專利名稱：用作法呢基－蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的化合物的制作方法
背景1995年4月20日公開的專利申請WO95/10516公開用于抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的三環(huán)類化合物。
鑒于法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的現(xiàn)實(shí)意義，對本領(lǐng)域的一個(gè)寶貴貢的貢獻(xiàn)將是用于抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的另一些化合物。本發(fā)明即提供了此種貢獻(xiàn)。
本發(fā)明概述本發(fā)明提供用于抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)的化合物。本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物由下式代表
其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H(其中n是1-3)，而其余的a、b、c和d基團(tuán)代表CR1或CR2；或a、b、c和d各自獨(dú)立選自CR1或CR2；每個(gè)R1和每個(gè)R2獨(dú)立選自H、鹵代、-CF3、-OR10(如-OCH3)、-COR10、-SR10(如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR11(其中t是0、1或2，如-SOCH3和-SO2CH3)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11(如-SCH2CO2CH3)、-SR11N(R75)2，其中每個(gè)R75獨(dú)立選自H和-C(O)OR11(如-S(CHO2)2NHC(O)O-叔-丁基和-S(CH2)2NH2)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代(例如，烷基取代的四唑-5-基硫代如1-甲基-四唑-5-基硫代)、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨(dú)立代表H、R1和R2的任何取代基，或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和或不飽和C5-C7環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨(dú)立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被下列基團(tuán)取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、-OPO3R10或R5和R6結(jié)合代表=O或=S和/或R7與R8結(jié)合代表=O或=S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基(如芐基)；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以任選含有連接于碳原子11的雙鍵(由虛線表示)；碳原子5和6之間的虛線代表任選的雙鍵，如此當(dāng)存在雙鍵時(shí)，A和B獨(dú)立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間無雙鍵存在時(shí)，A和B各自獨(dú)立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、=O、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2、3或4；及W選自(1)氰基(即CN)；(2)-OC(O)R12，其中R12選自(a)雜芳基，例如吡啶基(如3-吡啶基)、吲哚基(如2-吲哚基)、吡咯基(如2-吡咯基)和N-取代的吡咯基(例如N-烷基吡咯基，像N-烷基吡咯基-2-基，像N-甲基-2-吡咯基)；(b)H；(c)烷基(如甲基)；或(d)下式的取代基
或
其中R28選自-OC(O)R29、-OH、-OC(O)NHC(O)CCl3、或-OC(O)NH2,其中R29為烷基(如甲基)；(3)下式表示的亞胺酸酯(imidate)
其中R13選自(a)H,(b)CN,(c)-SO2-烷基(如-SO2CH3-),(d)-C(O)-芳基(如-C(O)C6H5，即-C(O)苯基)，(e)-SO2NR10R15(如-SO2NH2),(f)-S(O)NR10R15(如-C(O)NH2),(g)-OR10(如-OH和-OCH3)和(h)-C(O)NR10C(O)NR10R15(如-C(O)NHC(O)NH2)；R14為芳基；R10和R15獨(dú)立選自H、烷基、芳基和芳烷基；(4)由下式表示的亞胺酰胺基(imidamido)
其中R13選自(a)H,(b)CN,(c)-SO2-烷基(如-SO2CH3-),(d)-C(O)-芳基(如-C(O)C6H5，即-C(O)苯基)，(e)-SO2R10R15(如-SO2NH2),(f)-S(O)NR10R15(如-C(O)NH2),(g)-OR10(如-OH和-OCH3)和(h)-C(O)NR10C(O)NR10R15(如-C(O)NHC(O)NH2)；R16選自烷基、芳烷基、芳基、環(huán)烷基、雜芳基、雜芳烷基和雜環(huán)烷基；R10和R15如上所定義；及R10和R16獨(dú)立選自上面定義的基團(tuán)；(5)下式的1-氨基-2-硝基乙烯衍生物
其中R10如上所定義；及(6)下式的取代基
本發(fā)明的化合物(ⅰ)體外可有效地抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但不抑制香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶Ⅰ；(ⅱ)阻斷為法呢基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)的表型的改變，但不阻斷改造為香葉基香葉基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式誘導(dǎo)的表型的改變；(ⅲ)阻斷為法呢基受體的Ras的細(xì)胞內(nèi)加工，但不阻斷改造為香葉基香葉基受體的Ras的細(xì)胞內(nèi)加工；及(ⅳ)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras誘導(dǎo)的異常細(xì)胞在培養(yǎng)物中的生長。
本發(fā)明的化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和癌基因蛋白Ras的法呢基化。因此本發(fā)明進(jìn)一步提供通過給予有效量的上述的三環(huán)類化合物抑制哺乳動(dòng)物，尤其是人中的法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(如ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶)的方法。給予患者本發(fā)明的化合物以抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶在下述癌癥的治療中是有用的。
本發(fā)明提供通過給予有效量的本發(fā)明化合物抑制或治療細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化的細(xì)胞)異常生長的方法。細(xì)胞的異常生長指不依賴于正常調(diào)節(jié)機(jī)制(如接觸抑制的喪失)的細(xì)胞生長。這包括下列的異常生長(1)表達(dá)激活的Ras癌基因的瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)其中Ras蛋白因另一種基因的致癌突變而被激活的瘤細(xì)胞；及(3)其中出現(xiàn)異常的Ras激活的其它增生性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動(dòng)物(如人)有效量的本文所述的三環(huán)類化合物抑制或治療腫瘤生長的方法。具體地說，本發(fā)明提供通過給予有效量的本文上述的化合物抑制或治療表達(dá)激活的Ras癌基因的腫瘤生長的方法。可以被抑制或治療的腫瘤的實(shí)例包括(但不限于)肺癌(如肺腺癌)、胰癌(如胰腺癌像外分泌性的胰腺癌)、結(jié)腸癌(如結(jié)腸直腸癌像結(jié)腸腺癌和結(jié)腸癌)、骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML)、甲狀腺濾泡癌、脊髓發(fā)育不良綜合征(MDS)、膀胱癌、表皮癌、乳腺癌和前列腺癌。
相信本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動(dòng)物(如人)本文所述的有效量的三環(huán)類化合物抑制或治療良性和惡性增生性疾病的方法，在這些增生性疾病中，Ras蛋白因其它基因的致癌突變而被異常激活，即所述Ras基因本身不被突變所激活為致癌形式。例如，通過本文所述的三環(huán)類化合物可以抑制或治療良性增生性紊亂神經(jīng)纖維瘤病或其中Ras因酪氨酸激酶癌基因(如neu、src、abl、lck和fyn)的突變或過度表達(dá)而被激活的腫瘤。
用于本發(fā)明方法中的三環(huán)類化合物可以抑制或治療細(xì)胞的異常生長。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以通過阻斷G-蛋白異戊二烯化而抑制G-蛋白(如ras p21)的功能而起作用，從而使它們用于治療增生性疾病如腫瘤生長和癌癥。不希望受到理論的束縛，相信這些化合物可以抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，從而使它們顯示對ras轉(zhuǎn)化的細(xì)胞的抗增生活性。
本發(fā)明詳述除非另外指明，用于本文的下列術(shù)語按如下定義Ac-代表乙?；?；MH+-代表質(zhì)譜中分子的分子離子加氫；M+-代表質(zhì)譜中分子的分子離子；苯并三唑-1-基氧基表示
1-甲基-三唑-5-基硫代表示
?；?代表-C(O)-烷基、-C(O)-鏈烯基、-C(O)-鏈炔基、-C(O)-環(huán)烷基、-C(O)-環(huán)烯基或-C(O)-環(huán)炔基；鏈烯基-代表具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵且含有2-12個(gè)碳原子(優(yōu)選2-6個(gè)碳原子，最優(yōu)選3-6個(gè)碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；鏈炔基-代表具有至少一個(gè)碳-碳三鍵且含有2-12個(gè)碳原子(優(yōu)選2-6個(gè)碳原子)的直鏈和支鏈碳鏈；烷基-(包括烷氧基、芳烷基和雜芳烷基的烷基部分)-代表含有1-20個(gè)碳原子，優(yōu)選1-6個(gè)碳原子直鏈和支鏈碳鏈；芳烷基-代表連接于如上定義的烷基(優(yōu)選的)烷基為-CH2-)的如下定義的芳基，如芐基；芳基(包括芳烷基、芳氧基和芳烷氧基的芳基部分)-代表含有6-15個(gè)碳原子并具有至少一個(gè)芳環(huán)(如芳基是苯環(huán))的碳環(huán)基，所述碳環(huán)基上的所有可取代的碳原子都可看作為可能的連接點(diǎn)，所述碳環(huán)基任選由下列的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代(如1-3次)鹵代、烷基、羥基、烷氧基、苯氧基、-CF3、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-COOR10或-NO2；環(huán)烷基-代表3-20個(gè)碳原子(優(yōu)選3-7個(gè)碳原子)的分支或未分支的飽和碳環(huán)；Et-代表乙基；鹵代-代表氟、氯、溴和碘；雜芳基-代表具有至少一個(gè)選自氧、硫或氮的雜原子的環(huán)基，可任選由R3和R4取代，所述雜原子間斷碳環(huán)結(jié)構(gòu)且具有足夠的離域pi電子以提供芳族特性，所述芳族雜環(huán)基(優(yōu)選含有2-14個(gè)碳原子)，例如，(1)噻吩基(如2-或3-噻吩基)，(2)咪唑基(如(2-、4-或5-)咪唑基)，(3)三唑基(如3-或5-[1,2,4-三唑基]，(4)四唑基，(5)取代的四唑基，如
其中R27代表(a)芳基(如苯基)，(b)烷基(如甲基)，或(c)芳基烷基(芳烷基)(如芐基)，(6)呋喃基(如2-或3-呋喃基)，(7)噻唑基(如2-、4-或5-噻唑基)，(8)嘧啶基(如2-、4-或5-嘧啶基)，(9)吡嗪基(如2-吡嗪基)，(10)噠嗪基(如3-或4-噠嗪基)，(11)三嗪基(如2-、4-或6-[1,3,5-三嗪基]),(12)3-或5-[1,2,4-噻二唑基],(13)2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基，(14)苯并噁唑基(如2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基)，(15)吲哚基(苯并吡咯基)(如2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)，(16)吡唑基(如3-、4-或5-吡唑基)，(17)噁唑基(如3-、4-或5-噁唑基)，(18)2-、3-或4-吡啶基或吡啶基N-氧化物(任選由R3和R4取代)，其中吡啶基N-氧化物可以表示為
或
(19)苯并異噁唑基，(20)吡咯基，(21)苯并咪唑基，(22)異喹啉基，(23)喹啉基，(24)吡啶并吡嗪基，(25)萘啶基，(26)吡喃基，(27)苯并噻吩基，(28)異苯并呋喃基，(29)異噻唑基，(30)異噁唑基和(31)N-取代的吡咯基
其中R30選自烷基(如乙基)、芳烷基(如-CH2C6H5)、CH2C(O)NH2、-SO2CH3或-CH2C(O)OR31，其中R31為H或烷基(C(CH3)3)；雜芳基烷基(雜芳烷基)-代表連接于如上定義的烷基(優(yōu)選的烷基為-CH2-)的如上定義的雜芳基，如-CH2-(4-或5-)咪唑基；雜環(huán)烷基-代表含有3-15個(gè)碳原子、優(yōu)選4-6個(gè)碳原子的飽和(支鏈或無支鏈)碳環(huán)，所述碳環(huán)可被1-3個(gè)選自-O-、-S-、-NR10-(其中R10如上所定義)的雜基團(tuán)間隔；適當(dāng)?shù)碾s環(huán)烷基包括(1)四氫呋喃基(如2-或3-四氫呋喃基)，(2)四氫噻吩基，如(2-或3-四氫噻吩基)，(3)哌啶基(如2-、3-或4-哌啶基)，(4)吡咯烷基(如2-或3-吡咯烷基)，(5)2-或3-哌嗪基，(6)2-或4-二噁烷基，(7)四氫吡喃基和(8)取代的四氫吡喃基，其中所述取代基選自羥基和羥基烷基(如羥甲基)，例如
，和Ph-代表苯基。
本文涉及的下列溶劑和試劑用縮寫表示為四氫呋喃(THF)；異丙醇(iPrOH)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酐(TFAA)；1-羥基苯并三唑(HOBT)；1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(DEC)；二異丁基氫化鋁(DIBAL)；4-甲基嗎啉(NMM)。
所述取代基R1、R2、R3及R4的位置根據(jù)下面的編號環(huán)結(jié)構(gòu)進(jìn)行參照
本領(lǐng)域的專業(yè)人員可以理解在C-11鍵的S和R立體化學(xué)構(gòu)型為
式(1.0)化合物包括其中下部哌啶基為4-或3-哌啶基的化合物，即
或
式(1.0)化合物包括其中R2和R4為H，而R1和R3為鹵代(優(yōu)選獨(dú)立選自溴或氯)的化合物。例如，R1為溴而R3為氯。這些化合物包括其中R1在3-位而R3在8-位(如3-Br和8-Cl)的化合物。式(1.0)化合物也包括其中R2是H，而R1、R3和R4為鹵代(優(yōu)選獨(dú)立選自溴或氯)的化合物。
優(yōu)選式(1.0)化合物由式1.1化合物表示
其中所有的取代基如式1.0所定義。
優(yōu)選R2為H，而R1、R3和R4為鹵代；a為N而b、c和d為碳；A和B各自代表H2；任選C5和C6之間的鍵不存在；X為CH；而R5、R6、R7和R8為H。更優(yōu)選R1、R3和R4獨(dú)立選自溴或氯。最優(yōu)選R1為溴，而R3和R4獨(dú)立選自氯和溴。
更優(yōu)選式1.0化合物由式1.2和式1.3化合物代表
而最優(yōu)選式1.0化合物由式1.4和1.5化合物代表
其中R1、R3和R4獨(dú)立選自鹵代，優(yōu)選溴或氯；而A、B、X和W如式1.0化合物所定義。更優(yōu)選A和B各自代表H2；任選C5和C6之間的鍵不存在；X為CH。最優(yōu)選R1為溴，而R3和R4獨(dú)立選自溴或氯，還優(yōu)選R3為氯而R4為溴；A和B各自代表H2；任選C5和C6之間的鍵不存在；X為CH；而R5、R6、R7和R8為H。
W的-C(O)R12取代基的例子包括其中R12選自下列的基團(tuán)
和
對于取代基W而言，亞胺酸酯的例子包括其中R13選自下列的基團(tuán)(1)CN；(2)H；(3)-SO2R10R15；其中R10和R15選自H和烷基(如甲基)；(4)-C(O)NR10R15；其中R10和R15選自H和烷基(如甲基)；(5)-SO2-烷基和(6)-C(O)-芳基。亞胺酸酯的例子還包括其中R14為芳基(如苯基)的基團(tuán)。
例如，對于取代基W的亞胺酸酯的例子包括其中R13選自下列的基團(tuán)CN、C(O)NH2、H、-SO2NH2、-SO2NHCH3、-SO2N(CH3)2、-C(O)NHCH3、-SO2NH3和-C(O)C6H5。亞胺酸酯的例子還包括其中R14為苯基，而R13選自下列的基團(tuán)CN、C(O)NH2、H、-SO2NH2、-SO2NHCH3、-SO2N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-SO2NH3和-C(O)C6H5。
對于取代基W的亞胺酰胺基的例子包括其中R13選自下列的基團(tuán)(1)CN；(2)H；(3)-OR10；(4)-C(O)NR10C(O)NR10R15，其中R10和R15為H；(5)-SO2NR10R15，其中R10和R15獨(dú)立選自H和烷基(如甲基)；(6)-C(O)NR10R15，其中R10和R15獨(dú)立選自H和烷基(如甲基)；(7)-SO2-烷基；和(8)-C(O)-芳基。亞胺酰胺基的例子還包括其中R10和R15選自H和烷基(如甲基)的基團(tuán)；及其中R16選自H和雜芳烷基(如3-吡啶基甲基)的基團(tuán)。
例如，對于取代基W的亞胺酰胺基包括其中R13選自下列的基團(tuán)CN、H、-OCH3、-OH、-C(O)NHC(O)NH2、-SO2NH2、-SO2NHCH3、-SO2N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-SO2CH3和-C(O)C6H5。亞胺酰胺基的例子還包括其中R10和R16選自下H和
(即3-吡啶基甲基)的基團(tuán)。
亞胺酰胺基取代基的例子還包括這樣一些基團(tuán)，其中R10和R16選自下H和3-吡啶基甲基；而R13選自CN、H、-OCH3、-OH、-C(O)NHC(O)NH2、-SO2NH2、-SO2NHCH3、-SO2N(CH3)2、-C(O)NH2、-C(O)NHCH3、-SO2NH3和-C(O)C6H5。
此外，亞胺酰胺基取代基的例子還包括這樣一些基團(tuán)，其中(1)R13和R10為H，而R13為3-吡啶基甲基；及(2)R10和R16為H；而R13選自CN、H、-OCH3、-OH、-C(O)NHC(O)NH2、-SO2NH2及-C(O)NHCH3、-SO2NH3和-C(O)C6H5。
對于取代基W,1-氨基-2-硝基乙烯衍生物的例子包括其中R10為烷基(如甲基)的基團(tuán)。
優(yōu)選當(dāng)X為CH或N，而R1、R3和R4為鹵代的式1.2A和1.3A化合物
本發(fā)明的優(yōu)選化合物由下式的化合物代表
其中R1、R3和R4為鹵代，而其余的取代基如上所定義，更優(yōu)選式1.5A化合物。
其中W為亞胺酸酯的代表性式1.0化合物包括
和
其中W為亞胺酸酯的代表性式1.0化合物還包括
和
其中W為亞胺酰胺基的代表性式1.0化合物包括
和
其中W為亞胺酰胺基的代表性式1.0化合物還包括
其中W為氰基的代表性式1.0化合物包括
其中W為氰基的代表性式1.0化合物還包括
和
其中W為1-氨基-2-硝基乙烯衍生物的代表性式1.0化合物包括
和
其中W為1-氨基-2-硝基乙烯衍生物的代表性式1.0化合物還包括
其中W為-C(O)R12基團(tuán)的代表性式1.0化合物包括
式1.0化合物還包括下式的化合物
本發(fā)明的化合物也包括1-N-氧化物，即，例如下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物
其中
代表所述化合物的剩余部分。
于25℃，在甲醇或乙醇中測定所述化合物((+)-或(-)-)的旋光性。
本發(fā)明包括無定形態(tài)或結(jié)晶態(tài)的上述化合物。
畫入環(huán)體系的線表明已指定的鍵可以連接到任何可取代的環(huán)碳原子上。
本發(fā)明的一些化合物可以以不同的異構(gòu)體形式(如對映體或非對映體)包括阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(即其中7-元環(huán)為一固定構(gòu)象的化合物，如此則由于10-溴取代基的存在使11-碳原子定位于稠合苯環(huán)平面的上方或下方)存在。本發(fā)明設(shè)想了所有此類純形式和混合物的異構(gòu)體，包括外消旋混合物。也包括烯醇形式。
某些三環(huán)化合物應(yīng)具有酸性，例如具有羧基或酚羥基的那些三環(huán)化合物。這些化合物可以形成藥學(xué)上可接受的鹽。此類鹽的實(shí)例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、金鹽和銀鹽。也考慮了與藥學(xué)上可接受的胺如氨、烷基胺、羥基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的鹽。
某些堿性的三環(huán)化合物也可形成藥學(xué)上可接受的鹽，如酸加成鹽。例如，吡啶-氮原子可與強(qiáng)酸形成鹽，而具有堿性取代基如氨基的化合物也可與弱酸形成鹽。用于形成鹽的適合酸的例子為鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸和其它本領(lǐng)域熟知的無機(jī)酸和羧酸。通過方便的方法使游離堿的形式與足量的所需酸接觸產(chǎn)生鹽來制備所述鹽。通過用適當(dāng)?shù)南A水溶液，如稀氫氧化鈉、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉水溶液處理所述鹽可以再生成所述游離堿形式。這些游離堿形式在某些物理性質(zhì)，如在極性溶劑中的溶解度方面與它們各自的鹽形式有些不同，但對于本發(fā)明的目的而言，所述酸和堿的鹽與它們各自的游離堿形式卻是等同的。
所有這些酸和堿的鹽都在本發(fā)明藥學(xué)上可接受的鹽的范圍內(nèi)，且對本發(fā)明的目的而言，認(rèn)為所有的酸和堿的鹽與相應(yīng)化合物的游離堿形式是等同的。
根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)、申請序列號08/410187號(1995年3月24日遞交)、申請序列號08/577951號(1995年12月22日遞交)(現(xiàn)已放棄)、申請序列號08/615760號(1996年3月13日遞交)(現(xiàn)已放棄)、WO97/23478(1997年7月3日公開)(該專利公開申請序列號08/577951和08/615760號的主題)、申請序列號08/713297號(1996年9月13日遞交)及申請序列號08/877453號(1997年6月17日遞交)(每一公開結(jié)合在此作為參考)中所述方法以及根據(jù)以下描述的方法可以制備本發(fā)明化合物。
本發(fā)明化合物可以通過如下制備，即使下式化合物
其中所有的取代基如式1.0所定義，在DMF中與適當(dāng)保護(hù)的哌啶基乙酸(如1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基乙酸)和DEC/HOBT/NMM于25℃反應(yīng)約18小時(shí)產(chǎn)生下式化合物
然后在二噁烷和甲醇中，使式44.0化合物與TFA或10％硫酸反應(yīng)，接著與氫氧化鈉反應(yīng)產(chǎn)生下式化合物
例如，可以通過使式43.0化合物與如上所述的1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)來制備下式化合物
例如，式46.0化合物包括
和
這些化合物的制備在以下的制備實(shí)施例3、4、5、6、7、8、9、10、11、12和13中分別予以描述。
本發(fā)明化合物可以通過下述制備，即使下式化合物
在DMF中與適當(dāng)保護(hù)的哌啶基乙酸(如1-N-叔-丁氧基-羰基哌啶基乙酸)和DEC/HOBT/NMM于約25℃反應(yīng)約18小時(shí)產(chǎn)生下式化合物
然后在二噁烷和甲醇中，使式44.1化合物與TFA或10％硫酸反應(yīng)，接著與氫氧化鈉反應(yīng)產(chǎn)生式46.1化合物
在偶合劑如在二甲基甲酰胺中的DEC和HOBT存在下，使式46.1化合物與適當(dāng)?shù)聂人岱磻?yīng)，可以制備由式1.7代表的本發(fā)明的酰胺化合物
或者使式46.1化合物在如吡啶的溶劑中與酰氯或酸酐反應(yīng)。
具有1-N-O基團(tuán)的化合物
可通過用間-氯代過苯甲酸氧化下式的相應(yīng)的吡啶基化合物來制備
該反應(yīng)在適合的有機(jī)溶劑如二氯甲烷(通常為無水的)中、在適宜的溫度下進(jìn)行，以產(chǎn)生在所述三環(huán)體系中環(huán)Ⅰ的1位具有N-O取代基的本發(fā)明化合物。
一般來說，在加入間-氯代過苯甲酸之前，先將原料三環(huán)反應(yīng)物的有機(jī)溶劑溶液冷卻至約0℃。然后使該反應(yīng)物在反應(yīng)期間溫?zé)嶂潦覝?。通過標(biāo)準(zhǔn)的分離方法可以回收所需產(chǎn)物。例如，反應(yīng)混合物可以用適合的堿如飽和碳酸氫鈉水溶液或氫氧化鈉(如1N氫氧化鈉)洗滌，然后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。真空濃縮含有產(chǎn)物的溶液。通過標(biāo)準(zhǔn)方法如硅膠層析(如快速柱層析)可以純化產(chǎn)物。
或者，通過用間-氯代過苯甲酸和
其中Q為保護(hù)基團(tuán)例如BOC，進(jìn)行以上的氧化過程，由中間體
制備N-O化合物。氧化后，通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)除去保護(hù)基團(tuán)。然后使N-O中間體進(jìn)一步反應(yīng)產(chǎn)生本發(fā)明化合物。
式43.0化合物包括式43.1的化合物
通過本領(lǐng)域熟知的方法例如WO95/10516、U.S.5151423公開的方法和以下敘述的那些方法，可以制備式43.1化合物。以上中間體化合物也可以通過包含下列步驟的方法制備(a)在強(qiáng)堿存在下，使下式的酰胺
其中R11a為溴，R5a為氫及R6a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基；R5a為C1-C6烷基、芳基或雜芳基及R6a為氫；R5a和R6a獨(dú)立選自C1-C6烷基和芳基；或R5a和R6a與它們所連接的氮原子一起形成含有4-6個(gè)碳原子或含有3-5個(gè)碳原子和一個(gè)選自-O-和-NR9a-(其中R9a為氫、C1-C6烷基或苯基)的雜部分的環(huán)，與下式的化合物反應(yīng)
其中R1a、R2a、R3a和R4a獨(dú)立選自氫和鹵代而R7a為氯或溴，得到下式化合物
(b)使步驟(a)的化合物與(ⅰ)POCl3反應(yīng)，獲得下式的氰基化合物
；或與(ⅱ)DIBALH反應(yīng)，獲得下式的醛化合物
(c)使所述氰基化合物或醛與下式的哌啶衍生物反應(yīng)
其中L為選自氯和溴的離去基團(tuán)，分別獲得下式的酮或醇
或
(d)(ⅰ)用CF3SO3H使該酮環(huán)化獲得式13.0a化合物，其中虛線代表雙鍵；或(d)(ⅱ)用多磷酸使該醇環(huán)化獲得中間體化合物，其中虛線代表單鍵。
WO95/10516、U.S.5151423公開和以下敘述中制備所述中間體化合物的方法使用了三環(huán)酮中間體。下式的這些中間體
其中R11b、R1a、R2a、R3a和R4a獨(dú)立選自氫和鹵代，可通過以下方法制備，該方法包括(a)使下式的化合物
(ⅰ)在鈀催化劑和一氧化碳存在下，與式NHR5aR6a的胺(其中R5a和R6a如上述方法中所定義)反應(yīng)，得到下式的酰胺
；或(ⅱ)在鈀催化劑和一氧化碳存在下，與式R10aOH的醇(其中R10a為C1-C6低級烷基或C3-C6環(huán)烷基)反應(yīng)，得到下式的酯
隨后使該酯與式NHR5aR6a的胺反應(yīng)得到所述酰胺；(b)在強(qiáng)堿存在下，使所述酰胺與下式的碘取代的芐基化合物反應(yīng)
其中R1a、R2a、R3a、R4a和R7a如上所定義，獲得下式化合物
；和(c)用式R8aMgL試劑(其中R8a為C1-C8烷基、芳基或雜芳基，L為溴或氯)使步驟(b)的化合物環(huán)化，前提是在環(huán)化前，其中R5a或R6a為氫的化合物與適宜的N-保護(hù)基反應(yīng)。
式43.2化合物的(+)-異構(gòu)體
可采用包括酶催化的酯基轉(zhuǎn)移的方法用高對映體選擇性(enantioselectivity)來制備。優(yōu)選使式43.3的外消旋化合物
與酶如Toyobo LIP-300和酰化劑如異丁酸三氟乙酯反應(yīng)；然后通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)從(-)-對映體的胺分離生成的(+)-對映體的酰胺，接著，例如通過與酸如硫酸一起回流水解所述(+)-酰胺，再通過本領(lǐng)域熟知的技術(shù)用DIBAL還原生成的化合物獲得相應(yīng)的旋光性式43.2的富集的(+)-異構(gòu)體。或者，首先使式43.3的外消旋化合物還原為相應(yīng)的式43.2的外消旋化合物，然后用如上所述的酶(Toyobo LIP-300)和?；瘎┨幚淼玫?+)-酰胺，該酰胺經(jīng)水解后得到旋光性的富集的(+)-異構(gòu)體。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將能理解，通過上述的酶方法可以制備具有其它的R1、R2、R3和R4取代基的式1.0化合物。
為制備其中W為亞胺酸酯的式1.0的化合物，可以使式45.0或46.0化合物在適宜的溫度(如約80℃)下、在適合的溶劑(如異丙醇)存在下與
反應(yīng)合適時(shí)間(如約24小時(shí))。
例如，可以使其中X為N的式46.0化合物在異丙醇中與
于80℃反應(yīng)24小時(shí)，產(chǎn)生其中R13為CN而R14為苯基的式1.0化合物。類似地，與
(M.Haake和B.Schummelfeder.Synthesis，第753-758頁，1991年9月)反應(yīng)可以產(chǎn)生其中R13為-SO2NH2而R14為苯基的式1.0化合物。
根據(jù)Zweifel等(Synthesis，第150頁(1980))公開的方法，通過使式45.0或式46.0化合物(例如，其中X為CH)與CNOC6H5在二異丙基乙胺中反應(yīng)，可以產(chǎn)生其中R13為H而R14為苯基的式1.0化合物。
在適合的溶劑(如二氯甲烷)中，通過使式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯)與強(qiáng)堿如氫化鈉反應(yīng)，可以制備其中W為-CN的式1.0化合物。例如，在二氯甲烷中，可以使式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯，R13為H,R14為苯基，X為CH)與氫化鈉反應(yīng)，產(chǎn)生其中W為-CN的式1.0化合物。
在適宜的溫度下(如約25℃)，在適當(dāng)?shù)娜軇?如異丙醇)中，通過使式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯)與濃氫氧化銨反應(yīng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間(如約24小時(shí))，可以產(chǎn)生其中W為亞胺酰胺基的式1.0化合物。例如，在異丙醇中，于25℃使式1.0的亞胺酸酯化合物(其中R13為-CN,R14為苯基和X為N)與濃氫氧化銨反應(yīng)24小時(shí)，可以產(chǎn)生相應(yīng)的亞胺酰胺基(其中R13為-CN,R10和R16均為H)。
在合適的溫度(如約87℃)下，在適當(dāng)?shù)膲毫θ萜髦校ㄟ^使式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯基團(tuán))與濃氫氧化銨、氯化銨和水反應(yīng)，也可以產(chǎn)生其中W為亞胺酰胺基的式1.0化合物的鹽酸鹽。例如，在約87℃，在適當(dāng)?shù)膲毫θ萜髦?，使?.0的亞胺酸酯(其中X為CH,R13為H,R14為苯基)與濃氫氧化銨、氯化銨和水反應(yīng)，可以產(chǎn)生相應(yīng)的亞胺酰胺基鹽酸鹽(其中R13為-CN,R10和R16均為H)。
在合適的溫度(如約70℃)下，在適當(dāng)?shù)娜軇?如THF)中，通過使式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯基團(tuán))與胺(如NHR10R16)反應(yīng)，可以產(chǎn)生其中W為亞胺酰胺基的式1.0的化合物。例如，在約70℃下、THF中，可以使式1.0化合物(其中X為CH,R13為H和R14為苯基)與
(3-氨基甲基吡啶)反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的胍(其中R13為H,R10為H和R16為3-甲基吡啶基)。
其中W為亞胺酰胺基的式1.0的化合物也可以通過使式1.0的亞胺酸酯與硫酰胺結(jié)合來制備。例如，可以使式1.0的亞胺酸酯(其中R13為-CN,R14為苯基，X為N)與硫酰胺結(jié)合產(chǎn)生相應(yīng)的胍(其中R17為-SO2NH2,R18和R19均為H)。
其中W為亞胺酰胺基的式1.0的化合物也可以通過使式1.0的氰化物(如X為N)與硫酰胺結(jié)合產(chǎn)生相應(yīng)的亞胺酰胺基(其中R13為-SO2NH2,R10和R16均為H)來制備。
在適宜的溫度(如0℃至約25℃)下，在含有適當(dāng)堿(如三乙胺)的適當(dāng)溶劑(如乙腈、苯或甲苯)中，通過使式1.0的亞胺酸酯(其中R13為H)與氨磺酰氯反應(yīng)，也可以制備式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯基團(tuán)和R13為N-甲基氨磺?；?。例如，可以使式1.0的亞胺酸酯(其中R13為H,R14為苯基和X為N)與N-甲基氨磺酰氯或二甲基氨磺酰氯反應(yīng)產(chǎn)生相應(yīng)的亞胺酸酯(其中R13分別為-SO2NHCH3或-SO2N(CH3)2，而R14為苯基)。
通過使式1.0的亞胺酸酯與羥胺鹽酸鹽和氫氧化鈉水溶液，或甲氧基胺和氫氧化鈉水溶液反應(yīng)產(chǎn)生亞胺酰胺基(其中R13為分別為-OH或-OCH3，而R10和R16均為H)也可以制備其中W為亞胺酰胺基的式1.0的化合物。例如，所用的式1.0的亞胺酸酯可以是其中X可為N,R13可為H及R14可為苯基的式1.0的亞胺酸酯。
在適宜的溫度(如約25℃)下，在適當(dāng)?shù)娜軇?如無水二氯甲烷)中，通過使式1.0的亞胺酸酯(其中R13為H)分別與三甲基硅烷基異氰酸酯或異氰酸甲酯反應(yīng)適當(dāng)?shù)臅r(shí)間(約48小時(shí))也可以制備式1.0化合物(其中W為亞胺酸酯基團(tuán)和R13為-C(O)NH2或-C(O)NHCH3)。例如，所用的式1.0的亞胺酸酯可以是其中X可為N,R13可為H及R14可為苯基的式1.0的亞胺酸酯。
其中W為亞胺酰胺基的式1.0的化合物也可以通過使式1.0的亞胺酸酯與脲結(jié)合產(chǎn)生亞胺酰胺基(其中R13為-C(O)NH2,R10和R16均為H)來制備。例如，所用的式1.0的亞胺酸酯可以是其中X可為N,R13可為H及R14可為苯基的式1.0的亞胺酸酯。
根據(jù)在加拿大專利1178289號(1984)中所述方法，通過使式45.0或46.0化合物與1-甲硫基-1-甲氨基-2-硝基乙烯，N(C2H5)3和CuCl反應(yīng)，可以制備其中W為1-氨基-2-硝基乙烯的式1.0的化合物。
于回流下，通過使下式的化合物
與甲基碘在甲醇中反應(yīng)，然后將生成的產(chǎn)物與硝基甲烷一起回流也可以制備其中W為-氨基-2-硝基乙烯的式1.0化合物(見Indian J.Chem.,15B,297(1977))。
通過使式45.0或46.0化合物與適宜的羧酸，HOOCR12及HOBT/DEC/DMF反應(yīng)可以制備其中W為-C(O)R12的式1.0的化合物。
用下面的實(shí)施例來示范說明本發(fā)明化合物，這些不應(yīng)構(gòu)成對本公開范圍的限制。制備實(shí)施例1
步驟A.
于-20℃，將10g(60.5mmol)4-吡啶基乙酸乙酯和120ml無水二氯甲烷乙酸乙酯混合，加入10.45g(60.5mmol)MCPBA，并于-20℃攪拌1小時(shí)，再于25℃攪拌67小時(shí)。再加入3.48g(20.2mmol)MCPBA，并于25℃攪拌24小時(shí)。用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉(水溶液)洗滌然后用水洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物，經(jīng)層析(硅膠，2％-5.5％(10％氫氧化銨在甲醇中)/二氯甲烷)得到8.12g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=182.15步驟B
將3.5g(19.3mmol)步驟A的產(chǎn)物、17.5ml乙醇和96.6ml 10％氫氧化鈉(水溶液)混合，于67℃將該混合物加熱2小時(shí)。加入2N鹽酸(水溶液)調(diào)至pH=2.37，真空濃縮為殘留物。加入200ml干燥乙醇，通過celite過濾，并用干燥乙醇(2×50ml)洗滌濾餅。真空濃縮合并的濾液得到2.43g目的化合物。制備實(shí)施例2
通過PCT國際公開號WO95/10516中所述方法制備目的化合物。制備實(shí)施例3
步驟A
將14.95g(39mmol)8-氯代-11-(1-乙氧基-羰基-4-哌啶基)-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶和150ml二氯甲烷混合，然后加入13.07g(42.9mmol)的(nBu)4NNO3，并將該混合物冷卻至0℃。用1.5小時(shí)緩慢加入(滴加)在20ml二氯甲烷中的6.09ml(42.9mmol)TFAA溶液。將該混合物保持于0℃過夜，然后用飽和碳酸氫鈉(水溶液)、水和鹽水連續(xù)洗滌。用硫酸鈉干燥有機(jī)溶液，真空濃縮為殘留物，并層析該殘留物(硅膠，EtOAc/己烷梯度)分別得到4.32g和1.90g的兩種產(chǎn)物化合物3A(ⅰ)和3A(ⅱ)。
3A(ⅰ)化合物質(zhì)譜MH+=428.2；
3A(ⅱ)化合物質(zhì)譜MH+=428.3；步驟B
將得自步驟A的22.0g(51.4mmol)產(chǎn)物3A(ⅰ)、150ml 85％乙醇(水溶液)、25.85g(0.463mol)鐵粉和2.42g(21.8mmol)氯化鈣混合，于回流下加熱過夜。加入12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣并于回流下加熱2小時(shí)。再加入12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣，并于回流下再加熱2小時(shí)。通過celite過濾熱的混合物，用50ml熱乙醇洗滌celite，真空濃縮為殘留物。加入100ml無水乙醇，濃縮為殘留物并層析該殘留物(硅膠，甲醇/己烷梯度)得到16.47g的產(chǎn)物化合物。
步驟C
將16.47g(41.4mmol)得自步驟B的產(chǎn)物和150ml 48％HBr(水溶液)混合并冷卻至-3℃。緩慢加入(滴加)18ml溴，然后緩慢加入(滴加)在85ml水中的8.55g(0.124mol)亞硝酸鈉。于-3℃至0℃攪拌45分鐘，然后通過加入50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)至pH=10。用乙酸乙酯提取，用鹽水洗滌提取物并用硫酸鈉干燥提取物。濃縮為殘留物并層析該殘留物(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度)分別得到10.6g和3.28g的化合物3C(ⅰ)和3C(ⅱ)兩種產(chǎn)物。
3C(ⅰ)化合物質(zhì)譜MH+=461.2；3C(ⅱ)化合物質(zhì)譜MH+=539；步驟D
通過溶解于濃鹽酸中使步驟C的產(chǎn)物3C(ⅰ)水解，加熱至約100℃16小時(shí)。冷卻該混合物，用1M氫氧化鈉(水溶液)中和。用二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物，過濾和真空濃縮至目的化合物。
質(zhì)譜MH+=466.9.
步驟E
將使得自步驟D的1.160g(2.98mmol)目的化合物溶解于20mlDMF中，于室溫下攪拌，加入0.3914g(3.87mmol)4-甲基-嗎啉、0.7418g(3.87mmol)、DEC0.5229g(3.87mmol)HOBT及0.8795g(3.87mmol)1-N-t-丁氧基羰基-哌啶基-4-乙酸。于室溫下將該混合物攪拌2天，然后真空濃縮為殘留物并使殘留物在二氯甲烷和水中分配。用飽和碳酸氫鈉(水溶液)、10％磷酸二氫鈉和鹽水連續(xù)洗滌有機(jī)相。經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾并真空濃縮為殘留物。層析該殘留物(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+氨)得到1.72g產(chǎn)物。m.p.=94.0-94.5℃，質(zhì)譜MH+=616.3，元素分析計(jì)算值-C,60.54；H,6.06；N,6.83實(shí)測值-C,59.93；H,6.62；N,7.45。
步驟F
將得自步驟E的1.67g(2.7mmol產(chǎn)物和20ml二氯甲烷混合，于0℃攪拌，加入20mlTFA，攪拌該混合物2小時(shí)，然后用1N氫氧化鈉(水溶液)堿化該混合物。用二氯甲烷提取，經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾并真空濃縮得到1.16g產(chǎn)物。m.p.=140.2-140.8℃，質(zhì)譜MH+=516.2。制備實(shí)施例4
步驟A
于-5℃，將25.86g(55.9mmol)4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯和250ml濃硫酸混合，然后加入4.8g(56.4mmol)的硝酸鈉并攪拌2小時(shí)。將該混合物傾入600g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化。過濾該混合物，用300ml水洗滌，然后用500ml二氯甲烷提取。用200ml水洗滌提取物，用硫酸鎂干燥，然后過濾并真空濃縮為殘留物。使該殘留物層析(硅膠，10％EtOAc/二氯甲烷)分別得到24.4g(產(chǎn)率86％)的產(chǎn)物。m.p.=165-167℃，質(zhì)譜MH+=506(CI)，元素分析計(jì)算值-C,52.13；H,4.17；N,8.29實(shí)測值-C,52.18；H,4.51；N,8.16。
步驟B
于20℃，將20g(40.5mmol)步驟A的產(chǎn)物和200ml濃硫酸混合，然后冷卻該混合物至0℃。將7.12g(24.89mmol)的1,3-二溴代-5,5-二甲基-乙丙酰脲加入該混合物中，并于20℃攪拌3小時(shí)。冷卻至0℃，再加入1.0g(3.5mmol)二溴代乙丙酰脲并于20℃攪拌2小時(shí)。將該混合物傾入400g冰中，于0℃用濃氫氧化銨(水溶液)堿化，過濾收集生成的固體。用300ml水洗滌該固體，在200ml丙酮中制成淤漿，過濾提供19.79g(產(chǎn)率85.6％)的產(chǎn)物。m.p.=236-237℃，質(zhì)譜MH+=5 84(CI)，元素分析計(jì)算值-C,45.11；H,3.44；N,7.17實(shí)測值-C,44.95；H,3.57；N,7.16。
步驟C
于50℃，將25g(447mmol)鐵屑、10g(90mmol)氯化鈣和在700ml90:10 EtOH/水中的步驟B的20g(34.19mmol)產(chǎn)物混合。于回流下加熱該混合物過夜，通過celite過濾混合物，用2×200ml熱乙醇洗滌濾餅?；旌蠟V液和洗滌液，真空濃縮為殘留物。用600ml二氯甲烷萃取殘留物，用300ml水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾并真空濃縮為殘留物，然后層析(硅膠，30％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到11.4g(產(chǎn)率60％)的產(chǎn)物。m.p.=211-212℃，質(zhì)譜MH+=554(CI)，元素分析計(jì)算值-C,47.55；H,3.99；N,7.56實(shí)測值-C,47.45；H,4.31；N,7.49。
步驟D
于-10℃，將20g(35.9mmol)步驟C的產(chǎn)物緩慢加入(分次)在120ml濃鹽酸(水溶液)中的8g(116mmol)亞硝酸鈉溶液中。于0℃攪拌生成的混合物2小時(shí)，然后于0℃用1小時(shí)緩慢加入(滴加)150ml(1.44mol)50％H3PO2。于0℃攪拌3小時(shí)，然后傾入600g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化。用2×300ml二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物，然后過濾并真空濃縮為殘留物。將該殘留物層析(硅膠，25％EtOAc/己烷)得到13.67g(產(chǎn)率70％)的產(chǎn)物。m.p.=163-165℃，質(zhì)譜MH+=539(CI)，元素分析計(jì)算值-C,48.97；H,4.05；N,5.22實(shí)測值-C,48.86；H,3.91；N,5.18。
步驟E
將6.8g(12.59mmol)步驟D的產(chǎn)物和100ml濃鹽酸(水溶液)混合，于85℃攪拌過夜。冷卻該混合物，將其傾入300g冰中，用濃氫氧化銨(水溶液)堿化，用2×300ml二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物。過濾，真空濃縮為殘留物。然后層析(硅膠，10％甲醇/乙酸乙酯+2％氫氧化銨(水溶液))得到5.4g(產(chǎn)率92％)的目的化合物。m.p.=172-174℃，質(zhì)譜MH+=467(FAB)，元素分析計(jì)算值-C,48.69；H,3.65；N,5.97實(shí)測值-C,48.83；H,3.80；N,5.97。
步驟F按照與以下制備實(shí)施例5步驟C基本相同的方法，使上面步驟E的目的化合物與1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)產(chǎn)生下式化合物
步驟G
按照與以下制備實(shí)施例5步驟D基本相同的方法，使得自上面步驟F的目的化合物去保護(hù)，產(chǎn)生制備實(shí)施例4的目的化合物。制備實(shí)施例5
步驟A
通過與制備實(shí)施例3步驟D所述基本相同的方法，使2.42g 4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯水解，得到1.39g(產(chǎn)率69％)的產(chǎn)物。
步驟B
將1g(2.48mmol)步驟A的產(chǎn)物和25ml干燥甲苯混合，加入在甲苯中的2.5ml的1M DIBAL，并在回流下加熱該混合物。半小時(shí)后，再加入在甲苯中的2.5ml的1M DIBAL，并在回流下加熱1小時(shí)(通過TLC監(jiān)測反應(yīng)，用50％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨(水溶液)展開)。冷卻該混合物至室溫，加入50ml 1N鹽酸(水溶液)并攪拌5分鐘。加入100ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后用乙酸乙酯(3×150ml)提取。用硫酸鎂干燥提取物，過濾并真空濃縮得到1.1g的目的化合物。
步驟C
將0.501g(1.28mmol)的步驟B的化合物和20ml干燥DMF混合，然后加入0.405g(1.664mmol)1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸、0.319g(1.664mmol)DEC、0.225g(1.664mmol)HOBT和0.168g(1.664mmol)4-甲基嗎啉，于室溫下攪拌該混合物過夜。真空濃縮該混合物至殘留物，然后使殘留物在150ml二氯甲烷和150ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)中分配。用另外的150ml二氯甲烷提取水相。用硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物。將殘留物層析(硅膠，500ml己烷，1L1％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨(水溶液)，然后1L2％甲醇/二氯甲烷+0.1％氫氧化銨(水溶液))得到0.575g的產(chǎn)物。m.p.=115℃-125℃，質(zhì)譜MH+=616。
步驟D
將0.555g(0.9mmol)步驟C的產(chǎn)物和15ml二氯甲烷混合，冷卻該化合物至0℃。加入15ml TFA，并于0℃攪拌2小時(shí)。于40-45℃真空濃縮為殘留物，然后使殘留物在150ml二氯甲烷和100ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)中分配。用100ml二氯甲烷提取水層，合并提取物，用硫酸鎂干燥，真空濃縮得到0.47g的所述產(chǎn)物。m.p.=140℃-150℃，質(zhì)譜MH+=516。
制備實(shí)施例6 步驟A
將16.6g(0.03mol)制備實(shí)施例4步驟D的產(chǎn)物與乙腈和水的3∶1溶液(212.65ml乙腈和70.8ml水)混合，于室溫下攪拌生成的淤漿過夜。加入32.833g(0.153mol)NaIO4，然后加入0.31g(2.30mmol)RuO2，并于室溫下攪拌得到1.39g(產(chǎn)率69％)的所述產(chǎn)物(RuO的加入伴隨放熱反應(yīng)，溫度由20℃升至30℃)。攪拌該混合物1.3小時(shí)(約30分鐘后溫度回復(fù)至25℃)，然后過濾除去固體，用二氯甲烷洗滌該固體。真空濃縮濾液至殘留物，將該殘留物溶于二氯甲烷中。過濾除去不溶固體，用二氯甲烷洗滌該固體。用水洗滌濾液，濃縮至約200ml體積，用漂白劑(bleach)然后用水洗滌。用6N鹽酸(水溶液)提取。冷卻含水提取液至0℃，緩慢加入50％氫氧化鈉(水溶液)以調(diào)節(jié)pH=4，同時(shí)保持溫度＜30℃。用二氯甲烷提取，經(jīng)硫酸鎂干燥并真空濃縮為殘留物。使殘留物在20ml乙醇中形成淤漿并冷卻至0℃。過濾收集生成的固體，真空干燥該固體得到7.95g產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.7(s,1H),7.85(m,6H),7.5(d,2H),3.45(m,2H),3.15(m,2H).
步驟B
將21.58g(53.75mmol)步驟A的產(chǎn)物和500ml乙醇和甲苯的1∶1無水混合物混合，加入1.43g(37.8mmol)硼氫化鈉，于回流下加熱該混合物10分鐘。冷卻該混合物至0℃，加入100ml水，然后用1M鹽酸(水溶液)調(diào)節(jié)pH≈4-5，同時(shí)保持該溫度＜10℃。加入250ml乙酸乙酯并分離各層。用鹽水(3×50ml)洗滌有機(jī)層，然后用硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物(24.01g)，使殘留物經(jīng)層析(硅膠，30％己烷/二氯甲烷)得到所述產(chǎn)物。通過再層析純化不純的部分。共獲得18.57g所述產(chǎn)物。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):8.5(s,1H),7.9(s,1H),7.5(雙重雙峰，2H),6.2(s,1H),6.1(s,1H),3.5(m,1H),3.4(m,1H),3.2(m,2H).
步驟C
將18.57g(46.02mmol)步驟B的產(chǎn)物和500ml三氯甲烷混合，然后加入6.70ml(91.2mmol)SOCl2，于室溫下攪拌該混合物4小時(shí)。用5分鐘加入在800ml THF中的35.6g(0.413mol)哌嗪，于室溫下攪拌該混合物1小時(shí)。于回流下加熱該混合物過夜，然后冷卻至室溫，用1L二氯甲烷稀釋該混合物。用水(5×200ml)洗滌。用三氯甲烷(3×100ml)提取水洗滌液。合并所有的有機(jī)溶液，用鹽水(3×200ml)洗滌，用硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，5％、7.5％、10％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨梯度)得到18.49g目的化合物，為外消旋混合物。
步驟D-對映體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，流速100ml/分，20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分離步驟C的外消旋目的化合物，得到9.14g(+)-異構(gòu)體和9.30g(-)-異構(gòu)體。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=74.5℃-77.5℃；質(zhì)譜MH+=471.9；[α]25D=+97.4℃(8.48mg/2ml甲醇)；(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=82.9℃-84.5℃；質(zhì)譜MH+=471.8；[α]25D=-97.4°(8.32mg/2ml甲醇)。
步驟E
使3.21g(6.80mmol)步驟D的(-)-異構(gòu)體產(chǎn)物和150ml無水DMF混合。加入2.15g(8.8mmol)1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸、1.69g(8.8mmol)的DEC、1.19g(8.8mmol)HOBT和0.97ml(8.8mmol)N-甲基嗎啉，于室溫下攪拌該混合物過夜。真空濃縮除去DMF，并加入50ml飽和碳酸氫鈉(水溶液)。用二氯甲烷(2×250ml)提取，用50ml鹽水洗滌提取物并經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷+10％氫氧化銨)得到4.75g產(chǎn)物。m.p.=75.7℃-78.5℃；質(zhì)譜MH+=697；[α]25D=-5.5°(6.6mg/2ml甲醇)。
步驟F
使4.70g(6.74mmol)步驟E的產(chǎn)物和30ml甲醇混合，然后用1小時(shí)以每份10ml分次加入50ml 10％硫酸/二氧六環(huán)。將該混合物傾入50ml水中，加入15ml 50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)至pH≈10-11。過濾除去生成的固體，用二氯甲烷(2×250ml)提取濾液。真空濃縮水層除去甲醇，并再用250ml二氯甲烷提取。經(jīng)硫酸鎂干燥合并的提取物，真空濃縮得到產(chǎn)物。m.p.=128.1℃-131.5℃；質(zhì)譜MH+=597；[α]25D=-6.02°(9.3mg/2ml甲醇)。
制備實(shí)施例7
步驟A
于-5℃，使15g(38.5mmol)4-(8-氯代-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-甲酸乙酯和150ml濃硫酸混合，然后加入3.89g(38.5mmol)硝酸鉀并攪拌4小時(shí)。將該混合物傾入3L冰中，用50％氫氧化鈉(水溶液)堿化。用二氯甲烷提取，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后過濾并真空濃縮為殘留物。從丙酮中重結(jié)晶殘留物得到6.69g產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.5(s,1H),7.75(s,1H),7.6(s,1H),7.35(s,1H),4.15(q,2H),3.8(m,2H),3.5-3.1(m,4H),3.0-2.8(m,2H),2.6-2.2(m,4H),1.25(t,3H)。
步驟B
使6.69g(13.1mmol)步驟A的產(chǎn)物和100ml 85％乙醇/水混合，然后加入0.66g(5.9mmol)氯化鈣和6.56g(117.9mmol)鐵，于回流下加熱該混合物過夜。通過celite過濾熱的反應(yīng)混合物，用熱的乙醇沖洗濾餅。真空濃縮濾液得到7.72g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=478.0。
步驟C
使7.70g步驟B的產(chǎn)物和35ml乙酸混合，然后加入45ml溴在乙酸中的溶液，于室溫下攪拌該混合物過夜。加入300ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入75ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用乙酸乙酯提取。用硫酸鎂干燥提取物，真空濃縮為殘留物。層析殘留物(硅膠，20％-30％乙酸乙酯/己烷)得到3.47g產(chǎn)物(同時(shí)還有1.28g部分純化的產(chǎn)物)。質(zhì)譜MH+=555.9。1H NMR(CDCl3,300MHz):8.5(s,1H),7.5(s,1H),7.15(s,1H),4.5(s,2H),4.15(m,3H),3.8(brs,2H),3.4-3.1(m,4H),9-2.75(m,1H),2.7-2.5(m,2H),2.4-2.2(m,2H),1.25(m,3H)。
步驟D
使0.557g(5.4mmol)亞硝酸叔-丁酯和3ml DMF混合，于60℃-70℃加熱該混合物。緩慢加入(滴加)2.00g(3.6mmol)步驟C的產(chǎn)物和4mlDMF的混合物，然后冷卻該混合物至室溫。于40℃加入另外0.64ml亞硝酸叔-丁酯，于60℃-70℃再加熱該混合物0.5小時(shí)。冷卻至室溫，將該混合物傾入150ml水中。用二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥提取物并真空濃縮為殘留物。層析殘留物(硅膠，10％-20％乙酸乙酯/己烷)得到0.74g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=541.0。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.52(s,1H),7.5(d,2H),7.2(s,1H),4.15(q,2H),3.9-3.7(m,2H),3.5-3.1(m,4H),3.0-2.5(m,2H),2.4-2.2(m,2H),2.1-1.9(m,2H),1.26(t,3H)。
步驟E
使0.70g(1.4mmol)步驟D的產(chǎn)物和8ml濃鹽酸(水溶液)混合，于回流下加熱該混合物過夜。加入30ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入5ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥提取物，真空濃縮得到0.59g目的化合物。質(zhì)譜MH+=468.7；m.p.=123.9℃-124.2℃。
步驟F
采用與制備實(shí)施例5步驟C所述基本相同的方法，使得自步驟E的6.0g(12.8mmol)目的化合物與3.78g(16.6mmol)1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，得到8.52g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=694.0(FAB)。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.5(d,1H),7.5(d,2H),7.2(d,1H),4.15-3.9(m,3H),3.8-3.6(m,1H),3.5-3.15(m,3H),2.9(d,2H),2.8-2.5(m,4H),2.4-1.8(m,6H),1.8-1.6(brd,2H),1.4(s,9H),1.25-1.0(m,2H)。
步驟G
使8.50g步驟F的產(chǎn)物和60ml二氯甲烷混合，然后冷卻至0℃，加入55ml TFA。于0℃攪拌該混合物3小時(shí)，然后加入500ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，接著加入30ml 50％氫氧化鈉(水溶液)。用二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥，真空濃縮得到7.86g產(chǎn)物。質(zhì)譜M+=593.9(FAB)。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.51(d,1H),7.52(雙重雙峰，2H),7.20(d,1H),4.1-3.95(m,2H),3.8-3.65(m,2H),3.5-3.05(m,5H),3.0-2.5(m,6H),2.45-1.6(m,6H),1.4-1.1(m,2H)。
制備實(shí)施例8 步驟A
制備8.1g得自制備實(shí)施例7步驟E的目的化合物的甲苯溶液，加入在甲苯中的17.3ml的1M DIBAL溶液。在回流下加熱該混合物并用40分鐘緩慢加入(滴加)另外21ml 1M DIBAL/甲苯溶液。使反應(yīng)混合物冷卻至約0℃，加入700ml 1M鹽酸(水溶液)。分離并棄去有機(jī)相。用二氯甲烷洗滌水相，棄去提取物，然后通過加入50％氫氧化鈉(水溶液)堿化水相。用二氯甲烷提取，用硫酸鎂干燥，真空濃縮得到7.30g目的化合物，為對映體的外消旋混合物。
步驟B-對映體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，20％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分離步驟A的外消旋目的化合物，得到目的化合物的(+)-異構(gòu)體和(-)-異構(gòu)體。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=148.8℃；質(zhì)譜MH+=469；[α]25D=+65.6℃(12.93mg/2ml甲醇)；(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)m.p.=112℃；質(zhì)譜MH+=469；[α]25D=-65.2°(3.65mg/2ml甲醇)。
步驟C
采用與制備實(shí)施例5步驟C所述基本相同的方法，使得自制備實(shí)施例8步驟B的1.33g目的化合物的(+)-異構(gòu)體與1.37g 1-N-叔-丁氧基羰基哌啶基-4-乙酸反應(yīng)，得到2.78g產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=694.0(FAB)；[α]25D=+34.1℃(5.45mg/2ml甲醇)。
步驟D
通過與制備實(shí)施例5步驟D所述基本相同的方法處理2.78g步驟C的產(chǎn)物，得到1.72g產(chǎn)物。m.p.=104.1℃；質(zhì)譜MH+=594；[α]25D=+53.4℃(11.42mg/2ml甲醇)。
制備實(shí)施例9 步驟A
使40.0g(0.124mol)的原料酮與200ml硫酸混合，冷卻至0℃。用1.5小時(shí)緩慢加入13.78g(0.136mol)硝酸鉀，然后溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。采用與制備實(shí)施例4步驟A所述基本相同的方法處理該反應(yīng)物。層析(硅膠，20％、30％、40％、50％乙酸乙酯/己烷，然后100％乙酸乙酯)得到28g 9-硝基產(chǎn)物，伴有少量7-硝基產(chǎn)物，以及19g 7-硝基化合物和9-硝基化合物的混合物。
步驟B
采用與制備實(shí)施例4步驟C所述基本相同的方法，使步驟A的28g(76.2mmol)9-硝基化合物、400ml 85％乙醇/水、3.8g(34.3mmol)氯化鈣和38.28g(0.685mol)鐵反應(yīng)，得到24g產(chǎn)物。
步驟C
使13g(38.5mmol)步驟B的產(chǎn)物和140ml乙酸混合，用20分鐘緩慢加入2.95ml(57.8mmol)溴的10ml乙酸溶液。于室溫下攪拌反應(yīng)物，然后真空濃縮為殘留物。加入二氯甲烷和水，然后用50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)至pH=8.9。用水洗滌有機(jī)相，然后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮得到11.3g產(chǎn)物。
步驟D
冷卻100ml濃鹽酸(水溶液)至0℃，然后加入5.61g(81.4mmol)亞硝酸鈉并攪拌10分鐘。緩慢(分次)加入11.3g(27.1mmol)步驟C的產(chǎn)物，并于0℃-3℃攪拌該混合物2.25小時(shí)。緩慢加入(滴加)180ml50％H3PO2(水溶液)，使該混合物于0℃放置過夜。用30分鐘緩慢加入(滴加)150ml 50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)至pH=9，然后用二氯甲烷提取。用水洗滌提取物，然后用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，2％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到8.6g產(chǎn)物。
步驟E
使8.6g(21.4mmol)步驟D的產(chǎn)物與300ml甲醇混合并冷卻至0℃-2℃。加入1.21g(32.1mmol)硼氫化鈉，于約0℃攪拌1小時(shí)。再加入0.121g(3.21mmol)硼氫化鈉，于0℃攪拌2小時(shí)。然后于0℃放置過夜。真空濃縮為殘留物，然后使殘留物在二氯甲烷和水之間分配。分離有機(jī)相，真空(50℃)濃縮得到8.2g產(chǎn)物。
步驟F
使8.2g(20.3mmol)步驟E的產(chǎn)物與160ml二氯甲烷混合，冷卻至0℃，然后用30分鐘緩慢加入(滴加)14.8ml(203mmol)SOCl2。將混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?.5小時(shí)，然后真空濃縮為殘留物，加入二氯甲烷，用1N氫氧化鈉(水溶液)洗滌，然后用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物，接著加入無水THF和8.7g(101mmol)哌嗪，于室溫?cái)嚢柽^夜。真空濃縮為殘留物，加入二氯甲烷，用0.25N氫氧化鈉(水溶液)、水、然后用鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥，真空濃縮得到9.46g粗品產(chǎn)物。層析(硅膠，5％甲醇/二氯甲烷+氨)得到3.59g目的化合物，為外消旋體。1H NMR(CDCl3,200MHz):8.43(d,1H),7.55(d,1H),7.45(d,1H),7.11(d,1H),5.31(s,1H),4.86-4.65(m,1H),3.57-3.40(m,1H),2.98-2.55(m,6H),2.45-2.20(m,5H)。
步驟G-對映體的分離
根據(jù)制備實(shí)施例6步驟D所述，層析得自步驟F的外消旋目的化合物(5.7g)，用30％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫得到2.88g R-(+)-異構(gòu)體和2.77g S-(-)-異構(gòu)體的目的化合物。
R-(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=470.0；[α]25D=+12.1°(10.9mg/2ml甲醇)；S-(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=470.0；[α]25D=-13.2°(11.51mg/2ml甲醇)。
步驟H采用與制備實(shí)施例5步驟C和D所述基本相同的方法，由步驟F的外消旋化合物獲得制備實(shí)施例9的外消旋目的化合物。類似地，用得自步驟G的(-)-或(+)-異構(gòu)體，可以分別獲得制備實(shí)施例9的目的化合物的(-)-或(+)-異構(gòu)體。
制備實(shí)施例10 步驟A
于20℃將得自制備實(shí)施例4步驟E的13g(33.3mmol)目的化合物與300ml甲苯混合，加入32.5ml(32.5mmol)1M的DIBAL的甲苯溶液。于回流下加熱該混合物1小時(shí)，冷卻至20℃。再加入32.5ml 1MDIBAL溶液并于回流下加熱1小時(shí)。將該混合物冷卻至20℃并將其傾入400g冰、500ml乙酸乙酯和300ml 10％氫氧化鈉(水溶液)的混合物中。用二氯甲烷(3×200ml)提取水層，硫酸鎂干燥有機(jī)層，然后真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，12％甲醇/二氯甲烷+4％氫氧化銨)得到10.4g目的化合物，為外消旋體。質(zhì)譜MH+=469(FAB)。部分1HNMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.06(d,1H),3.95(d,1H).
步驟B-異構(gòu)體的分離
通過制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，5％異丙醇/己烷+0.2％二乙胺)分離步驟A的外消旋目的化合物，得到目的化合物的(+)-異構(gòu)體和(-)-異構(gòu)體。
(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=469(FAB)；[α]25D=+43.5°(c=0.402，乙醇)；部分1HNMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.05(d,1H),3.95(d,1H).
(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)質(zhì)譜MH+=469(FAB)[α]25D=-41.8°(C=0.328乙醇)；部分1H NMR(CDCl3,400MHz):8.38(s,1H),7.57(s,1H),7.27(d,1H),7.05(d,1H),3.95(d,1H).
步驟C按照制備實(shí)施例9步驟H的方法，可以獲得制備實(shí)施例10的目的化合物的(+)-或(-)-異構(gòu)體。
制備實(shí)施例11 化合物
可以根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)中制備實(shí)施例40的方法，接著按照WO95/10516中制備實(shí)施例193的方法制備。
按照與制備實(shí)施例6步驟D基本相同的方法可以分離(+)-或(-)-異構(gòu)體。
R-(+)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3):155.8(C),146.4(CH),140.5(CH),140.2(C),136.2(C)135.3(C),133.4(C),132.0(CH),129.9(CH),125.6(CH),119.3(C),79.1(CH),52.3(CH2),52.3(CH),45.6(CH2),45.6(CH2),30.0(CH2),29.8(CH2)。[α]25D=+25.8°(8.46mg/2ml甲醇)。
S-(-)-異構(gòu)體的理化數(shù)據(jù)13C NMR(CDCl3):155.9(C),146.4(CH),140.5(CH),140.2(C),136.2(C)135.3(C),133.3(C),132.0(CH),129.9(CH),125.5(CH),119.2(C),79.1(CH),52.5(CH2),52.5(CH),45.7(CH2),45.7(CH2),30.0(CH2),29.8(CH2)。[α]25D=-27.9°(8.90mg/2ml甲醇)。
按照與制備實(shí)施例5步驟C和D所述基本相同的方法，可由相應(yīng)的外消旋化合物，即下式化合物的(+)-異構(gòu)體或(-)-異構(gòu)體獲得制備實(shí)施例11的外消旋化合物，目的化合物的(+)-異構(gòu)體或(-)-異構(gòu)體。
制備實(shí)施例12
將得自WO95/10516中實(shí)施例193的14.73g(27.3mmol)化合物與125ml無水甲醇混合，加入(分次)300ml 10％濃硫酸的二氧六環(huán)溶液。于25℃攪拌該混合物2小時(shí)，然后傾入水中并用50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)至pH=13。用二氯甲烷提取，用水洗滌提取物，用硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，經(jīng)層析(硅膠，10％(10％氫氧化銨在甲醇中)/二氯甲烷中)得到8.9g目的化合物。質(zhì)譜MH+=539實(shí)施例14-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氰基-1-哌啶-碳亞胺酸(哌啶碳亞胺酸)苯酯
將1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙?；鵠-哌嗪(式47.0)(如制備實(shí)施例11所述制備)(2.5g)(1當(dāng)量)和二苯基氰基碳亞胺酸酯(carbonimidate)(1.38g)(1.2當(dāng)量)溶于2-丙醇(65ml)，于80℃回流和氮?dú)庀录訜嵩撊芤?4小時(shí)。蒸發(fā)該混合物至干燥，產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱(60×2.5cm)層析，用純乙酸乙酯作為洗脫劑得到目的化合物(2.7921g；87％),FABMS:m/z661(MH+)。
實(shí)施例24-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氰基-1-哌啶甲亞胺酰胺(carboximidamide)
將4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氰基-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(2.62g)(式2.0，如以上實(shí)施例1所述制備)溶于2-丙醇(50ml)中。加入濃氫氧化銨(4ml)。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)該混合物至干燥，用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱(60×2.5cm)層析，用4％(10％濃縮氫氧化銨在甲醇中)-二氯甲烷作為洗脫劑得到目的化合物(式3.0)(1.967g；85％)。FABMS:m/z584.2(MH+)。
實(shí)施例34-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙?；鵠-哌嗪(6g,1當(dāng)量)(式47.0得自以上制備實(shí)施例11)溶于無水二氯甲烷(71.1ml)。加入氰酸苯酯(2.2752ml)(2當(dāng)量)和二異丙基乙胺(100滴)，于25℃攪拌該混合物15分鐘。將反應(yīng)混合物直接引入硅膠柱(15×5cm)，用10％增至20％(10％濃氫氧化銨在甲醇中)-二氯甲烷洗脫得到目的化合物(6.66g；92％),FABMS:m/z635.9(MH+)。
實(shí)施例41-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[4-(1-氰基-4-哌啶基)乙酰基]-哌嗪
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(0.3g)(1當(dāng)量)(式4.0，如以上實(shí)施例3所述制備)溶于無水THF(11.2ml)中。加入60％的氫化鈉(0.0753g)(4當(dāng)量)在油中的懸浮液，于25℃攪拌該混合物2小時(shí)。用二氯甲烷稀釋該混合物，用1.0N氫氧化鈉洗滌。用硫酸鎂干燥二氯甲烷層，過濾并蒸發(fā)至干燥。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱(30×2.5cm)層析，用1.5％(10％濃縮氫氧化銨在甲醇中)-二氯甲烷作為洗脫劑，得到目的化合物(式5.0)(0.1824g；71％)。FABMS:m/z542.2(MH+)。
實(shí)施例54-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氨磺?；?1-哌啶碳亞胺酸苯酯方法1
如果按照方法1則可獲得式6.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙酰基]哌嗪(1當(dāng)量)(制備實(shí)施例11的式47.0)和二苯基氨磺?；紒啺匪狨?1.2當(dāng)量)[如M.Haake和B.Schummelfeder.Synthesis,753-758,(1991)中所述制備]溶于2-丙醇，如以上實(shí)施例1所述加熱該混合物得到目的化合物(式6.0)。
方法2
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(0.05g)(1當(dāng)量)(式4.0，如以上實(shí)施例3所述制備)溶于無水二氯甲烷(2ml)中。加入三乙胺(0.0328ml)(3當(dāng)量)。加入氨磺酰氯(0.0091g)(1當(dāng)量)[如RAppel和G.Berger在Chem.Ber.,91,1339-1341(1958)中所述制備]，并于25℃、氬氣下攪拌該混合物18小時(shí)。加入另外的氨磺酰氯(0.0091g)(1當(dāng)量)并繼續(xù)攪拌共90小時(shí)。用二氯甲烷稀釋該混合物，用1.0N氫氧化鈉提取。用硫酸鎂干燥二氯甲烷層，過濾并蒸發(fā)至干燥。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱(15×1cm)層析，用2％增至4％(10％濃縮氫氧化銨在甲醇中)-二氯甲烷作為洗脫劑，得到目的化合物(式6.0)(0.0054g；10％)。FABMS:m/z715.4(MH+)。δH(CDCl3)7.03(2H,m,ArH),7.09-7.18(4H,m,ArH),7.37(1H,m,ArH),7.39(1H,m,ArH),7.59(1H,s,ArH)和8.37(1H,s,ArH)。
實(shí)施例64-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氨磺?；?1-哌啶-甲亞胺酰胺
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-氨磺酰基-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式6.0)(如以上實(shí)施例5所述制備)(0.089g,0.1mmol)溶于無水THF(1ml)中。加入在無水THF(4ml)中的氨飽和溶液，于25℃在密封的反應(yīng)器中攪拌該混合物19小時(shí)。蒸發(fā)該混合物至干燥，經(jīng)硅膠層析，用2％-6％在二氯甲烷中的甲醇作為洗脫劑得到目的化合物(式7.0)(0.0667g；84％)。ESIMS:m/z638.0(MH+)。
實(shí)施例74-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N-甲基氨磺?；?-1-哌啶碳亞胺酸苯酯方法1
如果按照方法1則可獲得式8.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(1當(dāng)量)(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)溶于惰性無水溶劑如乙腈、苯或甲苯中，加入三乙胺(2當(dāng)量)。使該溶液冷卻至0℃，加入N-甲基氨磺酰氯(1.2當(dāng)量)[如J.A.Kloek和K.L.Leschinsky在J.Org.Chem.,41(25)，4028-4029(1976)中所述制備]。將該混合物于0℃-25℃攪拌3小時(shí)并經(jīng)處理后得到目的化合物(式8.0)。
方法2
如果按照方法2則可獲得式8.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙?；鵠哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，根據(jù)實(shí)施例11所述制備)和二苯基甲基氨磺?；紒啺匪狨?1.2當(dāng)量)[如A.Buschauer,Arch.Pharm.,377-378,(1987)中所述的相同方法制備，但僅使用甲基氨磺酰氯]溶于2-丙醇中，如以上實(shí)施例1所述加熱該混合物得到目的化合物。
實(shí)施例84-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N-甲基氨磺酰基)-1-哌啶甲亞胺酰胺
如果按照該方法則可獲得式9.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N-甲基氨磺酰基)-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式8.0，如以上實(shí)施例7所述制備)溶于2-丙醇中，并加入濃氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)至干燥。用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式9.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例94-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N,N-二甲基氨磺酰基)-1-哌啶碳亞胺酸苯酯方法1
如果按照方法1則可獲得式10.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(1當(dāng)量)(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)溶于惰性無水溶劑如乙腈、苯或甲苯中，加入三乙胺(2當(dāng)量)。使該溶液冷卻至0℃，加入N,N-二甲基氨磺酰氯(1.2當(dāng)量)。將該混合物于0℃-25℃攪拌3小時(shí)，并經(jīng)處理后得到目的化合物。
方法2
如果按照方法2則可獲得式10.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙?；鵠哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，根據(jù)制備實(shí)施例11所述制備)和二苯基二甲基氨磺?；紒啺匪狨?1.2當(dāng)量)[如A.Buschauer,Arch.Pharm.,377-378,(1987)中所述的相同方法制備，但僅使用二甲基氨磺酰氯]溶于2-丙醇中，如以上實(shí)施例1所述加熱該混合物得到目的化合物(式10.0)。
實(shí)施例104-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N,N-二甲基氨磺?；?-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
如果按照該方法則可獲得式11.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N,N-二甲基氨磺?；?-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式10.0)(如以上實(shí)施例9所述制備)溶于2-丙醇中，加入氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)至干燥。用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式11.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例114-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-羥基-1-哌啶碳亞胺酸苯酯方法1
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)(0.15g,0.26mmol)溶于甲醇(0.75ml)中，加入羥胺水溶液[通過使羥胺鹽酸鹽(0.0164g,0.26mmol)溶于50％(w/v)氫氧化鈉(0.0188g,0.26mmol)中來制備]和水(0.258ml)，于25℃攪拌該混合物3小時(shí)。再加入甲醇(1.2ml)并于25℃攪拌共26小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干燥，殘留物經(jīng)硅膠層析，用2％-4％-5％-10％-25％-35％甲醇(在二氯甲烷中)作為洗脫劑，得到目的化合物(式12.0)(0.0323g；24％)，與下面方法2制備的相同。
方法2
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[4-(1-氰基-4-哌啶基)乙?；鵠哌嗪(式5.0)(根據(jù)以上實(shí)施例4所述制備)(0.4g,0.737mmol)溶于甲醇(2ml)中。加入羥基胺水溶液[通過使羥基胺鹽酸鹽(0.0512g,0.737mmol)溶于50％(w/v)氫氧化鈉(0.0592g,0.737mmol)中來制備]和水(0.8ml)，于25℃攪拌該混合物3小時(shí)。加入另外的甲醇(3.2ml)并于25℃攪拌該混合物共18小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干燥，殘留物經(jīng)硅膠層析，用在二氯甲烷中的5％甲醇作為洗脫劑得到目的化合物(式12.0)(0.2965g；70％)。FABMS:m/z575.0(MH+)。
實(shí)施例124-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-甲氧基-1-哌啶碳亞胺酸酯
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)(0.1g,0.157mmol)和甲氧基胺鹽酸鹽(0.0154g，0.157mmol)溶于無水吡啶(1ml)中。于25℃攪拌該混合物2小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干燥。產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析，用在二氯甲烷中的2％-4％-10％甲醇作為洗脫劑得到目的化合物(式13.0)(0.0741g；80％)。FABMS:m/z589.1(MH+)。
實(shí)施例13N-[[(氨基羰基)氨基]羰基]-4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)(0.35g,0.549mmol)溶于無水二氯甲烷(7ml)中。加入三甲基硅烷基異氰酸酯(1.484ml,10.98mmol)。于25℃攪拌該混合物21小時(shí)。用二氯甲烷稀釋該混合物，用飽和氫氧化鈉水溶液、水洗滌，用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥。殘留物經(jīng)硅膠層析，用在二氯甲烷中的2％-3％甲醇作為洗脫劑得到目的化合物(式16.1)(0.1302g；33％)。FABMS:m/z721.9(MH+)。
實(shí)施例14N-[[(氨基羰基)氨基]羰基]-4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶甲亞酰胺
使N-[[(氨基羰基)氨基]羰基]-4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸酯(式16.1)(0.2943g,0.462mmol)溶于在無水THF(80ml)中的氨飽和溶液中，于25℃，在密閉容器中攪拌該混合物19小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干燥，殘留物經(jīng)硅膠層析，用3％(10％濃氫氧化銨在甲醇中)-二氯甲烷作為洗脫劑得到目的化合物(式17.1)(0.2663g,40％)。ESIMS:m/z645.2(MH+)。
實(shí)施例154-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-甲酰氨基-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
如果按照方法1，則可以得到式16.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙酰基]哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，根據(jù)制備實(shí)施例11所述制備)和二苯基甲酰氨基碳亞胺酸酯(1.2當(dāng)量)[如M.Haake和B.Schummelfeder,Synthesis.,753-758,(1991)中所述，用脲代替硫酰胺來制備]溶于2-丙醇中，于80℃、回流及氮?dú)庀录訜嵩撊芤?4小時(shí)。蒸發(fā)該混合物至干燥，經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式16.0)。
實(shí)施例164-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-甲酰氨基]-2-氧代乙基]-N-甲酰氨基-1-哌啶甲亞胺酰胺
如果按照方法1則可獲得式17.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-甲酰氨基-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式16.0)(如以上實(shí)施例15所述制備)溶于2-丙醇中，加入濃氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)至干燥。用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式17.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例174-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N’-甲基甲酰氨基)-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
如果按照該方法則可獲得式18.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(1當(dāng)量)(式4.0)(如以上實(shí)施例3所述制備)溶于無水二氯甲烷中。加入異氰酸甲酯(2當(dāng)量)。于25℃攪拌該混合物48小時(shí)。將該混合物與碳酸氫鈉水溶液一起振搖并用二氯甲烷提取。用硫酸鎂干燥后者，過濾并蒸發(fā)至干燥，經(jīng)硅膠層析后得到目的化合物(式18.0)。
實(shí)施例184-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-1 1-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N’-甲基甲酰氨基)-1-哌啶甲亞胺酰胺
如果按照該方法則可獲得式19.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(N’-甲基甲酰氨基)-1-哌啶碳亞胺酸苯酯(式18.0，如以上實(shí)施例17所述制備)溶于2-丙醇中，加入濃氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)至干燥。用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式19.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例19N-[4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-N’-甲基-2-硝基-1-乙烯胺
如果按照該方法則可獲得式20.0化合物。
使氯化銅(I)(1當(dāng)量)溶于無水乙腈中。在攪拌下，用10分鐘向該溶液滴加1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基]乙?；鵠-哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，如以上實(shí)施例11所述制備)、1-甲硫基-1-甲基-氨基-2-硝基乙烯(1當(dāng)量)(如加拿大專利第1178289號(1984)中所述方法制備)和三乙胺在無水乙腈中的溶液。濾除固體，減小體積，加入二氯甲烷。用碳酸氫鈉水溶液洗滌該混合物，用硫酸鎂干燥二氯甲烷層，過濾并蒸發(fā)至干燥。殘留物經(jīng)硅膠層析得到目的化合物(式20.0)。
實(shí)施例20N-[4-[2-[4-(8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-N’-甲基2-硝基-1-乙烯胺
如果按照該方法則可獲得式21.0化合物。
步驟AN-[4-[2-[4-(8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-N’-甲基-甲硫基-碳亞胺酸酯
使4-[2-[4-(8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-甲基-1-哌啶羰基硫代酰胺(1當(dāng)量)(式A-38)溶于甲醇中，用15分鐘加入甲基碘(1.2當(dāng)量)。然后回流下加熱該混合物2小時(shí)。蒸發(fā)該溶液至干燥，使殘留物溶于水中，用50％氫氧化鈉堿化，然后用氯化鈉飽和。用二氯甲烷提取該混合物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干燥得到目的化合物(式B-38)。
通過使以上制備實(shí)施例12的化合物與CH3NCS反應(yīng)制備式A-38化合物。該反應(yīng)于25℃、通氬氣及攪拌下在無水二氯甲烷中進(jìn)行，直至反應(yīng)完成。用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用飽和碳酸氫鈉(水溶液)，然后用水洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，5％(10％氫氧化銨在甲醇中)/二氯甲烷)得到式A-38化合物。
步驟BN-[4-[2-[4-(8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-1-哌啶基]-N’-甲基-2-硝基-1-乙烯胺
將得自以上步驟A的粗品產(chǎn)物(式B-38)與過量的硝基甲烷一起回流16小時(shí)，然后蒸發(fā)至干燥得到目的化合物(式21.0)。
實(shí)施例214-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(甲磺?；?-1-哌啶碳亞胺酸苯酯
如果按照該方法則可獲得式22.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙?；鵠哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，根據(jù)以上制備實(shí)施例11所述制備)和二苯基甲磺?；紒啺匪狨?1.2當(dāng)量)[如A.Buschauer,Arch.Pharm.,377-378(1987)所述制備]溶于2-丙醇中，如以上實(shí)施例1所述加熱該化合物得到目的化合物(式22.0)。
實(shí)施例224-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(甲磺?；?-1-哌啶甲亞胺酰胺
如果按照該方法則可獲得式23.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(甲磺酰基)-1-哌啶碳亞胺酸酯(式22.0，根據(jù)以上實(shí)施例21所述制備)溶于2-丙醇中，加入濃氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)該混合物至干燥，用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式23.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例234-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-苯甲?；?1-哌啶碳亞胺酸苯酯
如果按照該方法則可獲得式24.0化合物。
使1-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-4-[(4-哌啶基)乙酰基]哌嗪(1當(dāng)量)(式47.0，根據(jù)以上實(shí)施例11所述制備)和二苯基甲基苯甲?；紒啺匪狨?1.2當(dāng)量)[如A.Buschauer,Arch.Pharm.,377-378(1987)所述制備]溶于2-丙醇中，如以上實(shí)施例1所述加熱該化合物得到目的化合物(式24.0)。
實(shí)施例244-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-苯甲?；?1-哌啶甲亞胺酰胺
如果按照該方法則可獲得式25.0化合物。
使4-[2-[4-(3-溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5,6]芳庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-1-哌嗪基]-2-氧代乙基]-N-(苯甲酰基)-1-哌啶碳亞胺酸酯(式24.0，根據(jù)以上實(shí)施例23所述制備)溶于2-丙醇中，加入濃氫氧化銨。于25℃攪拌該混合物24小時(shí)，然后蒸發(fā)該混合物至干燥。用乙醚(2×250ml)研磨殘留物，棄去乙醚。剩余的產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析得到目的化合物(式25.0)。
或者，在上述反應(yīng)中，也可使用在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缂状蓟騎HF中的無水氨代替氫氧化銨。
實(shí)施例25
在室溫、二異丙基乙胺(2滴)存在下，使下式化合物
(式B-10，得自以上制備實(shí)施例10步驟D的(+)異構(gòu)體)(0.15g)二氯甲烷(1.5ml)溶液與氰酸苯酯
(Zweifel,Synthesis150(1980))(0.048ml)反應(yīng)1小時(shí)。然后用硅膠(30ml)快速層析該反應(yīng)混合物，用10％甲醇-二氯甲烷洗脫，隨后蒸發(fā)得到式27.0化合物，為無色粉末(0.15g)。MS(FAB):m/e713(MH+)實(shí)施例26
于室溫，氮?dú)庀拢瑢⑹?7.0化合物(實(shí)施例25)(0.06g)的二氯甲烷(2.0ml)溶液與60％氫化鈉(0.016g)一起攪拌2小時(shí)。然后用冰水處理反應(yīng)混合物，并用二氯甲烷(5×5ml)提取；干燥合并的提取物，蒸發(fā)，反應(yīng)粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠(20ml)層析。用5％甲醇-二氯甲烷洗脫，隨后蒸發(fā)得到式29.0，為無色粉末(0.042g)。MS(FAB):m/e619(MH+)實(shí)施例27
按照以上實(shí)施例25的方法，在二異丙基乙胺存在下，使胺
(式B-13，外消旋的，見制備實(shí)施例10)(0.09g)與氰酸苯酯(0.04ml)反應(yīng)，得到式26.0化合物(0.078g)，為白色粉末。MS(FAB):m/e713(MH+)實(shí)施例28
于90℃，將式26.0化合物(實(shí)施例27)(0.24g)和氯化銨(0.24g)的四氫呋喃(2.0ml)和氫氧化銨(2.0ml)的溶液在加壓管中加熱1.5小時(shí)。然后使反應(yīng)化合物在冰中冷卻，用水稀釋，用二氯甲烷(3×10ml)提取。蒸發(fā)合并的提取物，粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠(20ml)層析，用10％甲醇-3％氨-二氯甲烷洗脫，蒸發(fā)后得到目的化合物(式30.0)，為白色固體(0.115g)。MS(FAB):m/e636(MH+)實(shí)施例29
用3-氨基甲基吡啶(0.14ml)的水(0.5ml)溶液(含有在二氧六環(huán)(0.09ml)中的4M鹽酸)處理式26.0化合物(實(shí)施例27)(0.25g)的四氫呋喃(3.0ml)溶液。于70℃加熱反應(yīng)混合物3.5小時(shí)，冷卻至室溫，用冰水稀釋，用氫氧化鈉水溶液將該混合物的pH調(diào)至10，用二氯甲烷(2×15ml)提取。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠(10ml)層析，用10％甲醇-3％氨-二氯甲烷洗脫得到目的化合物(式31.0)，為無色粉末(0.28g)。MS(FAB):m/e727(MH+)實(shí)施例30
按照上述實(shí)施例26中制備式29.0化合物的方法，使胺26.0(實(shí)施例27)(0.2g)與60％氫化鈉(0.022g)反應(yīng)，得到目的化合物(式28.0)，為白色粉末(0.087g)。MS(FAB):m/e619(MH+)實(shí)施例31
將式B-10化合物
(+-異構(gòu)體，見以上實(shí)施例25)(100mg,1eq)、HOBT(25mg,1.1eq)、DEC(35mg,1.1eq)、DMF(5ml)和羧酸
(23mg,1.1eq)加入燒瓶中并于25℃攪拌18小時(shí)。當(dāng)TLC顯示反應(yīng)完成時(shí)，加入水，攪拌生成的混合物約5分鐘。過濾該混合物并用水洗滌沉淀。用二氯甲烷稀釋生成的固體，用1N氫氧化鈉(水溶液)洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾并真空除去溶劑。得到式35.0化合物，為白色固體(52mg)。
實(shí)施例32
按照實(shí)施例31的方法，但是用
作為羧酸(21mg,1.1eq)，得到式36.0化合物，為白色固體(86mg)。實(shí)施例33
按照實(shí)施例31的方法，但是用
作為羧酸(23mg,1.1eq)，得到式37.0化合物，為白色固體(84.4mg)。實(shí)施例34
按照實(shí)施例31的方法，但是用
作為羧酸(30mg,1.1eq)，得到式38.0化合物，為灰白色固體(0.105g)。
實(shí)施例35
將實(shí)施例8步驟D的(+)產(chǎn)物(0.139g,0.233mmol)溶于1.3ml DMF中，并于室溫下攪拌，加入55.2mg(0.288mmol)DEC,41.5mg(0.307mmol)HOBT和42.2mg(0.324mmol)的
和80μl(0.73mmol)N-甲基嗎啉。于室溫下攪拌該混合物1小時(shí)。將該混合物加入10ml水中，過濾生成的沉淀并用水洗滌。于40℃10mmHg下干燥18小時(shí)，得到123mg產(chǎn)物(m.p.=170.3-177.2℃，以每分鐘上升2-3℃加熱)。
實(shí)施例36-53按照實(shí)施例35的方法，但是用下表1所示的酸代替實(shí)施例35中所用的酸，得到式1.7化合物。
其中W在表1中定義。形成的化合物式號于W取代基下面的括號中給出。
表1
表1-續(xù)
表1-續(xù)
表1-續(xù)
實(shí)施例54
使1.0當(dāng)量實(shí)施例32的產(chǎn)物溶于無水DMF中，加入2.0當(dāng)量的氫化鈉(60％在礦物油中)。攪拌半小時(shí)，加入1.5當(dāng)量乙基碘，攪拌18小時(shí)，用1N鹽酸調(diào)節(jié)至pH7.0。真空濃縮并在水和二氯甲烷中分配。硫酸鎂干燥有機(jī)層，真空濃縮。經(jīng)硅膠層析殘留物，用甲醇-二氯甲烷(用氨飽和)(5-95)洗脫得到白色固體的產(chǎn)物，mp=112.6℃。
實(shí)施例55
按照實(shí)施例54(40.0-B)的方法，但是用芐基溴代替乙基碘，得到為白色固體的產(chǎn)物，mp=108℃。
實(shí)施例56
按照實(shí)施例54的方法，但是用溴代乙烯胺代替乙基碘，得到為白色固體的產(chǎn)物，mp=138.3℃。
實(shí)施例57
按照實(shí)施例54的方法，但是用甲磺酰氯代替乙基碘，得到為白色固體的產(chǎn)物，mp=136.3℃。
實(shí)施例58
按照實(shí)施例54的方法，但是用溴代乙酸叔丁酯代替乙基碘，得到為黃色固體的產(chǎn)物，mp=120-127℃。
實(shí)施例59
使實(shí)施例58的產(chǎn)物溶于二氯甲烷中，加入三氟乙酸，攪拌1小時(shí)。真空濃縮。經(jīng)制備性硅膠TLC層析殘留物，用甲醇-二氯甲烷(10-90)展開，得到粉紅色固體產(chǎn)物，mp=198℃。
實(shí)施例60
使1.0當(dāng)量制備實(shí)施例8步驟D的(+)產(chǎn)物溶于含有1.0當(dāng)量的2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基異硫代氰酸酯的二氯甲烷中。攪拌6天，然后用1N鹽酸洗滌，接著用1N氫氧化鈉洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)層，真空濃縮。經(jīng)硅膠層析殘留物，用氨飽和的甲醇-二氯甲烷(2-98)洗脫，，得到白色固體產(chǎn)物，mp=156.7-157.9℃。
實(shí)施例61
使制備實(shí)施例8步驟D的1.0當(dāng)量(+)產(chǎn)物溶于含有2.5當(dāng)量的無水碳酸鈉和2.2當(dāng)量的4-氯代吡啶鹽酸鹽的DMF中，于100℃加熱5天。冷卻至25℃，加入水并過濾沉淀。使該沉淀溶于二氯甲烷中，用1N鹽酸洗滌，接著用1N氫氧化鈉洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)層，真空濃縮。經(jīng)硅膠層析殘留物，得到白色固體的產(chǎn)物，mp=128.6℃。
實(shí)施例62
使制備實(shí)施例46的471.4mg(0.617mmol)產(chǎn)物溶于2ml的6M鹽酸中，于室溫下攪拌該溶液過夜。將反應(yīng)混合物加入20ml水中，過濾生成的沉淀并用0.1M鹽酸洗滌。經(jīng)快速層析(C-18反相硅膠，50％甲醇/水-90％甲醇/水梯度洗脫)。使生成的物質(zhì)溶于甲醇并加入到水中，經(jīng)過濾和干燥后得到目的化合物，為白色固體(334.7mg,mp=147.1-154.3℃，以2℃-3℃速率/分鐘加熱)。
實(shí)施例63
使制備實(shí)施例62的產(chǎn)物(63.8mg,0.0884mmol)產(chǎn)物溶于二氯甲烷中，加入三氯乙酰基異氰酸酯(12μl)。24小時(shí)后，再加入三氯乙?；惽杷狨?12μl)。24小時(shí)后，通過制備性TLC(5％乙醇/二氯甲烷)純化反應(yīng)混合物。使分離的物質(zhì)溶于二氯甲烷中，加入己烷中，蒸發(fā)生成的懸浮液，得到目的化合物，為白色固體(51.6mg,mp=165.4-178.5℃，以2℃-3℃速率/分鐘加熱)。
實(shí)施例64
使制備實(shí)施例62的產(chǎn)物(151.4mg,0.2097mmol)產(chǎn)物溶于二氯甲烷中，加入三氯乙?；惽杷狨?40μl)。15分鐘后，再加入三氯乙?；惽杷狨?6μl)。再過15分鐘后，加入甲醇，蒸發(fā)該混合物至干燥。使殘留物懸浮于甲醇/THF中，加入碳酸鉀(無水，15.9mg,0.115mmol)。3小時(shí)后，通過快速層析(5％乙醇/二氯甲烷)純化反應(yīng)混合物。使生成的物質(zhì)溶于甲醇中，加入水中，經(jīng)過濾和干燥后得到目的化合物，為白色固體(mp=165.4-178.5℃，以2℃-3℃/分鐘速率加熱)。
測試根據(jù)WO95/10516(1995年4月20日公開)所述的測試方法測定FPTIC50(法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制，體外酶測試)、GGPTIC50(香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制，體外酶測試)和COS細(xì)胞IC50(細(xì)胞-基測試)。根據(jù)WO95/10516所述的測試方法可以測定細(xì)胞墊測試和抗腫瘤活性(體內(nèi)抗腫瘤研究)。WO95/10516的公開內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
按照與上述基本相同的方法可以進(jìn)行其它一些測試，但是用另外的指示劑腫瘤細(xì)胞系代替T24-BAG細(xì)胞。這些測試可以用表達(dá)激活的K-ras基因的DLD-1-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞或表述激活的K-ras基因的SW620-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞進(jìn)行。用本領(lǐng)域已知的其它腫瘤細(xì)胞系也可以證實(shí)本發(fā)明化合物抑制其它類型癌細(xì)胞的活性。
軟瓊脂測定
無貼壁依賴性生長是致瘤細(xì)胞系的特征。將人腫瘤細(xì)胞懸浮于含有0.3％瓊脂糖和指定濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基中。將溶液涂在用含有相同濃度的法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑作為上層的0.6％瓊脂糖固化的生長培養(yǎng)基上。待上層固化后，將培養(yǎng)板于37℃、5％二氧化碳下孵育10-16天使集落生長。孵育后，用MTT(3-[4,5-二甲基-噻唑-2-基]-2,5-二苯基溴化四唑鎓，噻唑蘭)(1mg/ml的PBS溶液)涂于所述瓊脂上進(jìn)行集落染色。對這些集落進(jìn)行計(jì)數(shù)并計(jì)算IC50。
化合物2.0,3.0,4.0,5.0,7.0,12.0,13.0,16.1,17.1,27.0,29.0,26.0,28.0,30.0,31.0,4.0-B,5.0-B,15.0-B,25.0-B,27.0-B,28.0-B,29.0-B,31.0-B,36.0-B,40.0-B,41.0-B,42.0-B,43.0-B,45.0-B,46.0-B,47.0-B,48.0-B,61.0-B,62.0-B,66.0-B,73.0-B,78.0-B,80.0-B,83.0-B,84.0-B,91.0-B,93.0-B,94.0-B,98.0-B和100.0-B的FPTIC50(H-ras)在0.8-＞300nM(納摩爾)范圍內(nèi)。
化合物27.0,28.0,31.0,4.0-B,5.0-B和98.0-B的FPTIC50(K-ras)在16-782nM范圍內(nèi)。
化合物27.0,28.0,29.0,30.0和31.0的Cos細(xì)胞IC50在12-＞1000nM范圍內(nèi)。
式31.0(實(shí)施例29)化合物的GGPTIC50為＞7.5μM和式28.0(實(shí)施例30的GGPTIC50為＞9.6μM。
化合物27.0,4.0-B,5.0-B,15.0-B,25.0-B,27.0-B,28.0-B,29.0-B,31.0-B,36.0-B,40.0-B,41.0-B,42.0-B,43.0-B,45.0-B,46.0-B,47.0-B,48.0-B,62.0-B,66.0-B,73.0-B,78.0-B,83.0-B,84.0-B,91.0-B,93.0-B,94.0-B,98.0-B和100.0-B的Cos細(xì)胞IC50在7-＞1000nM范圍內(nèi)。
化合物27.0,5.0-B,15.0-B,25.0-B,27.0-B,28.0-B,29.0-B,31.0-B,36.0-B,40.0-B,41.0-B,42.0-B,43.0-B,45.0-B,46.0-B,47.0-B,48.0-B,62.0-B,66.0-B,73.0-B,78.0-B,80.0-B,83.0-B,84.0-B,91.0-B,93.0-B,94.0-B,98.0-B和100.0-B的軟瓊脂IC50在90-＞500nM范圍內(nèi)。
在由本發(fā)明所述的化合物制備藥用組合物時(shí)，惰性的藥學(xué)上可接受的載體可以為固體或液體。固體制劑包括粉劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑含有約5-約70％的活性組分。適當(dāng)?shù)墓腆w載體是本領(lǐng)域已知的，如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖。片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑為適合口服給藥的固體劑型。
制備栓劑時(shí)，首先將低熔點(diǎn)的蠟如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物融化，通過攪拌將活性組分均勻分散其中。然后將融化的均勻混合物傾至適當(dāng)大小的模中，使其冷卻而固化。
液體制劑包括溶液、懸浮液和乳液。適合胃腸外注射的實(shí)例為水或水-丙二醇溶液。
液體制劑也可以包括供鼻內(nèi)給藥的溶液。
適合吸入的氣溶膠制劑可包括溶液和粉末形式的固體，它們可以與藥學(xué)上可接受的載體例如惰性壓縮氣體混合。
也包括在使用前即刻將其轉(zhuǎn)化為供口服或胃腸外給藥的液體形式制劑的固體形式制劑。此類液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳液。
也可以將本發(fā)明的化合物透皮給藥。透皮組合物可以為霜?jiǎng)?、洗劑、氣溶膠和/或乳劑，包括在本領(lǐng)域內(nèi)為此目的而常用的基質(zhì)或藥庫型的透皮貼劑。
優(yōu)選該化合物口服給藥。
優(yōu)選該藥用制劑為單位劑型。為此類劑型時(shí)，該制劑可以分為含有適當(dāng)量(如達(dá)到所需目的的有效量)的活性組分的單位劑量。
制劑的單位劑型中活性化合物的量可以根據(jù)具體的使用情況在約0.1mg-1000mg、更優(yōu)選在約1mg-300mg之間變化或調(diào)整。
根據(jù)病人的需要和治療的疾病的嚴(yán)重程度可以改變使用的實(shí)際劑量。確定特殊情況下的合適劑量應(yīng)在本領(lǐng)域技術(shù)人員的專業(yè)范圍內(nèi)。一般而言，治療用比該化合物的最佳劑量稍小的劑量開始。此后，逐漸增加劑量至在特定情況下達(dá)到最佳效果。為方便起見，根據(jù)需要可以將每日總劑量分開，并在全天中分次給藥。
在考慮了各種因素如病人的年齡、身體狀況和大小(size)以及治療的癥狀的嚴(yán)重程度后，根據(jù)醫(yī)師的判斷調(diào)整本發(fā)明的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的用量和給藥次數(shù)。口服給藥的一般推薦劑量方案為每天10mg-2000mg、優(yōu)選每天10-1000mg，每天分2-4次給藥以阻斷腫瘤生長。當(dāng)在該劑量范圍內(nèi)給藥時(shí)，所述化合物是無毒性的。
下列為含有本發(fā)明化合物的藥用劑型的實(shí)施例。本發(fā)明的藥用組合物方面的范圍不受所提供的實(shí)施例的限制。
藥物劑型實(shí)施例實(shí)施例A-片劑
生產(chǎn)方法將序號1和2的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。將與序號3成分的混合物制粒。如果需要可通過粗篩(如1/4”,0.63cm)磨碎濕顆粒。干燥該濕顆粒。如果需要，過篩干燥的顆粒并使其與序號4的成分混合10-15分鐘。加入序號5的成分并混合1-3分鐘。在合適的壓片機(jī)上將該混合物壓片成適當(dāng)?shù)拇笮『椭亓俊?br> 實(shí)施例B-膠囊
生產(chǎn)方法將序號1、2和3的成分在適合的混合器中混合10-15分鐘。加入序號4的成分并混合1-3分鐘。在合適的包囊機(jī)上將該混合物填入兩半-的硬明膠膠囊中。
盡管結(jié)合以上提出的具體實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但是它的許多選擇方案、修改和變化對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說應(yīng)是顯而易見的。所有這些選擇方案、修改和變化都將認(rèn)為是在本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．下式的化合物
或藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物，其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9為O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n是1-3，而其余的a、b、c和d基團(tuán)代表CR1或CR2；或a、b、c和d各自獨(dú)立選自CR1或CR2；每個(gè)R1或每個(gè)R2獨(dú)立選自H、鹵代、-CF3、-OR10、-COR10、-SR10、-S(O)tR11(其中t是0、1或2)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、
-SR11C(O)OR11、-SR11N(R75)2，其中每個(gè)R75獨(dú)立選自H和-C(O)OR11、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫代或取代的四唑-5-基硫代、鏈炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵代、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4是相同的或不同的，且各自獨(dú)立代表H、任何R1和R2的取代基或者R3和R4一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和或不飽和C5-C7環(huán)；R5、R6、R7和R8各自獨(dú)立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基和芳基任選被下列基團(tuán)取代-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、-OPO3R10或R5和R6結(jié)合代表=O或=S和/或R7與R8結(jié)合代表=O或=S；R10代表H、烷基、芳基或芳烷基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，其中C可以含有任選連接于碳原子11的雙鍵(由虛線表示)；碳原子5和6之間的虛線代表可選的雙鍵，如此當(dāng)存在雙鍵時(shí)，A和B獨(dú)立代表-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間無雙鍵存在時(shí)，A和B各自獨(dú)立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、=O、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p是2,3或4；及W選自(1)氰基；(2)-OC(O)R12，其中R12選自(a)雜芳基；(b)H；(c)烷基；或(d)下式的取代基
或
其中R28選自-OC(O)R29、-OH、-OC(O)NHC(O)CCl3或-OC(O)NH2,其中R29為烷基；(3)下式表示的亞胺酸酯(imidate)
其中R13選自(a)H,(b)CN,(c)-SO2-烷基，(d)-C(O)-芳基，(e)-SO2NR10R15,(f)-C(O)NR10R15,(g)-OR10和(h)-C(O)NR10C(O)NR10R15；R14為芳基；R10和R15獨(dú)立選自H、烷基、芳基和芳烷基；(4)由下式表示的亞胺酰胺基(imidamido)
其中R13選自(a)H,(b)CN,(c)-SO2-烷基，(d)-C(O)-芳基，(e)-SO2NR10R15,(f)-C(O)NR10R15,(g)-OR10和(h)-C(O)NR10C(O)NR10R15；R16選自烷基、芳烷基、芳基、環(huán)烷基、雜芳基、雜芳烷基和雜環(huán)烷基；R10和R15如上所定義；及R10和R16獨(dú)立選自上面定義的基團(tuán)；(5)下式的1-氨基-2-硝基乙烯衍生物
其中R10如上所定義；及(6)下式的取代基
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R2是H；R1選自溴和氯；R3選自溴和氯；R4選自H、溴和氯；R5、R6、R7和R8為H；A和B各自為H2且C5和C6之間不存在任選的鍵。
3．權(quán)利要求1或2中任一項(xiàng)的化合物，其中W選自(1)-CN；(2)-C(O)R12，其中R12選自H、烷基、
和
(3)亞胺酸酯，其中R13選自(a)CN；(b)H；(c)-SO2NR10R15，其中R10和R15選自H和烷基；(d)-C(O)NR10R15，其中R10和R15選自H和烷基；(e)-SO2-烷基；和(f)-C(O)-芳基；(4)亞胺酰胺基，其中R13選自(a)CN；(b)H；(c)-OR14；(d)-NR10R15，其中R10和R15獨(dú)立選自H和烷基；(e)-SO2NR10R15，其中R10和R15獨(dú)立選自H和烷基；(f)-C(O)NR10R15，其中R10和R15獨(dú)立選自H和烷基；(g)-SO2-烷基；(h)-C(O)-芳基；(5)1-氨基-2-硝基乙烯衍生物，其中R10為烷基。
4．權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中所述亞胺酸酯基團(tuán)的R14為苯基；所述亞胺酰胺基的R10和R16選自H和雜芳烷基。
5．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R4為H。
6．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中R4選自氯或溴。
7．權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的化合物，其中X是CH。
8．權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中X是N。
9．權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為溴而R3為氯。
10．權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的化合物選自
其中R1、R3和R4各自獨(dú)立選自鹵代而A、B、X和W如權(quán)利要求1所定義。
11．權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的化合物，其中R1為溴；R3為氯和R4為溴。
12．權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中W選自(1)-C(O)R12，其中R12選自H、-CH3、
(2)亞胺酸酯，其中R13選自(a)CN；(b)C(O)NH2；(c)H；(d)-SO2NH2；(e)-SO2NHCH3；(f)-SO2N(CH3)2；(g)-C(O)NHCH3；(h)-SO2NH3和(i)-C(O)C6H5；(3)亞胺酰胺基，其中R13選自(a)CN；(b)H；(c)-OCH3；(d)-OH；(e)-NH2；(f)-N(CH3)2；(g)-SO2NH2；(h)-SO2NHCH3；(i)-SO2N(CH3)2；(j)-C(O)NH2；(k)-C(O)NHCH3；(1)-SO2CH3和(m)-C(O)C6H5；及(4)1-氨基-2-硝基乙烯衍生物，其中R10為-CH3。
13．權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的化合物，其中所述亞胺酸酯基團(tuán)的R14為苯基；所述亞胺酰胺基的R10和R16獨(dú)立選自H和
14．具有下式結(jié)構(gòu)的權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物
15．權(quán)利要求1的化合物選自
或
16．治療腫瘤細(xì)胞的方法，它包括給予有效量的權(quán)利要求1-15中的任何一項(xiàng)的化合物。
17．權(quán)利要求16的方法，其中所述被治療的細(xì)胞為胰腫瘤細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞、甲狀腺濾泡腫瘤細(xì)胞、脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞、表皮癌腫瘤細(xì)胞、膀胱癌腫瘤細(xì)胞、結(jié)腸腫瘤細(xì)胞、乳腺腫瘤細(xì)胞或前列腺腫瘤細(xì)胞。
18．抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，它包括給予有效量的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物。
19．包括有效量的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物與藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
20．權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物在治療腫瘤細(xì)胞中的用途。
21．權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物在治療腫瘤細(xì)胞的藥物生產(chǎn)中的用途。
22．權(quán)利要求1-1 5中任一項(xiàng)的化合物在抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶中的用途。
23．權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的化合物在抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的藥物生產(chǎn)中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開新的式(1.0)三環(huán)化合物。式(1.0)化合物由式(1.4)或(1.5)化合物表示,其中:R
文檔編號A61P35/00GK1237164SQ97199597
公開日1999年12月1日 申請日期1997年9月11日 優(yōu)先權(quán)日1996年9月13日
發(fā)明者A·G·塔韋拉斯, A·K·馬拉姆斯, A·阿福索, S·W·雷米斯?jié)删S斯基, F·G·喬羅格, R·J·多爾, T·拉曼里, C·阿爾瓦雷斯 申請人:先靈公司