專利名稱：乳胱氨酸類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于乳胱氨酸和其類似物。
真核細胞有許多蛋白酶解體系，包括溶酶體蛋白酶、需鈣蛋白酶、依賴于ATP-遍在蛋白-蛋白酶體的途徑、及不依賴于ATP的非溶酶體的過程。在細胞質(zhì)及細胞核中具主要的中性蛋白酶解活性的為蛋白酶體，其是具多種肽酶活性的20S(700千道爾頓(kDa))顆粒，該20S復(fù)合體是26S(1500kDa)復(fù)合體的蛋白酶解作用的核心部分，后者可分解或加工處理遍在蛋白-綴合蛋白質(zhì)。遍在蛋白化作用標(biāo)記蛋白質(zhì)以被26S蛋白酶體復(fù)合體水解。許多不正?；蚨虊勖６嚯谋灰蕾囉诒樵诘鞍?蛋白酶體的途徑所分解。不正常的肽包括有氧化劑損傷的蛋白質(zhì)(例如，那些具有氧化的二硫鍵的蛋白質(zhì))、翻譯提前終止的產(chǎn)物(例如，那些具有暴露的被蛋白酶體識別的疏水基團的蛋白質(zhì))、和脅迫引起的變性或損傷的蛋白質(zhì)(其中脅迫系由，例如，pH或溫度的改變或暴露給金屬引起)。另外，有些蛋白質(zhì)像酪蛋白并不需要遍在蛋白化就可被蛋白酶體水解。
蛋白酶體具胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和水解肽基-谷氨酰基肽的活性，即，該蛋白酶體能分別在疏水性、堿性和酸性殘基的羧基一側(cè)裂解肽。
發(fā)明概要本發(fā)明是涉及結(jié)構(gòu)上與乳胱氨酸及乳胱氨酸β-內(nèi)酯有關(guān)的新化合物。本發(fā)明亦涉及包含乳胱氨酸和乳胱氨酸類似物的藥物組合物。
本發(fā)明的一個方面是一種藥物組合物，其含有下式的化合物
其中Z1是O、S、SO2、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，而當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是O、S、NH、NRd、CHR1、或(R)或(S)的構(gòu)型的CHOR1，其中Rd為C1-6烷基，而R1是H、鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、NRdRe(當(dāng)Z2是CHOR1時除外)、或任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或是連接在一起的R1和R2是一個二價部分，條件為當(dāng)R1和R2是結(jié)合在一起時，Z1是NH或NRa且Z2是CHR1；Rc是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、且二價部分形成C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或C6-12芳基，其中當(dāng)R1和R2結(jié)合形成C3-8雜芳基或C6-12芳基時，則去除CHR1的氫；R2為C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基)、或者R1和R2結(jié)合為一個二價部分，此二價部分形成C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基，其中當(dāng)R1和R2結(jié)合形成C3-8雜芳基或C6-12芳基時，則除去CHR1的氫；A1為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C=NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)，或NRi(NRiRi′)，其中Rh是選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10?；?、C1-6烷酰基和C6-10芳基磺?；?；及每一Ri和R′i分別選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10?；籱是0、1、2、或3，n是0、1、2、或3；及R3是直鏈或有支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、C6-14芳基烷撐、或Y被去除，X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳基)氧羰基、或C6-14芳基；結(jié)合的R3和X3是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及L0是具有1至25個碳原子、0至10個雜原子及0至6個鹵素原子的有機部分；及一藥學(xué)上可接受的載體。
第二個方面是一種藥物組合物，包含一具有下式的化合物
其中Z1是O、S、SO2、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，限制條件為當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，R1是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe(每一Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-5炔基)；Z3是O、S、NH或NRj，其中Rj為C1-6烷基；X2是O或S；及A1是H、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y可被消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、NRiRi、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh是選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10酰基、C1-6烷基磺酰基、及C6-10芳基磺酰基；及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳基烷撐、或R3可被消除，及X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素，(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合在一起為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及一藥學(xué)上可接受的載體。
第三個方面是一種藥物組合物，其包含一具有下式之一的化合物
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或鹵素；Z2是O、S、NH或NRj，其中Rj是C1-6烷基；R1可為(R)或(S)構(gòu)型的H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe(每個Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；X2是O或S；A1是H、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C=NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y可被消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、N-RiRi′、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和R′i獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-6?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳基烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及一藥學(xué)上可接受的載體。
第四個方面是一種藥物組合物，其包含一具有下式的化合物
其中Z1是O、S、NH或NRj，Rj是C1-6烷基；X1是O或S，R1可為(R)或(S)構(gòu)型的H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、NRdRe(每一Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-5炔基)；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C6-12芳基、C3-8雜芳基、或鹵素；X2是O或S；A1是H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C=NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；喖谆?、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y可被消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRx、N-RiRi′、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Rj′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷叉、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳基烷撐、或R3可去除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R2和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及藥學(xué)上可接受的載體。
第五個方面是一種藥物組合物，包含一具有下式的化合物
其中Z1是O、S、NH或NRj，Rj是C1-6烷基；X1是O或S，R1是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵族元素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、NRdRe(每個Rd和Re獨立地為C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-12芳基、C3-8雜芳基、或鹵素；Ra是C1-6烷基；A1是H、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y可被消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、N-RiRi′、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、C6-14芳烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3在一起為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及藥學(xué)上可接受的載體。
第六個方面是一種藥物組合物，其包含一具有下式的化合物
其中X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，其中每一Rb和Rc獨立為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z1是O、S、NH或NRa，Ra是C1-6烷基；R1是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、NRdRe(每一Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；或連接在一起的R1和R2為二價部分形成C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、-NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg分別為氫、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基)，或R1和R2結(jié)合成二價部分形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)烷基或C6-12芳基，X2是O或S；A1是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，而每一個A1和A2獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y被可消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Ri′分別選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、C6-14芳烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、磺?；?、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及一藥學(xué)上可接受的載體。
第七個方面是一種藥物組合物，其包含一種具有下式的化合物
其中Z1是NH或NRa，NRa是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵連接的H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc分別為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z2是O、S、NH或NRj，Rj是C1-6烷基；R1是以(R)或(S)構(gòu)型存在的H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基ORd、SRd、或NRdRe，(每一Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；或R1和R2結(jié)合成二價部分，該二價部分形成C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、-NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立地為氫、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基)，或R1和R2結(jié)合成二價部分，形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)烷基或C6-12芳基，X2是O或S；每一A1和A2獨立以(R)或(S)構(gòu)型存在，為H、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或是具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y被可消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、N-RiRi′、-NRi(ORh)、或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或連在一起R3和X3為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及藥學(xué)上可接受的載體。
第八個方面是一種藥物組合物，其包含一具有下式的化合物
其中Z1是O、NH或NRa，NRa是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵連接的H；及每一A1和A2獨立地是H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或具以下式的結(jié)構(gòu)-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y被可消除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、N-RiRi′、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Ri′獨立選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷撐、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或連在一起R3和X3為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；和R12是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基；和藥學(xué)上可接受的載體。
第九個方面是一種藥物組合物，包含具有下式的化合物
Z1是NH或NRa，NRa是C1-6烷基；X1和X2獨立地是O、S；每一A1和A2獨立地是(R)或(S)構(gòu)型的H、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式的結(jié)構(gòu)-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是O、S、C＝O、C＝S、(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh、-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或Y可去除，X4是鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)，或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基及C2-6炔基；而每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，及n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、直鏈或支鏈的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳基烷叉、C6-14芳烷撐、或R3可被消除，且X3為氫、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基基；和藥學(xué)上可接受的載體。
如上所敘述的許多化合物都是新的化合物；此新化合物也是要求保護的。
本發(fā)明也包括可通過文中所描述化學(xué)合成路線制備的乳胱氨酸類似物、及治療有由蛋白酶體加工的蛋白質(zhì)所介導(dǎo)的病癥的受治療者的方法，該方法是通過向受治療者給藥(如口服)有效劑量的文中所公開的藥物組合物。這些方法包括對癌癥、炎癥(例如，與變應(yīng)性、骨髓或?qū)嶓w器官移植相聯(lián)系的炎性反應(yīng)或病癥)、牛皮癬及再狹窄(restenosis)的治療。
文中所公開的化合物對蛋白酶體有高度選擇性，但不會抑制其他蛋白酶，如胰蛋白酶，α-胰凝乳蛋白酶，需鈣蛋白酶I，需鈣蛋白酶II，木瓜蛋白酶，及組織蛋白酶B。
由下面詳細的描述及附上的權(quán)利要求更會明確本發(fā)明的其他特性及優(yōu)點。發(fā)明的詳細描述名詞解釋“任何天然氨基酸”一詞是指包括20種一般α-氨基酸(甘氨酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，絲氨酸，蘇氨酸，天門冬氨酸，天門冬酰氨，賴氨酸，谷氨酸，谷氨酰胺，精氨酸，組氨酸，苯丙氨酸，半胱氨酸，色氨酸，酪氨酸，甲硫氨酸，和脯氨酸)，及其他是任何天然產(chǎn)物的氨基酸，如正亮氨酸，乙酰甘氨酸，鳥氨酸，甲基丁烯基甲基蘇氨酸和苯基甘氨酸。氨基酸的側(cè)鏈的例子包括氫(甘氨酸)，甲基(丙氨酸)，-CH2-(C＝O)-NH2(天門冬酰胺)，-CH2-SH(半胱氨酸)，及-CH(OH)CH3(蘇氨酸)。
“抑制劑”一詞是描述夠阻斷式降低酶(如蛋白酶體、或20S蛋白酶體的X/MBI亞基或α-鏈)活性的化合物。抑制劑可以競爭、不競爭及非競爭抑制起作用。抑制劑可以可逆地或不可逆地結(jié)合，因此該名詞包括酶的自殺底物。抑制劑可修飾酶的活性位點上或附近的一或多個位點，或使酶的其他部位發(fā)生構(gòu)象變化。因此，文中所公開的化合物(如，其中L0是一環(huán)氧乙烷基或醛基)通過連結(jié)至與乳胱氨酸的相應(yīng)的C4上(結(jié)果形成有一個羥基或硫羥基的C4)與酶反應(yīng)，雖然與?；饔孟鄳?yīng)，化合物和酶反應(yīng)釋放一個離去基(如L1)。
烷基可以是取代或未取代的支鏈或非支鏈的碳氫化合物。支鏈烷基的例子包括，異丙基，仲-丁基，異丁基，叔-丁基，仲戍基，異戍基、叔戍基，異己基。取代的烷基可有1、2、3或更多個取代基，其可相同或不相同，每一個取代一個氫原子，取代基為鹵素(如氟、氯、溴及碘)、羥基、被護的羥基、氨基、保護的氨基、羧基、被護的羧基、氰基、甲基磺酰氨基、烷氧基、乙酰氧基、硝基及低級鹵代烷基；相似地，環(huán)烷基、芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳基、及雜環(huán)基，其可以以一或多個上述取代基取代。環(huán)烷基的例子如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戍基、環(huán)己基、環(huán)庚基、及環(huán)辛基。芳基是C6-20的芳香環(huán)基，其中環(huán)是由碳組成的(如C6-14、C6-10芳基，其中C8芳基可以是烷基芳基，如2，3-二甲基苯基或是一個芳烷基，如苯乙基，或是烷基芳基烷基，如O-甲基-芐基)。鹵代烷基的例子包括氟甲基、二氯甲基、三氟甲基、1，1-二氟乙基、及2，2-二溴甲基。
雜環(huán)基包含至少一個碳原子及至少一個雜原子(如氮、氧、硫或磷)的環(huán)結(jié)構(gòu)。雜芳基是一個芳香雜環(huán)基。雜環(huán)基和雜芳基的例子包括噻唑基、噻吩基、呋喃基、1-異苯并呋喃基、2H-苯并吡喃-3-基、2H-吡咯基、N-吡咯基、咪唑基、吡唑基、異噻唑基、異噁唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基(pyradazinyl)、中氮茚基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、2，3-二氮雜萘基、1，2-二氮雜萘基、和喋啶基。雜環(huán)基也可經(jīng)由雜環(huán)基的一個碳原子或一個雜原子連接到另一部分上。
(Cn烷基)氧羰基具有分子式R-O-(C＝O)-。因此，(C1-6烷基)氧羰基包括甲氧羰基和己氧羰基。文中所用的C1-10?；哂蟹肿邮?(C＝O)-L3，并包含1至10個碳原子(例如C1-6)及1-5個雜原子(至少一個氧原子)。該?；睦影兹┗?、乙?；⒈郊籽豸驶?、叔-丁氧羰基、三氟乙氧羰基、硫代苯甲酰基，苯基氨基羰基、及4-硝基苯氧羰基。
烷撐(alkylene)是由烷烴通過從兩個不同碳原子上除去兩個氫而衍生的兩價基。烷撐的例子如-CH2-CH(R)-CH2和1、4-環(huán)己烷撐。烷叉(alkylidene)是由烯烴通過從相同碳原子上去除兩個氫而衍生的兩價基，如1-丙基-3烷叉(＝CH-CH2-CH2-)。
文中所用的芳香碳原子是指在芳香體系如苯、萘，或芳香雜環(huán)體系如喹啉中的碳原子。非芳香碳原子的例子包含在R-(C＝O)-R、-CH2Cl、-CH2-、及R-(C＝O)-O-R中的碳原子。一個片段式量是所述片段或部分的原子量之和。例如，甲基的片段式量是15，羥基是17。
離去基由底物離去，攜帶離去基和底物之間的共價鍵的一對電子；優(yōu)選的離去基是通過吸電子基、芳香性、共振結(jié)構(gòu)、或其組合來穩(wěn)定這些電子。例子包含鹵離子(優(yōu)選為碘和溴)、甲磺酸根、三氟甲基磺酸根、對-甲苯磺酸根、對-2，4-硝基苯磺酸根、苯甲酸根、對-硝基苯甲酸、對-硝基苯基及C2-5鹵代烷基酰氧基，如三氟乙酸根。
很多硫羥基、氨基、羥基和羧基保護基為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。一般說來，對此保護基的種類的要求是不嚴格的，條件是其在該化合物的其它位置的任何后續(xù)反應(yīng)的條件下是穩(wěn)定的，并且可以在合適位點除去，而不會對分子的其余部分有不利影響。再者，在直接合成結(jié)束之后，保護基可以以另一種基來取代。顯然，在一種化合物和本發(fā)明公開的化合物的不同之處僅在于所公開的化合物的保護基被不同的保護基取代時，該化合物在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。例如，在一種化合物和本發(fā)明公開的化合物的不同僅在于硫羥基、氨基、或羥基部分(或羧基部分的氫或羥基)的一或多個氫被一個保護基取代而形成羧基或磺酸酯時，該被保護化合物在本發(fā)明的范圍之內(nèi)?；撬狨ヮ惏榛酋；?如，甲基磺酰基或甲磺?；?和芳磺?；?如，苯甲基磺?；?。進一步的例子和情況見T.W.Greene，“有機合成中的保護基”(ProtectiveGroups in Organic Chemistry)(參見一版，1981，二版，1991，T.W.Greene及P.G.M.Wuts)。
本發(fā)明也包含有同位素-標(biāo)記的文中所公開的化合物的對應(yīng)物；本發(fā)明的同位素標(biāo)記的化合物具有一個或多個被同位素替代的原子，該同位素具有發(fā)射可檢測的粒子或X-射線(放射性的)的核或磁旋轉(zhuǎn)核。這些核的例子包括2H、3H、13C、15N、15F、29S、31P、32P和125I。本發(fā)明同位素一標(biāo)記的化合物特別可作為用于光譜測定分析、放射免疫測定、基于γ or β閃爍、熒光顯影、放射自顯影的結(jié)合測定及動力學(xué)的研究(如抑制研究或一級或二級同位素效應(yīng)的測定)的探針(probes)或研究工具。
下面縮寫是用于合成的描述
AIBN，2，2-氮雜雙(異丁腈)；Bn，苯甲基；BOP-Cl，雙(2-氧代-3-噁唑烷)膦酰氯；Bu2BOTf，二丁硼三氟甲基磺酸酯；CDI，N，N′-羰基-二咪唑；Cp，環(huán)戍二烯基；DBU，1，8-二氮雜二環(huán)-[5，4，0]十一-7-烯；DCC，二環(huán)己基碳化亞胺；DDQ，2，3-二氯-5，6-雙氰-1，4-苯醌；DEAD，二乙酰氮雜二羧酸酯；DLBAL-H，二異丁氫化鋁；DMF，二甲基甲酰氨；Gilbert試劑，二甲基二氮雜甲基膦酸酯；LDA，二異丙酰胺鋰；LiHMDS，六甲基二硅酰氨，mesylate，甲磺酸酯；Mitsunobu試劑，(DEAD，三苯基磷和親核基)；NMO，N-甲基嗎林-N-氧化物；ph，苯基；PhFl，9-苯基-9-芴基；Ph2NTf，N-苯基三氟甲基磺酰亞胺；Swern氧化試劑(草酰氯，二甲基亞砜，三乙胺)；TBAF，四丁基氟化銨；TBS，叔-丁基二甲硅烷基，TCDI，硫羰-N，N′-羰基-二咪唑；Tf2O，脫水三氟甲基磺酸酐；TMS，三甲基硅烷基；triflate，三氟甲基磺酸酯；及TsCl、對甲苯磺酰氯。
也使用了下面的試劑
Dess-Martin高碘烷 Lawesson′s試劑
Tebbe試劑本發(fā)明部分基于在此所公開的結(jié)構(gòu)-功能資料，其建議如下優(yōu)選的立體化學(xué)關(guān)系，要注意的是優(yōu)選的化合物可以有一、二、三個或更多的立體中心，其具有所述的上-下(或β-α，在此所畫β是在紙頁所在平面之上)或(R)-(S)的關(guān)系。在一些實施方案中，優(yōu)選的構(gòu)型是7(R)、9(S)、6(S)、或其組合。在乳胱氨酸類似物中，R2和R0優(yōu)選是順式的關(guān)系，以便形成內(nèi)酯或內(nèi)酰胺型的中間物，其被認為與在此所揭示的作為蛋白酶體抑制劑的化合物的活性有關(guān)。然而，沒必要每一立體中心均與下列結(jié)構(gòu)一致。
乳胱氨酸 乳胱氨酸-β-內(nèi)酯本領(lǐng)域技術(shù)人員會認識到文中所述的化合物保持了乳胱氨酸或乳胱氨酸β-內(nèi)酯的立體化學(xué)及電子特性。
例如，羥異丁基和C9的羥基的構(gòu)象被認為對于識別目標(biāo)物是重要的，就好像γ-內(nèi)酰胺環(huán)的C6羥基和C7甲基重要一樣。但是，N-乙酰乳胱氨酸部分對活性并不是必要的。如R2、R1和尤其是A1(例如，A1是任何天然α-氨基酸，如纈氨酸，亮氨酸，賴氨酸及苯丙氨酸的側(cè)鏈基)部分能被修飾以控制蛋白酶體的選擇性及蛋白酶體的特殊肽酶活性的選擇性?？傊?，這些部分可模擬由蛋白酶加工或分解的一些肽或蛋白質(zhì)(即，為肽模擬學(xué))。
本發(fā)明部分也基于發(fā)現(xiàn)乳胱氨酸及乳胱氨酸β-內(nèi)酯對蛋白酶體的X/MBl亞基及α-鏈有高度的選擇性，但不抑制像胰蛋白酶、α-胰凝乳蛋白酶、需鈣蛋白酶I，需鈣蛋白酶II、組織蛋白酶和木瓜蛋白酶的蛋白酶的活性。這些選擇性可用于配制成副作用較少的藥物組合物，及評價涉及蛋白酶體的任一亞基與X/MBI亞基及α-鏈選擇抑制的相關(guān)性的基礎(chǔ)研究的結(jié)果。
關(guān)于以藥物組合物中包含的化合物的結(jié)構(gòu)式所描述的新化合物，以下考慮有幾種實施方案。
第一個方面的實施方案包括具有一或多個如下限制條件的化合物。在一個限制條件中L1是由一個氧或優(yōu)選是硫原子連接至X2所連結(jié)的碳原子上。該L1形成一硫酯，因此是一好的離去基。對硫酯基的確切性質(zhì)一般無嚴格要求。在初期的實驗中，由Kobs/[I]測量的大小硫酯的活性的大小大約相同，不管硫酯末端是簡單的芳烷基或更復(fù)雜的具有中間酰胺連鍵及末端羧酸、酯或氨基羰基的分支部分。在一個實施方案中，Z1是NH或NRa；X1是O或S，Z2是CHR1或CHOR1，R1為氫、鹵素、C1-6烷基、或C1-6鹵代烷基；R2是ORf；L0是-(C＝X2)-L1，X2是O，且L1是由硫原子連結(jié)至X2所連的碳原子上。另一實施方案中，L1是選自經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的C6-20芳烷羰基硫代、C6-20芳基硫代、C2-8烷基羰基硫代、及C1-12烷基硫代。如上面在“術(shù)語”部分所定義的，芳硫基包括有芳基硫代、烷基芳基硫代、芳烷基硫代和烷基芳基烷基硫代。
其他限制條件中，當(dāng)L0是羧基或(C1-4烷基)氧羰基及A1是烷基時，A1是C5-20烷基；A1和L0中只有一個是選自羧基和(C1-4烷基)氧羰基；A1不能是H；當(dāng)Z1和Z2都是NH，且A1是甲氧基時，L1至少有3個碳原子；當(dāng)R1和R2連結(jié)時，Z2是CR1；而當(dāng)A1和L0其中之一是(C1-4烷基)氧羰基或羧基時，其中另一個具有至少為20的片段式量。第1、5和7方面的新化合物通常不具有是氫的A1。
當(dāng)Z1是NH，Z2是(R)CHR1時，第一個方面的另一實施方案是那些化合物，其中當(dāng)有5個雜原子時，L1具有0-3個非芳香環(huán)的碳原子，在只有一個氧原子時，L1具有6-15個非芳香環(huán)的碳原子，及在有3個鹵素原子時，L1有0，1，3或5個非芳香基碳原子。
第一個方面的另一個實施方案包括一種化合物，其中Z2是CHR1且Z1是NH或NRa；在此L0是C2-16環(huán)氧乙烷基；L1是羥基，C1-12烷氧基，C1-12烷基磺酰氧基、C6-20芳磺酰氧基，C7-20芳烷基，C6-20芳氧基，C6-20芳烷羰基氧代，C2-8烷基羰基氧代，C2-8烷基羰基硫代，C1-12烷基硫代，C6-10芳烷基羰基硫代，或C6-20芳硫基；或L2是H，C1-2鹵代烷基或C1-6烷基。再者，Z2是O、S、NH或NRd。另一實施方案中，Z2是O、S、NHJ，NRd或CHR1；Rh是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，或C2-6炔基。
第一個方面的再一個實施方案包括一些化合物，其中Z1是O、S或SO2；其中Z2是O、S、NH或NRd；X1是CH2，CHRb或C(Rb)(Rc)；其中R2是C1-6烷基、C1-6鹵代烷基 C2-6烯基、或鹵素；R2是ORf、SRforNRfRg；其中Z2是β構(gòu)型(紙平面的上方)；CHX4是α構(gòu)型(紙平面之下)；R2是β構(gòu)型；或其組合。
本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，在此L0是H或(C＝X2)-L1，X2是O，且L1是由氧或硫原子連接至X2鏈結(jié)的碳原子上；A1和L0之中只有一個選自羧基和(C1-4烷基)氧代羰基；其中L1是羥基，C1-12烷氧基，C1-12烷基磺酰氧基，C6-20芳磺酰氧基，C7-20芳烷基，C6-20芳氧基，C6-20芳烷酰氧基，C2-8烷羰基氧代，C6-20芳烷羰基硫代，C6-20芳基硫代，C2-8烷基羰基硫代，或C1-12烷基硫代。
本發(fā)明還提供一些實施方案，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是CHR1或CHOR1，R1是H、鹵素、C1-6烷基、或C1-6鹵代烷基；R2是ORf；L0是(C＝X2)-L1，X2是O，L1是通過一硫原子連接至X2連結(jié)的碳原子上。個別的化合物包含乳胱氨酸、Clasto-乳胱氨酸三氟乙酯、去羧基乳胱氨酸、乳胱氨酰胺及苯乙基乳胱氨酸。
第二個方面的實施方案包括一些化合物，其中當(dāng)X4是羥基和-(CH2)n-R3X3是異丙基時，CHX4是(S)構(gòu)型；其中當(dāng)X4是羥基時，m是0，及Z1是NH時，-(CH2)n-R3X3部分有5至20個碳原子；其中Z1是NH或NRa；Z1是O、S或SO2；其中Z1是NRa；X1是CH2、CH(Rb)、或CRb)(Rc)；其中Z2是β構(gòu)型(紙平面之上)；CHX4是α構(gòu)型(紙平面之下)；其中R1是氫、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、或鹵素；其中R1是任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe；或以上的組合。
第二個方面的另一實施方案包括一些化合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，R1是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，羥基，鹵素，任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。ORd，SRd或NRdRc(Rd和Re獨立地是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-5炔基)；Z3是O或NH；X2是O或S；及A1是任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基或有下式的結(jié)構(gòu)-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是C＝O或(R)或(S)構(gòu)型的CHX4，或可去除，X4是鹵素，甲基，鹵甲基，或ORh，Rh是選自H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C1-10?；?，C1-6烷基磺?；?，和C6-10芳基磺酰基；n是0，1，2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烯基，C3-10環(huán)烯基，亞苯基，C6-14芳基烯基，或可去除；X3是H，羥基，硫羥基，羧基，氨基，鹵素，或C6-10芳基；或R3和X2連在一起為任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
本發(fā)明也提供了一種化合物，其中Z1是NH和Z3是O；或一種化合物，其中Z1和Z3都是NH；或一種化合物，其中至少有4種(如至少5種或全部)以下限制條件Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，R1是H，C1-6烷基，羥基或Rd，Rd是C1-6烷基；Z3是O或NH；X2是O；Z3是O或NH；及A1是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基，或CHX4，X4是鹵素，甲基，鹵甲基，或ORh，Rh是選自H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-10?；珻1-6烷基磺?；癈6-10芳磺?；?；R3是直鏈或支鏈的C1-8烯基，C3-10環(huán)烯基，亞苯基，C6-14芳基烯基，或可去除；m是0，1或2，n是0或1；X3是H。
本發(fā)明亦提供了一種藥物組合物，其中Z1是NH或NRa，X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，R1是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，羥基，鹵素，任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基，ORd，SRd，或NRdRe(每一Rd和Re獨立地是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，或C2-5炔基)；Z3是O或NH；X2是O或S；及A1是任何任何天然α氨基酸側(cè)鏈基或具下式的結(jié)構(gòu)，-Y-(CH2)n-R3X3其中Y是C＝O或(R)或(S)構(gòu)型的CHX4，或可去除，X4是鹵素，甲基、鹵甲基、或ORh，Rh是選自H，C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基，C1-10?；珻1-6烷基磺?；?，及C6-10芳基磺?；?；n是0，1，2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，亞苯基，C6-14芳基烷撐，或去除；X3是H，羥基，硫羥基，羧基，氨基，鹵素，或C6-10芳基；或R3和X3連在一起為任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
另一實施方案包括一種化合物，其中，X2是O，A1是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基，或X4是鹵素、鹵甲基 或ORh，Rh是選自H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-10酰基，C1-6烷基磺?；癈6-10芳基磺?；?；R3是直鏈或側(cè)鏈基的C1-8烷撐、C3-10環(huán)烷撐，亞苯基，C6-14芳烷撐，或去除；m是0，1或2及n是0或1；X3是氫，個別的乳胱氨酸類似物亦包含有clasto-乳胱氨酸β-內(nèi)酯。
第三個方面的實施方案包括一些化合物，其中當(dāng)X1是兩個單鍵氫時，且R1只有一個氧時，R1部分的式量至少為30原子質(zhì)量單位；當(dāng)X1是2個單鍵連結(jié)的氫及R1是2個氫，A1是烷基時，則A1至少有三個碳原子，結(jié)合的A1，R1和X1至少有一個碳原子，鹵素，或雜原子；當(dāng)X1是兩個單鍵鏈結(jié)的氫時，R1是氫，X2是氧，Rh是烷基時，則C4-6烷基，當(dāng)n是2時，Rh是C1-6鹵代烷基。
第三個方面的再一些實施方案包括化合物，其中X1是CH2、兩個單鍵H、CH(Rb)或C(Rb)(Rc)；Z1是O或S，Z2是NH或NRj；R1是C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、或鹵素；R1是任何天然α-氨基酸側(cè)鏈基、ORd、SRd或NRdRe；A1不能是氫；R1是β構(gòu)型；X4是α構(gòu)型或其組合。
第四個方面的實施方案包括一些化合物，其中Z1是O或S；Z2是NH或NRj；X1是O或S；R1是C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、或鹵素；R1是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe；R2是氫、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C6-12芳基、C3-8雜芳基、或鹵素；R2是氫、C3-6烷基、C3-6鹵代烷基、C4-6烯基、C4-6炔基、C6-12芳基、或C3-8雜芳基；A1不能是氫；R1在β構(gòu)型；X4是α構(gòu)型；或上述的組合。
第五個方面的實施方案為一些化合物，其中Z1是O或S。Z2是NH或NRj；R1是氫、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、或是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe；R1是氫、C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、C4-6炔基、鹵素、或任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd，SRd或NRdRe；R2是氫、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、C2-3炔基，C6-12芳基、C3-8雜芳基、或鹵素；R2是氫、C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、C4-6炔基、C6-12芳基、或C3-8雜芳基；Ra是C1-3烷基；A1不能是氫；X4是α構(gòu)型；或上述的組合。
第六個方面的實施方案為一些化合物，其中X1是O或S，X1是CH2、兩個單鍵H、CH(Rb)或C(Rb)(Rbc)，Z1是O或S；Z1是NH或NRa；R1是C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、鹵素、或任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；R1是ORd、SRd、或NRdRe；R1是C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、C4-6炔基、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe。R1和R2結(jié)合為一個二價部分；R1是β構(gòu)型；R2是β構(gòu)型；R2是C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、或鹵素；R2是C4-6烷基，C4-6鹵代烷基，C6-12芳基，C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、或C3-8雜環(huán)基；A1片段式量高于A2，A1片段式量低于A2；A1是(R)構(gòu)型；A1是(S)構(gòu)型；A1及A2中只有一個是氫；A1也能是任何任何天然α-氨基酸側(cè)鏈基；或其組合第七個方面的實施方案是化合物，其中X1是O或S；X1是CH2，兩個單鍵H、CH(Rb)或C(Rb)(Rbc)；Z2是O或S；Z2是NH或NRj；R1是C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、羥基、鹵素、或任何天然α氨基酸側(cè)鏈基；R1是ORdSRd、或NRdRe；R1是C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、C4-6炔基、任何任何天然α-氨基酸側(cè)鏈基；R1和R2一起為一個二價部分；R2是C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、疊氮基、C2-3炔基、羥基、或鹵素；R2是ORf，SRf、NRfRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)或-NRg(RSf)；R2是C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、疊氮基、C4-6炔基、ORf、SR1、NRfRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(RSf)；R1和R2在一起為一個二價部分；R1是α構(gòu)型；R1是β構(gòu)型；R2是α構(gòu)型，R2是β構(gòu)型；A1是α構(gòu)型；A2是β構(gòu)型；或其組合。
第八個方面的實施方案是一種化合物，其中A1、A2、R12和X1連結(jié)在一起，至少具一個碳原子和個雜原子；第八個方面的再一個實施方案為一些化合物，其中Z1是NH或NRa，X1芯O或S；X1是CH2、或兩個單鍵氫；R12是氫、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C2-3烯基、或C2-3炔基；R12是C4-6烷基、C4-6鹵代烷基、C4-6烯基、或C4-6炔基；A1、A2、R12和X1在一起，至少有一個碳原子和一個雜原子；其中A1片段式量大于A2片段式量(例如至少大于30或60)；其中A2片段式量大于A1片段式量(例如至少大于15或50)；或其組合第九個方面的實施方案為一些化合物，其中A1是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；其中A1片段式量至少為50(例如70，100或120)。
在此所述的個別化合物的例子，提供在表A、B及C。
表 A
表B
合成在此所揭示的合成方法是依結(jié)構(gòu)基團來編排的，技術(shù)人員能認識到權(quán)利要求1的化合物是與權(quán)利要求23的組合物中的化合物相關(guān)連的，權(quán)利要求5的化合物是與權(quán)利要求30的組合物中的化合物相關(guān)連的等等。權(quán)利要求1至5的化合物的合成法主要依據(jù)Uno等人所報導(dǎo)的其從(R)-谷氨酸合成(+)-乳胱氨酸的對映特異性合成結(jié)果[Uno，等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J AmChem.Soc)(1994)1162139]。要注意所有與權(quán)利要求1至5和24至32有關(guān)的流程圖中，當(dāng)用一直線連接A1(或任何相當(dāng)于A1的部分)至分子的其余部分時，必須假定有一虛線，用直線只是為了說明清楚。所有A1以“α”(即向下)連接至分子的其余部分，化合物A-1(流程

圖1)是當(dāng)作所有合成途徑的起始物質(zhì)，例如權(quán)利要求2所提議的合成途徑，因此，A1轉(zhuǎn)變至A2，如同上述工作使得通過標(biāo)準(zhǔn)烷基化化學(xué)而導(dǎo)入R1。在其中R1是羥基、鹵素、SRd、或-NRdRe，(其中Rd和Rc均獨立地是選自氫、C1-6烷基，C1-6鹵代烷基、C2-6烯基，C2-6炔基)的情況下，步驟b的親電子基分別是N-芳磺?；?3-苯氧雜氟丙啶[Davis，E.A，等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)(1984)，493241]、N-鹵代琥珀酰亞胺[Stotter，P.A，等人，“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem)(1973)382576]、RdS-SRd或元素硫[Zoretic，PA，等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)(1976)413587][Gassmm，P.G.等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org Chem).(1977)423236]，N-芳磺酰疊氮化物(然后將疊氮化物還原成為伯胺并加工成NRdRc)[Evans，D.A等人，“美國化學(xué)雜志”(J.Am.Chem)(1987)1096881]、如R1不穩(wěn)定或是易反應(yīng)的、或兩者皆是，則必須在此引入一個保護基，且在合成結(jié)束時除去。再以Uno報導(dǎo)的二步法(步驟b和c)[Uno，等人(994)]來完成A-2型化合物的制備。
下一個任務(wù)是導(dǎo)入A1，Uno[Uno等人，(1994)]證明在Lewis-acid介導(dǎo)的醛醇加成條件下，關(guān)于二環(huán)氨基酸衍生物A-2，A1的導(dǎo)入有非常高的表面選擇性。此碳-碳鍵的構(gòu)建使得權(quán)利要求2中詳述的A1官能基成為可能。于是，如Uno描述的，A2轉(zhuǎn)化成A3，接著把A-3用四氯化錫和一種醛(RfCHO，其中Rf是相當(dāng)于氫或A1的其余部分)在二乙醚中處理生成醛醇產(chǎn)物A-4(或A-5，假如Rf是氫)，接著以于此標(biāo)明為Po的基團適宜保護羥基。[Greene and Wuts，等人.“有機合成中的保護基”(Protective Groupsin Organic Synthesis)，二版，(1991)]。
a)LDA；親電劑，b)LDA；PhSeBr，c)O3，吡啶，d)TBSOTf，2，6-二甲基吡啶，e)RfCHO，SnCl4，Et2O，f)如P0O的保護羥基，g)相當(dāng)于R2的親電劑，h)酸性水，i)與R1相應(yīng)的親電劑通過立體選擇性親核加成到A-4或A-5的未飽和羰基系統(tǒng)來導(dǎo)入R2，然后用酸性水中止烯醇化，分別產(chǎn)生化合物A-6和A-7。這一方法與Suzuki的用于前列腺素合成的“三組分偶合”法[Suzuki等人(1988)]類似。在此該三組分為A-4(或A-5)，R2和質(zhì)子。根據(jù)一些事實，預(yù)計所示的A-6和A-7的非對映體是主要的幾種。
Uno合成法[Uno等人，(1994)]是使用OsO4-催化的雙羥基化與A-4類似的化合物(R1＝甲基，Rf＝異丙基)以導(dǎo)入對應(yīng)于R2的羥基。此反應(yīng)以完全的表面的選擇性進行，因此，一般說來具有適當(dāng)反應(yīng)活性(親核性或親電性)的基團同樣優(yōu)選趨向于A-4或A-5化合物的“β”面(從上)。
以酸性水中止烯醇化有立體選擇性。在Suzuki的三組分偶合法[Suzuki等人(1988)]中，親核劑和親電劑彼此以反式的方式被導(dǎo)入對方，R2和質(zhì)子彼此以反式導(dǎo)入對方。在想得到其中R1和R2彼此互為反式的化合物的情況下，設(shè)計了類似的方法。
上面描述的基本策略有一個例外，即R1和質(zhì)子導(dǎo)入羰基的α碳的順序是相反的。因此，A-1轉(zhuǎn)變至A-9是用那些與制備A-3一樣的方法，只是省略烷基化步驟(步驟a)。A-9加工成A-10和A-11使用了那些與產(chǎn)生A-4和A-5相同的方法。R2的加成作用，依然是從上面形成，但用相應(yīng)于R1的親電子基團的中止反應(yīng)的步驟使R1和R2有反式關(guān)系，就如A-12和A-13化合物中所示的那樣。
這些產(chǎn)生A-6，A-7，A-12和A-13化合物的方法的另一個優(yōu)點如下。如果中止步驟以對R2順式(與上述的相反)導(dǎo)入親電子基(質(zhì)子或R1)，則除開A-4和A-5分別產(chǎn)生A-12和A-13且A-10和A-11分別產(chǎn)生A-6和A-7外，仍然可采用立體特異性路線來得到想要的化合物。
其中A1是H的化合物是以不同方法(流程圖2)來制備的。例如，已證實當(dāng)A1是氫時，親電性[Hanessian.等人“合成通訊”(Synlett)(1991)10222]和親核性[Griffart-Brunet，等人“四面體通訊”(Tet.Lett.)(1991)35119]基團從下面以順式連接至A1的H上。因此，我們的以上策略的關(guān)鍵是當(dāng)A1不是氫時加成的立體選擇性方向改變。流程圖2
a)Br2，Et3N，b)相當(dāng)于R2的親核劑；H3O+，c)H2，Pd/C，d)DBU，CH2Cl2下述其中A1是H的化合物的快速制備利用了這一立體選擇性的方向改變。
以標(biāo)準(zhǔn)方法[Caine，等人，“有機化學(xué)雜志”(J.Org Chem)，(1985)502195]溴化A-2得到A-14，其在共軛加成-去除作用的步驟中被利用來得到A-15型化合物。因為A1是氫，烯烴的催化氫化應(yīng)以如化合物A-16中所顯示的所需要的順式構(gòu)型來安裝R1和R2，N，O-氨基的裂解在此情況之下也可發(fā)生，得到化合物A-17。由于在合成該去保護畢竟還是下一個步驟，這一事件的發(fā)生并不是不利的。通過化合物A-16和A-17的堿催化的差向異構(gòu)化作用分別可得到A-18和A-19。
以上方法使得可以制備權(quán)利要求2和25中所述的具任意和全部R1和R2的化合物，但其中加成環(huán)與內(nèi)酰胺環(huán)形成稠環(huán)的化合物(特別是其中R1和R2連在一起并產(chǎn)生構(gòu)成(3-8)環(huán)烷基，C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或C6-12芳基的二價部分的化合物)除外。他們的制備將在下文描述(流程圖3和4)。注意，雖然在流程圖3和4中只描述碳環(huán)體系，但通過選擇合適的反應(yīng)劑可以以這一方式制備脂環(huán)和雜環(huán)(芳香和非芳香兩種情況)類化合物。再則，一般用所述方法可達到的這些環(huán)上的所有取代類型均可以以下面建議的方法達到。為說明得到這些化合物的一般方法，列出了最簡單的碳環(huán)變體。流程圖3
a)過氧化作用，Simmons-Smith氮丙啶化作用，等，b)光環(huán)加成作用，烯酮加成作用，c)腈氧化物，甲亞胺內(nèi)鎓鹽，其他[3+2]環(huán)加成作用，等，d)Diels-Alder環(huán)加成作用等，e)[5+2]環(huán)加成作用，f)LG-(CH2)5-Nu，g)LG-(CH2)6-Nu，h)功能性官能團控制，i)DBU，CH2Cl2流程圖4
這些化合物的合成是依賴不同的環(huán)加成至α-β不飽和烯烴的化學(xué)[Carruthers等人“有機合成中的環(huán)加成”(Cycloaddition Reactions in OrganicSynthesis)(1990)和J.March，“現(xiàn)代有機化學(xué)”(Advanced OrganicChemistry)(1992)PP.826-877]。如流程圖3所示，[1+2]方法(如重氮插入作用，環(huán)丙烷化作用，過氧化作用及氮丙啶化作用)和化合物A-20(見用于制備這類化合物如A-10和A-11的流程圖1)，可得到A-21型化合物。A-22型的化合物以多種[2+2]環(huán)加成方法來制備(如光環(huán)加成和烯酮加成作用)。1，3-二極環(huán)加成化學(xué)([3+2]環(huán)加成試劑，像腈氧化物和甲亞胺內(nèi)鎓鹽)，可制備多種A-23型的化合物。A-24型化合物的制備，也許是最具變通性且最廣泛的環(huán)加成化學(xué)，因為其依賴于所有有機化學(xué)使用及研究得最多的反應(yīng)之一，即Diels-Alder反應(yīng)。依這方法制備的A-24類的化合物的種類太多而不再作詳盡說明；[Carruthers(1990)]，然而，值得注意的是，橋化合物(A-25型)是以此方法制備的。得到A-26的化合物的[5+2]環(huán)加成的不太常見，但已報導(dǎo)一些令人感興趣的實例。[Wender等人，“有機化學(xué)雜志”(J.Org，Chem，)(1991)，566267和Wender，等人，“四面體通訊”(Tet.Lett.(1992)326115]。
盡管所有這些方法將R1和R2彼此以順式導(dǎo)入，在A-24和A-26的情況下，堿-催化的差向異構(gòu)化作用得到這些化合物的反式稠合的種類，分別為A-28和A-29化合物。(A-21，A-22，A-23和A-25不能以此方式進行差向異構(gòu)化，因為這些反式稠合環(huán)比順式稠合體系遭受到更多的環(huán)張力)。
環(huán)庚基(A-26)和環(huán)辛基(A-27)化合物是以稍有不同的方法來制備的，該方法類似于流程圖1的方法?；旧鲜牵瑢⒁粋€親核試劑(縮寫為Nu)加到有一個離去基(縮寫為LG)的A-20上，該離去基連接到即將到來的親核試劑的另一端，并被必要數(shù)目的原子隔開。(A-26的情況下是5，A-27的情況下是6)。因此，在親核試劑的加成之后，所得的烯醇鹽取代離去基，以形成環(huán)?；蛘撸艘贿^程逐步進行以減少不需要的親核試劑和親電試劑的分子間的副反應(yīng)。在化學(xué)文獻中對從α-β不飽和羰基化合物制備環(huán)庚基和環(huán)辛基化合物已有評述。[Petasis N.A.等人“四面體”(Tetrahedron)(1992)48；5757]。
芳基和雜芳基化合物(如化合物A-30和化合物A-31，流程圖4)是以[4+2]環(huán)加成化學(xué)然后用二氯二氰基醌(DDQ)氧化成的環(huán)烯烴或雜環(huán)烯烴來制備的[Pizey.N.“合成反應(yīng)劑”(Synth.Reagents)(1977)3193-225]，在化合物A-31的情況下，所用的其他類型的二烯烴是羥基鄰亞二甲苯，由羥苯并環(huán)丁烯的開環(huán)反應(yīng)形成。[Arnold，B.J.等人，“化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Chem，Soc，)(1974)，409-415]。
因此，R1和R2所有的變體都已制備，現(xiàn)在轉(zhuǎn)向加工這類化合物以包括A1的所有變異(流程圖5)。
依據(jù)[Uno等人(1994)]的結(jié)果，如流程圖1所顯示，Lewis-酸催化的醛醇加成反應(yīng)將A-3加至RfCHO，接著通過進一步加工，產(chǎn)生A-33型化合物(流程圖5)，其具有所示構(gòu)型的立體中心。流程圖5
a)Dess-Martin高碘烷，b)NaBH4，c)RnNH2，NaCNBH3，d)MsCl，Et3N，e)親電試劑，f)LiEt3BH，g)Zn，HCl流程圖6
a)LiOH，THF，H2O，b)Tf2O，2，6-二-叔丁基吡啶或I2，PPh3，咪唑，b)親電試劑，d)金屬-鹵交換；親核試劑。流程圖7
a)OSO4，NMO，水，丙酮，b)TCDl，c)Bu3SnH，AlBN，d)分離的非對映異構(gòu)體，e)DEAD，Ph3P，醋酸，f)醋酸酯轉(zhuǎn)變成離去基，g)相當(dāng)于R2的親核試劑。該構(gòu)型包含R1的兩種構(gòu)型。[標(biāo)明直線鍵(即，既不為粗線也不為虛線)以表示此處的兩個非對映異構(gòu)體]。在此我們將注意力集中在A1中所包含的仲羥基的立體化學(xué)和相關(guān)。雖然醛醇加成反應(yīng)的條件改變(流程圖1)會產(chǎn)生此處的其他非對映異構(gòu)體，改變此中心的另一方法首先在標(biāo)準(zhǔn)條件下氧化成酮(如Swern，Dess-Martm高碘烷等)，然后再以適當(dāng)?shù)倪€原劑(如氫硼化鈉等)還原，其性質(zhì)是通過篩選一些還原劑而決定的。兩步法產(chǎn)生A-35化合物。同樣地使用案類或羥胺類(如流程圖5中以RnNH2表示的)和氰基氫硼化鈉(NaCNBH3)將A-34酮進行還原氨基化，形成A-36類化合物。這一步驟中立體化學(xué)誘導(dǎo)的方向可以通過用不同的還原劑來改變?；蛘撸ㄟ^先制備A-33或A-35化合物的甲基磺酸酯(“mesylate”)，然后將甲基磺酰酯用親核試劑(如RNH2、硫RS-、RO-、鹵素、羥胺、Grignard試劑等)取代，得到A1的多種衍生物，其在相應(yīng)于在A-33化合物的仲，羥基的碳上有完全的立體化學(xué)對照物。甲基磺酸酯的還原化(用三乙基硼烷鋰(LiEt3BH)或鹵化物的還原化(使用如在鹽酸中的鋅)可產(chǎn)生A-38型的化合物。
產(chǎn)生A1的不同衍生物的另一種方法描述于流程圖6。A-39型的化合物，其根據(jù)流程圖1來制備，被轉(zhuǎn)換成A-40型化合物，其中Xa是鹵化物或三氟甲基磺酸酯(“triflate”)，例如，通過使用標(biāo)準(zhǔn)功能基操作。使用親核試劑取代離去基提供了另一制備A-38化合物的方法。使碘化的A-40化合物處于金屬-鹵素交換的條件(如活化的金屬鎂或叔-丁基鋰)下產(chǎn)生親核試劑，向其可加入各種親核試劑，提供另一合成A-38型化合物的途徑。
另一種用于制備33型化合物亞組的方法也是值得注意的(流程圖7)，該方法使得可以從所有上面的討論的R2，及除羥基，鹵素，-SRd-NRdRe之外的R1來制備A3化合物。如流程圖1所示的，其中R1是以C-C鍵連結(jié)至內(nèi)酰胺環(huán)的A-4、A-5、A-10和A-11的化合物(在流程圖7中表示為A-41化合物)，能選行二羥基化以形成A-42型的化合物，其中羥基全部加在上面。[Uno，等人，(1994)]，(此立體選擇性的原因已在上面討論)，依[Uno，等人，(1994)]的步驟，叔羥基可以被選擇地去除，產(chǎn)生一個可用各種層析方法分離的A43型化合物的R1非對映異構(gòu)體的混合物。仲羥基的Mitsunobu轉(zhuǎn)化，然后相當(dāng)于R2的任何親核試劑(如氫氧化物、醇(酚)鹽、硫化物、Grignard試劑、氨類、鹵化物等)來取代適宜衍生的離去基而生成A-44型化合物，此為A-33型化合物的亞組化合物?？杀患庸こ善渖鲜龅南鄳?yīng)的A′衍生物。
因此，在提供R1、R2和權(quán)利要求2和25中的A1的所有演變的不同路線后，現(xiàn)在我們將注意力轉(zhuǎn)移至X1、L1和X2的配置(流程圖8)。
有一般結(jié)構(gòu)A-45的化合物可以以兩步法轉(zhuǎn)化成A-46，該兩步法首先催化氫化或弱酸水解(Corey，E.J.等人，“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc)，(1922a)，11410677，然后，在標(biāo)準(zhǔn)條件下以其叔丁基二甲硅烷基醚來保護伯羥基[Corey，EJ.和Venkateswarlu，A“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem Soc.)(1972)，946190]。酰胺的氮烷基化生成A-47化合物。[Challis，N.“酰胺化學(xué)”(The Chemistry of Amides)，(1970)734-754]。在其中希望Rb是氫的情況下，酰胺可以適宜的保護基封閉，在合成結(jié)束時去除)。[Greene，T.W，等人，“有機合成中的保護基”(Protective Groups in OrganicSynthesis)(1991)]。
烯胺A-48化合物可以在Tebbe烯化條件下由A-47來制備[Pine，S.H.等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)(1985)501212]。硫代酰胺A-49可通過將A-47用硫化雙(三環(huán)己基錫)，和三氯化硼處理來制備[Steliou，K.等人，“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am Chem，Soc.)(1982)1043104]。取代的烯胺A-50可經(jīng)將適當(dāng)?shù)腉rignand試劑或烷基鋰加到A-47或A-49上，接著再以酸性水解并分離E和Z烯烴異構(gòu)體來制備[Aguerro，A.，等人“J.Chem，Soc.Chem Commun.(1986)531和Schrock，R.R.，“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am Chem Soc.)(1976)985399和Harsen，C.“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)(1973)383074]。51型吡咯烷可以通過用氫化鋰鋁還原A-47而制得，[March，“現(xiàn)代有機化學(xué)雜志”(J.Advaced OrganicChemistry)(1992)826-877及Gaylord，J.用復(fù)雜氫化金屬還原(ReductionWith Complex Metal Hydrides)(1956)544-636]或以不同方法用雷氏鎳將A-49還原而制成(Belen′kii W.，“有機硫化物化學(xué)”(Chemistry of OrganosulfurCompounds)91990)193-228]。這些方法結(jié)合在一起構(gòu)成有A-52的一般結(jié)構(gòu)的化合物的合成方法，例如，在Uno的過程之后，其轉(zhuǎn)變成A-53[Uno，H.等人，](流程圖9)。在Corey及Reichand所用的條件下[Corey E.J.等人(1992a)]，A-53化合物通過氧化成酸并和L1偶連(均以標(biāo)準(zhǔn)法制得)轉(zhuǎn)化成A-54a類似物。使用Lawesson試劑[Cava，M.P.等人“四面體通訊”(Tetrahedron)(1985)415061]對這些化合物行硫化作用，可得硫羰類似物A-55a。A-54b化合物是通過與L2相應(yīng)的親核試劑(如三氟化碳)[Francese，C，等人，J.Chem，Soc.Chem.Commun，(1987)642]，加成到醛A-54b上然后用Dess-Martin過碘化劑氧化醇來制備。[Linderman，R.J.等人“四面體通訊”(Tet，Lett)，(1987)284259]。用Lawesson試劑硫化這些化合物可得硫羰類似物A-55b(Cava，M.P.等人)。A-55C型的過氧化物可從A-53或A54b通過Johnson的方法制備(Johnson，C.R.，Acc.Chem.Res.(1973)6341)。因此完成了此部分所有類似物的合成。流程圖8
a)H2，Pd/C，H+或HS(CH2)3SH，HCl，CF3CH2OH，b)TBS-Cl，咪唑，DMF，c)NaH，相當(dāng)于Ra的親電劑，DMF，e)硫化雙(三環(huán)己基錫)，BCl3，f)RcRb(H)(MgBr)；H+，g)LiAlH4，Et2O，h)雷氏鎳流程圖9
a)TBAF，THF，HF，CH3CN，HCl，MeOH，b)(COCl)2，DMSO，Et3N，CH2Cl2，c)NaClO2，pH7，THF，d)L1-H，BOP-Cl，e)Lawesson′s試劑，f)相當(dāng)于L2的親核劑，g)Dess-Matin高碘烷，h)Me2(S+)(O)CH2-權(quán)利要求4和31所涉及的化合物制備的方法是主要依賴于Seebach和Corey的方法。因此，如在流程圖10中所示，A-58型的過氧化物是依據(jù)Corey等人的方法[Corey，E.J.等人(1992b)]從61到62化合物制備。在步驟a中選用適當(dāng)?shù)挠糜谌┐挤磻?yīng)的醛類來配置R2。Corey[CoreyE.J.等人(1992b)]指出A-58過氧化物被立體專一地打開生成A-59。因此，通過用相當(dāng)于Z1的親核試劑處理A-58來配置Z1。(Pz指用于Z1的保護基)。Z2的配置是通過將A-59的羥基轉(zhuǎn)化成離去基，如，例如甲苯磺酸鹽，并用相當(dāng)于Z2的親核試劑取代離開基來完成。(Pz’指用于Z2的保護基)流程圖10
a)Et3N，b)RfCHO，c)K2CO3，d)MeOH，H2O，d)相當(dāng)于Z1的親核試劑，如果有必要，保護Z1，e)TsCl，吡啶，f)相當(dāng)于Z2的親核試劑，如果有必要，保護Z2，g)如果有必要，去保護Pz和Pz1，h)MeSO3H，甲苯，i)CH2N2，j)(CH3)3CCHO，酸，k)LiHMDS，相當(dāng)于A1的親電試劑，l)LiAlH4，m)TBS-Cl3，咪唑，DMF，n)酸性水，o)HCHO，酸，p)CDlSeebach的結(jié)果[Seebach，D.等人，Helv，“化學(xué)學(xué)報”(Chim，Acta.)(1987)701194]被用于合成的另一部分。A60轉(zhuǎn)變成A-61使得可以烯醇化并用相當(dāng)于A1的親電試劑進行烷基化作用產(chǎn)生A-62。Seebach證實該烷基化主要產(chǎn)生所示的非對映體。
酯類的還原和保護產(chǎn)生作為TBS醚的伯醇之后，去除叔丁基亞甲基保護基使得可以轉(zhuǎn)變成A-63型(例如，通過用甲醛和一種酸催化劑處理)或A-64型(例如通過用CDI處理)。在完成權(quán)利要求4和31的化合物的合成中，化合物是關(guān)鍵的中間產(chǎn)物(流程圖11)。A-65型的化合物是從A-64型化合物在Tebbe烯化條件下[Pine，S.H.等人(1985)]制備的。A-66型化合物是從A-64以硫化雙(三環(huán)己基錫)和三氯化硼處理而制備的[Steliou，K.等人(1982)]。A-67型的化合物是以將適當(dāng)?shù)腉rigard試劑或烷基鋰加至A-64或A-66，隨后再酸水解及分離E和Z烯烴異構(gòu)體而制得的。[Aguerro，A.等人(1986)和Schroch R.R.(1976)，和Hansen，C.等人(1973)]流程圖10中制備的A-63型化合物也是通過用氫化鋰鋁還原A-64來制備的[March，J.(1992)和Gaylord，J(1956)，或者通過用雷氏鎳還原A-66而生成[Belen′kiiW.，(1990)。A-63、A-64、A-65、A-66和A-67一起屬于A-68總類，其是轉(zhuǎn)化的乳胱氨酸類，是通過下列方法得到的TBS醚的氟化物去保護作用，通過醛醇類似物(例如，所示的二步法中的)把得到的伯醇氧化成羧酸，通過用Corey and Reichand的方法與L1偶連[Corey E.J.等人(1992a)]并(如需要)去除Z1和Z2的保護基(如果有必要)，而轉(zhuǎn)化成乳胱氨酸的類似物A-69化合物。乳半胱氨的類似物A-71是通過把A-69用Lawesson′s試劑處理而制得的[Cava，M.P.等人(1985)]，A-70類似物同樣由A-68通過3-丁基-二甲硅烷基醚的氟化物去保護作用，得到的伯醇氧化成醛，親核試劑(如三氟化碳)的加成[Francese，C.等人1987，見上面]，Dess-Martin高碘烷的氧化作用，用Lawesson′s試劑的硫化作用(如需要)[Cava，M.P.，91985]，及Z2和Z2的去保護作用(如需要)而制成。A-72型的過氧化物也從A-68以3-丁基-二甲硅烷醚的氟化物去保護作用，得到的伯醇氧化成醛，與L2相應(yīng)的親核試劑的加成，Dess-Martin高碘烷氧化，dimethyloxosulfonium methylide的加成，和Z1和Z2的去保護作用(如需要)而制得。此以上面方法制備權(quán)利要求4及31所有化合物。流程圖11
a)Tebbe烯醇化，b)硫化雙(三環(huán)己基錫)，三氯化硼，c)RcRbC(H)(MgBr)；H+，d)LiAlH4，Et2O，e)雷氏鎳，f)TBAF，THF，g)Swern氧化作用，h)NaClO2，Na2HPO4，i(L1-H，BOP-Cl，j)如需要去保護，k)Lawessons試劑，l)相當(dāng)于L2的親核試劑，m)Dess-Matin高碘烷，n)如需要，步驟k，o)Me2(S+)(O)CH2-權(quán)利要求1項所涉及的化合物主要依據(jù)Evans和Corey的方法。因此，如流程圖12所顯示，A-73型手性噁唑烷酮的烯醇化，再以芐氧基溴甲烷進行烷基化，然后配置R1。[Evans，D.A.等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc.)(1982)1041737](只有一種構(gòu)型的R1在此反應(yīng)中獲得。其他構(gòu)型的R1是使用手性噁唑烷酮的相反的對映體。A-74轉(zhuǎn)變成A-75型的醛，手性的、硼介導(dǎo)的和叔-丁基溴乙酸酯(用A-76)[Corey，E.J.等人，(199b)]的醛醇縮合產(chǎn)生仲醇，其以3-丁基-二甲基甲硅烷基(TBS)醚而被保護而產(chǎn)生A-77型的化合物。用相當(dāng)于Z1的親核試劑[Corey，E.J.等人(1992)]置換溴化物產(chǎn)生A-78化合物，A-78能轉(zhuǎn)化成A-79化合物。如上針對權(quán)利要求4所討論的所述化合物可以被烯醇化并用與A1相應(yīng)的親電子試劑立體特異性地烷基化而產(chǎn)生A-80。標(biāo)準(zhǔn)官能基的控制產(chǎn)生A-81型的甲苯磺酸鹽。以與R2相應(yīng)的親核試劑置換甲苯磺酸鹽[Hanessian，S.等人，J.Org.Chem.(1989)545831]得到A-82型化合物。其伯醇經(jīng)由如催化氫解并在伯醇氧化成羧酸以后環(huán)化成A-83化合物。
如流程圖13所表示，A-84型的化合物，其中R1是(R)或(S)構(gòu)型，被轉(zhuǎn)變成多種X1變體。A-85型的化合物由A-84型在Tebbe烯化條件下制備[Pine，等人(1985)]。A-86型的化合物是將A-84型用硫化雙(三環(huán)己基錫)和三氯化硼處理而制成的[Stelious，K.等人(1982)]。A-87型的化合物是以向A-84或A-86加入適當(dāng)?shù)腉rignard試劑或烷基鋰，然后以酸性水解，并分離E和Z烯異構(gòu)體而制成的[Aguerro A，等人，(1986)，Schrock.R.R.，(1976)及Hansen C，等人(1973)]。A-88型的化合物是將A-84用氫化鋰鋁還原制成的[March，J(1992)及Gaylord，J.(1956)]或用雷氏鎳還原A-86而生成[Belen′kii W.，(1990)]。當(dāng)在A-88中Z1是硫時，例如用KHSO5可實施氧化成環(huán)狀砜變體的氧化作用。[Tost，B.M.，等人，“四面體通訊”(Tet，Lett.)(1981)221287]。流程圖12
a)LDA，BnOCH2Br，b)LiAlH4，c)Swem氧化作用，d)Et3N，甲苯，e)A-75，f)TBS-Cl，咪唑，DMF，g)相當(dāng)于Z1的親核試劑，h)MeSO3H，i)CH2N2，j)TBAF，THF，k)(CH3)3CCHO，酸催化劑，1)LiHMDS，相當(dāng)于A1的親電試劑，m)LiAlH4，n)TBS-Cl，咪唑，DMF，o)去保護，p)TsCl，吡啶，q)與R2相應(yīng)的親核試劑，r)H2，Pd/C，s)氧化物，t)如有必要，Z1去保護，u)環(huán)化(例如，以二環(huán)己基碳化亞胺為例)。流程圖13a
a)Tebbe烯醇化，b)硫化雙(三環(huán)己基錫)，BCl3，c)RbRcC(H)(MgBr)；H+，d)LiAIH4，ET2O，e)雷氏鎳，f)KHSO5，g)TBAF，THF，h)Swem氧化作用，i)NaClO2，NaH2PO4，j)L1-H，BOP-Cl，k)Lawesson′s試劑。
a)TBAF，THF或HF，CH3CN或1％HCl，MeOH，b)(COCl)2，DMSO，Et3N，CH2Cl2，c)NaClO2，pH7，THF，d)L1-H，BOP-Cl，e)Lawesson′s試劑，f)NaClO2，相當(dāng)于L2的親核劑，G)Dess-Matin高碘烷 h)Me2(S+)(O)CH2-化合物A-84、A-85、A-86、A-87、A-88及A-89一起屬于A-90型總類，其被轉(zhuǎn)變成A-91類似物，如依據(jù)Uno等人的方法[Uno，H等人(1994)](流程圖13b)。A-91化合物被轉(zhuǎn)變成A-92類似物是經(jīng)由氧化成酸，在Corey and Reichard使用的條件下，與L1偶連(均以標(biāo)準(zhǔn)方法制備)[Corey E.J.等人，(1992a)]。以Lawesson′s試劑硫化，這些化合物產(chǎn)生A-93的硫羰類似物。A-94化合物可經(jīng)由相應(yīng)于L2的親核試劑(如三氟化碳)[Francese，C.等人，(1987)]加成至A-91醛上，再以Dess-Martin高碘烷氧化醇而制得。用Lawesson試劑對這些化合物行硫化，可得A-95硫羰類似物。A-96型的過氧化物由A-91或A-94以Johnson的方法來制得。由此，完成在此部分詳述的所有類似物的合成。注意如上面與權(quán)利要求6有相關(guān)的所有流程圖中，當(dāng)用直線將A2(或任何和A2相當(dāng)?shù)牟糠?連結(jié)至分子的其余部分時，要假定是虛線，用直線只為了說明清楚。所有A2在α面(底面)上連至分子的其余部分。
列在權(quán)利要求17中的所有化合物的合成都依賴于流程圖9的關(guān)鍵性中間代謝物。如流程圖14所示，B-1型化合物和A-53化合物亞型是相類似的，其各種制備描述于流程圖1、2及5至8，并描述于附上的文本中。
為了制備B-2類似物，使用了Corey等人的方法[Corey E.J.等人，“四面體通訊”(Tet，Lett)，(1993)346977]。例如以Lawesson試劑對B-2進行硫化得到B-3類似物[Cava，M.P.等人(1985)]。 流程圖15 a)OsO4，NMO，水，丙酮，b)TCDl，c)BU3SnH，AlBN，d)分離非對映體，e)DEAD，PPh3，醋酸，f)醋酸酯轉(zhuǎn)變成離去基，g)相當(dāng)于Z3的親核試劑，h)見流程圖8和9B-1型化合物的制備總結(jié)于流程圖15。用與流程圖1、2、5、6和8中所用的相同方法把如流程圖1中所使用的相同的起始物質(zhì)(A-1)加工成所有B-2化合物。然后用兩種可能的一般方法將這些中間物轉(zhuǎn)變成B-2。第一種和流程圖1、2、5、6、8和9詳述的方法相類似，其中在有關(guān)反應(yīng)中Z5(適當(dāng)活化或保護的)充當(dāng)親核試劑。
基于流程圖7中如示的另一方法，在流程圖15中也有說明。B-4的二羥化得到B-5，其接著如前進行脫氧得B-6。非對映體的分離，仲羥基的Mitsunobu轉(zhuǎn)變，及置換從Mitsunobu產(chǎn)物衍生的離去基，得到B-7型化合物，其再如流程圖8和9所述被加工成B-1型化合物。
列舉在權(quán)利要求17的所有合成物的所建議的合成法，都依賴從流程圖12而來的中間物A-81。如流程圖16所示，B-11型的化合物和A-81化合物的亞型是相類似的，其不同的制配法在流程圖12圖中說明，詳述在附上的文本中。B-11型化合物轉(zhuǎn)變成B-12，是如流程圖12進行的。B-13型化合物由B-12型依據(jù)流程圖13a和13b的有關(guān)步驟來制得。
為了制得B-14類似物，使用Corey的方法[Corey，E.J.等人(1993)]，例如用Lawesson′s試劑[Cava，M.P.等人(1985)]對B-14進行硫化，產(chǎn)生B-15類似物。流程圖16
a)見流程圖12，b)見流程圖13b，c)BOP-Cl，d)Lawesson′s試劑權(quán)利要求17所涉及的化合物的制備依賴從流程圖7而來的關(guān)鍵性中間物，如流程圖17所示，C-1化合物和A-41相類似，其制備在流程圖7中說明并在附上的文本描述。根據(jù)Fuchs的工作[Hutchinson D.K.等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc.)(1987)]，C-1化合物順序以雙(苯基氧甲基)銅酸鋰和酸性水處理，而得C-2型化合物?？傻玫絻煞N構(gòu)型的R7。詳述參見流程圖1和2。如流程圖8，弱酸水解，伯羥基的保護，及氮的烷基化或保護，得到C-2化合物。
通過用例如催化氫解反應(yīng)及隨后用與Z7相應(yīng)的親核試劑取代甲苯磺酸鹽的衍生物對芐基行去保護化，得到C-3化合物，其中如需要，Z7是被保護的。在與流程圖8和9的相同的一組反應(yīng)加工羧酸C-4使得可制備所有xa變體，Z7的去保護作用(如需要)，隨著用例二環(huán)己基羰化亞a胺環(huán)化產(chǎn)生雙環(huán)C-5結(jié)構(gòu)，若有必要，其用Lawesson′s試劑[Cava，M.P.等人(1985)]行硫化產(chǎn)生C-6。
權(quán)利要求7的右手結(jié)構(gòu)所涉及的化合物的裝備是依賴于流程圖9的關(guān)鍵中間物。如流程圖18所示，C-11化合物和以Z7限定的A-25型化合物亞型是相類似的，其制備于流程圖1-8中說明并在附上的文本中進行描述。例如通過在Swem氧化條件下，用例如于四氫呋喃中TBAF進行伯羥基去保護，產(chǎn)生C-12醛。此醛用例如由三苯基甲氧基甲基氯化鏻衍生的膦內(nèi)鎓鹽[Jamion，T.F.，等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am，Chem，Soc)(1994)1165505]生成C-13型的烯醇醚，其然后用酸水解和用例如NaClO2緩沖液氧化得到的醛，轉(zhuǎn)化為羧酸C-14[Corey，E.J.等人(1992a)]。
a)(BnOCH2)2CuLi，酸性水，b)其中A1是H的情況也參見流程圖1，c)HCl，HS(CH2)3SH，CF3，CH2OH，d)見流程圖8，e)H2，PdC/，f)TsCl，吡啶，g)相當(dāng)于Z2的親核試劑；h)Z2去保護，如需要，i)見流程圖8和9，j)Z2去保護(如需要)，k)DCC，l)Lawesson′s試劑。流程圖18
a)TBAF，THF，b)Swern氧化，c)Ph3P＝C(H(OCH3)，d)HCl，H2O，THF，e)NaClO2，NaH2PO4，f)去除Pz(如需要)，g)DCC，h)Lawesson′s試劑Z7的去保護(如需要)，接著用例如二環(huán)己基羰化亞胺進行環(huán)化[KlausnerY.S等人“合成”(Synthesis)(1972)453]產(chǎn)生雙環(huán)的C-15結(jié)構(gòu)，如果需要，其用Lawesson′s試劑[Cava，M.P.(1985)]進行硫化。
權(quán)利要求8和39所涉及的化合物的制備主要依賴于Evans的硼烯醇鹽介導(dǎo)的不對稱性醛醇方法[Euans，D.A.等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc.)(1981)1032127]和對分子內(nèi)基團環(huán)化的研究結(jié)果[Curran，D.P.“綜合有機合成”(Comprehensive Organic Synthesis)，(1991)4779-831]。
標(biāo)準(zhǔn)方法制備的C-21酯(流程圖19)被去質(zhì)子化，然后用苯甲氧基溴甲烷進行烷基化，并用DIBAL-H還原得到醛C-22的外消旋混合物。
將C-22加至由手性噁唑烷酮亞胺C-23衍生的硼烯醇鹽[Evans，D.A.等人(1981)]C-24的A3非對映異構(gòu)體的混合物。在此反應(yīng)中建立了構(gòu)型相同的另兩個新的立體中心，其不受A3的構(gòu)型影響。流程圖19
a)LDA，BnOCH2Br，b)DlBAL-H，c)Bu2BOTf，Et3N，d)C-22，e)TsCl，吡啶，f)相當(dāng)于Z1的親核試劑，g)H2，Pd/C，h)Swem試劑，i)NaClO2，NaH2PO4，j)CH2N2，k)LiAlH4，Swern氧化劑，l)Base，Gilbert試劑m)LDA，TMS-CI，n)LiOH，THF，水，o)BOp-Cl，p)(Bu3Sn)2，hv，q)(Ph3P)4Pd，R2-M，r)Lawesson′s試劑。
在6步法中(例如，仲羥基的甲苯磺酰化，以與Z7相應(yīng)的親核試劑置換，苯甲基的催化氫解，醇氧化成羧酸及酯化轉(zhuǎn)化成C-25醛使得可以制備分子內(nèi)基團環(huán)加成的底物。因此，用Gilbert試劑[Gilbert，J.C.等人，“有機化學(xué)雜志”(J Org.Chem.)(1982)471837]處理此醛，再用碘置換可烯醇化的氫產(chǎn)生乙炔C-26，在Z7的去保護(如需要)后，用例如BOP-Cl將其環(huán)化得C-27化合物。
將C-27暴露在原子轉(zhuǎn)移，分子內(nèi)基團的環(huán)化的條件下[Curran，D.P.等人“四面體通訊”(Tet.Lett.)(1987)282477和Curran，D.P.等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)(1989)543140]得到C-28化合物。這一反應(yīng)需進一步說明。A1和碘原子的立體化學(xué)并不重要，因為從碘產(chǎn)生的自由基在反應(yīng)條件下能夠互變。此外，僅有一種基的非對映體能夠環(huán)化，產(chǎn)生所述的順式-4，5環(huán)的體系，因為反式-4，5體系受到較大的環(huán)張力。
由于另外兩個原因，該環(huán)化作用是有利的。首先，其為5-內(nèi)-插型(5-endo-dig type)，因此依據(jù)Baldwin′s環(huán)化法則(Baldwin′s J.E.，J.Chem.soc.Chem.Commun.)(1976)734)，其是有利的。其二，使用的原子轉(zhuǎn)移條件是理想的，因為生成的乙烯非常易反應(yīng)且可被碘自由基迅速地停止[Curran，D.P.等人“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am，Chem.Soc.)(1986)1082489]。
將C-28加工成C-29是用，如標(biāo)準(zhǔn)的Stille[Stille，J.K.Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.(1986)24504]或Heck[Heck.R.F.，“綜合有機合成”(Compehensive，Organic Synthesis)(1991)4833-863]型偶連條件來完成，其使用合適的R9的金屬衍生物(例如M為三丁基甲錫烷基以Lawesson′試劑進行硫化[Cava，M.P.，等人，(1985)]得C-30化合物，由此完成權(quán)利要求8和39中的所有化合物的制備。
a)LiHMDS，PhN(Tf)2，b)(Ph3P)4Pd，R2-M，c)Lawesson′s試劑。
權(quán)利要求9和40所涉及的化合物的制備，主要依賴B-2的中間物，其制備已描述于流程圖13a、13b和14，并在附上的文本中進行討論。如流程圖20所示，C-31是以合適的堿行去質(zhì)子化，所成的烯醇鹽再用，例如三氟甲基磺酸酯來源的PhN(Tf)2[McMnrry，J.E.等人“四面體通訊”(Tet，Lett)(1983)24979]處理而得。乙烯基三氟甲基磺酸酯C-32以例如催化劑量的聯(lián)三苯磷鈀(Ph3P)4Pd)和合適的R9的金屬衍生物(M為例如三丁基甲錫烷基)(stille J.K.(1986)和Hech，R.F.(1991)]處理產(chǎn)生C-33類似物，其用Lawesson′s試劑[Cava，M.P.等人(1985)]處理產(chǎn)生C-34，由此完成這部分的所有化合物的制備。
權(quán)利要求10和41所涉及的化合物的制備主要依賴于A-38中間物，其制備在流程圖1，5和6中說明，并在附上的文本中討論。由此C-41型化合物(流程圖21)可用(R)或(S)構(gòu)型的Z7通過依照流程圖1至6中說明的方法來制備，其在所附文本中加以討論。C-41的弱酸水解[Corey，E.J.等人(1992a)]，緊接著伯羥基的保護[Corey E.J.等人(1972)]使得可以經(jīng)由標(biāo)準(zhǔn)的烷基化方法[Challis，N.(1970)]配置A4得到C-42。這些中間物加工成C-43是如流程圖8中對類似化合物所述的來進行。伯羥基的去保護使得可以氧化成羧酸C-44，其用例如雙(2-羰-3-唑啶膦)-氯(BOP-Cl)環(huán)化得到C-45類似物，該類似物用Lawesson′s試劑處理[Cava，M.P等人(1985)]得到C-46化合物，由此完成權(quán)利要求10和41中所有化合物的制備。流程圖21
a)HCl，HS(CH2)3SH′3，CF3CH2OH，b)TBS-Cl，吡啶，DMF，c)堿，相當(dāng)于A2的親電試劑，d)見流程圖8，e)TBAF，THF，f)Swem氧化，g)NaClO2，NaCH2PO4，h)BOP-Cl，i)Lawesson′s試劑。
權(quán)利要求11和42所涉及的化合物的制備是依據(jù)流程圖1，3，4，5，8和9所述的方法，并在所附文本中進行描述。因此，流程圖22所示，和A-2相似的C-51被加工成C-52化合物，其是按照與流程圖1中所用的相同方法通過使用含A5的醛和被護的(R)或(S)構(gòu)型的Z7來進行的。仲羥基的保護，得到C-52化合物[Corey E.J.等人(1972)]。其以與R9相應(yīng)的親核試劑處理并接著用酸性水行淬火而得C-53。決定親核加成及立體選擇性和液體淬火的原因已在流程圖的所附文本中討論。
仲羥基的去保護和隨后的轉(zhuǎn)化成甲苯磺酸鹽使得可以用與A3相應(yīng)的親核試劑取代甲苯磺酰鹽來導(dǎo)入A3，產(chǎn)生C-54型化合物。[HanessianS.(1980)]。以流程圖8所示及所附文本所述的及原文方法將這些化合物加工成C-55。伯羥基的去保護使得可以在Z7去保護(如需要)后氧化成羧酸C-50，其用例如二環(huán)己基碳化亞胺[Klausner，Y.S.等人(1972)]進行環(huán)化，得到C-57的類似物。用Lawesson′s試劑[Cava M.P(1985)]進行硫化得到C-58，由此完成權(quán)利要求11和24中的所有化合物的制備。
權(quán)利要求13和43所涉及的化合物的制備主要依據(jù)Lubell等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)1990 553511的結(jié)果。因此，如流程圖23所示，L-絲氨酸(C-61)以熟知的方法轉(zhuǎn)變成C-62酮(PhFl是9-苯基-9芴基的縮寫)。C-62的標(biāo)準(zhǔn)Wadsworth-Emmons烯化作用產(chǎn)生C-63或C-64的化合物，或其混合物。此混合產(chǎn)物的組成并不重要，因為兩種烯類異構(gòu)體在下一反應(yīng)中將生成相同的非對映體。流程圖22
a)TBS-OTf，2，6-二甲基吡啶，b)[(A2)(Z2-Pz)]CHCHO，SnCl4，Et2O，c)TBS-Cl，咪唑，DMF，d)相當(dāng)于R2的親核試劑，酸性水e)TBAF，THF，f)TsCl，吡啶，g)相當(dāng)于A1的親核試劑，h)見流程圖8，i)TBAF，k)NaClO2，NacH2PO4，l)Z2去保護(如需要)，m)DCC，n)Lawesson′s試劑。
a-c)見Lubel等人，d)A2MgBr，THF，酸性水，e)(MeO)2PCH2CO2Me，NaH，f)(A1)2CuLi，g)DIBAL-H，h)MeOH，TsOH，i)KOH，EtOH，j)Swern氧化，k)NaClO2，NaCH2PO4。
因此源自A1的銅酸鹽試劑從C-63或C-64的背面接近，因為巨大d9-苯基-9芴基(PhFl)完全封閉了另一面，得到主要的非對映體C-65。用5步法(把甲基酯還原成醛，以二甲基醛縮醇保護，噁唑烷酮的去保護，及伯羥基氧化成羧酸)將C-65轉(zhuǎn)化成C-66。
如流程圖24所述，二環(huán)己基碳化亞an介導(dǎo)的偶連，如C-66和胺的偶連生成C-67酰胺。C-66和C-67一起構(gòu)成C-88型化合物這一總類。9-苯基-9芴基(PhF1)以催化氫解除去，游離的胺用與R12相應(yīng)的親電試劑烷基化(以醛或酮進行還原性氨基化，且NaCNBH3是另一種選擇)得到C-69化合物。二甲基縮醛的酸性水解產(chǎn)生中間物C-70醛，其環(huán)化成C-73類似物。
C-71的Tebbe烯化產(chǎn)生C-73化合物。用Lawesson′s試劑處理C-71產(chǎn)生C-72化合物。其可用雷氏鎳去硫化得到C-74化合物。由此完成權(quán)利要求12和43中所有化合物的合成。權(quán)利要求14和44所涉及的化合物的制備主要依據(jù)Dener等人[“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)1993，581159]及Evans等人[“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am，Chem，SOc.)，1981，1032127]的結(jié)果。如流程圖25所示，D-天門冬氨酸(C-81)被保護且用與A6相應(yīng)的親電試劑進行烷基化，得到C-82化合物，主要的是那些所示的非對映體。Dener等人，[“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)1993，581159]。(PhFl是9-苯基-9芴基的縮寫)，位點特異的二異丁氫氧化鋁氫(DIBAL-H)的還原(由于PhFl基太大)產(chǎn)生C-83醛。
非對映體選擇性的硼介導(dǎo)的醛醇加成是下一個步驟。按照Evans等人的方法，“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc.)(1981)1032127，以叔-丁基二甲酸烷基(TBS)保護仲羥基之后可得到C-85。用過氧化氫鋰去除唑烷酮，用催化氫解去除PhFl基，并在例如二環(huán)己基碳化亞胺條件下完成內(nèi)酰胺化得到C-86。以四丁基氟化銨(TBAF)去除叔-丁基-二甲基甲矽烷基，形成內(nèi)酯(用氫氧化鋰對甲基酯行皂化作用，隨后如果需要，通過二環(huán)己基碳化亞胺偶連)產(chǎn)生C-87，再以與Rd相應(yīng)的親核試劑對酰胺氮進行烷基化，加工成C-88化合物。用1，8＝吖雙環(huán)-[5，4，0]十一-7-烯(DBU)進行差向異構(gòu)化，得C-89化合物，用Lawesson′s試劑處理C-89，(Cava等人，“四面體通訊”(Tetrahedron)1985，415061)得到C-90化合物，由此完成這部分的所有化合物的制備。以下13-21的例子是個別合成。流程圖24
a)H2NR3，DCC，b)H2，Pd/C，c)堿，相當(dāng)于R12的親電試劑，d)TsOH，e)Tebbe烯醇化，f)Lawesson′s試劑，g)雷氏鎳。
a-c)見Dener等人，d)DIBAL-H，e)Bu2OTf，f)C-83，g)TBS-Cl，咪唑，DMF，h)LiOOH，THF，H2O，i)H2，Pd/C，j)DCC，k)TBAF，THF，l)環(huán)化，m)堿，相當(dāng)于Ra的親電試劑，n)DBU，o)Lawesson′s試劑。用途所公開的化合物是用于治療由蛋白酶體的蛋白酶解功能直接介導(dǎo)的癥狀。(如肌肉萎縮)或者經(jīng)如NF-KB的由蛋白酶體加工的蛋白質(zhì)間接介導(dǎo)的癥狀。蛋白酶體參與涉及細胞調(diào)節(jié)(如細胞周期，基因轉(zhuǎn)錄，及代謝途徑)、細胞間信息傳送和免疫應(yīng)答(如抗原表達)等的蛋白質(zhì)的迅速去除和翻譯后加工。下面討論特定的例子，包括β-淀粉樣蛋白質(zhì)及調(diào)節(jié)性蛋白質(zhì)(如細胞周期蛋白)及轉(zhuǎn)錄因子NF-kB。在此使用的治療包含逆轉(zhuǎn)、減弱或阻止癥狀、臨床征兆并以某種方式破壞某一病癥的病理，以改善或穩(wěn)定病人的狀況。
Alzheimer′s癥(早老性癡呆)的特性是β-淀粉樣蛋白質(zhì)(β-AP)在老年斑及大腦血管的細胞外沉積。β-AP是從淀粉樣蛋白質(zhì)前體(APP)衍生的39至42個氨基酸的肽片段，已知的淀粉樣蛋白質(zhì)至少有三種異構(gòu)體(695、751及770個氨基酸)。不同mRNA的剪接，產(chǎn)生異構(gòu)體。正常的加工過程影響一部分β-淀粉樣蛋白的序列，因此阻止β-淀粉樣蛋白的產(chǎn)生。據(jù)認為由蛋白酶體加工的不正常的蛋白加工促成了早老性癡呆的大腦內(nèi)的β-淀粉樣蛋白質(zhì)的豐富。在鼠β-淀粉樣蛋白加工酶含有約10種不同的亞基(22KDa-32KDa)。該25KDa亞基的N-末端順序為X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Scr，其和人類macropam的β-亞基相同，參見Kojima.S.等人，F(xiàn)ed Eur.Biochem.Soc(1992)30457-60。淀粉樣蛋白質(zhì)加工酶在Gln15-Lys16處裂解，在鈣離子存在下，此酶也在Met-1-Asp1鍵和Asp1-Ala2鍵裂解以釋放β-淀粉樣蛋白質(zhì)的細胞外結(jié)構(gòu)域。
因此一個實施方案是一種治療早老性癡呆的方法，其包括向受治療者給藥有效劑量的具有文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物(如藥物組合物)。所述治療包括降低β-淀粉樣蛋白加工速率，降低β-淀粉樣蛋白斑的形成速率，及降低β-淀粉樣蛋白形成的速率及減少早老性癡呆的臨床征兆。
本發(fā)明的其他實施方案涉及惡病質(zhì)和肌肉消瘦。蛋白酶體可分解許多網(wǎng)織紅細胞和正生長的纖維細胞的蛋白質(zhì)。喪失胰島素或血清的細胞中，蛋白質(zhì)分解速率幾乎加倍。蛋白酶體的抑制作用降低蛋白分解。因此可減少肌肉蛋白質(zhì)損失和腎及肝臟對含氮物質(zhì)的負擔(dān)。蛋白酶體的抑制劑可用于治療像癌癥、慢性感染疾病、發(fā)熱、肌肉疾病(萎縮)，及去神經(jīng)化、神經(jīng)損傷害、禁食、酸中毒有關(guān)的腎衰竭和肝衰竭者，參見如Goldberg U.S.Pat.No5,340,736(1994)。本發(fā)明的實施方案包括用于下列目的方法降低細胞中肌肉蛋白質(zhì)的分解速率，降低細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分解速率、降低細胞中p53蛋白質(zhì)的分解速率，及抑制有關(guān)p53蛋白質(zhì)的癌的生長。這些方法的每一種都包括將細胞(體內(nèi)或體外，如受治療者的肌肉)和有效劑量的文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物(如藥物組合物)接觸。
另一被蛋白酶體加工的蛋白是NF-kB，其是Rel蛋白質(zhì)家族的一員。Rel家族轉(zhuǎn)錄激活蛋白可分成兩種類型。第一種類型需要蛋白酶解加工，包括p50(NF-kBl，105KDa)及p52(NF-K2，100KDa)。第二種類型是不需要蛋白酶解加工，包括p65(RclA，Rel(C-Rel)和RelB)。Rel族的成員中可以形成同型二聚體和雜二聚體；如NF-kB，是p50-p65雜二聚體。IKB和p105經(jīng)磷酸化及遍在蛋白化后，這兩種蛋白質(zhì)分別被分解及加工以便產(chǎn)生活化型的NF-kB，其被由細胞質(zhì)轉(zhuǎn)移至核中。遍在蛋白化的p105也被純化后的蛋白酶體加工(參見Palombella等人“細胞”(Cell)(1994)78773-785)，活化型的NF-kB與其他轉(zhuǎn)錄激活子例如HMGI(Y)形成立體特異性的增強因子復(fù)合體，誘導(dǎo)特定基因的選擇性表達。
NF-kB調(diào)節(jié)涉及免疫及炎性反應(yīng)的基因和有絲分裂事件。免疫球蛋白輕鏈K基因，白細胞介素-2(IL-2)受體的α-鏈基因，I型主要組織相容性復(fù)合體基因和一些編碼例如IL-2、IL-6、和粒性白細胞集落刺激因子和β-干擾素(IFN-β)細胞分裂素基因的表達需要NF-kB，[參見Palombella等人(1994)]。本發(fā)明的一些實施方案包括影響IL-2及IL-2，主要組織相容性復(fù)合體-I，IL-6，β-干擾素及任何其他先前提到的蛋白質(zhì)的表達水平的方法。而每一方法都包括向受治療者給藥有效劑量的文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。
NF-kB也參與編碼E-選擇蛋白，P-選擇蛋白，ICAM，VCAM-1細胞固著性的基因的表達，參見Collins T.，Lab Invest(1993)68499-508。本發(fā)明的一個實施方案是一種提供抑制細胞粘附的方法(如由E-選擇蛋白，P-選擇蛋白[CAM或VCAM-1所介導(dǎo)的細胞粘附)，包括將細胞和(或向受治療者給藥)有效劑量的文中公開的結(jié)構(gòu)式化合物(如藥物組合物)接觸。
NF-kB也可特異地結(jié)合至HIV-增強子/啟動子上，與mac239的Nef相比較，pbj14的HIV調(diào)節(jié)蛋白Nef的不同在于控制蛋白質(zhì)激酶結(jié)合處的2個氨基酸是不同的，據(jù)認為蛋白質(zhì)激酶報告I-kB的磷酸化，經(jīng)由遍在蛋白-蛋白酶體途徑引發(fā)IKB的分解。NF-kB分解后，被釋放至核內(nèi)，因此加強HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。參見Cohen“科學(xué)雜志”(J.Science)(1995)267960。本發(fā)明的兩個實施方案是用于抑制或減HIV病毒感染的方法，及降低病毒基因表達水平的方法。每一方法都包括受治療者給藥有效劑量的文中所公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。
含p50的復(fù)合體是急性炎癥及免疫應(yīng)答的快速遞質(zhì)。參見Thanos D.和Maniatis T.“細胞”(Cell)(1995)80529-532。胞內(nèi)蛋白酶解作用產(chǎn)生用于呈遞到T-淋巴細胞以便誘導(dǎo)主要組織相容性復(fù)合體I型介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的小肽。經(jīng)免疫系統(tǒng)篩選出的自身細胞，該細胞經(jīng)病毒感染或已經(jīng)受致癌性轉(zhuǎn)化。本發(fā)明的兩個實施方案是一種用于抑制細胞中抗原呈遞的方法(其包含將細胞暴露給文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物)，及用于抑制受治療者的免疫系統(tǒng)的方法、(如抑制移植排斥)，該方法包括向受治療者給藥有效劑量的文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物)。
另外，本發(fā)明也提供對治療炎癥的方法，其中該方法包含向受治療者給藥抗炎有效量的藥物組合物，該藥物組合物包含有文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物。炎癥是與下列情況有關(guān)的初次應(yīng)答和二次應(yīng)答a)諸如切傷、裂傷、刺傷的損傷；b)被一或多種病毒、細菌、霉菌、微生物、寄生蟲及真菌感染(c)變態(tài)反應(yīng)(d)一種病癥(e)外科手術(shù)(如移植)或(f)其組合。
變態(tài)反應(yīng)是對抗原及變態(tài)反應(yīng)原的初次應(yīng)答。變態(tài)反應(yīng)原的來源有植物(如草或樹的花粉)，動物(如毛發(fā)皮膚、動物毒素、尿，及狗，貓，昆蟲及毒蛇的排泄物)及真菌。除諸如黑麥草、豚草及柳杉花粉的變態(tài)反應(yīng)原外，某些食物或食物成分(如蛋、奶、貝類、草莓及巧克力)，疫苗和藥物(如青霉素)也會在某個體內(nèi)誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)病癥包括有風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、風(fēng)濕性發(fā)熱、炎性腸疾，(如節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎)、糖尿病、重癥肌無力、多發(fā)性硬化、急性熱病性多神經(jīng)炎、眼結(jié)膜炎、系統(tǒng)性紅斑性狼瘡、腦炎、成人呼呼窘迫癥候、牛皮癬、氣腫、早老性癡呆癥和肌肉營養(yǎng)不良。
本發(fā)明提供一種治療由器官或組織移植所誘發(fā)的炎癥的方法。此方法包含給已經(jīng)或即將移植的病人給藥包括文中所公開的結(jié)構(gòu)式的化合物的藥物組合物。移植包含有骨髓、實體器官(如腎、肺、心、胰、肝及皮膚)或組織。
一些蛋白酶體抑制劑在體外和體內(nèi)阻斷遍在蛋白化的NF-kB的分解及加工。蛋白酶體抑制劑也可阻斷IkB-α分解和NF-kB活化，參見Palombella等人及Traenckner等人“歐洲分子生物學(xué)聯(lián)合會雜志”(EVBO.J)(1994)135433-5441。本發(fā)明的一個實施方案是用于抑制IkB-α的分解的方法，包括將細胞和文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物接觸。另一實施方案是用于降低細胞、肌肉、器官或受治療者的NF-kB的細胞含量的方法，其包括將細胞、肌肉、器官或受治療者與文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物接觸。
其他需要蛋白酶解加工的真核細胞的轉(zhuǎn)錄因子，包含一般性的轉(zhuǎn)錄因子TFIIA，單純皰疹病毒VP16輔助蛋白(宿主細胞因子)，病毒誘導(dǎo)干擾素調(diào)節(jié)因子2蛋白，和膜結(jié)合的固醇類調(diào)節(jié)元件-結(jié)合蛋白1。
本發(fā)明其他實施方案是用于影響依賴于細胞周期蛋白的真核細胞周期的方法，包括把細胞(體外或體內(nèi))暴露給文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。細胞周期蛋白是涉及細胞周期控制的蛋白質(zhì)，蛋白酶體參與細胞周期蛋白的分解。細胞周期蛋白的分解能使細胞退出細胞周期的一個階段(如，有絲分裂)并進入另一個階段(如分裂)。據(jù)認為所有細胞周期蛋白都和p34cdc2蛋白激酶或相關(guān)的激酶有關(guān)。蛋白酶解導(dǎo)向訊號于氨基酸42-精氨酰-丙氨酰-丙氨酰-亮氨酰-甘氨酰-天門冬氨酰-異亮氨酰-絲氨酰-谷氨酰-天門冬酰氨50(破壞框)。有證據(jù)說明，在有絲分裂期間，細胞周期蛋白被轉(zhuǎn)化成易被遍在蛋白連接酶破壞的形式，或者，細胞周期蛋白專一性的連接酶在有絲分裂中被激活。參見Ciechaover，A“細胞”(Cell)(1994)7913-21。蛋白酶體的抑制作用抑制細胞周期蛋白分解，并因此抑制細胞增殖(如與細胞周期蛋白相關(guān)的癌癥)參見Kumatori等人，“美國國家科學(xué)院院刊”Proc.Natl.Acad.Sci.USA)(1990)877071-7075。本發(fā)明的一個實施方案是一種治療受治療者增殖性疾病(如癌癥、牛皮癬或再狹窄)的方法。包含對病人給藥有效劑量的文中所公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。慢性或急性炎癥可能起因于移植排斥、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、感染、皮膚病、發(fā)炎性腸疾、哮喘、骨質(zhì)疏松和自體免疫疾病等。排斥或發(fā)炎可能在任何類型的移植組織或器官(例如心、肺、腎、肝、皮膚移植物，和組織移植物中發(fā)生)。本發(fā)明也包括用于治療者體內(nèi)與細胞周期蛋白有關(guān)的炎癥的方法，向受治療者給藥有效劑量的文中所述結(jié)構(gòu)式的化合物。
其他的實施方案是用于影響依賴于蛋白酶體的癌蛋白調(diào)節(jié)的方法及治療或抑制癌生長的方法，每一方法包含將細胞(體內(nèi)，如受治療者體內(nèi)，或體外)暴露給文中所公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。HPV-16和HPV-18衍生的E6蛋白質(zhì)可刺激網(wǎng)織紅細胞的粗裂解物中p53的依賴于ATP和依賴于遍在蛋白的綴合和分解。已證明隱性致癌基因p53在具突變熱不穩(wěn)定E1蛋白的細胞株中，在一非允許溫度下累積。高濃度的p53可能導(dǎo)致細胞程序死亡。被遍在蛋白系統(tǒng)分解的原癌蛋白的例子包含c-Mos，c-Fos和c-Jun。一個實施方案是用于治療與p53有關(guān)的細胞程序死亡的方法，包括向受治療者給藥有效量的文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。
癌癥治療阻止、減輕或改善一或多種與腫瘤(特別是惡性腫瘤，如細胞繁殖不受控制的組織生長)的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移有關(guān)的原發(fā)或繼發(fā)現(xiàn)象。腫瘤細胞和良性癌細胞相比顯示更大程度退行發(fā)育。本發(fā)明提供一治療癌癥的方法，包括向受治療者給藥抗癌有效劑量的文中所述的藥物組合物，其中癌癥是選自癌，淋巴瘤，肉瘤和骨髓瘤。癌癥的例子包括有腺癌、腺泡細胞腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、牙槽細胞癌、退行發(fā)育性的癌、類基底細胞癌、基底細胞癌、細支氣管癌、支氣管原癌、腎腺癌、胚胎性癌、畸異性癌、纖維層肝細胞癌、濾泡癌、巨細胞癌、肝細胞癌、表皮內(nèi)癌、上皮內(nèi)癌、leptomanigio、髓樣癌、黑色素癌、腦膜癌、mesometonephric、燕麥細胞癌、鱗狀細胞癌汗腺癌、移行細胞癌和管狀細胞癌。肉瘤的例子包含有成釉細胞肉瘤、血管結(jié)石性肉瘤、葡萄簇狀瘤、子宮內(nèi)膜肉瘤、內(nèi)皮細胞性骨髓瘤、筋膜肉瘤、巨細胞瘤、綠色肉瘤(granulocytic sarcoma)、免疫母細胞瘤、近心臟成骨瘤、Coppices瘤、白血病性瘤(血癌)、淋巴肉瘤、髓樣瘤、骨髓瘤(綠色肉瘤)、austiogenci、骨膜瘤、網(wǎng)狀細胞肉瘤(也稱組織細胞淋巴瘤)、球形細胞瘤、紡綞細胞瘤、滑液瘤和毛細管擴張音原性瘤。淋巴瘤的例子包括Hodgkin′s疾病和淋巴細胞淋巴瘤，如Burkitt′s、結(jié)狀分化不良淋巴細胞(NPDL)、結(jié)狀混合淋巴細胞(NML)、NH(結(jié)狀組織細胞的)及擴散性淋巴癌等。另外的癌尚包括有神經(jīng)癌、成膠質(zhì)細胞癌、星形細胞瘤、黑素癌、平滑肌瘤、多骨髓瘤和血管瘤。
三肽醛蛋白酶抑制劑(芐氧羰基(Z)-亮氨酰-亮氨酰-亮氨醛)在30nM的最適濃度下誘導(dǎo)PC12細胞軸突的長出。參見(Tsubuki等人，“生物化學(xué)和生物物理研究通訊”(Biochem and Biophys Res.Comm.)(1993)1961195-1201。已證實肽醛抑制蛋白體的胰凝乳蛋白酶的活性。參見Vinitsky等人，1992，Tsubuki等人，1993。本發(fā)明的一個實施方案是一種促進軸突長出的方法，該方法包括向受治療者給藥文中公開的結(jié)構(gòu)式的化合物。
最后，所公開的化合物可用作診斷試劑。(如用診斷試劑盒或用于臨床實驗)，來篩選蛋白酶體加工的蛋白質(zhì)(如酶，轉(zhuǎn)錄因子)。所公開的化合物也可用于研究，用于特異性結(jié)合X/MBl亞基或α-鏈及抑制性與之相關(guān)的蛋白酶解活性的抑制上。例如可以測定蛋白酶體的其他亞基的活性(和特異性抑制劑)。
在成熟或活化期間，大部分細胞蛋白質(zhì)易受蛋白酶解加工作用。乳胱胺酸能用來測定細胞，發(fā)育或生理的過程和產(chǎn)物是否由蛋白酶體的蛋白分解活性所調(diào)節(jié)。一種所述方法包括得到生物體，完整細胞制劑，或細胞提取物；把生物體細胞制劑，或細胞提取物暴露給在此公開的結(jié)構(gòu)式的化合物；把暴露給化合物的生物體，細胞制劑，或細胞提取物暴露給信號并監(jiān)測過程或產(chǎn)物。在此所揭示的化合物具有高度的選擇性允許快速及準(zhǔn)確地去除或推斷特定的細胞發(fā)育或生理過程中的蛋白酶體。
本發(fā)明的化合物和組合物可用于幾種方法，這幾種方法包括治療炎癥的方法，其包括向受治療者給藥抗炎癥有效量的在此描述的藥物組合物。(如，乳胱氨酸硫酯、環(huán)內(nèi)脂、或內(nèi)酰胺)，其中炎癥是伴隨損傷或感染而產(chǎn)生的；其中的炎癥是伴隨變態(tài)反應(yīng)和過敏或哮喘而產(chǎn)生的；其中的炎癥涉及選自風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、風(fēng)濕性發(fā)熱、發(fā)炎性腸炎、糖尿病、重癥肌無力、多發(fā)性硬化癥、急性感染性多神經(jīng)炎、結(jié)膜炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腦炎、成人呼吸窘迫癥、氣腫、早老性癡呆、肌肉營養(yǎng)不良；其中的炎癥是伴隨骨髓或選自腎、肺、心、胰、肝及皮膚的實體器官的移植而產(chǎn)生的，并且此組合物是在移植之前，中和之后給藥，其中口服該藥物組合物，或其組合。
本發(fā)明也提供一治療癌癥的方法，包括向受治者給藥在此所描述的抗癌有效劑量的藥物組合物；治療牛皮癬的方法，包括向受治療者給藥有效劑量的在此所描述的的藥物組合物；以及一治療再狹窄的方法，包括向受治者給藥有效劑量在此所描述的藥物組合物。優(yōu)選的化合物和組合物包括各種乳胱氨酸-硫酯類、和乳胱氨酸β-內(nèi)酯類似物，也包括β-內(nèi)酯本身。配方與給藥考慮將本發(fā)明的方法用來臺療動物受治者，如哺乳動物(例如高等靈長類，尤其是人)。本發(fā)明包括包含在此所描述的一種新穎的化合物的藥物組合物，以及包含文中所述的并且首先被認為是蛋白酶體抑制劑的化合物(像乳胱氨酸)的藥物組合物。
可制成可藥用的鹽，例如用1，2，3或更大當(dāng)量的氯化氫，溴化氫，三氟醋酸和其他在藥物配制領(lǐng)域的技術(shù)人員所知的其他物質(zhì)。本發(fā)明的化合物可通過和藥學(xué)上可接受的無毒性的輔藥和載體混合而配制成藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物可以包含一種以上的發(fā)明的化合物，和/或也可以包含本發(fā)明不涉及的其他治療化合物，如抗發(fā)炎、抗癌或其他藥劑等。受治者可以有一種以上的炎癥，或一種以上的癌癥，不同組合的變態(tài)反應(yīng)，或能使用所公開的化合物的上述狀況的組合。本發(fā)明的化合物可以單劑量的方式給藥，且可以制藥領(lǐng)域熟知的任何方法配制。該方法如在Remington′s PharmaceuticalSciences所描述的(Mack出版公司出版，Easton PA.1980)。本發(fā)明也包括一種包裝藥物，其含有配制成各劑量的藥物組合物，并為自己用藥印刷有使用說明書。
可以制備作為蛋白酶體抑制劑的在此所公開的化合物用于以下目的以溶液或液體懸劑的形式不經(jīng)腸給藥；以片劑或膠囊形式口服(優(yōu)選)；特別是可以以粉劑或凝膠油狀溶液、滴鼻劑、氣霧劑或合劑的形式用于鼻內(nèi)給藥。用于不經(jīng)腸給藥的制劑可以含有普通賦形劑，無菌水或無菌生理食鹽水，聚二醇，如聚乙二醇，植物來源的油，氫化萘等。通過使用生物適應(yīng)性，生物可分解的丙交酯聚合物和丙交酯/乙交酯或聚氧化乙烯/聚氧化丙烯的共聚物可使本發(fā)明的化合物達到部分緩釋。另外的非腸道的輸送系統(tǒng)，包含亞乙基乙烯基乙酸酯共聚合物顆粒。滲透唧筒，不能植入的灌注系統(tǒng)及脂質(zhì)體。用于吸入給藥的制劑含有乳糖，聚氧化乙烯-9-月桂基醚、甘膽酸鹽或去氧膽酸鹽?？谇唤o藥的制劑包括甘膽酸鹽，陰道給藥的制劑含有檸檬酸。
所揭示化合物在藥用混合物中的濃度可依據(jù)一些因素而變化，這些因素包含要給藥的化合物的劑量、使用的化合物的藥物動力學(xué)特性、和用藥的路徑等。一般而言，本發(fā)明的化合物可以以包含約0.1-10％(重量/體積)的化合物的含水生理緩沖液的形式用于非腸道給藥。典型劑量范圍為約0.1-約5.0mg/kg(體重)/天，以1至4個分份劑量來給藥。每一分份劑量可以含相同或不同的本發(fā)明的化合物。該劑量是依據(jù)包括病人的健康狀況，被選用化合物的劑型和給藥途徑在內(nèi)的一些因素的有效劑量。
用于實施本發(fā)明來治療直接或間接由蛋白酶體介導(dǎo)的癥狀的活性化合物的有效劑量依據(jù)下列因素而變化；用藥的方式，受治療者的年齡和體重及要治療的受治療者的狀況。最后由值班醫(yī)生或獸醫(yī)來決定。文中將這些由值班醫(yī)生或獸醫(yī)決定的活性物質(zhì)的所述劑量稱為有效量。
無需進一步詳細說明，相信本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員會依據(jù)文中所述來最大程度地使用本發(fā)明。因而以下特定的實施例應(yīng)被理解為只是為了說明。而不是以任何方式限制所揭示的本發(fā)明的其余部分。所有在此所引述的出版物都一并收作參考文獻。
實施例1[3H]乳胱氨酸的合成乳胱氨酸由氧化-還原順序反應(yīng)氚化的β-內(nèi)酯制備。未標(biāo)記的β-內(nèi)酯在碳9的位置以Dess-Martin高碘烷在二氯甲烷中氧化成酮。再用1，2-二甲氧基乙烷/1％H2O中的[3H]NaBH4(NEN，13.5Ci/mmol)還原，產(chǎn)生氚化的β-內(nèi)酯以及C9-的差相并構(gòu)體(2∶3比率)。異構(gòu)化的β-內(nèi)酯以高效液相層析儀來分離(Rainin Microsorb二氧化硅柱，4.6×100毫米，10％正溶于己烷中的異丙醇)，再單獨與N-乙酰胱氨酸(0.5M)及三乙胺(1.5M)在CH3CN以產(chǎn)生乳胱氨酸(9S)及其C9-的差相異構(gòu)物(9R)，然后反應(yīng)的混合物再分別以反相高效液相層析純化。(TSK ODS-80Tm柱4.6×250毫米，10％CH3CN/0.1％CF3CO2H水溶液)。
實施例2細胞和組織粗提液的熒光顯影Neuro 2A粗提物(～11μg總蛋白質(zhì)/泳道)和牛腦粗提物(～54μg總蛋白質(zhì)/泳道)以下列方式處理(1)10μM[3H]乳胱氨酸，(2)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記乳胱氨酸(3)10μM[3H]乳胱氨酸(4)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記乳胱氨酸(5)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)識β-內(nèi)酯，(6)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記苯乙酰乳胱氨酸，(7)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記乳胱氨酰胺，(8)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記二羥酸，(9)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記6-去氧乳胱氨酸，(10)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記(6R，7S)-乳胱氨酸(6-差相，7-差相)，(11)10μM[3H]乳胱氨酸和1mM未標(biāo)記去(羥異丁基)-乳胱氨酸。從Neuro 2A成神經(jīng)細胞瘤或牛腦而來的粗提物，在有10μM[3H]乳半胱氨酸存在下，有或沒有1mM未標(biāo)記的競爭劑(同時加入)存在下，于室溫培養(yǎng)24小時，隨著進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(0.75毫米厚，12％聚丙烯酰胺凝膠)，膠體在0.1％考馬斯亮藍(Coomassie brillicrt blue)R-250，12％醋酸，50％甲醇中染色，接著以EN3HANCE(NEN)浸泡，然后用水沉淀熒光劑。
膠體放在Whatman濾紙上以凝膠干燥機在65℃下干燥30分鐘，然后在-78℃下對柯達SB底片曝光。
實施例3純化的蛋白質(zhì)復(fù)合物(20S蛋白酶體)的分離牛腦于液氮中冷凍，總重2kg的腦以Waring搗碎機中干式勻漿1分鐘。除非有說明，所有操作在4℃下進行。然后加入下面的緩沖液(總共6升)(pH7.7)18.25mM磷酸一氫鉀，6.75mM磷酸二氫鉀，0.27mM蔗糖，2mMEDTA(乙二胺鈉)，2mMEGTA(乙二醇雙(2-氨基乙醚四乙酸))，25mM氟化鈉，5mM焦磷酸四鈉，亮抑蛋白酶肽和胃蛋白酶抑制劑A各5μg/mL及5mm β-巰基乙醇。再于Warmg搗碎機中把組織濕式勻漿2分鐘，勻漿液在5,000g離心15分鐘后再于12,000g離心30分鐘。硫酸銨加至上清液至50％飽和度，樣品再于10,000g離心20分鐘，50-60％飽和度的硫酸銨部分，其有乳胱氨酸結(jié)合活性，該活性以對和放射性化合物溫育的樣品進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和熒光顯影來測定。然后對20mM MES-NaOH，pH5.6，5mM β-巰基乙醇透析過夜.再進行SP-瓊脂糖凝膠層析(Pharmacia SP-sepharose，快流型120毫升管柱床體積)，該層析是用20mM MES-NaOH，pH5.6，5mM β-巰基乙醇和0至0.3M氯化鈉梯度(500毫升梯度，流速＝2毫升/分鐘)。
收集稀釋有關(guān)部分后，用1M Tris-HCl將pH調(diào)至8，再進行Q-瓊脂糖凝膠層析(Pharmacia，Q-Sepharose，快流型，16毫升柱床體積)，以20mM Tris-HCl，pH8，5mM β-巰基乙醇以0至0.5M氯化鈉梯度進行(120毫升梯度，流速＝1毫升/分鐘)。收集有關(guān)部分，濃縮，加至Pharmacia Superose6膠體過濾柱(10mM Tris-HCl21mM EDTA，pH8，5mM β-巰基乙醇，流速＝0.5毫升/分鐘)，乳胱氨酸結(jié)合活性與高分子量的單一峰一致。此峰的部分被分離出且以10μM[3H]乳胱氨酸或10μM[3H]β-內(nèi)酯在25℃下處理24小時。加入三氟醋酸(TFA)至濃度為0.1％，然后樣品在室溫下靜置20分鐘，用Vydac C4管柱(300A/4.6×150毫米)以20至40％乙腈/0.1％三氟醋酸在室溫下進行反相高效液相層析10分鐘，再以40-55％氰甲烷/0.1％三氟醋酸進行30分鐘(流速為0.8毫升/分鐘)。以[N/US β-RAM的直讀閃爍監(jiān)測器監(jiān)測放射性。
乳胱氨酸結(jié)合蛋白質(zhì)從牛腦純化，通過凝膠過濾，發(fā)現(xiàn)兩者均在相同的高分子量復(fù)合體中。用[3H]乳胱氨酸處理此復(fù)合體不會導(dǎo)致其解離，且此放射性只和此復(fù)合物一起移動。
復(fù)合體的分子量測定為700KDa，十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示出其由許多分子量～24到32KDa的蛋白質(zhì)組成。印跡EP蛋白質(zhì)的Edman分解顯示出排列，24KDa帶中的蛋白酶體的幾個亞基的氨基酸順序，使得可以初步鑒定20S蛋白酶體的復(fù)合體。用[3H]乳胱氨酸處理復(fù)合體并進行反相高效液相層析儀來分離蛋白酶體亞基，可鑒別出11至12個不同的波峰。但放射性活性只和頭兩個峰有關(guān)，主要與第二個峰有關(guān)。通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠以考馬斯藍(Coomassie blue)染色和胰蛋白酶片段的測序證明頭兩個峰是均一的、雖然后來的一些洗脫，即較大的峰，然是不均一的。
結(jié)合到第1峰和第2峰中的計數(shù)比值會隨每批蛋白質(zhì)，溫育時間和配體而有變化。第一峰標(biāo)記的速度較慢，在任何時刻時，使用[3H]乳胱氨酸比用[3H]β-內(nèi)酯時第一峰和第二峰的標(biāo)記程度比例都要高。第一峰和[3H]β-內(nèi)酯一起反應(yīng)1或2小時，只產(chǎn)生痕量標(biāo)記；但是以[3H]β-內(nèi)酯或[3H]乳胱氨酸反應(yīng)24小時，會使這一峰被顯著標(biāo)記。選擇性與這兩種化合物的有關(guān)化學(xué)反應(yīng)活性相反，這一發(fā)現(xiàn)意味著乳胱氨酸的N-乙酰半乳氨酸部分可能有利于被第2種蛋白質(zhì)識別。
由反相高效液相層析柱洗脫的第一個峰只含有～32KD的蛋白質(zhì)，其和先前鑒定的32KDa的第二種乳胱氨酸結(jié)合蛋白一致。
實施例4純化的牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)的氨基酸順序?qū)⒓兓?0S蛋白酶體(如同實例3所述來純化的)和10μM乳胱氨酸在10mM Tris-HCl，1mM EDTA(pH8)溫育24小時。然后將溶液用含0.1％三氟醋酸(TFA)的20％含水乙腈稀釋10倍，并使在室溫靜置5分鐘，使用Vydac C4柱(100A/4.6×150毫米)進行反相高效液相層析，層析在室溫下進行，用20-40％乙腈/0.1％三氟乙酸洗脫10分鐘，再以40-50％乙腈/0.1％三氟乙酸洗脫30分鐘，將蛋白酶體亞基洗脫(流速為0.8毫升/分鐘)。根據(jù)210和280mM處紫外吸收來收集峰，主要的乳胱氨酸修飾的蛋白質(zhì)是第二個由柱洗脫下來的，而其次的乳胱氨酸結(jié)合蛋白質(zhì)是最先被洗脫的，合并重復(fù)注入的蛋白，冷凍干燥，胰蛋白酶水解并以反相高效液相層析分離這些胰蛋白酶解片段后進行Edman分解。推斷的乳胱氨酸修飾的殘基的鑒定是通過將從[3H]-乳胱氨酸處理蛋白酶體而分離的X/MBI亞基加至已用未標(biāo)記的乳胱氨酸處理過的樣品，然后分離并測序有放射性活性的胰蛋白酶水解的片段。在某一位置苯基硫代乙內(nèi)酰脲-氨基酸(phenylthiohydantom-amino acid)衍生物無法測定，意味著此殘基可能被修飾。
直接從N-末端測序和由主要的牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白的而來的胰蛋白酶水解片段的順序和人類蛋白酶體亞基X的順序(從cDNA克隆預(yù)測)，人類LMP7-E2(從含外顯子-2的cDNA克隆預(yù)測)一致。序列1(直接由N-末端測序而來)也和Saccharomyces cerevisiae Pre-2(由基因組克隆預(yù)測的)及Thermoplasma acidophilum β-亞基(由克隆的基因預(yù)測)相一致。N-末端七肽與似乎具有乳胱氨酸-修飾的N-末端蘇氨酸殘基的胰蛋白酶水解片段相似。在此位置的蘇氨酸也和列舉的所有成熟、加工形式的同系物推斷的N-末端一致。大寫字母表示高信賴度順序，而小寫字母代表低信賴度排布。
表1直接N-末端序列1.主要牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)的直接N-末端序列蛋白質(zhì) TTTLAFKFRHggIIA 序列1人類X/MBl亞基 5TTTLAFKFRGVIAl9 序列2人類LMP7-E274TTTLAFKFQHGVIAA88 序列3S.cerevisiae Pre-2 76TTTLAFRFQGGIVA90 序列4T.acidopholum β- 9TTTVGITLKDAVIMA23 序列5亞基2.主要牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)DAYSGGSVSLY 序列6人類X亞基 171DAYSGGAVNLYHVR184 序列7人類LMP7-E2239DSYSGGVVNMYHMK252 序列83.主要牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)VIEINPYLLGTMAGGAADCSF序列9人類X亞基 38VIEINPYLLGTLAGGAADCQFWER61 序列10人類LMP7-E2106VIEINPYLLGTMSGCAADCQYWER129 序列114.主要牛乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)GYSYDLEVEEAYDLAR 序列12人類X亞基 146GYSDLEVEQAYDLAR161序列13人類LMP7-E2214GYRPNLSPEEAYDLGR229 序列14次要乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)的胰蛋白酶水解片段的順序和人類紅細胞蛋白酶體的α鏈和鼠肝蛋白酶體α鏈的N-末端片段的順序一致。
表2胰蛋白酶水解片段序列次要牛乳乳胱氨酸-結(jié)合活性TTIAGVVYK DGI VLGADTR 序列15人類紅細胞蛋白酶體α鏈IXXIAGVVYK DG IVLGADTR19序列16鼠肝蛋白酶體鏈1TTTIAGVVYK DGI 12 序列17對該蛋白的胰蛋白酶水解片段的序列分析證明其和蛋白酶體α鏈(一種由純化的人紅細胞蛋白酶體和鼠肝蛋白酶體純化的～30KDa蛋白，其反有N-末端片端序列存在)同源。洗脫的第二個峰僅含～24KDa的蛋白質(zhì)，即主要乳胱氨酸-結(jié)合蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的N-未端的順序和得到的胰蛋白酶水解片段的順序顯示出和最近發(fā)現(xiàn)的20S蛋白酶體X亞基(也稱做MBl，主要組織相容性復(fù)合體(MHC)編碼的LMP7蛋白酶體亞基的同系物)的序列有高度的同一性。
實施例520S蛋白酶體肽酶活性的抑制動力學(xué)涉及蛋白酶體的實驗如下進行20S蛋白酶體(～5ng/μl)熔在10mM Tris-HCl，pH7.5，1mM EDTA中，其在25℃下、有溶于二甲基亞砜或甲醇的乳胱氨酸或乳胱氨酸類似物[不超過5％(V/V)]在在時溫育。加入化合物后于不同時間取出用于熒光測定的部分樣本并以含產(chǎn)生熒光的肽底物(100μM終濃度)的10mM Tris-HCl，pH7.5，1mm EDTA稀釋，來用于測定熒光測量。分別用Suc-LLVY-AMC，Cbz-Ile-βNA和Cbz-GGR-βNA(AMC＝7-酰氨基-4-甲基香豆酸；βNA＝β-賴酰氨)來測定類胰凝乳蛋白酶，類胰蛋白酶和肽基谷氨酰-肽的水解活性。
化合物生物活性是指該化合物誘導(dǎo)Neuro 2A成神經(jīng)細胞瘤細胞的軸突長出和抑制MG-63骨肉瘤細胞的細胞周期增進的能力。
表3
抑制作用的動力學(xué)
實施例6蛋白酶抑制的選擇性涉及其它蛋白酶的實驗與實施例5類似，除了和乳胱氨酸溫育的緩沖液如下α-胰凝乳蛋白酶10mM Tris-HCl，pH8，1mM EDTA(加100μMSuc-LLVY-AMC用于熒光測試)；胰蛋白酶10mM Tris-HCl，pH8，20mM氯化鈣(加100μM Cbz-GGR-βNA用于測試)；需鈣蛋白酶I20mMTris-HCl，pH8，1mM氯化鈣，1mM二硫蘇糖醇(加100μM Suc-LLVY-AMC用于測試)；需鈣蛋白酶II20mM Tris-HCl，pH8，10mM氯化鈣，1mm二硫蘇糖醇(加100μM Suc-LLYY-AMC用于測試)；木瓜蛋白酶50mM MES-NaOH，pH6.4，1mM二硫蘇糖醇(加100μM Cbz-RR-AMC用于測試)；組織蛋白酶B100μM磷酸二氫鉀，pH5.5，2mM EDTA，1mM二硫蘇糖醇加100μM Cbz-RR-AMC用于測試)。對于含7-酰氨基-4-甲基香豆酸的底物，是在380nm激發(fā)，在460nm測量熒光放射，對于含β萘酰胺的底物，是在335nm激發(fā)，在410nm測量熒光發(fā)射。熒光測量在25℃下進行，每一次實驗至少做三次，且以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示所測的值。
表4其他蛋白酶的抑制
使用產(chǎn)生熒光的肽底物來測評乳胱氨酸和β-內(nèi)酯對蛋白酶體的肽酶活性的作用。3種肽酶活性都被抑制，類胰蛋白酶和類胰凝乳蛋白酶的活性抑制是不可逆的，而PGPH活性抑制是可逆的。對于每種活性，測定每一抑制劑和酶的結(jié)合的表觀二級速率常數(shù)Kassoc，(表1A)。乳胱氨酸抑制類胰凝乳蛋白酶的活性最快(Kassoc＝194±15M-M-S-1)，抑制類胰蛋白酶的活性則慢20倍，而抑制PGPH活性則慢50倍。三種活性的抑制動力學(xué)不同的事實，進一步支持活性是由于各自的活性位點。β-內(nèi)酯表現(xiàn)出有相同的數(shù)量級，但其對每種活性的抑制比乳胱氨酸本身快了15-20倍，這與預(yù)計的β-內(nèi)酯有更大的化學(xué)反應(yīng)活性一致。也有可能是因為在最初結(jié)合到靶蛋白上時，在一限速步驟中乳胱氨酸被環(huán)化成β-內(nèi)酯，后者充當(dāng)一個激發(fā)的中間體來被親核試劑攻擊。
以在大量連續(xù)稀釋/超濾來去除過量抑制劑后，通過測量殘留肽酶活性來評估抑制作用的可逆性。類胰蛋白酶和類胰凝乳蛋白酶活性稀釋/超濾后依然被乳胱氨酸處理的樣品完全抑制，暗示抑制劑有非常低的Koff值，而未用抑制劑處理的對照仍然有活性(資料未列出)。在測評PGPH的活性時，除去抑制劑伴隨著催化活性的恢復(fù)。PGPH的抑制性可能是由于乳胱氨酸非共價地結(jié)合到PGPH位點或共價地與轉(zhuǎn)化位點結(jié)合。
先前，我們已指出類似物致使Neuro 2A細胞的軸突長出的能力反映在其抑制MG-63骨肉瘤細胞的細胞周期增進的能力，并且分子的γ-內(nèi)酰胺部分的修飾有損于這兩種活性然而N-乙酰半胱氨酸部分的修飾幾乎沒有影響。[Fenteany 1944，3135]。因此我們測試了類似物對20S蛋白酶體的抑制能力。但由于所提供的物質(zhì)，不足以測試三種活性。我們集中測試類胰凝乳蛋白酶的活性，其被乳胱氨酸的抑制最快。
生物研究中發(fā)現(xiàn)顯然有相同的趨勢生物活性化合物抑制類胰凝乳蛋白酶的活性以及乳胱氨酸本身。而沒有生物活性的化合物則不會有抑制性(表3)。乳胱氨酸核心α-內(nèi)酰胺的修飾減弱了其效果，但N-乙酰乳胱氨酸部分的修飾則不會。
實施例7測定乳胱氨酸(β-內(nèi)酯型)可阻斷體內(nèi)IkB-α的依賴于TNF-α的降解能力Hela細胞用DME加10％，牛血清蛋白平鋪在6-孔板中(3毫升/孔)，細胞先以0.125％DMSO，40μM G132(芐氧羰基-亮氨酰-亮氨酰-亮氨酸)(40μM，泳道103)或5μM β-內(nèi)酯，處理1小時，接著用1,000活性單位/毫升TNF-α或磷酸鹽緩沖液(PBS)處理。在37℃下再溫育0,20分鐘或40分鐘后收集細胞，用含有NP-40和蛋白酶抑制劑的緩沖液裂解細胞，蛋白質(zhì)在10％十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠上分離，蛋白質(zhì)再轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜，再用人IkB-α的C端20個氨基酸的抗體探測。
先前的報導(dǎo)指出IkB的可誘導(dǎo)分解之前是蛋白質(zhì)的磷酸化[參見Beg等人1993，“分子細胞生物學(xué)”(Mol Cell.Biol.)，133301；Traenckner等人，1994，“歐洲分子生物學(xué)學(xué)會雜志”(EMBO J.)135433；Miyamoto等人1994，PNAS 9112740；Lin等人，1995，PNAS，92552；DiDonato等人，1995，“分子細胞生物學(xué)”(Mol.Cell.Biol)151302，及Alkalay等人，1995，“分子細胞生物學(xué)”(Mol Cell.Biol)151294].該磷酸化的IkB顯然被蛋白酶體優(yōu)先講解(Palombella等人，1994”細胞“(Cell)78773)。該磷酸化作用為IkB的電泳遷移率稍稍變大而證實。由于腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的細胞顯示磷酸化作用的必要類型，并且隨時間而降解。
TNF誘導(dǎo)的細胞的IkB證實磷酸化作用是必要的，且在時間內(nèi)被分解。只用磷酸緩沖液處理的細胞未表現(xiàn)出IkB的濃度和修飾有變化。就如先前所報告的(Palombella等人，1994)，肽醛蛋白酶體抑制劑MG132可阻斷IkB的分解并穩(wěn)定其磷酸化形式。β-內(nèi)酯也可阻斷降解和穩(wěn)定磷酸化的IkB。這些結(jié)果表明，乳胱氨酸不影響導(dǎo)致IkB磷酸化的依賴于TNF的訊號途徑，但確實阻斷蛋白質(zhì)的降解。在Hela細胞的TNF誘導(dǎo)后，乳胱氨酸抑制IkB的分解，其最可能是通過特異阻斷蛋白酶體的作用。
實施例8乳胱氨酸(β-內(nèi)酯型)對體內(nèi)依賴于蛋白酶體的p105加工成p50的效果的測定COS細胞被平鋪在100毫米培養(yǎng)皿上，然后以DEAE-葡聚糖模擬轉(zhuǎn)染或用3μg包含人p105 cDNA的pcDNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染48小時后，用0.5％DMSO，50μM需鈣蛋白酶抑制劑II，50μM MG132或10μM β-內(nèi)酯將細胞先處理1小時。然后將細胞以35S-甲硫氨酸/半胱氨酸脈沖標(biāo)記，每一培養(yǎng)皿250μCi，標(biāo)記15分鐘，立即收集細胞或在用過量未標(biāo)記的甲硫氨酸及半胱氨酸追蹤標(biāo)記2小時后收集。然后用十二烷基硫酸鈉/Tris裂解細胞，蛋白質(zhì)用抗-p50抗體(識別p105蛋白質(zhì)N末端半部分)免疫沉降。這些蛋白質(zhì)于10％十二烷基硫酸鈉聚丙酰胺凝膠體上分離后，再固定，干燥再對放射自顯影底片曝光。
在脈沖標(biāo)記之后立即對分離的蛋白質(zhì)進行分析顯示有大量的標(biāo)記的有意義p105蛋白和極少的p50蛋白。二小時追蹤期之后，p105的濃度降低，而出現(xiàn)了另一和p50蛋白相應(yīng)的新帶，這正是如所預(yù)期的那樣(參見Fan和Maniaatis，1991；“自然”(Nature)354395；Palombella等人，1994“細胞”(Cell)78773)。細胞用需鈣蛋白酶II抑制劑預(yù)處理對p105加工成p50不起作用(第四泳道)，然而，用肽醛蛋白酶體抑制劑MG132處理細胞完全阻斷p50的出現(xiàn)(第5泳道)，如先前所報告的那樣(Palombella等人1994)。低濃度β-內(nèi)酯(10μM)對p50的濃度只有小的效果，但較高濃度(50μM)導(dǎo)致完全抑制p105加工成p50。乳胱氨酸有效阻斷體內(nèi)依賴于蛋白酶體的p105加工成p50。
實施例9軸突長出測定把化合物溶于增溶所需的少量甲醇(MeOH)或二甲基亞砜(DMSO)。在任何測定中存在的溶劑都不超過0.1％。當(dāng)需要時，蒸干溶液，且在使用之前重懸于細胞培養(yǎng)基質(zhì)中至終濃度。
Neuro 2A，IMR-32，PC12，和MG-63細胞從美國典型培養(yǎng)物收集所獲得。把Neuro 2A和IMR-32細胞培養(yǎng)在含有10％(體積/體積)小牛血清(FBS)的Eagle′s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(MEM)中。PC12細胞生長在含10％(體積/體積)馬血清和5％FBS的RPMI1640培養(yǎng)基中，并將MG-63細胞培養(yǎng)在含10％FBS的RPMI1640培養(yǎng)基中。
Neuro 2A細胞平鋪在12-孔聚苯乙烯培養(yǎng)皿中(22-毫米直徑，平底)，培養(yǎng)密度為每孔每毫升1×104細胞，且在任何處理之前在含10％FBS的MEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時。在一些相關(guān)的實驗中，在加乳胱氨酸之前3小時時，加入nocodazole、細胞松弛素B和環(huán)己酰亞胺。在去除血清的實驗中，平鋪24小時之后，細胞轉(zhuǎn)至無血清的MEM中，在添加乳胱氨酸之前再培養(yǎng)24小時，且接著保持在無血清條件下。
實施例10細胞周期分析MG-63細胞以每瓶每3毫升合7.5×104細胞平鋪在25cm2的瓶中，在含10％FBS的RPMI培養(yǎng)基中生長24小時。通過將培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換成含0.2％FBS的RPMI的培養(yǎng)基，將再混合的MG-63細胞同步在Go/Gl期，且培養(yǎng)64小時，接著以2毫升含10％FBS的RPMI刺激細胞并加入化合物。Neuro 2A在175cm2的瓶中含10％FRS的MEM培養(yǎng)基中生長至2×107。有絲分裂的細胞以100rpm旋轉(zhuǎn)速度振蕩5分鐘收集。將脫附的細胞再以每瓶每2毫升合1.5×105細胞再平鋪在25cm2的瓶中，培養(yǎng)30分鐘，使在加入乳胱氨酸之前能再附著。收集細胞用于生長周期分析，在MG-63細胞的情況下是刺激21小時后收集，而在Neu 2A細胞的情況下是在再平鋪20小時后收集。然后進行流式細胞計數(shù)器操作。
DNA直方圖通過Becton Dickinson FACScan流式細胞儀獲得。
實施例1120S蛋白酶體和蛋白酶體激活劑PA28的純化20S蛋白酶體是根據(jù)改進Hough等人和Ganoth等人的方法[參考Hough等人(1987)“生物化學(xué)雜志”(J.Biol Chem.)8303-8313]和[GanothD.等人“生物化學(xué)雜志”J.Biol Chem)263 12412-12419.]來純化的。PA28激活劑是通過改進Chu-Ping等人的方法來純化的[Chu Ping M.等人(1992)“生物化學(xué)雜志”(J.Biol.Chem.)267 10515 10523]。兔網(wǎng)織紅細胞從Green Hectares獲得(Oregon，WI)，通過懸浮在冰冷的PBS中并于2000×g離心15分鐘將網(wǎng)織紅細胞清洗三次。最后一次清洗后、于1.5倍體積的含lmM二硫蘇糖醇的冷的蒸餾水裂解細胞。然后將混合物于250psi之下經(jīng)過Glas-Co Bio-霧化器(Nebulizer)以確保細胞完全裂解。于100,000g將裂解液離心1小時以去除細胞碎屑。上清液(提取物)加至20mM HEPES pH7.6，1mM二硫蘇糖醇(緩沖液A)中，以0.2μM濾膜過濾并加至用A緩沖液平衡的DE52陰離子交換柱上。以5倍體積的A緩沖液沖洗，吸附的蛋白質(zhì)用2.5倍體積含500mM NaCl的A緩沖液洗脫。洗脫液(第II部分)用硫酸銨調(diào)節(jié)至38％飽和，于10,000×g離心20分鐘。上清液用硫酸銨調(diào)節(jié)至85％飽和，于10,000×g離心20分鐘，得到的沉淀重懸于少量的A緩沖液中并以4L緩沖液A透析過夜。透析液(第IIB部分)含有20S蛋白酶體和PA28激活劑，其加至Mono Q陰離子交換柱，用40倍柱體積的0至500mM NaCl梯度進行洗脫。
20S蛋白酶體對柱組分測試十二烷基硫酸鈉刺激Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC水解活性。收集活性組分，稀釋至50mM[NaCl]濃度，力至1毫升肝素瓊脂糖凝膠Hi-Trap柱上，用20倍柱體積的50mM至500mM NaCl梯度進行洗脫，收集活性組分，再用30,0000 MWCO Centricon離心濃縮器來濃縮。將濃縮液加至Superose 6大小排阻層析柱，以含10mM NaCl的緩沖液A洗脫。收集通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析鑒定為純的活性組分并于-80℃下貯存以備后用。PA28對柱組分(Vide supra)測定其對外源20S蛋白酶體水解SUC-亮氨酰-亮氨酰-纈氨酰-酪氨酰-AMC的活性的刺激能力。收集活性組分并稀釋至10mM NaCl中。將該物質(zhì)于1毫升Resource Q陰離子交換柱上用40倍柱體積的10-500mM NaCl梯度進一步純化和濃縮。收集活性組分，用10,000MWCO Centricon離心濃縮器來濃縮。濃縮液再通入Superdex 200大小排阻層析柱，以含100mM NaCl的緩沖液A洗脫?；钚越M分以十二烷基硫酸鈉-聚丙酰胺凝膠電泳鑒定其純度，收集純的活性組分并貯存于-80℃下備用。
實施例12乳胱氨酸對蛋白酶體活性的滅活2毫升的測試緩沖液(20mM HEPES，0.5mM EDTA，pH8.0)和溶在DMSO的Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC加入3毫升的熒光樣品池中，將樣品池置入日立F-2000型熒光分光光度計的套管室夾中。以循環(huán)水浴將溫度保持在37℃。加入0.3μg的蛋白酶體和3.5μg的PA28，隨著游離AMC的產(chǎn)生，在440nm處(發(fā)射波長380nm)熒光增加，由熒光的增加來監(jiān)測反應(yīng)的進行。由于受20S-PA28復(fù)合體形成緩慢，反應(yīng)進行的曲線表現(xiàn)出有持續(xù)1-2分鐘的滯后期。在達到底物水解的穩(wěn)態(tài)后，加入乳胱氨酸至1μM的終濃度，對反應(yīng)監(jiān)測1小時。由LABCALC(Galactic)軟件于微電腦上收集熒光(F)對時間(t)的數(shù)據(jù)。滅活常數(shù)值(Kinact)是以該數(shù)據(jù)對下列一級方程式的非線性least-squares-fit(最小平方適合度)來估計的F＝A(l-ekt)+C其中C＝Ft＝0，A＝Ft＝C，F(xiàn)t＝0由于乳半胱氨酸水解的動力學(xué)復(fù)雜和蛋白酶體滅活機制的復(fù)雜，蛋白酶體滅活的動力學(xué)也是復(fù)雜的這一事實反應(yīng)在曲線的調(diào)適上。所測反應(yīng)進行曲線與由把所述數(shù)據(jù)適合于以上方程式而產(chǎn)生的“最佳適合度”，最佳調(diào)適曲線有一個小的系統(tǒng)偏差。對滅活常數(shù)的評估是由這一簡單動力學(xué)模式達到的。
實施例13在C2C12細胞中的蛋白質(zhì)分解的抑制C2C12細胞(鼠成肌細胞株)用35硫甲硫氨酸標(biāo)記48小時。用添加含2mM未標(biāo)記的甲硫氨酸的相同的培養(yǎng)基洗滌并預(yù)先培養(yǎng)2小時。除去培養(yǎng)基，并以新鮮的含50％血清和某種濃度待測化合物的預(yù)先培養(yǎng)基取代該培養(yǎng)基。然后除去培養(yǎng)基，再補加入10％三氯醋酸、離心。對三氯醋酸可溶性部分做放射性活性計數(shù)。蛋白酶解的抑制是以三氯醋酸可溶性部分放射性活性減少的百分比來計算。據(jù)此數(shù)據(jù)，每一化合物的IC50就可計算出。
化合物可以定性分成++、十和0幾個等級，其中++表示比十大，而0表示很小或沒有活性，可能是因不溶解、不穩(wěn)定或其他原因造成。例如，在乳胱氨酸類中，化合物I-1，I-2和I-3屬于++等級，化合物I-4屬+等級，而I-5是0。對于類似于內(nèi)酯的P系列化合物，P-1至P-4屬++等級，化合物P-5和P-6屬+等級，而化合物P-7則屬0類。
實施例14化合物I-1的合成(3R，4S，5R，1′S)-4-羥基-5(1′-羥基-2′-甲基丙基)-3-甲基吡咯烷-2-酮-5-羧酸[10毫克，43.2毫摩爾依照Corey等人所描述的途徑制備(Corey E.J.and Reichard G.A.“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem Soc.)1992.114，10677]溶在0.4毫升無水二氯甲烷中，然后按順序用3-乙胺(18.0毫升，0.13毫摩爾，3.0當(dāng)量)和13.0毫克雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(51.1毫克，12當(dāng)量)和芐硫醇(8.0毫升，6.8毫摩爾，1.58當(dāng)量)處理。
在室溫下將溶液攪拌5小時，然后用二氯甲烷稀釋，再用水清洗。水層再用乙酸乙酯萃取，合并有機層，用硫酸鎂干燥。過濾除去溶劑得到的粗的固體，用19∶1己烷/乙酸乙酯研制，過濾收集。所得的白色固體再溶于少量乙腈，此清澈的溶液再用水稀釋。然后冷凍及冷凍干燥，過夜。可得8.0毫克想要的硫酯I-1(55％)，其是松散的白色固體。1H NMR(DMSO-d6300MHz)d.8.34(S，1H，NH)、7.19-7.28(m，5H)、5.40(d，1H，3J＝6.4Hz，OH)、5.11(d，1H，3J＝7.4Hz，OH)、4.39(t，3J＝6.4Hz)、4.04(S，2H)、3.76(t，1H，3J＝7.4Hz)、2.62(m，1H)、1.55(m，1H)、0.90(d，3H，3J＝7.5Hz)、0.85(d，3H，3J＝6.6Hz)、0.66(d，3H，3J＝6.8Hz)。
實施例15化合物I-2的合成向谷胱甘肽(360毫克，1.17毫摩爾)溶在11毫升水的溶液中加入1.35毫升1.004N氫氧化鈉水溶液溶液。然后將此溶液再加入新制的clasto-乳胱氨酸-β-內(nèi)酯[49.0毫克，0.23毫摩爾，依據(jù)Corey等人所描述的途徑制備(1992，“化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Chem.Soc.)114，10677]溶在10毫升的乙腈中的溶液中，室溫下攪拌4小時后，通過緩慢加入1N鹽酸水溶液將pH調(diào)至約4左右，抽真空除去乙腈，把水層冰凍并冷凍干燥，所得的固體再溶于水中，過濾再行冷凍干燥。所得白色固體以反相高效液相層析來純化。(Waters PrepDelta-Pak，19×300mm C18柱，用98％-0.05％三氟醋酸/水和2％-0.05三氟醋酸/甲醇-80％ 0.05％三氟醋酸/水和20％ 0.05％三氟醋酸/甲醇洗脫，以5毫升/每分鐘洗脫65分鐘)。純的組分冷凍干燥后可得谷胱甘肽硫酯加合物I-2。(48毫克，40％)其是松散的白色固體。1H NMR(DMSO-d6.300MHz)、d7.73-8.26(m，4H)、5.28(bs，1H，OH)、5.09(bs，1H，OH)、4.44(m，1H)、4.37(bd，1H，3J＝5.9Hz)、3.74(m，2H)、3.23(dd，1H，J＝13.3，4.6Hz)、2.95(dd，1H，J＝13.3，8.8Hz)、2.62(m，1H)、2.29-2.32(m，2H)、1.98-2.08(m，2H)、1.51-1.63(m，1H)、0.92(d，3H，3J＝7.5Hz)、0.86(d，3H，3J＝6.6H)，0.71(d，3H3J＝6.7Hz)。
實施例16化合物I-4的合成(3R，4S，5R，1′s)-4-羥基-5(1′-羥基-2′-甲基丙基)-3-甲基-吡咯烷-2-酮-5-羧酸[20.0毫克，86.5毫摩爾，依據(jù)Corey等人，E.J.rEICHARD，G.A.所描述的途徑制備(1992，“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem Soc)114，10677]溶于1.0毫升乙晴，然后在0℃下用1，8-二氮二雜環(huán)[5，4，0]十一碳-7-烯(14.0毫升，93.6毫摩爾，1.08當(dāng)量)處理后再用芐基溴(12.0毫升，101毫摩爾，1.17當(dāng)量)處理。室溫下攪拌過夜，在乙酸乙酯和水之間分配。水層用乙酸乙酯萃取三次，再合并有機層，再用硫酸鎂干燥，過濾，然后去除溶劑得到粗的固體，用己烷研制，過濾并收集。所得的白色固形物以少量的乙腈溶解，此清澈的溶液再用水稀釋、冷凍并冷凍干燥過夜?？傻?.7毫克想要的酯1-4(24％)，其是松散的白色固體。1HNMR(DMSO-d6300MHz)d8.02(s，1H，NH)、7.31-7.44(m，5H)、5.45(d，1H，3J＝6.4Hz，OH)、5.11(d，1H，2J＝12.5Hz)、5.03(d，1H，3J＝7.2Hz，OH)、5.00(d，1H，2J＝12.5Hz)、4.31(t，3J＝6.4Hz)、3.76(t，1H，3J＝7.2Hz)、2.68(m，1H)、1.52(m，1H)、0.89(d，3H，3J＝7.4Hz)、0.85(d，3H，3J＝6.6Hz)、0.67(d，3H，3J＝6.7Hz)。
實施例17化合物P-2的合成
(3S，7aR)-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮是由已知的方法(Thottathil J.K.等人“有機化學(xué)雜志”(J.Org.Chem.)1986，51，3140)從D-焦谷氨酸經(jīng)三個步驟制備并被轉(zhuǎn)化成(3S，7aR)-3-苯基-1氫吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮，該轉(zhuǎn)化是以Hamadn等人報導(dǎo)的方法[“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem Soc.)，1989.111，1524]通過2個步驟進行(硒基化及氧化脫去法)。然后將(3S，7aR)-3-苯基-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮轉(zhuǎn)變成(3S，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-7-羥基-3-苯基-5、6、7、7a-四羥基-1氫-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮，以類似于Uno等人報導(dǎo)的方法(“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chen Soc.)1994，116.2139)用6個步驟進行轉(zhuǎn)化。(3S，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-7-羥基-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮(70毫克，0.21毫摩爾)溶在1毫升吡啶中，再用32毫升乙酸酐(0.34毫摩爾，1.6當(dāng)量)于室溫下處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，于真空中除去溶劑可得77毫克想要的(3S，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-7-乙酰氧基-3-苯基-5、6、7、7a 四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮(97％)，其是一黃色油狀物質(zhì)，用于如下步驟。
粗的(3S，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-7-乙酰氧基-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮(75毫克，0.2毫摩爾)，溶在5毫升甲醇中，在有置于碳上的50毫克20％的氫氧化鈀存在下，將其置于1大氣壓的氫氣下。在薄層層析法分析(1∶1己烷/乙酸乙酯)顯示反應(yīng)已結(jié)束時，把混合物過濾并在真空中濃縮，可得55毫克(97％)想要的伯醇。不進行任何純化，以類似于Uno等人報導(dǎo)的方法(“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem Soc.)1994，116，2139)用2個步驟(Jone′s氧化，皂化作用)轉(zhuǎn)變成(4S，5R，1′S)-4-羥基-5-(1′-羥基-2′-甲基丙基)-吡咯烷-2-酮-5-羧酸。(4S，5R，1′S)-4-羥基-5-(1′-羥基-2′-甲基丙基)-吡咯烷-2-酮-5-羧酸(7.0毫克32毫摩爾)溶于2毫升1∶1乙腈/四氫呋喃，在室溫下和2-(1H-Benzotriazol-l-yl)-1，1，3，3，-tetrafluoroborate)(11.0毫克，34毫摩爾，1.1當(dāng)量)反應(yīng)，接著以三乙胺(0.36毫摩爾，11當(dāng)量)處理。在室溫下把混合物攪拌30分鐘，于真空中濃縮。急聚層析(230-400目SiO，用乙酸乙酯洗脫)最后可得3毫克的純內(nèi)酯P-2(47％)，其是一白色固體。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)d8.95(bs，1H，NH)、5.64(d，1H，3J＝6.7Hz，OH)、5.26(d，1H，3J＝6.0Hz，OH)、3.78(dd，1H，3J＝6.7、3.5Hz)、2.81(dd，1H，2J＝19.2Hz，3J＝6.0Hz)、2.60(d，1H，2J＝19.2Hz)、17.4(m，1H)、0.90(d，3H，3J＝6.9Hz)、0.68(d，3H，3J＝6.8Hz)。
實施例18化合物P-3的合成Clasto-乳胱氨酸-β-內(nèi)酯(5.0毫克，23.4毫摩爾；以Corey，E.J.Reichard，GA)等人描述的途徑制備(“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem，Soc.)1992，114，10677)溶于1.5毫升吡啶中，于室溫下再用乙酸酐(40毫升，0.42毫摩爾，18當(dāng)量)處理。于室溫下將溶液攪拌過夜，于真空中除去吡啶，加入2毫升甲苯，可得淡棕色固體。用己烷清洗固體三次，過濾，可得5.5毫克的純的乙酯P-3(93％)，其是白色固體。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)d9.11(bs，1H，NH)、5.33(d，1H，3J＝6.1Hz)、5.21(d，1H，3J＝5.0Hz)、2.84(m，1H)、2.06(s，3H )、1.90(m，1H)、1.08(d，3H，3J＝7.5Hz)、0.87(d，3H，3J＝6.9Hz)、0.78(d，3H，3J＝6.8Hz)。
實施例19化合物P-4的合成(3S，7aR)-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮是由已知的方法(Thottathil，J.K.等人“有機化學(xué)雜志”(J.OrgChem)1986，51，3140)從D-焦谷氨酸經(jīng)三個步驟制備并可轉(zhuǎn)化成(3S，7aR)-3-苯基-1氫-吡咯并[1，2-C]惡唑-5-酮，該轉(zhuǎn)化是以Hamad等人報導(dǎo)的方法(“美國化學(xué)學(xué)會雜志(J.Am.Chem Soc.)1989，111.1524)用2個步驟(硒基化及氧化脫去法)進行，然后將(3S，7aR)-3-苯基-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮轉(zhuǎn)化成(3S，6R，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-6-羥基-7-羧基-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1氫-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮，該轉(zhuǎn)化是以類似于Uno等人報告的方法(J.Am.Chem Soc，1994，116，2139)用4個步驟進行。
以所述的用于制備P-2的相同的方法將(3S，6R，7S，7aS，1′S)-7a-(1′-乙酰氧基-2′-甲基丙基)-6-羥基-7-羥基-3-苯基-5、6、7、7a-四氫-1H-吡咯并[1，2-C]噁唑-5-酮經(jīng)4個步驟(乙?；?、氫解、氧化及皂化)轉(zhuǎn)化成(3R，4S，5R，1′S)-4-羥基-5-(1′-羥基-2′-甲基丙基)-3-羥基吡咯烷-2-酮-5-羧酸。
用所述的用于制備P-2的方去將(3R，4S，5R，1′S)-4羥基-5-(1′-羥基-2′-甲基丙基)-3-羥基吡咯烷-2-酮-5-羧酸(20毫克，86毫摩爾)轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的β-內(nèi)酯。產(chǎn)生3毫克純的內(nèi)酯P-4(16％)，其是白色固體，1H NMR(DMSO-d6，300MHz)d8.96(s，1H，NH)、6.08(bs，1H，OH)、5.63(d，1H，3J＝6.6Hz，OH)、5.12(d，1H，3J＝5.7Hz)、4.31(d，1H，3J＝5.7Hz)、3.72(bt，1H)、1.70(m，1H)、0.88(d，3H，3J＝6.9Hz)、0.72(d，3H，3J＝6.8Hz)。
實施例20化合物P-6的合成Clasto-乳胱氨酸-β-內(nèi)酯(11.8毫克，55.3毫摩爾；以Corey，E.J.；Reichard，G.A.等人描述的途徑制備。“美國化學(xué)學(xué)會雜志”(J.Am.Chem.Soc.)1992，114，10677)溶于0.4毫升新蒸餾的吡啶中，于室溫下用甲磺酰氯(6.0毫升，77.5毫摩爾，1.4當(dāng)量)處理。于室溫下把溶液攪拌2小時，再以更多的甲磺酰氯清洗(10.0毫升，129毫摩爾，2.3當(dāng)量)，于室溫下攪拌過夜，以3×2毫升的甲苯于真空中濃縮暗黑色的溶液可得黃色固體。急聚層析(230-400目SiO2，1∶1己烷/乙酸乙酯洗脫)，最后可得12.6毫克的純的甲磺酸鹽P-6(78％)。其是松散的白色固體。1H NMR(CDCl3，300MHz)d6.28(bs，1H，NH)、5.27(d，1H，3J＝6.1Hz)、5.06(d，1H，3J＝4.0Hz)、3.11(s，3H)、2.80-2.89(m，1H)、2.24-2.34(m，1H)、1.33(d，3H，3J＝7.5Hz)、1.14(d，3H，3J＝7.0Hz)，1.05(d，3H，3J＝6.8Hz)。其他實施方案從上述說明，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可以容易地知道本發(fā)明的必要特性，并在不違背本發(fā)明的精神及范圍下可對本發(fā)明進行各種改變和修改以適于各種用途和情況。因此，其他實施方案也在權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。序列表(1)一般資料(i)申請人President and Fellows of Harvard College(ii)發(fā)明名稱乳胱氨酸類似物(iii)序列數(shù)17(iv)聯(lián)系地址
(A)住址Fish & Richardson P.C.
(B)街225 Frankin Street(C)城市波士頓(D)州MA(E)國家美國(F)郵政編碼021110-2804(v)電腦可讀形式(A)媒介型式軟盤(B)電腦IBM PC兼容(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件Patent In release#1.0 1.30版(vi)目前申請資料(A)申請?zhí)柎a(B)填寫日期1996年4月12日(C)分類(viii)在先申請資料(A)申請?zhí)柎a美國08/421,583(B)填寫日期1995.4.12(viii)代理人/代理人資料(A)名字Freeman，John W.
(B)注冊號碼29，066(C)參考資料/判決記錄號碼00246/197W01(ix)電話聯(lián)系資料(A)電話617/542 5070(B)傳真617/542/8900(C)電報200154(2)序列1的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)
(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列1Thr Thr Thr Leu Ala Phe Lys Phe Arg His Gly Gly Ile Ile Ala1 5 10 15(2)序列2的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列2Thr Thr Thr Leu Ala Phe Lys Phe Arg His Gly Val Ile Val Ala1 5 10 15(2)序列3的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列3Thr Thr Thr Leu Ala Phe Lys Phe Gln His Gly Val Ile Ala Ala1 5 10 15(2)序列4的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列4Thr Thr Thr Leu Ala Phe Arg Phe Gln Gly Gly Ile Ile Val Ala1 5 10 15(2)序列5的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列5Thr Thr Thr Val Gly Ile Thr Leu Lys Asp Ala Val Ile Met Ala1 5 10 15(2)序列6的資料(i)序列特征(A)長度11個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列6Asp Ala Tyr Ser Gly Gly Ser Val Ser Leu Tyr1 5 10(2)序列7的資料(i)序列特征(A)長度14個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列7Asp Ala Tyr Ser Gly Gly Ala Val Asn Leu Tyr His Val Arg1 5 10(2)序列8的資料(i)序列特征(A)長度14個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列8Asp Ser Tyr Ser Gly Gly Val Val Asn Met Tyr His Met Lys1 5 10(2)序列9的資料(i)序列特征(A)長度21個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列9Val Ile Glu Ile Asn Pro Tyr Leu Leu Gly Thr Met Ala Gly Gly Ala1 5 10 15Ala Asp Cys Ser Phe20(2)序列10的資料(i)序列特征(A)長度24個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列10Val Ile Glu Ile Asn Pro Tyr Leu Leu Gly Thr Leu Ala Gly Gly Ala1 5 10 15Ala Asp Cys Gln Phe Trp Glu Arg20(2)序列11的資料(i)序列特征(A)長度25個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列11Val Ile Glu Ile Asn Pro Pro Tyr Leu Leu Gly Thr Met Ser Gly Cys1 5 10 15Ala Ala Asp Cys Gln Tyr Trp Glu Arg20 25(2)序列12的資料(i)序列特征(A)長度16個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列12Gly Tyr Ser Tyr Asp Leu Glu Val Glu Glu Ala Tyr Asp Leu Ala Arg1 5 10 15(2)序列13的資料(i)序列特征(A)長度15個氨基酸
(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列13Gly Tyr ser Asp Leu Glu Val Glu Gln Ala Tyr Asp Leu Ala Arg1 5 10 15(2)序列14的資料(i)序列特征(A)長度16個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列14Gly Tyr Arg Pro Asn Leu ser Pro Glu Glu Ala Tyr Asp Leu Gly Arg1 5 10 15(2)序列15的資料(i)序列特征(A)長度19個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列15Thr Thr Ile Ala Gly Val Val Tyr Lys Asp Gly Ile Val Leu Gly Ala1 5 10 15Asp Thr Arg(2)序列16的資料(i)序列特征(i)序列特征(A)長度19個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列16Xaa Xaa Ile Ala Gly Val Val Tyr Lys Asp Gly Ils Val Leu Gly Ala1 5 10 15Asp Tnr Arg(2)序列17的資料(i)序列特征(A)長度9個氨基酸(B)類型氨基酸(C)鏈型無關(guān)(D)拓樸結(jié)構(gòu)線性，(ii)分子種類蛋白質(zhì)(xi)序列描述序列17Thr Thr Ile Ala Gly Val Val Tyr Lys1 5附錄AcO- 乙酰氧基-Me-甲基-NHAc- 亞氨基乙?；?OTBS- 叔丁基二甲硅烷基-OTf三氟甲基磺酸酯Tf-三氟甲基-
權(quán)利要求
1.一種具有下式的化合物，
其中Z1是O、S、SO2、NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、二個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)，或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，當(dāng)Z1是SO2時，X1是二個單鍵H；在(R)或(S)構(gòu)型中，Z2是O、S、NH、NRd，CHOR1或CHR1，其中Rd為C1-6烷基，及R1為H、鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、NRdRe(當(dāng)Z2是CHOR1的除外)、或任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或是R1和R2結(jié)合為一二價部分，條件是當(dāng)R1和R2結(jié)合時，則此時Z1為NH或NRa，及Z2是CHR1；Re為H、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，及二價部分形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基，當(dāng)R1和R2結(jié)合形成一C3-8雜芳基或C6-12芳基時，CHR1的H則被去除；R2為C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)或NRg(SRf)，每一Rf和Rg獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、或R1和R2結(jié)合為一二價部分，此二價部分形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基，當(dāng)R1和R2結(jié)合形成一C3-8雜芳基或C6-12芳基時，則CHR1的H去除；及當(dāng)R1和R2結(jié)合時，A1和L0其中之一為(C1-4烷基)氧羰基或羧基，A1和L0中的另一個的片段式量至少為20；A1為任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)或-NRi(NRiRi′)，其中Rh選自II、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10?；1-6烷基磺?；⒓癈6-10芳基磺?；?；并且每一Ri和Ri′獨立選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10酰基；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳基烷叉，C6-14芳基烷撐或去除，并且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及L0是-(C＝X2)-L1、-(C＝X2)-L2、或
，其中X2是O或S；L2是H、C1-6鹵代烷基、C1-6烷基、或C6-14芳基，及L1是一有0到25個碳原子、0至10個雜原子及0至6個鹵素原子的部分，L1通過一個氧或硫原子連結(jié)至和X2連結(jié)的碳原子上，其中當(dāng)L0是羧基或(C1-4烷基)-氧-羰基和A1是烷基時，A1是C5-20烷基；其中A1和L0中僅有一個選自羧基或(C1-4烷基)-氧-羰基；其中當(dāng)Z1和Z2皆為NH及A1為甲氧基時，L1至少具有3個碳原子；及當(dāng)Z1是NH及Z2是(R)CHR1時，L1在其有5個雜原子時，有0至3個非芳香非環(huán)的碳原子，L1在只有1個氧原子時有6至15個非芳香非環(huán)的碳原子，L1在有3個鹵素原子時有0，1，3或5個非芳香的碳原子。
2.如權(quán)利要求1的化合物，其中Z2是CHR1及Z1是NH或NRa。
3.如權(quán)利要求1的化合物，其中L0是C2-16環(huán)氧乙烷基；L1是選自羥基、C1-12烷氧基、C1-12烷基磺酰氧基、C6-20芳磺酰氧基、C7-20芳烷基、C6-20芳氧基、C6-20芳烷羰氧基、C2-8烷羰氧基、C6-20芳烷羰基硫代、C6-10芳基硫代、C2-8烷基羰基硫代、及C1-12烷基硫代；或L2是C1-2鹵代烷基、C1-6烷基、或H。
4.如權(quán)利要求1的化合物，其中Z2是O、S、NH、或NRd。
5.如權(quán)利要求1的化合物，其中Z2是O、S、NH、NRd或CHR1；及Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基。
6.一種具有下式的化合物
其中Z1是O、S、SO2、NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，Rb和Rc均獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，條件是當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd或是NRdRe(每一Rd及Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-5炔基)；Z3是O、S、NH、或NR1，Ri為C1-6烷基；X2是O或S；及A1為任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具有下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵代甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自II、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10?；1-6烷基磺?；?、及C6-10芳基磺?；患懊恳籖i和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基C6-14芳基烷叉，C6-14芳基烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和Xj結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；當(dāng)X4是(S)構(gòu)型的羥基和-(CH2)n-R2X3是異丙基時，R1就是H、OH或ORd；及當(dāng)X4是(R)構(gòu)型的羥基，m是0，且R1是C1-6烷基時，-(CH2)n-R3X3部分有5至20個碳原子。
7.如權(quán)利要求6的化合物，其中Z1是NH或NRa。
8.一種具有下式的化合物
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或鹵素；Z2是O、S、NH、或NRj，Rj為C1-6烷基；R1為(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素，任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe，其中每一Rd及Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或鹵素；X2是O或S；A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)、亞乙烯基、-C＝NoRh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳基烷叉，C6-14芳基烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；當(dāng)X1是兩個單鍵H且R1是一個氧時，則R1片段的式量至少為30原子質(zhì)量單位；當(dāng)X1是兩個單鍵H且R1是2H，及A1是烷基時，則A1至少有3個碳原子；結(jié)合的A1、R1和X1至少有一個碳原子、鹵素、或雜原子；當(dāng)X1是兩個單鍵H，及R1是H，X2是O，及Rh是烷基時，則Rh是C4-6烷基；當(dāng)n是2時，Rh是C1-6鹵代烷基。
9.一種具有下式的化合物
其中Z2是O、S、NH、或NRj，Rj為C1-6烷基；X1是O或S；R1為(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素，任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe，其中每一Rd及Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-5炔基；R2是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C6-12芳基，C3-8雜芳基，或鹵素；X2是O或S；A1為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳基烷叉，C6-14芳基烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
10.一種具有下式的化合物
其中Z1是O、S、NH、或NRj，Ri為C1-6烷基；X1是O或S；R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe(每一Rd及Re獨立地為C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；R2是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C6-12芳基，C3-8雜芳基，或鹵素；Ra是C1-6烷基；以及A1為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具有下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；喖谆?、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳基烷叉，C6-14芳基烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
11.一種具有下式的化合物
其中X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z1是O、S、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe(每一Rd及Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，其形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；R2是C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基)，或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，此二價部分形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；X2是O或S；以及A1是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，每一個A1和A2獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；喖谆?、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
12.一種具有下式的化合物
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或鹵素；Z2是O、S、NH或NRj，Rj為C1-6烷基；R1是(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、OR、SR或NRR，每一R和R獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；R2是C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基)，或R1和R2結(jié)合為一個二價部分、此二價部分形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；X2是O或S；以及每一個A1和A2獨立地是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，及獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Rj和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
13.一種具有下式的化合物
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H；每一個A1和A2獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O，C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10酰基；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，且X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；以及R12是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基；結(jié)合的A1、A2、R12、和X1具至少一個碳原子及雜原子。
14.一種具有下式的化合物
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；每一X1和X2獨立地是O或S；每一個A1和A2獨立地是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，及獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
15.如權(quán)利要求1的化合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是CHR1或CHOR1，R1為H、鹵素、C1-6烷基、或C1-6鹵代烷基；R2是ORf；及L0是-(C＝X2)-L1，X2是O，及L1是通過一個硫原子連接到與X2鍵合的碳原子上。
16.如權(quán)利要求15的化合物，其中L1是選自己經(jīng)取代的或未經(jīng)取代的C6-20芳烷羰基硫代，C6-20芳基硫代，C2-8烷基羰基硫代，C1-12烷基硫代。
17.如權(quán)利要求15的化合物，具有下式
18.如權(quán)利要求6的化合物，其中Z1是O、S、SO2、NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，而當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe，其中每一R1和Re獨立為氫，C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基，或C2-5炔基；Z3是O、S、NH、或NRi，Ri是C1-6烷基；X2是O或S；以及A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自II，C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；當(dāng)X4是羥基及-(CH2)n-R3X3是異丙基時，CHX4是(S)構(gòu)型，及當(dāng)X4是羥基，m是0、及Z1是NH時，-(CH2)n-R3X3部分具5至20個碳原子。
19.如權(quán)利要求6的化合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或NRdRe，其中每一Rd和Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基，或C2-5炔基；Z3是O或NH；X2是O或S；以及A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為C＝O、或(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、或ORh，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基，及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6，炔基、C1-10酰基、C1-6烷基磺?；?、及C6-10芳基磺酰基；n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、或C6-10芳基；或結(jié)合的R3和X3為任何任何天然的α-氨基酸的側(cè)鏈基。
20.如權(quán)利要求19的化合物，Z1是NH及Z3是O。
21.如權(quán)利要求19的化合物，Z1和Z3都是NH。
22.如權(quán)利要求6的化合物，具有一化學(xué)式，其中有至少四個以下限制條件Z1是NH，或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、羥基、或ORd，Rd為C1-6烷基；X2是O；Z3是O或NH；及A1是任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基，或CHX4，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、或ORh，Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6?；1-6烷基磺?；?、及C6-10芳基磺酰基；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷叉、亞苯基(phenylene)、C6-14芳基烷叉、或去除，及X3為H。
23.選自下式的權(quán)利要求22的化合物
24.一種藥物組合物，其含有下式的化合物和一種可藥用的載體
其中Z1是O、S、SO2、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H、E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是O、S、NH、或NRd、CHR1、或(R)或(S)構(gòu)型的CHOR1，其中Rd為C1-6烷基，及R1為H、鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、NRdRe(當(dāng)Z2是CHOR1時除外)、或任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或是R1和R2結(jié)合為一個二價的部分，條件是當(dāng)R1和R2連在一起時，Z1為NH或NRa，及Z2為CHR1；Re為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-6炔基，及該二價部分形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)烷基、或C6-12芳基，當(dāng)R1和R2結(jié)合形成一個C3-8雜芳基或C6-12芳基時，CHR1的H則去除；R2為C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基，C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基)、或R1和R2結(jié)合為一個二價部，此二價部分形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基，當(dāng)R1和R2結(jié)合形成一個C3-8雜芳基或C6-12芳基時，則CHR1的H去除；A1為H，任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10?；?、C1-6烷基磺?；⒓癈6-10芳基磺?；患懊恳籖i和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；及L0是H或有1至25個碳原子，0至10個雜原子和0至6鹵原子的有機部分。
25.如權(quán)利要求24的藥物組合物，其中Z2是CHR1和Z1是NH或NRa。
26.如權(quán)利要求24的藥物組合物，其中L0是H或-(C＝X2)-L1，X2是O及L1是通過一個氧或硫原子連接至X2連結(jié)的碳原子上；其中A1和L0中只有一個是選自羧基及(C1-4烷基)氧羰基；其中L1是羥基、C1-12烷氧基、C1-12烷基磺酰氧基、C6-10芳基磺酰氧基、C7-10芳烷基、C6-20芳氧基、C6-20芳烷羰氧基、C2-8烷羰氧基、C6-20芳烷羰基硫代、C6-20芳基硫代、C2-8烷羰基硫代、或C1-12烷基硫代。
27.如權(quán)利要求24的藥物組合物，其中L1是由一個硫原子連接至與X2連結(jié)的碳原子上。
28.如權(quán)利要求27的藥物組合物，其中L1是取代的或未經(jīng)取代的C6-20芳烷羰基硫代，C6-20芳基硫代，C2-8烷羰基硫代或C1-12烷基硫代。
29.如權(quán)利要求24的藥物組合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是CHR1或CHOR1，其中R1為H、鹵素、C1-6烷基、或C1-6鹵代烷基；R2是ORf；及L0是(C＝X2)-L1，X2是O及L1由一個硫原子連接至與X2連結(jié)的碳原子上。
30.如權(quán)利要求29的藥物組合物，其包括一選自下式的化合物
31.如權(quán)利要求24的藥物組合物，其中Z2是O、S、NH、或NRd。
32.一種包含下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
式中Z1是O、S、SO2、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素，條件是當(dāng)Z1是SO2時，X1是兩個單鍵H；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1、其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、一任何天然氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd或是NRdRe，其中每一Rd及Re，獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-6炔基)；Z3是O、S、NH、或NRj，Ri為C1-6烷基；X2是O或S；及A1為H，任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、C1-10酰基、C1-6烷基磺酰基、及C6-10芳基磺酰基；及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
33.如權(quán)利要求32的藥物組合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、一任何天然氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd或是NRdRe(每一Rd及Re獨立地為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基或C2-5炔基)；Z3是O或NH；X2是O或S；及A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為C＝0或(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵代甲基或ORh，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-10酰基、C1-6烷基磺?；⒓癈6-10芳基磺?；?；n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、或C6-10芳基；或R3和X5結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
34.如權(quán)利要求33的藥物組合物，其中X2是O，及A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基，或X4是鹵素、甲基、鹵甲基、或ORh，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C1-10?；?、C1-6烷基磺?；⒓癈6-10芳基磺?；?；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷撐、或去除；m是0、1、或2及n是0或1；及X3為H。
35.如權(quán)利要求32的藥物組合物，其包含一種選自下式的化合物clasto-乳胱氨酸(9R)-β-內(nèi)酯、clasto-乳胱氨酸三氟乙酯、去羧酸基乳胱氨酸、乳胱氨酰胺及苯乙酰乳胱氨酸。
36.如權(quán)利要求32的藥物組合物，其中Z1是NH或NRa；X1是O或S；Z2是(R)或(S)構(gòu)型的CHR1，其中R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、羥基、或ORd，Rd為C1-6烷基；Z3是O或NH；及A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或CHX4，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、或ORh，其中Rh選自 H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6?；1-6烷基磺?；?、及C6-10芳基磺酰基；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉、C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉、或去除；m是0、1、或2及n是0或1；及X3為H。
37.如權(quán)利要求32的藥物組合物，其包含一種選自如權(quán)利要求23的式的化合物。
38.一種含有選自下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
式中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z2是O、S、NH 、或NRi，Rj為C1-6烷基；R1為(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe，其中每一Rd及Re獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基或鹵素；X2是O或S；A1為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；喖谆?、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
39.一種含有下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中Z1是O、S、NH、或NRj，Ri為C1-6烷基；X1是O或S；R1為(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRc，其中每一Rd及R3獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基，C2-6烯基、或C2-6炔基)；R2是H，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C6-12芳基，C3-8雜芳基，或鹵素；X2是O或S；以及A1為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基，及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
40.一種含下式化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中Z1是O、S、NH、或NRj，Ri為C1-6烷基；X1是O或S；R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe，其中每一Rd及Re，獨立為C1-6烷基、C1-6、鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；R2是H，C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基，C6-12芳基，C3-8雜芳基，或鹵素；Ra是C1-6烷基；以及A1為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，n是0、1、2或3；R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
41.一種含有下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中X1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)、或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z1是O、S、SO2、NH、或NRa，Ra是C1-6烷基；R1為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、羥基、鹵素、任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd、或是NRdRe，其中每一Rd及Rc獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素)；或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，其形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、-ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)(每一Rf和Rg獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基)，或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，此二價部分形成一C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基，X2是O或S；以及A1是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，每一個A1和A2獨立地是H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NRiRi′、磺酰基、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10酰基；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
42.一種含有下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；X 1是O、S、CH2、兩個單鍵H，E或Z構(gòu)型的CH(Rb)，或E或Z構(gòu)型的C(Rb)(Rc)，每一Rb和Rc獨立地為C1-6烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；Z2是(R)或(S)構(gòu)型，且為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基羥基、鹵素、任何任何天然氨基酸的側(cè)鏈基、ORd、SRd或NRdRe，其中每一Rd和Re獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C6-12芳基、C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或鹵素；R2是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、疊氮基、C2-6炔基、鹵素、ORf、SRf、NRfRg、ONRfRg、-NRg(ORf)、或-NRg(SRf)，其中每一Rf和Rg獨立為H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基或C2-6炔基，或R1和R2結(jié)合為一個二價部分，此二價部分形成一個C3-8環(huán)烷基、C3-8雜芳基、C3-8雜環(huán)基、或C6-12芳基；X2是O或S；以及每一個A1和A2獨立地是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，并獨立的為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；喖谆?、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；籱是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
43.一種具有下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基，X1是O、S、CH2、兩個單鍵H；每一個A1和A2都獨立地是H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)、亞乙烯基、-CONORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基，C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基；以及R12是H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基。
44.一種含有下式的化合物和可藥用的載體的藥物組合物，
其中Z1是NH或NRa，Ra是C1-6烷基；每一X1和X2獨立地是O或S；每一個A1和A2獨立地是以(R)或(S)構(gòu)型存在的，并獨立地為H、任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基、或具下式，-(CH2)m-Y-(CH2)n-R3X3其中，Y為O、S、C＝O、C＝S、-(CH＝CH)-、亞乙烯基、-C＝NORh，-C＝NNRiRi′、磺?；?、亞甲基、(R)或(S)構(gòu)型的CHX4、或可去除，X4為鹵素、甲基、鹵甲基、ORh、SRh、NRiRi′、-NRi(ORh)、或NRi(NRiRi′)，其中Rh選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、和C2-6炔基、及每一Ri和Ri′獨立地選自H、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C2-6烯基、或C2-6炔基、及C1-10?；?；m是0、1、2或3，n是0、1、2或3；及R3是直鏈或支鏈的C1-8烷叉，直鏈或支鏈的C1-8烷撐，C3-10環(huán)烷叉，C3-10環(huán)烷撐、亞苯基、C6-14芳烷叉，C6-14芳烷撐、或去除，及X3為H、羥基、硫羥基、羧基、氨基、鹵素、(C1-6烷基)氧羰基、(C7-14芳烷基)氧羰基、或C6-14芳基；或R3和X3結(jié)合為任何任何天然α-氨基酸的側(cè)鏈基。
45.一種治療炎癥的方法，其包括向受治療者給藥抗炎有效劑量的權(quán)利要求24或權(quán)利要求32的化物。
46.權(quán)利要求45的方法，其中的炎癥與損傷或感染有關(guān)。
47.權(quán)利要求45的方法，其中的炎癥與變態(tài)反應(yīng)或氣喘有關(guān)。
48.權(quán)利要求45的方法，其中的炎癥與選自下列病癥的病癥有關(guān)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、風(fēng)濕性發(fā)熱、炎性腸疾，糖尿病、重癥肌無力、多發(fā)性硬化、急性熱病性多神經(jīng)炎、眼結(jié)膜炎、系統(tǒng)性紅斑性狼瘡、腦炎、成人呼呼窘迫癥、氣腫、早老性癡呆癥和肌肉營養(yǎng)不良。
49.權(quán)利要求45的方法，其中的炎癥與骨髓移植或選自腎、肺、心臟、胰、肝和皮膚的實體器官的移植有關(guān)，且該藥物組合物是在移植前、中或后給藥。
50.權(quán)利要求45的方法，其中該藥物組合物是經(jīng)口給藥。
51.權(quán)利要求45的方法，其中所述組合物是權(quán)利要求34的組合物。
52.權(quán)利要求45的方法，其中所述組合物是權(quán)利要求30的組合物。
53.一種治療癌癥的方法，其包括向受治療者給藥抗癌有效劑量的權(quán)利要求24或32的藥物組合物。
54.權(quán)利要求53的方法，其中的癌癥是選自癌、淋巴瘤、肉瘤和骨髓瘤。
55.權(quán)利要求53的方法，其中所述的癌癥選自腺癌、腺泡細胞腺癌、腎上腺皮質(zhì)癌、牙槽細胞癌、退行發(fā)育性的癌、類基底細胞癌、基底細胞癌、細支氣管癌、支氣管原癌、腎腺癌、胚胎性癌、畸異性癌、纖維層肝細胞癌、濾泡癌、巨細胞癌、肝細胞癌、表皮內(nèi)癌、上皮內(nèi)癌、leptomanigio、髓樣癌、黑色素癌、腦膜癌、mesometonephric、燕麥細胞癌、鱗狀細胞癌汗腺癌、移行細胞癌和管狀細胞癌、成釉細胞肉瘤、血管結(jié)石性肉瘤、葡萄簇狀瘤、子宮內(nèi)膜肉瘤、內(nèi)皮細胞性骨髓瘤、筋膜肉瘤、巨細胞瘤、綠色肉瘤、免疫母細胞瘤、近心臟成骨瘤、Kaposis瘤、白血病性瘤、淋巴肉瘤、髓樣瘤、骨髓瘤、austiogenci瘤、骨膜瘤、網(wǎng)狀細胞肉瘤、球形細胞瘤、紡綞細胞瘤、滑液瘤和毛細管擴張音原性瘤、神經(jīng)母細胞瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、星形細胞瘤、黑素瘤、平滑肌肉瘤、多骨髓瘤、血管瘤、Hodgkin′s疾病、Burkitt′s淋巴瘤、結(jié)狀分化不良淋巴細胞淋巴瘤、結(jié)狀混合淋巴細胞淋巴瘤、結(jié)狀組織細胞淋巴瘤和擴散性淋巴瘤。
56.權(quán)利要求53的方法，其中所述組合物是權(quán)利要求34的組合物。
57.權(quán)利要求53的方法，其中所述組合物是權(quán)利要求37的組合物。
58.一種用于治療牛皮癬的方法，其包括向受治療者給藥有效劑量的權(quán)利要求24或32的化合物。
59.一種用于治療再狹窄的方法，其包括向受治療者給藥有效劑量的權(quán)利要求24或32的藥物組合物。
全文摘要
與乳胱氨酸和乳胱氨酸β－內(nèi)酯有關(guān)的化合物、含有該化合物的藥物組合物以及使用方法。
文檔編號A61P35/00GK1187769SQ96194727
公開日1998年7月15日 申請日期1996年4月12日 優(yōu)先權(quán)日1995年4月12日
發(fā)明者斯圖爾特·L·施萊伯, 羅伯特·F·斯坦德爾特, 加布里爾·芬蒂尼, 蒂莫西·F·加米森 申請人:哈佛普里斯德特和菲羅斯學(xué)院