專利名稱：黃芩甙元作為皮膚及粘膜抗菌劑的作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及已知化合物黃芩甙元(Baicalein)(黃芩素、黃芩新素)的新用途，具體地說是涉及黃芩甙元作為皮膚及粘膜抗菌劑的應(yīng)用。
真菌性皮膚病是由酵母型真菌(Pathogenic yeasts)、皮膚癬菌(Dermatophytes)和絲狀霉菌(Filamentous fungi)引起的世界性傳染病，它的發(fā)生隨著廣譜抗菌素的濫用、環(huán)境污染的加據(jù)、免疫抑制劑的使用，尤其是免疫缺失人群如愛滋病(AIDS)患者的增加而大量增加。平均感染率10-40％，最近20年有所增加，且發(fā)展中國(guó)家大于發(fā)達(dá)國(guó)家。臨床上用于治療皮膚病的抗真菌劑多來源于化學(xué)合成如咪唑類(Imidazoles)或來源于微生物如二性霉素(Amphotericinum B)。從用藥途徑可以把這些藥物分為內(nèi)用(口服)抗真菌劑如灰黃霉素(Griseofulvum)，和外用抗真菌劑如克霉唑(Clotrimazolum)等。外用藥在皮膚病的治療中有非常重要的地位，它是治療皮膚病的重要武器，由于現(xiàn)今臨床使用的藥物(內(nèi)、外用)的抑(殺)菌選擇性差、副作用大、皮膚耐藥性低、透皮吸收能力弱以及治療周期長(zhǎng)等缺點(diǎn)，其治療效果不甚理想，因此，尋找和開發(fā)新的特效低毒抗真菌劑一直是世界各國(guó)藥物研究的熱點(diǎn)領(lǐng)域之一。
黃芩甙元(Baicalein)，又叫黃芩素、黃芩新素。
CAS(Chemical Abstract Service Number)(化學(xué)文摘國(guó)際代碼)491-67-87。
化學(xué)名為5，6，7-三羥基-2-苯基-4氫-1-苯并吡哺-4-酮(5，6，7-trihydroxy-2-phenyl-4H-1-Benzopyran-4-one)，結(jié)構(gòu)式為
分子式為C15H10O5，分子量為270.23。
這是一種熔點(diǎn)264～265℃，能溶于乙醇、丙酮和乙酸乙酯，微溶于氯仿，幾乎不溶于水的黃色針狀晶體(乙醇)。
黃芩甙元最早發(fā)現(xiàn)并分離于唇形科植物黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的根，為黃酮類化合物。以后，又陸續(xù)在同屬植物滇黃芩(S.amoena)、粘毛黃芩(S.viscidula)、甘肅黃芩(S.rehderiana)和川黃芩(S.hypecifolia)等，以及紫薇科植物木蝴蝶(Oroxylum indicum)(種子、莖皮)、車前科植物大車前(Plantago najor)(葉)中找到，提示這些種是黃芩甙元分布最集中的植物群。
現(xiàn)代研究表明，黃芩根含有兩種重要活性成分，即黃芩甙(Baicalin)和黃芩甙元(Baicalein)。一般認(rèn)為黃芩甙是黃芩的最主要活性成分，很多學(xué)者對(duì)其化學(xué)、藥理等進(jìn)行了一些研究，如抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗菌(如黃芩甙對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、結(jié)核桿菌等；黃芩甙對(duì)堇色毛癬菌、白色念珠菌等)、保肝利膽、利尿、解熱等作用，臨床上黃芩甙試用于治療傳染性肝炎、急性膽道感染等。黃芩甙元是植物黃芩另一重要的有效成分，資料表明，該化合物具有抗炎、抗變態(tài)、利尿、利膽和降低膽固醇等作用，值得強(qiáng)調(diào)的是Kubo et al.(1981)用黃芩甙元進(jìn)行了初步的抑制細(xì)菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芩甙元有抗菌活性(Bacillus subtilis、Staphyloccus aureus)。
從研究對(duì)象看，人們重視黃芩甙的醫(yī)療作用，而對(duì)黃芩甙元的認(rèn)識(shí)則遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠?，F(xiàn)有文獻(xiàn)沒有關(guān)于黃芩甙元對(duì)皮膚致病真菌抑制作用的系統(tǒng)報(bào)導(dǎo)，更沒有將其應(yīng)用于治療皮膚及粘膜真菌性皮膚病的研究。
本發(fā)明的目的是提供黃芩甙元作為皮膚及粘膜抗菌劑以及其用于制備皮膚抗菌藥及衛(wèi)生用品的新用途。
本發(fā)明的目的是基于發(fā)現(xiàn)中國(guó)傳統(tǒng)藥用植物黃芩根(Scutellaria baicalensis)的活性成分黃芩甙元(已知化合物)的抗皮膚及粘膜真菌及抗皮膚細(xì)菌而實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明是在發(fā)現(xiàn)黃芩根的有效化合物黃芩甙元具抗真菌特性，然后再用黃芩甙元對(duì)直接分離于皮膚病患者的致病真菌和細(xì)菌進(jìn)行抗菌活性實(shí)驗(yàn)，從而發(fā)現(xiàn)了黃芩甙元具有特異性很強(qiáng)的抗真菌活性以及非特異性抗細(xì)菌活性。
因此，可以將黃芩甙元用作皮膚及粘膜抗菌劑，按照醫(yī)藥上的常識(shí)，其藥理上可接受的鹽類也同樣可作為皮膚及粘膜抗菌劑。
它們的具體應(yīng)用可包括1.用于制備抗皮膚及粘膜真菌的藥物具體方法是按照常規(guī)方法，將有效量的黃芩甙元或其藥理上可接受的鹽類與醫(yī)藥上可接受的賦形劑或/和添加劑配合，制成合適劑型的藥物，用于治療粘膜真菌病及真菌性皮膚病。所說的真菌主要指皮膚及粘膜的致病酵母型真菌，例如白色念珠菌、新型隱球酵母、卵瓶型酵母、光滑球擬酵母、克魯斯假絲酵母和近平滑假絲酵母；以及皮膚癬菌，例如石膏狀小孢菌。
2.用于制備抗皮膚細(xì)菌的藥物具體方法是按常規(guī)方法，將有效量的黃芩甙元或其藥理上可接受的鹽類與醫(yī)藥上可接受的賦形劑或/和添加劑配合，制成合適劑型的藥物，用于治療細(xì)菌性皮膚病或/和真菌性皮膚病的細(xì)菌重復(fù)感染。所說的皮膚細(xì)菌主要指與體臭(腳氣、腋臭)有關(guān)的負(fù)責(zé)菌，主要包括微球菌屬、葡萄菌屬和棒桿菌屬的細(xì)菌。
3.用于制備兼治皮膚及粘膜真菌細(xì)菌病的藥物其具體方法及主要所適用的致病菌與上述第1、2點(diǎn)相同。
4.用于制備對(duì)皮膚及粘膜的真菌病或/和皮膚細(xì)菌病有輔助治療作用的衛(wèi)生用品具體可包括(1).將有效量的黃芩甙元或其藥理上可接受的鹽類與常規(guī)的賦形劑或/和添加劑配合，制成適當(dāng)?shù)念愋?劑型)的衛(wèi)生用品，可以是固體、液體、乳劑、噴霧劑、膏狀等。
(2).在制備現(xiàn)有一般的皮膚或粘膜衛(wèi)生用品時(shí)，在其成份中添加入有效量的黃芩甙元或/和其藥理上可接受的鹽類。所說的衛(wèi)生用品可以是香皂、肥皂、爽身粉、浴液、洗發(fā)香波、漱口水、牙膏、護(hù)膚膏、防曬油、香水等。
本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，黃芩甙元是一種對(duì)粘膜及皮膚致病酵母型真菌以及皮膚癬菌中的石膏狀小孢菌有特效的抗真菌劑，以其作為有效抗菌成分制備的抗皮膚及粘膜真菌藥物，特別適合于治療粘膜及皮膚酵母型真菌感染及頭癬，例如新生兒口腔念珠菌病(鵝口瘡)、嬰幼兒尿布皮損、陰道念珠菌炎、陰莖頭炎、消化道念珠菌病、慢性皮膚粘膜念珠菌病、擦爛性念珠菌病、念珠性肉芽腫、指(趾)甲念珠菌感染、支氣管及肺念珠菌感染以及花斑癬(頭癬)、真菌性頭皮屑(糠疹)等；還可用于治療或/和輔助治療肺部(中樞神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚、粘膜、骨、內(nèi)臟等)隱球菌病，隱球菌病是屬于愛滋病患者最重要的并發(fā)癥之一，目前世界上尚無其它藥物能夠治療。再者，由于念珠菌(屬)是黃芩甙元的敏感菌，因此，黃芩甙元也可制成合適劑型治療或/和輔助治療念珠菌系統(tǒng)感染，如尿路感染、心內(nèi)膜炎、腦膜炎等。
本發(fā)明實(shí)驗(yàn)還證明黃芩甙元同時(shí)還具有對(duì)皮膚細(xì)菌的非特異性抑制作用，特別是與體臭(腳氣，腋臭)有關(guān)的負(fù)責(zé)菌，所以，以其為有效抗菌成份制備的抗皮膚細(xì)菌藥物，特別適合于治療體臭，并且能保持皮膚的微生物正常區(qū)系平衡。
含有黃芩甙元的皮膚或粘膜衛(wèi)生用品，對(duì)皮膚及粘膜酵母型真菌感染，頭癬以及體臭等具有較好的預(yù)防或輔助治療作用。
本發(fā)明所說的一黃芩甙元為有效抗菌成份制備的藥物，一般為外用藥，但根據(jù)需要，也可制成內(nèi)用(內(nèi)服)藥，而一般技術(shù)人員通過本發(fā)明完全可以根據(jù)本領(lǐng)域現(xiàn)有技術(shù)及常規(guī)方法，將黃芩甙元或其藥理上可接受的鹽類與合適的醫(yī)藥上可接受的賦形劑或/和添加劑配合，制備出各種合適需要?jiǎng)┬偷乃幬?。同理，一般技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明按本領(lǐng)域的已有技術(shù)及常規(guī)方法，既可制備出本發(fā)明所說的含有黃芩甙元作為抗菌成份得到皮膚及粘膜衛(wèi)生用品。
本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，黃芩甙元作為皮膚及粘膜抗菌劑，其對(duì)致病真菌(酵母型真菌及皮膚癬菌)的體外最低抑制濃度(MIC)為60～100μg/mL之間，對(duì)敏感致病細(xì)菌(與體臭有關(guān)的負(fù)責(zé)菌)的體外MIC為80～250μg/mL之間。本發(fā)明所說的藥物或衛(wèi)生用品中的黃芩甙元的有效量(含量)，可由一般技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(即黃芩甙元對(duì)各種皮膚及粘膜致病菌的體外MIC)，以及根據(jù)藥物或衛(wèi)生用品的具體劑型，使用對(duì)象及使用方式等，通過常規(guī)方法加以確定，一般情況下，該有效量可為1～5％(W/W)。
本發(fā)明中所說的黃芩甙元，可以是商品化合物，或者通過已有公知方法制得；也可以由含有該化合物成份的植物材料(如黃芩根)經(jīng)常規(guī)方法(如溶劑萃取法)提取得到含有該成份的混合提取物，再經(jīng)純化而得，也可以直接以混合提取物的形式使用。
所說的黃芩甙元的藥理上可接受的鹽類是指引入黃芩甙元這一化合物的鹽類，例如硫酸鈉鹽，磷酸鈉鹽......。
下面通過具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明實(shí)驗(yàn)所用材料如下1.植物樣品黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi.)根，采于河南，經(jīng)鑒定為生藥黃芩(根)。呈圓錐形，扭曲，直徑2-3cm，表面深黃色，質(zhì)硬，皮部黃色，木部黃棕色，氣微，味苦。
2.黃芩甙元和黃芩甙用于化合物鑒定對(duì)照實(shí)驗(yàn)、抗真菌實(shí)驗(yàn)以及抗細(xì)菌實(shí)驗(yàn)用的黃芩甙元和黃芩甙純化合物樣品由Aldrich chimie公司(Fallavier，法國(guó))提供。
3.供試皮膚致病真菌和培養(yǎng)基十七種皮膚致病真菌隸屬粘膜及皮膚酵母型真菌、淺表層皮膚癬菌以及絲狀霉菌，其供試真菌的中譯名和拉丁名見表I。
這些真菌是由法國(guó)弗朗什—孔泰大學(xué)中心醫(yī)院(University of Franche-Comte，Besanon，CHR)提供，這些致病真菌直接分離于皮膚病患者，但新型隱球酵母由HIV(HumanImmunodeficiency Virus)患者或愛滋病(AIDS)病人血液中分離(Angers大學(xué)，法國(guó))，卵瓶形酵母由巴斯德醫(yī)學(xué)院(法國(guó))提供。
表I中供試真菌接種和培養(yǎng)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基(Sabouraud Agar)(AES實(shí)驗(yàn)室，Combourg，法國(guó))，配方組成如下肉湯胃蛋白酶胨 10g葡萄糖 20g瓊脂 10g氯霉素 0.05g蒸餾水 1000mLpH6.5
但卵瓶形酵母培養(yǎng)在改良DST培養(yǎng)基上，組方如下DST40g吐溫80 20mL氯霉素 0.05g蒸餾水 1000mLpH5～6(用1N鹽酸調(diào)節(jié))DST是指診斷性敏感試驗(yàn)抗菌素瓊脂培養(yǎng)基(Diagnostic Sensivity Test Antibiotic Agar)(AES實(shí)驗(yàn)室，Combourg，法國(guó))，每40g DST培養(yǎng)基含蛋白胨 10.00g牛肉膏 10.00g葡萄糖 2.00g氯化鈉 3.00g磷酸氫二鈉 2.00g醋酸鈉 0.01g腺嘌呤硫酸鹽 0.01g鳥嘌呤鹽酸鹽 0.01g尿嘧啶 0.01g黃嘌呤 0.01g瓊脂 12.95g4.供試皮膚細(xì)菌和培養(yǎng)基十六種直接來源于人體腳部和腋部的皮膚正常區(qū)系細(xì)菌和臭味負(fù)責(zé)菌應(yīng)用于該實(shí)驗(yàn)，其供試細(xì)菌的中譯名、拉丁名、菌種編號(hào)及來源見表II。
供試細(xì)菌接種和培養(yǎng)在瓊脂肉湯培養(yǎng)基(Nutrient broth)(BioMerieux，法國(guó))，其組成如下肉湯 6g酵母菌提取物 2g蛋白胨 5g氯化鈉 5g瓊脂 15g蒸餾水 100mLpH7.4±0.2實(shí)驗(yàn)1.黃芩根粗提取物(混合物)的制備96.22克黃芩根粉置索氏提取器中，用石油醚、氯仿、己酸己酯和甲醇(極性由小到大)四種溶劑依次分別進(jìn)行回流提取，這四種溶劑的溶液提取物。經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后，得四種膏狀的混合物(粗提取物)，其產(chǎn)量，含量和感官特征如下石油醚提取物 0.67g 0.70％(WW)綢膏狀 深褐色氯仿提取物0.72g 0.75％(W/W) 膏狀 淡黃色己酸己酯提取物2.50g 2.60％(W/W) 膏狀 淡黃色甲醇提取物8.81g 9.16％(W/W) 膏狀 深褐帶黃實(shí)驗(yàn)2.抗真菌混合物篩選實(shí)驗(yàn)為了研究四種粗提取物的抗真菌活性，有代表性的四種真菌用于該篩選實(shí)驗(yàn)，他們是白色念珠菌、黃曲霉、短柄帚霉和須發(fā)癬菌。
抗真菌篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表III。
由表III可以看出黃芩根的氯仿和乙酸乙酯提取物對(duì)白色念珠菌和黃曲霉具有抗菌活力，MIC分別是250～300μg/mL和700～900μg/mL。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明乙酸乙酯提取物在實(shí)驗(yàn)室條件下具有很好的抗菌效力穩(wěn)定性(25℃，保存7個(gè)月)；而氯仿提取物則會(huì)隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)而喪失其活性，因此，我們選擇黃芩根的乙酸乙酯提取物進(jìn)行重點(diǎn)研究。實(shí)驗(yàn)3.抗真菌活性成份的鑒定用黃芩甙元和黃芩甙作對(duì)照，用紙層析色譜法(展開劑苯/乙酸/水＝6/1.5/2.5)，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯提取物中不含黃芩甙(Baicalin)(比移值Rf＝0.7)。與此相反，我們得到一個(gè)邊緣整齊呈棕(淺)黃色的大色斑，Rf＝0.6，與黃芩甙元的Rf相同。此色斑洗脫后，用高效液相色譜法(HLPC)，紫外分光光度法和質(zhì)譜法(MS)等技術(shù)確認(rèn)此色斑就是黃芩甙元，說明黃芩甙元可能是黃芩根乙酸乙酯提取物的重要活性成份。
下面的實(shí)驗(yàn)證明黃芩甙元具有顯著的抗菌性能，為了比較，黃芩甙也用于抗真菌實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)4.抗皮膚真菌實(shí)驗(yàn)和最低抑制濃度(MIC)的測(cè)定10％的黃芩甙和黃芩甙元分別溶于DMSO(二甲基亞砜)，將藥物母液混合于約60℃的熱培養(yǎng)基中，配成一系列呈幾何級(jí)數(shù)濃度的藥物培養(yǎng)基(10，20，......，100；150，200，250，......，500μg/mL)。割取含有菌絲體和小分生孢子(Hyphae和Microconidia)的菌落塊(25～36mm2)，以菌落表面置于藥物培養(yǎng)基上。但對(duì)于酵母型真菌，絲狀霉菌和石膏狀小孢菌來講，則制成均一經(jīng)校對(duì)的孢子懸浮液(Spore suspension)，涂沫在培養(yǎng)基上。
對(duì)抗真菌實(shí)驗(yàn)而言，菌種不同，培養(yǎng)時(shí)間不同，見表IV。
所有MIC數(shù)值為三至五次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的平均值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表IV。
由表IV可以看出，黃芩甙元具有十分明顯的抗真菌活性(通常，MIC＜500μg/mL即認(rèn)為該化合物有明顯活性和有臨床應(yīng)用前景，因此，實(shí)驗(yàn)用的最高濃度為500μg/mL)，尤其對(duì)酵母型真菌具選擇性抑制作用，MIC在70～100μg/mL之間。該化合物對(duì)石膏狀小孢菌的孢子(MIC60μg/mL)也有抑制其繁殖生長(zhǎng)的作用。與此相反，黃芩甙在低于500μg/mL的濃度之下，其抗真菌活性很弱或無。
因此，我們認(rèn)為說明黃芩甙元就是黃芩根乙酸乙酯提取物的抗真菌成份之一。
由于黃芩甙元的選擇性抑制特性，下面的實(shí)驗(yàn)僅使用黃芩甙元研究它的抗皮膚細(xì)菌有效性。
實(shí)驗(yàn)5.抗皮膚細(xì)菌實(shí)驗(yàn)和最低抑制濃度MIC的測(cè)定該實(shí)驗(yàn)是把經(jīng)嚴(yán)格校對(duì)的細(xì)菌懸浮液，均勻涂沫在瓊脂肉湯培養(yǎng)基上，觀察結(jié)果而得。
MIC的測(cè)定技術(shù)是首先把黃芩甙元溶解在DMSO溶液中，配成5-10％(W/V)的母液。將該母液混合在培養(yǎng)基中，配成從濃度10ug/mL到500μg/mL的一系列呈幾何級(jí)數(shù)的藥物培養(yǎng)基。接種后，培養(yǎng)24小時(shí)(37℃)，觀察細(xì)菌生長(zhǎng)狀況，能夠完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度(培養(yǎng)基)即為黃芩甙元對(duì)該細(xì)菌的MIC。
所有MIC數(shù)值為三至五次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的平均值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表V(同實(shí)驗(yàn)4，實(shí)驗(yàn)用的最高濃度為500μg/mL)。
由表V可以看出，與腳氣有關(guān)的細(xì)菌如固著微球菌(MIC90μg/mL)、表皮葡萄球菌(150μg/mL)、人型葡萄球菌(250μg/mL)和一種棒桿菌(250μg/mL)，在黃芩甙元濃度為250μg/mL的條件下，其生長(zhǎng)繁殖能被完全抑制。有趣的是，干燥棒桿菌也是一種敏感菌，其MIC為80μg/mL，研究表明，干燥棒桿菌是唯一的一種含有一種5α-還原酶的腋臭負(fù)責(zé)菌，該細(xì)菌能把某些沒有氣味的甾類化合物(Steroid)，如睪(甾)酮(Testosterone)，還原為雄(甾)烷二醇(Androstanediol)、雄(甾)烷二酮(Androstanedione)、雄(甾)烯酮(Androstenoae)等，后者具有難聞的氣味。
表I供試皮膚真菌的類型、中譯名和拉丁名酵母型真菌(Pathogenic yeasts)新型隱球酵母(Cryptococcus neoformans).
卵瓶形酵母(Pityrosporum ovale)克魯斯假絲酵母(Candida krusei)近平滑假絲酵母(Candida parapsilopsis)白假絲酵母，白色念珠菌(Candida albicans)光滑球擬酵母(Candida glabrata)皮膚癬(蘚)菌(Dermatophytes)紅色蘚菌(Trichophyton rubrum)須發(fā)蘚菌(Trichophyton mentagrophytes)蘇丹奈斯發(fā)蘚菌(Trichophyton soudanense)堇色蘚菌(Trichophyton violaceum)趾間發(fā)蘚菌(Trichophyton interdigitale)絮狀表皮蘚菌(Epidermatophton floccosum)狗小孢菌(Microsporum canis)石膏狀小孢菌(Microsporum gypseum)絲狀霉菌(Filamentous fungi)煙曲霉(Aspergillus fumigalus)黃曲霉(Aspergillus flavus)短柄帚霉(Scopulsriopsis brevicaulis)說明中譯名蘇丹奈斯發(fā)蘚菌(Trichophyton soudanense)譯自《拉漢微生物名詞》(中國(guó)醫(yī)藥科技出版社)，趾間發(fā)蘚菌(Trichophyton interdigitale)譯自《拉漢醫(yī)學(xué)詞匯)(上?？萍汲霭嫔?，1981年)，其它真菌名均譯自《孢子植物名詞及名稱》(科學(xué)出版社，1990年)。表II供試皮膚細(xì)菌的中譯名、拉丁名、菌種編號(hào)及來源細(xì)菌菌珠 編號(hào) 國(guó)際編號(hào) 來源腳部(趾間、腳底)正常區(qū)系細(xì)菌(Microflora of normal feet)莫拉氏菌(屬)(Moraxella sp.)H7SV1 / *不動(dòng)桿菌(屬)(Acinetobacter sp.)H5DCl / *產(chǎn)堿桿菌(屬)(Alcaligenes sp.) H4TV1 / *與腳氣有關(guān)的負(fù)責(zé)菌(Causative species of foot odour)藤黃微球菌(Microeoccus luteus) IC5 / *固著微球菌(Micrococcus sedentarius)# 7B5 / *棒桿菌屬B族(Corynebacterium sp.group B)16C3/ *棒桿菌屬D2族(Corynebacterium sp.group D2) 19Cl/ *棒桿菌屬C族(Corynebacterium sp.group C)3C3 / *表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis) 1S2 / *人型葡萄球菌(Staphulococcus hominis)# 8S2 / *科氏葡萄球菌(Staphylococcus cohnii)6S3 / *腋部(腋窩、腋緣)正常區(qū)系細(xì)菌(Microflora of normal axilla)藤黃微球菌(Mierococcus luteus) CIP53.45ATCC93.41溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyiicus)# CIP81.56ATCC29.970木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)# CIP81.66ATCC29.971表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis) CIP55.109 NCTC98.55與腋臭有關(guān)的負(fù)責(zé)菌(Causative specie of axillary odour)干燥棒桿菌(Corynebacterium xerosis)CIP52.16/ *說明有符號(hào)“*”者，為MARSHALL博士(醫(yī)生)(Leeds大學(xué)，英格蘭)提供的菌株，CIP指法國(guó)巴斯德醫(yī)學(xué)院收藏標(biāo)本號(hào)(Collection of Institute Pasteur)，ATCC指美國(guó)典型培養(yǎng)物收藏標(biāo)本號(hào)(American Type Culture Collection)，NCTC指英國(guó)倫敦典型培養(yǎng)物收藏標(biāo)本號(hào)(National Collection of Type Culture London)。以上細(xì)菌中譯名均來自《細(xì)菌名稱》(科學(xué)出版社，1980年)，但少數(shù)標(biāo)有“#”者，是發(fā)明人按拉丁文譯出的。
表III黃芩四種不同提取物的抗菌活性(μg/mL)。致病真菌菌珠石油醚提取物氯仿提取物 乙酸乙酯提取物 甲醇提取物念珠菌 +++ 250(MIC) 300(MIC) +黃曲霉 ++ 700(MIC) 900(MIC) +短柄帚霉 +++ ++++ +++須發(fā)癬菌 +++ ++++ +++注明+++ 表示真菌生長(zhǎng)不受影響(對(duì)照)，++ 表示真菌生長(zhǎng)弱，+ 表示真菌生長(zhǎng)很弱，MIC 表示最低抑制濃度(Minimal Inhibitory Concentration)
表IV黃芩甙元和黃芩甙的抗真菌活性與MIC(μg/mL)皮膚致病真菌實(shí)驗(yàn)條件黃芩甙元黃芩甙酵母型真菌新型隱球酵母37℃，3天 70＞500卵瓶形酵母 37℃，2天 80＞500光滑球擬酵母37℃，2天 80＞500白色念珠菌 37℃，2天 90＞500克魯斯假絲酵母 37℃，2天 90＞500近平滑假絲酵母 37℃，2天 100 ＞500皮膚癬(蘚)菌石膏狀小孢菌25℃，2天 60＞500狗小孢菌25℃，7天 ＞500 ＞500紅色蘚菌25℃，7天 ＞500 ＞500須發(fā)蘚菌25℃，7天 ＞500 ＞500蘇丹奈斯發(fā)蘚菌 25℃，7天 ＞500 ＞500堇色蘚菌25℃，7天 ＞500 ＞500絮狀表皮蘚菌25℃，7天 ＞500 ＞500趾間發(fā)癬菌 25℃，14天＞500 ＞500絲狀霉菌煙典霉 37℃，2天 ＞500 ＞500黃典霉 37℃，2天 ＞500 ＞500短柄帚霉25℃，2天 ＞500 ＞500
表V黃芩甙元的抗皮膚細(xì)菌活性與MIC(μg/mL)皮膚細(xì)菌菌珠 MIC(μg/mL)腳部(趾間、腳底)正常區(qū)系細(xì)菌莫拉氏菌(屬) 60不動(dòng)桿菌(屬) ＞500產(chǎn)堿桿菌(屬) ＞500與腳氣有關(guān)的負(fù)責(zé)菌固著微球菌90表皮葡萄球菌 150人型葡萄球菌 250棒桿菌屬D2族 250棒桿菌屬B族 ＞500棒桿菌屬C族 ＞500藤黃微球菌＞500科氏葡萄球菌 ＞500腋部(腋窩、腋緣)正常區(qū)系細(xì)菌表皮葡萄球菌 150溶血葡萄球菌 250木糖葡萄球菌 ＞500藤黃微球菌＞500與腋臭有關(guān)的負(fù)責(zé)菌干燥棒桿菌80
權(quán)利要求
1.黃芩甙元或其藥理上可接受的鹽作為皮膚及粘膜抗菌劑的應(yīng)用。
2.按照權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征是用于制備抗皮膚及粘膜真菌的藥物。
3.按照權(quán)利要求2的抗真菌劑，其特征是所說皮膚及粘膜真菌為致病酵母型真菌及皮膚癬菌。
4.按照權(quán)利要求3的應(yīng)用，其特征是所說的致病酵母型真菌包括白色念珠菌，新型隱球酵母、卵瓶型酵母、光滑球擬酵母、克魯斯假絲酵母、近平滑假絲酵母；所說的皮膚癬菌為石膏狀小孢菌。
5.按照權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征是用于制備抗皮膚細(xì)菌的藥物。
6.按照權(quán)利要求5的應(yīng)用，其特征是所說的皮膚細(xì)菌指與體臭有關(guān)的負(fù)責(zé)菌。
7.按照權(quán)利要求6的應(yīng)用，其特征是所說的體臭負(fù)責(zé)菌為微球菌屬、葡萄菌屬和棒球菌屬的細(xì)菌。
8.按照權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征是用于制備兼治皮膚及粘膜真菌和細(xì)菌病的藥物。
9.按照權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征是用于制備對(duì)皮膚及粘膜的真菌或/和細(xì)菌病有輔助治療作用的衛(wèi)生用品。
全文摘要
本發(fā)明涉及黃芩甙元作為皮膚及粘膜抗菌劑的應(yīng)用,將黃芩甙元及其藥理上可接受的鹽類用于制備抗皮膚及粘膜真菌或/和細(xì)菌的藥物和衛(wèi)生用品,其對(duì)粘膜及皮膚酵母型真菌感染具有良好的治療效果。
文檔編號(hào)A61K31/35GK1177479SQ97108979
公開日1998年4月1日 申請(qǐng)日期1997年7月10日 優(yōu)先權(quán)日1997年7月10日
發(fā)明者楊得坡, 若埃爾·米葉-克萊爾, 讓-皮埃爾·肖蒙 申請(qǐng)人:中山大學(xué)