專利名稱:肉桂酰胺抗腫瘤作用的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及的肉桂酰胺是一個(gè)低毒性的抗惡性腫瘤有效化合物,可望用于臨床治療腫瘤的轉(zhuǎn)移。
惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康和生命。目前臨床應(yīng)用的化療藥物毒性較大,對(duì)實(shí)體瘤效果較差,接受化療的病人絕大部分最終都死于轉(zhuǎn)移。因此,尋找低毒性而能抑制腫瘤生長(zhǎng),轉(zhuǎn)移的藥物是腫瘤化療藥物研究的重要任務(wù)。本發(fā)明涉及的已知結(jié)構(gòu)化合物肉桂酰胺,其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)毒性很小,具有抑制血管生成,抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移作用。
本發(fā)明目的是將肉桂酰胺用于腫瘤化療,取得更好療效。本發(fā)明內(nèi)容和要點(diǎn)是1)利用藍(lán)四唑法,檢測(cè)肉桂酰胺對(duì)體外培養(yǎng)的人正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用。將藥物與細(xì)胞共培養(yǎng)72小時(shí),加入藍(lán)四唑試劑,反應(yīng)4小時(shí),除去培養(yǎng)液加入二甲基亞砜以溶解甲臜顆粒,然后在540nm處測(cè)量吸光度以判斷藥物活性。結(jié)果表明,它對(duì)人胚肺2BS細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)為4.3mM,而對(duì)腫瘤細(xì)胞(人肝癌BEL-7402細(xì)胞,人口腔上皮癌KB細(xì)胞,人纖維肉瘤HT-1080細(xì)胞)的IC50為1-2mM(表1),顯示出一定的選擇性。運(yùn)用雞胚尿囊膜法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肉桂酰胺在劑量為60μg/只時(shí)可抑制雞胚血管的生長(zhǎng)。
表1肉桂酰胺對(duì)人正常和腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用
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2)發(fā)現(xiàn)該化合物能抑制小鼠移植性腫瘤的生長(zhǎng)。在小鼠皮下接種肝癌22,腸癌26和Lewis肺癌,腹腔或口服給藥,按腫瘤重量或體積計(jì)算,在三種移植瘤模型上肉桂酰胺均能有效抑制腫瘤的生長(zhǎng)(表2、3、4)。
表2肉桂酰胺對(duì)小鼠肝癌22生長(zhǎng)的抑制作用
*P<0.05,與對(duì)照組相比注皮下接種24小時(shí)后開始給藥,每組動(dòng)物10只,未出現(xiàn)死亡。
表3肉桂酰胺對(duì)小鼠腸癌26生長(zhǎng)的抑制作用
*P<0.01,與對(duì)照組相比注皮下接種24小時(shí)后開始給藥,每組動(dòng)物8只,未出現(xiàn)死亡。
表4肉桂酰胺對(duì)小鼠Lewis肺癌生長(zhǎng)的抑制作用
*P<0.01,與對(duì)照組相比注皮下接種24小時(shí)后開始給藥,每組動(dòng)物8只,未出現(xiàn)死亡。
3)發(fā)現(xiàn)該化合物能抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。在小鼠Lewis肺癌自發(fā)性轉(zhuǎn)移模型上腹腔注射給予肉桂酰胺,結(jié)果降低了出現(xiàn)肺轉(zhuǎn)移的小鼠數(shù)(轉(zhuǎn)移率),同時(shí)肺轉(zhuǎn)移的數(shù)目也明顯降低(表5)。
表5肉桂酰胺對(duì)小鼠Lewis肺癌肺轉(zhuǎn)移的抑制作用
*P<0.05,與對(duì)照組相比注皮下接種24小時(shí)后開始給藥,每組動(dòng)物8只,未出現(xiàn)死亡。
4)通過腹腔注射給藥,觀察昆明小鼠十四天內(nèi)動(dòng)物死亡情況以衡量其毒性,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,該化合物毒性很低,其急性毒性的半數(shù)致死量為503mg/kg。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是開拓了肉桂酰胺抗腫瘤作用的新用途,該化合物毒性低,它能抑制腫瘤原發(fā)瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,顯示該化合物有開發(fā)應(yīng)用前景。
權(quán)利要求
1 肉桂酰胺抗腫瘤作用的新用途,其特征是體外實(shí)驗(yàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖具有抑制作用,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)毒性低,可抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。
2 按權(quán)利要求1所述的肉桂酰胺抗腫瘤作用的新用途,其特征是體外實(shí)驗(yàn)采用藍(lán)四唑法,將藥物與腫瘤細(xì)胞共同培養(yǎng),加入藍(lán)四唑試劑進(jìn)行反應(yīng),除去培養(yǎng)液,加入二甲基亞砜,以溶解甲臜顆粒,在540nm處測(cè)吸光度以判斷藥物活性。
3 按權(quán)利要求1所述的肉桂酰胺的抗腫瘤作用新用途,其特征是通過腹腔注射給藥十四天,觀察正常小鼠死亡情況,以判定肉桂酰胺的低毒性。
4 按權(quán)利要求1所述的肉桂酰胺抗腫瘤作用的新用途,其特征是動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn),在小鼠皮下接種肺癌22,腸癌26和Lewis肺癌,腹腔或口服給藥,按腫瘤重量或體積計(jì)算,肉桂酰胺對(duì)三種移植瘤模型,均能有效抑制腫瘤生長(zhǎng)。
5 按照權(quán)利要求1所述的肉桂酰胺抗腫瘤作用新用途,其特征是小鼠皮下接種Lewis肺癌后,經(jīng)腹腔注射給藥,可抑制肺轉(zhuǎn)移瘤的形成。
全文摘要
本發(fā)明涉及已知結(jié)構(gòu)化合物肉桂酰胺的抗腫瘤藥理新作用,該化合物對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞具有增殖抑制作用;它能抑制血管生成;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明它能抑制小鼠移植性肝癌,結(jié)腸癌和肺癌的生長(zhǎng);它能降低惡性腫瘤肺轉(zhuǎn)移發(fā)生率和轉(zhuǎn)移灶的數(shù)目;該化合物毒性低,能抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,是一個(gè)具有開發(fā)前景的抗腫瘤化合物。
文檔編號(hào)A61P35/04GK1217185SQ98124419
公開日1999年5月26日 申請(qǐng)日期1998年10月30日 優(yōu)先權(quán)日1998年10月30日
發(fā)明者姜曉峰, 甄永蘇, 金蓮舫, 胡繼蘭 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所