專利名稱：用氨基酸和羥基酸衍生物取代的芐脒衍生物和其作為抗凝血?jiǎng)┑挠猛镜闹谱鞣椒?br> 技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用氨基酸和羥基酸衍生物取代的單環(huán)N-雜環(huán)族化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽，其可抑制酶、因子Ⅹa，因而可用作抗凝血?jiǎng)?。本發(fā)明還涉及包含所述衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，其及使用方法。
背景技術(shù)：
因子Ⅹa是一類胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶類的酶。因子Ⅹa和Ⅴa與鈣離子和磷脂的一對(duì)一結(jié)合形成了凝血酶原酶復(fù)合物，其將前凝血酶轉(zhuǎn)化成凝血酶。而凝血酶又將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白，纖維蛋白聚合形成不溶性的纖維蛋白。
在凝血級(jí)聯(lián)中，凝血酶原酶復(fù)合物為內(nèi)源性途徑(表面激活的)和外源性(血管損傷組織因子)途徑的會(huì)聚點(diǎn)(Biochemistry,(1991),Vol.30,p.10363；和Cell(1998),Vol.53,pp.505-518)。隨著發(fā)現(xiàn)組織因子途徑抑制劑(TFPI)的活化方式，凝血級(jí)聯(lián)的模式也進(jìn)一步精化(Seminars inHematology (1992),Vol.29,pp.159-161)。TFPI是一種循環(huán)性多結(jié)構(gòu)域絲氨酸蛋白酶抑制劑，其具有三種Kuniz型結(jié)構(gòu)域，該抑制劑與因子Ⅴa競(jìng)爭(zhēng)游離的因子Ⅹa。因子Ⅹa與TFPI的二元復(fù)合物一旦形成，就會(huì)變?yōu)橐蜃英鱝和組織因子復(fù)合物的潛在的抑制劑。
因子Ⅹa可被兩種不同的復(fù)合物激活，即經(jīng)凝血級(jí)聯(lián)中“Ⅹa暴發(fā)性”途徑的組織因子Ⅶa復(fù)合物和“Ⅹa持續(xù)性”途徑的因子Ⅸa-Ⅷa復(fù)合物(TENase)激活。在血管損傷后，“Ⅹa暴發(fā)性”途徑經(jīng)組織因子(TF)激活。凝血級(jí)聯(lián)的向上調(diào)節(jié)經(jīng)“Ⅹa持續(xù)性”途徑通過(guò)因子Ⅹa產(chǎn)生而發(fā)生。凝血級(jí)聯(lián)的向下調(diào)節(jié)則隨著因子Ⅹa-TFPI復(fù)合物的形成而發(fā)生，該復(fù)合物不僅除去因子Ⅹa，而且進(jìn)一步抑制經(jīng)“Ⅹa暴發(fā)性”途徑形成因子。因而，凝血級(jí)聯(lián)受因子Ⅹa的自然調(diào)節(jié)。
為防止凝血，因子Ⅹa對(duì)凝血酶抑制的主要優(yōu)點(diǎn)是因子Ⅹa對(duì)凝血酶的多種功能起到重要作用。凝血酶不僅會(huì)催化纖維蛋白原向纖維蛋白的轉(zhuǎn)化、因子Ⅷ向因子Ⅷa的轉(zhuǎn)化、因子Ⅴ向因子Ⅴa的轉(zhuǎn)化、因子Ⅺ向Ⅺa的轉(zhuǎn)化，而且也激活為單細(xì)胞趨化因子的血小板和用于淋巴細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的有絲分裂原。當(dāng)與凝血調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合時(shí)，凝血酶會(huì)激活蛋白質(zhì)C，體內(nèi)因子Ⅴa和Ⅷa的抗凝血滅活劑。在循環(huán)中，在肝素或其它蛋白聚糖締合的糖胺聚糖催化的反應(yīng)中，抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)和肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)會(huì)迅速滅活凝血酶，從而在組織中的凝血酶會(huì)由蛋白酶、連接蛋白滅活。凝血酶通過(guò)獨(dú)特的“束縛配位體”凝血酶受體實(shí)施其多細(xì)胞活化功能(Cell(1991),/vol.64,p.1057)，其需要相同的用于纖維蛋白原結(jié)合和裂解并經(jīng)凝血調(diào)節(jié)蛋白和蛋白質(zhì)C激活的陰離子結(jié)合位點(diǎn)和活性位點(diǎn)。因此，另一組體內(nèi)分子靶點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合凝血酶，隨之的蛋白水解事件將根據(jù)細(xì)胞的類型及何種受體、調(diào)節(jié)劑、底物或抑制劑結(jié)合凝血酶而具有完全不同的生理學(xué)結(jié)果。
有關(guān)蛋白質(zhì)抗停滯(antistasin)和蜱抗凝血?jiǎng)╇?TAP)的公開數(shù)據(jù)表明，因子Ⅹa抑制劑是有效的抗凝血?jiǎng)?Thrombosis and Haemostasis(1992),Vol.67,pp.371-376；and Science(1990),vol.248,pp.593-596)。
因子Ⅹa的活性位點(diǎn)可被兩種結(jié)合抑制劑阻斷，一種是機(jī)理型(mechanism-based)結(jié)合抑制劑，另一種為緊密型(tight)結(jié)合抑制劑(緊密型結(jié)合抑制劑因缺乏酶與抑制劑間的共價(jià)鍵而與機(jī)理型結(jié)合抑制劑不同)。公知的機(jī)理型結(jié)合抑制劑有兩種類型，可逆型和不可逆型，它們易于通過(guò)酶-抑制劑鍵的水解區(qū)分(Thrombosis Res(1992),Vol.67,pp.221-231；和Trends Pharmacol.Sci.(1987),Vol.8,pp.303-307)。一系列的胍基化合物是緊密型結(jié)合抑制劑的實(shí)例(Thrombosis Res(1980),Vol.19,pp.339-349)。另外已表明，芳基磺?；?精氨酸-哌啶甲酸衍生物為凝血酶的緊密型結(jié)合抑制劑(Biochem.(1984),Vol.23,pp.85-90),以及一系列含芳基脒的化合物，包括3-脒基苯基芳基衍生物(Thrombosis Res (1983),Vol.29,pp.635-642)和雙(脒基)芐基環(huán)酮(Thrombosis Res (1980),Vol.17,pp.545-548)。但是，這些化合物對(duì)因子Ⅹa的選擇性均較差。
EP 0 540051A(Nagahara等)公開了芳族脒衍生物，認(rèn)為所述衍生物因可以可逆地抑制因子Ⅹa而顯示出具有強(qiáng)烈的抗凝血?jiǎng)┳饔谩?br> 在Pharmazie(1977),Vol.32,No.3,pp141-145公開了α,α′-雙(脒基亞芐基)環(huán)酮和α,α＇-雙(脒基芐基)環(huán)酮的合成方法。這些化合物是絲氨酸蛋白酶抑制劑。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及可抑制因子Ⅹa的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，因而這種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可用作藥用試劑以治療以血栓形成活性為特征的疾病。
因此，一方面，本發(fā)明提供了一種選自具有下式的、為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中A為-C(R8)=或-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-N(R13)-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、硝基、-OR13、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-N(R13)C(O)R13或-N(H)S(O)2R16；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(NH)N(H)C(O)OR16、-C(NH)N(H)C(O)R13、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、氨基、脲基、胍基、-OR13、-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(O)N(R13)R14、-R15-C(O)N(R13)R14、-CH(OH)C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-N(R13)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)R14、-N(R13)S(O)2R16或-N(R13)C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-4)或-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R8為氫、烷基或鹵素；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-R15-CH(N(R13)R14)C(O)OR13或-(R15)S(O)2R16；
R10分別獨(dú)立地為烷基、鏈烯基、鏈炔基、鹵代烷基、鹵代鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-C(O)R15-N(R13)R14、-R15-C(O)R13、-R15-C(O)N(R13)N(R13)R14、-R15-C(R13)(OR13)-R15-N(R13)(R14)、-C(R13)(OR13)C(O)OR14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-C(R13)(NR13)(R14)C(O)OR13、-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-C(R13)(OR13)R14、-R15-N(R13)(R14)、-R15-N(R13)C(O)OR16、-R15-N(R13)C(O)OR14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-N(R13)S(O)2R16、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)N(R13)R14、-R15-N(R13)-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-N(R13)S(O)R14、-R15OR13、-R15-ON(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-OS(O)2OR13、-R15-P(O)(OR13)R14、-R15-OP(O)(OR13)2、-R15P(O)(OR13)2、-R15-SR13、-R15-S-R15-C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)R14、-R15-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-SC(O)N(R13)R14、-R15-SC(S)N(R13)R14、-R15-S(O)R13、-R15-S(O)2R16、-R15-S(O)OR13、-R15-S(O)2OR13、-R15-S(O)2N(R13)R14、-R15-S(O)(NR13)R14；或R10分別為芳基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基(adamantyl)(選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基烷基(其中金剛烷基選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基或芳基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
另一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療人體患有的以血栓形成活性為特征的疾病的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的如上所述的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
另一方面，本發(fā)明提供了一種用于治療人體患有的以血栓形成活性為特征的疾病的方法，該方法包含使患者服用治療有效量的如上所述的本發(fā)明的化合或其藥學(xué)上可接受的鹽。
另一方面，本發(fā)明提供了一種通過(guò)抑制Ⅹa因子而緩減人體患有的疾病的治療方法，該方法包含使患者服用治療有效量的如上所述的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
另一方面，本發(fā)明提供了一種通過(guò)服用本發(fā)明的化合物而在體外或體內(nèi)抑制Ⅹa因子的方法。
發(fā)明詳述定義除非另有說(shuō)明，在本發(fā)明的說(shuō)明書和權(quán)利要求書中所采用的下述術(shù)語(yǔ)具有如下意義“烷基”是指僅由碳和氫原子組成的、不包含不飽和鍵的、具有1-6個(gè)碳原子的、直鏈或支鏈的、單價(jià)或二價(jià)的基團(tuán)，如，甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(異丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)等。
“鏈烯基”是指僅由碳和氫原子組成的、包含至少一個(gè)雙鍵的、具有2-6個(gè)碳原子的、直鏈或支鏈的、單價(jià)或二價(jià)的基團(tuán)，如，乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基等。
“鏈炔基”是指僅由碳和氫原子組成的、包含至少一個(gè)叁鍵的、具有2-6個(gè)碳原子的、直鏈或支鏈的、單價(jià)或二價(jià)的基團(tuán)，如，乙炔基、丙-1-炔、丁-1-炔基、戊-1-炔基、戊-3-炔基等。
“烷氧基”是指式-ORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(異丙氧基)、正丁氧基、正戊氧基、1,1-二甲基乙氧基(叔丁氧基)等。
“亞烷基”是指僅由碳和氫原子組成的、不包含不飽和鍵的、具有1-6個(gè)碳原子的、直鏈或支鏈的二價(jià)基團(tuán)，如，亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞正丁基等。
“芳基”是指苯基或萘基。
“芳烷基”是指式-RaRb的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Rb為如前定義的芳基，如芐基。
“芳氧基”是指式-ORb的基團(tuán)，其中Rb為如前定義的芳基，如苯氧基、萘氧基。
“芳烷氧基”是指式-ORc的基團(tuán)，其中Rc為如前定義的芳烷基，如芐氧基等。
“烷氧基烷基”是指式-RaORa的基團(tuán)，其中每一個(gè)Ra獨(dú)立地為如前定義的烷基，如甲氧基乙基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、丙氧基乙基等。
“烷氧基鏈烯基”是指式-RdORa的基團(tuán)，其中Ra是如前定義的烷基，Rd是如前定義的鏈烯基，如甲氧基乙烯基、甲氧基丙-1-烯基、乙氧基丁-1-烯基、丙氧基戊-1-烯基、乙氧基戊-1,4-二烯基等。
“烷氧基鏈炔基”是指式-ReORa的基團(tuán)，其中Ra是如前定義的烷基，Re是如前定義的鏈炔基，如乙氧基乙炔基、甲氧基丙-1-炔基、丙氧基丁-1-炔基、乙氧基戊-1-炔基、甲氧基戊-1,4-二炔基等。
“烷氧羰基鏈烯基”是指式-RdC(O)ORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Rd為如前定義的鏈烯基，如乙氧羰基乙烯基、3-甲氧羰基丙-1-烯基、4-叔丁氧羰基丁-1-烯基、5-乙氧羰基戊-1-烯基、5-叔丁氧羰基戊-1,4-二烯基等。
“烷氧羰基鏈炔基”是指式-ReC(O)ORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Re為如前定義的鏈炔基，如3-甲氧羰基丙-1-炔基、4-叔丁氧羰基丁-1-炔基、5-乙氧羰基戊-1-炔基、5-叔丁氧羰基戊-3-炔基等。
“芳氧羰基鏈烯基”是指式-RdC(O)ORb的基團(tuán)，其中Rb為如前定義的芳基，Rd為如前定義的鏈烯基，如苯氧羰基乙烯基、苯氧羰基丙-1-烯基、4-苯氧羰基丁-1-烯基、5-萘氧羰基戊-1-烯基、5-苯氧羰基戊-1,4-二烯基等。
“芳氧羰基鏈炔基”是指式-ReC(O)ORb的基團(tuán)，其中Rb為如前定義的芳基，Re為如前定義的鏈炔基，如3-苯氧羰基丙-1-炔基、4-苯氧羰基丁-1-炔基、5-苯氧羰基戊-1-炔基、5-苯氧羰基戊-3-炔基等。
“脒基(amidino)”是指基團(tuán)-C(NH)-NH2。
“羧基鏈烯基”是指被羧基取代的如前定義的鏈烯基，如3-羧基丙-1-烯基、4-羧基丁-1-烯基、4-羧基戊-1-烯基、5-羧基戊-1,4-二烯基等。
“羧基鏈炔基”是指被羧基取代的如前定義的鏈炔基，如3-羧基丙-1-炔基、4-羧基丁-1-炔基、5-羧基戊-1-炔基、5-羧基戊-3-炔基等。
“環(huán)烷基”是指僅由碳和氫原子組成的、飽和的、具有3-7元單環(huán)的環(huán)基團(tuán)，如丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基等。
“二烷氨基”是指式-NRaRa，其中Ra獨(dú)立地為如前定義的烷基，如二甲氨基、甲基乙基氨基、二乙氨基、二丙氨基、乙基丙基氨基等。
“二烷氨基羰基”是指式-C(O)NRaRa，其中Ra獨(dú)立地為如前定義的烷基，如二甲氨基羰基、甲基乙基氨基羰基、二乙氨基羰基、二丙氨基羰基、乙基丙基氨基羰基等。
“鹵素”是指溴、氯或氟。
“鹵代烷基”是指被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素取代的如前定義的烷基，如三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1-溴甲基-2-溴乙基等。
“鹵代烷氧基”是指式-ORf的基團(tuán)，其中，Rf為如前定義的鹵代烷基，如三氟甲氧基、二氟甲氧基、三氯甲氧基、2-三氟乙氧基、1-氟甲基-2-氟乙氧基、3-溴-2-氟丙氧基、1-溴甲基-2-溴乙氧基等。
“鹵代鏈烯基”是指被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素取代的如前定義的鏈烯基，如溴代乙烯基、3-三氟丙-1-烯基、溴代丁-1-烯基、氯代戊-1-烯基、溴代戊-1,4-二烯基等。
“鹵代鏈炔基”是指被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素取代的如前定義的鏈炔基，如溴代乙炔基、3-三氟丙-1-炔基、溴代丁-1-炔基、氯代戊-1-炔基、溴代戊-1,4-二炔基等。
“鹵代烷氧基烷基”是指式-RaORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，它被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素在烷氧基上取代，如溴代甲氧基乙基、氯代乙氧基甲基、3-三氟丙氧基甲基、溴代丙氧基乙基等。
“鹵代烷氧基鏈烯基”是指式-RdORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Rd為如前定義的鏈烯基，它被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素取代，如溴代甲氧基乙烯基、氯代甲氧基丙-1-烯基、氯代乙氧基丁-1-烯基、3-三氟丙氧基戊-1-烯基、氯代乙氧基戊-1,4-二烯基等。
“鹵代烷氧基鏈炔基”是指式-ReORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Re為如前定義的鏈炔基，它被一個(gè)可多個(gè)如前定義的鹵素取代，如溴代甲氧基乙炔基、氯代甲氧基丙-1-炔基、3-三氟丙氧基丁-1-炔基、溴代乙氧基戊-1-炔基、氯代甲氧基戊-3-炔基等。
“羥基鏈烯基”是指被羥基取代的如前定義的鏈烯基，如3-羥基丙-1-烯基、4-羥基丁-1-烯基、4-羥基戊-1-烯基、5-羥基戊-1,4-二烯基等。
“羥基鏈炔基”是指被羥基取代的如前定義的鏈炔基,如3-羥基丙-1-炔基、4-羥基丁-1-炔基、5-羥基戊-1-炔基、5-羥基戊-1,4-二炔基等。
“鹵代烷氧羰基烷基”是指式-RaC(O)ORa的基團(tuán)，其中Ra獨(dú)立地為如前定義的烷基，其中末端的烷基被1個(gè)或多個(gè)鹵素取代，如溴代乙氧羰基乙基、3-氯丙氧羰基乙基、4-溴丁氧羰基乙基等。
“鹵代烷氧羰基鏈烯基”是指式-RdC(O)ORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，它被1個(gè)或多個(gè)鹵素取代，Rd為如前定義的鏈烯基，如溴代甲氧羰基乙烯基、3-氯乙氧羰基丙-1-烯基、4-(2-溴乙氧羰基)丁-1-烯基、5-(3-氯丙氧羰基)戊-1-烯基等。
“鹵代烷氧羰基鏈炔基”是指式-ReC(O)ORa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，它被1個(gè)或多個(gè)鹵素取代，Re為如前定義的鏈炔基，如溴代甲氧羰基乙炔基、3-(2-氯乙氧羰基)丙-1-炔基、4-(3-氯丙氧羰基)丁-1-炔基、5-(2-溴乙氧羰基)戊-1-炔基等。
“雜環(huán)基”是指穩(wěn)定的3-10元單環(huán)或雙環(huán)基團(tuán)，其可為飽和或不飽和的，它由碳原子和1-3個(gè)選自氮、氧和硫原子的原子組成，氮、氧和硫原子可被選擇性地氧化，氮原子可被選擇性地季銨化。雜環(huán)基團(tuán)可在任意的雜原子或碳原子上連接至主結(jié)構(gòu)上，導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定和結(jié)構(gòu)。這種雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吖庚因基、吖庚因基、吡咯基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、噁唑烷基、噻唑基、二氫化茚基、異噁唑基、異噁唑烷基、嗎啉基、噻唑基、噻唑烷基、異噻唑基、硅寧環(huán)基、異噻唑烷基、吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、異二氫吲哚基、八氫異吲哚基、喹啉基、異喹啉基、十氫異喹啉基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、噻嗯基、苯并噻嗯基、硫雜嗎啉基、硫雜嗎啉基亞砜(thiamorpholinylsulfoxide)、硫雜嗎啉基砜和噁二唑基。本發(fā)明中優(yōu)選的雜環(huán)基團(tuán)是吲哚基、咪唑基、噻唑基、異噁唑基、吡啶基、噻嗯基、苯并嗯基、呋喃基和3,4-二氫-2,3-二氧代-1(2H)嘧啶基。
“雜環(huán)基烷基”是指式-RaRg的基團(tuán)，其中，Ra為如前定義的烷基，Rg為如前定義的雜環(huán)基，如吲哚基甲基或咪唑基甲基等。
“(1,2)-咪唑基”是指連接在1位或2位上的咪唑基。
“(1,2)-咪唑啉基”是指連接在1位或2位上的4,5-二氫咪唑基。
“單烷氨基”是指式-NHRa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，如甲氨基、乙氨基、丙氨基等。
“單烷基氨基羰基”是指式-C(O)NHRa的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基,如甲氨基羰基、乙氨基羰基、丙氨基羰基等。
“(1,2)-四氫嘧啶基”是指連接在1位或2位上的四氫嘧啶基。
“金剛烷基”是指式-RaRh的基團(tuán)，其中Ra為如前定義的烷基，Rh為金剛烷基，如金剛烷基甲基、2-金剛烷基乙基等。
“選擇性”(“optional”或“optionally”)是指隨后所述的的事件可能發(fā)生或不發(fā)生，該定義包括了所述事件發(fā)生或不發(fā)生的兩種可能。例如，“選擇性取代的芳基”是指芳基可被取代或未被取代，該定義包括取代的芳基和無(wú)取代基的芳基。
“藥學(xué)上可接受的鹽”包括酸加成鹽和堿加成鹽。
“藥學(xué)上可接受的酸加成鹽”是指保留其生物功效和游離堿性能的那些鹽，其不會(huì)在生物上或其它方面產(chǎn)生不希望的性能。所述鹽是與無(wú)機(jī)酸形成的，無(wú)機(jī)酸的實(shí)例為鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者是與有機(jī)酸形成的，有機(jī)酸的實(shí)例為乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來(lái)酸、丙二醇、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對(duì)甲苯磺酸、水楊酸等。
“藥學(xué)上可接受的堿加成鹽”是指保留其生物功效和游離酸性能的那些鹽，其不會(huì)在生物上或其它方面產(chǎn)生不希望的性能。這些鹽可通過(guò)使無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿與游離酸進(jìn)行加成來(lái)制備。由無(wú)機(jī)堿得到的鹽包括但不限于鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁鹽等。優(yōu)選的無(wú)機(jī)鹽為銨、鈉、鉀、鈣和鎂鹽。由有機(jī)堿得到的鹽包括但不限于下述堿的鹽伯胺、仲胺、叔胺、取代的胺包括天然取代的胺、環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂，如異丙基胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、三甲胺(trimethamine)、二環(huán)己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、哈胺青霉素G、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺樹脂等。特別優(yōu)選的有機(jī)堿為異丙基胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺(trimethamine)、二環(huán)己胺、膽堿和咖啡因。
“治療有效量”是指式(Ⅰ)化合物在對(duì)人體給藥時(shí)的用量足以對(duì)以下所述的以血栓形成活性為特征的疾病進(jìn)行有效的治療。構(gòu)成“治療有效量”的式(Ⅰ)化合物的用量將根據(jù)化合物、疾病和其嚴(yán)重程度、患者的年齡等改變，但也會(huì)受本領(lǐng)域技術(shù)人員按照其一般知識(shí)及本發(fā)明的說(shuō)明確定。
本文中“治療”(“treating”或“treatment”)包含了對(duì)人體疾病的治療，所述疾病以血栓形成活性為特征，所述“治療”包括(ⅰ)預(yù)防人體疾病的發(fā)生，特別是當(dāng)患者已感染上該疾病，但還未診斷出時(shí)；(ⅱ)控制該疾病，即阻止疾病的惡化；或(ⅲ)緩減該疾病，即使該疾病消退。
本文中所述反應(yīng)的收率是以理論收率的百分比表示的。
本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在其結(jié)構(gòu)中可具有不對(duì)稱碳原子。因此，本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可包含單一形式的立體異構(gòu)體、處消旋物和對(duì)映體與非對(duì)映體的混合物。本發(fā)明包含所有的這些單一立體異構(gòu)體、外消旋物和其混合物。
本發(fā)明所采用的命名法是由I.U.P.A.C.體系改進(jìn)的，其中本發(fā)明的化合物被命名為芐脒衍生物。例如，本發(fā)明通式(Ⅰ)的化合物，即
其中，A為-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-；R1為羥基；R2為-C(NH)NH2；R3為1-甲基咪唑啉-2-基；R4為氫；R5和R6均為氟；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1)；R9為甲基；R10為甲基；R11為甲基；R12為-C(O)OR13；R13為氫，則該化合物命名為4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
用途和給藥A．用途本發(fā)明的化合物是因子Ⅹa的抑制劑，因而，基于因子Ⅹa在凝血級(jí)聯(lián)(見上述發(fā)明背景部分)的作用，其可用于以血栓形成為特征的疾病。本發(fā)明化合物的主要適應(yīng)癥是預(yù)防心肌梗塞后的長(zhǎng)期危險(xiǎn)。其它適應(yīng)癥是預(yù)防矯形外科術(shù)后深度靜脈血栓形成(DVT)或預(yù)防短暫缺血性發(fā)作后的患者。本發(fā)明的化合物還可用于目前采用香豆素的適應(yīng)癥，如DVT或其它類型的外科介入術(shù)如冠狀動(dòng)脈旁路移植和經(jīng)皮穿透冠狀血管成形術(shù)。本發(fā)明的化合物還用于治療與下述疾病相關(guān)的血栓形成并發(fā)癥，包括急性前髓細(xì)胞白血病、糖尿病、復(fù)合骨髓瘤、與膿毒性休克有關(guān)的彌散性血管內(nèi)凝血、與感染有關(guān)的紫瘢暴發(fā)、成人呼吸窘迫綜合癥、不穩(wěn)定心絞痛，以及與主動(dòng)脈瓣或血管修復(fù)術(shù)相關(guān)的血栓形成并發(fā)癥。本發(fā)明的化合物也可用于預(yù)防血栓形成疾病，特別是用于具有高度危險(xiǎn)性有可能發(fā)生這種疾病的患者。
此外，本發(fā)明的化合物可用作選擇性抑制因子Ⅹa而不會(huì)抑制凝血級(jí)聯(lián)中其它成分的體外和體內(nèi)診斷劑。
B．試驗(yàn)用于顯示本發(fā)明化合物對(duì)因子Ⅹa抑制作用的主要生物實(shí)驗(yàn)是簡(jiǎn)單的顯色實(shí)驗(yàn)，其僅包括絲氨酸蛋白酶、本發(fā)明實(shí)驗(yàn)用化合物、底物和緩沖液(參見Thrombosis Res.(1979),Vol.16,pp.245-254)。例如，四種組織人體絲氨酸蛋白酶被用于主要生物實(shí)驗(yàn)中，即游離因子Ⅹa、凝血酶原酶、凝血酶(Ⅱa)和組織張溶酶原激活物(tPA)。在出現(xiàn)纖維蛋白溶解過(guò)程的抑制中不需要的副作用之前，對(duì)tPA的實(shí)驗(yàn)成功進(jìn)行(參見J.Med.Chem.(1993),Vol.36,pp.314-319)。
另一個(gè)用于說(shuō)明本發(fā)明化合物抑制因子Ⅹa的用途的生物實(shí)驗(yàn)表明了化合物在加有檸檬酸鹽血漿中對(duì)游離因子Ⅹa的作用效力。例如，本發(fā)明化合物的抗凝作用是用前凝血酶時(shí)間(PT)或激活的部分促凝血酶原激酶時(shí)間(aPTT)測(cè)定的，而化合物的選擇性則用凝血酶凝塊時(shí)間(TCT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。在主要酶實(shí)驗(yàn)中的Ki值與在加有檸檬酸鹽血漿中游離因子Ⅹa的Ki值間的關(guān)系將會(huì)篩選出與其它血漿成分作用或被其它血漿成分激活的化合物。而Ki值與PT的延伸關(guān)系是必要的體外證明，游離因子Ⅹa抑制實(shí)驗(yàn)中的效力轉(zhuǎn)化成臨床凝血實(shí)驗(yàn)的效力。此外，在加有檸檬酸鹽的血漿中PT的延伸可用于測(cè)量在隨后的藥物動(dòng)力學(xué)研究中的活性持續(xù)時(shí)間。
有關(guān)表明本發(fā)明化合物活性的實(shí)驗(yàn)的其它內(nèi)容可參見R.Lottenberg等，Methods in Enzymology(1981),Vol.80,pp.341-361，和H Ohno等，Thrombosis Research (1980),Vol.19,pp.579-588。
C．一般給藥方式本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可以純化合物形式或適宜的藥物組合物形式進(jìn)行給藥，可采用任何可接受的給藥方式或通過(guò)用于類似用途的試劑進(jìn)行給藥。因此，采用的給藥方式可選擇通過(guò)口、鼻、腸胃外、局部、皮膚或直腸的固體、半固體、凍干粉或液體藥劑形式給藥，例如，片劑、栓劑、丸劑、軟彈性和硬明膠膠囊劑、粉末劑、溶液劑、懸浮液劑或氣溶膠劑等，優(yōu)選采用單位劑量形式、適用于精確劑量的簡(jiǎn)單給藥。組合物可包含常規(guī)藥用載體或賦形劑和作為活性成分的本發(fā)明的化合物，此外，還可包含其它藥劑、載體、助劑等。
通常，根據(jù)所需給藥方式，藥學(xué)上可接受的組合物將包含約1-99％(重量)的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及99-1％(重量)的適宜的藥用賦形劑。優(yōu)選組合物包含5-75％(重量)的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其余為適宜的藥用賦形劑。
優(yōu)選的給藥方式是口服給藥，采用常規(guī)日劑量方案，該方案可根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行調(diào)整。對(duì)于口服給藥，是將包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽通過(guò)加入通常采用的賦形劑形成的，所述賦形劑的實(shí)例為藥用級(jí)甘露醇、乳糖、淀粉、預(yù)糊化淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素醚衍生物、葡萄糖、明膠、蔗糖、檸檬酸鹽、沒食子酸丙酯等。這種組合物可采用溶液劑、懸浮液、劑、片劑、丸劑、膠囊劑、粉末劑、緩釋制劑等形式。
優(yōu)選該組合物為膠囊劑、caplet或片劑，因而其還可包含一種稀釋劑如乳糖、蔗糖、磷酸二鈣等；崩解劑如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉或其衍生物；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂等；和粘結(jié)劑如淀粉、阿拉伯膠、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、纖維素醚衍生物等。
本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽也可配制成一種栓劑，例如將約0.5-50％的活性成分分布于一種可在體內(nèi)緩慢溶解的載體中，如聚氧乙二醇和聚乙二醇(PEG)，如PEG 1000(96％)和PEG 4000(4％)。
對(duì)本發(fā)明的可采用液體形式給藥的藥物組合物，例如可通過(guò)溶解、分散等手段將該組合物或其藥學(xué)上可接受的鹽(約0.5-20％)和選擇性藥用助劑溶解、分散于載體中，載體的實(shí)例為水、鹽水、含水葡萄糖、甘油、乙醇等，從而形成溶液或懸浮液。
如果需要的話，本發(fā)明的藥物組合物還可包含少量的輔助物質(zhì)，如潤(rùn)濕劑或乳化劑、pH緩沖劑、抗氧化劑等，例如檸檬酸、脫水山梨酸單月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、丁基化羥基苯等。
該類劑型的實(shí)際制備方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的或者明顯的，例如可參看下述文獻(xiàn)Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th Ed.,(Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania,1990)。無(wú)論如何，按照本發(fā)明的技術(shù)，所給藥的組合物將包含治療有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，以用于治療可通過(guò)抑制Ⅹa因子而緩減的疾病。
本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以治療有效量進(jìn)行給藥，所述的治療有效量將會(huì)受多種因素的影響而改變，這些因素包括采用的特定化合物的活性、代謝穩(wěn)定性、和化合物的活性長(zhǎng)短，年齡、體重、健康狀況、性別、飲食情況、給藥方式和時(shí)間、排泄速度、藥物聯(lián)合、特定疾病的嚴(yán)重程度及接受治療的對(duì)象。通常，治療有效的日劑量為約0.14-14.3mg本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽/kg體重/天，優(yōu)選約0.7-10mg/kg體重/天，首選1.4-7.2mg/kg體重/天。例如，對(duì)體重70kg的人來(lái)說(shuō)，其劑量范圍為每天約10mg-1.0g的本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，優(yōu)選約50-700mg/天，首選約100-500mg/天。
優(yōu)選實(shí)施方案在以上發(fā)明概述中提出的本發(fā)明的化合物中，優(yōu)選幾組化合物。
一組優(yōu)選的化合物包含選自下式(Ⅰ)的那些化合物，其為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
在該組化合物中，優(yōu)選以下亞組的化合物其中A為-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素或-OR13；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為脲基、胍基、-N(R13)R14、-N(H)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基；
R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為4)；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基；R10分別獨(dú)立地為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-OP(O)(OR13)2；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR16和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
在該亞組化合物中，更優(yōu)選的是如下的化合物，其中Z1和Z2獨(dú)立地為-O-；R1為氫或OR13；R2為-C(NH)NH2；R3為(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被甲基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R4為氫；R5和R6彼此獨(dú)立地為鹵素；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1)；R9為氫、烷基、芳基或芳烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-OP(O)(OR13)2；或R10為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代鹵素、鹵代烷基、羥基或-OP(O)(OR13)2)；或R10為咪唑基烷基或吲哚基烷基；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基或芳基。
在該組化合物中，首選下述化合物，其中R1為OR13；R3為(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；
R5和R6均為氟；R9為氫或烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16或-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13。
該組優(yōu)選的具體化合物選自下述化合物4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
另一組優(yōu)選的化合物為以下亞組，其中
A為-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素或-OR13；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為脲基、胍基、-N(R13)R14、-N(H)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基；R7為-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R10分別獨(dú)立地為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-Op(O)(OR13)2；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代；烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR16和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
在該亞組化合物中，更優(yōu)選的是如下的化合物，其中Z1和Z2獨(dú)立地為-O-；R1為氫或-OR13；R2為-C(NH)NH2；R3為(1,2)四氫嘧啶基(選擇性地被甲基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R4為氫；R5和R6彼此獨(dú)立地為鹵素；R7為-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-OP(O)(OR13)2；或R10為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代鹵素、鹵代烷基、羥基或-OP(O)(OR13)2)；或R10為咪唑基烷基或吲哚基烷基；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫或烷基；
R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基或芳基。
在該組化合物中，首選下述化合物，其中R1為OR13；R3為(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R5和R6均為氟；R9為氫或烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16或-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13。
該組優(yōu)選的具體化合物選自下述化合物4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
本發(fā)明化合物的制備為方便起見，下述本發(fā)明化合物的制備過(guò)程說(shuō)明僅針對(duì)A為-N=的式(Ⅰ)的化合物的制備過(guò)程。但是，可以理解，可采用類似的合成方法來(lái)制備式(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)、(Ⅴ)、(Ⅵ)和(Ⅶ)的化合物。同樣可以理解，在以下的說(shuō)明中，在示意式中取代基和/或變量的組合(如R10和R11)是可允許的，只要這種組合會(huì)形成穩(wěn)定的化合物。
A．制備式(Ⅰa)和(Ⅰb)的化合物式(Ⅰa)和(Ⅰb)的化合物為在發(fā)明概述中描述的本發(fā)明的化合物，其可以按照以下的反應(yīng)路線制備，其中X為鹵素；Y為溴、氯或碘；R13為烷基或芳烷基(選擇性地被鹵素、烷基、芳基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基取代)；R1、R3、R4、R5、R6、R9、R10和R11均如發(fā)明概述中所述(只是在R10和R11的說(shuō)明中R13不是芳基)P19反應(yīng)路線1
P20反應(yīng)路線(續(xù))
式中的氨基酸是從例如Aldrich Chemical Co.,Sigma Chemical Co.或ICN Biomedicals,Inc.商購(gòu)得到。式(B)、(D)、(F)、(H)和(K)的化合物例如可從Aldrich Chemical Co.商購(gòu)，或者可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。
通常，式(Ⅰa)和(Ⅰb)的化合物的制備過(guò)程是首先，在標(biāo)準(zhǔn)酯化條件例如在-100至50℃，優(yōu)選室溫下，在強(qiáng)無(wú)機(jī)酸例如氯化氫(氣體)存在下，用式(B)的化合物處理式(A)的化合物，得到式(C)的化合物，采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如真空除去溶劑而將其從反應(yīng)混合物中分離出來(lái)。
然后，在非質(zhì)子傳遞溶劑例如DMSO中，在堿如三乙胺存在下，在20-50℃，優(yōu)選室溫下，用式(D)的化合物處理形成的式(C)化合物，處理時(shí)間為20-40小時(shí)。采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如萃取、過(guò)濾及真空除去溶劑而從反應(yīng)混合物中分離出式(E)的化合物。
此后，再在標(biāo)準(zhǔn)的烷基化條件下，例如在非質(zhì)子傳遞溶劑例如乙腈中，在堿如氫化鈉存在下，在室溫下，用式(F)的化合物處理形成的式(E)的化合物，處理時(shí)間為1-24小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如萃取、真空除去溶劑及采用快速色譜法從反應(yīng)混合物中分離出式(G)的化合物。
此后，在堿如碳酸銫存在下，在20-120℃，優(yōu)選室溫下，用等摩爾量的式(H)的化合物處理在非質(zhì)子傳遞溶劑例如乙腈中的形成的式(G)化合物，處理時(shí)間應(yīng)足夠長(zhǎng)以完成所需反應(yīng)，該反應(yīng)用薄層色譜法(TLC)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如萃取、真空除去溶劑及快速色譜法從反應(yīng)混合物中分離出式(J)的化合物。
此后，在堿如碳酸銫存在下，在20-120℃，優(yōu)選35℃，用等摩爾量的式(K)的化合物處理在非質(zhì)子傳遞溶劑例如DMSO中形成的式(J)化合物，處理時(shí)間應(yīng)足夠長(zhǎng)以完成所需反應(yīng)，例如處理時(shí)間約13小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如萃取、真空除去溶劑及快速色譜法而從反應(yīng)混合物中分離出式(L)的化合物。
將形成的式(L)化合物溶解于無(wú)水鏈烷醇，優(yōu)選乙醇中，用無(wú)機(jī)酸優(yōu)選鹽酸處理，同時(shí)保持反應(yīng)混合物為約-78℃至室溫，反應(yīng)時(shí)間為2-24小時(shí)，當(dāng)檢測(cè)(例如采用TLC)出反應(yīng)完成后，將溫度升至室溫。真空除去溶劑，形成的殘余物溶解于新的無(wú)水鏈烷醇、優(yōu)選乙醇中，然后再用無(wú)水氨氣在室溫至100℃下處理約1-5小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如真空除去溶劑及快速色譜法而從反應(yīng)混合物中分離出式(Ⅰa)的化合物，并且用高壓液相色譜(HPLC)進(jìn)行純化。
另外，上述用無(wú)水氨氣處理形成的殘余物的過(guò)程中，可用式NH2OR13的化合物代替氨氣進(jìn)行處理，得到相應(yīng)的式(Ⅰa)的化合物，其中R2為-C(NH)N(H)OR13。
然后，將形成的式(Ⅰa)的化合物在酸性條件下水解，例如用強(qiáng)無(wú)機(jī)酸如鹽酸處理，生產(chǎn)出式(Ⅰb)的化合物。此外，在該步驟期間，任一種所生產(chǎn)的包含酯取代基R1、R3、R4、R5、R6、R10、R11、R13或R14的式(Ⅰa)化合物可水解成包含相應(yīng)酸取代基的化合物。
此外，式(Ⅰa)化合物可在標(biāo)準(zhǔn)酯交換條件下用式R13OH的醇處理，其中R13為芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，生產(chǎn)出R13為選擇性取代的芳基的本發(fā)明化合物。
R3為-C(NH)NH2或-C(NH)N(H)OR13的式(Ⅰa)的化合物可以類似如上所述式(L)化合物的方式，從相應(yīng)的氰基化合物制得。
此外，可在酸性條件下對(duì)R1、R3、R4、R5、R6、R9、R10或R11包含-C(O)N(R13)R14或-C(O)OR13基團(tuán)的式(Ⅰa)化合物(其中R13和R14彼此獨(dú)立地為烷基、選擇性取代的芳基或選擇性取代的芳烷基)進(jìn)行水解，制得相應(yīng)的R1、R3、R4、R5、R5、R9、R10或R11包含-C(O)OH的本發(fā)明化合物。
此外，在標(biāo)準(zhǔn)酰胺化條件下，可對(duì)R1、R3、R4、R5、R6、R9、R10或R11包含-C(O)OR13基團(tuán)的式(Ⅰa)化合物(其中R13為氫、烷基、選擇性取代的芳基或選擇性取代的芳烷基)進(jìn)行酰胺化，得到相應(yīng)的R1、R3、R4、R5、R6、R9、R10或R11包含-C(O)N(R13)R14基團(tuán)的本發(fā)明化合物，其中R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、選擇性取代的芳基或選擇性取代的芳烷基。
此外，在標(biāo)準(zhǔn)條件下，可對(duì)R1、R3、R4、R5、R6、或R10包含硝基的式(Ⅰa)化合物還原，得到相應(yīng)的R1、R3、R4、R5、R6、或R10包含氨基的式(Ⅰa)化合物，可用適宜的烷基化試劑處理得到相應(yīng)的R1、R3、R4、R5、R6、或R10包含-N(R13)R14或-N(R13)C(O)R14的式(Ⅰa)化合物，其中R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、選擇性取代的芳基或選擇性取代的芳烷基。
式(Ⅰa)的化合物可以進(jìn)一步用適宜的酰鹵、優(yōu)選酰氯處理，或用適宜的酸酐或等同物處理，得到R2為-C(NH)N(H)C(O)R13的本發(fā)明化合物，其中R13為氫、烷基、選擇性取代的芳基或選擇性取代的芳烷基。另外，式(Ⅰa)的化合物還可進(jìn)一步用氨基甲酰氯或其等同物處理，得到R2為-C(NH)N(H)C(O)OR16的本發(fā)明化合物，其中R16如發(fā)明概述中所述。
另外，式(Ⅰa)的化合物可以進(jìn)一步在極性溶劑如二氯甲烷中，在室溫下，用式R16-S(O)2-咪唑(其中R16如發(fā)明概述中所述)進(jìn)行處理，得到R2為-C(NH)N(H)S(O)2R16的本發(fā)明化合物。
另外，式(Ⅰa)的化合物可以進(jìn)一步在極性溶劑如二氯甲烷中，在室溫下，用適宜的N-R13取代的苯基氨基甲酸酯進(jìn)行處理，時(shí)間約為6-24小時(shí)，優(yōu)選約12小時(shí)，得到R2為-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13的本發(fā)明化合物。
此外，如果式(A)的化合物已如發(fā)明概述所述通過(guò)R9取代基對(duì)氨基基團(tuán)取代，該化合物就無(wú)需反應(yīng)路線1所述的步驟3的烷基化過(guò)程。
B．式(N)化合物的制備式(N)的化合物為本發(fā)明化合物制備過(guò)程的中間體，其制備如以下的反應(yīng)路線2所述，其中Ⅹ為鹵素；R13為烷基或芳烷基(選擇性地被鹵素、烷基、芳基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基取代)；R5、R6、R10和R11均如發(fā)明概述中所述(只是在R10和R11的說(shuō)明中R13不是芳基)反應(yīng)路線2
式(M)的羥基酸可以從例如Aldrich Chemical Co.,Sigma ChemicalCo.,或IcN Biomedicals,Inc.商購(gòu)，或者可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。式(D)的化合物可以從例如Aldrich Chemical Co.商購(gòu)，或者可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。
通常，式(N)的化合物是這樣制備的在非質(zhì)子傳遞溶劑如DMF中，在堿如碳酸銫存在下，在室溫至50℃，優(yōu)選約45℃，用化合物(D)處理式(M)的化合物。將反應(yīng)混合物在該溫度下攪拌約24-72小時(shí)，優(yōu)選約72小時(shí)。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如萃取、真空除去溶劑及色譜法從反應(yīng)混合物中分離出式(N)的化合物。
然后，式(N)的化合物可以類似于在上述反應(yīng)路線1中所述化合物(E)的方式進(jìn)行處理，得到本發(fā)明的化合物，包括那些R13為氫或芳基的相應(yīng)的化合物(通過(guò)水解或酯交換)。
C．式(Q)化合物的制備式(Q)化合物在本發(fā)明化合物的制備過(guò)程中作為中間體，其制備過(guò)程如反應(yīng)路線3所示，其中Ⅹ為鹵素，R1、R3、R4、R9、R11、R13和R14如發(fā)明概述中所述，R17為烷基、芳基或芳烷基
反應(yīng)路線3
P25
式(O)的化合物按照上述反應(yīng)路線1的方法制備。式(P)的化合物可以從例如Aldrich Chemical Co.商購(gòu)，或者可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備。
通常，式(Q)的化合物是這樣制備的首先，在有機(jī)酸如三氟乙酸(TFA)存在下，將式(O)的化合物溶解于非質(zhì)子傳遞溶劑如二氯甲烷中，在室溫下攪拌形成的溶液約1-10小時(shí)，優(yōu)選約1.5小時(shí)；然后，除去溶劑，在堿如碳酸鉀存在下，將形成的殘余物溶解于鏈烷醇的水溶液、優(yōu)選甲醇/水中，直至pH為10-12，優(yōu)選pH為11。然后，再用式(P)的化合物對(duì)形成的溶液進(jìn)行處理，將形成的混合物在室溫下攪拌直至反應(yīng)完成，例如通過(guò)HPLC對(duì)所需產(chǎn)物進(jìn)行等分混合物分析。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如萃取、過(guò)濾及真空除去溶劑和色譜法從反應(yīng)混合物中分離出式(Q)的化合物。
其它式(P)的脒基酸可用于該反應(yīng)路線中生產(chǎn)相應(yīng)的式(Q)化合物。
式(Q)的化合物可以類似于上述反應(yīng)路線1中式(L)化合物的方式進(jìn)行處理，得到相應(yīng)的本發(fā)明的化合物。
D．式(Ⅰc)和(Ⅰd)化合物的制備式(Ⅰc)和(Ⅰd)的化合物為本發(fā)明的化合物，其制備過(guò)程如反應(yīng)路線4所示，其中Ⅹ為鹵素，R1、R3、R4、R9、R11、R13、R14、R15和R16如發(fā)明概述中所述，R17為烷基、芳基或芳烷基反應(yīng)路線4
式(O)的化合物按照上述反應(yīng)路線1所述的方法制備。
通常，式(Ⅰc)和(Ⅰd)的化合物的制備過(guò)程是這樣的首先，將式(O)的化合物溶解于非質(zhì)子傳遞溶劑/鏈烷醇中，例如乙醇/二氯甲烷中，然后，在-20至0℃，優(yōu)選約-10℃下還原該溶液，再用無(wú)機(jī)酸如鹽酸處理該溶液約15分鐘至1個(gè)小時(shí)，優(yōu)選約15分鐘。此后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約10-20小時(shí)，優(yōu)選20小時(shí)。真空除去揮發(fā)性溶劑，形成的殘余物再溶解于醇中，優(yōu)選無(wú)水乙醇。然后，將形成的溶液冷卻至約-20℃至約0℃，優(yōu)選約-10℃，再在室溫下用無(wú)水氨氣處理約15分鐘至約1小時(shí)，優(yōu)選約15分鐘。此后，將形成的混合物加熱回流約1-3小時(shí)，優(yōu)選約2小時(shí)，再冷卻至室溫，濃縮。將形成的殘余物溶解于無(wú)機(jī)酸水溶液中，例如鹽酸水溶液，加熱回流約2-4小時(shí)，優(yōu)選約4小時(shí)。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如通過(guò)HPLC純化從反應(yīng)混合物中分離出式(Ⅰc)的化合物。
然后，將式(Ⅰc)的化合物溶解于含水醇溶劑中，例如，甲醇/水。在強(qiáng)有機(jī)堿如碳酸鉀存在下，向形成的溶液中加入亞氨代乙酸烷基酯(alkylacetimidate)，優(yōu)選亞氨代乙酸乙酯。在室溫下，將形成的反應(yīng)混合物攪拌約1-3小時(shí)，優(yōu)選約1小時(shí)。然后，采用標(biāo)準(zhǔn)分離技術(shù)如過(guò)濾和色譜法從反應(yīng)混合物中分離出式(Ⅰd)的化合物。
此外，通過(guò)用適宜的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸或者通過(guò)適宜的無(wú)機(jī)或有機(jī)堿進(jìn)行處理，本發(fā)明的所有以游離堿形式或游離酸形式存在的化合物均可轉(zhuǎn)化成其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的化合物的鹽也可轉(zhuǎn)化成游離堿形式或游離酸形式或另一種鹽形式。
下面提供具體的制備例和實(shí)施例作為指導(dǎo)以幫助實(shí)施本發(fā)明，但它們并不是對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。
制備例1式(C)的化合物
A、將2-氨基異丁酸(3.3g，32mmol)的無(wú)水乙醇(100ml)溶液冷卻至-78℃，用HCl(g)鼓泡10分鐘。將燒瓶用隔膜密封，并在室溫下攪拌。14小時(shí)后，將混合物進(jìn)行真空濃縮，得到5.3g(收率99％)的2-氨基異丁酸乙酯，為白色固體；NMR(CDCl3)8.9(brs,3),4.1(q,2),1.7(s,6),1.3(t,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物2-N-甲基-2-氨基丙酸乙酯。
C、以類似的方式，制備下列化合物2-甲基-2-氨基丙酸乙酯；2-甲基乙基-2-氨基丙酸乙酯；2-(2-甲基丙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(1-甲基丙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(羥基甲基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(1-羥基乙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(巰基甲基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(甲硫基乙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(羧甲基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(氨基羰基甲基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(2-羧基乙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(氨基羰基乙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(3-胍基丙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(4-胍基丙基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(4-氨基丁基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(4-氨基-3-羥基丁基)-2-氨基丙酸乙酯；2-(4-(N-叔丁氧羰基氨基)丁基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(咪唑-4-基甲基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(苯基甲基)-2-氨基丙酸甲酯；2-((4-羥基苯基)甲基)-2-氨基丙酸甲酯；
2-(吲哚-3-基甲基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(2-巰基乙基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(2-羥基乙基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(3-氨基丙基)-2-氨基丙酸甲酯；2-(3-脲基丙基)-2-氨基丙酸甲酯；和2-(2,2-二羧基乙基)-2-氨基丙酸甲酯。
制備例2式(E)的化合物A、將2-氨基異丁酸乙酯(92.0g,12mmol)的無(wú)水DMSO(125ml)溶液中加入五氟吡啶(1.6ml,2.4g,14.4mmol)和三乙胺(8.3ml,6.1g,60mmol)。將形成的混合物在室溫下攪拌40小時(shí),然后將其倒入300ml水和300ml乙酸乙酯中。分離出水層，用100ml的乙酸乙酯萃取。并將合并后的萃取液用水(250ml)洗滌，再用鹽水(250ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到3.5g(收率92％)的4-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶，為結(jié)晶固體NMR(CDCl3)5.0(brs,1),4.2(q,2),1.7(s,6),1.3(t,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基)氨基戊-1-基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；和4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-N-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；
4-N-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；和4-N-(1-乙氧羰基-4-氨基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶。
制備例3式(G)的化合物A、向4-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶(3.1g,9.8mmol)的乙腈(70ml)溶液中加入氫化鈉(0.8g,20mmol,60％礦物油的分散體)。在氣體釋放停止后，加入碘甲烷(1.25ml,2.8g,20mmol)，將形成的混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后，將混合物倒入200ml水和200ml乙酸乙酯中。分離出水層，用100ml乙酸乙酯萃取。將合并后的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到一種棕色油。通過(guò)硅膠快速色譜純化，得到2.2g(收率68％)的4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶，為澄清無(wú)色的液體NMR(CDCl3)4.2(q,2),3.1(s.3),1.6(s,6),1.3(t,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-N-乙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-丙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-丁基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；
4-N-苯基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-芐基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(3-乙氧羰基)丙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(4-二甲氨基羰基)丁基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-(4-二甲氨基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-丙基-N-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-引哚-3-基乙基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶；和4-N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-氨基丁基)氨基-2,3,5,6-四氟吡啶。
制備例4式(J)的化合物
A、向4-[N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基]-2,3,5,6-四氟吡啶(2.2g,6.6mmol)的乙腈(60ml)溶液中加入2-芐氧基-5-氰基苯酚(1.5g,6.6mmol)和碳酸銫(2.8g,8.6mmol)。將形成的混合物在40℃下攪拌2天。然后，將混合物冷卻至室溫，并將其倒入200ml 0.5M的KOH水溶液與200ml乙酸乙酯中。分離出水層，用100ml乙酸乙酯萃取。將合并后的有機(jī)萃取液用0.5M的KOH水溶液(200ml)洗滌，再用鹽水(200ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到黃色油，其靜置后固化。用30％乙酸乙酯/己烷進(jìn)行重結(jié)晶，得到2.4g(收率68％)的4-芐氧基-3-[(4-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈，為白色結(jié)晶狀固體NMR(CDCl3)7.6-7.1(m,8),5.2(s,2),4.2(q,2),3.1(s,3),1.6(s,6),1.3(t,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基氨基)戊基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；和4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基)乙基氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-(N-乙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丁基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-苯基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-芐基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；
4-芐氧基-3-[(4-(N-(3-乙氧羰基丙基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-(4-氨基羰基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-(4-氨基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丁氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-巰基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；
4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基丙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羧基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-羧基丙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-引哚-3-基乙氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；和4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
制備例5式(L)的化合物A、向4-芐氧基-3-[(4-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-3,5,6-三氟吡啶-2-基)氧基]芐腈(2.4g,4.5mmol)的DMSO(50ml)溶液中，加入3-((1-甲基)咪唑啉-2-基)苯酚(0.8g,4.5mmol)和碳酸銫(1.9g,5.8mmol)。將形成的混合物在35℃下進(jìn)行攪拌。13小時(shí)后，將混合物冷卻至室溫，將混合物倒入200ml水和200ml乙酸乙酯中。分離出水層，用100ml乙酸乙酯萃取。將合并后的有機(jī)萃取液0.5M KOH溶液(200ml)洗滌，再用鹽水(200ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈，為固體泡沫NMR(CDCl3)7.4-7.0(m,12),5.0(s,2),4.2(q,2),3.9(t,2),3.5(t,2),3.1(s,3),2.8(s,3),1.6(s,6),1.3(t,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基氨基戊-1-基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基氨基戊-1-基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；和4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基)乙基氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-(N-乙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丁基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-苯基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-芐基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-(3-乙氧羰基丙基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-(4-氨基羰基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；
4-芐氧基-3-[(4-(N-(4-氨基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-巰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羧基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；
4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-羧基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈；和4-芐氧基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
制備例6式(N)的化合物A、向2-羥基-4-甲基戊酸乙酯(0.50g,2.5mmol)的無(wú)水DMF(25ml)溶液中加入五氟吡啶(0.31ml,0.47g,2.8mmol)和碳酸銫(1.1g,3.3mmol)。將形成的混合物加熱至45℃并在該溫度下攪拌10天，然后將其倒入100ml水和100ml乙酸乙酯中。分離出水層，用500ml的乙酸乙酯萃取。將合并后的萃取液用水(100ml)洗滌，再用鹽水(100ml)洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到0.87g(收率99％)的4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶，為澄清的黃色溶液NMR(CDCl3)5.2(d,1),4.3-4.1(m,3),2.0(m,1),1.8(m,1),1.3(m,3),1.0(m,6)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶；和4-(1-乙氧羰基-4-氨基丁基)氧基-2,3,5,6-四氟吡啶。
制備例7式(Q)的化合物A、向4-芐氧基-3-[(4-(N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基氨基)戊基)氨基-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈(600mg,0.74mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中，加入25ml的TFA。將形成的混合物在室溫下攪拌1.5小時(shí)，然后真空除去所有的揮發(fā)性成分。將殘余物溶解于25ml的3∶2甲醇/水混合物中，加入K2CO3，直至pH值為11(1.05g，7.4mmol)，再加入脒基磺酸(275mg,2.22mmol)。30分鐘后，抽取單位部分，用C18Dynamax柱進(jìn)行HPLC分析，用含0.1％三氟乙酸的20-80％乙腈的水溶液進(jìn)行梯度洗脫，顯示發(fā)生完全反應(yīng)。將反應(yīng)混合物進(jìn)行真空濃縮以除去溶劑，殘余的水溶液用乙腈萃取3次。合并后的有機(jī)層用鹽水洗滌，用硅藻土柱過(guò)濾，濃縮，得到800mg的4-芐氧基-3-[(4-(N-(羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈，為一種油。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-(N-(羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈。
實(shí)施例1式(Ⅰa)的化合物A、將4-芐氧基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈(0.98g，1.46mmol)的無(wú)水乙醇(40ml)溶液冷卻至-78℃，將HCl(氣體)鼓泡通過(guò)該混合物15分鐘。形成的混合物在室溫下攪拌20小時(shí)，然后在不加熱的情況下真空濃縮，得到一種白色泡沫物。將該泡沫物溶解于無(wú)水乙醇(40ml)中，加熱回流，同時(shí)用NH3(氣體)溫和地鼓泡通過(guò)該混合物。2小時(shí)后，將混合物冷卻至室溫，真空濃縮。用C18 Dynamax柱進(jìn)行HPLC純化，用含0.1％三氟乙酸的20-80％的乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫，得到4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒的三氟乙酸鹽，為白色固體NMR(DMSO-d6)10.2(br s,1),9.0(br s,2),8.7(br s,2),7.3-7.6(m,6),7.0(d,2),3.9-4.2(m,6),3.0(s,3),2.9(s,3),1.5(s,3),1.1(t,3)ppm。
B、以類似的方式,制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；NMR(DMSO-d6)11.1(br s,1),10.3(br s,1),9.1(br s,2),8.9(br s,2),7.0-7.7(m,10),6.6(d,1),4.3(m,1),4.0(m,2),3.9(m,2),3.1(m,2),3.0(s,3),1.8(m,2),1.5(m,4)ppm；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；NMR(DMSO-d6)10.2(br s,1),9.0(brs,2),8.8(br s,2),7.3-7.6(m,6),7.0(d,1),5.2(m,1),4.2(q,2),3.9-4.1(m,4),2.9(s,3),1.7-2.0(m,3),1.2(t,3),1.0(s,3),0.95(s,3)ppm；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；NMR(DMSO-d6)10.2(br s,1),9.0(br s,2),8.8(br s,2),7.3-7.6(m,6),7.0(d,2),4.4(q,2),3.8-4.2(m,5),3.0(s,3),2.9(s,3),1.4(d,3),1.2(t,3)ppm。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(N-乙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丁基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-苯基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-芐基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(3-乙氧羰基丙基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；
4-羥基-3-[(4-(N-(4-氨基羰基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(4-氨基丁基)-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-乙氧羰基-3-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-巰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羥基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-羧基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-4-胍基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-巰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲硫基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羥基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-羧基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；
4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-氨基羰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-羧基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-氨基羰基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-咪唑-4-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-苯基甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-2-吲哚-3-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
實(shí)施例2式(Ⅰb)的化合物A、將4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒的三氟乙酸鹽(0.10g,0.11mmol)的6N HCl水溶液(12ml)在65℃下攪拌1小時(shí)。然后，將其冷卻至室溫，用乙腈和三氟乙酸稀釋，用C18 Dynamax柱進(jìn)行HPLC純化，用含0.1％三氟乙酸的20-80％的乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫，得到4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒的三氟乙酸鹽，為白色固體NMR((DMSO-d6)/TFA)10.2(br s,1),9.0(br s,2),8.8(br s,2),7.3-7.6(m,6),7.0(d,2),4.1m,2),3.9(m,2),3.0(s,3),2.9(s,3),1.4(s,3)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒NMR(DMSO-d6)9.0(br s,2),8.8(br s,2),7.0-7.7(m,6),7/0(d,1),5.2(m,1),3.9-4.1(m,4),2.9(s,3),3.0(s,3),1.7-2.0(m,3),1.0(s,3),0.95(s,3)ppm；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒的三氟乙酸鹽,為白色固體NMR(DMSO-d6)10.2(br s,1),9.0(br s,2),8.8(br s,2),7.3-7.6(m,6),7.0(d,2),4.3(q,2),4.1(m,2),3.9(m,2),3.0(s,3),2.9(s,3),1.4(d,3)ppm。
C、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(N-乙基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丁基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-苯基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-芐基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(3-羧基丙基)-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(4-氨基羰基丁基)-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；
4-羥基-3-[(4-(N-(4-氨基丁基)-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-丙基-N-(1-羧基-3-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-甲基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-甲基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-巰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-3-甲硫基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-羥基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-羥基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-氨基羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-3-羧基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-3-氨基羰基丙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-咪唑-4-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-苯基甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-2-吲哚-3-基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-4-胍基丁基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-1-甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-甲基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-巰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-甲硫基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-羥基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-羥基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-羧基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-氨基羰基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；
4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-羧基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-氨基羰基丙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-咪唑-4-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-苯基甲基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-2-吲哚-3-基乙氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(1-羧基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(1-羧基-4-胍基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
實(shí)施例3式(Ⅰc)的化合物A、將4-芐氧基-3-[(4-(N-(1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐腈(890mg,1.1mmol)的乙醇/二氯甲烷1∶1混合物溶液(15ml)冷卻至-10℃，將HCl(氣體)鼓泡通過(guò)該混合物15分鐘。形成的混合物在室溫下攪拌20小時(shí)，然后在不加熱的情況下真空濃縮除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)，得到一種白色泡沫狀固體。將該泡沫物溶解于無(wú)水乙醇(40ml)中，冷卻至-10℃，同時(shí)用NH3(氣體)溫和地鼓泡通過(guò)該混合物15分鐘。然后，將混合物在65℃下加熱2小時(shí)，再將混合物冷卻至室溫，真空濃縮。形成的殘余物溶解于6N HCl水溶液(10ml)，并在85℃下加熱4小時(shí)。將混合物冷卻至室溫，用C18 Dynamax柱進(jìn)行HPLC純化，用含0.1％三氟乙酸的20-80％的乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫，得到4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；NMR(DMSO-d6)8.9(br s,2),8.6(br s,2),7.7-7.2(m,12),6.8-7.7(m,9),6.5(br s,1),4.4(m,1),3.7(s,3),2.8(m,2),1.9(m,2),1.5(m,4)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒NMR(DMSO-d6)8.9(br s,2),6.3-7.7(m,17),4.4(m,1),3.7(s,3),3.1(m,2),1.9(m,2),1.5(m,4)ppm；C、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
實(shí)施例4式(Ⅰd)的化合物A、向4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基)咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒(271mg,0.47mmol)的4∶1甲醇/水混合物(12ml)的溶液中加入K2CO3(193mg,1.4mmol,pH8-9)和亞氨代乙酸乙酯(172mg,1.4mmol)。攪拌1小時(shí)后，將混合物過(guò)濾，用制備HPLC在C18Dynamax柱上進(jìn)行純化，用含0.1％三氟乙酸的20-80％的乙腈水溶液進(jìn)行梯度洗脫，得到4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；NMR((DMSO-d6))9.3(br s,1),8.9(br s,3),8.6(br s,2),8.4(br s,2),7.4-7.7(m,9),7.2(d,1),6.8(d,1),4.4(m,1),3.7(s,3),3.2(m,2),2.1(s,3),1.9(m,2),1.5(m,4)ppm。
B、以類似的方式，制備下列化合物4-羥基-3-[(4-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒NMR(DMSO-d6)10.3(br s,1),9.4(br s,1),9.0(br s,3),8.7(br s,2),8.5(br s,2),7.0-7.7(m,9),6.3(br s,1),4.4(m,1),4.1(m,2),3.9(m,2),3.3(m,2),3.0(s,3),2.2(s,3),1.8(m,2),1.5(m,4)ppm。
實(shí)施例5本實(shí)施例說(shuō)明代表性口服藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-N-甲基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒A．成分 ％重量本發(fā)明的化合物20.0％乳糖 79.5％硬脂酸鎂 0.5％將上述成分混合，并充入硬殼明膠膠囊中，每一粒膠囊包含100mg，每一粒膠囊大約是一天的劑量。
B．成分 ％重量本發(fā)明的化合物 20.0％硬脂酸鎂0.9％淀粉8.6％乳糖 79.6％PVP(聚乙烯吡咯烷酮) 0.5％將除硬脂酸鎂之外的其它成分合并，以水作為造粒液體進(jìn)行造粒。然后將其干燥，再與硬脂酸鎂混合，用適宜的壓片機(jī)形成藥片。
C．成分 重量本發(fā)明的化合物0.1g聚乙二醇 20.0g聚乙二醇400 20.0g聚山梨酸酯80 1.0g水至100ml將本發(fā)明的化合物溶解于乙二醇、乙二醇400和聚山梨酸酯80中。然后在攪拌下加入足量的水，得到100ml的溶液，將其過(guò)濾，裝瓶。
D．成分 ％重量本發(fā)明的化合物20.0％花生油78.0％司盤60 2.0％將上述成分熔化，混合，裝入軟塑料膠囊中。
E．成分 ％重量本發(fā)明的化合物 1.0％甲基或羧甲基纖維素 2.0％0.9％鹽水 至100ml實(shí)施例6本實(shí)施例說(shuō)明代表性的腸胃外給藥的藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒成分本發(fā)明的化合物0.02g聚乙二醇 20.0g聚乙二醇400 20.0g聚山梨酸酯80 1.0g0.9％鹽水溶液 至100ml將本發(fā)明的化合物溶解于乙二醇、乙二醇400和聚山梨酸酯80中。然后在攪拌下加入足量的0.9％鹽水溶液，得到100ml的靜脈內(nèi)溶液，將其通過(guò)0.2μ的膜過(guò)濾材料過(guò)濾，在無(wú)菌條件下包裝。
實(shí)施例7本實(shí)施例說(shuō)明代表性栓劑形式的藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒成分 ％重量本發(fā)明的化合物 1.0％聚乙二醇1000 74.5％聚乙二醇4000 24.5％在蒸汽浴中，將各種成分熔化在一起并混合，將其倒入包含2.5g總重量的模子中。
實(shí)施例8
本實(shí)施例說(shuō)明代表性吹入劑形式的藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-N-甲基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒成分 ％重量本發(fā)明微粉化的化合物1.0％微粉化的乳糖 99.0％將兩種成分磨碎，混合，包裝在備有劑量泵的吹藥器中。
實(shí)施例9本實(shí)施例說(shuō)明代表性噴霧劑形式的藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒成分 ％重量本發(fā)明的化合物0.005％水 89.995％乙醇 10.000％將本發(fā)明的化合物溶解于乙醇中，摻入水。然后將制劑包裝在備有劑量泵的噴霧器中。
實(shí)施例10本實(shí)施例說(shuō)明代表性氣溶膠形式的藥物組合物的制備過(guò)程，所述組合物包含本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如，4-羥基-3-[(4-N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基)-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒成分 ％重量本發(fā)明的化合物 0.10％噴射劑 98.90％油酸 1.00％將本發(fā)明的化合物分散于油酸和噴射劑中。然后將形成的混合物倒入備有計(jì)量閥的氣溶膠容器中。
實(shí)施例11(對(duì)因子Ⅹa和凝血酶的體外實(shí)驗(yàn))該實(shí)驗(yàn)說(shuō)明了本發(fā)明的化合物對(duì)因子Ⅹa、凝血酶和組織纖溶酶原激活物的活性。該活性是由酶使對(duì)硝基酰苯胺肽裂解的初始速度確定的。裂解產(chǎn)物對(duì)硝基苯胺在405nm處有吸收，摩爾消光系數(shù)為9920M-1cm-1。
試劑和溶液二甲亞砜(DMSO)(Baker分析級(jí))。
實(shí)驗(yàn)緩沖液50mM TrisHCl,150mM NaCl,2.5mM CaCl2,0.1％聚乙二醇6000,pH7.5。
酶(Enzyme Research Lab.)1．人體因子Ⅹa儲(chǔ)液0.281mg/ml(以實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)，在-80℃下貯藏(工作溶液(2×):106ng/ml或2nM(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)，使用前制備)。
2．人體凝血酶儲(chǔ)液在-80℃下貯藏(工作溶液(2×):1200ng/ml或40nM實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑的溶液，使用前制備)。
3．人體組織纖溶酶原激活物(tPA)(Two chains,Sigma)儲(chǔ)液1mg/ml，在-80℃下貯藏(工作溶液(2×):1361ng/ml(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)，使用前制備)。
顯色底物(Pharmacia Hepar Inc.):
1．S2222(FⅩa實(shí)驗(yàn))儲(chǔ)液6mM(dH2O為溶劑)，在4℃下貯藏(工作溶液(4×):656μM(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑))。
2．S2302(凝血酶實(shí)驗(yàn))儲(chǔ)液10mM(dH2O為溶劑)，在4℃下貯藏(工作溶液(4×):1200μM(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑))。
3．S2288(tPA實(shí)驗(yàn))儲(chǔ)液10mM(dH2O為溶劑)，在4℃下貯藏(工作溶液(4×):1484μM(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑))。
(所有底物工作溶液在實(shí)驗(yàn)的第5天制備)標(biāo)準(zhǔn)抑制劑化合物儲(chǔ)液5mM(DMSO為溶劑)，在-20℃下貯藏。
測(cè)試化合物(本發(fā)明的化合物)儲(chǔ)液10mM(DMSO為溶劑)，在-20℃下貯藏。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程實(shí)驗(yàn)是在總體積為200μL的96孔微量滴定板中進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)組分的最后濃度為50mM TrisHCl，150mM NaCl,2.5mM CaCl2,0.1％聚乙二醇6000,pH7.5，存在或不存在標(biāo)準(zhǔn)抑制劑，或測(cè)試化合物及酶和底物的濃度如下(1)1nM因子Ⅹa和164μM S2222；(2)20nM凝血酶和300μMS2302；(3)10nM tPA和371μM S2228。在本實(shí)驗(yàn)中，在1-3稀釋液中標(biāo)準(zhǔn)抑制劑化合物的濃度通常為5μM-0.021μM。在本實(shí)驗(yàn)中，在1-3稀釋液中測(cè)試化合物的濃度通常為10μM-0.041μM。對(duì)于強(qiáng)效力測(cè)試化合物，在因子Ⅹa實(shí)驗(yàn)中采用的濃度須進(jìn)一步稀釋100倍(100nM-0.41nM)或1000倍(10nM-0.041nM)。在本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)條件下，采用的所有底物濃度等于其Km值。實(shí)驗(yàn)在室溫下進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)的第一步是制備10mM測(cè)試化合物的儲(chǔ)液(DMSO作溶劑)(對(duì)于因子Xa實(shí)驗(yàn)，應(yīng)將強(qiáng)效力化合物10mM的儲(chǔ)液進(jìn)一步稀釋至0.1-0.01mM)，隨后，在96深孔板中按照如下所述，采用Biomek 1000 (或Multiprobe 204)對(duì)10mM的儲(chǔ)液進(jìn)行一系列的稀釋，制備測(cè)試化合物工作溶液(4×)(a)用實(shí)驗(yàn)緩沖液分兩步將10mM的儲(chǔ)液1稀釋至250∶1至100，和1至2.5，，制得40μM的工作溶液(實(shí)驗(yàn)緩沖液作溶劑)；(b)制備另外五份40μM溶液的系列稀釋液(1∶3)(各濃度下各600μl)。總共六份測(cè)試化合物溶液用于本實(shí)驗(yàn)中。按照如上述對(duì)測(cè)試化合物相同的稀釋步驟，制備標(biāo)準(zhǔn)抑制劑化合物(5mM儲(chǔ)液)或DMSO(對(duì)照)。
實(shí)驗(yàn)的第二步是用Biomek或MP204，將50μl的測(cè)試化合物工作溶液(4×)(40μM-0.164μM)分配于微量滴定板上，重復(fù)進(jìn)行一次同樣的過(guò)程。用Biomek或MP204向該溶液中加入100μl的酶工作溶液(2×)。將形成的溶液在室溫下培養(yǎng)10分鐘。
用Biomek或MP204向該溶液中加入50μl的底物工作溶液(4×)。
在室溫下，在THERMOmax板計(jì)數(shù)器中，以10秒為間隔，測(cè)量在405nm處的酶動(dòng)力學(xué)，共測(cè)量5分鐘。
計(jì)算BX化合物的Ki值以頭兩分鐘的讀數(shù)值為基礎(chǔ)計(jì)算酶速率，單位為mOD/min。采用EXCEL的擴(kuò)展頁(yè)(spread-sheet)，通過(guò)擬合數(shù)據(jù)成對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)方程(線性)或Morrison方程(非線性)而確定IC50值。然后，將IC50值除以2得到Ki值。并從Morrison方程順便計(jì)算3nM外的Ki值(因子Ⅹa)。
本發(fā)明的化合物在該實(shí)驗(yàn)中的測(cè)試結(jié)果表明，其具有抑制人體因子Ⅹa和人凝血酶的選擇能力。
實(shí)施例12
(人體凝血酶原酶的體外實(shí)驗(yàn))該實(shí)驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明化合物抑制凝血酶原酶的能力。以meizothrombin作為中間體，凝血酶原酶(PTase)可催化激活前凝血酶而產(chǎn)生片斷1.2和凝血酶。該實(shí)驗(yàn)是一個(gè)終點(diǎn)實(shí)驗(yàn)。由凝血酶(反應(yīng)產(chǎn)物之一)的活性或由形成的凝血酶的數(shù)量/基于凝血酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)間(nM對(duì)mOD/min)來(lái)測(cè)量凝血酶原酶的活性。為確定本發(fā)明化合物的IC50值(PTase)，PTase活性通過(guò)凝血酶活性表示(mOD/min)。
材料酶1．人體因子Va(Haematologic Technologies Inc.,Cat#HCVA-0110)工作溶液1.0mg/ml(50％甘油為溶劑)，2mM CaCl2，在-20℃下貯藏。
2．人體因子Ⅹa(Enzyme Research Lab.，Cat#HFⅩa-1011)工作溶液0.281mg/ml(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)(無(wú)BSA)，在-80℃下貯藏。
3．人體前凝血酶(FⅡ)(Enzyme Research Lab.，Cat#HP1002)工作溶液稀釋FⅡ至4.85mg/ml(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)(無(wú)BSA)，在-80℃下貯藏。
磷脂(PCPS)泡囊PCPS泡囊(80％PC,20％PS)按照下述方法的改進(jìn)方法制備Barenhola等，Biochemistry(1977),Vol.16,pp.2806-2810。
磷脂酰絲氨酸(Avanti Polar Lipid,Inc.,Cat#840032)10mg/ml(氯仿為溶劑)，從腦純化得到，在氮?dú)饣驓鍤饧?20℃下貯藏。
磷脂酰膽堿(Avanti Polar Lipid,Inc.,Cat#850457)50mg/ml(氯仿為溶劑)，合成16∶0-18∶1棕櫚酰-油酰，在氮?dú)饣驓鍤饧?20℃下貯藏。
Spectrozyme-TH(American Diagnostica Inc.,Cat#238L,50μmol，在室溫下貯藏)工作溶液溶解50μmol于10ml dH2O中。
BSA(Sigma Chem Co.,Cat#A-7888,Fraction V,RIA級(jí))。
實(shí)驗(yàn)緩沖液50mM TrisHCl,pH7.5,150mM NaCl,2.5mM CaCl2,0.1％聚乙二醇6000(BDH),0.05％BSA(Sigma,FrV,RIA級(jí))。
對(duì)于單板實(shí)驗(yàn)，制備下述工作溶液1．凝血酶原酶復(fù)合物(a)100μM PCPS(27.5μl的儲(chǔ)液(4.36mM)，用實(shí)驗(yàn)緩沖液稀釋至最終1200μl)。(b)25nM人體因子Ⅹa5.08μl的Ⅴa儲(chǔ)液，用實(shí)驗(yàn)緩沖液稀釋至最終1200μl。(c)5pM的人體因子Ⅹa用實(shí)驗(yàn)緩沖液稀釋因子Ⅹa儲(chǔ)液(0.281mg/ml)1∶1,220,000。制備至少1200μl。
按照PCPS、Ⅴa和Ⅹa的順序，合并等體積(1100μl)的每一種成分。在室溫下靜置5-10分鐘，立即使用或貯藏在冰中(使用前升溫至室溫)。
2．6μM人體前凝血酶(FⅡ)用實(shí)驗(yàn)緩沖液稀釋124μl FⅡ儲(chǔ)液(4.85mg/ml)至最終1400μL。
3．20mM EDTA/實(shí)驗(yàn)緩沖液0.8ml 0.5M的EDTA(pH8.5)加上19.2ml實(shí)驗(yàn)緩沖液。
4．0.2mM Spectrozyme-TH/EDTA緩沖液0.44ml的SPTH儲(chǔ)液(5mM)加上10.56ml的20mM EDTA/實(shí)驗(yàn)緩沖液。
5．測(cè)試化合物(本發(fā)明的化合物)從10mM儲(chǔ)液(DMSO)制備工作溶液(5×)，制備一系列1∶3的稀釋液。在6種濃度下重復(fù)對(duì)化合物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)條件和過(guò)程凝血酶原酶反應(yīng)在包含Ptase(20uMPCPS,5nM hFⅤa和1pMhFⅩa)、1.2uM人體因子Ⅱ及各種濃度測(cè)試化合物(5μM-0.021μM或更低濃度范圍)的最終50μl的混合物中進(jìn)行。加入PTase開始反應(yīng)，在室溫下培養(yǎng)6分鐘。加入EDTA/緩沖液至最終10mM使反應(yīng)停止。然后，在室溫下，在THEROmax微量滴定計(jì)數(shù)器中，在作為底物的0.1mmSpectrozyme-TH存在下，測(cè)量凝血酶(產(chǎn)物)在405nm處的活性，測(cè)量5分鐘(以10秒為間隔)。反應(yīng)是在96孔的微量滴定板中進(jìn)行的。
在實(shí)驗(yàn)的第一步中，將10μl的稀釋后的測(cè)試化合物(5×)或緩沖液加入板中，重復(fù)操作一次。然后，將10μl的前凝血酶(hFⅡ)(5×)加入每一個(gè)孔中。以后，將30μl的PTase加至每一個(gè)孔中，混合約30秒。然后，將滴定板在室溫下培養(yǎng)6分鐘。
第二步，將50μl的20mM EDTA(實(shí)驗(yàn)緩沖液為溶劑)加入每一個(gè)孔中以使反應(yīng)停止。將形成的溶液混合約10秒。再向每一個(gè)孔中加入100μl的0.2mM的Spectrozyme。然后，在Molecular Devices微量滴定板計(jì)數(shù)器中，以10秒為間隔，測(cè)量凝血酶在405nm處的反應(yīng)速率，測(cè)量5分鐘。
計(jì)算凝血酶反應(yīng)速率以mOD/min表示，使用來(lái)自5分鐘反應(yīng)的OD讀數(shù)。采取對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)曲線擬合程序計(jì)算IC50值。
本發(fā)明的化合物進(jìn)行的該實(shí)驗(yàn)表明其具有抑制凝血酶原酶的能力。
實(shí)施例13(體內(nèi)實(shí)驗(yàn))下述實(shí)驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明化合物作為抗凝血?jiǎng)┑哪芰Α?br> 將雄性大鼠用戊巴比妥鈉麻醉(90mg/kg,i.p.)，準(zhǔn)備進(jìn)行手術(shù)。向大鼠的左頸動(dòng)脈中插入套管以測(cè)量血壓，并且取血樣檢測(cè)凝塊變化(前凝血酶時(shí)間(PT)和激活部分促凝血酶原激酶時(shí)間(aPTT))。在其尾靜脈插管以對(duì)其供給測(cè)試化合物(即本發(fā)明的化合物和標(biāo)準(zhǔn)樣)，并且進(jìn)行促凝血酶原激酶灌注。經(jīng)正中切口開腹，將距腎靜脈2-3cm距離的腹大動(dòng)脈分開。將所有在該腹大動(dòng)脈上2-3cm段的靜脈分支進(jìn)行結(jié)扎。完成手術(shù)后，在實(shí)驗(yàn)之前將大鼠穩(wěn)定。將測(cè)試化合物以靜脈內(nèi)快速濃注法給藥(t=0)。3分鐘以后(t=3)，開始5分鐘的促凝血酶原激酶灌注。在兩分鐘灌注后(t=5)，將腹大動(dòng)脈在近端和遠(yuǎn)端結(jié)扎。將血管復(fù)原60分鐘，然后，從大鼠上切除，將其切開，小心除去血塊(如果存在的話)，稱重。使用Wiscoxin配對(duì)有正負(fù)號(hào)的排列檢驗(yàn)法對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
本發(fā)明的化合物當(dāng)進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)時(shí)，顯示出抑制血液凝集的能力。
以上，參考具體的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)描述，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以理解，在不背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)和范圍下可以進(jìn)行各種變化，采用各種等同代換。此外，可以做出各種改進(jìn)以適應(yīng)目標(biāo)特定的情形、材料、事物組成、過(guò)程、加工步驟。所有這些改進(jìn)也均在本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種選自具有下式的、為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中A為-C(R8)=或-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-N(R13)-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、硝基、-OR13、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-N(R13)C(O)R13或-N(H)S(O)2R16；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(NH)N(H)C(O)OR16、-C(NH)N(H)C(O)R13、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、氨基、脲基、胍基、-OR13、-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(O)N(R13)R14、-R15-C(O)N(R13)R14、-CH(OH)C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-N(R13)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)R14、-N(R13)S(O)2R16或-N(R13)C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-4)或-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R8為氫、烷基或鹵素；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-R15-CH(N(R13)R14)C(O)OR13或-(R15)S(O)2R16；R10分別獨(dú)立地為烷基、鏈烯基、鏈炔基、鹵代烷基、鹵代鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-C(O)R15-N(R13)R14、-R15-C(O)R13、-R15-C(O)N(R13)N(R13)R14、-R15-C(R13)(OR13)-R15-N(R13)(R14)、-C(R13)(OR13)C(O)OR14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-C(R13)(OR13)R14、-R15-N(R13)(R14)、-R15-N(R13)C(O)OR16、-R15-N(R13)C(O)OR14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-N(R13)S(O)2R16、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)N(R13)R14、-R15-N(R13)-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-N(R13)S(O)R14、-R15OR13、-R15-ON(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-OS(O)2OR13、-R15-P(O)(OR13)R14、-R15-OP(O)(OR13)2、-R15-P(O)(OR13)2、-R15-SR13、-R15-S-R15-C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)R14、-R15-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-SC(O)N(R13)R14、-R15-SC(S)N(R13)R14、-R15-S(O)R13、-R15-S(O)2R16、-R15-S(O)OR13、-R15-S(O)2OR13、-R15-S(O)2N(R13)R14、-R15-S(O)(NR13)R14；或R10分別為芳基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基(adamantyl)(選擇性地被下述取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基烷基(其中金剛烷基選擇性地被下述取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基或芳基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、(單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基；羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、芳基、烷基、羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的選自具有下式(Ⅰ)、為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中A為-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素或-OR13；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為脲基、胍基、-N(R13)R14、-N(H)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基；R7為-N(R9)-(CR10)(R11))n-R12(其中n為4)；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基；R10分別獨(dú)立地為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-OP(O)(OR13)2；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR16和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基可選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR16和-OP(O)(OR13)2)。R11彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中Z1和Z2獨(dú)立地為-O-；R1為氫或OR13；R2為-C(NH)NH2；R3為(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被甲基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R4為氫；R5和R6彼此獨(dú)立地為鹵素；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1)；R9為氫、烷基、芳基或芳烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-Op(O)(OR13)2；或R10為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代鹵素、鹵代烷基、羥基或-OP(O)(OR13)2)；或R10為咪唑基烷基或吲哚基烷基；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基或芳基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中R1為-OR13；R3為(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R5和R6均為氟；R9為氫或烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16或-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其選自4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-乙氧羰基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基-1-甲基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-甲基-N-(1-羧基乙基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-氨基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-胍基戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(N-(1-羧基-5-(N-(1-亞氨基乙基)氨基)戊基)氨基)-6-(3-(1-甲基咪唑-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
7.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中A為-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素或-OR13；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為脲基、胍基、-N(R13)R14、-N(H)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基；R7為-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R10分別獨(dú)立地為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-OP(O)(OR13)2；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR16和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-SR13、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中Z1和Z2獨(dú)立地為-O-；R1為氫或-OR13；R2為-C(NH)NH2；R3為(1,2)四氫嘧啶基(選擇性地被甲基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R4為氫；R5和R6彼此獨(dú)立地為鹵素；R7為-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-R15-N(R13)R14、-R15SR13、-R15OR13、-R15-S(O)2OR16、-R15-Op(O)(OR13)2；或R10為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代鹵素、鹵代烷基、羥基或-OP(O)(OR13)2)；或R10為咪唑基烷基或吲哚基烷基；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫或烷基；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基或芳基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中R1為OR13；R3為(1,2)-咪唑基(選擇性地被甲基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被甲基取代)；R5和R6均為氟；R9為氫或烷基；R10為烷基、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)R16或-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14；R11為氫或烷基；R12為-C(O)OR13。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其選自4-羥基-3-[(4-(1-乙氧羰基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基)咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒；和4-羥基-3-[(4-(1-羧基-3-甲基丁氧基)-6-(3-(1-甲基咪唑啉-2-基)苯氧基-3,5-二氟吡啶-2-基)氧基]芐脒。
11.一種用于治療人體患有的以血栓形成活性為特征的疾病的藥物組合物，該組合物包含治療有效量的選自具有下式的、為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，和一種藥學(xué)上可接受的賦形劑
其中A為-C(R8)=或-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-N(R13)-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、硝基、-OR13、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-N(R13)C(O)R13或-N(H)S(O)2R16；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR14、-C(NH)N(H)C(O)OR16、-C(NH)N(H)C(O)R13、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、氨基、脲基、胍基、-OR13、-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(O)N(R13)R14、-R15-C(O)N(R13)R14、-CH(OH)C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-N(R13)C(O)R13、(1,2)四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14-N(R13)C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)R14、-N(R13)S(O)2R16或-N(R13)C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-4)或-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R8為氫、烷基或鹵素；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-R15-CH(N(R13)R14)C(O)OR13或-(R15)S(O)2R16；R10分別獨(dú)立地為烷基、鏈烯基、鏈炔基、鹵代烷基、鹵代鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-C(O)R15-N(R13)R14、-R15-C(O)R13、-R15-C(O)N(R13)N(R13)R14、-R15-C(R13)(OR13)-R15-N(R13)(R14)、-C(R13)(OR13)C(O)OR14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-C(R13)N(R13)(R14)C(O)OR13、-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-C(R13)(OR13)R14、-R15-N(R13)(R14)、-R15-N(R13)C(O)OR16、-R15-N(R13)C(O)OR14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-N(R13)S(O)2R16、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)N(R13)R14、-R15-N(R13)-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-N(R13)S(O)R14、-R15OR13、-R15-ON(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-OS(O)2OR13、-R15-P(O)(OR13)R14、-R15-OP(O)(OR13)2、-R15-P(O)(OR13)2、-R15-SR13、-R15-S-R15-C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)R14、-R15-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-SC(O)N(R13)R14、-R15-SC(S)N(R13)R14、-R15-S(O)R13、-R15-S(O)2R16、-R15-S(O)OR13、-R15-S(O)2OR13、-R15-S(O)2N(R13)R14、-R15-S(O)(NR13)R14；或R10分別為芳基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基(adamantyl)(選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基烷基(其中金剛烷基選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基或芳基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、芳基、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
12.一種用于治療人體患有的以血栓形成活性為特征的疾病的方法，該方法包含使患者服用治療有效量的選自具有下式的、為單一立體異構(gòu)體或其混合物形式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
和
其中A為-C(R8)=或-N=；Z1和Z2獨(dú)立地為-O-、-N(R13)-、-S-或-OCH2-；R1和R4彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、硝基、-OR13、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-N(R13)C(O)R13或-N(H)S(O)2R16；R2為-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(NH)N(H)C(O)OR16、-C(NH)N(H)C(O)R13、-C(NH)N(H)S(O)2R16或-C(NH)N(H)C(O)N(H)R13；R3為鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、氨基、脲基、胍基、-OR13、-C(NH)NH2、-C(NH)N(H)OR13、-C(O)N(R13)R14、-R15-C(O)N(R13)R14、-CH(OH)C(O)N(R13)R14、-N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-N(R13)C(O)R13、(1,2)-四氫嘧啶基(選擇性地被烷基取代)、(1,2)-咪唑基(選擇性地被烷基取代)或(1,2)-咪唑啉基(選擇性地被烷基取代)；R5和R6彼此獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、鹵代烷基、硝基、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)N(R13)R14、-N(R13)C(O)R14、-N(R13)S(O)2R16或-N(R13)C(O)N(R13)CH2C(O)N(R13)R14；R7為-N(R9)-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-4)或-O-(C(R10)(R11))n-R12(其中n為1-6)；R8為氫、烷基或鹵素；R9為氫、烷基、芳基、芳烷基、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)R14、-R15-CH(N(R13)R14)C(O)OR13或-(R15)S(O)2R16；R10分別獨(dú)立地為烷基、鏈烯基、鏈炔基、鹵代烷基、鹵代鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、-C(O)OR13、-R15-C(O)OR13、-R15-C(O)N(R13)R14、-C(O)R15-N(R13)R14、-R15-C(O)R13、-R15-C(O)N(R13)N(R13)R14、-R15-C(R13)(OR13)-R15-N(R13)(R14)、-C(R13)(OR13)C(O)OR14、R15-C(R13)(C(O)OR13)2、-C(R13)N(R13)(R14)C(O)OR13、-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-C(R13)(OR13)R14、-R15-N(R13)(R14)、-R15-N(R13)C(O)OR16、-R15-N(R13)C(O)OR14、-R15-N(R13)C(NR13)R16、-R15-N(R13)S(O)2R16、-R15-N(R13)C(O)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-N(R13)C(NR13)N(R13)N(R13)R14、-R15-N(R13)-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-N(R13)S(O)R14、-R15OR13、-R15-ON(R13)C(NR13)N(R13)R14、-R15-OS(O)2OR13、-R15-P(O)(OR13)R14、-R15-OP(O)(OR13)2、-R15-P(O)(OR13)2、-R15-SR13、-R15-S-R15-C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)R14、-R15-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-R15-N(R13)C(O)R13、-R15-S-S-R15-C(R13)(N(R13)R14)C(O)OR13、-R15-SC(O)N(R13)R14、-R15-SC(S)N(R13)R14、-R15-S(O)R13、-R15-S(O)2R16、-R15-S(O)OR13、-R15-S(O)2OR13、-R15-S(O)2N(R13)R14、-R15-S(O)(NR13)R14；或R10分別為芳基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為芳烷基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、氰基、硝基、-OR13、-SR13、-N(R13)R14、-C(O)OR13、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基(選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為雜環(huán)基烷基(其中雜環(huán)基選擇性地被選自下述的一個(gè)或多個(gè)取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、芳烷基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基(adamantyl)(選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；或R10分別為金剛烷基烷基(其中金剛烷基選擇性地被選自下述的取代基取代烷基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-OR13、-SR13、-C(O)OR13、-N(R13)R14、-C(O)N(R13)R14、-S(O)2OR13和-OP(O)(OR13)2)；R11彼此獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基或芳基；R12為-C(O)OR13或-C(O)N(R13)R14；R13和R14彼此獨(dú)立地為氫、烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)；R15為直鏈或支鏈的亞烷基；和R16為烷基、芳基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、羥基、烷氧基、芳烷氧基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)，或者芳烷基(選擇性地被下述基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、羥基、烷氧基、芳烷基、氨基、二烷氨基、單烷氨基、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、單烷氨基羰基或二烷氨基羰基)。
全文摘要
本發(fā)明涉及由氨基酸和羥基酸衍生物取代的芐脒衍生物,它可用作抗凝血?jiǎng)?。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明化合物的藥物組合物,以及使用該化合物治療以血栓形成活性為特征的疾病的方法。
文檔編號(hào)A61P7/02GK1211232SQ97192215
公開日1999年3月17日 申請(qǐng)日期1997年2月7日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月12日
發(fā)明者莫妮卡·科昌尼, 拉居·莫漢, 邁克爾·M·莫里西, 霍華德·P·額, 衛(wèi)嘉·惲 申請(qǐng)人:伯萊克斯實(shí)驗(yàn)室公司