了2.5個月的另一樣品證實了聯(lián)合微平衡系統(tǒng)測定的含濕量是在75％RH下0.3％濕度。這些結果表明無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽是化學和物理穩(wěn)定的。這些特征給予該無水結晶形式好的制劑和貯存性質，有助于以高度可重復制備的方法，以高度結晶形式純度批量獲得。實施例5片劑使用無水結晶纈無環(huán)鳥苷如下制備下面的制劑。</tables>*50次輕敲(taps)后堆積密度0.45g/cc(無水結晶形式)實施例6片劑使用無水結晶纈無環(huán)鳥苷如下制備下面的制劑。</tables>*50次輕敲后堆積密度0.60g/cc(無水結晶形式)；KarlFischer水含量＝0.4實施例5片劑的制備步驟1用所示手篩篩選所示下面成分30目纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽乳糖微晶纖維素聚乙烯吡咯酮K30交聯(lián)聚乙烯吡咯酮60目硬脂酸鎂膠體二氧化硅(CSD)步驟2然后在一1立方英尺V-型摻和機中將除聚乙烯吡咯酮外的來自步驟1的30目篩選成分混合10分鐘。步驟3然后將1.540kgSD3A醇(5％甲醇變性的乙醇)與0.6600kg純化的水混合，手動攪拌下將0.1548kg篩過的聚乙烯吡咯酮溶解于0.6192kg混合的溶劑中。步驟4然后通過一邊混合一邊加入溶解的聚乙烯吡咯酮，在1立方英尺的LittlefordLodige混合機中將來自步驟2的混合3的粉末制成顆粒。再加入1.315kg混合的溶劑，如下所示，混合物共經(jīng)7分鐘制成丸塊。梨片式7分鐘切碎機6.5分鐘步驟5然后將來自步驟4的顆粒在流化床干燥器(GlattGPCG5)中干燥，入口氣溫50℃，干燥至大約1.0～3.0％L.O.D.任何可接受含濕量。步驟6然后把來自步驟5的顆粒用裝有30目篩的M型Fitz研磨機篩選，刀口向前，以中等速度操作。步驟7向來自步驟6的顆粒中加入來自步驟1的篩選過的硬脂酸鎂，并用步驟2的摻和機摻和5分鐘。步驟8稱重潤滑過的顆粒2.650kg(來自步驟7)，加入來自步驟1的篩選出的CSD，然后用手分散，并將混合物在步驟2的摻和機中摻和5分鐘。在裝有橢圓形加工裝置的ManestyBeta壓制機上將混合物壓制成片，19.1mm×10.2mm，壓制重量為大約935.5mg。實施例6片劑的制備步驟1核成分用一20目手篩過篩后在合適大小的V-型摻合機中混合10分鐘。步驟2將來自步驟1的混合好的粉末然后通過一邊混合一邊加入水而在10升高剪切混合機(SP1-型)中制造顆粒。之后，加入大約11-14％水，以核成分w/w計，將混合物制成片劑，進行3至41/2分鐘。步驟3將來自步驟2的顆粒放在盤架干燥器(實施例5、6和7)或真空干燥器(實施例3和4)(SP1-型)中在50℃溫度下干燥至大約1.0至2.0％L.O.D.可接受的含濕量。步驟4剩余的成分通過20目篩子過篩，并加入到步驟3的核成分中，然后該混合物用裝有0.062″篩的Comil197AS型過篩。步驟5然后將混合物在合適大小V-型摻和機中摻和5分鐘。步驟6將來自步驟5的摻和3的顆粒在裝有膠囊成型設備的ManestyBeta壓片機上壓片，18.25mm×7.14mm，壓制重量大約700mg，壓制力大約14.5至18kN。步驟7然后所得片劑可任意地用標準方法如用白色濃縮物、甲基羥基丙基纖維素、二氧化鈦、聚乙二醇和多乙氧基醚包衣。權利要求1.一種基本上無水結晶形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，其主要有如下的d間距圖譜()10.20±0.08，8.10±0.06，7.27±0.06，6.08±0.05，5.83±0.03，5.37±0.02，5.23±0.02，4.89±0.02，4.42±0.02，4.06±0.02，3.71±0.02，3.39±0.02，3.32±0.02，2.91±0.02，2.77±0.02。2.權利要求1的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，其結合水含量不多于3％w/w。3.權利要求2的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，其結合水含量不多于2％w/w。4.權利要求3的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，其結合水含量不多于1％w/w。5.基本具有圖1至3所示相同X-射線衍射圖譜的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。6.前面任一權利要求中要求的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，其用于藥物治療。7.權利要求1至5中任一權項要求的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽在制備治療皰疹病毒感染的藥物中的應用。8.一種治療人皰疹病毒感染的方法，包括給人宿主施用有效抗皰疹病毒量的權利要求1至5中任一權項要求的結晶纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽。9.一種制備基本具有權利要求1中所定義的d間距的無水結晶形式纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的方法，所述方法包括用一定量的增溶劑處理纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，將一定量所述纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽轉化成無水結晶形式；然后分離所述無水結晶形式。10.一種制備基本具有權利要求1中所定義的d間距的無水結晶形式纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽的方法，所述方法包括下面步驟a)在溶液中生成游離堿或鹽形式的纈無環(huán)鳥苷；b)將所述游離堿纈無環(huán)鳥苷或其鹽轉化成纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽；c)從溶液中分離纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，并可任選地去除未結合的溶劑，得基本干燥形式的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽；d)用增溶劑處理纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽，將一定量所述任選被干燥的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽轉化成無水結晶形式；和e)分離所述的無水結晶形式。11.權利要求10的方法，其中增溶劑是有1至4個碳原子的低級醇。12.權利要求11的方法，其中低級醇是乙醇或主要由乙醇組成的溶劑。13.權利要求12的方法，其中低級醇是乙醇或主要由乙醇組成的溶劑，其加入量占基本上干燥的纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽重量的大約17％至大約40％。14.權利要求10的方法，其中增溶劑是有3至6個碳原子的低級酮。全文摘要本發(fā)明涉及無水結晶形式L－纈氨酸(2－[2－氨基－1,6－二氫－6－氧代—嘌呤－9－基)甲氧基]乙酯鹽酸鹽(另外也稱作纈無環(huán)鳥苷鹽酸鹽)和其制備方法。文檔編號A61P31/22GK1179159SQ9619266公開日1998年4月15日申請日期1996年1月19日優(yōu)先權日1995年1月20日發(fā)明者B·H·卡爾特爾,J·M·帕爾丁,P·G·瓦爾拉希金,R·A·文尼克,W·B·格魯布三世,G·A·科維,P·G·拉克,D·M·斯金內爾,D·J·瓦特魯普申請人:惠爾康基金會集團公司