專利名稱：用作法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的取代的苯并芳庚并吡啶衍生物的制作方法
背景1995年4月20日公開的專利申請WO95/10516公開用作抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的三環(huán)類化合物。
鑒于對法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的現(xiàn)實意義，對本領(lǐng)域的一個寶貴的貢獻將是用作法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的一些化合物。本發(fā)明即提供了此種貢獻。
本發(fā)明概述本發(fā)明提供用作抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)的化合物。本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物由下式代表
其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H(其中n是1-3)，而其余的a、b、c和d基團代表CR1或CR2；或a、b、c和d各自獨立選自CR1或CR2；每個R1和每個R2獨立選自H、鹵代、-CF3、-OR10(如-OCH3)、-COR10、-SR10(如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR11(其中t是0、1或2，如-SOCH3和-SO2CH3)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11(如-SCH2CO2CH3)、-SR11N(R75)2其中每個R76獨立選自H和-C(O)OR11，如-S(CH2)2NHC(O)O-叔-丁基和-S(CH2)2NH2)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代(例如，烷基取代的四唑-5-基硫代如1-甲基-四唑-5-基硫代)、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨立代表H、R1和R2的任何一個取代基或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和或不飽和C5-C7環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被下列基團取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、OPO3R10或R5與R6結(jié)合代表=O或=S和/或R7與R8結(jié)合代表=O或=S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基(如芐基)；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以含有任選連接于碳原子11的雙鍵(由虛線表示)；碳原子5和6之間的虛線代表任選的雙鍵，如此當(dāng)存在雙鍵時，A和B獨立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間無雙鍵存在時，A和B各自獨立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、=O、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4 ；和W代表選自以下的基團
或
其中R12選自(1)H；(2)烷基(如甲基和乙基)；(3)芳基；(4)芳基烷基(芳烷基)；R13選自(1)H；(2)烷基(如甲基和乙基)；(3)烷氧基(如甲氧基)；(4)雜環(huán)烷基，例如(a)四氫吡喃基；及(b)取代的四氫吡喃基，其中所述取代基選自羥基和羥基烷基(如羥甲基)，例如D-半乳糖基，即
(5)芳基；及(6)芳烷基，如芐基；R14選自(1)H；(2)烷基(如-C(CH3)3)；(3)芳基；及(4)雜芳基；環(huán)
代表雜環(huán)烷基環(huán)，其中Y代表所述環(huán)的其余部分，所述其余部分由碳原子和任選選自NH、NR15、O和S的雜原子組成；且所述的其余部分任選具有與它稠合的芳環(huán)(如苯基)；所述雜環(huán)烷基環(huán)一般含有4或5個碳原子，通常為4個碳原子，實例包括
和
具有與所述其余部分Y稠合的芳環(huán)的雜環(huán)烷基環(huán)實例包括
R15代表-C(O)OR16；及R16代表烷基、優(yōu)選-C(CH3)3。
本發(fā)明的化合物(ⅰ)在體外有效抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但不抑制香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶Ⅰ；(ⅱ)阻斷為法呢基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)的表型改變，但不阻斷改造的為香葉基香葉基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)的表型改變；(ⅲ)阻斷為法呢基受體的Ras的細(xì)胞內(nèi)加工，但不阻斷改造的為香葉基香葉基受體的細(xì)胞內(nèi)加工；及(ⅳ)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras誘導(dǎo)的異常細(xì)胞在培養(yǎng)基中的生長。
本發(fā)明的化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和致癌基因蛋白Ras的法呢基化。因此本發(fā)明進一步提供通過給予有效量的上述的三環(huán)類化合物抑制哺乳動物，尤其是人中的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(如ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶)的方法。給予患者本發(fā)明的化合物以抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶在下述癌癥的治療中是有用的。
本發(fā)明提供通過給予有效量的本發(fā)明化合物抑制或治療細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長的方法。細(xì)胞的異常生長指不依賴于正常調(diào)節(jié)機制(如接觸抑制的喪失)的細(xì)胞生長。這包括下列的異常生長(1)表達激活的Ras致癌基因的癌細(xì)胞(腫瘤)；(2)其中Ras蛋白因為另一種基因的致癌突變而被激活的癌細(xì)胞；及(3)其中出現(xiàn)異常的Ras激活的其它增生性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動物(如人)有效量的本文所述的三環(huán)類化合物抑制或治療腫瘤生長的方法。具體地說，本發(fā)明提供通過給予有效量的本文所述的化合物抑制或治療表達激活的Ras致癌基因的腫瘤生長的方法?？梢员灰种苹蛑委煹哪[瘤的實例包括(但不限于)肺癌(如肺腺癌)、胰癌(如胰腺癌像外分泌性的胰腺癌)、結(jié)腸癌(如結(jié)腸直腸癌像結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML)、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征(MDS)、膀胱癌、表皮癌、乳腺癌和前列腺癌。
相信本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動物(如人)本文所述的有效量的三環(huán)類化合物抑制或治療良性和惡性增生性疾病的方法，在這些增生性疾病中，Ras蛋白因為其它基因的致癌突變而被異常激活，即所述Ras基因本身不被突變所激活成致癌形式。例如，通過本文所述的三環(huán)類化合物可以抑制或治療良性增生性紊亂神經(jīng)纖維瘤病或其中Ras因為酪氨酸激酶致癌基因(如neu、src、abl、lck和fyn)突變或過度表達而被激活的腫瘤。
用于本發(fā)明方法中的三環(huán)類化合物抑制或治療細(xì)胞的異常生長。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以通過阻斷G-蛋白異戊二烯化而抑制G-蛋白(如ras p21)的功能，從而使它們用于治療增生性疾病如腫瘤生長和癌癥。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以通過抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，從而使它們顯示抑制ras轉(zhuǎn)化細(xì)胞的抗增生活性。
本發(fā)明詳述除非另外指明，用于本文的下列術(shù)語按如下定義MH+-代表質(zhì)譜中分子的分子離子加氫；苯并三唑-1-基氧基表示
1-甲基-四唑-5-基硫代表示
鏈烯基-代表具有至少一個碳-碳雙鍵且含有2-12個碳原子(優(yōu)選2-6個碳原子和最優(yōu)選3-6個碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；鏈炔基-代表具有至少一個碳-碳三鍵且含有2-12個碳原子(優(yōu)選2-6個碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；烷基-(包括烷氧基、芳烷基和雜芳烷基的烷基部分)-代表含有1-20個碳原子，優(yōu)選1-6個碳原子的直鏈和支鏈碳鏈。
芳烷基-代表連接于如上定義的烷基上的如下定義的芳基，優(yōu)選的烷基為-CH2-(如芐基)；芳基(包括芳烷基的芳基部分)-代表含有6-15個碳原子并具有至少一個芳環(huán)(如芳基是苯環(huán))的碳環(huán)基，所述碳環(huán)基上的所有可取代的碳原子都可看作為可能的連接點，所述碳環(huán)基任選由下列的一個或多個基團(例如1-3個)取代鹵代、烷基、羥基、烷氧基、苯氧基、-CF3、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-COOR10或-NO2；-CH2-咪唑基代表通過所述咪唑環(huán)上的任何可取代的碳原子連接到-CH2-上的咪唑基，即
如-CH2-(2-、4-或5-)咪唑基，例如
鹵代-代表氟、氯、溴和碘；雜芳基-代表具有至少一個選自氧、硫或氮的雜原子的環(huán)基，可任選由R3和R4取代，所述雜原子間斷碳環(huán)結(jié)構(gòu)且具有足夠的離域pi電子數(shù)以提供芳族特性，所述芳族雜環(huán)基優(yōu)選含有2-14個碳原子，如(2-、4-或5-)咪唑基、三唑基、2-、3-或4-吡啶基或吡啶基N-氧化物(任選被R3和R4取代)，其中吡啶基N-氧化物可以表示為
雜芳基烷基(雜芳烷基)-代表連接于如上定義的烷基上的如上定義的雜芳基，優(yōu)選的烷基為-CH2-(如-CH2-(4-或5-)咪唑基)；雜環(huán)烷基-代表含有3-15個碳原子，優(yōu)選4-6個碳原子的飽和(支鏈或無支鏈)碳環(huán)，所述碳環(huán)可被1-3個選自-O-、-S-或-NR10-的雜基團間斷；適合的雜環(huán)烷基包括(1)2-或3-四氫呋喃基，(2)2-或3-四氫噻吩基，(3)2-、3-或4-哌啶基，(4)2-或3-吡咯烷基，(5)2-或3-哌嗪基，(6)2-或4-二噁烷基，(7)四氫吡喃基和(8)取代的四氫吡喃基，其中所述取代基選自羥基和羥基烷基(如羥甲基)，例如D-半乳糖基，如
本文涉及的下列溶劑和試劑用縮寫表示為乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羥基苯并三唑(HOBT)；1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(DEC)；二異丁基氫化鋁(DIBAL)；和4-甲基嗎啉(NMM)。
所述取代基R1、R2、R3及R4的位置根據(jù)下面的編碼環(huán)結(jié)構(gòu)進行參照
本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以理解在C-11鍵上的S和R立體化學(xué)構(gòu)型為
式(1.0)化合物包括其中底部哌啶基為4-或3-哌啶基的化合物，即
或
式(1.0)化合物包括其中R2和R4為H，而R1和R3為鹵代(優(yōu)選獨立選自溴或氯)的化合物。例如，R1為溴而R3為氯。這些化合物包括其中R1在3-位而R3在8-位(如3-Br和8-Cl)的化合物。式(1.0)化合物也包括其中R2是H，而R1、R3和R4為鹵代(優(yōu)選獨立選自溴或氯)的化合物。
優(yōu)選式(1.0)化合物由式1.1化合物表示
其中所有的取代基如式1.0所定義。
優(yōu)選R2為H，而R1、R3和R4為鹵代；a為N而b、c和d為碳；A和B各自代表H2；C5和C6之間的任選鍵不存在；X為CH；而R5、R6、R7和R8為H。更優(yōu)選R1、R3和R4獨立選自溴或氯。最優(yōu)選R1為溴，而R3和R4獨立選自氯和溴。
更優(yōu)選式(1.0)化合物由式1.2和式1.3化合物代表
而最優(yōu)選式(1.0)化合物由式1.4和1.5化合物代表
其中R1、R3和R4各獨立選自鹵代，優(yōu)選溴或氯；而A、B、X和W如式(1.0)化合物所定義。更優(yōu)選A和B各自代表H2；C5和C6之間的任選鍵不存在；X為CH。最優(yōu)選R1為溴，而R3和R4獨立為溴或氯，還更優(yōu)選R3為氯而R4為溴；A和B各自代表H2；C5和C6之間的任選鍵不存在；X為CH；而R5、R6、R7和R8為H。
當(dāng)W表示
優(yōu)選R12選自H、烷基(最優(yōu)選甲基或乙基)和芳烷基(最優(yōu)選芐基)；優(yōu)選R13選自H、烷基(最優(yōu)選甲基或乙基)、烷氧基(最優(yōu)選甲氧基)、芳烷基(最優(yōu)選芐基)和雜環(huán)烷基(最優(yōu)選D-半乳糖基)。優(yōu)選(1)R12和R13為H；(2)R12為烷基(如甲基)，而R13為烷氧基(如甲氧基)；(3)R12為烷基且R13為烷基(如R12和R13均為乙基)；(4)R12為雜環(huán)烷基(如D-半乳糖基)和R13為H；或(5)R12為芳烷基(如芐基)和R13為H。
當(dāng)W表示
所述雜環(huán)烷基環(huán)
優(yōu)選選自
和
當(dāng)W表示
R14優(yōu)選為烷基且最優(yōu)選為-C(CH3)3。
優(yōu)選X為CH或N，而R1、R3和R4為鹵代的式1.2A和1.3A化合物
本發(fā)明的優(yōu)選化合物由下式的化合物代表
和
其中R1、R3和R4為鹵代而其余的取代基如上所定義，更優(yōu)選式1.5A化合物。其中W為
的代表性式1.0化合物包括
和
其中W為
的代表性式1.0化合物包括
其中W為
的代表性式1.0化合物包括
和
式1.0的代表性化合物包括
本發(fā)明的化合物也包括1-N-氧化物-，即，例如下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物
其中
代表所述化合物的剩余部分。
于25℃在甲醇或乙醇中測定所述化合物的旋光性((+)-或(-)-)。
本發(fā)明包括無定形態(tài)或結(jié)晶態(tài)的上述化合物。
引入環(huán)體系的線表明已指定的鍵可以連接到任何可取代的環(huán)碳原子上。
本發(fā)明的一些化合物可以以不同的異構(gòu)體形式(如對映體或非對映體)包括阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(即其中7-元環(huán)為一固定構(gòu)象，如此則由于10-位溴取代基的存在使11-碳原子定位于稠合苯環(huán)平面的上方或下方的化合物)存在。本發(fā)明設(shè)想了所有此類純形式和混合物形式的異構(gòu)體，包括外消旋混合物。也包括烯醇形式。
某些三環(huán)化合物，例如具有羧基或酚羥基的三環(huán)化合物應(yīng)具有酸性性質(zhì)。這些化合物可以形成藥學(xué)上可接受的鹽。此類鹽的實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽。金鹽和銀鹽。也考慮了與藥學(xué)上可接受的胺如氨、烷基胺、羥基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的鹽。
某些堿性的三環(huán)化合物也可形成藥學(xué)上可接受的鹽，如酸加成鹽。例如，吡啶氮原子可與強酸形成鹽，而具有堿性取代基如氨基的化合物也可與弱酸形成鹽。用于形成鹽的適合酸的例子為鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸和其它本領(lǐng)域熟知的無機酸和羧酸。通過常規(guī)的方法使游離堿的形式與足量的所需酸接觸產(chǎn)生鹽來制備所述鹽。通過用適當(dāng)?shù)膲A的稀釋水溶液，如稀的氫氧化鈉、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉水溶液處理所述鹽可以再生成所述游離堿形式。這些游離堿的形式在某些物理性質(zhì)，如在極性溶劑中的溶解度方面與它們各自的鹽形式有些不同，但對于本發(fā)明的目的而言，所述酸和堿的鹽與它們各自的游離堿形式卻是等同的。
打算作為藥學(xué)上可接受的鹽的所有這些酸和堿的鹽都在本發(fā)明范圍內(nèi)，且對于本發(fā)明的目的而言，認(rèn)為所有的酸和堿的鹽與相應(yīng)化合物的游離堿形式是等同的。
根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)、申請系列號08/410187(1995年3月24日遞交)，申請系列號08/577951(1995年12月22日遞交)(現(xiàn)已放棄)、申請系列號08/615760(1996年3月13日遞交)(現(xiàn)已放棄)、WO97/23478(1997年7月3日公開)(該專利公開申請系列號08/577951和08/615760的主題)、申請系列號08/711925(1996年9月13日遞交)，及申請系列號08/877453(1997年6月17日遞交)(每份公開的內(nèi)容結(jié)合在此作為參考)中所述方法，以及根據(jù)以下描述的方法可以制備本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明化合物可以通過使下式化合物
其中所有的取代基如式1.0中所定義，在DMF中與適宜的保護的哌啶基乙酸(如1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基乙酸)和DEC/HOBT/NMM于25℃反應(yīng)約18小時產(chǎn)生下式的化合物
然后在二噁烷和甲醇中，使式13.0化合物與TFA或10％硫酸反應(yīng)，接著與氫氧化鈉反應(yīng)產(chǎn)生式14.0化合物
例如，可以通過使式12.0化合物與如上所述的1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)來制備下式化合物
例如，式15.0化合物包括以下化合物
這些化合物的制備在以下的制備性實施例3,4,5,6,7,8,9,10,11,12和13中分別予以描述。本發(fā)明化合物可以通過使下式化合物
在DMF中與適當(dāng)保護的哌啶基乙酸(如1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基乙酸)和DEC/HOBT/NMM于約25℃反應(yīng)約18小時產(chǎn)生下式化合物來制備
然后在二噁烷和甲醇中，使式13.1化合物與TFA或10％硫酸反應(yīng)，接著與氫氧化鈉反應(yīng)產(chǎn)生式15.1化合物
在偶合劑如在二甲基甲酰胺中的DEC和HOBT存在下，使式15.1化合物與適當(dāng)?shù)聂人岱磻?yīng)可以制備由式1.7代表的本發(fā)明的酰胺化合物
另外，式15.1化合物可以在如吡啶的溶劑中與酰氯或酸酐反應(yīng)。
具有1-N-O基團的化合物
可通過用間-氯代過苯甲酸氧化由下式的相應(yīng)的吡啶基化合物來制備
該反應(yīng)在適合的有機溶劑如二氯甲烷(通常為無水的)中，在適宜的溫度下進行以產(chǎn)生在所述三環(huán)體系中環(huán)1的1位具有N-O取代基的本發(fā)明化合物。
一般來說，在加入間-氯代過苯甲酸之前，先將原料三環(huán)反應(yīng)物的有機溶劑溶液冷卻至約0℃。然后使該反應(yīng)物在反應(yīng)期間溫?zé)嶂潦覝?。通過標(biāo)準(zhǔn)的分離方法可以回收所需產(chǎn)物。例如，反應(yīng)混合物可以用適合的堿如飽和碳酸氫鈉水溶液或氫氧化鈉(如1N氫氧化鈉)洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。真空濃縮含有產(chǎn)物的溶液。通過標(biāo)準(zhǔn)方法如硅膠層析(如快速柱層析)可以純化產(chǎn)物。
另外，通過用間-氯代過苯甲酸和
其中Q為保護基團，例如BOC，進行以上的氧化過程，可以由中間體
制備N-O化合物。氧化后，通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)除去保護基團。然后使N-O中間體反應(yīng)進一步產(chǎn)生本發(fā)明化合物。
式12.0化合物包括式12.1的化合物
通過本領(lǐng)域熟知的方法，例如WO95/10516、U.S.5151423公開的方法和以下敘述的那些方法制備式12.1化合物。以上中間體化合物也可以通過包含下列步驟的方法制備(a)在強堿存在下使下式的酰胺
其中R11a為溴，R5a為氫及R6a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基；R5a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基及R6a為氫；R5a和R6a獨立選自C1-C6烷基和芳基；或R5a和R6a與它們所連接的氮原子一起形成含有4-6個碳原子或含有3-5個碳原子及一個選自-O-和-NR9a-的雜部分的環(huán)，其中R9a為氫、C1-C6烷基或苯基，與下式的化合物反應(yīng)
其中R1a、R2a、R3a和R4a獨立選自氫和鹵素而R7a為氯或溴，得到下式化合物
(b)使步驟(a)的化合物與(ⅰ)POCl3反應(yīng)獲得下式的氰基化合物
或與(ⅱ)DIBALH反應(yīng)獲得下式的醛化合物
(c)使該氰基化合物或該醛與下式的哌啶衍生物反應(yīng)
其中L為選自氯和溴的離去基團，分別獲得下式的酮或醇
或
(d)(ⅰ)用CF3SO3H使該酮環(huán)化獲得式13.0a化合物，其中虛線代表雙鍵；或(d)(ⅱ)用多磷酸使該醇環(huán)化獲得中間體化合物，其中虛線代表單鍵。
WO95/10516、U.S.5151423公開了和以下敘述了使用三環(huán)酮中間體制備所述中間體化合物的方法。下式的這些中間體
其中R11b、R1a、R2a、R3a和R4a獨立選自氫和鹵素，可通過以下步驟制備，包括(a)使下式的化合物
(ⅰ)在鈀催化劑和一氧化碳存在下，與式NHR5aR6a的胺(其中R5a和R6a如上述過程所定義)反應(yīng)得到下式的酰胺
或(ⅱ)在鈀催化劑和一氧化碳存在下，與式R10aOH的醇(其中R10a為C1-C6低級烷基或C3-C6環(huán)烷基)反應(yīng)得到下式的酯
隨后使該酯與式NHR5aR6a的胺反應(yīng)得到所述酰胺；(b)在強堿存在下，使所述酰胺與下式的碘取代的芐基化合物反應(yīng)
其中R1a、R2a、R3a、R4a和R7a如上所定義，獲得下式的化合物
知(c)用式R8aMgL試劑(其中R8a為C1-C8烷基、芳基或雜芳基而L為溴或氯)使步驟(b)的化合物環(huán)合，前提是在環(huán)合前，使其中R5a或R6a為氫的化合物與適宜的N-保護基反應(yīng)。
式12.2化合物的(+)-異構(gòu)體
可采用包括酶催化的酯基轉(zhuǎn)移的方法具有高對映體選擇性地制備。優(yōu)選使式12.3的外消旋化合物
與酶如Toyobo LlP-300和?；瘎┤绠惗∷崛阴シ磻?yīng)；然后通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)使生成的(+)-酰胺與(-)-對映體的胺分離。接著，例如通過與酸如硫酸一起回流水解所述(+)-酰胺，再通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)用DIBAL還原生成的化合物獲得相應(yīng)的旋光性式12.2的富集(+)-異構(gòu)體。另外，首先使式12.3的外消旋化合物還原為相應(yīng)的式12.2的外消旋化合物，然后用酶(Toyobo LlP-300)和如上所述的?；瘎┨幚淼玫?+)-酰胺，該酰胺經(jīng)水解后得到旋光性的富集(+)-異構(gòu)體。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將能理解，通過上述的酶方法可以制備具有其它的R1、R2、R3和R4取代基的式1.0化合物。
為制備式1.0的化合物，其中W為
或
使式14.0或15.0化合物分別與適當(dāng)?shù)柠u代乙酰胺或鹵代乙酸酯反應(yīng)
或
其中X為鹵素(如溴或氯)，以使哌啶環(huán)的胺氮烷基化。根據(jù)本領(lǐng)域熟知的方法進行該反應(yīng)。例如，在有適合堿(如碳酸鈉)存在的適合的有機溶劑(如DMF)中，使式14.0或15.0化合物與適宜的鹵代乙酰胺反應(yīng)。
例如，在有碳酸鈉存在的DMF中，使下式化合物
與鹵代乙酰胺或鹵代乙酸酯反應(yīng)
或
其中X為溴或氯，分別產(chǎn)生下式化合物
和
用下面的實施例來示范說明本發(fā)明化合物，這些不應(yīng)構(gòu)成對本公開范圍的限制。制備實施例1
步驟A.
于-20℃將10g(60.5mmol)4-吡啶基乙酸乙酯和120ml無水二氯甲烷混合，加入10.45g(60.5mmol)MCPBA并于-20℃攪拌1小時，再于25℃攪拌67小時。加入另外的3.48g(20.2mmol)MCPBA并于25℃攪拌24小時。用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉(水溶液)然后用水洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮至殘留物，經(jīng)層析(硅膠，2％-5.5％(10％氫氧化銨在甲醇中)/二氯甲烷)得到8.12g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=182.15步驟B
將3.5g(19.3mmol)步驟A的產(chǎn)物、17.5ml乙醇和96.6ml 10％氫氧化鈉(水溶液)混合，于67℃加熱該混合物2小時。加入2N鹽酸(水溶液)調(diào)至pH=2.37，真空濃縮至殘留物。加入200ml干燥乙醇，通過celite過濾并用干燥乙醇(2×50ml)洗滌濾餅。真空濃縮合并的濾液產(chǎn)生2.43g標(biāo)題化合物。制備實施例2
通過PCT國際公開號WO95/10516中所述方法制備標(biāo)題化合物。制備實施例3
步驟A
將14.95g(39mmol)8-氯代-11-(1-乙氧基-羰基-4-哌啶基)-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶和150ml二氯甲烷混合，然后加入13.07g(42.9mmol)的(nBu)4NNO3并冷卻該混合物至0℃。用1.5小時緩慢加入(滴加)在20ml二氯甲烷中的6.09ml(42.9mmol)TFAA。使該混合物保持于0℃過夜，然后用飽和碳酸氫鈉(水溶液)、水和鹽水連續(xù)洗滌。用硫酸鈉干燥有機溶液，真空濃縮至殘留物并層析該殘留物(硅膠，EtOAc/己烷梯度)分別得到4.32g和1.90g的兩種產(chǎn)物化合物3A(ⅰ)和3A(ⅱ)。
3A(ⅰ)化合物質(zhì)譜MH+428.2；3A(ⅱ)化合物質(zhì)譜MH+428.3；步驟B
將得自步驟A的22.0g(51.4mmol)產(chǎn)物3A(ⅰ)、150ml85％乙醇(水溶液)、25.85g(0.463mole)鐵粉和2.42g(21.8mmol)氯化鈣混合，加熱至回流過夜。加入12.4g(0.222mole)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣并于回流下加熱2小時。加入另外的12.4g(0.222mole)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣并于回流下再加熱2小時。通過celite過濾熱的混合物，用50ml熱乙醇洗滌celite，真空濃縮濾液至殘留物。加入100ml無水乙醇，濃縮至殘留物并層析該殘留物(硅膠，甲醇/二氯甲烷梯度)得到16.47g的產(chǎn)物化合物。步驟C
將16.47g(41.4mmol)得自步驟B的產(chǎn)物和150ml48％HBr(水溶液)混合并冷卻至-3℃。緩慢加入(滴加)18ml溴，然后緩慢加入(滴加)在85ml水中的8.55g(0.124mole)亞硝酸鈉。于-3℃至0℃攪拌45分鐘，然后通過加入50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)至pH=10。用乙酸乙酯提取，用鹽水洗滌提取物并用硫酸鈉干燥提取物。濃縮至殘留物并層析該殘留物(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度)分別得到10.6g和3.28g的兩種產(chǎn)物化合物3C(ⅰ)和3C(ⅱ)。
3C(ⅰ)化合物質(zhì)譜MH+=461.2；3C(ⅱ)化合物質(zhì)譜MH+=539；
通過溶解于濃鹽酸中使步驟C的產(chǎn)物3C(ⅰ)水解，加熱至約100℃16小時。冷卻該混合物，用1M氫氧化鈉(水溶液)中和。用二氯甲烷提取，硫酸鎂干燥提取物，過濾和真空濃縮至標(biāo)題化合物。
質(zhì)譜MH+=466.9.
步驟E
使得自步驟D的1.160g(2.98mmol)的標(biāo)題化合物溶解于20mlDMF中，于室溫下攪拌，加入0.3914g(3.87mmol)4-甲基-嗎琳、0.7418g(3.87mmol)DEC、0.5229g(3.87mmol)HOBT、及0.8795g(3.87mmol)1-N-t-丁氧基羰基-哌啶基-4-乙酸。于室溫下攪拌該混合物2天，然后真空濃縮至殘留物并使該殘留物在二氯甲烷和水之間分配。用飽和碳酸氫鈉(水溶液)、10％磷酸二氫鈉(水溶液)和鹽水連續(xù)洗滌有機相。經(jīng)硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮至殘留物。層析該殘留物(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+氨)得到1.72g產(chǎn)物。m.p.=94.0-94.5℃，質(zhì)譜MH+=616.3，元素分析計算值-C,60.54；H,6.06；N,6.83實測值-C,59.93；H,6.62；N,7.45。
步驟F
將得自步驟E的1.67g(2.7mmol)產(chǎn)物和20ml二氯甲烷混合，于0℃攪拌，加入20mlTFA，攪拌該混合物2小時，然后用1N氫氯化鈉(水溶液)堿化該混合物。用二氯甲烷提取，經(jīng)硫酸鎂干燥有機相，過濾并真空濃縮得到1.16g產(chǎn)物。m.p.=140.2-140.8℃，質(zhì)譜MH+=516.2。制備實施例4
步驟A
于-5℃，將25.86g(55.9mmol)4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯和250ml濃硫酸混合，然后加入4.8g(56.4mmol)的硝酸鈉并攪拌2小時。將該混合物傾入600g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化。過濾該混合物，用300ml水洗滌，然后用500ml二氯甲烷提取。用200ml水洗滌提取物，用硫酸鎂干燥，然后過濾并真空濃縮至殘留物。使該殘留物層析(硅膠，10％EtOAc/二氯甲烷)得到24.4g(產(chǎn)率86％)的產(chǎn)物。m.p.=165-167℃，質(zhì)譜MH+=506(Cl)，元素分析計算值-C,52.13；H,4.17；N,8.29
實測值-C,52.18；H,4.51；N,8.16。步驟B
于20℃將20g(40.5mmol)步驟A的產(chǎn)物和200ml濃硫酸混合，然后冷卻該混合物至0℃。將7.12g(24.89mmol)的1,3-二溴代-5,5-二甲基-海因加入該混合物中并于20℃攪拌3小時。冷卻至0℃，加入另外的1.0g(3.5mmol)二溴代海因并于20℃攪拌2小時。將該混合物傾入400g冰中，于0℃用濃氫氧化銨(水溶液)堿化，過濾收集生成的固體。用300ml水洗滌該固體，制成在200ml丙酮中的淤漿，過濾提供19.79g(產(chǎn)率85.6％)的產(chǎn)物。m.p.=236-237℃，質(zhì)譜MH+=584(Cl)，元素分析計算值-C,45.11；H,3.44；N,7.17實測值-C,44.95；H,3.57；N,7.16。
步驟C
于50℃，將25g(447mmol)鐵屑、10g(90mmol)氯化鈣和在700ml90∶10EtOH/水中的步驟B的20g(34.19mmol)產(chǎn)物的懸浮液混合。于回流下加熱該混合物過夜，通過Celite過濾，用2×200ml熱乙醇洗滌濾餅。合并濾液及洗滌液，真空濃縮至殘留物。用600ml二氯甲烷萃取殘留物，用300ml水洗滌，硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮至殘留物，然后層析(硅膠，30％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到11.4g(產(chǎn)率60％)的產(chǎn)物。m.p.=211-212℃，質(zhì)譜MH+=554(Cl)，元素分析計算值-C,47.55；H,3.99；N,7.56實測值-C,47.45；H,4.31；N,7.49。
步驟D
于-10℃，將20g(35.9mmol)步驟C的產(chǎn)物緩慢加入(分次)在120ml濃鹽酸(水溶液)中的8g(116mmol)亞硝酸鈉溶液中。于0℃攪拌生成的混合物2小時，然后于0℃用1小時緩慢加入(滴加)150ml(1.44mole)50％H3PO2。于0℃攪拌3小時，然后傾入600g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化。用2×300ml二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物，然后過濾并真空濃縮至殘留物。使該殘留物層析(硅膠，25％EtOAc/己烷)得到13.67g(產(chǎn)率70％)的產(chǎn)物。m.p.=163-165℃，質(zhì)譜MH+=539(Cl)，元素分析計算值-C,48.97；H,4.05；N,5.22實測值-C,48.86；H,3.91；N,5.18。
步驟E
將6.8g(12.59mmol)步驟D的產(chǎn)物和100ml濃鹽酸(水溶液)混合，于85℃攪拌過夜。冷卻該混合物，將其傾入300g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化，用2×300ml二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物。過濾，真空濃縮至殘留物，然后層析(硅膠，10％甲醇/乙酸乙酯+2％氫氧化銨(水溶液))得到5.4g(產(chǎn)率92％)的標(biāo)題化合物。m.p.=172-174℃，質(zhì)譜MH+=467(FAB)，元素分析計算值-C,48.69；H,3.65；N,5.97實測值-C,48.83；H,3.80；N,5.97。
步驟F按照與以下制備實施例5步驟C基本相同的方法，使上面步驟E的標(biāo)題化合物與1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)產(chǎn)生下式化合物
步驟G按照與以下制備實施例5步驟D基本相同的方法，使得自上面步驟F的標(biāo)題化合物去保護產(chǎn)生制備實施例4的標(biāo)題化合物。制備實施例5
步驟A
通過與制備實施例3步驟D所述基本相同的方法，使2.42g4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯水解得到1.39g(產(chǎn)率69％)的該產(chǎn)物。
步驟B
將1g(2.48mmol)步驟A的產(chǎn)物和25ml干燥甲苯混合，加入在甲苯中的2.5ml的1M DIBAL并在回流下加熱該混合物。半小時后，加入另外的在甲苯中的2.5ml的1M DIBAL并在回流下加熱1小時(通過TLC用50％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨(水溶液)展開監(jiān)測反應(yīng))。冷卻該混合物至室溫，加入50ml1N鹽酸(水溶液)并攪拌5分鐘。加入100ml1N氫氧化鈉(水溶液)，然后用乙酸乙酯(3×150ml)提取。用硫酸鎂干燥提取物，過濾并真空濃縮得到1.1g的標(biāo)題化合物。
步驟C
將0.501g(1.28mmol)的步驟B的標(biāo)題化合物和20ml干燥DMF混合，然后加入0.405g(1.664mmol)1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸、0.319g(1.664mmol)DEC、0.225g(1.664mmol)HOBT和0.168g(1.664mmol)4-甲基嗎啉，于室溫下攪拌該化合物過夜。真空濃縮該混合物至殘留物，然后使殘留物在150ml二氯甲烷和150ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)間分配。用另外的150ml二氯甲烷提取水相。用硫酸鎂干燥有機相，真空濃縮至殘留物。使殘留物層析(硅膠，500ml己烷，1L1％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨(水溶液)，然后1L2％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨(水溶液))得到0.575g的產(chǎn)物。m.p.=115℃-125℃，質(zhì)譜MH+=616。
步驟D
將0.555g(0.9mmol)步驟C的產(chǎn)物和15ml二氯甲烷混合，冷卻該化合物至0℃。加入15mlTFA并于0℃攪拌2小時。于40-45℃真空濃縮至殘留物，然后使殘留物在150ml二氯甲烷和100ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)間分配。用100ml二氯甲烷提取水層，合并提取物，用硫酸鎂干燥，真空濃縮得到0.47g的所述產(chǎn)物。m.p.=140℃-150℃，質(zhì)譜MH+=516。
制備實施例6 步驟A
將16.6g(0.03mol)制備實施例4步驟D的產(chǎn)物與乙腈和水的3∶1溶液(212.65ml乙腈和70.8ml水)混合，于室溫下攪拌生成的淤漿過夜。加入32.833g(0.153mole)NaIO4，然后加入0.31g(2.30mmol)RuO2并于室溫下攪拌得到1.39g(產(chǎn)率69％)的所述產(chǎn)物(RuO的加入伴隨放熱反應(yīng)，反應(yīng)溫度由20℃升至30℃)。攪拌該混合物1.3小時(約30分鐘后溫度回復(fù)至25℃)，然后過濾除去固體，用二氯甲烷洗滌該固體。真空濃縮濾液至殘留物，使該殘留物溶于二氯甲烷中。過濾除去不溶固體，用二氯甲烷洗滌該固體。用水洗滌濾液，濃縮至約200ml體積，用漂白劑然后用水洗滌。用6N鹽酸(水溶液)提取。冷卻含水提取液至0℃，緩慢加入50％氫氧化鈉(水溶液)以調(diào)節(jié)pH=4，同時保持該溫度＜30℃。用二氯甲烷提取兩次，硫酸鎂干燥并真空濃縮至殘留物。使殘留物在20ml乙醇中形成淤漿并冷卻至0℃。過濾收集生成的固體，真空干燥該固體得到7.95g產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.7(s,1H),7.85(m,6H),7.5(d,2H),3.45(m,2H),3.15(m,2H)。
步驟B
將21.58g(53.75mmol)步驟A的產(chǎn)物與500ml乙醇和甲苯的無水1∶1混合物混合，加入1.43g(37.8mmol)硼氫化鈉，于回流下加熱該混合物10分鐘。冷卻該混合物至0℃，加入100ml水，然后用1M鹽酸(水溶液)調(diào)節(jié)pH約為4-5，同時保持其溫度＜10℃。加入250ml乙酸乙酯并分離各層。用鹽水(3×50ml)洗滌有機層，然后用硫酸鈉干燥。真空濃縮至殘留物(24.01g)，使殘留物經(jīng)層析(硅膠，30％己烷/二氯甲烷)得到所述產(chǎn)物。通過再層析純化不純的部分。共獲得18.57g所述產(chǎn)物。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.5(s,1H),7.9(s,1H),7.5(dd,2H),6.2(s,1H),6.1(s,1H),3.5(m,1H),3.4(m,1H),3.2(m,2H)。
將18.57g(46.02mmol)步驟B的產(chǎn)物與500ml三氯甲烷混合，然后加入6.70ml(91.2mmol)SOCl2，于室溫下攪拌該混合物4小時。用5分鐘加入在800ml THF中的35.6g(0.413mole)哌嗪，于室溫下攪拌該混合物1小時?；亓骷訜嵩摶旌衔镞^夜，然后冷卻至室溫，用1L二氯甲烷稀釋該混合物。用水(5×200ml)洗滌，用三氯甲烷(3×100ml)提取含水洗液。合并所有的有機溶液，用鹽水(3×200ml)洗滌，硫酸鎂干燥。真空濃縮至殘留物，層析(硅膠，5％、7.5％、10％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨梯度)得到18.49g標(biāo)題化合物，為外消旋混合物。
步驟D-對映體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，流速100ml/分，20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分離步驟C的外消旋標(biāo)題化合物，得到9.14g(+)-異構(gòu)體和9.30g(-)-異構(gòu)體。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=74.5℃-77.5℃；質(zhì)譜MH+=471.9；[α]25D=+97.4℃(8.48mg/2ml甲醇)；(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=82.9℃-84.5℃；質(zhì)譜MH+=471.8；[α]25D=-97.4°(8.32mg/2ml甲醇)。
步驟E
使3.21g(6.80mmol)步驟D的(-)-異構(gòu)體產(chǎn)物與150ml無水DMF混合。加入2.15g(8.8mmol)的1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸、1.69g(8.8mmol)的DEC、1.19g(8.8mmol)HOBT和0.97ml(8.8mmol)N-甲基嗎啉，于室溫下攪拌該混合物過夜。真空濃縮除去DMF并加入50ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)。用二氯甲烷(2×250ml)提取，用50ml鹽水洗滌提取物并經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮至殘留物，層析(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+10％氫氧化銨)得到4.75g產(chǎn)物。
m.p.=75.7℃-78.5℃；質(zhì)譜MH+=697；[α]25D=-5.5°(6.6mg/2ml甲醇)。
步驟F
使4.70g(6.74mmol)步驟E的產(chǎn)物與30ml甲醇混合，然后用1小時以每份10ml分次加入50ml 10％硫酸/二氧六環(huán)溶液。將該混合物傾入50ml水中，加入15ml 50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)至pH約為10-11。過濾除去生成的固體，用二氯甲烷(2×250ml)提取濾液。真空濃縮水層除去甲醇，并再用250ml二氯甲烷提取。經(jīng)硫酸鎂干燥合并的提取物，真空濃縮得到產(chǎn)物。m.p.=128.1℃-131.5℃；質(zhì)譜MH+=597；[α]25D=-6.02°(9.3mg/2ml甲醇)。
制備實施例7
步驟A
于-5℃使15g(38.5mmol)4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯與150ml濃硫酸混合，然后加入3.89g(38.5mmol)硝酸鉀并攪拌4小時。將該混合物傾入3L冰中，用50％氫氧化鈉(水溶液)堿化。用二氯甲烷提取，硫酸鎂干燥，然后過濾并真空濃縮至殘留物。從丙酮中重結(jié)晶殘留物得到6.69g產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.5(s,1H),7.75(s,1H),7.6(s,1H),7.35(s,1H),4.15(q,2H),3.8(m,2H),3.5-3.1(m,4H),3.0-2.8(m,2H),2.6-2.2(m,4H),1.25(t,3H)。
步驟B
使6.69g(13.1mmol)步驟A的產(chǎn)物與100ml85％乙醇/水混合，然后加入0.66g(5.9mmol)氯化鈣和6.56g(117.9mmol)鐵，于回流下加熱該混合物過夜。通過硅藻土過濾熱的反應(yīng)混合物，用熱的乙醇沖洗濾餅。真空濃縮濾液得到7.72g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=478.0。
步驟C
使7.70g步驟B的產(chǎn)物與35ml乙酸混合，然后加入45mlBr2在乙酸中的溶液，于室溫下攪拌該混合物過夜。加入300ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入75ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用乙酸乙酯提取。用硫酸鎂干燥提取物，真空濃縮至殘留物。層析殘留物(硅膠，20％-30％乙酸乙酯/己烷)得到3.47g產(chǎn)物(同時還有另外1.28g部分純化的產(chǎn)物)。質(zhì)譜MH+=555.9。
1H NMR(CDCl3,300MHz):8.5(s,1H),7.5(s,1H),7.15(s,1H),4.5(s,2H),4.15(m,3H),3.8(br s,2H),3.4-3.1(m,4H),9-2.75(m,1H),2.7-2.5(m,2H),2.4-2.2(m,2H),1.25(m,3H)。
步驟D
使0.557g(5.4mmol)亞硝酸叔-丁酯與3ml DMF混合，于60℃-70℃加熱該混合物。緩慢加入(滴加)2.00g(3.6mmol)步驟C的產(chǎn)物和4mlDMF的混合物，然后冷卻該混合物至室溫。于40℃加入另外的0.64ml亞硝酸叔-丁酯，于60℃-70℃再加熱該混合物0.5小時。冷卻至室溫，將該混合物傾入150ml水中。用二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物并真空濃縮至殘留物。層析殘留物(硅膠，10％-20％乙酸乙酯/己烷)得到0.74g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH-=541.0。
1H NMR(CDCl3,200MHz):8.52(s,1H),7.5(d,2H),7.2(s,1H),4.15(q,2H),3.9-3.7(m,2H),3.5-3.1(m,4H),3.0-2.5(m,2H),2.4-2.2(m,2H),2.1-1.9(m,2H),1.26(t,3H)。
步驟E
使0.70g(1.4mmol)步驟D的產(chǎn)物與8ml濃鹽酸(水溶液)混合，于回流下加熱該混合物過夜。加入30ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入5ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥提取物，真空濃縮得到0.59g標(biāo)題化合物。質(zhì)譜MH+=468.7；m.p.=123.9℃-124.2℃。
步驟F
采用與制備實施例5步驟C所述基本相同的方法，使得來自步驟E的6.0g(12.8mmol)標(biāo)題化合物與3.78g(16.6mmol)1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)得到8.52g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=694.0(FAB)。
1H NMR(CDCl3,200MHz):8.5(d,1H),7.5(d,2H),7.2(d,1H),4.15-3.9(m,3H),3.8-3.6(m,1H),3.5-3.15(m,3H),2.9(d,2H),2.8-2.5(m,4H),2.4-1.8(m,6H),1.8-1.6(br d,2H),1.4(s,9H),1.25-1.0(m,2H)。
步驟G
使8.50g步驟F的產(chǎn)物與60ml二氯甲烷混合，然后冷卻至0℃，加入55ml TFA。于0℃攪拌該混合物3小時，然后加入500ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，接著加入30ml 50％氫氧化鈉(水溶液)。用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥，真空濃縮得到7.86g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=593.9(FAB)。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.51(d,1H),7.52(dd,2H),7.20(d,1H),4.1-3.95(m,2H),3.8-3.65(m,2H),3.5-3.05(m,5H),3.0-2.5(m,6H),2.45-1.6(m,6H),1.4-1.1(m,2H)。
制備實施例8 步驟A
制備8.1g得自制備實施例7步驟E的標(biāo)題化合物的甲苯溶液，加入在甲苯中的17.3ml的1M DIBAL溶液。在回流下加熱該混合物并用40分鐘緩慢加入(滴加)另外的21ml 1M DIBAL/甲苯溶液。使該反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入700ml 1M鹽酸(水溶液)。分離并棄去有機相。用二氯甲烷洗滌水相，棄去提取物，然后通過加入50％氫氧化鈉(水溶液)堿化水相。用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥提取物，真空濃縮得到7.30g標(biāo)題化合物，為對映體的外消旋混合物。
步驟B-對映體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，用20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺)制備步驟A的外消旋標(biāo)題化合物，得到(+)-異構(gòu)體和(-)-異構(gòu)體的標(biāo)題化合物。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=148.8℃；質(zhì)譜MH+=469；[α]25D=+65.6℃(12.93mg/2ml甲醇)；(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=112℃；質(zhì)譜MH+=469；[α]25D=-65.2°(3.65mg/2ml甲醇)。
步驟C
采用與制備實施例5步驟C所述基本相同的方法，使得自制備實施例8步驟B的1.33g標(biāo)題化合物的(+)-異構(gòu)體與1.37g 1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，得到2.78g所述產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=694.0(FAB)；[α]25D=+34.1℃(5.45mg/2ml甲醇)。
步驟D
通過與制備實施例5步驟D所述基本相同的方法處理2.78g步驟C的產(chǎn)品，得到1.72g產(chǎn)物。m.p.=104.1℃；質(zhì)譜MH+=594；[α]25D=+53.4℃(11.42mg/2ml甲醇)。
制備實施例9
步驟A
使40.0g(0.124mole)的原料酮與200ml硫酸混合，冷卻至0℃。用1.5小時緩慢加入13.78g(0.136mole)硝酸鉀，然后溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。采用與制備實施例4步驟A所述基本相同的方法處理反應(yīng)物。層析(硅膠，20％、30％、40％、50％乙酸乙酯/己烷，然后100％乙酸乙酯)得到28g 9-硝基產(chǎn)物，伴有少量7-硝基產(chǎn)物，以及19g 7-硝基化合物和9-硝基化合物的混合物。
步驟B
采用與制備實施例4步驟C所述基本相同的方法，使步驟A的28g(76.2mmol)9-硝基產(chǎn)物、400ml 85％乙醇/水、3.8g(34.3mmol)氯化鈣和38.28g(0.685mole)鐵反應(yīng)，得到24g所述產(chǎn)物。
步驟C
使13g(38.5mmol)步驟B的產(chǎn)物與140ml乙酸混合，用20分鐘緩慢加入2.95ml(57.8mmol)Br2的10ml乙酸溶液。于室溫下攪拌反應(yīng)混合物，然后真空濃縮至殘留物。加入二氯甲烷和水，然后用50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)至pH=8-9。用水洗滌有機相，然后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮得到11.3g產(chǎn)物。
步驟D
冷卻100ml濃鹽酸(水溶液)至0℃，然后加入5.61g(81.4mmol)亞硝酸鈉并攪拌10分鐘。緩慢(分次)加入11.3g(27.1mmol)步驟C的產(chǎn)物并于0℃-3℃攪拌該混合物2.25小時。緩慢加入(滴加)180ml50％H3PO2(水溶液)，使該混合物于0℃放置過夜。用30分鐘緩慢加入(滴加)150ml 50％氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH=9，然后用二氯甲烷提取。用水洗滌提取物，然后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥。真空濃縮至殘留物，層析(硅膠，2％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到8.6g產(chǎn)物。
步驟E
使8.6g(21.4mmol)步驟D的產(chǎn)物與300ml甲醇混合并冷卻至0℃-2℃。加入1.21g(32.1mmol)硼氫化鈉，于約0℃攪拌該混合物1小時。再加入0.121g(3.21mmol)硼氫化鈉，于0℃攪拌2小時，然后于0℃放置過夜。真空濃縮至殘留物，然后使殘留物在二氯甲烷和水之間分配。分離有機相，真空(50℃)濃縮得到8.2g產(chǎn)物。
步驟F
使8.2g(20.3mmol)步驟E的產(chǎn)物與160ml二氯甲烷混合，冷卻至0℃，然后用30分鐘緩慢加入(滴加)14.8ml(203mmol)SOCl2。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?.5小時，然后真空濃縮至殘留物，加入二氯甲烷，用1N氫氧化鈉(水溶液)洗滌，然后用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。真空濃縮至殘留物，接著加入無水THF和8.7g(101mmol)哌嗪，于室溫攪拌過夜。真空濃縮至殘留物，加入二氯甲烷，用0.25N氫氧化鈉(水溶液)、水，然后用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥，真空濃縮得到9.46g粗產(chǎn)物。層析(硅膠，5％甲醇/二氯甲烷+氨氣)得到3.59g標(biāo)題化合物，為外消旋體。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.43(d,1H),7.55(d,1H),7.45(d,1H),7.11(d,1H),5.31(s,1H),4.86-4.65(m,1H),3.57-3.40(m,1H),2.98-2.55(m,6H),2.45-2.20(m,5H)。
步驟G-對映體的分離
根據(jù)制備實施例6步驟D所述，用30％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺，將得自步驟F的外消旋標(biāo)題化合物(5.7g)層析純化，得到2.88gR-(+)-異構(gòu)體和2.77g S-(-)-異構(gòu)體的標(biāo)題化合物。
R-(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+470.0；[α]25D=+12.1°(10.9mg/2ml甲醇)；S-(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+470.0；[α]25D=-13.2°(11.51mg/2ml甲醇)。
步驟H采用與制備實施例5步驟C和D基本相同的方法，由步驟F的外消旋化合物獲得制備實施例9的外消旋標(biāo)題化合物。類似地，用得自步驟G的(-)-或(+)-異構(gòu)體，分別獲得制備實施例9的標(biāo)題化合物的(-)-或(+)-異構(gòu)體。
制備實施例10 步驟A
于20℃將得自制備實施例4步驟E的13g(33.3mmol)標(biāo)題化合物與300ml甲苯混合，然后加入32.5ml(32.5mmol)1M的DIBAL的甲苯溶液。于回流下加熱該混合物1小時，冷卻該混合物至20℃，再加入32.5ml1M的DIBAL溶液，在回流下加熱1小時。冷卻該混合物到20℃并將其傾入400g冰、500ml乙酸乙酯和300ml10％氫氧化鈉(水溶液)的混合物中。用二氯甲烷(3×200ml)提取水層，硫酸鎂干燥有機層，然后真空濃縮至殘留物。層析(硅膠，12％甲醇/二氯甲烷+4％氫氧化銨)得到10.4g標(biāo)題化合物，為外消旋體。質(zhì)譜MH+=469(FAB)。部分1H NMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.06(d,1H),3.95(d,1H)。
步驟B-對映體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，用5％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫)分離步驟A的外消旋標(biāo)題化合物，得到標(biāo)題化合物的(+)-異構(gòu)體和(-)-異構(gòu)體。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=469(FAB)；[α]25D=+43.5°(c=0.402，乙醇)；部分1H NMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.05(d,1H),3.95(d,1H)。
(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=469(FAB)；[α]25D=-41.8°(C=0.328乙醇)；部分1H NMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.05(d,1H),3.95(d,1H)。
步驟C按照制備實施例9步驟H的方法，可以獲得制備實施例10的標(biāo)題化合物的外消旋化合物、(+)-異構(gòu)體或(-)-異構(gòu)體。
制備實施例11 下式化合物
可以根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)中制備實施例40的方法，接著按照WO95/10516中實施例193的方法制備按照與制備實施例6步驟D基本相同的方法可以分離(+)-或(-)-異構(gòu)體。
R-(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3):155.8(C),146.4(CH),140.5(CH),140.2(C),136.2(C)135.3(C),133.4(C),132.0(CH),129.9(CH),125.6(CH),119.3(C),79.1(CH),52.3(CH2),52.3(CH),45.6(CH2),45.6(CH2),30.0(CH2),29.8(CH2)。[α]25D=+25.8°(8.46mg/2ml甲醇)。
S-(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3):155.9(C),146.4(CH),140.5(CH),140.2(C),136.2(C)135.3(C),133.3(C),132.0(CH),129.9(CH),125.5(CH),119.2(C),79.1(CH),52.5(CH2),52.5(CH),45.7(CH2),45.7(CH2),30.0(CH2),29.8(CH2)。[α]25D=-27.9°(8.90mg/2ml甲醇)。
按照與制備實施例5步驟C和D基本相同的方法，可由相應(yīng)的外消旋化合物、所述化合物的(+)-異構(gòu)體或(-)-異構(gòu)體獲得制備實施例11標(biāo)題化合物的外消旋化合物、(+)-異構(gòu)體或(-)-異構(gòu)體。
實施例1
于室溫下將式16.0化合物
(制備實施例8)(0.11g,0.19mmol)、無水二甲基甲酰胺(2ml)、2-溴代乙酰胺(0.027g,0.2mmol)和無水碳酸鈉(0.04g,0.38mmol)攪拌過夜。用水稀釋該混合物，過濾并用水洗滌固體，用二氯甲烷稀釋該固體。用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得到為固體的式2.0化合物(0.084g,68％,mp131℃)。
實施例2
步驟A
于0℃，向無水乙醚(100ml)中的嗎琳(1.62ml,18.5mmol)和三乙胺(2.62ml,18.8mmol)的攪拌溶液中加入溶于乙醚(10ml)中的氯代乙酰氯(1.5ml,1.02eq)。攪拌半小時后，加入水和1M鹽酸，振搖該化合物。分離有機相，用鹽水和1N氫氧化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到淺色油狀物的標(biāo)題化合物(0.05g)。
步驟B
于室溫下，將式16.0化合物(制備實施例8)(0.10g,0.17mmol)、無水二甲基甲酰胺(4ml)、得自實施例2步驟A的標(biāo)題化合物(0.051g,0.31mmol)和無水碳酸鈉(0.036g,0.34mmol)攪拌過夜。用水稀釋該混合物，過濾并用水洗滌固體。用二氯甲烷稀釋該固體，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得到固體(0.077g)。經(jīng)制備性薄層層析(硅膠)純化，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨洗脫得到式7.0化合物(0.063g,52％,mp126.9-131.9℃)。
實施例3
步驟A
于0℃，向無水乙醚(100ml)中的1-哌嗪甲酸叔-丁酯(2.12g,11.4mmol)和三乙胺(1.62ml,11.6mmol)的攪拌溶液中加入溶于乙醚(10ml)中的氯代乙酰氯(0.92ml,1.02eq)。攪拌半小時后，加入水和1M鹽酸，振搖該混合物。分離有機相，用鹽水和1N氫氧化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到淺色油狀物的標(biāo)題化合物(2.37g)。
步驟B
于室溫下將式16.0化合物(制備實施例8)(0.25g,0.41mmol)、無水二甲基甲酰胺(5ml)、得自實施例3步驟A的標(biāo)題化合物(0.12g,0.46mmol)和無水碳酸鈉(0.053g,0.50mmol)的混合物攪拌過夜。用水稀釋該混合物，過濾并用水洗滌固體。用二氯甲烷稀釋該固體，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得到固體(0.296g)。經(jīng)制備性薄層層析(硅膠)純化，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨洗脫得到式8.0化合物(0.17g,49％,mp139.1-141.2℃)。
實施例4
向溶于無水二氯甲烷(25ml)中的式8.0化合物(實施例3)(0.12g)中加入三氟乙酸(1ml)，于室溫下攪拌生成的溶液2小時。緩慢加入50％氫氧化鈉水溶液，接著加入二氯甲烷和鹽水。充分振搖該混合物，用水洗滌有機相，分離并用無水硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮得到殘留物，經(jīng)制備性薄層層析(硅膠)純化殘留物，用5％甲醇-二氯甲烷和濃氫氧化銨洗脫得到式9.0化合物(0.07g,71％,mp130.3-135.2℃)。
實施例5
于室溫下將式16.0化合物(制備實施例8)(0.51g,0.85mmol)、無水二甲基甲酰胺(10ml)、溴代乙酸叔-丁酯(0.13ml,0.89mmol)和無水碳酸鈉(0.18g,1.7mmol)的混合物攪拌過夜。用水稀釋該混合物，過濾并用水洗滌固體。用二氯甲烷稀釋該固體，用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮得到式11.0化合物，為固體(0.47g,79％,mp107-112℃)。
實施例6
按照與實施例1方法相似的方法，使式16.0化合物與2-氯代-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺反應(yīng)產(chǎn)生式3.0化合物(產(chǎn)率40％,mp116-120℃)。
實施例7
按照與實施例1方法相似的方法，使式16.0化合物與2-氯代-N,N-二乙基乙酰胺反應(yīng)產(chǎn)生式4.0化合物(產(chǎn)率62％,mp110-114℃)。
實施例8
按照與實施例1方法相似的方法，使式16.0化合物與N-氯代乙酰基-芐胺(即N-氯代乙?；?N-芐胺)反應(yīng)
產(chǎn)生式5.0化合物(產(chǎn)率39％,mp112-116℃)。
實施例9
按照與實施例1方法相似的方法，使式16.0化合物與1-溴代乙酰氨基-1-脫氧-β-D-半乳吡喃糖反應(yīng)產(chǎn)生式6.0化合物(產(chǎn)率23％,mp187.0-189.9℃)。
實施例10
按照與實施例2方法相似的方法，使式16.0化合物與1-(2-氯代乙酰基)-二氫吲哚反應(yīng)產(chǎn)生式10.0化合物。
實施例11
于室溫下，將式11.0化合物(制備實施例5)(0.40g)、二氯甲烷(10ml)和三氟乙酸(1ml)的混合物攪拌10天。用1N氫氧化鈉(水溶液)中和該混合物至pH7，用甲醇稀釋并真空濃縮，用無水乙醇洗滌該固體，過濾，真空濃縮濾液。將用氯化氫(氣體)飽和的二氯甲烷加入生成的奶油色泡沫中，于室溫下攪拌30分鐘后，過濾該混合物，真空干燥該固體得到式11.1化合物(1.0g,MH+=652)，伴有作為雜質(zhì)的氯化鈉。
實施例12
將1.0當(dāng)量的制備實施例8步驟D的(+)產(chǎn)物溶于含有1.1當(dāng)量的縮水甘油的二氯甲烷中并攪拌48小時。真空濃縮并用硅膠層析純化殘留物得到為白色固體的產(chǎn)物。
測試根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)所述的測試方法測定FPT IC50(法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制，體外酶測試)和COS細(xì)胞IC50(細(xì)胞-基測試)。根據(jù)WO95/10516所述的測試方法可以測定GGPT IC50(香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制，體外酶測試)、細(xì)胞墊測定和抗腫瘤活性(體內(nèi)抗腫瘤研究)。WO95/10516的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
按照與上述基本相同的方法可以進行其它一些測試，但是用另外的指示劑癌細(xì)胞系代替T24-BAG細(xì)胞。這些測試可以用表達激活的K-ras基因的DLD-1-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞或表達激活的K-ras基因的SW620-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞進行。用本領(lǐng)域已知的其它癌細(xì)胞系也可以證實本發(fā)明化合物抑制其它類型癌細(xì)胞的活性。
軟瓊脂測定無貼壁依賴性生長是致瘤細(xì)胞系的特征。將人癌細(xì)胞懸浮于含有0.3％瓊脂糖和指定濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基中。將該溶液涂在用含有相同濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑作為上層的0.6％瓊脂糖固化的生長培養(yǎng)基上。待上層固化后，將培養(yǎng)板于37℃、5％二氧化碳下孵育10-16天使集落生長。孵育后，用MTT(3-[4,5-二甲基-噻唑-2-基]-2,5-二苯基溴化四唑鎓，噻唑蘭)(1mg/ml的PBS溶液)涂于所述瓊脂上進行集落染色對該集落進行計數(shù)并計算IC50。
化合物2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0,11.0和20.0的FPT IC50(H-ras)在1.8-20nM(納摩爾)范圍內(nèi)。
化合物2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0和9.0的FPT IC50(K-ras)在8.6-51.9nM范圍內(nèi)。
化合物2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,10.0和20.0的Cos細(xì)胞IC50在6-840nM范圍內(nèi)。
化合物2.0,3.0,4.0,6.0,7.0,8.0,9.0和20.0的軟瓊脂F(xiàn)PT IC50在60至＞500nM范圍內(nèi)。
在由本發(fā)明所述的化合物制備藥用組合物時，惰性的、藥學(xué)上可接受的載體可以為固體或液體。固體制劑包括粉劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可含有約5-約70％的活性組分。適當(dāng)?shù)墓腆w載體是本領(lǐng)域已知的，如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、蔗糖、乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑為適合口服給藥的固體劑型。
制備栓劑時，首先將低熔點的蠟如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物融化，攪拌下將活性組分均勻分散其中。然后將融化的均勻混合物傾至方便大小的模中，使其冷卻而固化。
液體制劑包括溶液、懸浮液和乳液。適合胃腸外注射的實例為水或水-丙二醇溶液。
液體制劑也可以包括供鼻內(nèi)給藥的溶液。
適合吸入的氣溶膠制劑可包括溶液和粉末形式的固體，它們可以與藥學(xué)上可接受的載體例如惰性壓縮氣體混合。
也包括在馬上要使用前將其轉(zhuǎn)化為供口服或胃腸外給藥的液體形式制劑的固體形式制劑。此類液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。
也可以將本發(fā)明的化合物透皮給藥。透皮組合物可以為霜劑、洗劑、氣溶膠和/或乳劑，包括在本領(lǐng)域內(nèi)為此目的而常用的基質(zhì)或藥庫型的透皮貼劑。
優(yōu)選該化合物口服給藥。
優(yōu)選該藥用制劑為單位劑型。為此類劑型時，該制劑可以分為含有適當(dāng)量(如達到所需目的的有效量)的活性組分的單位劑量。
制劑的單位劑型中活性化合物的量可以根據(jù)具體的使用情況在約0.1mg-1000mg、更優(yōu)選在約1mg-300mg之間變化或調(diào)整。
根據(jù)病人的需要和待治療疾病的嚴(yán)重程度可以改變使用的實際劑量。確定特殊情況下的合適劑量應(yīng)在本領(lǐng)域技術(shù)人員的專業(yè)范圍內(nèi)。一般而言，治療用比該化合物的最佳劑量稍低的劑量開始。此后，逐漸增加劑量至在特定情況下達到最佳效果。為方便起見，根據(jù)需要可以將每日總劑量分開，并在全天中分次給藥。
在考慮了各種因素如病人的年齡、身體狀況和體重以及待治療的癥狀的嚴(yán)重程度后，根據(jù)醫(yī)師的判斷調(diào)整本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的用量和給藥次數(shù)?？诜o藥的一般推薦劑量方案為每天10mg-2000mg、優(yōu)選每天10-1000mg，每天分2-4次給藥以阻斷腫瘤生長。當(dāng)在該劑量范圍內(nèi)給藥時，所述化合物是無毒性的。
下列為含有本發(fā)明化合物的藥用劑型的實施例。本發(fā)明的藥用組合物方面的范圍不受所提供的實施例的限制。
藥物劑型實施例實施例A-片劑
制備方法將序號1和2的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。將與序號3成分的混合物制粒。如果需要可通過粗篩(如1/4”,0.63cm)磨碎濕顆粒。干燥濕顆粒。如果需要，過篩干燥的顆粒并使其與序號4的成分混合10-15分鐘。加入序號5的成分并混合1-3分鐘。在合適的壓片機上將該混合物壓片成適當(dāng)?shù)拇笮『椭亓俊?br> 實施例B-膠囊
制備方法使序號1、2和3的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。加入序號4的成分并混合1-3分鐘。在合適的膠囊填充機上將該混合物填入兩節(jié)的硬明膠膠囊中。
盡管結(jié)合以上提出的具體的實施方案介紹了本發(fā)明，它的許多選擇方案、修改和變化對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說應(yīng)是顯而易見的。所有這些選擇、修改和變化都將認(rèn)為是在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．下式的化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H其中n是1-3，而其余的a、b、c和d基團代表CR1或CR2；或a、b、c和d各自獨立選自CR1或CR2；每個R1和每個R2獨立選自H、鹵代、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t是0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11、-SR11N(R75)2，其中每個R75獨立選自H和-C(O)OR11、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨立代表H、R1和R2的任何一個取代基或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和或不飽和C5-C7環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被下列基團取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、-OPO3R10或R5和R6結(jié)合代表=O或=S和/或R7與R8結(jié)合代表=O或=S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以含有任選連接于碳原子11的雙鍵(由虛線表示)；碳原子5和6之間的虛線代表任選的雙鍵，如此當(dāng)存在雙鍵時，A和B獨立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間無雙鍵存在時，A和B各自獨立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、=O、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；和W代表選自以下的基團
或
其中R12選自(1)H；(2)烷基；(3)芳基；(4)芳基烷基；R13選自(1)H；(2)烷基；(3)烷氧基；(4)雜環(huán)烷基；(5)芳基；及(5)芳烷基；R14選自(1)H；(2)烷基；(3)芳基；及(4)雜芳基；環(huán)
代表雜環(huán)烷基環(huán)，其中Y代表所述環(huán)的其余部分，所述其余部分由碳原子和任選選自NH、NR15、O和S的雜原子組成，且所述的其余部分任選含有與其稠合的芳環(huán)；R15代表-C(O)OR16；及R16代表烷基。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R2是H；R1選自溴和氯；R3選自溴和氯；R4選自H、溴和氯；R5、R6、R7和R8為H；A和B各自為H2且C5和C6之間不存在任選的鍵。
3．權(quán)利要求1-2中任一項的化合物，其中W選自(A)
其中(1)R12選自H、烷基和芳烷基；及(2)R13選自H、烷基、烷氧基、芳烷基和雜環(huán)烷基；(B)
其中所述雜環(huán)烷基環(huán)
選自
其中R14為H或烷基。
4．權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中R4為H。
5．權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中R4選自氯或溴。
6．權(quán)利要求1-5中任一項的化合物，其中X是CH。
7．權(quán)利要求1-6中任一項的化合物，其中R12和R13獨立選自H、甲基、乙基、甲氧基、芐基、和R14代表H或-C(CH3)。
8．權(quán)利要求1-7中任一項的化合物選自
其中R1、R3和R4各自獨立選自鹵代而A、B、X和W如權(quán)利要求1所定義。
9．權(quán)利要求1-8中任一項的化合物，其中R1為溴而R3為氯和R4為溴。
10．權(quán)利要求1-9中任一項的化合物，其中所述化合物為下式化合物
11．權(quán)利要求1的化合物選自
12．治療腫瘤細(xì)胞的方法，其包括給予有效量的權(quán)利要求1-11中任何一項的化合物。
13．權(quán)利要求12的方法，其中被治療的細(xì)胞為胰腫瘤細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞、甲狀腺濾泡腫瘤細(xì)胞、脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞、表皮癌腫瘤細(xì)胞、膀胱癌腫瘤細(xì)胞、結(jié)腸腫瘤細(xì)胞、乳腺腫瘤細(xì)胞或前列腺腫瘤細(xì)胞。
14．抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，其包括給予有效量的權(quán)利要求1-11中任一項的化合物。
15．抑制細(xì)胞異常生長的藥用組合物，其包含有效量的權(quán)利要求1-11中任一項的化合物與藥學(xué)上可接受載體的組合。
16．權(quán)利要求1-11中任一項的化合物治療腫瘤細(xì)胞的用途。
17．權(quán)利要求1-11中任一項的化合物在制備治療腫瘤細(xì)胞的藥物中的用途。
18．權(quán)利要求1-11中任一項的化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的用途。
19．權(quán)利要求1-11中任一項的化合物在制備抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開新的式(1.0)化合物。式(1.0)化合物由式(1.4)或(1.5)化合物代表,其中:R
文檔編號A61K31/4545GK1236364SQ9719952
公開日1999年11月24日 申請日期1997年9月11日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月13日
發(fā)明者A·G·塔弗拉斯, F·G·恩羅格 申請人:先靈公司